本発明は、検出を可能にする部分を含有するヌクレオチド類似体の使用によって標的分子の存在を検出するための方法を提供する。そのような類似体は、核酸に組み入れることができる。１つの実施形態では、規定されたポリヌクレオチド配列に対する反復的酵素的オリゴヌクレオチド合成事象を介して複数の検出可能なオリゴヌクレオチドを作製するプロセスにおいて、ヌクレオチド類似体が使用される。該方法は、一般に、ヌクレオシド、モノヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、もしくはポリヌクレオチド、またはそれらの類似体を使用して、規定されたポリヌクレオチド配列に対する標的部位に実質的に相補的であるオリゴヌクレオチド産物の合成を開始すること；場合により、オリゴヌクレオチド鎖エロンゲーターまたはチェーンターミネーターとしてヌクレオチドもしくはヌクレオチド類似体を使用して、ポリマー化反応を終結さること；ポリメラーゼによって合成された複数のオリゴヌクレオチド産物を検出することを含む。 （もっと読む）

液体サンプル中における標的細胞の存否を検出する方法であって：
（ａ）前記サンプルが：（ｉ）測定可能な活性を有する酵素を含む細胞外培地を含んでなり；且つ（ii）前記測定可能な活性を有する細胞内酵素標的細胞を含む疑いがあり；
（ｂ）前記方法が：（ｉ）前記細胞外培地内の前記測定可能な活性は不活性化するが、前記標的細胞中の前記測定可能な活性は不活性化しない試薬で、前記液体サンプルを処理する工程；（ii）前記標的細胞を溶解して前記細胞内酵素を放出させる工程；及び（iii）前記測定可能な活性を測定する工程を含んでなる。これにより、細胞外酵素による干渉を受けることなく、細胞内酵素を測定することができる。本発明は特に、アデニル酸キナーゼ活性に基づく検出アッセイを用いて、細菌感染血液を処理するのに適している。 （もっと読む）

この発明は、タンパク質キナーゼ遺伝子ファミリーの幅広いメンバーに適用でき、かつ、キナーゼ阻害剤の検出及び評価に有用であるスクリーニングアッセイ方法に関するものである。 （もっと読む）

【課題】 感度及び精度が十分に高いアデノシン三リン酸の検出方法を提供すること。
【解決手段】 アデノシン三リン酸を含有する試料をポリリン酸、アデノシン一リン酸、アデニル酸キナーゼ、ポリリン酸キナーゼ、ルシフェリン、ルシフェラーゼ及び２価金属イオンと混合させて、アデノシン三リン酸を増幅させ、ルシフェリンを発光させる増幅発光ステップと、増幅発光ステップにおいてルシフェリンが発した光の量を測定する発光量測定ステップと、を備えるアデノシン三リン酸の検出方法であって、アデニル酸キナーゼ、ポリリン酸キナーゼ、ルシフェリン、ルシフェラーゼ及び２価金属イオンが、試料と混合される前に、酸素存在下で混合されていることを特徴とするアデノシン三リン酸の検出方法。 （もっと読む）

【課題】Ｐｈｏｔｉｎｕｓ ｐｙｒａｌｉｓの野生型ルシフェラーゼよりも高い熱安定性を具えたルシフェラーゼ活性保有タンパク質を提供する。また発現させるＤＮＡ、ベクター及び細胞並びに本タンパク質を用いる発光アッセイの実施のための試験キット及び試薬も提供する。
【解決手段】Ｐ． ｐｙｒａｌｉｓルシフェラーゼの３５４位またはＬｕｃｉｏｌａ属ルシフェラーゼの３５６位に位置するグルタミン酸と同等のグルタミン酸を代替アミノ酸、特にリシンで置換する。さらに好ましくは、Ｐ． ｐｙｒａｌｉｓルシフェラーゼの２１５位またはＬｕｃｉｏｌａ属ルシフェラーゼの２１７位と同等の位置に第二の置換アミノ酸を有する。 （もっと読む）

【課題】ヒトメタボトロピックグルタミン酸受容体蛋白サブタイプ２および5をコードする核酸、およびこれにコードされる蛋白の提供。
【解決手段】ヒトメタボトロピックグルタミン酸受容体のｍＧｌｕＲ２およびｍＧｌｕＲ５のサブタイプをコードするメタボトロピックグルタミン酸受容体サブタイプの産生に有用である核酸の提供。関連する受容体サブユニットを同定し単離することを可能にするプローブの提供。さらに新規のメタボトロピックグルタミン酸受容体の機能に影響を与える化合物（例えば、グルタミン酸受容体機能のアゴニスト、アンタゴニスト、およびモジュレーター（活性調節因子））を同定し性状解析するための、このような受容体サブタイプの使用方法の提供。 （もっと読む）

【課題】従来技術よりも簡便、かつ高感度なアミノ酸の分析方法を提供することにある。
【解決手段】支持体上に固定されたアミノアシル−tRNA合成酵素と、標識されたＡＴＰ若しくはＡＴＰアナログ及び／又はtRNAとアミノ酸を反応させる工程、ならびに、アミノアシル−tRNA合成酵素に結合した標識されたＡＴＰ若しくはＡＴＰアナログ及び／又はtRNAとアミノ酸を反応させる工程を持つ分析方法。 （もっと読む）

本発明は、Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）ＲＣＣ３５６の天然リガンドとしてのイソ吉草酸の同定に関する。ＲＣＣ３５６受容体の活性を調節する薬剤のスクリーニングアッセイの基礎として、本発明にはＲＣＣ３５６ポリペプチドとイソ吉草酸との相互作用の利用が含まれる。本発明には、診断およびスクリーニングアッセイの実施用キットの他、ＲＣＣ３５６／イソ吉草酸の相互作用に基づいて実施される診断および他のアッセイも含まれる。 （もっと読む）

本発明は、ヒトのホスホジエステラーゼ１１（ＰＤＥ１１）のＧＡＦ_Aドメイン及びＧＡＦ_Bドメインと、アデニル酸シクラーゼの触媒ドメインとを有する新規のポリペプチド並びにＰＤＥ１１モジュレーターの同定方法におけるそれらの使用に関する。 （もっと読む）

本発明は、ヒトのホスホジエステラーゼ１０（ＰＤＥ１０）のＧＡＦ_Aドメイン及びＧＡＦ_Bドメインと、アデニル酸シクラーゼの触媒ドメインとを有する新規のポリペプチド並びにＰＤＥ１０モジュレーターの同定方法における当該ポリペプチドの使用に関する。 （もっと読む）

本発明は、環状ヌクレオチドcGMPおよびcAMPの細胞内濃度の光学的定量解析の方法であって、ある種のCNGチャンネル、カルシウム感受性発光タンパク質、および調節物質を発見しようとする別の標的タンパク質を組み合わせて組換え手法により発現する細胞株を使用する方法、に関する。このように改変された細胞株は、ハイスループットスクリーニング（HTSおよびuHTS）に適し、環状ヌクレオチドcGMPおよびcAMPの合成および分解に関与する受容体または酵素の活性に影響する医薬を同定するために使用することができる。
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【課題】 高価な測定機器が必要なルシフェリン／ルシフェラーゼ系による発光測定方法を用いない簡便、高感度、かつ実用性の高いＡＴＰの定量方法およびキットを提供する。
【解決手段】 試料から抽出したＡＴＰを増幅させた後、ＡＴＰ増幅に用いた酵素を不活化し、当該増幅後のＡＴＰ試料を、ＡＴＰサイクリング法を併用した酵素比色法または電気的定量法を用いて定量する。この方法により、従来の比色法よるＡＴＰ定量方法と比較して、約１,０００,０００倍検出感度の高いＡＴＰ定量方法、ＡＴＰサイクリング法と比色法を組み合わせたものに比べて約１,０００倍検出感度の上昇が実現できる。 （もっと読む）

本発明は、微生物細胞からのＡＴＰレベルの一段階抽出および検出のための組成物および方法に関する。開示された組成物は、一般的な一段階試薬組成物を使用して、幅広い異なる微生物中でＡＴＰのバイオルミネセンスの検出を効率的に引き出すように調合される。その他の有用な抽出剤を同定するための、または微生物細胞に対するそれらの薬学的または生物学的効果について化合物をスクリーニングするための、追加的なルミネセンスベースの方法が提供される。
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【課題】被検液中に存在するＡＴＰ等の影響を受けず、ピロリン酸のみを検出・定量する方法を提供すること
【解決手段】妨害物質であるＡＴＰ等を含む試料に、キナーゼ及び補酵素としてＮＡＤ又はＮＡＤＰを要求する脱水素酵素を作用させ、生成するＮＡＤＨ又はＮＡＤＰＨに非発色性電子受容体の存在下、電子伝達体を作用させて消去し、ついでピロリン酸からＡＴＰを生成する酵素を用いてＡＴＰを生成させ、同様にして生成するＮＡＤＨ又はＮＡＤＰＨにテトラゾリウム塩の存在下、電子伝達体を作用させ、生成するホルマザン色素を測定するピロリン酸の第一の測定方法、及び第一の方法と同様にして生成するＮＡＤＨ又はＮＡＤＰＨから、電子伝達体を経由して、生成する電子を酸素に受容させることにより過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を消去し、ついでピロリン酸からＡＴＰを生成させ、同様に過酸化水素を生成させ、該過酸化水素を測定する第二の測定方法。 （もっと読む）

本発明は、一定量のＧＰＲ１１９アゴニストと一定量のジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）インヒビターとの組み合わせであって、その結果この組み合わせが、一定量のＧＰＲ１１９アゴニストのみまたは一定量のＤＰＰ−ＩＶインヒビターのみによって得られる効果よりも被験体の血糖値の低下または血中ＧＬＰ−１レベルの増加に効果がある組み合わせ、ならびに糖尿病および糖尿病に関連する状態または血中ＧＬＰ−１レベルの増加によって改善される状態の治療または予防のためのこのような組み合わせの使用に関する。本発明はまた、ＧＬＰ−１分泌促進薬のスクリーニングのためのＧタンパク質共役型受容体の使用に関する。
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【課題】ホタルルシフェラーゼの発光を、天然型L-システインをベースに反応溶液内で直接合成する。
【解決手段】(1) Ｌ−ホタルルシフェリンまたはその誘導体のエステル、および(2) Ｌ−ホタルルシフェリンまたはその誘導体のチオエステル、からなる群から選ばれる少なくとも１種を含むＬ−ホタルルシフェリン原料をエステラーゼと反応させることを特徴とするＤ−ホタルルシフェリンまたはその発光性誘導体の製造方法。 （もっと読む）

酵素を検出するために特に有用な組成物、方法およびキットを開示する。酵素を定量するために特に有用な組成物、方法およびキットを開示する。酵素を特徴付けするために特に有用な組成物、方法およびキットを開示する。本出願は、（ｉ）疎水性分子と、（ｉｉ）生理的ｐＨにてミセル形成を促進することが可能な１つ以上の電荷平衡分子とを含む、ミセルを提供し、該疎水性分子は、該疎水性分子を該ミセル中に組み込むことが可能な疎水性部分と、色素部分と、必要に応じた電荷部分と、を含み、該疎水性分子および／または該電荷平衡分子は、酵素基質を含む。 （もっと読む）

本発明は、Ｇタンパク質共役型受容体ＧＰＲ３９の機能性特性化およびＧＰＲ３９タンパク質活性を変性または調節する化合物に関する。具体的には、本発明は、胃腸の動態および／またはコレステロール代謝の調節が可能な化合物を同定するためのＧＰＲ３９のアゴニストまたはアンタゴニストのためのスクリーニングの方法、およびそれらの化合物の治療的使用に関する。本発明は、ＧＰＲ３９遺伝子内に変異を有するトランスジェニック動物にも関する。
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【解決手段】本発明は、所与の種の試料液中に存在し得る生きた細胞数の検知及び計量のための反応式（１）ルシフェリン＋ＡＴＰ＋Ｏ₂ ＋Ｍｇ²⁺＋ルシフェラーゼ→オキシルシフェリン＋光子による生物発光の利用に関するもので、本利用は、所与の非ウィルス種の生きた細胞のＡＴＰの形で表される細胞内の自由ヌクレオチドアデニリル（ＡＮ）の全含有量の測定が、(i) ＡＴＰの添加無しと(ii)既知量のＡＴＰの添加後とに行われ、前記族の細胞内の自由なＡＴＰ、ＡＤＰ及びＡＭＰの総計が、ミオキナーゼ及びピルビル酸キナーゼによって細胞内自由ＡＤＰ及びＡＭＰがＡＴＰに転換した後、関係式（２）[AN]=[ATP]+[ADP]+[AMP]=Cteにより一定であるという点が利用されることが特徴である。また、ＡＴＰ法による細胞数の検知及び計量の方法に関する。 （もっと読む）

【解決手段】本発明は、対象宿主細胞の自由ＮＡ又はＤＮＡ若しくはＲＮＡウィルスに結合されたＮＡを利用したウィルスの検知及び計量のためのＡＴＰ法の利用に関する。また、ＡＴＰ法によるウィルスの測定方法に関する。 （もっと読む）