整形外科用インプラントの抗微生物ヒアルロン酸被覆物
本発明は、ヒアルロン酸またはその誘導体で表面が覆われたインプラントに関する。このコーティング・インプラントは耐微生物増殖性を持つ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、２００３年９月３０日に出願された米国特許仮出願第６０／５０６，７６０号の優先権を主張するもので、本明細書ではその開示内容全体を援用する。
（技術分野）
本発明は、ヒアルロン酸またはその誘導体で表面が覆われたインプラントに関する。このコーティング・インプラントは耐微生物増殖性を持つ。
【背景技術】
【０００２】
ひとたび生体適合材料製インプラントをからだの中に移植すると、その後に該インプラントが宿主血漿成分（フィブリン等の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質成分を含む）によって覆われ、最終的に宿主の細胞に覆われることで、柔らかくて固い組織が形成される（例えば、バイヤー（Ｂａｉｅｒ）他、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ（Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｍａｔｅｒ． Ｒｅｓ．） １８：３３７−３５５ （１９８４））。生体適合材料に沈着した細胞外マトリックスおよび血漿タンパク質に付着するスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）およびスタヒロコッカス・エピデルミィス（Ｓ．ｅｐｅｒｄｅｒｍｉｓ）の能力は、病原または整形外科装置関連感染での有意要因であり、結果として生ずる細菌によって生物膜が形成されることが報告されている（ホイール（Ｈｏｙｌｅ）他、プログレス・イン・ドラッグ・リサーチ（Ｐｒｏｇ． Ｄｒｕｇ Ｒｅｓ．）、３７： ９１−１０５ （１００１）を参照せよ）。
【０００３】
生物膜形成は、表面に対する細菌の付着とそれに続く細胞間の付着とを必要とする２段階プロセスであり、細菌多層膜を形成する（例えば、クレムトン（Ｃｒａｍｔｏｎ）他、感染と免疫（Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ．）、６７：５４２７−５４３３（１９９９）を参照せよ）。ひとたび生物膜が形成されると、この生物膜の内側にいる細菌はファゴサイトーシスおよび抗生物質から保護されていることから、臨床的に処置することが困難である（ホイール（Ｈｏｙｌｅ）を参照せよ）。この１０年間にわたって、抗生物質の全身投与は、インプラントに関連する感染に対する有効な処置を提供するものではなかった（例えば、ペティ（Ｐｅｔｔｙ）他、骨関節外科雑誌（Ｊ． Ｂｏｎ． Ｊｏｉｎｔ Ｓｕｒｇ．）、６７：１２３６−１２４４）、バース（Ｂａｒｔｈ）他、バイオマテリアル（Ｂｉｏｍａｔ．）、１０：３２５−３２８（１９８９）、ワッサイル（Ｗａｓｓａｉｌ）他、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ（Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｍａｔｅｒ． Ｒｅｓ．）、３６（３）：３２５−３３０（１９９７）、およびローウィ（Ｌｏｗｙ）、ニューイングランド・ ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．）、３３９（８）：５２０−３２（１９８８）を参照せよ）。
【０００４】
ハラブ（Ｈａｌｌａｂ）他、組織工学（Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ．）、７（１）：５５−７１（２００１）およびランジェ（Ｌａｎｇｅ）他、生体分子工学（Ｂｉｏｍｏｌ． Ｅｎｇ．）、１９：２５５−６１（２００２）は、医療用インプラントの表面特性（トポロジーおよび化学的性質を含む）が細胞および細菌の付着を促進もしくは阻害する上で重要であると報告している。したがって、感染を減少させることを目的として、インプラントの表面を修飾することが種々の研究でなされたことが報告されている（例えば、コエルナー（Ｋｏｅｒｎｅｒ）他、バイオマテリアルズ（Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、２３（１４）：２８３５−４０（２００２）、パーク（Ｐａｒｋ）他、バイオマテリアルズ（Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、１９：８５１−９（１９９８）、およびローウィ（Ｌｏｗｙ）、ニューイングランド・ ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．）、３３９（８）：５２０−３２（１９８８）を参照せよ）。
【０００５】
細菌付着よりも、修飾表面に対する真核細胞およびＥＣＭタンパク質の付着が、よりいっそう注目された（例えば、アンセルム（ａｎｓｅｌｍｅ）他、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ（Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｍａｔｅｒ． Ｒｅｓ．）、４９（２）：１５５−６６（２００２）、およびローウィ（Ｌｏｗｙ）、ニューイングランド・ ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．）、３３９（８）：５２０−３２（１９８８）、さらにハラブ（Ｈａｌｌａｂ）他、組織工学（Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ．）、７（１）：５５−７１（２００１）を参照せよ。チタニウム等の材料のトポグラフィおよび表面化学的性質を修飾するために、異なる表面処理が用いられてきた（例えば、プレオ（Ｐｕｌｅｏ）他、バイオマテリアルズ（Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、２０：２３１１−２１（１９９９）、ローウィ（Ｌｏｗｙ）、およびハラブ（Ｈａｌｌａｂ）を参照せよ）。ローウィ（Ｌｏｗｙ）の論文は、上記表面を研磨する一つの方法を記述している。別の方法はその表面を抗菌または抗タンパク質被膜で被覆することである（例えば、コエルナー（Ｋｏｅｒｎｅｒ）、ナガオカ（Ｎａｇａｏｋａ）他、アメリカ人工臓器学会誌（ＡＳＡＩＯ Ｊ．）、１４１（３）：Ｍ３６５−８（１９９５）、およびシヤオのチタニウム・イン・メジシン（Ｔｉｔａｎｉｕｍ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）４１７−４４９（シュプリンガー出版、ハイデルベルグおよびベルリン、２００１）を参照せよ。
【０００６】
親水性被膜（例えば、ヒアルロナン）が耐付着性を持つことが報告されている。例えば、パベシオ（Ｐａｖｅｓｉｏ）他、メディカル・デバイス・テクノロジー（Ｍｅｄ． Ｄｅｖｉｃｅ Ｔｅｃｈｎｏｌ．）、８（７）：２０−１および２４−７ （１９９７）、ならびにカシネリ（Ｃａｓｓｉｎｅｌｌｉ）他、ジャーナル・オブ・バイオマテリアル・サイエンス・エディッション（Ｊ． Ｂｉｏｍａｔｅｒ． Ｓｃｉ． Ｐｏｌｙｍ． Ｅｄ．）、１１（９）：９６１−７７（２０００）は、線維芽細胞およびスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）の付着が減少した被覆高分子医療装置（例えば、眼内レンズ、ステント、およびカテーテル）を記述している。
バラツ（Ｂａｌａｚｓ）他の米国特許第４，５００，６７６号は、高分子材料およびそれから作られた製品を記述しており、この製品はその高分子材料とともにヒアルロン酸またはその塩を含むことで生体適合性となっている。
ホエーリグ（Ｗａｈｌｉｇ）他の米国特許第４，８５３，２２５号は、生理的に許容される賦形剤とギラーゼ阻害剤型の化学療法薬である少なくとも１種類の遅延放出活性化合物とを含む埋め込み型のデポー製剤を記述している。
【０００７】
デラ・バレ（ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅ）他の米国特許第５，１６６，３３１号、デラ・バレ（ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅ）他の米国特許第５，４４２，０５３号、およびデラ・バレ（ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅ）他の米国特許第５，６３１，２４１号はすべて、種々の用途に対して医薬的に有用なヒアルロン酸部分、すなわち創傷治癒に有用である５０，０００ないし１００，０００ダルトンならびに眼内および関節内注射に有用である５００，０００ないし７３０，０００ダルトンを記述している。これらの引用文献にあるヒアルロン酸は、遊離の酸として、アルカリもしくはアルカリ土類金属塩として、または１つ以上の薬理学的活性物質を持つ塩として、存在すると思われる。
【０００８】
グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，５０５，９４５号、グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，５３０，１０２号、グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，５３０，１０２号、グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，７０７，６２７号、およびグリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，７１８，８９９号、さらに国際公開番号ＷＯ９４／１５６４０はすべて、微生物およびウイルスの感染と戦う高濃度の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＭを含む組成物を記述している。これらの引用文献の免疫グロブリンを、多様な生体適合性材料、例えばコラーゲン、フィブリン、ヒアルロン酸、生物分解可能な重合体、およびそれらの断片上に、固定化することができる。
【０００９】
フォーク（Ｆａｌｋ）等の米国特許第５，９２９，０４８号およびフォーク（Ｆａｌｋ）等の米国特許第６，０６９，１３５号はすべて、ヒアルロン酸および／あるいはその塩および／またはその相同体、類似体、誘導体、複合体、エステル類、断片、およびそれらのサブユニットを治療量含む、組成物、製剤、ならびに潅流の悪い組織および病理学的組織を処置するための方法を記述している。
バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔａｉｎｅ）の米国特許第６，４２８，５７９号は、生理活性分子が金−スルヒドリル結合を介して付着した金層を表面に有する被覆埋め込み型の装置を記述している。
ハリッシュ（Ｈａｒｉｓｈ）等の米国特許第６，５０３，５５６号は、埋め込み型装置または腔内人工器官にコーティングを形成する方法を記述している。この引用文献のコーティングもまた、活性成分、放射線不透過性エレメント、または放射性同位元素の送達に用いることができる。
ケオフ（Ｋｅｏｇｈ）他の米国特許第６，６１７，１４２号は、医療装置の表面に固定化生体分子のコーティングを設けて組織液および体液との接触のための生体適合性を改善する方法を記述している。
米国特許公開番号２００３／００９１６０９Ａ１および国際公開番号ＷＯ０２／０５８７５２はどちらも、医療装置、さらにはそれを製造して使用する方法を記述しており、この医療装置は、担体（すなわち、重合体）と、ポリヌクレオチド、もしくは抗菌ポリヌクレオチドを発現する細胞とを含む。
しかし、微生物の増殖を阻害する改善されたインプラントが求められている。
【特許文献１】米国特許第５，１６６，３３１号
【特許文献２】米国特許第５，４４２，０５３号
【特許文献３】米国特許第５，６３１，２４１号
【特許文献４】米国特許第５，５０５，９４５号
【特許文献５】米国特許第５，５３０，１０２号
【特許文献６】米国特許第５，５３０，１０２号
【特許文献７】米国特許第５，７０７，６２７号
【特許文献８】米国特許第５，７１８，８９９号
【特許文献９】国際公開番号ＷＯ９４／１５６４０
【特許文献１０】米国特許第５，９２９，０４８号
【特許文献１１】国際公開番号ＷＯ０２／０５８７５２
【特許文献１２】米国特許第６，０６９，１３５号
【特許文献１３】米国特許第６，４２８，５７９号
【特許文献１４】米国特許第６，５０３，５５６号
【特許文献１５】米国特許第６，６１７，１４２号
【特許文献１６】米国特許公開番号２００３／００９１６０９Ａ１
【発明の開示】
【００１０】
本発明は、ヒアルロン酸またはその誘導体で覆われたインプラントに関連する。このコーティング・インプラントは耐微生物増殖性を持つ。
一実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体で覆われたインプラントに関し、このインプラントは金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせである。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体で覆われたインプラントに関し、このインプラントはプラスチックまたは重合体を実質的に含まない。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体で覆われた整形外科用のインプラントに関する。
別の実施形態では、本発明は（ａ）ヒアルロン酸またはその誘導体と（ｂ）抗菌剤とを含むコーティングによって覆われたインプラントに関する。
別の実施形態では、本発明は（ａ）インプラントの表面に存在する第１の層と（ｂ）第１の層に存在するヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２の層とを有するマルチコーティング・インプラントに関する。
本発明の非限定的実施形態を例示することを意図した以下の図面、詳細な説明、および実施例を参照することで、本発明をより完全に理解することができる。
【００１１】
（図面の簡単な説明）
図１Ａないし図１Ｆは、標準のチタニウム表面、１時間培養後のコーティング表面（ＴＳ、ＴＳＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、ＴＡＳＴ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の電界放射型走査電子顕微鏡（ＦＥＳＥＭ）像を示し、他の表面に比べてかなり少ない細菌がＴＨＹ面に見られることを示す。
図２Ａおよび図２Ｂは、異なる表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の数密度を示す。（ａ）標準チタニウム（ＴＳおよびＴＳＳ）および標準チタニウム・コーティング、（ｂ）標準チタニウム（ＴＳ）および研磨面。
図３Ａおよび図３Ｂは、標準チタニウム（ＴＳ）面および化学的に研磨したチタニウム（ＴＣ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の傾向顕微鏡像を示す。白い点は生菌を表しており、元の像では赤色に見えた。
図４は、４８時間培養のＣＡ、ＣＡＣ、ＣＰ、およびＣＰＣの表面上のスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）のＳＥＭ像を示す。
図５は、ＣＡおよびＣＰの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
図６は、ＣＡＣおよびＣＰＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
図７は、ＣＣ、ＣＨ、ＣＨＰ、およびＣＨＲの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
図８は、ＣＨＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
上記したように、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体（抗菌コーティング（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｏａｔｉｎｇ））でコーティングされたインプラントに関する。このコーティング・インプラントは、微生物増殖を阻害する。阻害され得る微生物増殖の例として、限定されるものではないけれども、スタヒロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ） およびスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）が挙げられる。
【００１３】
本発明のコーティング・インプラントを、生体吸収可能、再吸収可能、あるいは半永久的なものとすることができる。本発明のインプラントを、骨統合、骨接合、整形外科、および歯科での用途で使用することができる。典型的なインプラントとして、限定されるものではないけれども、空隙充填材（例えば、骨空隙充填材）、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板（例えば、頭蓋顔面用、上顎骨顔面用、整形外科用、および骨格用）、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー（例えば、縫合用および骨用）、スカフォード、ステム、メッシュ（例えば、硬質性、膨張性、編組み状（ｗｏｖｅｎ）、ニット状（ｋｎｉｔｔｅｄ）、および織編状（ｗｅａｖｅｄ））、スポンジ、細胞封入もしくは組織工学用インプラント、薬物送達装置（例えば、抗ウイルス薬、抗生物質、および担体、骨成長誘導触媒（骨形成タンパク質、成長因子、ペプチド、およびその他）、モノフィラメントもしくはマルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜（例えば、多孔性、微孔性、および再吸収性の膜）、気泡材（例えば、連続気泡材および独立気泡材）、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、およびぺーサー・リード（ｐａｃｅｒ ｌｅａｄ）が挙げられる。
【００１４】
一実施形態では、上記インプラントが整形外科用のインプラントである。別の実施形態では、上記インプラントが整形外科用のインプラントであって、このインプラントが整形外科用骨空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、ネジ増強装置、または頭蓋再建装置である。
「ヒアルロン酸」という用語は、本明細書で用いられるように、交互に繰り返す単位として生ずるグルクロン酸（Ｃ６Ｈ１０Ｏ７）とアセチルグルコサミン（Ｃ８Ｈ１５ＮＯ６）との（共）重合体を含む。
「ヒアルロン酸誘導体」という用語は、本明細書で用いられるように、ヒアルロン酸塩（例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、および一価の遷移金属、もしくはそれらの組み合わせ）、ヒアルロン酸エステル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、および第２ブチル、もしくはそれらの組み合わせ）、あるいはそれらの組み合わせを含む。
【００１５】
インプラント用の典型的な材料として、限定されるものではないけれども、金属および合金（例えば、チタニウム、チタニウム合金、ニッケル・チタニウム合金、タンタル、プラチナ・イリジウム合金、金、マグネシウム、ステンレス鋼、およびクロモ・コバルト合金）、セラミック、ならびに生体適合性プラスチックまたは重合体（例えば、ポリウレタンおよび／またはポリ（α−ヒドロキシエステル）、例えばポリ乳酸、ポリグリコリド、およびポリカプロラクトン、およびそれらの組み合わせ）が挙げられる。インプラントの他の非限定的な例として、米国特許第４，５０３，１５７号、第４，８８０，６１０号、第５，０４７，０３１号、第５，０５３，２１２号、第５，１２９，９０５号、第５，１６４，１８７号、第５，１７８，８４５号、第５，２７９，８３１号、第５，３３６，２６４号、第５，４９６，３９９号、第５，５６９，４４２号、第５，５７１，４９３号、第５，５８０，６２３号、第５，６８３，４９６号、第５，６８３，６６７号、第５，６９７，９８１号、第５，７０９，７４２号、第５，７８２，９７１号、第５，８２０，６３２号、第５，８４６，３１２号、第５，８８５，５４０号、第５，９００，２５４号、第５，９５２，０１０号、第５，９６２，０２８号、第５，９６４，９３２号、第５，９６８，２５３号、第６，００２，０６５号、第６，００５，１６２号、第６，０５３，９７０号、および第６，３３４，８９１号、またはそれらの組み合わせのいずれかに開示された材料が挙げられる。なお、これらの米国特許の内容全体を本明細書に援用する。
【００１６】
一実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関するもので、このインプラントは金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせを含む。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関するもので、このインプラントは金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせである。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関するもので、このインプラントは本質的に金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせからなる。
上記インプラントがセラミックである場合、このセラミックは好ましくはリン酸カルシウム・セラミック、例えばリン酸カルシウム、好ましくはヒドロキシアパタイトもしくはその代わりとしてリン酸三カルシウムである。さらに、インプラントの本体が、少なくとも部分的に硫酸カルシウム、脱ミネラル骨、自己骨、もしくはコラリン物質であってよい。ヒドロキシアパタイトおよびリン酸三カルシウムは、それらが完全に骨に溶け込みはじめるか、あるいは新たな天然の骨組織によっても置換されるという利点を有する。
【００１７】
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関し、このインプラントは実質的に重合体成分（すなわち、プラスチックもしくは重合体）を含まない。別の実施形態では、インプラントに含まれる重合体成分の量は、インプラントの全重量を基準にして重合体およびプラスチックの約２５重量％以下である。別の実施形態では、インプラントに含まれる重合体成分の量は、インプラントの全重量を基準にして重合体およびプラスチックの約１０重量％以下である。別の実施形態では、インプラントに含まれる重合体成分の量は、インプラントの全重量を基準にして重合体およびプラスチックの約５重量％以下である。
【００１８】
プラスチックまたは重合体を実質的に含まない有用なインプラントの非限定的例として、骨空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、スカフォード、ステント、メッシュ、スポンジ、細胞封入用インプラント、組織工学用インプラント、薬物送達装置、骨成長誘導触媒、モノフィラメント、マルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜、気泡材、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、およびぺーサー・リードが挙げられる。
ヒアルロン酸またはその誘導体を、任意の適当な供給源から得ることができる。この供給源として、限定されるものではないが、細菌発酵、抽出、および／または動物体液（例えば、関節液）、組織、骨、またはその他からの単離が挙げられる。あるいは、ヒアルロン酸またはその誘導体を生体外（ｅｘ ｖｉｖｏ）で完全または部分的に化学合成することができる。異なる供給源から得たヒアルロン酸またはその誘導体の特性（例えば、分子量）が異なることもある。ヒアルロン酸またはその誘導体を得るための方法は、例えば米国特許第５，１６６，３３１号に記載されており、その開示全体を本明細書で明確に援用する。
【００１９】
一実施形態では、ヒアルロン酸の数平均分子量（ヒアルロン酸のポリエチレン・オキシド標準等の適当な標準に対してＧＰＣまたはＳＥＣによって測定されたとおり）は、少なくとも約１，０００グラム／モルである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の数平均分子量は、少なくとも約５，０００ｇ／ｍｏｌである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の数平均分子量は、約１０，０００グラム／モルないし約５，０００，０００グラム／モル、例えば約５０，０００グラム／モルないし約３，０００，０００グラム／モル、約１０，０００グラム／モルないし約１，０００，０００グラム／モル、あるいは約１５０，０００グラム／モルないし約２，０００，０００グラム／モルである。
別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の重量平均分子量（例えば、ポリエチレン・オキシド標準等の適当な標準に対してＧＰＣまたはＳＥＣによって測定されたとおり）は、少なくとも約１，５００グラム／モルである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の重量平均分子量は、少なくとも約８，０００グラム／モルである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の重量平均分子量は、少なくとも約１５，０００グラム／モルないし約２５，０００，０００グラム／モル、例えば約７５，０００グラム／モルないし約１０，０００，０００グラム／モル、約１５，０００グラム／モルないし約５，０００，０００グラム／モル、あるいは約２５０，０００グラム／モルないし約４，０００，０００グラム／モルである。
【００２０】
別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体は、多分散性（すなわち、数平均分子量に対する重量平均分子量の比率）が約１．３ないし約１０である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約１．６ないし約８である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約１．５ないし約４である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約２ないし約７である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約４ないし約９である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約１．８ないし約２．５である。
別の実施形態では、抗菌コーティングは、細菌、例えばスタヒロコッカス・アウレウス（ＳｔａｐｈｌｏｃｏｃｃｕＳ． ａｕｒｅｕｓ）またはスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）の吸着、付着、および／または増殖に対する生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）耐性が、抗菌コーティングが施されていないインプラントによって示されるものよりも、少なくとも５倍良好である。別の実施形態では、上記したような生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）耐性が少なくとも約１０倍良好である。別の実施形態では、上記したような生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）耐性が少なくとも約１００倍良好である。
【００２１】
ヒアルロン酸またはその誘導体のコーティングを形成することが可能な任意の方法を、本発明のコーティング・インプラントの製造に用いることができる。この方法として、限定されるものではないけれども、ディップ・コーティング、ブラシによる塗布、スプレー・コーティング、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。コーティング方法の例は、米国特許第４，５００，６７６号、第６，１８７，３６９号、および第６，１０６，８８９号、ならびに米国公開特許出願第２００２／００６８０９３号および第２００３／００９６１３１号に見いだされ、これらに開示されたもの全体を本明細書で援用する。概して、ヒアルロン酸またはその誘導体および有機溶媒を含む組成物をインプラントに塗布し、得られたコーティング・インプラントを乾燥または硬化させる。この抗菌コーティングは、好ましくはインプラントの表面の大部分（すなわち、５０％を上回る）、より好ましくはインプラントの表面の実質的に全て、最も好ましくはインプラントの表面の本質的に全てを覆う。
【００２２】
いくつかの実施形態では、コーティングを施す前に、化学的および／または物理的処理によってインプラント材料の表面を修飾することができる。例えば、インプラントの表面を研磨してその表面の粗さを少なくすることで、インプラント表面の物理的改質がおこなえ、あるいは研削することで表面粗さを増加させること（例えば、付着を改善すること）ができる。同様に、インプラントの表面を、例えば強酸もしくは強塩基処理、実施例１の記載どおりの電解研磨処理、実施例１の記載どおりの金属による陽極酸化処理、あるいはそれらの組み合わせによる処理によって、その表面を化学的に改質することができる。
抗菌コーティングの厚さは、約１ミクロンないし約５００ミクロンである。別の実施形態では、抗菌コーティングの厚さは、約３ミクロンないし約２５０ミクロンである。抗菌コーティングの厚さは、約５ミクロンないし最大で約１００ミクロンである。
【００２３】
別の実施形態では、インプラントは、さらに、このインプラントの表面に少なくとも第１のコーティングが設けられている。したがって、一実施形態では、本発明は、（ａ）インプラントの表面に存在する第１のコーティングと、（ｂ）上記第１のコーティング上に存在し、ヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２のコーティングとを有するマルチコーティング・インプラントに関する。有用な第１のコーティングの非限定的例として、金属（例えば、チタニウム、金、もしくはプラチナ）、セラミック材料（例えば、ヒドロキシアパタイトもしくはリン酸三カルシウム）、または重合体（例えば、アクリル重合体系コーティング）、あるいはそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【００２４】
第１のコーティングを、インプラント材料と同一または異なるものとすることができる。一実施形態では、第１のコーティングの組成はインプラントと同一である。別の実施形態では、第１のコーティングの組成は、インプラントの組成と異なる。
インプラントが第１のコーティングによって被覆される場合、インプラントの組成を変えることができる。有用なインプラント材料の非限定的例として、上記したように金属、合金、もしくはセラミック、および／またはプラスチックもしくは重合体（例えば、ポリウレタンおよび／またはポリ（α−ヒドロキシエステル）（例として、ポリラクチド、ポリグリコリド、およびポリカプロラクトン）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられる。
セラミックもしくは重合体によってインプラントを被覆する方法として、ヒアルロン酸またはその誘導体でインプラントを被覆するための上記したものが挙げられる。第１のコーティングは、セラミックまたは重合体を含み、その厚さは約１ミクロンから約５００ミクロン、別の実施形態では約３ミクロンから約２５０ミクロン、さらに別の実施形態では約５ミクロンから最大で約１００ミクロンまでの範囲に及ぶ。
【００２５】
一実施形態では、上記第１のコーティングはアクリル重合体を含む。
別の実施形態では、上記第１のコーティングは本質的にアクリル重合体からなる。
別の実施形態では、上記第１のコーティングはアクリル重合体からなる。
インプラント材料を金属または合金で被覆する方法は、米国特許第６，４２８，５７９号に開示されており、その開示内容の全体を本明細書に援用する。金属コーティングの非限定的例として、チタン、金、銀、およびプラチナが挙げられる。使用した場合、金属製の第１のコーティングは、好ましくは金である。
この金属コーティングの厚さは、使用した場合、一般に約１０オングストロームないし約５，０００オングストロームである。別の実施形態では、金属コーティングの厚さは、使用した場合、約１０オングストロームないし約１，０００オングストロームである。別の実施形態では、上記金属コーティングの厚さは、使用した場合、約１０オングストロームないし約２５０オングストロームである。
使用の際に、インプラントの表面上の異なる点で第１のコーティングの厚さが変動し得ることがわかるだろう。好ましくは、上記第１のコーティングの厚さは、インプラントの表面全体にわたって実質的に均一である。
【００２６】
第１のコーティングは、使用の際に、好ましくは上記インプラント表面の少なくとも大部分（すなわち、５０％を超える）、より好ましくは上記インプラント表面のほぼ全て、最も好ましくは上記インプラント表面の基本的に全てを被覆する。
第１のコーティングを使用する場合、抗菌コーティングの厚さは上記した通りであり、この第１のコーティングを上記した方法によって塗布することができる。
第１のコーティングを使用する場合、以下に説明するように、抗菌コーティングは治療剤をさらに含むことができる。
【００２７】
任意に、一種類以上の治療剤を抗菌コーティングに含有することができる。上記治療剤として、限定されるものではないけれども、抗生物質、化学療法剤、骨形成タンパク質等の骨成長因子（特に骨成長誘導因子）、内皮成長因子、インシュリン成長因子、またはその他、あるいはそれらの組み合わせが挙げられる。一実施形態では、治療剤が抗菌組成物と複合体を形成する。別の実施形態では、上記治療剤を抗菌コーティングの表面に付着させることができる。別の実施形態では、上記治療剤を徐放性製剤として抗菌コーティング組成物に含有する。典型的な治療剤として、限定されるものでないけれども、限定されるものではないけれども、防腐剤（例えば、国際特許出願番号ＷＯ０２／０８２９０７に列挙された防腐剤）、広域性殺生物剤、グラム陽性抗菌剤、グアニジウム合成物、ビグアナイド、ビピリジン、フェノキシド防腐剤、アルキル酸化物、アリール酸化物、チオール、ハロゲン化物、脂肪族アミン、芳香族アミン、第四級アンモニウム化合物（例えば、ペンシルバニアのＬＬＣ、バイオセイフ（ＢＩＯＳＡＦＥ）から市販されている四級アンモニウム殺生物剤）、化学療法剤、ならびに成長因子（例えば、骨成長誘導因子、形態形成タンパク質、内皮成長因子、およびインシュリン成長因子）が挙げられる。
【００２８】
有用な抗菌剤の非限定例として、抗アメーバ剤、例えばアルスチノール、ビアラミコール、カルバルソン、セファエリン、クロルベタミド、クロロキン、クロルフェノキサミド、クロルテトラサイクリン、デヒドロエメチン、ジブロモ・プロパミジン、ジロキサニド、ジフェタルゾン、エメチン、フマギリン、グラウカルビン、グリコビアルゾール、８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸、ヨードクロルヒドロキシキン、ヨードキノール、パロモマイシン、ファンクオン、ポリベンズアルゾール、プロパミジン、キンファミド、セニダゾール、スルファルシド、テクロザン、テトラサイクリン、チオカルバミジン、チオカルバルゾン、チニダゾール；抗生物質、例えばアミノグリコシド（例えば、アミカシン、アプラマイシン、アルベカシン、バンベルマイシン、ブチロシン、ジベカシン、ジヒドロストレプトマイシン、ホルチミシン、ゲンタマイシン、イセパマイシン、カニアマイシン、ミクロノマイシン、ネオマイシン、ネオマイシン・ウンデシレン酸塩、ネチルマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン、シソマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、トロスペクトマイシン）、アンフェニコール（アジダムフェニコール、クロラムフェニコール、フロルフェニコール、チアフェニコール）、アンサマイシン（リファミド、リファムピン、リファミシン、リファペンチン、リファキシミン）、β−ラクタム（カルバセフェム、ロラカルベフ、カルバフェネム（ビオペネム、イミペネム、メロペネム、パニペネム）、セファロスポリン（セファクロール、セファドロキシル、セファマンドール、セファトリジン、セファゼドン、セファゾリン、セフカペンポボキシル、セフクリジン、セフジニル、セフジトレン、セフェピン、セフェタメト、セフィキシム、セフィンノキン、セフォジジム、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォラニド、セフォタキム、セフォチアム、セフォゾプラン、セフピミゾール、セフピラミド、セフピローム、セフポドキムプロキセチル、セフプロジル、セフロキサジン、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム、セフテゾール、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアクソン、セフロキム、セフゾナム、セファセトリル・ナトリウム、セファレキシン、セファログリシン、セファロリジン、セファロスポリン、セファロチン、セファピリン・ナトリウム、セフラジン、ピブセファレキシン）、セファミシン（セフブペラゾン、セフメタゾール、セフミノクス、セフォテタン、セフォキシチン）、モノバクタム（アズトレオナム、カルモナム、チゲモナム）、オキサセフェン（フロモクセフ、モクサラクタム）、ペニシリン（アムジノシリン、アムジノシリンピボキシル、アモキシリン、アンピシリン、アパルシリン、アスポキシリン、アジドシリン、アズロシリン、バカンピシリン、ベンジルペニシリン酸、ベンジルペニシリン・ナトリウム、カルベニシリン、カリンダシリン、クロメトシリン、クロキサシリン、シクラシリン、ジクロキサシリン、エピシリン、フェンベニシリン、フロキサシリン、ヘタシリン、レナンピシリン、メタピシリン、メチシリン・ナトリウム、メズロシリン、ナフシリン・ナトリウム、オキサシリン、ペナメシリン、ペネタメート・ヨウ化水素、ペニシリンＧ−ベネタミン、ペニシリン−Ｇベンザチン、ペニシリンＧ−ベンズヒドリルアミン、ペニシリンＧ−カルシウム、ペニシリンＧ−ヒドラバミン、ペニシリンＧ−カリウム、ペニシリンＧ−プロカイン、ペニシリンＮ、ペニシリンＯ、ペニシリンＶ、ペニシリンＶ−ベンザチン、ペニシリンＶ−ヒドラバミン、ペニメピシリン、フェネチシリン・カリウム、ピペラシリン、ピバンピシリン、プロピシリン、キナシリン、スルベニシリン、サルタミシリン、ファランピシリン、テモシリン、チカルシリン）、リチペネム）、リンコサミド（クリンダマイシン、リンコマイシン）、マクロライド（アジスロマイシン、カルボマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、エリスロマイシンアシストレート、エリスロマイシンエストレート、エリスロマイシン・グルコヘプトン酸、ラクトビオン酸エリスロマイシン、プロピオン酸エリスロマイシン、ステアリン酸エリスロマイシン、ジョサマイシン、ロイコマイシン、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、プリマイシン、ロキタマイシン、ロサラマイシン、ロキシスロマイシン、スピラマイシン、トロレアンドマイシン）、ポリペプチド（アンホマイシン、バシトラシン、カプレオマイシン、コリスチン、エンデュラシジン、エンビオマイシン、フサファンジン、グラミシジン、グラミシジン、ミカマイシン、ポリミキシン、プリスチナマイシン、リストセチン、テイコプラニン、ポリミキシン、チオストレプトン、ツベラクチノマイシン、チロシジン、タイロスライシン、バンコマイシン、バイオマイシン、バージニアマイシン、バシトラシン亜鉛）、テトラサイクリン（アピシリン、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、グアメサイクリン、リメサイクリン、メクロサイクロン、メタサイクリン（ミノサイクリン）、オキシテトラサイクリン（ペニメピシリン）、ピパシリン、ロリテトラサイクリン、サンシクリン、テトラシクリン）、シクロセリン、ムピロシン、ツベリン；合成抗菌剤、例えば２，４−ジアミノピリミジン（ブロジモプリン、テクストロクソプリム、トリメトプリム）、ニトロフラン（フラルタドン、フラゾリウム・クロリド、ニフラデン、ニフラテル、ニフルホリン、ニフルピリノール、ニフルプラジン、ニフルトイノル、ニトロフィラントイン）、キノロンおよび類似体（シノキサシン、シプロフロキサシン、クリナフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、フルメキン、グレパフロキサシン、ロメフロキサシン、ミロキサシン、ナジフロキサシン、ナジリキシン酸、ノルフラキサシン、オフロキサシン、オキソリン酸、パズフロキサシン、ペフロキサシン、ピペミド酸、ピロミド酸、ロソキサシン、ルフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、トロバフロキサシン）、スルホンアミド（アセチルスルファメトキシピリダジン 、ベンジル・スルファミド、クロラミン−Ｂ、クロラミン−Ｔ、ジクロラミンＴ、Ｎ２−ホルミルスルフィソミジン、Ｎ４−β−Ｄ−グルコシルスルファニルアミド、マフェニド、４’−（メチルスルファモイル）スルファニルアニリド、ノピリルスルファミド、フタリルスルファセタミド、フタリルスルファチアゾール、サラゾスルファジミジン、スクシニルスルファチアゾール、スルファベンザミド、スルファセタミド、スルファクロルピリダジン、スルファクリソイジン、スルファシチン、スルファジアジン、スルファジクラミド、スルファジメトキシン、スルファドキシン、スルファエチドール、スルファグアニジン、スルファグアノール、スルファレン、スルファロキシン、スルファメラジン、スルファメーター、スルファメタジン、スルファメチゾール、スルファメトミジン、スルファメトキサゾール、スルファメトキシピリダジン、スルファメトロール、スルファミドクリソイジン、スルファモキソール、スルファニルアミド、４−スルファニルアミドサルチル酸、Ｎ４−スルファニリルスルファニルアミド、スルファニリル尿素、Ｎ−スルファニリル−３，４−キシルアミド、スルファニトラン、スルファペリン、スルファフェナゾール、スルファプロキシリン、スルファピラジン、スルファピリジン、スルファソミゾール、スルファシマジン、スルファチアゾール、スルファチオ尿素、スルファトールアミド、スルフィソミジン、スルフィソクサゾール）、スルホン（アセダプソン、アセジアスルホン、アセトスルホン・ナトリウム、ダプソン、ジアチモスルホン、グルコスルホンナトリウム、ソラスルホン、サクシスルホン、スルファニル酸、ｐ−スルファニルベンジルアミン、スルホキソン・ナトリウム、チアゾールスルホン）、クロホクトール、ヘキセジン、メセナミン、メセナミン・アンヒドロメチレンシトレート、馬尿酸メテナミン、マンデル酸メテナミン、メセナミンスルホサリチル酸塩、ニトロキソリン、タウロリジン、キシボモール；抗らい菌剤、例えばアセダプソン、アセトスルホン・名とアリウム、クロファジミン、ダプソン、ジアチルモスルホン、グルコスルホン・ナトリウム、ヒドノカルピン酸、ソラスルホン、スクシスルホン・名とアリウム、抗真菌剤、例えばアリルアミン・ブテナフィン、ナフチフィン、テルビナフィン、イミダゾール（例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロロダントイン、クロルミダゾール、クロコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、エニルコナゾール、フェンチコナゾール、フルトリマゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ラノコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、硝酸オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、チオコナゾール）、チオカルバメート（トルシレート、トリンデート、トルナフテート）、トリアゾール（フルオナゾール、イトラコナゾール、サペルコナゾール、テルコナゾール）、アクリゾルシン、アモロルフィン、ビフェナミン、ボロモサリシルクロラニリド、ブクロサミド、プロピオン酸カルシウム、クロルフェネシン、シクロピロックス、クロキシキン、コパラフィネート、ジアムタゾールジヒドロクロライド、エキサラミド、フルシトシン、ハレタゾール、ヘキセチジン、ロフルカルバン、ニフラテル、ヨウ化カリウム、プロピオン酸、ピリチオン、サリチルアニリド、プロピオン酸ナトリウム、スルベンチン、テノニトロゾール、トリアセチン、ウジョチオン、ウンデシレン酸、プロピオン酸亜鉛； ならびにその他が挙げられる。
【００２９】
本発明で有用な他の抗菌剤として、β−ラクタマーゼ阻害剤（例えば、クラブラン酸、スルバクタム、タゾバクタム）、クロラムフェニコール（例えば、アジダムフェニコール、クロラムフェニコール、チアフェニコール）；フシジン酸；合成剤、例えばトリメトプリム、必要に応じてスルホンアミドとの組み合わせ）、およびニトロイミダゾール（例えば、メトロニダゾール、チニダゾール、ニモラゾール）；抗ミコバクテリア剤（例えば、カプレオマイシン、クロファジミン、ダプソン、エタンブトール、イソニアジド、ピラチナミド、リファブチン、リファンピシン、ストレプトマイシン、チオアミド）； 抗ウイルス剤（例えば、アクリロビル、アマンタジン、アジドチミジン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、トリバビリン、トリフリジン、ビダラビン）；インターフェロン（例えば、インターフェロンα、インターフェロンβ）防腐剤（例えば、クロルヘキシジン、ゲンチアナ紫、オクテニジン、ポビドンヨード、第四級アンモニウム化合物、スルファジアジン銀、トリクロサン）が挙げられる。
【００３０】
一実施形態では、上記抗菌剤は抗生物質、好ましくはゲンタマイシンである。
別の実施形態では、上記抗菌剤は防腐剤、好ましくはクロルヘキシジンである。
一実施形態では、本発明は、（ａ）ヒアルロン酸またはその誘導体と（ｂ）抗菌剤とを含むコーティングによって被覆されたインプラントに関する。
一実施形態では、本発明は、（ａ）ヒアルロン酸またはその誘導体と（ｂ）防腐剤とを含むコーティングによって被覆されたインプラントに関する。
【００３１】
いくつかの実施形態では、抗菌コーティングは一種類以上の重合体添加物を含むことができる。理論によって限定されることなく、出願人は重合体（例えば、弾性膜形成重合体）の付加によって抗菌コーティングの構造的特性を改善し得ると考える（例えば、改善された可撓性、付着、および／または亀裂抵抗性）。重合体が生体適合性を有し、ヒアルロン酸成分の所望の特性に対して有意に干渉しない限り、いかなる重合体も使用することができる。典型的には、上記重合体は、使用した場合、生体吸着性または浸食性である。より好ましくは、上記重合体は、使用した場合、生体吸着性である。有用な重合体の非限定的例として、ポリウレタン（米国特許第４，５００，６７６号を参照。この特許の開示内容全体を本明細書に援用する）、ポリラクチド；ポリグリコリド；Ｌ−ラクチド；Ｌ−乳酸、Ｄ−ラクチド、Ｄ−乳酸、Ｄ，Ｌ−ラクチドからなる群から選択される単量体のホモ重合体または共重合体；グリコリド；α−ヒドロキシ酪酸；α−ヒドロキシ吉草酸；α−ヒドロキシ酢酸；α−ヒドロキシカプロン酸；α−ヒドロキシヘプタン酸；α−ヒドロキシデカン酸；α−ヒドロキシミリスチン酸；α−ヒドロキシオクタン酸；α−ヒドロキシステアリン酸；ヒドロキシ酪酸塩；ヒドロキシ吉草酸塩；β−プロピオラクチド；β−プロピオ酪酸；γ−カプロラクトン；β−カプロラクトン；γ−ブチロラクトン；ピバロカクトン；テトラメチルグリコリド；テトラメチルグリコール酸；ジメチルグリコール酸；トリメチレンカーボネート；ジオキサノン；液晶（共）重合体を形成するそれらの単量体；セルロースを形成するそれらの単量体；酢酸セルロースを形成するそれらの単量体；カルボキシメチルセルロースを形成する単量体；ヒドロキシプロピルメチル・セルロースを形成するそれらの単量体；ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンアジパート）、ポリ（ブチレンオキシド）、およびそれらの混合物からなる群から選択されるマクロジオールを含むポリウレタン前駆体、ヘキサメチレンジイソシアネート、イソホロンジイソシアネート、シクロヘキサンジイソシアネート、水素化メチレンジフェニレンジイソシアネート、およびそれらの混合物からなる群から選択されるイソシアネート官能基含有化合物、ならびにエチレンジアミン、１，４−ブタンジオール、１，２−ブタンジオール、２−アミノ−１−ブタノール、チオジエチレンジオール、２−メルカプトエチルエーテル、３−ヘキシン−２，５−ジオール、クエン酸、およびそれらの混合物からなる群から選択される増量剤；コラーゲン、アルギン酸塩（例えば、アルギン酸ナトリウムまたはカルシウム）、キチンおよびキトサン等のポリサッカリド、ポリ（プロピレンフマレート）；ならびにそれらの混合物が挙げられる。
【００３２】
一実施形態では、抗菌性コーティングは少なくとも１種類以上の弾性膜形成重合体添加物をさらに含む。
別の実施形態では、抗菌性コーティングはヒアルロン酸を含む。
別の実施形態では、抗菌性コーティングはヒアルロン酸ナトリウムを含む。
別の実施形態では、抗菌性コーティングは本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの混合物からなる。
別の実施形態では、抗菌コーティングは本質的にヒアルロン酸またはその誘導体からなる。
以下の例は、本発明の理解を助けるために記述されるものであって、もちろん本明細書で記述および主張される本発明を具体的に限定するものとして解釈されるべきではない。当業者の範囲内にある今や知られた均等物または後で開発される均等物の置換を含む本発明のそのような変形例あるいは実験的設計の軽微な変更は、本明細書で具体化されている本発明の範囲内であると考えられる。
【００３３】
（実施例）
チタニウム基材の調製： 直径１２．７ｍｍ×厚さ１．０ｍｍの非合金チタニウム円板を電気化学的に陽極化し、アクリルポリマー・ベースコーティング（およびヒアルロン酸トップコーティングでディップ・コーティングした。ヒアルロン酸を含有する試料のすべてをエチレンオキシドで滅菌した。
コーティングがクロルヘキシジンを含む場合、１．５％クロルヘキシジンジアセタート防腐剤の水溶液にヒアルロン酸含有基材をディップ・コーティングした。
【実施例１】
【００３４】
実施例１は、ヒアルロン酸で被覆してある種々のチタニウム表面（基材）の微生物試験結果を説明する。
検討に用いた基材： 本検討に用いた種々の基材を表１に列挙する。
【００３５】
【表１】
【００３６】
ＴＳＳ試料（シンセス（Ｓｙｎｔｈｅｓ）（米国））を米国材料試験協会（ＡＳＴＭ）Ｆ６７インプラント材料規格に合致する４等級のインプラント品質チタニウムから作った。すなわち、棒状のものを切断し、バリ取り、セラミックスによるタンブリング、クリーニング、および金陽極化をおこなった（インジュリー（Ｉｎｊｕｒｙ）２６（Ｓ１）２１−２７（１９９５）の記載を参照）。つぎに、上記試料を上記したように、被覆しなかった試料ＴＳＳを除いて、種々の表面処理で被覆した。
ＴＳ試料（シンセス（Ｓｙｎｔｈｅｓ）（米国））もまた、米国材料試験協会（ＡＳＴＭ）Ｆ６７インプラント材料規格に合致する４等級のインプラント品質チタニウムから作った。すなわち、シート状のものをパンチングまたは棒状のものを切断し、バリ取り、セラミックスによるタンブリング、さらにクリーニングをおこなった。ＴＳ試料を金陽極化（酸化）することで、酸化チタニウムからなる表層を設けた。金陽極化に先立って、以下の方法の１つを用いてＴＣ、ＴＥ、およびＴＭ面を研磨した。試料を液体（電解液）に浸して電流を印加することで、電解研磨面を作った。電流を印加することなく液状化学品に試料を浸すことによって、化学研磨を実施した。最後に、試料表面にダイアモンド・ペーストを用いることで、機械的研磨面を作った。
ＴＩＧ面に関しては、窒素インプランテーションを一面のみに適用することで、陽極化膜の光学特性を変化させた。
ＴＬＦ面の金陽極化をおこなわなかった。
【００３７】
各試料の表面性状を、レーザー・プロファイロメトリ（ＵＢＭメステクニック社（Ｍｅｓｓｔｅｃｈｎｉｋ ＧｍｂＨ）、ドイツ）によって定量測定した。また、加速電圧約４ｋＶおよび放出電流約４０μＡで二次電子（ＳＥ）検出モードを用いた日立Ｓ−４７００走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）によって、上記表面の撮像をおこなった。各表面のＲｍおよびＲｒｍｓ粗さパラメーター（シッティング（Ｓｉｔｔｉｎｇ）他、材料科学ジャーナル：医療用材料（Ｊ．Ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｍａｔｅｒ．Ｍｅｄ．）１０：３５−３６（１９９９）を測定して以下の表２に示す。粗さの違いを試料間で観察したところ、ＴＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、およびＴＡＳＴで比較可能な粗さが示され、ＴＳＳおよびＴＣがより滑らかであり、さらにＴＥおよびＴＭが最も滑らかであった。表面粗さの検討結果を表２に示す。
【００３８】
【表２】
Ｒｍは相加平均を示し、Ｒｒｍｓは自乗平均を示す。
【００３９】
スタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）８３２５−４を、振とう浴中、約３７°で、脳心臓浸出物ブロス（ＢＨＩ）で増殖させてＤ６００の値を約１にし、表１に記載した試験表面の１つを含む４穴プレートに、あらかじめ温めたＢＨＩを１ｍｌイノキュレートし、ＯＤ６００の初期値を約０．０５にした。各試験試料を、振とうせずに３７℃で１時間インキュベートした。ＴＳ、ＴＳＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、およびＴＡＳＴ面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）をＳＥＭで視覚化するために、付着した菌をグルタルアルデヒドで固定し、約１％ＯｓＯ４による後染色、臨界点乾燥、およびＡｕ／Ｐｄによる被覆をおこない、さらに加速電圧を約５ｋＶとし、また放出電流を約４０μＡとして後方散乱電子（ＢＳＥ）検出器を用いたＳＥＭによって視覚化した（リチャーズ（Ｒｉｃｈａｒｄｓ）他、顕微鏡検査ジャーナル（Ｊ．Ｍｉｃｒｏｓｃ．）１７７：４３−５２（１９９５）を参照）。付着しているスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の密度を定量するために、細菌を、蛍光酸化還元色素である５−シアノ、２−ジトリルテトラゾリウムクロリド（ＣＴＣ）（アン（Ａｎ）他、微生物学方法ジャーナル（Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ）２４：２９（１９９５））で約１時間にわたり染色し、アキシオカム（Ａｘｉｏｃａｍ）カメラを装着したツアイス（Ｚｅｉｓｓ）のアキシオプラン（Ａｘｉｏｐｌａｎ）２落射蛍光顕微鏡で視覚化した。各像における表面に付着した生菌の密度を、ＫＳ４００ソフトウエアを用いて計数し、ターキー検定による一方向ＡＮＯＶＡを用いて統計学的に分析した。
【００４０】
コーティング表面のＳＥＭ像は、ＴＨＹ面（図１）（すなわち、ヒアルロン酸ナトリウム含有面）を除いて、調製した表面の全てにスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）が付着したことを示した（図１）。（表面性状のＳＥＭ像もまた、粗さパラメーターの結果を追認した（細菌の後ろに表面が見られる図１を参照せよ））。蛍光顕微鏡は、ＳＥＭによる撮像を追認にした。蛍光顕微鏡像（図３）を用いて測定したように、ＴＣ表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）は、ＴＳ（対照）または他の研磨チタニウム表面（ＴＥおよびＴＭ）よりも有意に多かった。ＴＨＹ面でスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）を計数したところ、他のコーティング表面に比べて有意に少なかった（図２ａ）。付着量は、ＴＳＳおよびＴＡＳＴ表面で最も多かった。ＴＣ表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）は、蛍光顕微鏡像を用いて測定されるように、ＴＳ（対照）または他の研磨チタニウム表面（ＴＥおよびＴＭ）よりも有意に多かった（図３）。表面粗さが異なるにもかかわらず（表２）、ＴＳ、ＴＥ、およびＴＭ上の細菌の密度は、類似している（図２ｂ）。ＴＨＹを除いて、異なるコーティング試料に対して付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）で有意な違いは観察されなかった。この検討（図１）で用いたＴＨＹ面上で、対照面であるＴＳおよびＴＳＳ（図１）と比較してスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の密度が最小であったことから、金属および重合体インプラントに対する細菌の付着を阻害する上で、ＴＨＹ被覆が有用であることが示唆される。
【００４１】
この生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）での検討の結果は、単独で表面を研磨または被覆することが、該表面に対するスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の付着を最小化することに、有意な効果を示さなかったことを示している。この検討によって、促進するように設計された細菌の付着と同様に、ＴＡＳＴ表面が細菌の付着を促進し得ることが確証された。その一方、ヒアルロン酸ナトリウムによってチタニウム（ＴＳＳ）を被覆することで、その表面に付着しているスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の密度が有意に減少した。
【実施例２】
【００４２】
実施例２は、重合体、ヒアルロン酸、および抗菌剤（例えば、クロルヘキシジン）を含有するコーティングが金陽極化チタニウム基材での微生物増殖を抑制するのに有用であることを示す。
ヒアルロン酸、クロロヘキシジン、および／または重合体の種々の組み合わせによって上記のように、金陽極化チタニウム（シンセス（Ｓｙｎｔｈｅｓ）（米国））をディップ・コーティングした。種々の被覆を表３に示す。
【００４３】
【表３】
【００４４】
金属基材の表面特性
実施例１に記載されているようにして、コーティング基材に対して表面粗さの測定を実施した。その結果を表４に示す。
【００４５】
【表４】
＊超純チタニウム
＊＊Ｒａは測定プロファイルの全ての点の絶対値の相加平均（シッティング（Ｓｉｔｔｉｎｇ）他、材料科学ジャーナル：医療用材料（Ｊ．Ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｍａｔｅｒ．Ｍｅｄ．）１０：３５−３６（１９９９）を参照せよ）。
【００４６】
ＳＥＭのための固定。特に明記しない限り、全ての化学品をフルカ・ケミー（Ｆｌｕｋａ Ｃｈｅｍｉｅ ＡＧ）（スイス、ブクス）から購入した。全ての手順を２２〜２５℃で実施し、ピペラジン−Ｎ’Ｎ’−ビス−２−エタンスルホン酸（ＰＩＰＥＳ）緩衝液を、特に明記しない限り、濃度０．１モルおよびｐＨ７．４で使用した。最初に細胞または細菌を、２．５％グルタルアルデヒド含有ＰＩＰＥＳで５分間の固定をおこなう前に、ＰＩＰＥＳ緩衝液で２分間濯いだ。細菌／細胞に対して、ＰＩＰＥＳ緩衝液中での２分間の濯ぎを３回おこない、１％四酸化オスミウム（シメック・トレード（Ｓｉｍｅｃ Ｔｒａｄｅ ＡＧ）、スイス、ツォフィンゲン）含有ＰＩＰＥＳ緩衝液（ｐＨ６．８）で６０分間の後固定した。つぎに、一連のエタノール（５０％、７０％、９６％、および１００％）に通しての脱水処理（各洗浄を５分間）先立って、細菌／細胞を２倍希釈水で３回濯いだ（各洗浄を２分間）。つぎに、エタノールを、１：３、１：１、および３：１の１，２−トリクロロフルオロエタン：エタノールを用いて置き換え、続いて１００％（ｖ／ｖ）１，２−トリクロロトリフルオロエタンで置き換えた。この後に、試料をポラロン（ＰＯＬＡＲＯＮ）３０００臨界点乾燥機（アガー・サイエンティフィック（Ａｇａｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、英国、スタンステッド）内で臨界点乾燥し、バルテック・メド（Ｂａｌｔｅｃ Ｍｅｄ）０２０ユニット（バルテック（Ｂａｌｔｅｃ）、リヒテンシュタイン、ブクス）を用いて１０ｎｍの金／パラジウム（８０／２０）で被覆した。ＨＣ−ＢＳＥ検出モードで作動させた日立Ｓ−４７００ＦＥＳＥＭを用いて、試料の検査をおこなった。表面上のランダムに選択した座標から、１０個の像を取った。
【００４７】
線維芽細胞培養。インフィニティ（商標）テロメラーゼ不死化ヒト初代線維芽細胞（ｈＴＥＲＴ−ＢＪ１）保存培養を液体窒素から回収し、１０％胎仔牛血清（ＦＣＳ）、メジウム１９９、２００ｍＭのＬ−グルタミン、および１００ｍＭのピルビン酸ナトリウム（抗生物質無し）とともにダルベッコ修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）中、２５ｃｍ２プラスチック・フラスコ１本あたり３００，０００細胞で播種した。２〜３日後、０．２５％トリプシンおよび０．０２％エチレンジアミン・テトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、ジナトリウム塩（カルシウムおよびマグネシウムを含まない）を含むタイロード緩衝塩溶液（ＴＢＳＳ）で、ｈＴＥＲＴ細胞を剥離させた。回収された細胞を濯ぎ、ＳＥＭ観察のための固定に先立って、２４時間毎に培地を変えながら、４８時間および９６時間にわたって異なる表面上で、１０％ＦＣＳ（上記の通り）を含むＤＮＥＭ中、１つのウエルあたり１０，０００細胞を播種して培養した。
上記した検討の結果を以下で論ずる。
【００４８】
スタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）付着／増殖： スタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）と接触した基材のＳＥＭ分析は、クロルヘキシジンなしに表面全体にわたって細菌を示したが、クロルヘキシジンを有する表面ではわずかしか見られなかった（図４）。泡様の構造がＣＡＣに見られた。プレート計数によって、クロルヘキシジン無しの表面から回収されたスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）は生存可能であったが、クロルヘキシジンのある表面から回収されたものは初期の時点で生存不可能であった。しかし、９６時間で生存可能性が高まった。このような結果は、スタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）がクロルヘキシジンに対する耐性を与えること、あるいはクロルヘキシジン濃度が９６時間でかなり減少したことから培地および表面に存在するいっさいの細菌が増殖することが可能であることを示唆している。
【００４９】
ｈＴＥＲＴ線維芽細胞付着：
ｈＴＥＲＴ線維芽細胞付着の検討を群１および群２の表面（表２参照）に対しておこなった。培養４８時間および９６時間後、十分に広がった細胞を、クロルヘキシジンを含まない群１上で観察した（図５）。一方、クロルヘキシジンを含む表面上では無傷の細胞は観察されなかった（図６）。群２の表面に対して、わずかに広がった細胞がＣＨＰおよびＣＨＲ表面で観察された（図７）。付着細胞は、ＣＨ表面（ヒアルロン酸）（図７）またはクロルヘキシジンを含む表面（図７）で観察されなかった。
ｈＴＥＲＴ線維芽細胞付着の検討で調べた単一細胞のいくつかを撮像し、画像分析を用いて広がりの量を分析した。ＣＨＣに関する結果（図８）は、９６時間後にその表面上に広がった細胞をほとんど示さなかった。
【００５０】
別の実験を実施して、ｈＴＥＲＴ細胞の生存性／付着性に対する異なる濃度のクロルヘキシジンの細胞毒性を測定した。ｈＴＥＲＴ細胞を、上記したように、４穴プレート中でサーマノクス（Ｔｈｅｒｍａｎｏｘ）円板上で培養した。１０％ＦＣＳを含むＤＭＥＭに０．１％、１％、または１０％のクロルヘキシジンをイノキュレートした。また、２枚の円板が１０％ＦＣＳを含むＤＭＥＭだけを含有し、一方の円板をクロルヘキシジンと同一のプレートに入れ、他方を別の４穴プレートに入れた。培地を除去する前に、プレートを３７℃で２４時間インキュベートし、さらに１μｌ／ｍｌカルセインＡＭ（生細胞と反応）および１μｌ／ｍｌエチジウム・ホモ二量体（死細胞と反応）を含む１ｍｌＤＭＥＭ（ＦＣＳ無し）を添加した。プレートを暗所中、さらに３７℃で３０分間インキュベートし、続いてツアイス（Ｚｅｉｓｓ）落射蛍光顕微鏡で視覚化した。十分に広がった生細胞をクロルヘキシジンにさらされていない試料と同一の試料で観察し、一方死細胞をクロルヘキシジンにさらされた試料と同一のプレートで培養した表面上で観察した。０．１％または１％のクロロヘキサジンにさらされた試料で観察されなかった。上記結果は、低濃度のクロロヘキシジンもまた線維芽細胞の致死に用いることができる。
【００５１】
本発明は、本発明のいくつかの態様の例証として意図された実施例に開示された特定の実施形態によって範囲が限定されることはなく、また機能的均等物である任意の実施形態がこの発明の範囲内である。実際、本明細書に示し、かつ記載されたものに加えて種々の変更は、当業者に公知であり、添付された請求の範囲の範囲内に落ちることを目的としている。
多数の参考文献が引用され、それらの参考文献の開示内容全体が本明細書中に援用される。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】図１Ａないし図１Ｆは、標準のチタニウム表面、１時間培養後のコーティング表面（ＴＳ、ＴＳＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、ＴＡＳＴ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の電界放射型走査電子顕微鏡（ＦＥＳＥＭ）像を示し、他の表面に比べてかなり少ない細菌がＴＨＹ面に見られることを示す。
【図２】図２Ａおよび図２Ｂは、異なる表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の数密度を示す。（ａ）標準チタニウム（ＴＳおよびＴＳＳ）および標準チタニウム・コーティング、（ｂ）標準チタニウム（ＴＳ）および研磨面。
【図３】図３Ａおよび図３Ｂは、標準チタニウム（ＴＳ）面および化学的に研磨したチタニウム（ＴＣ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の傾向顕微鏡像を示す。白い点は生菌を表しており、元の像では赤色に見えた。
【図４】図４は、４８時間培養のＣＡ、ＣＡＣ、ＣＰ、およびＣＰＣの表面上のスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）のＳＥＭ像を示す。
【図５】図５は、ＣＡおよびＣＰの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【図６】図６は、ＣＡＣおよびＣＰＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【図７】図７は、ＣＣ、ＣＨ、ＣＨＰ、およびＣＨＲの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【図８】図８は、ＣＨＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【技術分野】
【０００１】
この出願は、２００３年９月３０日に出願された米国特許仮出願第６０／５０６，７６０号の優先権を主張するもので、本明細書ではその開示内容全体を援用する。
（技術分野）
本発明は、ヒアルロン酸またはその誘導体で表面が覆われたインプラントに関する。このコーティング・インプラントは耐微生物増殖性を持つ。
【背景技術】
【０００２】
ひとたび生体適合材料製インプラントをからだの中に移植すると、その後に該インプラントが宿主血漿成分（フィブリン等の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質成分を含む）によって覆われ、最終的に宿主の細胞に覆われることで、柔らかくて固い組織が形成される（例えば、バイヤー（Ｂａｉｅｒ）他、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ（Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｍａｔｅｒ． Ｒｅｓ．） １８：３３７−３５５ （１９８４））。生体適合材料に沈着した細胞外マトリックスおよび血漿タンパク質に付着するスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）およびスタヒロコッカス・エピデルミィス（Ｓ．ｅｐｅｒｄｅｒｍｉｓ）の能力は、病原または整形外科装置関連感染での有意要因であり、結果として生ずる細菌によって生物膜が形成されることが報告されている（ホイール（Ｈｏｙｌｅ）他、プログレス・イン・ドラッグ・リサーチ（Ｐｒｏｇ． Ｄｒｕｇ Ｒｅｓ．）、３７： ９１−１０５ （１００１）を参照せよ）。
【０００３】
生物膜形成は、表面に対する細菌の付着とそれに続く細胞間の付着とを必要とする２段階プロセスであり、細菌多層膜を形成する（例えば、クレムトン（Ｃｒａｍｔｏｎ）他、感染と免疫（Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ．）、６７：５４２７−５４３３（１９９９）を参照せよ）。ひとたび生物膜が形成されると、この生物膜の内側にいる細菌はファゴサイトーシスおよび抗生物質から保護されていることから、臨床的に処置することが困難である（ホイール（Ｈｏｙｌｅ）を参照せよ）。この１０年間にわたって、抗生物質の全身投与は、インプラントに関連する感染に対する有効な処置を提供するものではなかった（例えば、ペティ（Ｐｅｔｔｙ）他、骨関節外科雑誌（Ｊ． Ｂｏｎ． Ｊｏｉｎｔ Ｓｕｒｇ．）、６７：１２３６−１２４４）、バース（Ｂａｒｔｈ）他、バイオマテリアル（Ｂｉｏｍａｔ．）、１０：３２５−３２８（１９８９）、ワッサイル（Ｗａｓｓａｉｌ）他、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ（Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｍａｔｅｒ． Ｒｅｓ．）、３６（３）：３２５−３３０（１９９７）、およびローウィ（Ｌｏｗｙ）、ニューイングランド・ ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．）、３３９（８）：５２０−３２（１９８８）を参照せよ）。
【０００４】
ハラブ（Ｈａｌｌａｂ）他、組織工学（Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ．）、７（１）：５５−７１（２００１）およびランジェ（Ｌａｎｇｅ）他、生体分子工学（Ｂｉｏｍｏｌ． Ｅｎｇ．）、１９：２５５−６１（２００２）は、医療用インプラントの表面特性（トポロジーおよび化学的性質を含む）が細胞および細菌の付着を促進もしくは阻害する上で重要であると報告している。したがって、感染を減少させることを目的として、インプラントの表面を修飾することが種々の研究でなされたことが報告されている（例えば、コエルナー（Ｋｏｅｒｎｅｒ）他、バイオマテリアルズ（Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、２３（１４）：２８３５−４０（２００２）、パーク（Ｐａｒｋ）他、バイオマテリアルズ（Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、１９：８５１−９（１９９８）、およびローウィ（Ｌｏｗｙ）、ニューイングランド・ ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．）、３３９（８）：５２０−３２（１９８８）を参照せよ）。
【０００５】
細菌付着よりも、修飾表面に対する真核細胞およびＥＣＭタンパク質の付着が、よりいっそう注目された（例えば、アンセルム（ａｎｓｅｌｍｅ）他、ジャーナル・オブ・バイオメディカル・マテリアルズ・リサーチ（Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｍａｔｅｒ． Ｒｅｓ．）、４９（２）：１５５−６６（２００２）、およびローウィ（Ｌｏｗｙ）、ニューイングランド・ ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．）、３３９（８）：５２０−３２（１９８８）、さらにハラブ（Ｈａｌｌａｂ）他、組織工学（Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ．）、７（１）：５５−７１（２００１）を参照せよ。チタニウム等の材料のトポグラフィおよび表面化学的性質を修飾するために、異なる表面処理が用いられてきた（例えば、プレオ（Ｐｕｌｅｏ）他、バイオマテリアルズ（Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、２０：２３１１−２１（１９９９）、ローウィ（Ｌｏｗｙ）、およびハラブ（Ｈａｌｌａｂ）を参照せよ）。ローウィ（Ｌｏｗｙ）の論文は、上記表面を研磨する一つの方法を記述している。別の方法はその表面を抗菌または抗タンパク質被膜で被覆することである（例えば、コエルナー（Ｋｏｅｒｎｅｒ）、ナガオカ（Ｎａｇａｏｋａ）他、アメリカ人工臓器学会誌（ＡＳＡＩＯ Ｊ．）、１４１（３）：Ｍ３６５−８（１９９５）、およびシヤオのチタニウム・イン・メジシン（Ｔｉｔａｎｉｕｍ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）４１７−４４９（シュプリンガー出版、ハイデルベルグおよびベルリン、２００１）を参照せよ。
【０００６】
親水性被膜（例えば、ヒアルロナン）が耐付着性を持つことが報告されている。例えば、パベシオ（Ｐａｖｅｓｉｏ）他、メディカル・デバイス・テクノロジー（Ｍｅｄ． Ｄｅｖｉｃｅ Ｔｅｃｈｎｏｌ．）、８（７）：２０−１および２４−７ （１９９７）、ならびにカシネリ（Ｃａｓｓｉｎｅｌｌｉ）他、ジャーナル・オブ・バイオマテリアル・サイエンス・エディッション（Ｊ． Ｂｉｏｍａｔｅｒ． Ｓｃｉ． Ｐｏｌｙｍ． Ｅｄ．）、１１（９）：９６１−７７（２０００）は、線維芽細胞およびスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）の付着が減少した被覆高分子医療装置（例えば、眼内レンズ、ステント、およびカテーテル）を記述している。
バラツ（Ｂａｌａｚｓ）他の米国特許第４，５００，６７６号は、高分子材料およびそれから作られた製品を記述しており、この製品はその高分子材料とともにヒアルロン酸またはその塩を含むことで生体適合性となっている。
ホエーリグ（Ｗａｈｌｉｇ）他の米国特許第４，８５３，２２５号は、生理的に許容される賦形剤とギラーゼ阻害剤型の化学療法薬である少なくとも１種類の遅延放出活性化合物とを含む埋め込み型のデポー製剤を記述している。
【０００７】
デラ・バレ（ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅ）他の米国特許第５，１６６，３３１号、デラ・バレ（ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅ）他の米国特許第５，４４２，０５３号、およびデラ・バレ（ｄｅｌｌａ Ｖａｌｌｅ）他の米国特許第５，６３１，２４１号はすべて、種々の用途に対して医薬的に有用なヒアルロン酸部分、すなわち創傷治癒に有用である５０，０００ないし１００，０００ダルトンならびに眼内および関節内注射に有用である５００，０００ないし７３０，０００ダルトンを記述している。これらの引用文献にあるヒアルロン酸は、遊離の酸として、アルカリもしくはアルカリ土類金属塩として、または１つ以上の薬理学的活性物質を持つ塩として、存在すると思われる。
【０００８】
グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，５０５，９４５号、グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，５３０，１０２号、グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，５３０，１０２号、グリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，７０７，６２７号、およびグリスチナ（Ｇｒｉｓｔｉｎａ）他の米国特許第５，７１８，８９９号、さらに国際公開番号ＷＯ９４／１５６４０はすべて、微生物およびウイルスの感染と戦う高濃度の免疫グロブリンＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＭを含む組成物を記述している。これらの引用文献の免疫グロブリンを、多様な生体適合性材料、例えばコラーゲン、フィブリン、ヒアルロン酸、生物分解可能な重合体、およびそれらの断片上に、固定化することができる。
【０００９】
フォーク（Ｆａｌｋ）等の米国特許第５，９２９，０４８号およびフォーク（Ｆａｌｋ）等の米国特許第６，０６９，１３５号はすべて、ヒアルロン酸および／あるいはその塩および／またはその相同体、類似体、誘導体、複合体、エステル類、断片、およびそれらのサブユニットを治療量含む、組成物、製剤、ならびに潅流の悪い組織および病理学的組織を処置するための方法を記述している。
バレンタイン（Ｖａｌｅｎｔａｉｎｅ）の米国特許第６，４２８，５７９号は、生理活性分子が金−スルヒドリル結合を介して付着した金層を表面に有する被覆埋め込み型の装置を記述している。
ハリッシュ（Ｈａｒｉｓｈ）等の米国特許第６，５０３，５５６号は、埋め込み型装置または腔内人工器官にコーティングを形成する方法を記述している。この引用文献のコーティングもまた、活性成分、放射線不透過性エレメント、または放射性同位元素の送達に用いることができる。
ケオフ（Ｋｅｏｇｈ）他の米国特許第６，６１７，１４２号は、医療装置の表面に固定化生体分子のコーティングを設けて組織液および体液との接触のための生体適合性を改善する方法を記述している。
米国特許公開番号２００３／００９１６０９Ａ１および国際公開番号ＷＯ０２／０５８７５２はどちらも、医療装置、さらにはそれを製造して使用する方法を記述しており、この医療装置は、担体（すなわち、重合体）と、ポリヌクレオチド、もしくは抗菌ポリヌクレオチドを発現する細胞とを含む。
しかし、微生物の増殖を阻害する改善されたインプラントが求められている。
【特許文献１】米国特許第５，１６６，３３１号
【特許文献２】米国特許第５，４４２，０５３号
【特許文献３】米国特許第５，６３１，２４１号
【特許文献４】米国特許第５，５０５，９４５号
【特許文献５】米国特許第５，５３０，１０２号
【特許文献６】米国特許第５，５３０，１０２号
【特許文献７】米国特許第５，７０７，６２７号
【特許文献８】米国特許第５，７１８，８９９号
【特許文献９】国際公開番号ＷＯ９４／１５６４０
【特許文献１０】米国特許第５，９２９，０４８号
【特許文献１１】国際公開番号ＷＯ０２／０５８７５２
【特許文献１２】米国特許第６，０６９，１３５号
【特許文献１３】米国特許第６，４２８，５７９号
【特許文献１４】米国特許第６，５０３，５５６号
【特許文献１５】米国特許第６，６１７，１４２号
【特許文献１６】米国特許公開番号２００３／００９１６０９Ａ１
【発明の開示】
【００１０】
本発明は、ヒアルロン酸またはその誘導体で覆われたインプラントに関連する。このコーティング・インプラントは耐微生物増殖性を持つ。
一実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体で覆われたインプラントに関し、このインプラントは金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせである。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体で覆われたインプラントに関し、このインプラントはプラスチックまたは重合体を実質的に含まない。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体で覆われた整形外科用のインプラントに関する。
別の実施形態では、本発明は（ａ）ヒアルロン酸またはその誘導体と（ｂ）抗菌剤とを含むコーティングによって覆われたインプラントに関する。
別の実施形態では、本発明は（ａ）インプラントの表面に存在する第１の層と（ｂ）第１の層に存在するヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２の層とを有するマルチコーティング・インプラントに関する。
本発明の非限定的実施形態を例示することを意図した以下の図面、詳細な説明、および実施例を参照することで、本発明をより完全に理解することができる。
【００１１】
（図面の簡単な説明）
図１Ａないし図１Ｆは、標準のチタニウム表面、１時間培養後のコーティング表面（ＴＳ、ＴＳＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、ＴＡＳＴ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の電界放射型走査電子顕微鏡（ＦＥＳＥＭ）像を示し、他の表面に比べてかなり少ない細菌がＴＨＹ面に見られることを示す。
図２Ａおよび図２Ｂは、異なる表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の数密度を示す。（ａ）標準チタニウム（ＴＳおよびＴＳＳ）および標準チタニウム・コーティング、（ｂ）標準チタニウム（ＴＳ）および研磨面。
図３Ａおよび図３Ｂは、標準チタニウム（ＴＳ）面および化学的に研磨したチタニウム（ＴＣ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の傾向顕微鏡像を示す。白い点は生菌を表しており、元の像では赤色に見えた。
図４は、４８時間培養のＣＡ、ＣＡＣ、ＣＰ、およびＣＰＣの表面上のスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）のＳＥＭ像を示す。
図５は、ＣＡおよびＣＰの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
図６は、ＣＡＣおよびＣＰＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
図７は、ＣＣ、ＣＨ、ＣＨＰ、およびＣＨＲの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
図８は、ＣＨＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
上記したように、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体（抗菌コーティング（Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｃｏａｔｉｎｇ））でコーティングされたインプラントに関する。このコーティング・インプラントは、微生物増殖を阻害する。阻害され得る微生物増殖の例として、限定されるものではないけれども、スタヒロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｉｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ） およびスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）が挙げられる。
【００１３】
本発明のコーティング・インプラントを、生体吸収可能、再吸収可能、あるいは半永久的なものとすることができる。本発明のインプラントを、骨統合、骨接合、整形外科、および歯科での用途で使用することができる。典型的なインプラントとして、限定されるものではないけれども、空隙充填材（例えば、骨空隙充填材）、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板（例えば、頭蓋顔面用、上顎骨顔面用、整形外科用、および骨格用）、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー（例えば、縫合用および骨用）、スカフォード、ステム、メッシュ（例えば、硬質性、膨張性、編組み状（ｗｏｖｅｎ）、ニット状（ｋｎｉｔｔｅｄ）、および織編状（ｗｅａｖｅｄ））、スポンジ、細胞封入もしくは組織工学用インプラント、薬物送達装置（例えば、抗ウイルス薬、抗生物質、および担体、骨成長誘導触媒（骨形成タンパク質、成長因子、ペプチド、およびその他）、モノフィラメントもしくはマルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜（例えば、多孔性、微孔性、および再吸収性の膜）、気泡材（例えば、連続気泡材および独立気泡材）、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、およびぺーサー・リード（ｐａｃｅｒ ｌｅａｄ）が挙げられる。
【００１４】
一実施形態では、上記インプラントが整形外科用のインプラントである。別の実施形態では、上記インプラントが整形外科用のインプラントであって、このインプラントが整形外科用骨空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、ネジ増強装置、または頭蓋再建装置である。
「ヒアルロン酸」という用語は、本明細書で用いられるように、交互に繰り返す単位として生ずるグルクロン酸（Ｃ６Ｈ１０Ｏ７）とアセチルグルコサミン（Ｃ８Ｈ１５ＮＯ６）との（共）重合体を含む。
「ヒアルロン酸誘導体」という用語は、本明細書で用いられるように、ヒアルロン酸塩（例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、および一価の遷移金属、もしくはそれらの組み合わせ）、ヒアルロン酸エステル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、および第２ブチル、もしくはそれらの組み合わせ）、あるいはそれらの組み合わせを含む。
【００１５】
インプラント用の典型的な材料として、限定されるものではないけれども、金属および合金（例えば、チタニウム、チタニウム合金、ニッケル・チタニウム合金、タンタル、プラチナ・イリジウム合金、金、マグネシウム、ステンレス鋼、およびクロモ・コバルト合金）、セラミック、ならびに生体適合性プラスチックまたは重合体（例えば、ポリウレタンおよび／またはポリ（α−ヒドロキシエステル）、例えばポリ乳酸、ポリグリコリド、およびポリカプロラクトン、およびそれらの組み合わせ）が挙げられる。インプラントの他の非限定的な例として、米国特許第４，５０３，１５７号、第４，８８０，６１０号、第５，０４７，０３１号、第５，０５３，２１２号、第５，１２９，９０５号、第５，１６４，１８７号、第５，１７８，８４５号、第５，２７９，８３１号、第５，３３６，２６４号、第５，４９６，３９９号、第５，５６９，４４２号、第５，５７１，４９３号、第５，５８０，６２３号、第５，６８３，４９６号、第５，６８３，６６７号、第５，６９７，９８１号、第５，７０９，７４２号、第５，７８２，９７１号、第５，８２０，６３２号、第５，８４６，３１２号、第５，８８５，５４０号、第５，９００，２５４号、第５，９５２，０１０号、第５，９６２，０２８号、第５，９６４，９３２号、第５，９６８，２５３号、第６，００２，０６５号、第６，００５，１６２号、第６，０５３，９７０号、および第６，３３４，８９１号、またはそれらの組み合わせのいずれかに開示された材料が挙げられる。なお、これらの米国特許の内容全体を本明細書に援用する。
【００１６】
一実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関するもので、このインプラントは金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせを含む。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関するもので、このインプラントは金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせである。
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関するもので、このインプラントは本質的に金属、合金、セラミック、またはそれらの組み合わせからなる。
上記インプラントがセラミックである場合、このセラミックは好ましくはリン酸カルシウム・セラミック、例えばリン酸カルシウム、好ましくはヒドロキシアパタイトもしくはその代わりとしてリン酸三カルシウムである。さらに、インプラントの本体が、少なくとも部分的に硫酸カルシウム、脱ミネラル骨、自己骨、もしくはコラリン物質であってよい。ヒドロキシアパタイトおよびリン酸三カルシウムは、それらが完全に骨に溶け込みはじめるか、あるいは新たな天然の骨組織によっても置換されるという利点を有する。
【００１７】
別の実施形態では、本発明はヒアルロン酸またはその誘導体によって覆われたインプラントに関し、このインプラントは実質的に重合体成分（すなわち、プラスチックもしくは重合体）を含まない。別の実施形態では、インプラントに含まれる重合体成分の量は、インプラントの全重量を基準にして重合体およびプラスチックの約２５重量％以下である。別の実施形態では、インプラントに含まれる重合体成分の量は、インプラントの全重量を基準にして重合体およびプラスチックの約１０重量％以下である。別の実施形態では、インプラントに含まれる重合体成分の量は、インプラントの全重量を基準にして重合体およびプラスチックの約５重量％以下である。
【００１８】
プラスチックまたは重合体を実質的に含まない有用なインプラントの非限定的例として、骨空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、スカフォード、ステント、メッシュ、スポンジ、細胞封入用インプラント、組織工学用インプラント、薬物送達装置、骨成長誘導触媒、モノフィラメント、マルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜、気泡材、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、およびぺーサー・リードが挙げられる。
ヒアルロン酸またはその誘導体を、任意の適当な供給源から得ることができる。この供給源として、限定されるものではないが、細菌発酵、抽出、および／または動物体液（例えば、関節液）、組織、骨、またはその他からの単離が挙げられる。あるいは、ヒアルロン酸またはその誘導体を生体外（ｅｘ ｖｉｖｏ）で完全または部分的に化学合成することができる。異なる供給源から得たヒアルロン酸またはその誘導体の特性（例えば、分子量）が異なることもある。ヒアルロン酸またはその誘導体を得るための方法は、例えば米国特許第５，１６６，３３１号に記載されており、その開示全体を本明細書で明確に援用する。
【００１９】
一実施形態では、ヒアルロン酸の数平均分子量（ヒアルロン酸のポリエチレン・オキシド標準等の適当な標準に対してＧＰＣまたはＳＥＣによって測定されたとおり）は、少なくとも約１，０００グラム／モルである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の数平均分子量は、少なくとも約５，０００ｇ／ｍｏｌである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の数平均分子量は、約１０，０００グラム／モルないし約５，０００，０００グラム／モル、例えば約５０，０００グラム／モルないし約３，０００，０００グラム／モル、約１０，０００グラム／モルないし約１，０００，０００グラム／モル、あるいは約１５０，０００グラム／モルないし約２，０００，０００グラム／モルである。
別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の重量平均分子量（例えば、ポリエチレン・オキシド標準等の適当な標準に対してＧＰＣまたはＳＥＣによって測定されたとおり）は、少なくとも約１，５００グラム／モルである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の重量平均分子量は、少なくとも約８，０００グラム／モルである。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の重量平均分子量は、少なくとも約１５，０００グラム／モルないし約２５，０００，０００グラム／モル、例えば約７５，０００グラム／モルないし約１０，０００，０００グラム／モル、約１５，０００グラム／モルないし約５，０００，０００グラム／モル、あるいは約２５０，０００グラム／モルないし約４，０００，０００グラム／モルである。
【００２０】
別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体は、多分散性（すなわち、数平均分子量に対する重量平均分子量の比率）が約１．３ないし約１０である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約１．６ないし約８である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約１．５ないし約４である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約２ないし約７である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約４ないし約９である。別の実施形態では、ヒアルロン酸またはその誘導体の多分散性は、約１．８ないし約２．５である。
別の実施形態では、抗菌コーティングは、細菌、例えばスタヒロコッカス・アウレウス（ＳｔａｐｈｌｏｃｏｃｃｕＳ． ａｕｒｅｕｓ）またはスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）の吸着、付着、および／または増殖に対する生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）耐性が、抗菌コーティングが施されていないインプラントによって示されるものよりも、少なくとも５倍良好である。別の実施形態では、上記したような生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）耐性が少なくとも約１０倍良好である。別の実施形態では、上記したような生体内（ｉｎ ｖｉｖｏ）耐性が少なくとも約１００倍良好である。
【００２１】
ヒアルロン酸またはその誘導体のコーティングを形成することが可能な任意の方法を、本発明のコーティング・インプラントの製造に用いることができる。この方法として、限定されるものではないけれども、ディップ・コーティング、ブラシによる塗布、スプレー・コーティング、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。コーティング方法の例は、米国特許第４，５００，６７６号、第６，１８７，３６９号、および第６，１０６，８８９号、ならびに米国公開特許出願第２００２／００６８０９３号および第２００３／００９６１３１号に見いだされ、これらに開示されたもの全体を本明細書で援用する。概して、ヒアルロン酸またはその誘導体および有機溶媒を含む組成物をインプラントに塗布し、得られたコーティング・インプラントを乾燥または硬化させる。この抗菌コーティングは、好ましくはインプラントの表面の大部分（すなわち、５０％を上回る）、より好ましくはインプラントの表面の実質的に全て、最も好ましくはインプラントの表面の本質的に全てを覆う。
【００２２】
いくつかの実施形態では、コーティングを施す前に、化学的および／または物理的処理によってインプラント材料の表面を修飾することができる。例えば、インプラントの表面を研磨してその表面の粗さを少なくすることで、インプラント表面の物理的改質がおこなえ、あるいは研削することで表面粗さを増加させること（例えば、付着を改善すること）ができる。同様に、インプラントの表面を、例えば強酸もしくは強塩基処理、実施例１の記載どおりの電解研磨処理、実施例１の記載どおりの金属による陽極酸化処理、あるいはそれらの組み合わせによる処理によって、その表面を化学的に改質することができる。
抗菌コーティングの厚さは、約１ミクロンないし約５００ミクロンである。別の実施形態では、抗菌コーティングの厚さは、約３ミクロンないし約２５０ミクロンである。抗菌コーティングの厚さは、約５ミクロンないし最大で約１００ミクロンである。
【００２３】
別の実施形態では、インプラントは、さらに、このインプラントの表面に少なくとも第１のコーティングが設けられている。したがって、一実施形態では、本発明は、（ａ）インプラントの表面に存在する第１のコーティングと、（ｂ）上記第１のコーティング上に存在し、ヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２のコーティングとを有するマルチコーティング・インプラントに関する。有用な第１のコーティングの非限定的例として、金属（例えば、チタニウム、金、もしくはプラチナ）、セラミック材料（例えば、ヒドロキシアパタイトもしくはリン酸三カルシウム）、または重合体（例えば、アクリル重合体系コーティング）、あるいはそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
【００２４】
第１のコーティングを、インプラント材料と同一または異なるものとすることができる。一実施形態では、第１のコーティングの組成はインプラントと同一である。別の実施形態では、第１のコーティングの組成は、インプラントの組成と異なる。
インプラントが第１のコーティングによって被覆される場合、インプラントの組成を変えることができる。有用なインプラント材料の非限定的例として、上記したように金属、合金、もしくはセラミック、および／またはプラスチックもしくは重合体（例えば、ポリウレタンおよび／またはポリ（α−ヒドロキシエステル）（例として、ポリラクチド、ポリグリコリド、およびポリカプロラクトン）、あるいはそれらの組み合わせが挙げられる。
セラミックもしくは重合体によってインプラントを被覆する方法として、ヒアルロン酸またはその誘導体でインプラントを被覆するための上記したものが挙げられる。第１のコーティングは、セラミックまたは重合体を含み、その厚さは約１ミクロンから約５００ミクロン、別の実施形態では約３ミクロンから約２５０ミクロン、さらに別の実施形態では約５ミクロンから最大で約１００ミクロンまでの範囲に及ぶ。
【００２５】
一実施形態では、上記第１のコーティングはアクリル重合体を含む。
別の実施形態では、上記第１のコーティングは本質的にアクリル重合体からなる。
別の実施形態では、上記第１のコーティングはアクリル重合体からなる。
インプラント材料を金属または合金で被覆する方法は、米国特許第６，４２８，５７９号に開示されており、その開示内容の全体を本明細書に援用する。金属コーティングの非限定的例として、チタン、金、銀、およびプラチナが挙げられる。使用した場合、金属製の第１のコーティングは、好ましくは金である。
この金属コーティングの厚さは、使用した場合、一般に約１０オングストロームないし約５，０００オングストロームである。別の実施形態では、金属コーティングの厚さは、使用した場合、約１０オングストロームないし約１，０００オングストロームである。別の実施形態では、上記金属コーティングの厚さは、使用した場合、約１０オングストロームないし約２５０オングストロームである。
使用の際に、インプラントの表面上の異なる点で第１のコーティングの厚さが変動し得ることがわかるだろう。好ましくは、上記第１のコーティングの厚さは、インプラントの表面全体にわたって実質的に均一である。
【００２６】
第１のコーティングは、使用の際に、好ましくは上記インプラント表面の少なくとも大部分（すなわち、５０％を超える）、より好ましくは上記インプラント表面のほぼ全て、最も好ましくは上記インプラント表面の基本的に全てを被覆する。
第１のコーティングを使用する場合、抗菌コーティングの厚さは上記した通りであり、この第１のコーティングを上記した方法によって塗布することができる。
第１のコーティングを使用する場合、以下に説明するように、抗菌コーティングは治療剤をさらに含むことができる。
【００２７】
任意に、一種類以上の治療剤を抗菌コーティングに含有することができる。上記治療剤として、限定されるものではないけれども、抗生物質、化学療法剤、骨形成タンパク質等の骨成長因子（特に骨成長誘導因子）、内皮成長因子、インシュリン成長因子、またはその他、あるいはそれらの組み合わせが挙げられる。一実施形態では、治療剤が抗菌組成物と複合体を形成する。別の実施形態では、上記治療剤を抗菌コーティングの表面に付着させることができる。別の実施形態では、上記治療剤を徐放性製剤として抗菌コーティング組成物に含有する。典型的な治療剤として、限定されるものでないけれども、限定されるものではないけれども、防腐剤（例えば、国際特許出願番号ＷＯ０２／０８２９０７に列挙された防腐剤）、広域性殺生物剤、グラム陽性抗菌剤、グアニジウム合成物、ビグアナイド、ビピリジン、フェノキシド防腐剤、アルキル酸化物、アリール酸化物、チオール、ハロゲン化物、脂肪族アミン、芳香族アミン、第四級アンモニウム化合物（例えば、ペンシルバニアのＬＬＣ、バイオセイフ（ＢＩＯＳＡＦＥ）から市販されている四級アンモニウム殺生物剤）、化学療法剤、ならびに成長因子（例えば、骨成長誘導因子、形態形成タンパク質、内皮成長因子、およびインシュリン成長因子）が挙げられる。
【００２８】
有用な抗菌剤の非限定例として、抗アメーバ剤、例えばアルスチノール、ビアラミコール、カルバルソン、セファエリン、クロルベタミド、クロロキン、クロルフェノキサミド、クロルテトラサイクリン、デヒドロエメチン、ジブロモ・プロパミジン、ジロキサニド、ジフェタルゾン、エメチン、フマギリン、グラウカルビン、グリコビアルゾール、８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリンスルホン酸、ヨードクロルヒドロキシキン、ヨードキノール、パロモマイシン、ファンクオン、ポリベンズアルゾール、プロパミジン、キンファミド、セニダゾール、スルファルシド、テクロザン、テトラサイクリン、チオカルバミジン、チオカルバルゾン、チニダゾール；抗生物質、例えばアミノグリコシド（例えば、アミカシン、アプラマイシン、アルベカシン、バンベルマイシン、ブチロシン、ジベカシン、ジヒドロストレプトマイシン、ホルチミシン、ゲンタマイシン、イセパマイシン、カニアマイシン、ミクロノマイシン、ネオマイシン、ネオマイシン・ウンデシレン酸塩、ネチルマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン、シソマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、トロスペクトマイシン）、アンフェニコール（アジダムフェニコール、クロラムフェニコール、フロルフェニコール、チアフェニコール）、アンサマイシン（リファミド、リファムピン、リファミシン、リファペンチン、リファキシミン）、β−ラクタム（カルバセフェム、ロラカルベフ、カルバフェネム（ビオペネム、イミペネム、メロペネム、パニペネム）、セファロスポリン（セファクロール、セファドロキシル、セファマンドール、セファトリジン、セファゼドン、セファゾリン、セフカペンポボキシル、セフクリジン、セフジニル、セフジトレン、セフェピン、セフェタメト、セフィキシム、セフィンノキン、セフォジジム、セフォニシド、セフォペラゾン、セフォラニド、セフォタキム、セフォチアム、セフォゾプラン、セフピミゾール、セフピラミド、セフピローム、セフポドキムプロキセチル、セフプロジル、セフロキサジン、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム、セフテゾール、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアクソン、セフロキム、セフゾナム、セファセトリル・ナトリウム、セファレキシン、セファログリシン、セファロリジン、セファロスポリン、セファロチン、セファピリン・ナトリウム、セフラジン、ピブセファレキシン）、セファミシン（セフブペラゾン、セフメタゾール、セフミノクス、セフォテタン、セフォキシチン）、モノバクタム（アズトレオナム、カルモナム、チゲモナム）、オキサセフェン（フロモクセフ、モクサラクタム）、ペニシリン（アムジノシリン、アムジノシリンピボキシル、アモキシリン、アンピシリン、アパルシリン、アスポキシリン、アジドシリン、アズロシリン、バカンピシリン、ベンジルペニシリン酸、ベンジルペニシリン・ナトリウム、カルベニシリン、カリンダシリン、クロメトシリン、クロキサシリン、シクラシリン、ジクロキサシリン、エピシリン、フェンベニシリン、フロキサシリン、ヘタシリン、レナンピシリン、メタピシリン、メチシリン・ナトリウム、メズロシリン、ナフシリン・ナトリウム、オキサシリン、ペナメシリン、ペネタメート・ヨウ化水素、ペニシリンＧ−ベネタミン、ペニシリン−Ｇベンザチン、ペニシリンＧ−ベンズヒドリルアミン、ペニシリンＧ−カルシウム、ペニシリンＧ−ヒドラバミン、ペニシリンＧ−カリウム、ペニシリンＧ−プロカイン、ペニシリンＮ、ペニシリンＯ、ペニシリンＶ、ペニシリンＶ−ベンザチン、ペニシリンＶ−ヒドラバミン、ペニメピシリン、フェネチシリン・カリウム、ピペラシリン、ピバンピシリン、プロピシリン、キナシリン、スルベニシリン、サルタミシリン、ファランピシリン、テモシリン、チカルシリン）、リチペネム）、リンコサミド（クリンダマイシン、リンコマイシン）、マクロライド（アジスロマイシン、カルボマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、エリスロマイシンアシストレート、エリスロマイシンエストレート、エリスロマイシン・グルコヘプトン酸、ラクトビオン酸エリスロマイシン、プロピオン酸エリスロマイシン、ステアリン酸エリスロマイシン、ジョサマイシン、ロイコマイシン、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、プリマイシン、ロキタマイシン、ロサラマイシン、ロキシスロマイシン、スピラマイシン、トロレアンドマイシン）、ポリペプチド（アンホマイシン、バシトラシン、カプレオマイシン、コリスチン、エンデュラシジン、エンビオマイシン、フサファンジン、グラミシジン、グラミシジン、ミカマイシン、ポリミキシン、プリスチナマイシン、リストセチン、テイコプラニン、ポリミキシン、チオストレプトン、ツベラクチノマイシン、チロシジン、タイロスライシン、バンコマイシン、バイオマイシン、バージニアマイシン、バシトラシン亜鉛）、テトラサイクリン（アピシリン、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、グアメサイクリン、リメサイクリン、メクロサイクロン、メタサイクリン（ミノサイクリン）、オキシテトラサイクリン（ペニメピシリン）、ピパシリン、ロリテトラサイクリン、サンシクリン、テトラシクリン）、シクロセリン、ムピロシン、ツベリン；合成抗菌剤、例えば２，４−ジアミノピリミジン（ブロジモプリン、テクストロクソプリム、トリメトプリム）、ニトロフラン（フラルタドン、フラゾリウム・クロリド、ニフラデン、ニフラテル、ニフルホリン、ニフルピリノール、ニフルプラジン、ニフルトイノル、ニトロフィラントイン）、キノロンおよび類似体（シノキサシン、シプロフロキサシン、クリナフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、フルメキン、グレパフロキサシン、ロメフロキサシン、ミロキサシン、ナジフロキサシン、ナジリキシン酸、ノルフラキサシン、オフロキサシン、オキソリン酸、パズフロキサシン、ペフロキサシン、ピペミド酸、ピロミド酸、ロソキサシン、ルフロキサシン、スパルフロキサシン、テマフロキサシン、トスフロキサシン、トロバフロキサシン）、スルホンアミド（アセチルスルファメトキシピリダジン 、ベンジル・スルファミド、クロラミン−Ｂ、クロラミン−Ｔ、ジクロラミンＴ、Ｎ２−ホルミルスルフィソミジン、Ｎ４−β−Ｄ−グルコシルスルファニルアミド、マフェニド、４’−（メチルスルファモイル）スルファニルアニリド、ノピリルスルファミド、フタリルスルファセタミド、フタリルスルファチアゾール、サラゾスルファジミジン、スクシニルスルファチアゾール、スルファベンザミド、スルファセタミド、スルファクロルピリダジン、スルファクリソイジン、スルファシチン、スルファジアジン、スルファジクラミド、スルファジメトキシン、スルファドキシン、スルファエチドール、スルファグアニジン、スルファグアノール、スルファレン、スルファロキシン、スルファメラジン、スルファメーター、スルファメタジン、スルファメチゾール、スルファメトミジン、スルファメトキサゾール、スルファメトキシピリダジン、スルファメトロール、スルファミドクリソイジン、スルファモキソール、スルファニルアミド、４−スルファニルアミドサルチル酸、Ｎ４−スルファニリルスルファニルアミド、スルファニリル尿素、Ｎ−スルファニリル−３，４−キシルアミド、スルファニトラン、スルファペリン、スルファフェナゾール、スルファプロキシリン、スルファピラジン、スルファピリジン、スルファソミゾール、スルファシマジン、スルファチアゾール、スルファチオ尿素、スルファトールアミド、スルフィソミジン、スルフィソクサゾール）、スルホン（アセダプソン、アセジアスルホン、アセトスルホン・ナトリウム、ダプソン、ジアチモスルホン、グルコスルホンナトリウム、ソラスルホン、サクシスルホン、スルファニル酸、ｐ−スルファニルベンジルアミン、スルホキソン・ナトリウム、チアゾールスルホン）、クロホクトール、ヘキセジン、メセナミン、メセナミン・アンヒドロメチレンシトレート、馬尿酸メテナミン、マンデル酸メテナミン、メセナミンスルホサリチル酸塩、ニトロキソリン、タウロリジン、キシボモール；抗らい菌剤、例えばアセダプソン、アセトスルホン・名とアリウム、クロファジミン、ダプソン、ジアチルモスルホン、グルコスルホン・ナトリウム、ヒドノカルピン酸、ソラスルホン、スクシスルホン・名とアリウム、抗真菌剤、例えばアリルアミン・ブテナフィン、ナフチフィン、テルビナフィン、イミダゾール（例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロロダントイン、クロルミダゾール、クロコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、エニルコナゾール、フェンチコナゾール、フルトリマゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ラノコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、硝酸オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、チオコナゾール）、チオカルバメート（トルシレート、トリンデート、トルナフテート）、トリアゾール（フルオナゾール、イトラコナゾール、サペルコナゾール、テルコナゾール）、アクリゾルシン、アモロルフィン、ビフェナミン、ボロモサリシルクロラニリド、ブクロサミド、プロピオン酸カルシウム、クロルフェネシン、シクロピロックス、クロキシキン、コパラフィネート、ジアムタゾールジヒドロクロライド、エキサラミド、フルシトシン、ハレタゾール、ヘキセチジン、ロフルカルバン、ニフラテル、ヨウ化カリウム、プロピオン酸、ピリチオン、サリチルアニリド、プロピオン酸ナトリウム、スルベンチン、テノニトロゾール、トリアセチン、ウジョチオン、ウンデシレン酸、プロピオン酸亜鉛； ならびにその他が挙げられる。
【００２９】
本発明で有用な他の抗菌剤として、β−ラクタマーゼ阻害剤（例えば、クラブラン酸、スルバクタム、タゾバクタム）、クロラムフェニコール（例えば、アジダムフェニコール、クロラムフェニコール、チアフェニコール）；フシジン酸；合成剤、例えばトリメトプリム、必要に応じてスルホンアミドとの組み合わせ）、およびニトロイミダゾール（例えば、メトロニダゾール、チニダゾール、ニモラゾール）；抗ミコバクテリア剤（例えば、カプレオマイシン、クロファジミン、ダプソン、エタンブトール、イソニアジド、ピラチナミド、リファブチン、リファンピシン、ストレプトマイシン、チオアミド）； 抗ウイルス剤（例えば、アクリロビル、アマンタジン、アジドチミジン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、トリバビリン、トリフリジン、ビダラビン）；インターフェロン（例えば、インターフェロンα、インターフェロンβ）防腐剤（例えば、クロルヘキシジン、ゲンチアナ紫、オクテニジン、ポビドンヨード、第四級アンモニウム化合物、スルファジアジン銀、トリクロサン）が挙げられる。
【００３０】
一実施形態では、上記抗菌剤は抗生物質、好ましくはゲンタマイシンである。
別の実施形態では、上記抗菌剤は防腐剤、好ましくはクロルヘキシジンである。
一実施形態では、本発明は、（ａ）ヒアルロン酸またはその誘導体と（ｂ）抗菌剤とを含むコーティングによって被覆されたインプラントに関する。
一実施形態では、本発明は、（ａ）ヒアルロン酸またはその誘導体と（ｂ）防腐剤とを含むコーティングによって被覆されたインプラントに関する。
【００３１】
いくつかの実施形態では、抗菌コーティングは一種類以上の重合体添加物を含むことができる。理論によって限定されることなく、出願人は重合体（例えば、弾性膜形成重合体）の付加によって抗菌コーティングの構造的特性を改善し得ると考える（例えば、改善された可撓性、付着、および／または亀裂抵抗性）。重合体が生体適合性を有し、ヒアルロン酸成分の所望の特性に対して有意に干渉しない限り、いかなる重合体も使用することができる。典型的には、上記重合体は、使用した場合、生体吸着性または浸食性である。より好ましくは、上記重合体は、使用した場合、生体吸着性である。有用な重合体の非限定的例として、ポリウレタン（米国特許第４，５００，６７６号を参照。この特許の開示内容全体を本明細書に援用する）、ポリラクチド；ポリグリコリド；Ｌ−ラクチド；Ｌ−乳酸、Ｄ−ラクチド、Ｄ−乳酸、Ｄ，Ｌ−ラクチドからなる群から選択される単量体のホモ重合体または共重合体；グリコリド；α−ヒドロキシ酪酸；α−ヒドロキシ吉草酸；α−ヒドロキシ酢酸；α−ヒドロキシカプロン酸；α−ヒドロキシヘプタン酸；α−ヒドロキシデカン酸；α−ヒドロキシミリスチン酸；α−ヒドロキシオクタン酸；α−ヒドロキシステアリン酸；ヒドロキシ酪酸塩；ヒドロキシ吉草酸塩；β−プロピオラクチド；β−プロピオ酪酸；γ−カプロラクトン；β−カプロラクトン；γ−ブチロラクトン；ピバロカクトン；テトラメチルグリコリド；テトラメチルグリコール酸；ジメチルグリコール酸；トリメチレンカーボネート；ジオキサノン；液晶（共）重合体を形成するそれらの単量体；セルロースを形成するそれらの単量体；酢酸セルロースを形成するそれらの単量体；カルボキシメチルセルロースを形成する単量体；ヒドロキシプロピルメチル・セルロースを形成するそれらの単量体；ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンアジパート）、ポリ（ブチレンオキシド）、およびそれらの混合物からなる群から選択されるマクロジオールを含むポリウレタン前駆体、ヘキサメチレンジイソシアネート、イソホロンジイソシアネート、シクロヘキサンジイソシアネート、水素化メチレンジフェニレンジイソシアネート、およびそれらの混合物からなる群から選択されるイソシアネート官能基含有化合物、ならびにエチレンジアミン、１，４−ブタンジオール、１，２−ブタンジオール、２−アミノ−１−ブタノール、チオジエチレンジオール、２−メルカプトエチルエーテル、３−ヘキシン−２，５−ジオール、クエン酸、およびそれらの混合物からなる群から選択される増量剤；コラーゲン、アルギン酸塩（例えば、アルギン酸ナトリウムまたはカルシウム）、キチンおよびキトサン等のポリサッカリド、ポリ（プロピレンフマレート）；ならびにそれらの混合物が挙げられる。
【００３２】
一実施形態では、抗菌性コーティングは少なくとも１種類以上の弾性膜形成重合体添加物をさらに含む。
別の実施形態では、抗菌性コーティングはヒアルロン酸を含む。
別の実施形態では、抗菌性コーティングはヒアルロン酸ナトリウムを含む。
別の実施形態では、抗菌性コーティングは本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの混合物からなる。
別の実施形態では、抗菌コーティングは本質的にヒアルロン酸またはその誘導体からなる。
以下の例は、本発明の理解を助けるために記述されるものであって、もちろん本明細書で記述および主張される本発明を具体的に限定するものとして解釈されるべきではない。当業者の範囲内にある今や知られた均等物または後で開発される均等物の置換を含む本発明のそのような変形例あるいは実験的設計の軽微な変更は、本明細書で具体化されている本発明の範囲内であると考えられる。
【００３３】
（実施例）
チタニウム基材の調製： 直径１２．７ｍｍ×厚さ１．０ｍｍの非合金チタニウム円板を電気化学的に陽極化し、アクリルポリマー・ベースコーティング（およびヒアルロン酸トップコーティングでディップ・コーティングした。ヒアルロン酸を含有する試料のすべてをエチレンオキシドで滅菌した。
コーティングがクロルヘキシジンを含む場合、１．５％クロルヘキシジンジアセタート防腐剤の水溶液にヒアルロン酸含有基材をディップ・コーティングした。
【実施例１】
【００３４】
実施例１は、ヒアルロン酸で被覆してある種々のチタニウム表面（基材）の微生物試験結果を説明する。
検討に用いた基材： 本検討に用いた種々の基材を表１に列挙する。
【００３５】
【表１】
【００３６】
ＴＳＳ試料（シンセス（Ｓｙｎｔｈｅｓ）（米国））を米国材料試験協会（ＡＳＴＭ）Ｆ６７インプラント材料規格に合致する４等級のインプラント品質チタニウムから作った。すなわち、棒状のものを切断し、バリ取り、セラミックスによるタンブリング、クリーニング、および金陽極化をおこなった（インジュリー（Ｉｎｊｕｒｙ）２６（Ｓ１）２１−２７（１９９５）の記載を参照）。つぎに、上記試料を上記したように、被覆しなかった試料ＴＳＳを除いて、種々の表面処理で被覆した。
ＴＳ試料（シンセス（Ｓｙｎｔｈｅｓ）（米国））もまた、米国材料試験協会（ＡＳＴＭ）Ｆ６７インプラント材料規格に合致する４等級のインプラント品質チタニウムから作った。すなわち、シート状のものをパンチングまたは棒状のものを切断し、バリ取り、セラミックスによるタンブリング、さらにクリーニングをおこなった。ＴＳ試料を金陽極化（酸化）することで、酸化チタニウムからなる表層を設けた。金陽極化に先立って、以下の方法の１つを用いてＴＣ、ＴＥ、およびＴＭ面を研磨した。試料を液体（電解液）に浸して電流を印加することで、電解研磨面を作った。電流を印加することなく液状化学品に試料を浸すことによって、化学研磨を実施した。最後に、試料表面にダイアモンド・ペーストを用いることで、機械的研磨面を作った。
ＴＩＧ面に関しては、窒素インプランテーションを一面のみに適用することで、陽極化膜の光学特性を変化させた。
ＴＬＦ面の金陽極化をおこなわなかった。
【００３７】
各試料の表面性状を、レーザー・プロファイロメトリ（ＵＢＭメステクニック社（Ｍｅｓｓｔｅｃｈｎｉｋ ＧｍｂＨ）、ドイツ）によって定量測定した。また、加速電圧約４ｋＶおよび放出電流約４０μＡで二次電子（ＳＥ）検出モードを用いた日立Ｓ−４７００走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）によって、上記表面の撮像をおこなった。各表面のＲｍおよびＲｒｍｓ粗さパラメーター（シッティング（Ｓｉｔｔｉｎｇ）他、材料科学ジャーナル：医療用材料（Ｊ．Ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｍａｔｅｒ．Ｍｅｄ．）１０：３５−３６（１９９９）を測定して以下の表２に示す。粗さの違いを試料間で観察したところ、ＴＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、およびＴＡＳＴで比較可能な粗さが示され、ＴＳＳおよびＴＣがより滑らかであり、さらにＴＥおよびＴＭが最も滑らかであった。表面粗さの検討結果を表２に示す。
【００３８】
【表２】
Ｒｍは相加平均を示し、Ｒｒｍｓは自乗平均を示す。
【００３９】
スタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）８３２５−４を、振とう浴中、約３７°で、脳心臓浸出物ブロス（ＢＨＩ）で増殖させてＤ６００の値を約１にし、表１に記載した試験表面の１つを含む４穴プレートに、あらかじめ温めたＢＨＩを１ｍｌイノキュレートし、ＯＤ６００の初期値を約０．０５にした。各試験試料を、振とうせずに３７℃で１時間インキュベートした。ＴＳ、ＴＳＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、およびＴＡＳＴ面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）をＳＥＭで視覚化するために、付着した菌をグルタルアルデヒドで固定し、約１％ＯｓＯ４による後染色、臨界点乾燥、およびＡｕ／Ｐｄによる被覆をおこない、さらに加速電圧を約５ｋＶとし、また放出電流を約４０μＡとして後方散乱電子（ＢＳＥ）検出器を用いたＳＥＭによって視覚化した（リチャーズ（Ｒｉｃｈａｒｄｓ）他、顕微鏡検査ジャーナル（Ｊ．Ｍｉｃｒｏｓｃ．）１７７：４３−５２（１９９５）を参照）。付着しているスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の密度を定量するために、細菌を、蛍光酸化還元色素である５−シアノ、２−ジトリルテトラゾリウムクロリド（ＣＴＣ）（アン（Ａｎ）他、微生物学方法ジャーナル（Ｊ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ）２４：２９（１９９５））で約１時間にわたり染色し、アキシオカム（Ａｘｉｏｃａｍ）カメラを装着したツアイス（Ｚｅｉｓｓ）のアキシオプラン（Ａｘｉｏｐｌａｎ）２落射蛍光顕微鏡で視覚化した。各像における表面に付着した生菌の密度を、ＫＳ４００ソフトウエアを用いて計数し、ターキー検定による一方向ＡＮＯＶＡを用いて統計学的に分析した。
【００４０】
コーティング表面のＳＥＭ像は、ＴＨＹ面（図１）（すなわち、ヒアルロン酸ナトリウム含有面）を除いて、調製した表面の全てにスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）が付着したことを示した（図１）。（表面性状のＳＥＭ像もまた、粗さパラメーターの結果を追認した（細菌の後ろに表面が見られる図１を参照せよ））。蛍光顕微鏡は、ＳＥＭによる撮像を追認にした。蛍光顕微鏡像（図３）を用いて測定したように、ＴＣ表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）は、ＴＳ（対照）または他の研磨チタニウム表面（ＴＥおよびＴＭ）よりも有意に多かった。ＴＨＹ面でスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）を計数したところ、他のコーティング表面に比べて有意に少なかった（図２ａ）。付着量は、ＴＳＳおよびＴＡＳＴ表面で最も多かった。ＴＣ表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）は、蛍光顕微鏡像を用いて測定されるように、ＴＳ（対照）または他の研磨チタニウム表面（ＴＥおよびＴＭ）よりも有意に多かった（図３）。表面粗さが異なるにもかかわらず（表２）、ＴＳ、ＴＥ、およびＴＭ上の細菌の密度は、類似している（図２ｂ）。ＴＨＹを除いて、異なるコーティング試料に対して付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）で有意な違いは観察されなかった。この検討（図１）で用いたＴＨＹ面上で、対照面であるＴＳおよびＴＳＳ（図１）と比較してスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の密度が最小であったことから、金属および重合体インプラントに対する細菌の付着を阻害する上で、ＴＨＹ被覆が有用であることが示唆される。
【００４１】
この生体外（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）での検討の結果は、単独で表面を研磨または被覆することが、該表面に対するスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の付着を最小化することに、有意な効果を示さなかったことを示している。この検討によって、促進するように設計された細菌の付着と同様に、ＴＡＳＴ表面が細菌の付着を促進し得ることが確証された。その一方、ヒアルロン酸ナトリウムによってチタニウム（ＴＳＳ）を被覆することで、その表面に付着しているスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の密度が有意に減少した。
【実施例２】
【００４２】
実施例２は、重合体、ヒアルロン酸、および抗菌剤（例えば、クロルヘキシジン）を含有するコーティングが金陽極化チタニウム基材での微生物増殖を抑制するのに有用であることを示す。
ヒアルロン酸、クロロヘキシジン、および／または重合体の種々の組み合わせによって上記のように、金陽極化チタニウム（シンセス（Ｓｙｎｔｈｅｓ）（米国））をディップ・コーティングした。種々の被覆を表３に示す。
【００４３】
【表３】
【００４４】
金属基材の表面特性
実施例１に記載されているようにして、コーティング基材に対して表面粗さの測定を実施した。その結果を表４に示す。
【００４５】
【表４】
＊超純チタニウム
＊＊Ｒａは測定プロファイルの全ての点の絶対値の相加平均（シッティング（Ｓｉｔｔｉｎｇ）他、材料科学ジャーナル：医療用材料（Ｊ．Ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｍａｔｅｒ．Ｍｅｄ．）１０：３５−３６（１９９９）を参照せよ）。
【００４６】
ＳＥＭのための固定。特に明記しない限り、全ての化学品をフルカ・ケミー（Ｆｌｕｋａ Ｃｈｅｍｉｅ ＡＧ）（スイス、ブクス）から購入した。全ての手順を２２〜２５℃で実施し、ピペラジン−Ｎ’Ｎ’−ビス−２−エタンスルホン酸（ＰＩＰＥＳ）緩衝液を、特に明記しない限り、濃度０．１モルおよびｐＨ７．４で使用した。最初に細胞または細菌を、２．５％グルタルアルデヒド含有ＰＩＰＥＳで５分間の固定をおこなう前に、ＰＩＰＥＳ緩衝液で２分間濯いだ。細菌／細胞に対して、ＰＩＰＥＳ緩衝液中での２分間の濯ぎを３回おこない、１％四酸化オスミウム（シメック・トレード（Ｓｉｍｅｃ Ｔｒａｄｅ ＡＧ）、スイス、ツォフィンゲン）含有ＰＩＰＥＳ緩衝液（ｐＨ６．８）で６０分間の後固定した。つぎに、一連のエタノール（５０％、７０％、９６％、および１００％）に通しての脱水処理（各洗浄を５分間）先立って、細菌／細胞を２倍希釈水で３回濯いだ（各洗浄を２分間）。つぎに、エタノールを、１：３、１：１、および３：１の１，２−トリクロロフルオロエタン：エタノールを用いて置き換え、続いて１００％（ｖ／ｖ）１，２−トリクロロトリフルオロエタンで置き換えた。この後に、試料をポラロン（ＰＯＬＡＲＯＮ）３０００臨界点乾燥機（アガー・サイエンティフィック（Ａｇａｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、英国、スタンステッド）内で臨界点乾燥し、バルテック・メド（Ｂａｌｔｅｃ Ｍｅｄ）０２０ユニット（バルテック（Ｂａｌｔｅｃ）、リヒテンシュタイン、ブクス）を用いて１０ｎｍの金／パラジウム（８０／２０）で被覆した。ＨＣ−ＢＳＥ検出モードで作動させた日立Ｓ−４７００ＦＥＳＥＭを用いて、試料の検査をおこなった。表面上のランダムに選択した座標から、１０個の像を取った。
【００４７】
線維芽細胞培養。インフィニティ（商標）テロメラーゼ不死化ヒト初代線維芽細胞（ｈＴＥＲＴ−ＢＪ１）保存培養を液体窒素から回収し、１０％胎仔牛血清（ＦＣＳ）、メジウム１９９、２００ｍＭのＬ−グルタミン、および１００ｍＭのピルビン酸ナトリウム（抗生物質無し）とともにダルベッコ修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）中、２５ｃｍ２プラスチック・フラスコ１本あたり３００，０００細胞で播種した。２〜３日後、０．２５％トリプシンおよび０．０２％エチレンジアミン・テトラ酢酸（ＥＤＴＡ）、ジナトリウム塩（カルシウムおよびマグネシウムを含まない）を含むタイロード緩衝塩溶液（ＴＢＳＳ）で、ｈＴＥＲＴ細胞を剥離させた。回収された細胞を濯ぎ、ＳＥＭ観察のための固定に先立って、２４時間毎に培地を変えながら、４８時間および９６時間にわたって異なる表面上で、１０％ＦＣＳ（上記の通り）を含むＤＮＥＭ中、１つのウエルあたり１０，０００細胞を播種して培養した。
上記した検討の結果を以下で論ずる。
【００４８】
スタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）付着／増殖： スタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）と接触した基材のＳＥＭ分析は、クロルヘキシジンなしに表面全体にわたって細菌を示したが、クロルヘキシジンを有する表面ではわずかしか見られなかった（図４）。泡様の構造がＣＡＣに見られた。プレート計数によって、クロルヘキシジン無しの表面から回収されたスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）は生存可能であったが、クロルヘキシジンのある表面から回収されたものは初期の時点で生存不可能であった。しかし、９６時間で生存可能性が高まった。このような結果は、スタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ． ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）がクロルヘキシジンに対する耐性を与えること、あるいはクロルヘキシジン濃度が９６時間でかなり減少したことから培地および表面に存在するいっさいの細菌が増殖することが可能であることを示唆している。
【００４９】
ｈＴＥＲＴ線維芽細胞付着：
ｈＴＥＲＴ線維芽細胞付着の検討を群１および群２の表面（表２参照）に対しておこなった。培養４８時間および９６時間後、十分に広がった細胞を、クロルヘキシジンを含まない群１上で観察した（図５）。一方、クロルヘキシジンを含む表面上では無傷の細胞は観察されなかった（図６）。群２の表面に対して、わずかに広がった細胞がＣＨＰおよびＣＨＲ表面で観察された（図７）。付着細胞は、ＣＨ表面（ヒアルロン酸）（図７）またはクロルヘキシジンを含む表面（図７）で観察されなかった。
ｈＴＥＲＴ線維芽細胞付着の検討で調べた単一細胞のいくつかを撮像し、画像分析を用いて広がりの量を分析した。ＣＨＣに関する結果（図８）は、９６時間後にその表面上に広がった細胞をほとんど示さなかった。
【００５０】
別の実験を実施して、ｈＴＥＲＴ細胞の生存性／付着性に対する異なる濃度のクロルヘキシジンの細胞毒性を測定した。ｈＴＥＲＴ細胞を、上記したように、４穴プレート中でサーマノクス（Ｔｈｅｒｍａｎｏｘ）円板上で培養した。１０％ＦＣＳを含むＤＭＥＭに０．１％、１％、または１０％のクロルヘキシジンをイノキュレートした。また、２枚の円板が１０％ＦＣＳを含むＤＭＥＭだけを含有し、一方の円板をクロルヘキシジンと同一のプレートに入れ、他方を別の４穴プレートに入れた。培地を除去する前に、プレートを３７℃で２４時間インキュベートし、さらに１μｌ／ｍｌカルセインＡＭ（生細胞と反応）および１μｌ／ｍｌエチジウム・ホモ二量体（死細胞と反応）を含む１ｍｌＤＭＥＭ（ＦＣＳ無し）を添加した。プレートを暗所中、さらに３７℃で３０分間インキュベートし、続いてツアイス（Ｚｅｉｓｓ）落射蛍光顕微鏡で視覚化した。十分に広がった生細胞をクロルヘキシジンにさらされていない試料と同一の試料で観察し、一方死細胞をクロルヘキシジンにさらされた試料と同一のプレートで培養した表面上で観察した。０．１％または１％のクロロヘキサジンにさらされた試料で観察されなかった。上記結果は、低濃度のクロロヘキシジンもまた線維芽細胞の致死に用いることができる。
【００５１】
本発明は、本発明のいくつかの態様の例証として意図された実施例に開示された特定の実施形態によって範囲が限定されることはなく、また機能的均等物である任意の実施形態がこの発明の範囲内である。実際、本明細書に示し、かつ記載されたものに加えて種々の変更は、当業者に公知であり、添付された請求の範囲の範囲内に落ちることを目的としている。
多数の参考文献が引用され、それらの参考文献の開示内容全体が本明細書中に援用される。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】図１Ａないし図１Ｆは、標準のチタニウム表面、１時間培養後のコーティング表面（ＴＳ、ＴＳＳ、ＴＨＹ、ＴＩＧ、ＴＬＦ、ＴＡＳＴ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ）の電界放射型走査電子顕微鏡（ＦＥＳＥＭ）像を示し、他の表面に比べてかなり少ない細菌がＴＨＹ面に見られることを示す。
【図２】図２Ａおよび図２Ｂは、異なる表面に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の数密度を示す。（ａ）標準チタニウム（ＴＳおよびＴＳＳ）および標準チタニウム・コーティング、（ｂ）標準チタニウム（ＴＳ）および研磨面。
【図３】図３Ａおよび図３Ｂは、標準チタニウム（ＴＳ）面および化学的に研磨したチタニウム（ＴＣ）に付着したスタヒロコッカス・アウレウス（Ｓ． ａｕｒｅｕｓ） の傾向顕微鏡像を示す。白い点は生菌を表しており、元の像では赤色に見えた。
【図４】図４は、４８時間培養のＣＡ、ＣＡＣ、ＣＰ、およびＣＰＣの表面上のスタヒロコッカス・エピデルミディス（Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）のＳＥＭ像を示す。
【図５】図５は、ＣＡおよびＣＰの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【図６】図６は、ＣＡＣおよびＣＰＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【図７】図７は、ＣＣ、ＣＨ、ＣＨＰ、およびＣＨＲの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【図８】図８は、ＣＨＣの表面上での４８時間培養後（左側像）および９６時間培養後（右側像）のｈＴＥＲＴ線維芽細胞のＳＥＭ像を示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
コーティングされたインプラントであって、金属、合金、またはセラミックを前記インプラントが含み、また前記コーティングが含む、コーティング・インプラント。
【請求項２】
前記コーティングが無いインプラントと比較して、少なくとも約５倍良好に、細菌の吸着、付着、または増殖の少なくとも１つを減少させる、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項３】
前記細菌が、スタヒロコッカス・アウレウス、スタヒロコッカス・エピデルミディス、またはそれらの混合物である、請求項２に記載のコーティング・インプラント。
【請求項４】
前記細菌がスタヒロコッカス・アウレウスである、請求項３に記載のコーティング・インプラント。
【請求項５】
空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、スカフォード、ステム、メッシュ、スポンジ、組織工学用インプラント、薬物送達装置、骨成長誘導触媒、モノフィラメント、マルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜、気泡材、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、およびぺーサー・リードの形状である、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項６】
前記コーティングの厚さが約１ミクロンないし約５００ミクロンである、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項７】
前記コーティングの厚さが約３ミクロンないし約２５０ミクロンである、請求項６に記載のコーティング・インプラント。
【請求項８】
前記コーティングが、スタヒロコッカス・アウレウスの吸着、付着、または増殖の少なくとも１つを、少なくとも約１０倍減少させる、請求項２に記載のコーティング・インプラント。
【請求項９】
前記コーティングが、スタヒロコッカス・アウレウスの吸着、付着、または増殖の少なくとも１つを、少なくとも約１００倍減少させる、請求項２に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１０】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸を含む、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１１】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸ナトリウムを含む、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１２】
前記抗菌コーティングが、本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせからなる、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１３】
前記抗菌コーティングが治療剤をさらに含む、請求項１のコーティング・インプラント。
【請求項１４】
前記治療剤が抗生物質を含む、請求項１３のコーティング・インプラント。
【請求項１５】
前記インプラントが重合体成分を実質的に含まない、請求項１１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１６】
コーティングされた整形外科用インプラントであって、
前記コーティングがヒアルロン酸またはその誘導体を含む、整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項１７】
前記整形外科用インプラントが、整形外科用の整形外科用の 骨空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、ネジ増強装置、または頭蓋再建装置である、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項１８】
前記コーティングの厚さが約１ミクロンないし約５００ミクロンである、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項１９】
前記コーティングの厚さが約３ミクロンないし約２５０ミクロンである、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２０】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸を含む、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２１】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸ナトリウムを含む、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２２】
前記抗菌コーティングが、本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせからなる、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２３】
前記抗菌コーティングが治療剤をさらに含む、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２４】
前記治療剤が抗生物質を含む、請求項２３に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２５】
マルチコーティングされたインプラントであって、
（ａ）前記インプラントの表面に存在する第１のコーティングを有する第１の層と、（ｂ）前記第１の層の上に存在するヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２の層と、
を含むマルチコーティング・インプラント。
【請求項２６】
前記第１の層が金属、合金、セラミック、または重合体を含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項２７】
前記第１の層の厚さが約１０オングストロームないし約５０００オングストロームである、請求項２６に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項２８】
前記第１の層の厚さが約１０オングストロームないし約１，０００オングストロームである、請求項２７に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項２９】
前記第２のコーティングがヒアルロン酸を含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３０】
前記第２のコーティングがヒアルロン酸ナトリウムを含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３１】
前記第２のコーティングが本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせからなる、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３２】
前記第２のコーティングが治療剤をさらに含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３３】
前記治療剤が抗生物質または防腐剤を含む、請求項３２に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３４】
前記コーティングが本質的にヒアルロン酸またはその誘導体からなり、前記インプラントが空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー， スカフォード、ステム、メッシュ、スポンジ、細胞封入用インプラント、組織工学用インプラント、薬物送達装置、骨成長誘導触媒、モノフィラメント、マルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜、気泡材、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、またはぺーサー・リードからなる、コーティング・インプラント。
【請求項３５】
コーティング・インプラントを製造する方法であって、
（ａ）金属、合金、またはセラミックを含むインプラントを設けること、ならびに、
（ｂ）ヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２のコーティングで前記インプラントを被覆すること、
を含むコーティング・インプラントの製造方法。
【請求項３６】
前記インプラントが第１のコーティングをさらに含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記第１のコーティングが金属、合金、セラミック、または重合体を含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記第１のコーティングがアクリル重合体である、請求項３７に記載の方法。
【請求項１】
コーティングされたインプラントであって、金属、合金、またはセラミックを前記インプラントが含み、また前記コーティングが含む、コーティング・インプラント。
【請求項２】
前記コーティングが無いインプラントと比較して、少なくとも約５倍良好に、細菌の吸着、付着、または増殖の少なくとも１つを減少させる、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項３】
前記細菌が、スタヒロコッカス・アウレウス、スタヒロコッカス・エピデルミディス、またはそれらの混合物である、請求項２に記載のコーティング・インプラント。
【請求項４】
前記細菌がスタヒロコッカス・アウレウスである、請求項３に記載のコーティング・インプラント。
【請求項５】
空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、スカフォード、ステム、メッシュ、スポンジ、組織工学用インプラント、薬物送達装置、骨成長誘導触媒、モノフィラメント、マルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜、気泡材、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、およびぺーサー・リードの形状である、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項６】
前記コーティングの厚さが約１ミクロンないし約５００ミクロンである、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項７】
前記コーティングの厚さが約３ミクロンないし約２５０ミクロンである、請求項６に記載のコーティング・インプラント。
【請求項８】
前記コーティングが、スタヒロコッカス・アウレウスの吸着、付着、または増殖の少なくとも１つを、少なくとも約１０倍減少させる、請求項２に記載のコーティング・インプラント。
【請求項９】
前記コーティングが、スタヒロコッカス・アウレウスの吸着、付着、または増殖の少なくとも１つを、少なくとも約１００倍減少させる、請求項２に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１０】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸を含む、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１１】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸ナトリウムを含む、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１２】
前記抗菌コーティングが、本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせからなる、請求項１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１３】
前記抗菌コーティングが治療剤をさらに含む、請求項１のコーティング・インプラント。
【請求項１４】
前記治療剤が抗生物質を含む、請求項１３のコーティング・インプラント。
【請求項１５】
前記インプラントが重合体成分を実質的に含まない、請求項１１に記載のコーティング・インプラント。
【請求項１６】
コーティングされた整形外科用インプラントであって、
前記コーティングがヒアルロン酸またはその誘導体を含む、整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項１７】
前記整形外科用インプラントが、整形外科用の整形外科用の 骨空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー、ネジ増強装置、または頭蓋再建装置である、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項１８】
前記コーティングの厚さが約１ミクロンないし約５００ミクロンである、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項１９】
前記コーティングの厚さが約３ミクロンないし約２５０ミクロンである、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２０】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸を含む、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２１】
前記抗菌コーティングがヒアルロン酸ナトリウムを含む、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２２】
前記抗菌コーティングが、本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせからなる、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２３】
前記抗菌コーティングが治療剤をさらに含む、請求項１６に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２４】
前記治療剤が抗生物質を含む、請求項２３に記載の整形外科用コーティング・インプラント。
【請求項２５】
マルチコーティングされたインプラントであって、
（ａ）前記インプラントの表面に存在する第１のコーティングを有する第１の層と、（ｂ）前記第１の層の上に存在するヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２の層と、
を含むマルチコーティング・インプラント。
【請求項２６】
前記第１の層が金属、合金、セラミック、または重合体を含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項２７】
前記第１の層の厚さが約１０オングストロームないし約５０００オングストロームである、請求項２６に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項２８】
前記第１の層の厚さが約１０オングストロームないし約１，０００オングストロームである、請求項２７に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項２９】
前記第２のコーティングがヒアルロン酸を含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３０】
前記第２のコーティングがヒアルロン酸ナトリウムを含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３１】
前記第２のコーティングが本質的にヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせからなる、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３２】
前記第２のコーティングが治療剤をさらに含む、請求項２５に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３３】
前記治療剤が抗生物質または防腐剤を含む、請求項３２に記載のマルチコーティング・インプラント。
【請求項３４】
前記コーティングが本質的にヒアルロン酸またはその誘導体からなり、前記インプラントが空隙充填材、骨折安定化補助材、髄内固定装置、関節増強／代替装置、骨固定板、ネジ、タック、クリップ、ステープル、釘、ピン、ロッド、アンカー， スカフォード、ステム、メッシュ、スポンジ、細胞封入用インプラント、組織工学用インプラント、薬物送達装置、骨成長誘導触媒、モノフィラメント、マルチフィラメント構造、シート、コーティング、膜、気泡材、ネジ増強装置、頭蓋再建装置、心臓弁、またはぺーサー・リードからなる、コーティング・インプラント。
【請求項３５】
コーティング・インプラントを製造する方法であって、
（ａ）金属、合金、またはセラミックを含むインプラントを設けること、ならびに、
（ｂ）ヒアルロン酸またはその誘導体を含む第２のコーティングで前記インプラントを被覆すること、
を含むコーティング・インプラントの製造方法。
【請求項３６】
前記インプラントが第１のコーティングをさらに含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記第１のコーティングが金属、合金、セラミック、または重合体を含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記第１のコーティングがアクリル重合体である、請求項３７に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公表番号】特表２００７−５０７３０６（Ｐ２００７−５０７３０６Ａ）
【公表日】平成１９年３月２９日（２００７．３．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５３４１１２（Ｐ２００６−５３４１１２）
【出願日】平成１６年９月３０日（２００４．９．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３２２３９
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３２４１７
【国際公開日】平成１７年４月１４日（２００５．４．１４）
【出願人】（５９１０７３５５５）ジンテーズ アクチエンゲゼルシャフト クール (36)
【氏名又は名称原語表記】ＳＹＮＴＨＥＳ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【出願人】（３０６０４７６７５）
【出願人】（３０６０４７６８６）
【出願人】（３０６０４７６９７）シンセス（ユーエスエー） (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年３月２９日（２００７．３．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年９月３０日（２００４．９．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３２２３９
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０３２４１７
【国際公開日】平成１７年４月１４日（２００５．４．１４）
【出願人】（５９１０７３５５５）ジンテーズ アクチエンゲゼルシャフト クール (36)
【氏名又は名称原語表記】ＳＹＮＴＨＥＳ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【出願人】（３０６０４７６７５）
【出願人】（３０６０４７６８６）
【出願人】（３０６０４７６９７）シンセス（ユーエスエー） (1)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]