疾患を治療するための免疫グロブリンドメイン含有細胞表面認識分子の使用
本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。ＩＮＳＰ０５２とインターフェロン、ＴＮＦアンタゴニスト又は更に抗感染剤若しくは抗血液凝固剤との組み合わせもまた本発明の範囲内である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質ＩＮＳＰ０５２は、免疫グロブリン含有細胞表面認識分子として、そしてより特にはサイトカインアンタゴニストとして、ＷＯ２００３／０９３３１６及び国際出願番号ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００４７７２に開示されている。
【発明の開示】
【０００３】
発明の概要
本発明は、ＩＮＳＰ０５２が、補体経路のタンパク質、特にプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンと相互作用するという予想できない発見に基づく。
【０００４】
従って、本発明の第一の目的は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用である。本発明の第二の目的は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２を発現する細胞、又はＩＮＳＰ０５２のコード配列を含んで成る発現ベクターの使用である。本発明はまた、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用にも関する。
【０００５】
発明の説明
本発明は、ＩＮＳＰ０５２が、補体経路のタンパク質、特にプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンと相互作用するという予想できない発見に基づく。この度特徴付けられたＷＯ２００３／０９３３１６及び国際出願番号ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００４７７２のポリヌクレオチド又は対応するポリペプチドのこれらの驚くべき特性は、これらを薬剤又は医薬組成物の調製のために特に適当にする。
【０００６】
従って、第一の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用に関する。
【０００７】
第二の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェント条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、方法に関する。
【０００８】
第三の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用に関する。
【０００９】
第四の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェント条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、使用に関する。
【００１０】
好ましくは、可溶性ＩＮＳＰ０５２が、薬剤又は医薬組成物の調製のために使用される。
【００１１】
本明細書中、「可溶性ＩＮＳＰ０５２」又は「ｓＩＮＳＰ０５２」の用語は、膜結合されていないＩＮＳＰ０５２ポリペプチド、又は１又は複数の膜貫通ドメインを含有しないＩＮＳＰ０５２ポリペプチドを意味する。
【００１２】
本発明に関係して、内在性ＩＮＳＰ０５２の放出を刺激し、あるいは活性を増強する物質は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のために同様に使用できることが当業者に明らかであろう。
【００１３】
本発明は、膜結合ＩＮＳＰ０５２細胞外部分から成る可溶性ＩＮＳＰ０５２（配列番号２２）が、補体経路のタンパク質、特にプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンと相互作用するという予想できない発見に基づく。
【００１４】
本明細書中、「補体経路タンパク質」の用語は、プロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンから選択されるタンパク質を意味する。これらの補体経路タンパク質は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患に関係する。
【００１５】
好ましくは、感染症は、全身性真菌疾患、リケッチア病、クラミジア病、寄生虫感染症、ウイルス疾患、膿瘍、ヒト免疫不全ウイルス感染症、菌血症、敗血症性ショック、性行為感染症又は細菌疾患から選択される。
【００１６】
好ましくは、細菌疾患は、グラム陽性球菌により生じる疾患、グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患、グラム陽性桿菌により生じる疾患、グラム陰性桿菌により生じる疾患、嫌気性桿菌により生じる疾患、スピロヘータにより生じる疾患、又はマイコバクテリアにより生じる疾患から選択される。
【００１７】
ある態様において、本明細書中、「グラム陰性好気性菌球菌」は、ナイセリア属（Neisseria）、例えば、 N. meningitidis、 N. gonorrhoeae及び中咽頭、膣、又は直腸に一般的に生息する多数の雑菌Neisseria種といった生物を意味する。
【００１８】
好ましくは、グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患は、髄膜炎、菌血症、尿道炎、子宮頚管炎、直腸炎、咽頭炎、卵管炎、精巣上体炎、淋病感染症、急性細菌性髄膜炎又は髄膜炎菌感染症から選択される。
【００１９】
本明細書中、「菌血症」は、血流中の細菌を意味する。
【００２０】
本明細書中、「敗血症ショック」は、輸液療法に対する低灌流及び低血圧不応性を意味する。本明細書中、「敗血症」又は「全身性炎症反応症候群」は、炎症の全身症状により付随される、重篤な局在的な又は菌血症の感染症を意味する。本明細書中、菌血症による敗血症（sepsis)は、敗血症(septicemia)を意味する。
【００２１】
好ましくは、寄生虫感染症は、腸外原虫感染症、自由生活アメーバーによる感染症、腸管原虫感染症、線虫（回虫）感染症、吸虫（Trematode）（Fluke）感染症又は条虫（サナダムシ）感染症から選択される。
【００２２】
好ましくは、腸外原虫感染症はマラリアである。
【００２３】
好ましくは、ウイルス疾患は、呼吸性ウイルス疾患、ヘルペスウイルス感染症、中枢神経系ウイルス疾患、アルボウイルス又はアレナウイルス疾患から選択される。
【００２４】
更に、各補体経路タンパク質は、以下に記載されるとおり、特定の疾患に関係することが示されている。
【００２５】
ある態様において、本発明は、プロパージン関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２６】
ある態様において、本発明は、ＭＢＬ２関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２７】
ある態様において、本発明は、ＭＡＳＰ１関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２８】
ある態様において、本発明は、ＭＡＳＰ２関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２９】
ある態様において、本発明は、アンチトロンビンＩＩＩ関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００３０】
ある態様において、本発明は、補体因子Ｈ関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００３１】
ある態様において、本発明は、アルブミン関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００３２】
プロパージン（因子Ｐ；４６９個のアミノ酸；５１２７６Ｄａ）は、自然免疫系の補体第二経路において活性である血漿タンパク質である。これは、Ｃ３ｂ，Ｂｂ転換酵素を安定化するための多くの微生物表面に結合する正の制御因子である。Ｃ３ｂ，Ｂｂ転換酵素は、その後、急速にＣ３ｂに対してよりＣ３を切断し、これはオプソニンとして、あるいは宿主細胞においては進行しないが、細菌細胞において進行する増幅ループにおける経路を再開するために作用する。代替経路において、Ｃ３はこのように、因子Ｉ及びＨの制御下において、因子Ｂ、因子Ｄ、及びプロパージンＰを介して活性化する。プロパージンの欠乏は、特に、ナイセリア種に対する高い感受性に関係する。プロパージンにおける欠損は、プロパージン欠乏（ｐｆｄ）の原因であり、細菌感染に対する、特に髄膜炎菌感染に対するより高い感受性をもたらす。３つの表現型が報告されている：完全欠乏（Ｉ型）、不完全欠乏（ＩＩ型）、及びプロパージンの機能障害（ＩＩＩ型）。プロパージンは、「プロパージン関連疾患」の用語により示される多くの疾患に関係している。
【００３３】
「プロパージン関連疾患」は、補体欠乏、完全欠乏（Ｉ型）、不完全欠乏（ＩＩ型）、プロパージンの機能障害（ＩＩＩ型）、髄膜炎菌性疾患、ナイセリア感染症、低補体血症、無フィブリノーゲン血症、溶連菌感染後急性糸球体腎炎、無ガンマグロブリン血症、スイス型無ガンマグロブリン血症、糸球体疾患、屈折異常、ウィスコット・アルドリッチ症候群、ＩｇＡ糸球体腎炎、プロテインＣ欠乏症、腎炎、慢性肉芽腫症、細菌感染症、蛋白尿、敗血症性ショック、溶血、全身感染症、敗血症(septicemia)、免疫不全症候群、全身性エリテマトーデス、マラリア、血栓症、糖尿病、壊死、後天性免疫不全症候群から選択される。
【００３４】
好ましくは、糸球体疾患は、腎炎症候群、ネフローゼ症候群、原発性糸球体疾患、続発性腎疾患から選択される。
【００３５】
好ましくは、原発性糸球体疾患は、微小変化群、巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、糸球体間質増殖性糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、急速進行性糸球体腎炎、又は繊維性糸球体腎炎から選択される。
【００３６】
好ましくは、腎炎症候群は、血尿、高血圧、腎不全、浮腫、急性糸球体腎炎、一過性糸球体腎炎、感染後糸球体腎炎、劇症性糸球体腎炎、急速進行性糸球体腎炎（ＲＰＧＮ）、低悪性度糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、半月体形成性糸球体腎炎、免疫不足ＲＰＧＮ、免疫複合体ＲＰＧＮ、抗ＧＢＭ抗体疾患自己免疫、原発性腎臓血尿性−蛋白尿症候群、無症候性血尿性−蛋白尿症候群、慢性血尿性−蛋白尿症候群、慢性糸球体腎炎、緩徐進行性糸球体疾患から選択される。
【００３７】
マンノース結合レクチン２遺伝子（ＭＢＬ２；２４８個のアミノ酸；２６１４３Ｄａ；サブユニット；６セットのホモ三量体のオリゴマー複合体）は、マンノース結合レクチン（ＭＢＬ）又はタンパク質（ＭＢＰ）をコードし、急性相応答の一部として肝臓により分泌され、そして自然免疫防御に関係する。ＭＢＬのためのリガンドは、多様な微生物により発現され、そして該タンパク質の結合は、頻発性及び慢性感染症に対する感受性をもたらすオプソニン作用、並びに補体系の活性化に導く。ＭＢＬ２は、「ＭＢＬ２関連疾患」の用語により示される多くの疾患に関係している。
【００３８】
「ＭＢＬ２関連疾患」は、血管疾患、動脈硬化性疾患、マンノース結合タンパク質欠乏症、オプソニオン欠損による慢性感染症、髄膜炎菌感染症、全身性エリテマトーデス、補体欠損症、急性期反応、髄膜炎菌性髄膜炎、ＩｇＡ糸球体腎炎、ＩｇＧサブクラス欠損症、嚢胞性線維症、亜急性皮膚エリテマトーデス、関節リウマチ、免疫不全症候群、気道感染症、関節腫脹、インフルエンザ、原発性シェーグレン症候群、溶血、嚢胞性線維症、細菌感染症、皮膚粘膜リンパ節症候群、分類不能型免疫不全症、ループス腎炎、多発性関節炎、炎症、敗血症性ショック、結核、ウイルス感染症、肺炎球菌感染症、ＨＩＶ感染症、中耳炎、腎炎、全身感染症、マラリア、膜性腎症、敗血症症候群、結腸の腺癌、Ｃ型肝炎、自然流産、シェーグレン症候群、急性中耳炎、糸球体腎炎、単純ヘルペス、皮膚筋炎、壊死、アスペルギルス症、粥状動脈硬化、エプスタイン・バーウイルス感染症、肺炎、原発性胆汁性肝硬変、Ｂ型肝炎、肝疾患、骨髄炎、循環器疾患、肝炎、好中球減少症、サルコイドーシス、後天性免疫不全症候群、硬変、髄膜炎、潰瘍性大腸炎、グリオーマ、腎疾患、冠動脈硬化、慢性腎不全、結腸直腸癌、ショック、川崎病、急性気道感染、外陰部前庭炎症候群、ベーチェット病、クローン病活性指数、再狭窄、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ｈＴＬＶ−ｉ）プロウイルス感染症、皮膚筋炎、Ｂ型肝炎ウイルス感染症、ＩｇＡ腎症、ＣＯＰＤ感染症、妊娠糖尿病、巨細胞性動脈炎、う歯、クラミジア・トラコマチス感染症、絨毛羊膜炎、原発性胆汁性肝硬変、肺炎クラミジア感染、セリアック病、Ｑ熱後疲労症候群、又は慢性Ｑ熱から選択される。
【００３９】
好ましくは、循環器障害は、心臓及び呼吸器停止、心臓弁膜症動脈性高血圧、心内膜炎、起立性低血圧、失神、心膜疾患、動脈硬化症、心臓腫瘍、冠動脈疾患、大動脈及びその分枝の疾患、心不全、末梢血管障害、ショック、スポーツ心臓症候群又は不整脈から選択される。
【００４０】
Ｒａ反応性因子（ＲＡＲＦ）は、一定の腸内細菌により発現されるＲａ及びＲ２ポリサッカライドに結合する補体依存性殺菌因子である。ＲＡＲＦ活性は、脊椎動物の多様なグループの血清中に見られ、これは、これらの細菌種による感染に抵抗するための進化的に保存されたメカニズムであることを示唆する。ＲＡＲＦは、１００ｋＤ補体、ＣＲＡＲＦ、またＭＡＳＰ１若しくはｐ１００とも称される、を含み、これは補体成分Ｃ４（Ｃ４Ｆ；Ｃ４Ｓ）、Ｃ２、及びＣ３を活性化するものと考えられる。後の研究は、しかしながら、ＭＡＳＰ２からＭＡＳＰ１が分離し、そしてＭＡＳＰ１がＣ３及びＣ２を活性化し、一方でＭＡＳｐ２はＣ４及びＣ２を活性化することを示した。ＲＡＲＦの他の成分は、哺乳類結合レクチン、微生物炭化水素と結合し、そしてＭＡＳＰを活性化する補体系の血漿タンパク質メンバーである。その後ＭＡＳＰは、Ｃ３コンバーターゼを産出するため、あるいはＣ３を直接活性化するためにＣ４及びＣ２を補充する。
【００４１】
ＭＡＳＰ１の選択的スプライシングは、補体活性化の哺乳類結合レクチン（ＭＢＬ）経路に含まれる２つのＲＡＲＦ成分をコードする２つの転写変異体をもたらす。各アイソフォームは、ジスルフィド結合により結合されたヘテロ二量体を形成する２つの鎖に切断される。コードされるタンパク質は、ペプチダーゼのトリプシンファミリーのメンバーである。ＭＡＳＰ１（６９９個のアミノ酸；７９２５８Ｄａ）は、従って、一定の腸内細菌により発現されるＲａ及びＲ２ポリサッカライドと特異的に結合する殺菌性Ｒａ反応因子ＲＡＲＦの成分である。ＭＡＳＰ１は、「ＭＡＳＰ１関連疾患」の用語により表される数種の疾患に関係している。
【００４２】
「ＭＡＳＰ１関連疾患」は、糸球体腎炎、ＩｇＡ糸球体腎炎、全身性エリテマトーデス又は免疫不全症候群から選択される。
【００４３】
ＭＡＳＰ２（６８６個のアミノ酸；７５６８５Ｄａ；アイソフォーム２はＭＡＳＰ−１と結合する；ペプチダーゼＳ１ファミリーに属する）は、おそらくマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）補体活性化経路の開始において重要な役割を果たすチロシンプロテアーゼである。活性化後、これはＣ４Ａ及びＣ４Ｂを産生するＣ４を切断する。ＭＡＳＰ２は、「ＭＡＳＰ−２関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００４４】
「ＭＡＳＰ−２関連疾患」は、免疫不全症候群又はＭＡＳＰ２欠乏症から選択される。
【００４５】
好ましくは、「免疫不全症候群」は、後天性免疫不全症候群又はマンノース結合タンパク質（ＭＢＰ）座位に関係する免疫不全症から選択される。
【００４６】
アンチトロンビンＩＩＩ（４６４個のアミノ酸；５２６０２Ｄａ；セルピンファミリーに属する）は、血液凝固カスケードを制御する血漿中の最も重要なセリンプロテアーゼ阻害因子である。ＡＴ−ＩＩＩは、トロンビン、並びに因子ＩＸａ、Ｘａ、及びＸＩａを阻害する。その阻害活性は、一般に、ヘパリンの存在下において増強される。アンチトロンビンＩＩＩにおける欠損は、アンチトロンビンＩＩＩ欠乏症（ａｔ−ｉｉｉ欠乏症）の原因である。ＡＴ−ＩＩＩ欠乏症は、血栓形成傾向、罹患した個人が重篤な自発性血栓症に進行しやすい常染色体優性遺伝疾患である。ＡＴ−ＩＩＩ欠乏症は４つのタイプに分類される。Ｉ型は、抗原性及び機能レベルが５０％低下することにより特徴づけられる。ＩＩ型は、トロンビン結合ドメインに影響する欠損を有する。ＩＩＩ型は、ヘパリン結合ドメインの変化である。血漿ａｔ−ｉｉｉ抗原レベルはＩＩ型及びＩＩＩ型において正常である。ＩＶ型は、分類不可能な突然変異の種々のグループから成る。ＡＴ−ＩＩＩバーセル、ツール／アルジェ／アミアン／トヤマ、ルーアン−１、−２、−及び−Ａはヘパリン結合特性を減少した（あるいは欠如した）。Ａｔ−ｉｉｉハミルトン、グラスゴー／シェフィールド／シカゴ、ノースウィックパーク／ミラノ−１、ペスカラ、デンバー／ミラノ−２、及びユタは、阻害活性を奪われている。
【００４７】
アンチトロンビンＩＩＩは、「アンチトロンビンＩＩＩ関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００４８】
アンチトロンビンＩＩＩ関連疾患は、血液関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ欠乏症、血栓形成傾向、プロテインＳ欠乏症、活性型プロテインＣ抵抗性、播種性血管内凝固、血栓症、プロテインＣ欠乏症、静脈血栓症、家族性アンチトロンビンＩＩＩ欠乏症、血液凝固異常、血栓塞栓症、先天性フィブリノゲン異常症、下肢の深部静脈血栓症、動脈血栓症、出血、副腎皮質ホルモン過剰症、腸間膜静脈血栓症、子癇前症、脳血栓、電撃性紫斑病、肺塞栓症、ネフローゼ症候群、全身感染症、線維素可溶性欠損、抗リン脂質抗体症候群、脳静脈血栓症、第ＸＩＩ因子欠乏症、ヘルプ症候群、門脈血栓症、肺血栓塞栓症、多臓器不全、上矢状洞血栓症、静脈閉塞、術後出血、ホモシスチン尿、敗血症性ショック、脳静脈血栓症、血小板減少症、自発性血小板凝集疾患、腎静脈血栓症、静脈閉塞症、脳梗塞、妊娠中毒症、静脈炎後症候群、血小板増多、リベド血管炎、粥状動脈硬化、血小板機能異常症、肝中心静脈閉塞症、うっ滞、網膜静脈閉塞、急性前骨髄球性白血病、シュワルツマン反応、皮膚壊死、肝硬変、増大出血時間障害、スネドン症候群、真性多血症、紫斑病、子癇、血友病Ａ、敗血症症候群、レッグ・ペルテス病、心筋梗塞、脳血管発作、髄膜炎菌血症、遺伝性血液凝固異常、狭心症、縦隔線維症、血栓性静脈炎、循環器疾患、胎児発育遅延、肺静脈血栓症、高リポ蛋白血症、血管病、肝機能障害、肝静脈血栓症、急性心筋梗塞、腎症候群を伴う出血熱、梗塞、網膜中心静脈閉塞症、肝疾患、皮下血腫、ベーチェット病、急性リンパ性白血病、低プロトロンビン血症、腸間膜梗塞、蛋白尿、脳塞栓症、骨髄増殖性疾患、習慣性流産、播種性血管内凝固敗血症、血栓塞栓症、マールブルグウイルス感染症、エボラウイルス感染症又は熱傷血栓症から選択される。
【００４９】
好ましくは、血液関連障害は、貧血、組織球性症候群、鉄過剰関連障害、白血病、リンパ腫、骨髄増殖性疾患、形質細胞疾患、うっ血及び血液凝固異常、脾臓障害、血栓性障害、血小板異常、血管出血障害、白血球減少症、リンパ球減少症又はＡＩＤＳ−関連血液病及び悪性腫瘍から選択される。
【００５０】
アンチトロンビンＩＩＩに関係する薬剤を開発することは興味深い。例えば、Advantek Biologicsは、遺伝障害のためのアンチトロンビンＩＩＩペプチドを伴う薬剤を開発することを試みている。Aventis Behringは、播種性血管内凝固敗血症のためのアンチトロンビンＩＩＩペプチドの研究を中断した。Bayerは、血栓塞栓症のためのアンチトロンビンＩＩＩ薬剤について着手している。GTC Biotherapeuticsは、マールブルグウイルス感染症、エボラウイルス感染症及び熱傷血栓症のための遺伝子導入アンチトロンビンＩＩＩを仮登録している。Myriad Geneticsは、血栓症のためのＭＰＣ−１２０３（凝固阻害因子アンチトロンビンＩＩＩ）の開発を試みている。
【００５１】
補体因子Ｈ（１２３１個のアミノ酸；１３９１２５Ｄａ）は、補体活性化（ＲＣＡ）遺伝子クラスターの制御因子のメンバーであり、２０の短いコンセンサス反復（ＳＣＲ）ドメインを伴うタンパク質をコードする。異なるアイソフォームをコードする選択的転写スプライシング変異体が特徴づけられている。該タンパク質は、血流中に分泌され、そして補体活性化の制御において必須の役割を有し、微生物感染症に対してこの自然防御メカニズムを制限する。因子Ｈは、因子ＩによるＣ３ｂの不活性化における補助因子として機能し、そしてまた、補体第二経路におけるＣ３Ｂｂ複合体（Ｃ３転換酵素）及び（Ｃ３ｂ）ＮＢＢ複合体（Ｃ５転換酵素）の解離速度を増大する。該遺伝子中の突然変異は、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）及び慢性低補体血腎症に関係している。ＨＵＳは、歪んだ赤血球(「有棘赤血球」)を付随する微小血管症性溶血性貧血、血小板減少症、及び急性腎不全に導く微小血管障害である。遺伝の優性及び劣性型が共に報告されている。ＨＵＳの殆どのケースは、ベロ毒産生細菌により生じる下痢の流行に関係するが、ＨＵＳの否定形ケースは、下痢を伴わずに発生する（ａＨＵＳ）。補体因子Ｈは、膜増殖性糸球体腎炎及び因子Ｈ欠乏症に関係する。補体因子Ｈは、「補体因子Ｈ関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００５２】
補体因子Ｈ関連疾患は、尿毒症性症候群、血栓性血小板減少性紫斑病、溶血性尿毒症症候群、微小血管症性溶血性貧血、膜性増殖性糸球体腎炎、低補体血症、原発性高シュウ酸尿症、急性腎不全、血小板減少症、膀胱癌、溶血性貧血、抗リン脂質抗体症候群、溶血、全身性エリテマトーデス、炎症、悪性腫瘍、肝疾患、血栓症、肺悪性腫瘍、慢性低補体血腎症、補体因子Ｈ欠乏症又は年齢関連黄斑変性症から選択される。
【００５３】
アルブミン（ＡＬＢ；６０９個のアミノ酸；６９３６６Ｄａ）は、およそ半分の血清タンパク質を含んで成る可溶性の単量体タンパク質である。アルブミンは、ステロイド、脂肪酸及び甲状腺ホルモンの担体タンパク質として主に機能し、そして細胞外液量を安定化する役割を果たす（血液中のコロイド浸透圧の制御）。血清アルブミンは、水、Ｃａ（２＋）、Ｎａ（＋）、Ｋ（＋）、脂肪酸、ホルモン、ビリルビン及び薬物のための良好な結合能を有する。染色体４における該遺伝子中の突然変異は、多様な異常なタンパク質をもたらす。アルブミンは、新生タンパク質がラフ型小胞体から放出される前に除去されるＮ−末端ペプチドを有するプレプロアルブミンとして肝臓中で合成される。該産生物であるプロアルブミンは、ゴルジ小胞中で次々に切断され、分泌アルブミンを産生する。ＡＬＢにおける欠損は、家族性アルブミン異常過チロキシン血症（ｆｄｈ）の原因となる。ＦＤＨは、Ｔ（４）のためのＡＬＢの増大した親和性による甲状腺機能正常性過チロキシン血症である。これは、コーカサス人種における遺伝性甲状腺機能正常性過チロキシン血症の最も一般的な原因である。ＡＬＢ中の欠損は、高亜鉛血症の原因となりうる。アルブミンの多様な構造は、実際に、血中の亜鉛濃度の無症候性増大をもたらす亜鉛の増大した結合性に導きうる。アルブミンは「アルブミン関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００５４】
アルブミンに関連する薬物の開発に注目される。例えば、Mitsubishi Pharmaは、血液病、腎疾患及び創傷治癒血友病のための組換え血清アルブミンを仮登録している。Pharming Group NVは、出血性貧血のためのヒト血清アルブミンの開発を試みている。
【００５５】
「アルブミン関連疾患」は、微量アルブミン尿、アルブミン尿、糖尿病性腎症、低アルブミン血症、腎疾患、蛋白尿、インスリン依存性糖尿病、栄養障害、インスリン非依存性糖尿病、網膜症、ネフローゼ症候群、腹水症、慢性腎不全、低蛋白血症、腎不全、硬変、糖尿病、タンパク質・エネルギー栄養障害、肝硬変、肝腎症候群、本態性高血圧、クワシオルコル、循環器疾患、二峰性アルブミン血症、気管支肺胞洗浄液、卵巣過剰刺激症候群、高チロキシン血症、肝疾患、糖尿病性網膜症、炎症、蛋白喪失性腸症、血液量減少、細菌性腹膜炎、肝不全、糖尿病性微小血管症、肝肺症候群、慢性肝疾患、肝細胞の原発癌、尿毒症、浮腫、巣状分節性糸球体硬化症、核黄疸、重篤な低栄養症、リポイドネフローゼ、肝性脳症、消耗症、貧血、肝機能障害、末梢血管疾患、血液量増加症、自律神経ニューロパチー、高血圧性腎疾患、急性肝不全、糸球体硬化症、高血糖症、粥状動脈硬化、アルコール性肝硬変、環状浮腫、原発性胆汁性肝硬変、糸球体腎炎、肝線維症、腎機能異常、インスリン抵抗性、腹膜炎、ネフローゼ、低カルシウム血症、全身感染症、高ビリルビン血症、慢性糸球体腎炎、脂質代謝異常、代謝性アシドーシス、高ホモシステイン血症、左室肥大、動脈性高血圧症、糖尿病性糸球体硬化症、慢性肝炎、脳症、門脈圧亢進症、溶血、アレルギー性鼻炎、収縮期高血、肺水腫、低ナトリウム血症、低血圧、糖尿、冠疾患、高血圧性網膜症、高コレステロール血症、近位腎尿細管機能障害、低マグネシウム血症、アルコール性肝疾患、二次性副甲状腺機能亢進症、特発性膜性腎症、黄疸、無アルブミン血症、家族性アルブミン異常高チロキシン血症、高亜鉛血症、血液病、腎疾患、創傷治癒血友病、又は出血性貧血から選択される。
【００５６】
本明細書において使用される場合、「治療」の用語は、疾患形成、発達、進行の、あるいは疾患の徴候のいずれか一つ若しくはいくつかの、又は全ての、疾患形成、発達、進行の減弱、低下、又は部分的な、実質的な若しくは完全な予防又は妨害を包含する。
【００５７】
本明細書中の「ＩＮＳＰ０５２」の用語は、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又はＩＮＳＰ０５２核酸分子に関する。
【００５８】
「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」は：
配列番号２に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン１ポリペプチド」を意味する。配列番号４に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチド」を意味する。配列番号６に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン３ポリペプチド」を意味する。配列番号８に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン４ポリペプチド」を意味する。配列番号１０に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン５ポリペプチド」を意味する。配列番号１２に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン６ポリペプチド」を意味する。配列番号１４に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン７ポリペプチド」を意味する。配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２及び配列番号１４の組み合わせは、配列番号１６に示される配列を産生する。配列番号１６に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」を意味する。配列番号２０に示される配列を有するポリペプチドは、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインである。配列番号２２に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの細胞外ドメインを意味する。配列番号２４に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチドを意味する。配列番号２６に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドを意味する。配列番号２９に示される配列を有するポリペプチドは、以下、ヒスチジンタグ化、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインを意味する。配列番号３０に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインのＦｃ融合物を意味する。配列番号３１に示される配列を有するポリペプチドは、以下、ＩＮＳＰ０５２の断片を含有するＩｇドメイン（ＩＮＳＰ０５２Ｉｇ２）を意味する。配列番号３２に示される配列を有するポリペプチドは、以下、第１Ｉｇドメインが欠如している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１）を意味する。配列番号３３に示される配列を有するポリペプチドは、以下、第２Ｉｇドメインが欠如している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２）を意味する。本明細書における「可溶性ＩＮＳＰ０５２」又は「可溶性形態」は、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２及び／又は配列番号３３を意味する。
【００５９】
ある態様において、この態様に従うＩＮＳＰ０５２ポリペプチドは、配列番号１６（ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド）に示されるアミノ酸配列から成り、あるいはその断片又は官能性等価物である。他の態様において、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドは、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、又は配列番号１４のいずれか１つに示されるアミノ酸配列から成り、あるいはこれらの変異体である。
【００６０】
配列番号２０に示されるアミノ酸配列は、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインを示し、そして完全長タンパク質のアミノ酸１〜２４０に対応する。配列番号２２は、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインを表す。
【００６１】
ＷＯ０３／９３３１６に示されるとおり、該ＩＮＳＰ０５２完全長予測物は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属するＶＥＧＦ／ＰＤＧＦ受容体に関係する、４１６個のアミノ酸のＩ型膜タンパク質をコードする。推定上のシグナル配列は、ＩＮＳＰ０５２のアミノ酸１〜３３から成る。Ｉｇ様ドメインはアミノ酸４８〜１２４から成る。Ｉｇドメインはアミノ酸１６１〜２１６から成る。予想される膜貫通（ＴＭ）ドメインは、ＩＮＳＰ０５２のアミノ酸２４１〜２６３から成る。従って、ＩＮＳＰ０５２の成熟細胞外ドメインは、ＩＮＳＰ０５２のアミノ酸３４〜２４０から成る。この後者の配列は、配列番号４３４及び配列番号８８０として文献中に開示される２つの配列（ＷＯ０４／００９８３４；配列番号２７及び２８）に類似する。膜結合ＩＮＳＰ０５２の細胞内ドメインは、アミノ酸２６４〜４１６に対応する。
【００６２】
ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメイン及び／又は「可溶性形態」は、該ポリペプチド配列中のこれらの境界のＣ末端及び／又はＮ末端の付加的残基が、該ポリペプチド断片中に含まれる場合、正確に折りたたまれ、かつ生物活性を示すであろうことが強く推定される。ある態様において、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドは、Ｃ末端及び／又はＮ末端の付加的残基を含む。例えば、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド配列又は相同配列由来の付加的な５、１０、２０、３０、４０、５０又は１００ものアミノ酸残基は、正確に折りたたまれ、そして生物活性を示すというポリペプチド断片の能力を害することなく、受容体結合ドメインの境界のＣ末端及び／又はＮ末端のいずれか又は両方において含むことができる。１００又は２００残基ほどの大きさの伸展は、第２構造因子間の大きなループのために必須となりうる。
【００６３】
ある態様において、ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの切頭型変異体について、１又は数個のアミノ酸残基（例えば、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０又はそれ以上）が、生物活性を害することなく、該ドメインのＣ末端又はＮ末端のいずれか又は両方において欠失していてよい。
【００６４】
ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの好ましい切頭型変異体は、配列番号３１に示される配列を有する、ＩＮＳＰ０５２の断片を含有するＩｇドメイン（ＩＮＳＰ０５２Ｉｇ２）であってよい。
【００６５】
ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの好ましい切頭型変異体は、配列番号３２に示される配列を有する、第１Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１）であってよい。
【００６６】
ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの好ましい切頭型変異体は、配列番号３３に示される配列を有する、第２Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２）であってよい。
【００６７】
以下に議論されるとおり、ある態様において、本発明のポリペプチドは、融合タンパク質又は「自立（free-standing)」タンパク質の形態において供されることができる。従って、本発明のある態様は、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインから成るポリペプチドを供する。本発明の他の態様は、融合タンパク質を形成するための少なくとも１つの他のポリペプチドと融合したＩＮＳＰ０５２から成るポリペプチド（成熟体及び切頭型変異体を含む、完全長タンパク質又はその細胞外ドメイン）を供する。
【００６８】
「ＩＮＳＰ０５２核酸分子」は、配列番号１（ＩＮＳＰ０５２エクソン１ポリペプチドをコードする）、配列番号３（ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチドをコードする）、配列番号５（ＩＮＳＰ０５２エクソン３ポリペプチドをコードする）、配列番号７（ＩＮＳＰ０５２エクソン４ポリペプチドをコードする）、配列番号９（ＩＮＳＰ０５２エクソン５ポリペプチドをコードする）、配列番号１１（ＩＮＳＰ０５２エクソン６ポリペプチドをコードする）、配列番号１３（ＩＮＳＰ０５２エクソン７ポリペプチドをコードする）、配列番号１５（ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドをコードする）、配列番号１７（マウスバーチャルＩＮＳＰ０５５ポリペプチドをコードする）、配列番号１９（ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの細胞外ドメインをコードする）、配列番号２１（ＩＮＳＰ０５２成熟ポリペプチドの細胞外ドメインをコードする）、配列番号２３（成熟ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチドをコードする）、配列番号２５（成熟ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドをコードする）を含んで成る又はこれらから成る核酸、あるいはこれらの配列のいずれか１つの重複等価物又は断片を意味することができる。
【００６９】
配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１及び配列番号１３に示される配列の組み合わせは、配列番号１５に示される配列を産生する。
【００７０】
配列番号２３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１及び配列番号１３に示される配列の組み合わせは、配列番号２５に示される配列を産生する。
【００７１】
本発明のある態様において、該核酸分子は、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメイン（配列番号２０）を含んで成る、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。好ましくは、該核酸分子は、配列番号１９に記載される核酸配列を含んで成るか、あるいはこれから成る。これらの配列はＣ末端に付加されるヒスチジン残基を含むが、これは同時係属特許出願ＷＯ０３／０９３３１６の図７にも記載されている。
【００７２】
本発明のある態様において、該核酸分子は、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメイン（配列番号２２）を含んで成るか、又はこれから成るポリペプチドをコードする。好ましくは、該核酸分子は、配列番号２１に記載される核酸配列を含んで成るか、あるいはこれから成る。これらの配列はＣ末端に付加されるヒスチジン残基を含むが、これは同時係属特許出願ＷＯ０３／０９３３１６の図７にも記載されている。
【００７３】
本発明のある態様において、該核酸分子は、ＩＮＳＰ０５２の断片を含有するＩＧ−ドメイン（配列番号３１）である、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインの変異体を含んで成るか、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。
【００７４】
本発明の態様において、該核酸分子は、配列番号３２に示される配列を有する、第１Ｉｇドメインを欠失する細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１）である、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインの変異体を含んで成る、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。
【００７５】
本発明のある態様において、該核酸分子は、配列番号３３に示される配列を有する、第２Ｉｇドメインを欠失する細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２）である、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインの変異体を含んで成る、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。
【００７６】
ある態様において、「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」の用語は、付随の配列表の配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、又は配列番号３６（配列番号１８を除き全てヒト）の配列の全て又は一部を含んで成るタンパク質、並びにこれらの塩、アイソフォーム、ムテイン、活性画分、官能性誘導体及び円順列変異誘導体に関することができる。ある態様において、ヒト以外の種、例えば、マウス（例えば、配列番号１８）又はラット由来のＩＮＳＰ０５２は、ヒトにおいて実質的な免疫応答を誘発することなく、生物活性を示すタンパク質を許容するようにタンパク質間に十分な同一性が存在する限り、本発明に従い使用することができる。
【００７７】
ある態様において、「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」の用語は、更に、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患において所望の活性を示す、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、又は配列番号３６（配列番号１８を除き全てヒト）のいずれかの断片、部分、ドメイン又はサブドメインに関する。ある態様において、タンパク質断片、アイソフォーム、特異的グリコシル化又はシリル化形態、あるいは該タンパク質の１又は複数のドメインは、これらが、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患のいずれかの有利な効果、好ましくは少なくとも、完全長タンパク質と比較可能である効果を示す限り、本発明に従い使用することができる。この有利な効果は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患における効果を示すために、適切な文献中に記載されているin vitro又はin vivo試験のいずれかにおいて測定することができる。ＩＮＳＰ０５２の生物活性は、例えば、ナイセリア種の感染を低下するため、又は血液凝固若しくは血小板凝集を予防するため、又は血管の拡張若しくは狭窄において作用するため、又は血圧、血液凝固、体液貯留、オプソニン作用、補体活性若しくは浸透圧を調整するためのその能力においてＩＮＳＰ０５２をアッセイすることにより測定することができる。
【００７８】
ある態様において、ＩＮＳＰ０５２は自然発生、すなわち未変性タンパク質、又は組換えタンパク質であってよい。組換え産生は、真核生物細胞、例えば、酵母細胞又は哺乳類細胞、好ましくはＣＨＯ細胞、ＨＥＫ細胞（ヒト胎児腎臓細胞）、又はヒト線維芽細胞若しくは株化細胞中で行うことができる。これは更に、原核生物細胞、例えば、大腸菌（E.coli)において産生されることができる。
【００７９】
好ましくは、ＩＮＳＰ０５２は、１又は複数の部位でグリコシル化されている。これはまた、与えられた必要性及び該タンパク質の産生又は単離の起源に依存して非グリコシル化としてもよい。
【００８０】
好ましくは、本発明のポリペプチドは、配列番号２２の残基２、７１、１０５、１３４、１３９及び／又は１５６においてグリコシル化されている（残基の番号付けのための参考として配列番号２２が用いられる）。
【００８１】
本明細書における「塩」の用語は、ＩＮＳＰ０５２分子又はその類似体のカルボキシル基の塩及びアミノ基の酸付加塩の両方を意味する。カルボキシル基の塩は、当業者に既知の手段により形成することができ、無機塩、例えば、ナトリウム、カルシウム、アンモニウム、三価鉄又は亜鉛塩等、及び有機塩基を伴う塩、例えば、アミン、例えば、トリエタノールアミン、アルギニン又はリジン、ピペリジン、プロカイン等により形成されるものを含む。酸付加塩は、例えば、鉱酸、例えば、塩酸又は硫酸を伴う塩、及び有機酸、例えば、酢酸又はシュウ酸を伴う塩を含む。当然に、いずれのこのような塩も、本発明に関するＩＮＳＰ０５２の生物活性を維持すること、すなわち感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患において有利な効果を発揮する必要がある。
【００８２】
ある態様において、ＩＮＳＰ０５２のアイソフォーム又はスプライス変異体もまた、これら疾患進行及び／又は疾患の症状を阻害することができる限り、使用することができる。
【００８３】
ある態様において、「ムテイン」の用語は、天然ＩＮＳＰ０５２の１又は複数のアミノ酸残基が異なるアミノ酸残基により置換された、付加された、あるいは欠失された、好ましくは少なくとも野生型ＩＮＳＰ０５２と同程度の活性を有するか、あるいはより強力な活性を有するＩＮＳＰ０５２の類似体を意味する。ＩＮＳＰ０５２の生物活性は、例えば、ＩＮＳＰ０５２を、例えば、ナイセリア種の感染を低下させる能力、又は血液凝固若しくは血小板凝集を予防する能力、又は血管の拡張若しくは狭窄に作用する能力、又は血圧、血液凝固、体液貯蔵、オプソニン作用、補体活性化若しくは浸透圧を調節する能力についてアッセイすることにより測定することができる。タンパク質間の相互作用を評価するためのアッセイは当業界に周知である。このようなアッセイの例は、ＥＬＩＳＡ結合アッセイ、免疫沈降アッセイ、又は他の適当なシステム、例えば、ＢＩＡコアシステムにおける測定である。これらのムテインは、既知の合成法、及び／又は部位特異的変異原性技術、又はそのために適当ないずれかの他の技術により調製することができる。
【００８４】
好ましくは、このようなムテインは、配列番号２２と十分に重複したアミノ酸の配列、例えば、少なくとも実質的に配列番号２２と同様の活性を有するような配列を有する。ＩＮＳＰ０５２突然変異体の活性は、更に、例えば、ナイセリア種の感染を低下させる能力、又は血液凝固若しくは血小板凝集を予防する能力、又は血管の拡張若しくは狭窄に作用する能力、又は血圧、血液凝固、体液貯蔵、オプソニン作用、補体活性化若しくは浸透圧を調節する能力においてＩＮＳＰ０５２をアッセイすることにより試験することができる。
【００８５】
ある態様において、本発明に従うムテインは、本発明に従い、ストリンジェントな条件下で、ＩＮＳＰ０５２をコードするＤＮＡ又はＲＮＡとハイブリダイズする核酸、例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡによりコードされるタンパク質を含む。「ストリンジェント条件」という用語は、ハイブリダイズ条件及びこれに続く洗浄条件を意味し、これらの条件を当業者は慣習的に「ストリンジェント」と呼ぶ。Ausubel他、Current Protocols in Molecular Biology(上述), Interscience, N.Y., §§6.3及び6.4(1987, 1992)、及びSambrook他(Sambrook, J. C., Fritsch, E. F., 及びManiatis, T.(1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY)を参照されたい。
【００８６】
制限はないが、ストリンジェント条件の例は、例えば５分間にわたって２×ＳＳＣ及び０．５％ＳＤＳ中で、１５分間にわたって２×ＳＳＣ及び０．１％ＳＤＳ中で、３０〜６０分間にわたって３７℃で０．１×ＳＳＣ及び０．５％ＳＤＳ中で、次いで３０〜６０分間にわたって６８℃で０．１×ＳＳＣ及び０．５％ＳＤＳ中で、研究中のハイブリッドの計算上のＴｍを１２〜２０℃下回る温度で洗浄する洗浄条件を含む。当業者には明らかなように、ストリンジェント条件がＤＮＡ配列、オリゴヌクレオチド・プローブ（１０〜４０塩基）又は混合型オリゴヌクレオチド・プローブの長さにも依存する。混合型プローブが使用される場合、ＳＳＣの代わりに塩化テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）を使用することが好ましい。上述のAusubelを参照されたい。
【００８７】
いずれのこのようなムテインも、配列番号２２と実質的に同様の、あるいはより良好な生物活性を有するように、配列番号２２の配列と十分に重複するアミノ酸配列を有する。
【００８８】
好ましい態様において、いずれかのこのようなムテインは、配列番号１６の配列と少なくとも４０％の同一性又は相同性を有する。より好ましくは、これは、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は最も好ましくは、少なくとも９０％のその同一性又は相同性を有する。
【００８９】
同一性は、２又はそれ以上のポリペプチド配列間、あるいは２又はそれ以上のポリヌクレオチド配列間のこれらの配列を比較することにより決定される関係を反映する。一般に、同一性は、比較される配列の全長にわたる、２つのポリヌクレオチド配列又は２つのポリペプチド配列のそれぞれの正確なヌクレオチド間又はアミノ酸間の一致を意味する。
【００９０】
正確な一致が存在しない場合の配列のために、「％同一性」が決定される。一般的に比較する２つの配列を整列させ、配列間の最大相関を与える。これは、片方又は両方の配列中に「ギャップ」を挿入することを含み、アライメントの程度を増強する。％同一性は、比較される各配列の全長（いわゆるグローバルアライメント）にわたり決定することができ、これは同じ又は極めて近似した長さの配列に特に有用であり、あるいはより短く定義された長さ（いわゆるローカルアライメント）にわたり決定することができ、これは異なる長さの配列により適当である。
【００９１】
２又は複数の配列の同一性又は相同性を比較する方法は、当業界において周知である。従って、例えば、ウィスコンシン配列分析パッケージ（Wisconsin Sequence Analysis Package）、バージョン９．１において入手可能なプログラム(Devereux et al., 1984)、例えば、プログラムＢＥＳＴＦＩＴ及びＧＡＰを２つのポリヌクレオチド間の％同一性及び、２つのポリペプチド配列間の％同一性及び％相同性を決定するために使用することができる。ＢＥＳＴＦＩＴは、ＳｍｉｔｈとＷａｔｅｒｍａｎの「ローカルホモロジー」アルゴリズムを使用し(Smith and Waterman, 1981)、そして、２つの配列間の類似性の最良な単一領域を発見する。配列間の同一性及び／又は類似性を決定するための他のプログラムもまた、当業界において既知であり、例えば、プログラムのＢＬＡＳＴファミリー(Altschul et al., 1990; Altschul et al., 1997、www. ncbi. nlm. nih. gov においてＮＣＢＩのホームページを介して構築される)、及びＦＡＳＴＡ（Pearson, 1990 ; Pearson and Lipman, 1988)がある。
【００９２】
本発明に従い使用することができるＩＮＳＰ０５２のムテイン、又はこれらをコードする核酸は、過剰な実験をすることなく、本明細書に供される技術及びガイドラインに基づき、当業者により慣習的に得ることができる置換ペプチド又はポリヌクレオチドとして実質的に対応する配列の有限のセットを含む。
【００９３】
本発明に関するムテインの好ましい変化は、「保存的な」置換として知られる。ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又はタンパク質の保存的なアミノ酸置換は、グループのメンバー間の置換基が分子の生物活性を保存するであろう、十分に類似する物理化学的な特徴を有する群における同義アミノ酸を含んでよい(Grantham, 1974)。また、アミノ酸の挿入及び欠失は、特に、当該挿入又は欠失が少数、例えば、３０以下、そして好ましくは１０以下のアミノ酸のみを含み、そして、機能的構造に重大なアミノ酸、例えば、システイン残基を除去又は置換しない場合、これらの機能を変化することなく上に定義した配列において作製することができる。このような欠失、及び／又は挿入により産出されたタンパク質及びムテインは、本発明の範囲内である。
【００９４】
好ましくは、該同義アミノ酸グループは表Ｉに定義されるものである。より好ましくは該同義アミノ酸グループは、表ＩＩに定義されるものであり；そして最も好ましくは、該同義アミノ酸グループは、表ＩＩＩに定義されるものである。
【００９５】
【表１】
【００９６】
【表２】
【００９７】
【表３】
【００９８】
本発明の使用のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又はタンパク質のムテインを得るために使用することができるタンパク質中のアミノ酸置換の産生の例は、いずれかの既知の方法、例えば、Markらによる米国特許第第4,959, 314号、第4, 588, 585号及び第4, 737,462号; Koths らによる第5,116, 943 号；Namen らによる第4,965, 195号；及びLeeらによる第5,017, 691号において供され、そしてリジン置換タンパク質は米国特許第4,904, 584号(Shaw ら)において供される。
【００９９】
「融合タンパク質」の用語は、他のタンパク質と融合されたＩＮＳＰ０５２、又はそのムテインを含んで成るポリペプチドを意味する。この他のタンパク質は、例えば体液中の滞留時間が長い。例えばヒトの体内の半減期のような分子の生体活性を改善することができるタンパク質の全て又は官能性部分に融合されたＩＮＳＰ０５２の全て又は官能性部分を含む融合タンパク質が、本発明において好ましい。好ましい態様において、融合タンパク質は、免疫グロブリン（Ｉｇ）融合を含む。免疫グロブリンの全て又は一部に融合されたＩＮＳＰ０５２の全て又は一部を含む融合タンパク質が、極めて好ましい。これらは、単量体又は多量体、ヘテロ又はホモ多量体であってよい。有利には、融合タンパク質は免疫グロブリンの定常領域、具体的には免疫グロブリンのＦｃ部分を含んで成る。免疫グロブリンがＩｇＧ１又はＩｇＧ２イソ型である態様が、本発明に従いさらに好ましい。好ましくは、融合はＦｃ融合である。好ましくは、融合タンパク質は配列番号３０から成る。
【０１００】
このように、ＩＮＳＰ０５２は、他のタンパク質、ポリペプチドなど、例えば、免疫グロブリン又はその断片に融合することができる。融合は直接的であるか、又は１〜３アミノ酸残基長又はそれ以上という短さであってよい短リンカー・ペプチド、例えば１３アミノ酸残基長を介して形成することができる。前記リンカーは、例えば、配列Ｅ−Ｆ−Ｍ（Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｍｅｔ）のトリペプチド、又はＩＮＳＰ０５２配列と免疫グロブリン配列との間に導入されたＧｌｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｍｅｔを含む１３アミノ酸リンカー配列であってよい。
【０１０１】
本明細書中に使用される「官能性誘導体」は、ＩＮＳＰ０５２の誘導体、及びこれらのムテイン及び融合タンパク質を網羅する。これらは当業界に知られた手段によって、残基又はＮ−又はＣ−末端基上の側鎖として生じる官能基から調製することができ、そしてこれらが医薬的に許容されるままである限り、すなわち、配列番号２２の活性と少なくとも実質的に同様のタンパク質の活性を破壊することがなく、そしてこの活性を含有する組成物に毒性を与えることがない限り、本発明に含まれる。従って、好ましい態様において、官能性誘導体は、アミノ酸残基上の１又は複数の側鎖として発生する１又は複数の官能基に結合された少なくとも１つの部分を含んで成る。
【０１０２】
本発明に従い、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）側鎖は、極めて好ましい部分である。ＰＥＧ側鎖は抗原部位をマスキングし、そして体液中でＰＥＧ側鎖が結合された物質の残留時間を延長することができる。その他の誘導体は、カルボキシル基の脂肪族エステル、アンモニア又は第１級若しくは第２級アミンとの反応によるカルボキシル基のアミド、アシル部分（例えば、アルカノイル又は炭素環式アロイル基）とともに形成されたアミノ酸残基の遊離アミノ基のＮ−アシル誘導体、又はアシル部分とともに形成された遊離ヒドロキシル基（例えば、セリル又はトレオニル残基）のＯ−アシル誘導体を含む。
【０１０３】
ＩＮＳＰ０５２及びそのムテイン及び融合タンパク質の「活性画分」は、タンパク質分子のポリペプチド鎖の断片又は前駆体の単独の状態、又は関連分子又は残基、例えば糖又はリン酸塩残基との連結状態、あるいはタンパク質部分又は糖残基単独の凝集体を網羅するが、前記活性画分は配列番号２２と少なくとも実質的に同様の活性を有するものとする。
【０１０４】
本発明によれば、ＩＮＳＰ０５２は、前記核酸分子を含むベクターの形態でヒトの身体に投与することもできる。従って、本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤を製造するための、前記核酸分子を含んで成るベクターの使用に関する。好ましくは、該ベクターは、ＩＮＳＰ０５２のコード配列の全て又は部分に作動可能的に連結されたプロモーターを含む、発現ベクターである。さらに好ましい態様において、該ベクターは遺伝子治療ベクターである。遺伝子治療ベクターは、当業界において既知であり、その大半は、ウイルス由来のベクター、例えばアデノウイルス又はレンチウイルス・ベクターである。
【０１０５】
本発明に従い、ＩＮＳＰ０５２は、ＩＮＳＰ０５２を産生及び／又は分泌する細胞の形態で、ヒトの身体に投与することもできる。従って、本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の製造のためのＩＮＳＰ０５２発現細胞の使用に関し、すなわち、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び／又は予防するための細胞療法に関する。該細胞は、ＩＮＳＰ０５２自然産生細胞、及び／又は組換えＩＮＳＰ０５２を産生するトランスフェクト型細胞であってよい。好ましいものは、多量のタンパク質を発現させ分泌する細胞、例えば、ＩＮＳＰ０５２をコードする核酸分子を含んで成る発現ベクターの多数のコピーを担持する過剰発現細胞である。
【０１０６】
本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び／又は予防するための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２の全て又は一部をコードする核酸分子を含んで成るベクターを含んで成る細胞に関する。本発明によるポリペプチドを産生するために遺伝子改変された細胞もまた、本発明の範囲に含まれる。
【０１０７】
通常はサイレントであるか、あるいは十分でない量の阻害因子を発現させる細胞中においてＩＮＳＰ０５２の内在的産生を誘発及び/又は促進するための発現ベクターの使用もまた、本発明に関して考慮される。従って、本発明は、所望のタンパク質を産生するための内在的遺伝子活性化（ＥＧＡ）として知られる技術を利用する。
【０１０８】
本発明に従い、ＩＮＳＰ０５２は、単独で、あるいは、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び／又は予防するための相加的又は相乗的な効果を得るために、いくつかのほかの治療法又は薬剤との組み合わせ（例えば、多剤療法）において投与することができる。従って、好ましくは、本発明の薬剤はさらに；
・ インターフェロン、特にインターフェロン−α、インターフェロン−β、又はインターフェロン−γ、あるいは
・ 腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト、特に可溶性ＴＮＦＲ、例えば可溶性ｐ５５（ＴＢＰＩ）及び／又は可溶性ｐ７５（ＴＢＰＩＩ）、あるいは
・ 抗感染症剤、あるいは
・ 抗血液凝固剤、を含んで成る。
【０１０９】
前記抗血液凝固剤は、ニトレート、ニトログリセリン、イソソルビド、ジニトレート、イソソルビドモノニトレート、ビタミンＣ又はＥ、β−ブロッカー、プロプラノロール（インデラル、シプラー）、ラベタロール（ノルマデート）、アセブトロール（セクトラル）、アテノロール（アテン、テノルミン、ベタカルド、テンシミン）、メトプロロール（ベタロック、メトラル）、ビソプロロール（コンコール）、カルベジロール（カルベジル、カルロック、カルビル）、抗凝固薬、ヘパリン、ワルファリン、抗血小板薬、アスピリン、糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体アンタゴニスト、クロピドグレル、ＮＳＡＩＤ、エノキサパリン（クレキサン）、ダルテパリン（フラグミン）、レビパリン（クリバリン）、アブシキシマブ（レオプロ、セントコール）、エプチフィバチド、ラミフィバン、チロフィバン、アブシキシマブ、クロピドグレルデプラット、クロピレット）、チクロピジン（チクリド、チクロップ）、ヒルジン、ビバリルジン、アルガトロバン、ダナパロイド、スタチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害因子、ラミプリル（カルデース）、カプトプリル（カポトリル、アセテン）、エナラプリル（エンバス、バソノルム）、リシノプリル（プレベース、リプリル、ゼストリル）、ホシノプリル、カルシウムチャネルブロッカー、ベラパミル（カラン、イソプチン）、ニフェジピン（アダラット、デピン）、ニカルジピン（カルデン）、アムロジピン（アムデピン、カルバジル）、ジルチアゼム（カルジゼム、ジルゼム）、ベプリジル（バスコール）、ラノラジン、ニコランジル、抗生物質、テトラサイクリン、キノロン、葉酸、血栓溶解薬、組換え組織プラスミノーゲン活性化因子（ｒｔ−Ｐａｓ）、アルテプラーゼ（アクティバーゼ及びレテプラーゼ（レトバーセ））、フィブリン−依存薬、アンクロッド、バトロキソビン（デフィブラーゼ）、チエノピリジン、クロピドグレル（プラビックス）、チクロピジン（チクリド）、チエノピリジン（クロピドグレル）、直接トロンビン阻害因子（ＤＴＩ）、ヒルジン、アルガトロバン（ノバスタン）、ビバリルジン（アンジオマックス）、ダナプロイド（オルガラン）、レピルジン（レフルダン）、デシルジン（レバスク）、イノガトラン、エフェガトラン、キシメラガトラン（エクサンタ）、抗線溶薬、トラネキサム酸、又はεアミノ−カプロン酸から成る群から選択される。
【０１１０】
抗感染症剤は、ペンタミジン、抗生物質、コリスチン、アミノグリコシド又はアンホテリシンＢから選択することができる。
【０１１１】
全ての治療は、同時、順次、又は別々の使用が意図される。
【０１１２】
ＩＮＳＰ０５２と一緒に、１又は複数の上記物質を含んで成る医薬組成物は、本発明の範囲内である。
【０１１３】
本発明のさらなる態様において、ＩＮＳＰ０５２は、インターフェロンとの組み合わせにおいて使用される。好ましくは、該インターフェロンは、インターフェロン−α、インターフェロン−β、又はインターフェロン−γから選択される。インターフェロンは、また、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患と関係している。例えば、インターフェロン−αは、好中球減少症、血小板減少症、Ｃ型肝炎、又はＢ型肝炎に関係している。例えば、インターフェロン−βは、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ウイルス疾患、ＨＩＶ感染症及びインフルエンザに関係している。例えば、インターフェロン−γは、結核、ウイルス疾患、内蔵又は皮膚リーシュマニア症、ＨＩＶ感染症、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフルエンザ、糖尿病、マラリア、細菌感染症、抗酸菌症及びフィラリア性象皮病に関係している。
【０１１４】
本発明のよりさらなる態様において、ＩＮＳＰ０５２は、ＴＮＦアンタゴニストとの組み合わせにおいて使用される。ＴＮＦアンタゴニストは、いくつかの方法においてこれらの活性を発揮する。第１に、アンタゴニストは、十分な親和性及び特異性を持ってＴＮＦ分子自体に結合するか又はこれを封鎖することにより、ＴＮＦ受容体結合に関与するＴＮＦエピトープを部分的又は実質的に中和することができる（以降「封鎖アンタゴニストと呼ぶ）。封鎖アンタゴニストは、例えば、ＴＮＦに対する抗体であってよい。例えば、ＴＮＦ−αは、ウイルス疾患、マラリア、敗血症性ショック、細菌感染症、抗酸菌症、細菌性髄膜炎、ＨＩＶ感染症及び結核に関係している。
【０１１５】
あるいは、ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦ結合後の細胞表面受容体によって活性化されたＴＮＦシグナル伝達経路を阻害することもできる（以降シグナル伝達アンタゴニストと呼ぶ）。ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦが増殖及び免疫グロブリン分泌を引き起こすin vitroの感受性細胞系、例えばヒトＢ細胞上の天然型ＴＮＦの活性に対するＴＮＦアンタゴニストの効果に関して候補物質に慣習的なスクリーニングを施すことによって容易に同定され、そして評価される。アッセイは、候補アンタゴニストを種々に希釈した、例えば、アッセイにおいて使用されるＴＮＦのモル量の０．１〜１００倍に希釈したＴＮＦ配合物、及びＴＮＦを含まないか又はアンタゴニストしか含まない対照を含有する(Tucci他、1992)。
【０１１６】
封鎖アンタゴニストは、本発明に従って使用されるのに好ましいＴＮＦアンタゴニストである。封鎖アンタゴニストの中でも、高い親和性を持ってＴＮＦと結合し、そして免疫原性が低いポリペプチドが好ましい。可溶性ＴＮＦ受容体分子、及びＴＮＦに対する中和抗体が特に好ましい。例えば、ＴＮＦ−ＲＩ（ｐ５５）及びＴＮＦ−ＲＩＩ（ｐ７５）の可溶性形態が本発明において有用である。受容体の細胞外ドメイン又は受容体の官能性部分を含む、これらの受容体の切頭型形態が、本発明に基づいて、より具体的に好ましいアンタゴニストである。切頭型可溶性ＴＮＦのＩ型及びＩＩ型受容体が例えば欧州特許第914431号明細書に記載されている。
【０１１７】
ＴＮＦ受容体の切頭形態は可溶性であり、そして約３０ｋＤａ又は４０ｋＤａのＴＮＦ阻害結合タンパク質として尿及び血清中に検出されている。これらのタンパク質はそれぞれＴＢＰＩ及びＴＢＰＩＩと呼ばれる（Engelmann他、1990）。ＴＮＦアンタゴニスト及び／又はインターフェロンと同時に、又は順次に、又は別々にＩＮＳＰ０５２を使用することが本発明において好ましい。
【０１１８】
本発明従い、ＴＢＰＩ及びＴＢＰＩＩは、ＩＮＳＰ０５２との組み合わせで使用される好ましいＴＮＦアンタゴニストである。該受容体分子の誘導体、断片、領域及び生体活性部分は、本発明に使用することもできる受容体分子と機能上類似している。受容体分子のこのような生体活性の等価物又は誘導体は、受容体分子をコードするポリペプチド又は配列の部分であって、十分なサイズを有し、そして、膜結合型ＴＮＦ受容体との相互作用が阻害又は遮蔽されるような親和性を伴いＴＮＦに結合できるものを意味する。
【０１１９】
更に好ましい態様において、ヒト可溶性ＴＮＦ−ＲＩ（ＴＢＰＩ）は、本発明に従って使用されるＴＮＦアンタゴニストである。天然型及び組換え型の可溶性ＴＮＦ受容体分子、及びこれらの生成方法は、欧州特許第308 378号、同第398,327号及び同第433,900号明細書に記載されている。
【０１２０】
疾患の初期段階にＴＮＦ−αを遮蔽することが有益な場合がある一方、より後の段階において、ＴＮＦ自体が疾患の進行において有益な効果を発揮し得ることが論じられている(Abraham他、2000)。従って、本発明はさらに、特に疾患の進行段階における、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療又は予防のためのＩＮＳＰ０５２及びＴＮＦの組み合わせに関する。本発明に従い、ＴＮＦ−α又はＴＮＦ−βを使用することができる。
【０１２１】
本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための、任意に１又は複数の医薬的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤と一緒に、ＩＮＳＰ０５２を含んで成る医薬組成物に関する。該医薬組成物はさらに、上述のいずれかのさらなる成分、及び好ましくはインターフェロンを含んでよい。
【０１２２】
本発明の医薬組成物は、本発明に従う核酸分子を含んで成るベクター、又はＩＮＳＰ０５２を発現させる細胞を含んで成ってよい。
【０１２３】
この薬剤の活性成分、すなわち本発明に従うポリペプチド、核酸又は細胞、又はこれらの組み合わせ、並びに上述の物質の組み合わせは、種々の方法で個体に投与することができる。投与経路は、皮膚内、経皮（例えば徐放性配合物）、筋内、腹腔内、静脈内、皮下、経口、硬膜外、局所及び鼻腔内経路を含む。任意のその他の治療上効果的な投与経路、例えば上皮組織又は内皮組織を通した吸収、又は遺伝子治療を用いることもできる。遺伝子治療の場合、活性物質をコードするＤＮＡ分子が患者に投与され（例えばベクターを介して）、これにより、活性物質はin vivoで発現し、そして分泌される。加えて、本発明に従うタンパク質は、生体活性物質、例えば、医薬的に許容される界面活性剤、賦形剤、担体、希釈剤及びビヒクルの他の成分と一緒に投与することができる。
【０１２４】
「医薬的に許容される」という用語の定義は、活性成分の生体活性の効果を妨害することがなく、また投与される宿主に対して毒性でない、いずれかの担体を包含するものとする。例えば、非経口投与の場合、活性タンパク質は、ビヒクル、例えば、生理食塩水、デキストロース溶液、血清アルブミン及びリンゲル溶液中の注射用投与形態において調製することができる。
【０１２５】
非経口（例えば静脈、皮下、筋内）投与の場合、活性タンパク質は、医薬的に許容される非経口用ビヒクル（例えば、水、生理食塩水、デキストロース溶液）、及び等張性（例えば、マンニトール）又は化学安定性（例えば、保存剤及び緩衝液）を維持する添加剤とともに、溶液、懸濁液、エマルジョン又は凍結乾燥粉末として調製することができる。この配合物は、慣習的に使用される技術によって滅菌される。
【０１２６】
本発明に従う活性タンパク質の生物学的利用率は、ヒトの体内の分子の半減期を増大させる複雑な手順を用いることにより、例えば国際公開第92/13095号公報に記載されているようにポリエチレングリコールに分子を連結することによって改善することができる。
【０１２７】
該活性タンパク質の治療上有効な量は、受容体のタイプ、本発明の物質のその受容体に対する親和性、これにより示される任意の滞留細胞毒性の活性、投与経路、患者の臨床的状態を含む、多くの変数の関数となる。
【０１２８】
「治療上有効な量」は、投与した場合、本発明に従う物質がin vivoの疾患の発生又は進行に対して有益な効果をもたらすような量である。単回投与量又は複数回投与量として個体に投与される量は、ＩＮＳＰ０５２の薬物動態特性、投与経路、患者の状態及び特徴（性別、年齢、体重、健康状態、大きさ）、症状の程度、併用治療、治療頻度及び所望の効果を含む、種々の因子に応じて変化することになる。確立された投与量範囲は当業者の能力の範囲内で調節され操作される。
【０１２９】
本発明に従うポリペプチドの所要の投与量は、約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、又は約０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１〜５ｍｇ／ｋｇ、又は約１〜３ｍｇ／ｋｇであるが、上述のように投与量は、多くの部分が治療時の判断に委ねられる。本発明の薬剤は毎日、隔日又は週に３回投与することができる。
【０１３０】
一日投与量は通常、所望の結果を得るのに効果的な複数回に分けられた形態、又は徐放性形態で与えられる。２回目又はそれ以降の投与は、個体への最初又は前回の投与量と同じ量、又はこれよりも少ない量、又はこれよりも多い量の投与量で行うことができる。２回目又はそれ以降の投与は、疾患の発症中又は発症前に投与することができる。
【０１３１】
本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び/又は予防するための方法であって、治療及び/又は予防を必要とする患者に、本発明に従う有効量の物質を、任意には医薬的に許容される担体と一緒に投与することを含む方法に関する。あるいは、または、これに加えて、任意に発現ベクター内に含まれるＩＮＳＰ０５２又は本発明の核酸分子を産生する細胞を、本発明に従い投与することができる。
【０１３２】
該発現ベクターは、全身投与することができる。好ましくは、該発現ベクターは、筋内注射によって投与される。特に。肺が疾患（例えば、肺の感染症）に関与する場合、さらに好ましい投与経路は吸入である。特に皮膚が関与する場合、ＩＮＳＰ０５２配列を含む発現ベクター、又は本発明に従うＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの局所投与が、さらに好ましい投与経路である。
【０１３３】
本発明はさらに、有効量のＩＮＳＰ０５２と医薬的に許容される担体とを混和することを含む医薬組成物の製造方法、及び有効量のＩＮＳＰ０５２を、当該治療及び/又は予防を必要とする宿主に投与することを含む、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び/又は予防方法に関する。
【０１３４】
学術論文又は概要、公開済又は未公開の特許出願明細書、発行済特許明細書又はその他の参考文献を含む、本発明中に引用された全ての参考文献全体を、参考文献に提供された全てのデータ、表、図面及び本文を含めて、参考のため本明細書中に引用する。加えて、本明細書中に引用された参考文献中に引用された文献の内容全体も、参考のため本明細書中に組み込まれる。
【０１３５】
周知の方法工程、慣習的な方法工程、周知の方法又は慣習的な方法に言及しても、このことは、本発明の特徴、説明又は実施態様が従来技術において開示、教示又は示唆されることの承認には決してならない。
【０１３６】
具体的な実施態様の前記説明により、本発明の全般的な性質が完全に明らかになるので、他者が当業者の知識を応用することによって（本明細書中に引用した参考文献の内容を含む）、本発明の全般的な概念を逸脱することなしに、不必要な試験を行うことなく、このような具体的な実施態様を種々の用途のために容易に変更及び/又は改変することが可能である。従ってこのような改変及び/又は変更は、その意味において、本明細書中に提供された教示及び指針に基づいた、開示された実施態様の等価物の範囲であるものとする。言うまでもなく、本明細書中の語法又は術語は説明を目的としたものであり、制限を有するものではなく、従って本明細書の術語又は語法は、当業者の知識と組み合わせて、本明細書中に示された教示及び指針に照らして、当業者により解釈されるべきである。
【０１３７】
以上本発明を説明してきたが、下記実施例を参照することにより、本発明はより容易に理解される。実施例は説明のために提供するものであって、本発明を限定するものではない。
【実施例】
【０１３８】
実施例１−クローニング及び発現
細胞外ＩＮＳＰ０５２のクローニング、哺乳類細胞発現ベクターの構築、哺乳類細胞における発現及び細胞外ＩＮＳＰ０５２及び細胞外ドメインのヒスチジンタグ化バージョンの精製は、国際出願ＷＯ２００３／０９３３１６号及びＰＣＴ／ＧＢ／２００４／００４７７２号の実施例２及び３に記載されている。
【０１３９】
配列番号３０に示される配列を有するポリペプチド（以降、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインのＦｃ融合物を意味する）を２回（各５００ｍｌ）精製し、そして７．９ｍｇ及び２．４ｍｇを回収した。配列番号３２に示される配列を有するポリペプチド（以降、第１Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２又はＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１を意味する）を精製し、そして回収した（それぞれ０．７ｍｇ及び０．３ｍｇの回収物の２回の精製（５００ｍｌ）及び回収物７ｍｇの１回の精製）。配列番号３３に示される配列を有するポリペプチド（以降、第２Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２又はＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２を意味する）を精製し（５００ｍｌ）、そしてウェスタンブロットレベルにおいて回収した。
【０１４０】
実施例２−ＩＮＳＰ０５２の結合パートナー
Ｉ．導入
可溶性ＩＮＳＰ０５２（ｓＩＮＳＰ０５２−膜結合ＩＮＳＰ０５２の成熟細胞外部分に対応する、配列番号２２）の潜在的な結合パートナーを同定するためにＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ技術（表面増強レーザー脱離／イオン化飛行時間質量分光法／ProteinChipTMアレイ）を使用した。端的には、以下の工程を行った。
１． マウスから試料を獲得する、
２． ＳＥＬＤＩ分析及び最適化、
３． ビーズにスケールアップ、
４． ＳＥＬＤＩにおいて溶出物を分析する、
５． ビーズ溶出物のＨＰＬＣ、
６． チップ及びゲルのＨＰＬＣ画分の分析、
７． 単離タンパク質の消化、及び
８． ナノＬＣ ＭＳ／ＭＳ及びタンパク質の同定。
【０１４１】
ＩＩ．材料及び方法
まず、静脈内ＬＰＳ又はＮａＣｌ（コントロール）をメスＣＨ３マウスに注射し、そして３時間後心臓内パンキュレーション（puncuration）を介して血液を採取した。該マウスに３００μｇ／ＫｇのＬＰＳを腹腔内注射した。血漿のために、該血液をヘパリン処理チューブ中に採取し、そして血清のために未処理チューブ中に採取した。該チューブを１３，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上清（血清又は血漿試料）を回収し、そして実験のために使用した。
【０１４２】
その後、１．２５μｇのベイトタンパク質ｓＩＮＳＰ０５２又はコントロールＩＬ−１８（ＩＬ−１８ＢＰ結合コントロールタンパク質としてのＩＬ−１８）をRS100 ProteinChipTM アレイ(Ciphergen Biosystems Inc., Fremont, CA)上の各スポットに適用し、そして加湿チャンバー中で２時間（室温にて）インキュベートした。非特異的結合部位を、０．５Ｍエタノールアミン／ＰＢＳで１時間（室温にて）ブロックした。アレイを５分間、ＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００で３回洗浄した。血漿試料を、ＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００において１:１に希釈し、そして該アレイにおいてインキュベートした（２時間、室温）。４時間のインキュベーション時間で該試料の至適条件に達する。その後、該アレイをＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００で２×５分間、そして１Ｍの尿素／２％ＣＨＡＰＳ／０．５ＭのＮａＣｌ／５０Ｍのトリス ｐＨ９で１×３分間洗浄した。これらを５ｍＭのＨＥＰＥＳ ｐＨ７．２でリンスした（１５秒間、室温）。該基質、シナピン酸をアレイ上の各スポットに適用し、そしてProteinChipTM Biology System IIを使用して、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳにより質量分析を行った。レーザー強度２００、感度９及び１０、並びに１０〜４０ｋＤａ及び２０〜１６０ｋＤａの間のマスフォーカスを使用してスペクトルが産生された。
【０１４３】
異なるチップ由来のコントロール及び試料のスペクトルを同じファイルに併せ、そして分析のために等しく処理した。製造業者の指示に従い、Ciphergen biosystems Inc.由来の一体化（all in 1)タンパク質標準を使用して該スペクトルを較正した。スペクトル間の比較のために、これらを全イオン電流に対して標準化した。異なる形で現されるピークを、Ciphergen Biomarker Wizardソフトウェアを使用して同定した。
【０１４４】
結合タンパク質の同定のために、ＩＤＭアフィニティービーズ(Ciphergen biosystems)を使用し、ＲＳ１００チップにおいて使用されたものと同様のプロトコルを適用した。５０ｍＭ酢酸ナトリウムバッファー，ｐＨ５．０中の１ｍｇのベイトタンパク質（ｓＩＮＳＰ０５２）を、６００μｌのビーズにおいて室温で一晩インキュベートした。該ビーズを５０ｍＭの酢酸ナトリウムバッファー，ｐＨ５．０で２×５分間洗浄し、そして０．５Ｍのトリス−ＨＣｌ，ｐＨ９．０、０．１％トリトン−Ｘ１００で２時間ブロックした。これらをＰＢＳ中の０．１％トリトン−Ｘ１００で３×１０分間、そしてＰＢＳ中で２×１０分間洗浄した。血漿試料をＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００において１：１に希釈し、そしてビーズ上でインキュベートした（一晩、室温）。０．２Ｍの尿素／０．１％ＣＨＡＰＳ／０．２ＭのＮａＣｌ／５０ｍＭのトリス ｐＨ７．５で２×５分間、そしてＰＢＳで２×５分間洗浄した。相互作用タンパク質を、５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡ（トリ−ホスファチジン酸）で溶出させた。溶出液を、ＮＰ２０プロテインチップを使用して分析した。５μｌの溶出液をスポット毎に添加した。スポットを脱イオン水で洗浄し、そして不希釈シナピン酸を添加した。レーザー強度１８０／２００、感度８、並びに２〜３０ｋＤａ及び２０〜１６０ｋＤａの間のマスフォーカスを使用してスペクトルが産生された。
【０１４５】
更に該溶出液を、０．２ｍｌ／分の流速で、２．１ｍｍ直径を伴うＣ４（ブチル）カラム（逆相）(VYDAC 214TP(TM) Series, Grace Vydac)において分画した。該カラムを、０．１％ＴＦＡ中０〜９０％の連続線形アセトニトリル勾配で展開した。１分画分を回収した。該画分を凍結乾燥し、そして該タンパク質濃度をＮＰ２０プロテインチップを使用して決定した。
【０１４６】
注目のタンパク質を含有するＲＰ−ＨＰＬＣ画分を、製造業者のプロトコルに従い、RapigestTMSF (Waters)を使用して同定のためにトリプシン消化した。
【０１４７】
プールした画分はまた、ゲル電気泳動及び銀染色により分析した。
【０１４８】
質量分光実験は、Ｑ−ＳＴＡＲ四重極解／飛行時間機器(MDS/Sciex)を使用して行った。インターフェースを、キャピラリーＣ−１８ＲＰカラム（７５μｍの内径、１５０ｍｍの長さ）を備えるアルティメイトＨＰＬＣシステム(LC-Packings)に接続した。ペプチド消化物を、Ｆａｍｏｓオートサンプラー (LC-Packings)を使用してカラムに注入し、そして０．１％ギ酸の存在下で水中のアセトニトリルの勾配により、２００ｎｌ／分の流速において分離させた。カラムをナノエミッターに接続し、そして２４００Ｖの電流を使用して該溶出液を質量分光計の開口部にスプレーした。該質量分光計は、データ依存収集モードにおいて操作する。［Ｍ＋２Ｈ］2+又は［Ｍ＋３Ｈ］3+前駆イオンが２０カウント／秒のシグナルを決定するときに、第２の調査スキャンは、ＭＳモードにて行い、その後４ＭＳ／ＭＳスキャンを行う。前駆イオンの質量及び電荷に依存して自動的に設定された衝突エネルギーにおける標的ガスとして窒素を使用し、タンデム質量スペクトルが得られた。
【０１４９】
ＭＳ／ＭＳデータを、Mascotプログラムに転送し、そして屋内で利用可能なタンパク質データベースにおいて行われる検索後、ペプチド配列を決定した。
【０１５０】
使用したプロトコルを以下に供する：
【０１５１】
ａ）ＣＩＰＨＥＲＧＥＮ ＲＳ １００プロテインチップを使用するタンパク質結合パートナーの獲得
１． ＮａＨＣＯ3中に１：３に希釈した５μｇの１ｍｇ／ｍｌタンパク質を各スポットに添加した。
２． 加湿チャンバー中で２時間インキュベートした。
３． ５０μｌの０．５Ｍエタノールアミンを添加し、そして混合することにより室温で１時間ブロックした（ミクロミックス５ ２０／０２／６０）。
４． ＰＢＳ中の０．１％トリトン×１００で２×５分間洗浄した（ミクロミックス５ ２０／３／５）。
５． 試料を調製し、そして５０μｌの血漿溶液／スポットを添加した。
ｉ．ＰＢＳ／０．１％トリトン中１：１に希釈したＬＳＰ刺激化マウス由来の血漿
６． バイオプロセッサーを５００ｒｐｍで１分間遠心分離した。室温で２時間インキュベートし、振盪した（ミクロミックス５ ２０／２／１２０）。
７． 以下のとおり洗浄した。
ｉｉ．ＰＢＳ中０．１％トリトン×１００で３×５分間
ｉｉｉ．１Ｍ尿素／２％ＣＨＡＰＳ／０．５Ｍ ＮａＣｌ／５０ｍＭトリス ｐＨ９で１×３分間
８． ホルダーからアレイをはずし、そしてこれを５ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ７．５を含有する１５ｍｌファルコン中においた（１０秒間）。
９． ２×０．５μｌのＳＰＡ溶液を添加した。
１０．空気乾燥させ、そして試料を分析した。
１１．該チップを、以下の読み取り条件を使用して、Ｃｉｐｈｅｒｇｅｎ ＳＥＬＤＩで分析した：２００−１０−４０−６５−１００−５１又は２００−９−２０−１６０−１６０−５０（レーザー強度−感度−マスフォーカス低−マスフォーカス高−最大質量−マスフォーカス）。
【０１５２】
ｂ）アフィニティービーズにＩＮＳＰ０５２に結合し、そしてマウス血漿と共にインキュベートする。
ｉ）ベイトタンパク質をビーズに結合させる。
１． ビーズをとり、そして室温で３０分間保つ。
２． ローラー上でビーズを５分間混合する。
３． ２００μｌのビーズを１．５ｍｌのエッペンドルフチューブに添加する。
４． １ｍｌの水で６回洗浄する。
５． ６００μｌの
ａ．２．２ｍｇ／ｍｌのＩＮＳＰ０５２（１３４９５Ｆ１３Ｐ１ １．７ｍｇ／ｍｌを４ｍｇ／ｍｌに濃縮した）（合計１３２０μｇ）
ｂ．酢酸ナトリウムバッファーｐＨ５．０中の１．９５ｍｇ／ｍｌのＩＬ１８（ｈＩＬ１８成熟，大腸菌，Ｂａｔｃｈ ＬＭ １０８２１−１１０ １ｍｇ／ｍｌを４ｍｇ／ｍｌに濃縮した）（合計１１７０μｇ）
を添加し、そしてローラー上室温で一晩インキュベートした。
ｉｉ）非結合部位を飽和し、血漿と共にインキュベートする。
６． 上清を除去し、タンパク質濃度を決定し、そして貯蔵した（タンパク質濃度については以下を参照のこと）
７． ２×１ｍｌの５０ｍＭ酢酸ナトリウムバッファー５．０で洗浄した。
８． ６００μｌの０．５Ｍトリス−ＨＣＬ ｐＨ９、０．１％トリトン×１００（残存している可能性のある活性群を非活性化するため）を添加し、そして室温においてローラー上で２時間インキュベートする。
９． ＰＢＳ中の１ｍｌの０．１％トリトン×１００で３×１０分間洗浄する。
１０． １ｍｌのＰＢＳで２×１０分間洗浄する。
１１． ２０μｌのＩＮＳＰ０５２結合ビーズを８つの１．５ｍｌエッペンドルフチューブ中に入れる。
１２． ６００μｌの血漿＋６００μｌＰＢＳ中の０．１％トリトン＋５６μｌの２５×プロテアーゼ阻害剤を混合し（完全混合）、そしてビーズ中に添加する。
ａ．Ｃｔｒｌ血清
ｂ．ＬＰＳ血清
ｉｉｉ）洗浄し、そしてビーズから溶出させる。
１３． 洗浄及び溶出溶液を調製し、そしてこれらを濾過した。
１４． 上清を除去し、そして結合ビーズの新たなセットとともに可能なインキュべーションのために−８０℃で貯蔵した。
１５． 各エッペンドルフ中に２×１００μｌのＰＢＳを添加し、同じ試料を１つだけのエッペンドルフに移し、２つのエッペンドルフの合計を得た。
１６． ビーズを１×５分間４００μｌ及び１×５分間５００μｌの０．２Ｍ尿素／０．１％ＣＨＡＰＳ／０．２Ｍ ＮａＣｌ／５０ｍＭ トリス ｐＨ７．５で洗浄し、洗浄溶液を保ち、そしてＳＥＬＤＩで分析した。
１７． ビーズを２×５分間１ｍｌの１×ＰＢＳで洗浄した。
１８． ２００μｌの５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡ（０．２ｍｌのＨ２０、０．５ｍｌの１００％ＡＣＮ、０．３ｍｌの１％ＴＦＡ）で溶出した。３０秒間静かにボルテックスし、３分間回転させ、そして再度３０秒間静かにボルテックスした。溶出液を分離エッペンドルフ中においた。
１９． ビーズを４℃で３時間置き、２００μｌの５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡを添加し、そして溶出手順をやり直した。
２０． 更に、２００μｌの５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡを添加し、そして溶出手順をやり直した。
２１． 溶出液１のために３μｌ及び溶出液２及び３のために６μｌをＮＰ２０スポット上においた。乾燥させた。２×５×上げ下げ（up-and-down）、Ｈ２０で洗浄した。乾燥させた。０．８μｌの１００％ＳＰＡを添加した。
２２． 低及び高分子量タンパク質を、分離ＳＥＬＤＩプロトコルで分析した。
ａ．低：８００−８−２−３０−１６０−１６
ｂ．高：２００−８−２０−１６０−１６０−５０
２３． ゲル電気泳動及び銀染色で多様な溶液を観察した。
【０１５３】
ｃ）ビーズ溶出液の逆相ＨＰＬＣ画分
ＬＰＳ血漿（２１１２０４由来）と共にインキュベートしたＩＮＳＰ０５２結合ビーズの溶出液を、ＨＰＬＣカラムを介して操作した。パラメーターは以下を使用した：
カラム：
Ｃ４（ブチル）カラム（逆相）、２．１
溶出液Ａ：０．１％ＴＦＡ
溶出液Ｂ：０．１％ＴＦＡ、９０％アセトニトリル
洗浄カラム：
３０分 ０〜９０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、０．２ｍｌ／分
注入試料：
０．１％ＴＦＡ中に再懸濁した１００μｌの凍結乾燥試料
その後、５分間溶媒Ａ（０．１％ＴＦＡ）
溶出：
１０５分溶出 ０〜９０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、０．２ｍｌ／分
５分溶出 ９０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、０．２ｍｌ／分
１０分洗浄 ０．１％ＴＦＡ
１分の画分を回収した。各画分をＳＥＬＤＩで分析した。２００μｌ中１０μｌがＮＰ２０プロテインチップスポット上で吸収されるとき、最も高いＨＰＬＣピークだけが見える。従って、より小さなピークに対応する画分を凍結乾燥し、１５μｌの０．３ＲＦＡ、５０％アセトニトリル中で再懸濁し、そして５μｌをチップに添加した。
【０１５４】
ｄ）ＭＡＬＤＩのためのラピジェスト(RAPIGEST）タンパク質消化
１． 該画分（２００μｌ）を別々に凍結乾燥させた。
２． 再懸濁するために５０μｌを使用し、そして４つの画分を併せた。該チューブをさらに前の容量に添加した５０μｌで洗浄した。
３． 該資料を凍結乾燥させた。
該試料を５０μｌの０．２ｗ／ｖラピジェスト(Rapigest)中に再懸濁し、そしてラピジェスト(Rapigest)プロトコルに従った。
【０１５５】
ＩＩＩ．結果
２０、５０、５３及び５６ｋＤａのタンパク質ピークは、固定化したｓＩＮＳＰ０５２を伴うアレイスポットに結合するように見えたが、固定化したコントロールタンパク質、ＩＬ−１８を伴うアレイスポットには結合しなかった。ＬＰＳ刺激化血漿は、一般に、コントロール血漿と比較して結合パートナーのより高いピーク（より結合性）を示した。血漿試料は、血清と比較して、固定化したｓＩＮＳＰ０５２においてインキュベートした場合、より高いピークを与えた。
【０１５６】
従って、該マウスペプチド配列は、ＭＳ／ＭＳデータをMascotプログラムに転送し、そして屋内で利用可能なタンパク質データベース中で行われる検索後に決定した。いくつかの結合パートナーは以下のとおり同定した：
−プロパージン。プロパージンサイズ（４９９５９Ｄａ）は、５９ｋＤａの観察されたＳＥＬＤＩマスと一致した（該タンパク質はグリコシル化されている）；
−マンノース結合レクチンＣ前駆体（ＭＢＬ−Ｃ）；２５ｋＤａのサイズは、ゲルバンド（約３０ｋＤａ）と相関した。該タンパク質は、ジスルフィド結合を介するタイトなポリマーを形成し、ＳＥＬＤＩにおいて５０．６ｋＤａのピークを説明する。
−８１ｋＤａのサイズを伴う、ＭＵＳＣＲＡＲＦ ＮＩＤ又はＲａ反応因子（ＲａＲＦ）のＰ１００セリンプロテアーゼ；
−アンチトロンビンＩＩＩ（５２ｋＤａ）；
−補体因子Ｈ前駆体（１４３ｋＤａ）；
−アルブミン１（断片）（６７ｋＤａ）及び
−セリンプロテアーゼ−２と会合したマンノース結合レクチン（７７ｋＤＡ）。
【０１５７】
予想外に、全ての結合パートナーは、補体経路由来のタンパク質、特にヒトプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンに相当した。この度、国際出願ＷＯ２００３／０９３３１６及びＰＣＴ／ＧＢ／２００４／００４７７２のポリヌクレオチド又は対応するポリペプチドのこの度特徴付けられたこれらの驚くべき特性は、これらを薬剤又は医薬組成物の調製に特に適当とする。
【０１５８】
実施例３−マウスモデル
ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの生物活性は、Chu ら(Gene-engineered models for genetic manipulation and functional analysis of the cardiovascular system in mice. Chang Gung Med J. 2003 Dec;26(12):868-78.)、 Ma ら(Neurocardiovascular regulation in mice: experimental approaches and novel findings. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2003 Nov;30(11):885-93.) 又はSvenson ら(Invited review: Identifying new mouse models of cardiovascular disease: a review of high-throughput screens of mutagenized and inbred strains. J Appl Physiol. 2003 Apr;94(4): 1650-9; discussion 1673.)に説明されるとおり、循環器疾患のマウスモデル中で試験することができる。
【０１５９】
あるいは、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの生物活性は、Cluff ら(Synthetic toll-like receptor 4 agonists stimulate innate resistance to infectious challenge. Infect Immun. 2005 May;73(5):3044-52)、Ahmed ら(Mycetoma caused by Madurella mycetomatis: a neglected infectious burden. Lancet Infect Dis. 2004 Sep;4(9):566-74.)、 Schriewer ら(Mouse models for studying orthopoxvirus respiratory infections. Methods MoI Biol. 2004;269:289-308.) 又はDavis ら(Breaking the species barrier: use of SCID mouse- human chimeras for the study of human infectious diseases. Cell Microbiol. 2003 Dec;5(12):849-60.)に説明されるとおり、感染疾患のマウスモデル中で試験することができる。
【０１６０】
あるいは、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの生物活性は、Kikuchi ら(A transgenic mouse model of autoimmune glomerulonephritis and necrotizing arteritis associated with cryoglobulinemia. J Immunol. 2002 Oct 15;169(8):4644-50.)、Nordstrand ら(Streptokinase as a mediator of acute post-streptococcal glomerulonephritis in an experimental mouse model. Infect Immun. 1998 Jan;66(1):315-21.)、 又は Rondeau E. ([A new model of extramembranous glomerulonephritis in the mouse after a single injection of anti-aminopeptidase A monoclonal antibodies] Nephrologie. 1992;13(3):138.)に説明されるとおり、糸球体腎炎のマウスモデル中で試験することができる。
【０１６１】
【表４】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質ＩＮＳＰ０５２は、免疫グロブリン含有細胞表面認識分子として、そしてより特にはサイトカインアンタゴニストとして、ＷＯ２００３／０９３３１６及び国際出願番号ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００４７７２に開示されている。
【発明の開示】
【０００３】
発明の概要
本発明は、ＩＮＳＰ０５２が、補体経路のタンパク質、特にプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンと相互作用するという予想できない発見に基づく。
【０００４】
従って、本発明の第一の目的は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用である。本発明の第二の目的は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２を発現する細胞、又はＩＮＳＰ０５２のコード配列を含んで成る発現ベクターの使用である。本発明はまた、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用にも関する。
【０００５】
発明の説明
本発明は、ＩＮＳＰ０５２が、補体経路のタンパク質、特にプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンと相互作用するという予想できない発見に基づく。この度特徴付けられたＷＯ２００３／０９３３１６及び国際出願番号ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００４７７２のポリヌクレオチド又は対応するポリペプチドのこれらの驚くべき特性は、これらを薬剤又は医薬組成物の調製のために特に適当にする。
【０００６】
従って、第一の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用に関する。
【０００７】
第二の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェント条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、方法に関する。
【０００８】
第三の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用に関する。
【０００９】
第四の観点において、本発明は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェント条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、使用に関する。
【００１０】
好ましくは、可溶性ＩＮＳＰ０５２が、薬剤又は医薬組成物の調製のために使用される。
【００１１】
本明細書中、「可溶性ＩＮＳＰ０５２」又は「ｓＩＮＳＰ０５２」の用語は、膜結合されていないＩＮＳＰ０５２ポリペプチド、又は１又は複数の膜貫通ドメインを含有しないＩＮＳＰ０５２ポリペプチドを意味する。
【００１２】
本発明に関係して、内在性ＩＮＳＰ０５２の放出を刺激し、あるいは活性を増強する物質は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のために同様に使用できることが当業者に明らかであろう。
【００１３】
本発明は、膜結合ＩＮＳＰ０５２細胞外部分から成る可溶性ＩＮＳＰ０５２（配列番号２２）が、補体経路のタンパク質、特にプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンと相互作用するという予想できない発見に基づく。
【００１４】
本明細書中、「補体経路タンパク質」の用語は、プロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンから選択されるタンパク質を意味する。これらの補体経路タンパク質は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患に関係する。
【００１５】
好ましくは、感染症は、全身性真菌疾患、リケッチア病、クラミジア病、寄生虫感染症、ウイルス疾患、膿瘍、ヒト免疫不全ウイルス感染症、菌血症、敗血症性ショック、性行為感染症又は細菌疾患から選択される。
【００１６】
好ましくは、細菌疾患は、グラム陽性球菌により生じる疾患、グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患、グラム陽性桿菌により生じる疾患、グラム陰性桿菌により生じる疾患、嫌気性桿菌により生じる疾患、スピロヘータにより生じる疾患、又はマイコバクテリアにより生じる疾患から選択される。
【００１７】
ある態様において、本明細書中、「グラム陰性好気性菌球菌」は、ナイセリア属（Neisseria）、例えば、 N. meningitidis、 N. gonorrhoeae及び中咽頭、膣、又は直腸に一般的に生息する多数の雑菌Neisseria種といった生物を意味する。
【００１８】
好ましくは、グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患は、髄膜炎、菌血症、尿道炎、子宮頚管炎、直腸炎、咽頭炎、卵管炎、精巣上体炎、淋病感染症、急性細菌性髄膜炎又は髄膜炎菌感染症から選択される。
【００１９】
本明細書中、「菌血症」は、血流中の細菌を意味する。
【００２０】
本明細書中、「敗血症ショック」は、輸液療法に対する低灌流及び低血圧不応性を意味する。本明細書中、「敗血症」又は「全身性炎症反応症候群」は、炎症の全身症状により付随される、重篤な局在的な又は菌血症の感染症を意味する。本明細書中、菌血症による敗血症（sepsis)は、敗血症(septicemia)を意味する。
【００２１】
好ましくは、寄生虫感染症は、腸外原虫感染症、自由生活アメーバーによる感染症、腸管原虫感染症、線虫（回虫）感染症、吸虫（Trematode）（Fluke）感染症又は条虫（サナダムシ）感染症から選択される。
【００２２】
好ましくは、腸外原虫感染症はマラリアである。
【００２３】
好ましくは、ウイルス疾患は、呼吸性ウイルス疾患、ヘルペスウイルス感染症、中枢神経系ウイルス疾患、アルボウイルス又はアレナウイルス疾患から選択される。
【００２４】
更に、各補体経路タンパク質は、以下に記載されるとおり、特定の疾患に関係することが示されている。
【００２５】
ある態様において、本発明は、プロパージン関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２６】
ある態様において、本発明は、ＭＢＬ２関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２７】
ある態様において、本発明は、ＭＡＳＰ１関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２８】
ある態様において、本発明は、ＭＡＳＰ２関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００２９】
ある態様において、本発明は、アンチトロンビンＩＩＩ関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００３０】
ある態様において、本発明は、補体因子Ｈ関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００３１】
ある態様において、本発明は、アルブミン関連疾患の治療のための薬剤又は医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２の使用に関する。
【００３２】
プロパージン（因子Ｐ；４６９個のアミノ酸；５１２７６Ｄａ）は、自然免疫系の補体第二経路において活性である血漿タンパク質である。これは、Ｃ３ｂ，Ｂｂ転換酵素を安定化するための多くの微生物表面に結合する正の制御因子である。Ｃ３ｂ，Ｂｂ転換酵素は、その後、急速にＣ３ｂに対してよりＣ３を切断し、これはオプソニンとして、あるいは宿主細胞においては進行しないが、細菌細胞において進行する増幅ループにおける経路を再開するために作用する。代替経路において、Ｃ３はこのように、因子Ｉ及びＨの制御下において、因子Ｂ、因子Ｄ、及びプロパージンＰを介して活性化する。プロパージンの欠乏は、特に、ナイセリア種に対する高い感受性に関係する。プロパージンにおける欠損は、プロパージン欠乏（ｐｆｄ）の原因であり、細菌感染に対する、特に髄膜炎菌感染に対するより高い感受性をもたらす。３つの表現型が報告されている：完全欠乏（Ｉ型）、不完全欠乏（ＩＩ型）、及びプロパージンの機能障害（ＩＩＩ型）。プロパージンは、「プロパージン関連疾患」の用語により示される多くの疾患に関係している。
【００３３】
「プロパージン関連疾患」は、補体欠乏、完全欠乏（Ｉ型）、不完全欠乏（ＩＩ型）、プロパージンの機能障害（ＩＩＩ型）、髄膜炎菌性疾患、ナイセリア感染症、低補体血症、無フィブリノーゲン血症、溶連菌感染後急性糸球体腎炎、無ガンマグロブリン血症、スイス型無ガンマグロブリン血症、糸球体疾患、屈折異常、ウィスコット・アルドリッチ症候群、ＩｇＡ糸球体腎炎、プロテインＣ欠乏症、腎炎、慢性肉芽腫症、細菌感染症、蛋白尿、敗血症性ショック、溶血、全身感染症、敗血症(septicemia)、免疫不全症候群、全身性エリテマトーデス、マラリア、血栓症、糖尿病、壊死、後天性免疫不全症候群から選択される。
【００３４】
好ましくは、糸球体疾患は、腎炎症候群、ネフローゼ症候群、原発性糸球体疾患、続発性腎疾患から選択される。
【００３５】
好ましくは、原発性糸球体疾患は、微小変化群、巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、糸球体間質増殖性糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、急速進行性糸球体腎炎、又は繊維性糸球体腎炎から選択される。
【００３６】
好ましくは、腎炎症候群は、血尿、高血圧、腎不全、浮腫、急性糸球体腎炎、一過性糸球体腎炎、感染後糸球体腎炎、劇症性糸球体腎炎、急速進行性糸球体腎炎（ＲＰＧＮ）、低悪性度糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、半月体形成性糸球体腎炎、免疫不足ＲＰＧＮ、免疫複合体ＲＰＧＮ、抗ＧＢＭ抗体疾患自己免疫、原発性腎臓血尿性−蛋白尿症候群、無症候性血尿性−蛋白尿症候群、慢性血尿性−蛋白尿症候群、慢性糸球体腎炎、緩徐進行性糸球体疾患から選択される。
【００３７】
マンノース結合レクチン２遺伝子（ＭＢＬ２；２４８個のアミノ酸；２６１４３Ｄａ；サブユニット；６セットのホモ三量体のオリゴマー複合体）は、マンノース結合レクチン（ＭＢＬ）又はタンパク質（ＭＢＰ）をコードし、急性相応答の一部として肝臓により分泌され、そして自然免疫防御に関係する。ＭＢＬのためのリガンドは、多様な微生物により発現され、そして該タンパク質の結合は、頻発性及び慢性感染症に対する感受性をもたらすオプソニン作用、並びに補体系の活性化に導く。ＭＢＬ２は、「ＭＢＬ２関連疾患」の用語により示される多くの疾患に関係している。
【００３８】
「ＭＢＬ２関連疾患」は、血管疾患、動脈硬化性疾患、マンノース結合タンパク質欠乏症、オプソニオン欠損による慢性感染症、髄膜炎菌感染症、全身性エリテマトーデス、補体欠損症、急性期反応、髄膜炎菌性髄膜炎、ＩｇＡ糸球体腎炎、ＩｇＧサブクラス欠損症、嚢胞性線維症、亜急性皮膚エリテマトーデス、関節リウマチ、免疫不全症候群、気道感染症、関節腫脹、インフルエンザ、原発性シェーグレン症候群、溶血、嚢胞性線維症、細菌感染症、皮膚粘膜リンパ節症候群、分類不能型免疫不全症、ループス腎炎、多発性関節炎、炎症、敗血症性ショック、結核、ウイルス感染症、肺炎球菌感染症、ＨＩＶ感染症、中耳炎、腎炎、全身感染症、マラリア、膜性腎症、敗血症症候群、結腸の腺癌、Ｃ型肝炎、自然流産、シェーグレン症候群、急性中耳炎、糸球体腎炎、単純ヘルペス、皮膚筋炎、壊死、アスペルギルス症、粥状動脈硬化、エプスタイン・バーウイルス感染症、肺炎、原発性胆汁性肝硬変、Ｂ型肝炎、肝疾患、骨髄炎、循環器疾患、肝炎、好中球減少症、サルコイドーシス、後天性免疫不全症候群、硬変、髄膜炎、潰瘍性大腸炎、グリオーマ、腎疾患、冠動脈硬化、慢性腎不全、結腸直腸癌、ショック、川崎病、急性気道感染、外陰部前庭炎症候群、ベーチェット病、クローン病活性指数、再狭窄、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ｈＴＬＶ−ｉ）プロウイルス感染症、皮膚筋炎、Ｂ型肝炎ウイルス感染症、ＩｇＡ腎症、ＣＯＰＤ感染症、妊娠糖尿病、巨細胞性動脈炎、う歯、クラミジア・トラコマチス感染症、絨毛羊膜炎、原発性胆汁性肝硬変、肺炎クラミジア感染、セリアック病、Ｑ熱後疲労症候群、又は慢性Ｑ熱から選択される。
【００３９】
好ましくは、循環器障害は、心臓及び呼吸器停止、心臓弁膜症動脈性高血圧、心内膜炎、起立性低血圧、失神、心膜疾患、動脈硬化症、心臓腫瘍、冠動脈疾患、大動脈及びその分枝の疾患、心不全、末梢血管障害、ショック、スポーツ心臓症候群又は不整脈から選択される。
【００４０】
Ｒａ反応性因子（ＲＡＲＦ）は、一定の腸内細菌により発現されるＲａ及びＲ２ポリサッカライドに結合する補体依存性殺菌因子である。ＲＡＲＦ活性は、脊椎動物の多様なグループの血清中に見られ、これは、これらの細菌種による感染に抵抗するための進化的に保存されたメカニズムであることを示唆する。ＲＡＲＦは、１００ｋＤ補体、ＣＲＡＲＦ、またＭＡＳＰ１若しくはｐ１００とも称される、を含み、これは補体成分Ｃ４（Ｃ４Ｆ；Ｃ４Ｓ）、Ｃ２、及びＣ３を活性化するものと考えられる。後の研究は、しかしながら、ＭＡＳＰ２からＭＡＳＰ１が分離し、そしてＭＡＳＰ１がＣ３及びＣ２を活性化し、一方でＭＡＳｐ２はＣ４及びＣ２を活性化することを示した。ＲＡＲＦの他の成分は、哺乳類結合レクチン、微生物炭化水素と結合し、そしてＭＡＳＰを活性化する補体系の血漿タンパク質メンバーである。その後ＭＡＳＰは、Ｃ３コンバーターゼを産出するため、あるいはＣ３を直接活性化するためにＣ４及びＣ２を補充する。
【００４１】
ＭＡＳＰ１の選択的スプライシングは、補体活性化の哺乳類結合レクチン（ＭＢＬ）経路に含まれる２つのＲＡＲＦ成分をコードする２つの転写変異体をもたらす。各アイソフォームは、ジスルフィド結合により結合されたヘテロ二量体を形成する２つの鎖に切断される。コードされるタンパク質は、ペプチダーゼのトリプシンファミリーのメンバーである。ＭＡＳＰ１（６９９個のアミノ酸；７９２５８Ｄａ）は、従って、一定の腸内細菌により発現されるＲａ及びＲ２ポリサッカライドと特異的に結合する殺菌性Ｒａ反応因子ＲＡＲＦの成分である。ＭＡＳＰ１は、「ＭＡＳＰ１関連疾患」の用語により表される数種の疾患に関係している。
【００４２】
「ＭＡＳＰ１関連疾患」は、糸球体腎炎、ＩｇＡ糸球体腎炎、全身性エリテマトーデス又は免疫不全症候群から選択される。
【００４３】
ＭＡＳＰ２（６８６個のアミノ酸；７５６８５Ｄａ；アイソフォーム２はＭＡＳＰ−１と結合する；ペプチダーゼＳ１ファミリーに属する）は、おそらくマンノース結合レクチン（ＭＢＬ）補体活性化経路の開始において重要な役割を果たすチロシンプロテアーゼである。活性化後、これはＣ４Ａ及びＣ４Ｂを産生するＣ４を切断する。ＭＡＳＰ２は、「ＭＡＳＰ−２関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００４４】
「ＭＡＳＰ−２関連疾患」は、免疫不全症候群又はＭＡＳＰ２欠乏症から選択される。
【００４５】
好ましくは、「免疫不全症候群」は、後天性免疫不全症候群又はマンノース結合タンパク質（ＭＢＰ）座位に関係する免疫不全症から選択される。
【００４６】
アンチトロンビンＩＩＩ（４６４個のアミノ酸；５２６０２Ｄａ；セルピンファミリーに属する）は、血液凝固カスケードを制御する血漿中の最も重要なセリンプロテアーゼ阻害因子である。ＡＴ−ＩＩＩは、トロンビン、並びに因子ＩＸａ、Ｘａ、及びＸＩａを阻害する。その阻害活性は、一般に、ヘパリンの存在下において増強される。アンチトロンビンＩＩＩにおける欠損は、アンチトロンビンＩＩＩ欠乏症（ａｔ−ｉｉｉ欠乏症）の原因である。ＡＴ−ＩＩＩ欠乏症は、血栓形成傾向、罹患した個人が重篤な自発性血栓症に進行しやすい常染色体優性遺伝疾患である。ＡＴ−ＩＩＩ欠乏症は４つのタイプに分類される。Ｉ型は、抗原性及び機能レベルが５０％低下することにより特徴づけられる。ＩＩ型は、トロンビン結合ドメインに影響する欠損を有する。ＩＩＩ型は、ヘパリン結合ドメインの変化である。血漿ａｔ−ｉｉｉ抗原レベルはＩＩ型及びＩＩＩ型において正常である。ＩＶ型は、分類不可能な突然変異の種々のグループから成る。ＡＴ−ＩＩＩバーセル、ツール／アルジェ／アミアン／トヤマ、ルーアン−１、−２、−及び−Ａはヘパリン結合特性を減少した（あるいは欠如した）。Ａｔ−ｉｉｉハミルトン、グラスゴー／シェフィールド／シカゴ、ノースウィックパーク／ミラノ−１、ペスカラ、デンバー／ミラノ−２、及びユタは、阻害活性を奪われている。
【００４７】
アンチトロンビンＩＩＩは、「アンチトロンビンＩＩＩ関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００４８】
アンチトロンビンＩＩＩ関連疾患は、血液関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ欠乏症、血栓形成傾向、プロテインＳ欠乏症、活性型プロテインＣ抵抗性、播種性血管内凝固、血栓症、プロテインＣ欠乏症、静脈血栓症、家族性アンチトロンビンＩＩＩ欠乏症、血液凝固異常、血栓塞栓症、先天性フィブリノゲン異常症、下肢の深部静脈血栓症、動脈血栓症、出血、副腎皮質ホルモン過剰症、腸間膜静脈血栓症、子癇前症、脳血栓、電撃性紫斑病、肺塞栓症、ネフローゼ症候群、全身感染症、線維素可溶性欠損、抗リン脂質抗体症候群、脳静脈血栓症、第ＸＩＩ因子欠乏症、ヘルプ症候群、門脈血栓症、肺血栓塞栓症、多臓器不全、上矢状洞血栓症、静脈閉塞、術後出血、ホモシスチン尿、敗血症性ショック、脳静脈血栓症、血小板減少症、自発性血小板凝集疾患、腎静脈血栓症、静脈閉塞症、脳梗塞、妊娠中毒症、静脈炎後症候群、血小板増多、リベド血管炎、粥状動脈硬化、血小板機能異常症、肝中心静脈閉塞症、うっ滞、網膜静脈閉塞、急性前骨髄球性白血病、シュワルツマン反応、皮膚壊死、肝硬変、増大出血時間障害、スネドン症候群、真性多血症、紫斑病、子癇、血友病Ａ、敗血症症候群、レッグ・ペルテス病、心筋梗塞、脳血管発作、髄膜炎菌血症、遺伝性血液凝固異常、狭心症、縦隔線維症、血栓性静脈炎、循環器疾患、胎児発育遅延、肺静脈血栓症、高リポ蛋白血症、血管病、肝機能障害、肝静脈血栓症、急性心筋梗塞、腎症候群を伴う出血熱、梗塞、網膜中心静脈閉塞症、肝疾患、皮下血腫、ベーチェット病、急性リンパ性白血病、低プロトロンビン血症、腸間膜梗塞、蛋白尿、脳塞栓症、骨髄増殖性疾患、習慣性流産、播種性血管内凝固敗血症、血栓塞栓症、マールブルグウイルス感染症、エボラウイルス感染症又は熱傷血栓症から選択される。
【００４９】
好ましくは、血液関連障害は、貧血、組織球性症候群、鉄過剰関連障害、白血病、リンパ腫、骨髄増殖性疾患、形質細胞疾患、うっ血及び血液凝固異常、脾臓障害、血栓性障害、血小板異常、血管出血障害、白血球減少症、リンパ球減少症又はＡＩＤＳ−関連血液病及び悪性腫瘍から選択される。
【００５０】
アンチトロンビンＩＩＩに関係する薬剤を開発することは興味深い。例えば、Advantek Biologicsは、遺伝障害のためのアンチトロンビンＩＩＩペプチドを伴う薬剤を開発することを試みている。Aventis Behringは、播種性血管内凝固敗血症のためのアンチトロンビンＩＩＩペプチドの研究を中断した。Bayerは、血栓塞栓症のためのアンチトロンビンＩＩＩ薬剤について着手している。GTC Biotherapeuticsは、マールブルグウイルス感染症、エボラウイルス感染症及び熱傷血栓症のための遺伝子導入アンチトロンビンＩＩＩを仮登録している。Myriad Geneticsは、血栓症のためのＭＰＣ−１２０３（凝固阻害因子アンチトロンビンＩＩＩ）の開発を試みている。
【００５１】
補体因子Ｈ（１２３１個のアミノ酸；１３９１２５Ｄａ）は、補体活性化（ＲＣＡ）遺伝子クラスターの制御因子のメンバーであり、２０の短いコンセンサス反復（ＳＣＲ）ドメインを伴うタンパク質をコードする。異なるアイソフォームをコードする選択的転写スプライシング変異体が特徴づけられている。該タンパク質は、血流中に分泌され、そして補体活性化の制御において必須の役割を有し、微生物感染症に対してこの自然防御メカニズムを制限する。因子Ｈは、因子ＩによるＣ３ｂの不活性化における補助因子として機能し、そしてまた、補体第二経路におけるＣ３Ｂｂ複合体（Ｃ３転換酵素）及び（Ｃ３ｂ）ＮＢＢ複合体（Ｃ５転換酵素）の解離速度を増大する。該遺伝子中の突然変異は、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）及び慢性低補体血腎症に関係している。ＨＵＳは、歪んだ赤血球(「有棘赤血球」)を付随する微小血管症性溶血性貧血、血小板減少症、及び急性腎不全に導く微小血管障害である。遺伝の優性及び劣性型が共に報告されている。ＨＵＳの殆どのケースは、ベロ毒産生細菌により生じる下痢の流行に関係するが、ＨＵＳの否定形ケースは、下痢を伴わずに発生する（ａＨＵＳ）。補体因子Ｈは、膜増殖性糸球体腎炎及び因子Ｈ欠乏症に関係する。補体因子Ｈは、「補体因子Ｈ関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００５２】
補体因子Ｈ関連疾患は、尿毒症性症候群、血栓性血小板減少性紫斑病、溶血性尿毒症症候群、微小血管症性溶血性貧血、膜性増殖性糸球体腎炎、低補体血症、原発性高シュウ酸尿症、急性腎不全、血小板減少症、膀胱癌、溶血性貧血、抗リン脂質抗体症候群、溶血、全身性エリテマトーデス、炎症、悪性腫瘍、肝疾患、血栓症、肺悪性腫瘍、慢性低補体血腎症、補体因子Ｈ欠乏症又は年齢関連黄斑変性症から選択される。
【００５３】
アルブミン（ＡＬＢ；６０９個のアミノ酸；６９３６６Ｄａ）は、およそ半分の血清タンパク質を含んで成る可溶性の単量体タンパク質である。アルブミンは、ステロイド、脂肪酸及び甲状腺ホルモンの担体タンパク質として主に機能し、そして細胞外液量を安定化する役割を果たす（血液中のコロイド浸透圧の制御）。血清アルブミンは、水、Ｃａ（２＋）、Ｎａ（＋）、Ｋ（＋）、脂肪酸、ホルモン、ビリルビン及び薬物のための良好な結合能を有する。染色体４における該遺伝子中の突然変異は、多様な異常なタンパク質をもたらす。アルブミンは、新生タンパク質がラフ型小胞体から放出される前に除去されるＮ−末端ペプチドを有するプレプロアルブミンとして肝臓中で合成される。該産生物であるプロアルブミンは、ゴルジ小胞中で次々に切断され、分泌アルブミンを産生する。ＡＬＢにおける欠損は、家族性アルブミン異常過チロキシン血症（ｆｄｈ）の原因となる。ＦＤＨは、Ｔ（４）のためのＡＬＢの増大した親和性による甲状腺機能正常性過チロキシン血症である。これは、コーカサス人種における遺伝性甲状腺機能正常性過チロキシン血症の最も一般的な原因である。ＡＬＢ中の欠損は、高亜鉛血症の原因となりうる。アルブミンの多様な構造は、実際に、血中の亜鉛濃度の無症候性増大をもたらす亜鉛の増大した結合性に導きうる。アルブミンは「アルブミン関連疾患」の用語により表される疾患に関係している。
【００５４】
アルブミンに関連する薬物の開発に注目される。例えば、Mitsubishi Pharmaは、血液病、腎疾患及び創傷治癒血友病のための組換え血清アルブミンを仮登録している。Pharming Group NVは、出血性貧血のためのヒト血清アルブミンの開発を試みている。
【００５５】
「アルブミン関連疾患」は、微量アルブミン尿、アルブミン尿、糖尿病性腎症、低アルブミン血症、腎疾患、蛋白尿、インスリン依存性糖尿病、栄養障害、インスリン非依存性糖尿病、網膜症、ネフローゼ症候群、腹水症、慢性腎不全、低蛋白血症、腎不全、硬変、糖尿病、タンパク質・エネルギー栄養障害、肝硬変、肝腎症候群、本態性高血圧、クワシオルコル、循環器疾患、二峰性アルブミン血症、気管支肺胞洗浄液、卵巣過剰刺激症候群、高チロキシン血症、肝疾患、糖尿病性網膜症、炎症、蛋白喪失性腸症、血液量減少、細菌性腹膜炎、肝不全、糖尿病性微小血管症、肝肺症候群、慢性肝疾患、肝細胞の原発癌、尿毒症、浮腫、巣状分節性糸球体硬化症、核黄疸、重篤な低栄養症、リポイドネフローゼ、肝性脳症、消耗症、貧血、肝機能障害、末梢血管疾患、血液量増加症、自律神経ニューロパチー、高血圧性腎疾患、急性肝不全、糸球体硬化症、高血糖症、粥状動脈硬化、アルコール性肝硬変、環状浮腫、原発性胆汁性肝硬変、糸球体腎炎、肝線維症、腎機能異常、インスリン抵抗性、腹膜炎、ネフローゼ、低カルシウム血症、全身感染症、高ビリルビン血症、慢性糸球体腎炎、脂質代謝異常、代謝性アシドーシス、高ホモシステイン血症、左室肥大、動脈性高血圧症、糖尿病性糸球体硬化症、慢性肝炎、脳症、門脈圧亢進症、溶血、アレルギー性鼻炎、収縮期高血、肺水腫、低ナトリウム血症、低血圧、糖尿、冠疾患、高血圧性網膜症、高コレステロール血症、近位腎尿細管機能障害、低マグネシウム血症、アルコール性肝疾患、二次性副甲状腺機能亢進症、特発性膜性腎症、黄疸、無アルブミン血症、家族性アルブミン異常高チロキシン血症、高亜鉛血症、血液病、腎疾患、創傷治癒血友病、又は出血性貧血から選択される。
【００５６】
本明細書において使用される場合、「治療」の用語は、疾患形成、発達、進行の、あるいは疾患の徴候のいずれか一つ若しくはいくつかの、又は全ての、疾患形成、発達、進行の減弱、低下、又は部分的な、実質的な若しくは完全な予防又は妨害を包含する。
【００５７】
本明細書中の「ＩＮＳＰ０５２」の用語は、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又はＩＮＳＰ０５２核酸分子に関する。
【００５８】
「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」は：
配列番号２に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン１ポリペプチド」を意味する。配列番号４に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチド」を意味する。配列番号６に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン３ポリペプチド」を意味する。配列番号８に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン４ポリペプチド」を意味する。配列番号１０に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン５ポリペプチド」を意味する。配列番号１２に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン６ポリペプチド」を意味する。配列番号１４に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２エクソン７ポリペプチド」を意味する。配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２及び配列番号１４の組み合わせは、配列番号１６に示される配列を産生する。配列番号１６に示される配列を有するポリペプチドは、以下「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」を意味する。配列番号２０に示される配列を有するポリペプチドは、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインである。配列番号２２に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの細胞外ドメインを意味する。配列番号２４に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチドを意味する。配列番号２６に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドを意味する。配列番号２９に示される配列を有するポリペプチドは、以下、ヒスチジンタグ化、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインを意味する。配列番号３０に示される配列を有するポリペプチドは、以下、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインのＦｃ融合物を意味する。配列番号３１に示される配列を有するポリペプチドは、以下、ＩＮＳＰ０５２の断片を含有するＩｇドメイン（ＩＮＳＰ０５２Ｉｇ２）を意味する。配列番号３２に示される配列を有するポリペプチドは、以下、第１Ｉｇドメインが欠如している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１）を意味する。配列番号３３に示される配列を有するポリペプチドは、以下、第２Ｉｇドメインが欠如している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２）を意味する。本明細書における「可溶性ＩＮＳＰ０５２」又は「可溶性形態」は、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２及び／又は配列番号３３を意味する。
【００５９】
ある態様において、この態様に従うＩＮＳＰ０５２ポリペプチドは、配列番号１６（ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド）に示されるアミノ酸配列から成り、あるいはその断片又は官能性等価物である。他の態様において、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドは、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、又は配列番号１４のいずれか１つに示されるアミノ酸配列から成り、あるいはこれらの変異体である。
【００６０】
配列番号２０に示されるアミノ酸配列は、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインを示し、そして完全長タンパク質のアミノ酸１〜２４０に対応する。配列番号２２は、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインを表す。
【００６１】
ＷＯ０３／９３３１６に示されるとおり、該ＩＮＳＰ０５２完全長予測物は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属するＶＥＧＦ／ＰＤＧＦ受容体に関係する、４１６個のアミノ酸のＩ型膜タンパク質をコードする。推定上のシグナル配列は、ＩＮＳＰ０５２のアミノ酸１〜３３から成る。Ｉｇ様ドメインはアミノ酸４８〜１２４から成る。Ｉｇドメインはアミノ酸１６１〜２１６から成る。予想される膜貫通（ＴＭ）ドメインは、ＩＮＳＰ０５２のアミノ酸２４１〜２６３から成る。従って、ＩＮＳＰ０５２の成熟細胞外ドメインは、ＩＮＳＰ０５２のアミノ酸３４〜２４０から成る。この後者の配列は、配列番号４３４及び配列番号８８０として文献中に開示される２つの配列（ＷＯ０４／００９８３４；配列番号２７及び２８）に類似する。膜結合ＩＮＳＰ０５２の細胞内ドメインは、アミノ酸２６４〜４１６に対応する。
【００６２】
ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメイン及び／又は「可溶性形態」は、該ポリペプチド配列中のこれらの境界のＣ末端及び／又はＮ末端の付加的残基が、該ポリペプチド断片中に含まれる場合、正確に折りたたまれ、かつ生物活性を示すであろうことが強く推定される。ある態様において、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドは、Ｃ末端及び／又はＮ末端の付加的残基を含む。例えば、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド配列又は相同配列由来の付加的な５、１０、２０、３０、４０、５０又は１００ものアミノ酸残基は、正確に折りたたまれ、そして生物活性を示すというポリペプチド断片の能力を害することなく、受容体結合ドメインの境界のＣ末端及び／又はＮ末端のいずれか又は両方において含むことができる。１００又は２００残基ほどの大きさの伸展は、第２構造因子間の大きなループのために必須となりうる。
【００６３】
ある態様において、ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの切頭型変異体について、１又は数個のアミノ酸残基（例えば、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０又はそれ以上）が、生物活性を害することなく、該ドメインのＣ末端又はＮ末端のいずれか又は両方において欠失していてよい。
【００６４】
ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの好ましい切頭型変異体は、配列番号３１に示される配列を有する、ＩＮＳＰ０５２の断片を含有するＩｇドメイン（ＩＮＳＰ０５２Ｉｇ２）であってよい。
【００６５】
ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの好ましい切頭型変異体は、配列番号３２に示される配列を有する、第１Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１）であってよい。
【００６６】
ＩＮＳＰ０５２細胞外ドメインの好ましい切頭型変異体は、配列番号３３に示される配列を有する、第２Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２）であってよい。
【００６７】
以下に議論されるとおり、ある態様において、本発明のポリペプチドは、融合タンパク質又は「自立（free-standing)」タンパク質の形態において供されることができる。従って、本発明のある態様は、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインから成るポリペプチドを供する。本発明の他の態様は、融合タンパク質を形成するための少なくとも１つの他のポリペプチドと融合したＩＮＳＰ０５２から成るポリペプチド（成熟体及び切頭型変異体を含む、完全長タンパク質又はその細胞外ドメイン）を供する。
【００６８】
「ＩＮＳＰ０５２核酸分子」は、配列番号１（ＩＮＳＰ０５２エクソン１ポリペプチドをコードする）、配列番号３（ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチドをコードする）、配列番号５（ＩＮＳＰ０５２エクソン３ポリペプチドをコードする）、配列番号７（ＩＮＳＰ０５２エクソン４ポリペプチドをコードする）、配列番号９（ＩＮＳＰ０５２エクソン５ポリペプチドをコードする）、配列番号１１（ＩＮＳＰ０５２エクソン６ポリペプチドをコードする）、配列番号１３（ＩＮＳＰ０５２エクソン７ポリペプチドをコードする）、配列番号１５（ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドをコードする）、配列番号１７（マウスバーチャルＩＮＳＰ０５５ポリペプチドをコードする）、配列番号１９（ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの細胞外ドメインをコードする）、配列番号２１（ＩＮＳＰ０５２成熟ポリペプチドの細胞外ドメインをコードする）、配列番号２３（成熟ＩＮＳＰ０５２エクソン２ポリペプチドをコードする）、配列番号２５（成熟ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドをコードする）を含んで成る又はこれらから成る核酸、あるいはこれらの配列のいずれか１つの重複等価物又は断片を意味することができる。
【００６９】
配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１及び配列番号１３に示される配列の組み合わせは、配列番号１５に示される配列を産生する。
【００７０】
配列番号２３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１及び配列番号１３に示される配列の組み合わせは、配列番号２５に示される配列を産生する。
【００７１】
本発明のある態様において、該核酸分子は、ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメイン（配列番号２０）を含んで成る、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。好ましくは、該核酸分子は、配列番号１９に記載される核酸配列を含んで成るか、あるいはこれから成る。これらの配列はＣ末端に付加されるヒスチジン残基を含むが、これは同時係属特許出願ＷＯ０３／０９３３１６の図７にも記載されている。
【００７２】
本発明のある態様において、該核酸分子は、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメイン（配列番号２２）を含んで成るか、又はこれから成るポリペプチドをコードする。好ましくは、該核酸分子は、配列番号２１に記載される核酸配列を含んで成るか、あるいはこれから成る。これらの配列はＣ末端に付加されるヒスチジン残基を含むが、これは同時係属特許出願ＷＯ０３／０９３３１６の図７にも記載されている。
【００７３】
本発明のある態様において、該核酸分子は、ＩＮＳＰ０５２の断片を含有するＩＧ−ドメイン（配列番号３１）である、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインの変異体を含んで成るか、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。
【００７４】
本発明の態様において、該核酸分子は、配列番号３２に示される配列を有する、第１Ｉｇドメインを欠失する細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１）である、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインの変異体を含んで成る、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。
【００７５】
本発明のある態様において、該核酸分子は、配列番号３３に示される配列を有する、第２Ｉｇドメインを欠失する細胞外ＩＮＳＰ０５２（ＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２）である、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインの変異体を含んで成る、あるいはこれから成るポリペプチドをコードする。
【００７６】
ある態様において、「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」の用語は、付随の配列表の配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、又は配列番号３６（配列番号１８を除き全てヒト）の配列の全て又は一部を含んで成るタンパク質、並びにこれらの塩、アイソフォーム、ムテイン、活性画分、官能性誘導体及び円順列変異誘導体に関することができる。ある態様において、ヒト以外の種、例えば、マウス（例えば、配列番号１８）又はラット由来のＩＮＳＰ０５２は、ヒトにおいて実質的な免疫応答を誘発することなく、生物活性を示すタンパク質を許容するようにタンパク質間に十分な同一性が存在する限り、本発明に従い使用することができる。
【００７７】
ある態様において、「ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド」の用語は、更に、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患において所望の活性を示す、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、又は配列番号３６（配列番号１８を除き全てヒト）のいずれかの断片、部分、ドメイン又はサブドメインに関する。ある態様において、タンパク質断片、アイソフォーム、特異的グリコシル化又はシリル化形態、あるいは該タンパク質の１又は複数のドメインは、これらが、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患のいずれかの有利な効果、好ましくは少なくとも、完全長タンパク質と比較可能である効果を示す限り、本発明に従い使用することができる。この有利な効果は、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患における効果を示すために、適切な文献中に記載されているin vitro又はin vivo試験のいずれかにおいて測定することができる。ＩＮＳＰ０５２の生物活性は、例えば、ナイセリア種の感染を低下するため、又は血液凝固若しくは血小板凝集を予防するため、又は血管の拡張若しくは狭窄において作用するため、又は血圧、血液凝固、体液貯留、オプソニン作用、補体活性若しくは浸透圧を調整するためのその能力においてＩＮＳＰ０５２をアッセイすることにより測定することができる。
【００７８】
ある態様において、ＩＮＳＰ０５２は自然発生、すなわち未変性タンパク質、又は組換えタンパク質であってよい。組換え産生は、真核生物細胞、例えば、酵母細胞又は哺乳類細胞、好ましくはＣＨＯ細胞、ＨＥＫ細胞（ヒト胎児腎臓細胞）、又はヒト線維芽細胞若しくは株化細胞中で行うことができる。これは更に、原核生物細胞、例えば、大腸菌（E.coli)において産生されることができる。
【００７９】
好ましくは、ＩＮＳＰ０５２は、１又は複数の部位でグリコシル化されている。これはまた、与えられた必要性及び該タンパク質の産生又は単離の起源に依存して非グリコシル化としてもよい。
【００８０】
好ましくは、本発明のポリペプチドは、配列番号２２の残基２、７１、１０５、１３４、１３９及び／又は１５６においてグリコシル化されている（残基の番号付けのための参考として配列番号２２が用いられる）。
【００８１】
本明細書における「塩」の用語は、ＩＮＳＰ０５２分子又はその類似体のカルボキシル基の塩及びアミノ基の酸付加塩の両方を意味する。カルボキシル基の塩は、当業者に既知の手段により形成することができ、無機塩、例えば、ナトリウム、カルシウム、アンモニウム、三価鉄又は亜鉛塩等、及び有機塩基を伴う塩、例えば、アミン、例えば、トリエタノールアミン、アルギニン又はリジン、ピペリジン、プロカイン等により形成されるものを含む。酸付加塩は、例えば、鉱酸、例えば、塩酸又は硫酸を伴う塩、及び有機酸、例えば、酢酸又はシュウ酸を伴う塩を含む。当然に、いずれのこのような塩も、本発明に関するＩＮＳＰ０５２の生物活性を維持すること、すなわち感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患において有利な効果を発揮する必要がある。
【００８２】
ある態様において、ＩＮＳＰ０５２のアイソフォーム又はスプライス変異体もまた、これら疾患進行及び／又は疾患の症状を阻害することができる限り、使用することができる。
【００８３】
ある態様において、「ムテイン」の用語は、天然ＩＮＳＰ０５２の１又は複数のアミノ酸残基が異なるアミノ酸残基により置換された、付加された、あるいは欠失された、好ましくは少なくとも野生型ＩＮＳＰ０５２と同程度の活性を有するか、あるいはより強力な活性を有するＩＮＳＰ０５２の類似体を意味する。ＩＮＳＰ０５２の生物活性は、例えば、ＩＮＳＰ０５２を、例えば、ナイセリア種の感染を低下させる能力、又は血液凝固若しくは血小板凝集を予防する能力、又は血管の拡張若しくは狭窄に作用する能力、又は血圧、血液凝固、体液貯蔵、オプソニン作用、補体活性化若しくは浸透圧を調節する能力についてアッセイすることにより測定することができる。タンパク質間の相互作用を評価するためのアッセイは当業界に周知である。このようなアッセイの例は、ＥＬＩＳＡ結合アッセイ、免疫沈降アッセイ、又は他の適当なシステム、例えば、ＢＩＡコアシステムにおける測定である。これらのムテインは、既知の合成法、及び／又は部位特異的変異原性技術、又はそのために適当ないずれかの他の技術により調製することができる。
【００８４】
好ましくは、このようなムテインは、配列番号２２と十分に重複したアミノ酸の配列、例えば、少なくとも実質的に配列番号２２と同様の活性を有するような配列を有する。ＩＮＳＰ０５２突然変異体の活性は、更に、例えば、ナイセリア種の感染を低下させる能力、又は血液凝固若しくは血小板凝集を予防する能力、又は血管の拡張若しくは狭窄に作用する能力、又は血圧、血液凝固、体液貯蔵、オプソニン作用、補体活性化若しくは浸透圧を調節する能力においてＩＮＳＰ０５２をアッセイすることにより試験することができる。
【００８５】
ある態様において、本発明に従うムテインは、本発明に従い、ストリンジェントな条件下で、ＩＮＳＰ０５２をコードするＤＮＡ又はＲＮＡとハイブリダイズする核酸、例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡによりコードされるタンパク質を含む。「ストリンジェント条件」という用語は、ハイブリダイズ条件及びこれに続く洗浄条件を意味し、これらの条件を当業者は慣習的に「ストリンジェント」と呼ぶ。Ausubel他、Current Protocols in Molecular Biology(上述), Interscience, N.Y., §§6.3及び6.4(1987, 1992)、及びSambrook他(Sambrook, J. C., Fritsch, E. F., 及びManiatis, T.(1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY)を参照されたい。
【００８６】
制限はないが、ストリンジェント条件の例は、例えば５分間にわたって２×ＳＳＣ及び０．５％ＳＤＳ中で、１５分間にわたって２×ＳＳＣ及び０．１％ＳＤＳ中で、３０〜６０分間にわたって３７℃で０．１×ＳＳＣ及び０．５％ＳＤＳ中で、次いで３０〜６０分間にわたって６８℃で０．１×ＳＳＣ及び０．５％ＳＤＳ中で、研究中のハイブリッドの計算上のＴｍを１２〜２０℃下回る温度で洗浄する洗浄条件を含む。当業者には明らかなように、ストリンジェント条件がＤＮＡ配列、オリゴヌクレオチド・プローブ（１０〜４０塩基）又は混合型オリゴヌクレオチド・プローブの長さにも依存する。混合型プローブが使用される場合、ＳＳＣの代わりに塩化テトラメチルアンモニウム（ＴＭＡＣ）を使用することが好ましい。上述のAusubelを参照されたい。
【００８７】
いずれのこのようなムテインも、配列番号２２と実質的に同様の、あるいはより良好な生物活性を有するように、配列番号２２の配列と十分に重複するアミノ酸配列を有する。
【００８８】
好ましい態様において、いずれかのこのようなムテインは、配列番号１６の配列と少なくとも４０％の同一性又は相同性を有する。より好ましくは、これは、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は最も好ましくは、少なくとも９０％のその同一性又は相同性を有する。
【００８９】
同一性は、２又はそれ以上のポリペプチド配列間、あるいは２又はそれ以上のポリヌクレオチド配列間のこれらの配列を比較することにより決定される関係を反映する。一般に、同一性は、比較される配列の全長にわたる、２つのポリヌクレオチド配列又は２つのポリペプチド配列のそれぞれの正確なヌクレオチド間又はアミノ酸間の一致を意味する。
【００９０】
正確な一致が存在しない場合の配列のために、「％同一性」が決定される。一般的に比較する２つの配列を整列させ、配列間の最大相関を与える。これは、片方又は両方の配列中に「ギャップ」を挿入することを含み、アライメントの程度を増強する。％同一性は、比較される各配列の全長（いわゆるグローバルアライメント）にわたり決定することができ、これは同じ又は極めて近似した長さの配列に特に有用であり、あるいはより短く定義された長さ（いわゆるローカルアライメント）にわたり決定することができ、これは異なる長さの配列により適当である。
【００９１】
２又は複数の配列の同一性又は相同性を比較する方法は、当業界において周知である。従って、例えば、ウィスコンシン配列分析パッケージ（Wisconsin Sequence Analysis Package）、バージョン９．１において入手可能なプログラム(Devereux et al., 1984)、例えば、プログラムＢＥＳＴＦＩＴ及びＧＡＰを２つのポリヌクレオチド間の％同一性及び、２つのポリペプチド配列間の％同一性及び％相同性を決定するために使用することができる。ＢＥＳＴＦＩＴは、ＳｍｉｔｈとＷａｔｅｒｍａｎの「ローカルホモロジー」アルゴリズムを使用し(Smith and Waterman, 1981)、そして、２つの配列間の類似性の最良な単一領域を発見する。配列間の同一性及び／又は類似性を決定するための他のプログラムもまた、当業界において既知であり、例えば、プログラムのＢＬＡＳＴファミリー(Altschul et al., 1990; Altschul et al., 1997、www. ncbi. nlm. nih. gov においてＮＣＢＩのホームページを介して構築される)、及びＦＡＳＴＡ（Pearson, 1990 ; Pearson and Lipman, 1988)がある。
【００９２】
本発明に従い使用することができるＩＮＳＰ０５２のムテイン、又はこれらをコードする核酸は、過剰な実験をすることなく、本明細書に供される技術及びガイドラインに基づき、当業者により慣習的に得ることができる置換ペプチド又はポリヌクレオチドとして実質的に対応する配列の有限のセットを含む。
【００９３】
本発明に関するムテインの好ましい変化は、「保存的な」置換として知られる。ＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又はタンパク質の保存的なアミノ酸置換は、グループのメンバー間の置換基が分子の生物活性を保存するであろう、十分に類似する物理化学的な特徴を有する群における同義アミノ酸を含んでよい(Grantham, 1974)。また、アミノ酸の挿入及び欠失は、特に、当該挿入又は欠失が少数、例えば、３０以下、そして好ましくは１０以下のアミノ酸のみを含み、そして、機能的構造に重大なアミノ酸、例えば、システイン残基を除去又は置換しない場合、これらの機能を変化することなく上に定義した配列において作製することができる。このような欠失、及び／又は挿入により産出されたタンパク質及びムテインは、本発明の範囲内である。
【００９４】
好ましくは、該同義アミノ酸グループは表Ｉに定義されるものである。より好ましくは該同義アミノ酸グループは、表ＩＩに定義されるものであり；そして最も好ましくは、該同義アミノ酸グループは、表ＩＩＩに定義されるものである。
【００９５】
【表１】
【００９６】
【表２】
【００９７】
【表３】
【００９８】
本発明の使用のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又はタンパク質のムテインを得るために使用することができるタンパク質中のアミノ酸置換の産生の例は、いずれかの既知の方法、例えば、Markらによる米国特許第第4,959, 314号、第4, 588, 585号及び第4, 737,462号; Koths らによる第5,116, 943 号；Namen らによる第4,965, 195号；及びLeeらによる第5,017, 691号において供され、そしてリジン置換タンパク質は米国特許第4,904, 584号(Shaw ら)において供される。
【００９９】
「融合タンパク質」の用語は、他のタンパク質と融合されたＩＮＳＰ０５２、又はそのムテインを含んで成るポリペプチドを意味する。この他のタンパク質は、例えば体液中の滞留時間が長い。例えばヒトの体内の半減期のような分子の生体活性を改善することができるタンパク質の全て又は官能性部分に融合されたＩＮＳＰ０５２の全て又は官能性部分を含む融合タンパク質が、本発明において好ましい。好ましい態様において、融合タンパク質は、免疫グロブリン（Ｉｇ）融合を含む。免疫グロブリンの全て又は一部に融合されたＩＮＳＰ０５２の全て又は一部を含む融合タンパク質が、極めて好ましい。これらは、単量体又は多量体、ヘテロ又はホモ多量体であってよい。有利には、融合タンパク質は免疫グロブリンの定常領域、具体的には免疫グロブリンのＦｃ部分を含んで成る。免疫グロブリンがＩｇＧ１又はＩｇＧ２イソ型である態様が、本発明に従いさらに好ましい。好ましくは、融合はＦｃ融合である。好ましくは、融合タンパク質は配列番号３０から成る。
【０１００】
このように、ＩＮＳＰ０５２は、他のタンパク質、ポリペプチドなど、例えば、免疫グロブリン又はその断片に融合することができる。融合は直接的であるか、又は１〜３アミノ酸残基長又はそれ以上という短さであってよい短リンカー・ペプチド、例えば１３アミノ酸残基長を介して形成することができる。前記リンカーは、例えば、配列Ｅ−Ｆ−Ｍ（Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｍｅｔ）のトリペプチド、又はＩＮＳＰ０５２配列と免疫グロブリン配列との間に導入されたＧｌｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｍｅｔを含む１３アミノ酸リンカー配列であってよい。
【０１０１】
本明細書中に使用される「官能性誘導体」は、ＩＮＳＰ０５２の誘導体、及びこれらのムテイン及び融合タンパク質を網羅する。これらは当業界に知られた手段によって、残基又はＮ−又はＣ−末端基上の側鎖として生じる官能基から調製することができ、そしてこれらが医薬的に許容されるままである限り、すなわち、配列番号２２の活性と少なくとも実質的に同様のタンパク質の活性を破壊することがなく、そしてこの活性を含有する組成物に毒性を与えることがない限り、本発明に含まれる。従って、好ましい態様において、官能性誘導体は、アミノ酸残基上の１又は複数の側鎖として発生する１又は複数の官能基に結合された少なくとも１つの部分を含んで成る。
【０１０２】
本発明に従い、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）側鎖は、極めて好ましい部分である。ＰＥＧ側鎖は抗原部位をマスキングし、そして体液中でＰＥＧ側鎖が結合された物質の残留時間を延長することができる。その他の誘導体は、カルボキシル基の脂肪族エステル、アンモニア又は第１級若しくは第２級アミンとの反応によるカルボキシル基のアミド、アシル部分（例えば、アルカノイル又は炭素環式アロイル基）とともに形成されたアミノ酸残基の遊離アミノ基のＮ−アシル誘導体、又はアシル部分とともに形成された遊離ヒドロキシル基（例えば、セリル又はトレオニル残基）のＯ−アシル誘導体を含む。
【０１０３】
ＩＮＳＰ０５２及びそのムテイン及び融合タンパク質の「活性画分」は、タンパク質分子のポリペプチド鎖の断片又は前駆体の単独の状態、又は関連分子又は残基、例えば糖又はリン酸塩残基との連結状態、あるいはタンパク質部分又は糖残基単独の凝集体を網羅するが、前記活性画分は配列番号２２と少なくとも実質的に同様の活性を有するものとする。
【０１０４】
本発明によれば、ＩＮＳＰ０５２は、前記核酸分子を含むベクターの形態でヒトの身体に投与することもできる。従って、本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤を製造するための、前記核酸分子を含んで成るベクターの使用に関する。好ましくは、該ベクターは、ＩＮＳＰ０５２のコード配列の全て又は部分に作動可能的に連結されたプロモーターを含む、発現ベクターである。さらに好ましい態様において、該ベクターは遺伝子治療ベクターである。遺伝子治療ベクターは、当業界において既知であり、その大半は、ウイルス由来のベクター、例えばアデノウイルス又はレンチウイルス・ベクターである。
【０１０５】
本発明に従い、ＩＮＳＰ０５２は、ＩＮＳＰ０５２を産生及び／又は分泌する細胞の形態で、ヒトの身体に投与することもできる。従って、本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の製造のためのＩＮＳＰ０５２発現細胞の使用に関し、すなわち、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び／又は予防するための細胞療法に関する。該細胞は、ＩＮＳＰ０５２自然産生細胞、及び／又は組換えＩＮＳＰ０５２を産生するトランスフェクト型細胞であってよい。好ましいものは、多量のタンパク質を発現させ分泌する細胞、例えば、ＩＮＳＰ０５２をコードする核酸分子を含んで成る発現ベクターの多数のコピーを担持する過剰発現細胞である。
【０１０６】
本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び／又は予防するための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２の全て又は一部をコードする核酸分子を含んで成るベクターを含んで成る細胞に関する。本発明によるポリペプチドを産生するために遺伝子改変された細胞もまた、本発明の範囲に含まれる。
【０１０７】
通常はサイレントであるか、あるいは十分でない量の阻害因子を発現させる細胞中においてＩＮＳＰ０５２の内在的産生を誘発及び/又は促進するための発現ベクターの使用もまた、本発明に関して考慮される。従って、本発明は、所望のタンパク質を産生するための内在的遺伝子活性化（ＥＧＡ）として知られる技術を利用する。
【０１０８】
本発明に従い、ＩＮＳＰ０５２は、単独で、あるいは、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び／又は予防するための相加的又は相乗的な効果を得るために、いくつかのほかの治療法又は薬剤との組み合わせ（例えば、多剤療法）において投与することができる。従って、好ましくは、本発明の薬剤はさらに；
・ インターフェロン、特にインターフェロン−α、インターフェロン−β、又はインターフェロン−γ、あるいは
・ 腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニスト、特に可溶性ＴＮＦＲ、例えば可溶性ｐ５５（ＴＢＰＩ）及び／又は可溶性ｐ７５（ＴＢＰＩＩ）、あるいは
・ 抗感染症剤、あるいは
・ 抗血液凝固剤、を含んで成る。
【０１０９】
前記抗血液凝固剤は、ニトレート、ニトログリセリン、イソソルビド、ジニトレート、イソソルビドモノニトレート、ビタミンＣ又はＥ、β−ブロッカー、プロプラノロール（インデラル、シプラー）、ラベタロール（ノルマデート）、アセブトロール（セクトラル）、アテノロール（アテン、テノルミン、ベタカルド、テンシミン）、メトプロロール（ベタロック、メトラル）、ビソプロロール（コンコール）、カルベジロール（カルベジル、カルロック、カルビル）、抗凝固薬、ヘパリン、ワルファリン、抗血小板薬、アスピリン、糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体アンタゴニスト、クロピドグレル、ＮＳＡＩＤ、エノキサパリン（クレキサン）、ダルテパリン（フラグミン）、レビパリン（クリバリン）、アブシキシマブ（レオプロ、セントコール）、エプチフィバチド、ラミフィバン、チロフィバン、アブシキシマブ、クロピドグレルデプラット、クロピレット）、チクロピジン（チクリド、チクロップ）、ヒルジン、ビバリルジン、アルガトロバン、ダナパロイド、スタチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害因子、ラミプリル（カルデース）、カプトプリル（カポトリル、アセテン）、エナラプリル（エンバス、バソノルム）、リシノプリル（プレベース、リプリル、ゼストリル）、ホシノプリル、カルシウムチャネルブロッカー、ベラパミル（カラン、イソプチン）、ニフェジピン（アダラット、デピン）、ニカルジピン（カルデン）、アムロジピン（アムデピン、カルバジル）、ジルチアゼム（カルジゼム、ジルゼム）、ベプリジル（バスコール）、ラノラジン、ニコランジル、抗生物質、テトラサイクリン、キノロン、葉酸、血栓溶解薬、組換え組織プラスミノーゲン活性化因子（ｒｔ−Ｐａｓ）、アルテプラーゼ（アクティバーゼ及びレテプラーゼ（レトバーセ））、フィブリン−依存薬、アンクロッド、バトロキソビン（デフィブラーゼ）、チエノピリジン、クロピドグレル（プラビックス）、チクロピジン（チクリド）、チエノピリジン（クロピドグレル）、直接トロンビン阻害因子（ＤＴＩ）、ヒルジン、アルガトロバン（ノバスタン）、ビバリルジン（アンジオマックス）、ダナプロイド（オルガラン）、レピルジン（レフルダン）、デシルジン（レバスク）、イノガトラン、エフェガトラン、キシメラガトラン（エクサンタ）、抗線溶薬、トラネキサム酸、又はεアミノ−カプロン酸から成る群から選択される。
【０１１０】
抗感染症剤は、ペンタミジン、抗生物質、コリスチン、アミノグリコシド又はアンホテリシンＢから選択することができる。
【０１１１】
全ての治療は、同時、順次、又は別々の使用が意図される。
【０１１２】
ＩＮＳＰ０５２と一緒に、１又は複数の上記物質を含んで成る医薬組成物は、本発明の範囲内である。
【０１１３】
本発明のさらなる態様において、ＩＮＳＰ０５２は、インターフェロンとの組み合わせにおいて使用される。好ましくは、該インターフェロンは、インターフェロン−α、インターフェロン−β、又はインターフェロン−γから選択される。インターフェロンは、また、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患と関係している。例えば、インターフェロン−αは、好中球減少症、血小板減少症、Ｃ型肝炎、又はＢ型肝炎に関係している。例えば、インターフェロン−βは、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ウイルス疾患、ＨＩＶ感染症及びインフルエンザに関係している。例えば、インターフェロン−γは、結核、ウイルス疾患、内蔵又は皮膚リーシュマニア症、ＨＩＶ感染症、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、インフルエンザ、糖尿病、マラリア、細菌感染症、抗酸菌症及びフィラリア性象皮病に関係している。
【０１１４】
本発明のよりさらなる態様において、ＩＮＳＰ０５２は、ＴＮＦアンタゴニストとの組み合わせにおいて使用される。ＴＮＦアンタゴニストは、いくつかの方法においてこれらの活性を発揮する。第１に、アンタゴニストは、十分な親和性及び特異性を持ってＴＮＦ分子自体に結合するか又はこれを封鎖することにより、ＴＮＦ受容体結合に関与するＴＮＦエピトープを部分的又は実質的に中和することができる（以降「封鎖アンタゴニストと呼ぶ）。封鎖アンタゴニストは、例えば、ＴＮＦに対する抗体であってよい。例えば、ＴＮＦ−αは、ウイルス疾患、マラリア、敗血症性ショック、細菌感染症、抗酸菌症、細菌性髄膜炎、ＨＩＶ感染症及び結核に関係している。
【０１１５】
あるいは、ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦ結合後の細胞表面受容体によって活性化されたＴＮＦシグナル伝達経路を阻害することもできる（以降シグナル伝達アンタゴニストと呼ぶ）。ＴＮＦアンタゴニストは、ＴＮＦが増殖及び免疫グロブリン分泌を引き起こすin vitroの感受性細胞系、例えばヒトＢ細胞上の天然型ＴＮＦの活性に対するＴＮＦアンタゴニストの効果に関して候補物質に慣習的なスクリーニングを施すことによって容易に同定され、そして評価される。アッセイは、候補アンタゴニストを種々に希釈した、例えば、アッセイにおいて使用されるＴＮＦのモル量の０．１〜１００倍に希釈したＴＮＦ配合物、及びＴＮＦを含まないか又はアンタゴニストしか含まない対照を含有する(Tucci他、1992)。
【０１１６】
封鎖アンタゴニストは、本発明に従って使用されるのに好ましいＴＮＦアンタゴニストである。封鎖アンタゴニストの中でも、高い親和性を持ってＴＮＦと結合し、そして免疫原性が低いポリペプチドが好ましい。可溶性ＴＮＦ受容体分子、及びＴＮＦに対する中和抗体が特に好ましい。例えば、ＴＮＦ−ＲＩ（ｐ５５）及びＴＮＦ−ＲＩＩ（ｐ７５）の可溶性形態が本発明において有用である。受容体の細胞外ドメイン又は受容体の官能性部分を含む、これらの受容体の切頭型形態が、本発明に基づいて、より具体的に好ましいアンタゴニストである。切頭型可溶性ＴＮＦのＩ型及びＩＩ型受容体が例えば欧州特許第914431号明細書に記載されている。
【０１１７】
ＴＮＦ受容体の切頭形態は可溶性であり、そして約３０ｋＤａ又は４０ｋＤａのＴＮＦ阻害結合タンパク質として尿及び血清中に検出されている。これらのタンパク質はそれぞれＴＢＰＩ及びＴＢＰＩＩと呼ばれる（Engelmann他、1990）。ＴＮＦアンタゴニスト及び／又はインターフェロンと同時に、又は順次に、又は別々にＩＮＳＰ０５２を使用することが本発明において好ましい。
【０１１８】
本発明従い、ＴＢＰＩ及びＴＢＰＩＩは、ＩＮＳＰ０５２との組み合わせで使用される好ましいＴＮＦアンタゴニストである。該受容体分子の誘導体、断片、領域及び生体活性部分は、本発明に使用することもできる受容体分子と機能上類似している。受容体分子のこのような生体活性の等価物又は誘導体は、受容体分子をコードするポリペプチド又は配列の部分であって、十分なサイズを有し、そして、膜結合型ＴＮＦ受容体との相互作用が阻害又は遮蔽されるような親和性を伴いＴＮＦに結合できるものを意味する。
【０１１９】
更に好ましい態様において、ヒト可溶性ＴＮＦ−ＲＩ（ＴＢＰＩ）は、本発明に従って使用されるＴＮＦアンタゴニストである。天然型及び組換え型の可溶性ＴＮＦ受容体分子、及びこれらの生成方法は、欧州特許第308 378号、同第398,327号及び同第433,900号明細書に記載されている。
【０１２０】
疾患の初期段階にＴＮＦ−αを遮蔽することが有益な場合がある一方、より後の段階において、ＴＮＦ自体が疾患の進行において有益な効果を発揮し得ることが論じられている(Abraham他、2000)。従って、本発明はさらに、特に疾患の進行段階における、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療又は予防のためのＩＮＳＰ０５２及びＴＮＦの組み合わせに関する。本発明に従い、ＴＮＦ−α又はＴＮＦ−βを使用することができる。
【０１２１】
本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための、任意に１又は複数の医薬的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤と一緒に、ＩＮＳＰ０５２を含んで成る医薬組成物に関する。該医薬組成物はさらに、上述のいずれかのさらなる成分、及び好ましくはインターフェロンを含んでよい。
【０１２２】
本発明の医薬組成物は、本発明に従う核酸分子を含んで成るベクター、又はＩＮＳＰ０５２を発現させる細胞を含んで成ってよい。
【０１２３】
この薬剤の活性成分、すなわち本発明に従うポリペプチド、核酸又は細胞、又はこれらの組み合わせ、並びに上述の物質の組み合わせは、種々の方法で個体に投与することができる。投与経路は、皮膚内、経皮（例えば徐放性配合物）、筋内、腹腔内、静脈内、皮下、経口、硬膜外、局所及び鼻腔内経路を含む。任意のその他の治療上効果的な投与経路、例えば上皮組織又は内皮組織を通した吸収、又は遺伝子治療を用いることもできる。遺伝子治療の場合、活性物質をコードするＤＮＡ分子が患者に投与され（例えばベクターを介して）、これにより、活性物質はin vivoで発現し、そして分泌される。加えて、本発明に従うタンパク質は、生体活性物質、例えば、医薬的に許容される界面活性剤、賦形剤、担体、希釈剤及びビヒクルの他の成分と一緒に投与することができる。
【０１２４】
「医薬的に許容される」という用語の定義は、活性成分の生体活性の効果を妨害することがなく、また投与される宿主に対して毒性でない、いずれかの担体を包含するものとする。例えば、非経口投与の場合、活性タンパク質は、ビヒクル、例えば、生理食塩水、デキストロース溶液、血清アルブミン及びリンゲル溶液中の注射用投与形態において調製することができる。
【０１２５】
非経口（例えば静脈、皮下、筋内）投与の場合、活性タンパク質は、医薬的に許容される非経口用ビヒクル（例えば、水、生理食塩水、デキストロース溶液）、及び等張性（例えば、マンニトール）又は化学安定性（例えば、保存剤及び緩衝液）を維持する添加剤とともに、溶液、懸濁液、エマルジョン又は凍結乾燥粉末として調製することができる。この配合物は、慣習的に使用される技術によって滅菌される。
【０１２６】
本発明に従う活性タンパク質の生物学的利用率は、ヒトの体内の分子の半減期を増大させる複雑な手順を用いることにより、例えば国際公開第92/13095号公報に記載されているようにポリエチレングリコールに分子を連結することによって改善することができる。
【０１２７】
該活性タンパク質の治療上有効な量は、受容体のタイプ、本発明の物質のその受容体に対する親和性、これにより示される任意の滞留細胞毒性の活性、投与経路、患者の臨床的状態を含む、多くの変数の関数となる。
【０１２８】
「治療上有効な量」は、投与した場合、本発明に従う物質がin vivoの疾患の発生又は進行に対して有益な効果をもたらすような量である。単回投与量又は複数回投与量として個体に投与される量は、ＩＮＳＰ０５２の薬物動態特性、投与経路、患者の状態及び特徴（性別、年齢、体重、健康状態、大きさ）、症状の程度、併用治療、治療頻度及び所望の効果を含む、種々の因子に応じて変化することになる。確立された投与量範囲は当業者の能力の範囲内で調節され操作される。
【０１２９】
本発明に従うポリペプチドの所要の投与量は、約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、又は約０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１〜５ｍｇ／ｋｇ、又は約１〜３ｍｇ／ｋｇであるが、上述のように投与量は、多くの部分が治療時の判断に委ねられる。本発明の薬剤は毎日、隔日又は週に３回投与することができる。
【０１３０】
一日投与量は通常、所望の結果を得るのに効果的な複数回に分けられた形態、又は徐放性形態で与えられる。２回目又はそれ以降の投与は、個体への最初又は前回の投与量と同じ量、又はこれよりも少ない量、又はこれよりも多い量の投与量で行うことができる。２回目又はそれ以降の投与は、疾患の発症中又は発症前に投与することができる。
【０１３１】
本発明はさらに、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患を治療及び/又は予防するための方法であって、治療及び/又は予防を必要とする患者に、本発明に従う有効量の物質を、任意には医薬的に許容される担体と一緒に投与することを含む方法に関する。あるいは、または、これに加えて、任意に発現ベクター内に含まれるＩＮＳＰ０５２又は本発明の核酸分子を産生する細胞を、本発明に従い投与することができる。
【０１３２】
該発現ベクターは、全身投与することができる。好ましくは、該発現ベクターは、筋内注射によって投与される。特に。肺が疾患（例えば、肺の感染症）に関与する場合、さらに好ましい投与経路は吸入である。特に皮膚が関与する場合、ＩＮＳＰ０５２配列を含む発現ベクター、又は本発明に従うＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの局所投与が、さらに好ましい投与経路である。
【０１３３】
本発明はさらに、有効量のＩＮＳＰ０５２と医薬的に許容される担体とを混和することを含む医薬組成物の製造方法、及び有効量のＩＮＳＰ０５２を、当該治療及び/又は予防を必要とする宿主に投与することを含む、感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び/又は予防方法に関する。
【０１３４】
学術論文又は概要、公開済又は未公開の特許出願明細書、発行済特許明細書又はその他の参考文献を含む、本発明中に引用された全ての参考文献全体を、参考文献に提供された全てのデータ、表、図面及び本文を含めて、参考のため本明細書中に引用する。加えて、本明細書中に引用された参考文献中に引用された文献の内容全体も、参考のため本明細書中に組み込まれる。
【０１３５】
周知の方法工程、慣習的な方法工程、周知の方法又は慣習的な方法に言及しても、このことは、本発明の特徴、説明又は実施態様が従来技術において開示、教示又は示唆されることの承認には決してならない。
【０１３６】
具体的な実施態様の前記説明により、本発明の全般的な性質が完全に明らかになるので、他者が当業者の知識を応用することによって（本明細書中に引用した参考文献の内容を含む）、本発明の全般的な概念を逸脱することなしに、不必要な試験を行うことなく、このような具体的な実施態様を種々の用途のために容易に変更及び/又は改変することが可能である。従ってこのような改変及び/又は変更は、その意味において、本明細書中に提供された教示及び指針に基づいた、開示された実施態様の等価物の範囲であるものとする。言うまでもなく、本明細書中の語法又は術語は説明を目的としたものであり、制限を有するものではなく、従って本明細書の術語又は語法は、当業者の知識と組み合わせて、本明細書中に示された教示及び指針に照らして、当業者により解釈されるべきである。
【０１３７】
以上本発明を説明してきたが、下記実施例を参照することにより、本発明はより容易に理解される。実施例は説明のために提供するものであって、本発明を限定するものではない。
【実施例】
【０１３８】
実施例１−クローニング及び発現
細胞外ＩＮＳＰ０５２のクローニング、哺乳類細胞発現ベクターの構築、哺乳類細胞における発現及び細胞外ＩＮＳＰ０５２及び細胞外ドメインのヒスチジンタグ化バージョンの精製は、国際出願ＷＯ２００３／０９３３１６号及びＰＣＴ／ＧＢ／２００４／００４７７２号の実施例２及び３に記載されている。
【０１３９】
配列番号３０に示される配列を有するポリペプチド（以降、成熟ＩＮＳＰ０５２の細胞外ドメインのＦｃ融合物を意味する）を２回（各５００ｍｌ）精製し、そして７．９ｍｇ及び２．４ｍｇを回収した。配列番号３２に示される配列を有するポリペプチド（以降、第１Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２又はＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ１を意味する）を精製し、そして回収した（それぞれ０．７ｍｇ及び０．３ｍｇの回収物の２回の精製（５００ｍｌ）及び回収物７ｍｇの１回の精製）。配列番号３３に示される配列を有するポリペプチド（以降、第２Ｉｇドメインを欠失している細胞外ＩＮＳＰ０５２又はＩＮＳＰ０５２−ＥＣ−ＤＥＬ ＩＧ２を意味する）を精製し（５００ｍｌ）、そしてウェスタンブロットレベルにおいて回収した。
【０１４０】
実施例２−ＩＮＳＰ０５２の結合パートナー
Ｉ．導入
可溶性ＩＮＳＰ０５２（ｓＩＮＳＰ０５２−膜結合ＩＮＳＰ０５２の成熟細胞外部分に対応する、配列番号２２）の潜在的な結合パートナーを同定するためにＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ技術（表面増強レーザー脱離／イオン化飛行時間質量分光法／ProteinChipTMアレイ）を使用した。端的には、以下の工程を行った。
１． マウスから試料を獲得する、
２． ＳＥＬＤＩ分析及び最適化、
３． ビーズにスケールアップ、
４． ＳＥＬＤＩにおいて溶出物を分析する、
５． ビーズ溶出物のＨＰＬＣ、
６． チップ及びゲルのＨＰＬＣ画分の分析、
７． 単離タンパク質の消化、及び
８． ナノＬＣ ＭＳ／ＭＳ及びタンパク質の同定。
【０１４１】
ＩＩ．材料及び方法
まず、静脈内ＬＰＳ又はＮａＣｌ（コントロール）をメスＣＨ３マウスに注射し、そして３時間後心臓内パンキュレーション（puncuration）を介して血液を採取した。該マウスに３００μｇ／ＫｇのＬＰＳを腹腔内注射した。血漿のために、該血液をヘパリン処理チューブ中に採取し、そして血清のために未処理チューブ中に採取した。該チューブを１３，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した。上清（血清又は血漿試料）を回収し、そして実験のために使用した。
【０１４２】
その後、１．２５μｇのベイトタンパク質ｓＩＮＳＰ０５２又はコントロールＩＬ−１８（ＩＬ−１８ＢＰ結合コントロールタンパク質としてのＩＬ−１８）をRS100 ProteinChipTM アレイ(Ciphergen Biosystems Inc., Fremont, CA)上の各スポットに適用し、そして加湿チャンバー中で２時間（室温にて）インキュベートした。非特異的結合部位を、０．５Ｍエタノールアミン／ＰＢＳで１時間（室温にて）ブロックした。アレイを５分間、ＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００で３回洗浄した。血漿試料を、ＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００において１:１に希釈し、そして該アレイにおいてインキュベートした（２時間、室温）。４時間のインキュベーション時間で該試料の至適条件に達する。その後、該アレイをＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００で２×５分間、そして１Ｍの尿素／２％ＣＨＡＰＳ／０．５ＭのＮａＣｌ／５０Ｍのトリス ｐＨ９で１×３分間洗浄した。これらを５ｍＭのＨＥＰＥＳ ｐＨ７．２でリンスした（１５秒間、室温）。該基質、シナピン酸をアレイ上の各スポットに適用し、そしてProteinChipTM Biology System IIを使用して、ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳにより質量分析を行った。レーザー強度２００、感度９及び１０、並びに１０〜４０ｋＤａ及び２０〜１６０ｋＤａの間のマスフォーカスを使用してスペクトルが産生された。
【０１４３】
異なるチップ由来のコントロール及び試料のスペクトルを同じファイルに併せ、そして分析のために等しく処理した。製造業者の指示に従い、Ciphergen biosystems Inc.由来の一体化（all in 1)タンパク質標準を使用して該スペクトルを較正した。スペクトル間の比較のために、これらを全イオン電流に対して標準化した。異なる形で現されるピークを、Ciphergen Biomarker Wizardソフトウェアを使用して同定した。
【０１４４】
結合タンパク質の同定のために、ＩＤＭアフィニティービーズ(Ciphergen biosystems)を使用し、ＲＳ１００チップにおいて使用されたものと同様のプロトコルを適用した。５０ｍＭ酢酸ナトリウムバッファー，ｐＨ５．０中の１ｍｇのベイトタンパク質（ｓＩＮＳＰ０５２）を、６００μｌのビーズにおいて室温で一晩インキュベートした。該ビーズを５０ｍＭの酢酸ナトリウムバッファー，ｐＨ５．０で２×５分間洗浄し、そして０．５Ｍのトリス−ＨＣｌ，ｐＨ９．０、０．１％トリトン−Ｘ１００で２時間ブロックした。これらをＰＢＳ中の０．１％トリトン−Ｘ１００で３×１０分間、そしてＰＢＳ中で２×１０分間洗浄した。血漿試料をＰＢＳ、０．１％トリトンＸ−１００において１：１に希釈し、そしてビーズ上でインキュベートした（一晩、室温）。０．２Ｍの尿素／０．１％ＣＨＡＰＳ／０．２ＭのＮａＣｌ／５０ｍＭのトリス ｐＨ７．５で２×５分間、そしてＰＢＳで２×５分間洗浄した。相互作用タンパク質を、５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡ（トリ−ホスファチジン酸）で溶出させた。溶出液を、ＮＰ２０プロテインチップを使用して分析した。５μｌの溶出液をスポット毎に添加した。スポットを脱イオン水で洗浄し、そして不希釈シナピン酸を添加した。レーザー強度１８０／２００、感度８、並びに２〜３０ｋＤａ及び２０〜１６０ｋＤａの間のマスフォーカスを使用してスペクトルが産生された。
【０１４５】
更に該溶出液を、０．２ｍｌ／分の流速で、２．１ｍｍ直径を伴うＣ４（ブチル）カラム（逆相）(VYDAC 214TP(TM) Series, Grace Vydac)において分画した。該カラムを、０．１％ＴＦＡ中０〜９０％の連続線形アセトニトリル勾配で展開した。１分画分を回収した。該画分を凍結乾燥し、そして該タンパク質濃度をＮＰ２０プロテインチップを使用して決定した。
【０１４６】
注目のタンパク質を含有するＲＰ−ＨＰＬＣ画分を、製造業者のプロトコルに従い、RapigestTMSF (Waters)を使用して同定のためにトリプシン消化した。
【０１４７】
プールした画分はまた、ゲル電気泳動及び銀染色により分析した。
【０１４８】
質量分光実験は、Ｑ−ＳＴＡＲ四重極解／飛行時間機器(MDS/Sciex)を使用して行った。インターフェースを、キャピラリーＣ−１８ＲＰカラム（７５μｍの内径、１５０ｍｍの長さ）を備えるアルティメイトＨＰＬＣシステム(LC-Packings)に接続した。ペプチド消化物を、Ｆａｍｏｓオートサンプラー (LC-Packings)を使用してカラムに注入し、そして０．１％ギ酸の存在下で水中のアセトニトリルの勾配により、２００ｎｌ／分の流速において分離させた。カラムをナノエミッターに接続し、そして２４００Ｖの電流を使用して該溶出液を質量分光計の開口部にスプレーした。該質量分光計は、データ依存収集モードにおいて操作する。［Ｍ＋２Ｈ］2+又は［Ｍ＋３Ｈ］3+前駆イオンが２０カウント／秒のシグナルを決定するときに、第２の調査スキャンは、ＭＳモードにて行い、その後４ＭＳ／ＭＳスキャンを行う。前駆イオンの質量及び電荷に依存して自動的に設定された衝突エネルギーにおける標的ガスとして窒素を使用し、タンデム質量スペクトルが得られた。
【０１４９】
ＭＳ／ＭＳデータを、Mascotプログラムに転送し、そして屋内で利用可能なタンパク質データベースにおいて行われる検索後、ペプチド配列を決定した。
【０１５０】
使用したプロトコルを以下に供する：
【０１５１】
ａ）ＣＩＰＨＥＲＧＥＮ ＲＳ １００プロテインチップを使用するタンパク質結合パートナーの獲得
１． ＮａＨＣＯ3中に１：３に希釈した５μｇの１ｍｇ／ｍｌタンパク質を各スポットに添加した。
２． 加湿チャンバー中で２時間インキュベートした。
３． ５０μｌの０．５Ｍエタノールアミンを添加し、そして混合することにより室温で１時間ブロックした（ミクロミックス５ ２０／０２／６０）。
４． ＰＢＳ中の０．１％トリトン×１００で２×５分間洗浄した（ミクロミックス５ ２０／３／５）。
５． 試料を調製し、そして５０μｌの血漿溶液／スポットを添加した。
ｉ．ＰＢＳ／０．１％トリトン中１：１に希釈したＬＳＰ刺激化マウス由来の血漿
６． バイオプロセッサーを５００ｒｐｍで１分間遠心分離した。室温で２時間インキュベートし、振盪した（ミクロミックス５ ２０／２／１２０）。
７． 以下のとおり洗浄した。
ｉｉ．ＰＢＳ中０．１％トリトン×１００で３×５分間
ｉｉｉ．１Ｍ尿素／２％ＣＨＡＰＳ／０．５Ｍ ＮａＣｌ／５０ｍＭトリス ｐＨ９で１×３分間
８． ホルダーからアレイをはずし、そしてこれを５ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ７．５を含有する１５ｍｌファルコン中においた（１０秒間）。
９． ２×０．５μｌのＳＰＡ溶液を添加した。
１０．空気乾燥させ、そして試料を分析した。
１１．該チップを、以下の読み取り条件を使用して、Ｃｉｐｈｅｒｇｅｎ ＳＥＬＤＩで分析した：２００−１０−４０−６５−１００−５１又は２００−９−２０−１６０−１６０−５０（レーザー強度−感度−マスフォーカス低−マスフォーカス高−最大質量−マスフォーカス）。
【０１５２】
ｂ）アフィニティービーズにＩＮＳＰ０５２に結合し、そしてマウス血漿と共にインキュベートする。
ｉ）ベイトタンパク質をビーズに結合させる。
１． ビーズをとり、そして室温で３０分間保つ。
２． ローラー上でビーズを５分間混合する。
３． ２００μｌのビーズを１．５ｍｌのエッペンドルフチューブに添加する。
４． １ｍｌの水で６回洗浄する。
５． ６００μｌの
ａ．２．２ｍｇ／ｍｌのＩＮＳＰ０５２（１３４９５Ｆ１３Ｐ１ １．７ｍｇ／ｍｌを４ｍｇ／ｍｌに濃縮した）（合計１３２０μｇ）
ｂ．酢酸ナトリウムバッファーｐＨ５．０中の１．９５ｍｇ／ｍｌのＩＬ１８（ｈＩＬ１８成熟，大腸菌，Ｂａｔｃｈ ＬＭ １０８２１−１１０ １ｍｇ／ｍｌを４ｍｇ／ｍｌに濃縮した）（合計１１７０μｇ）
を添加し、そしてローラー上室温で一晩インキュベートした。
ｉｉ）非結合部位を飽和し、血漿と共にインキュベートする。
６． 上清を除去し、タンパク質濃度を決定し、そして貯蔵した（タンパク質濃度については以下を参照のこと）
７． ２×１ｍｌの５０ｍＭ酢酸ナトリウムバッファー５．０で洗浄した。
８． ６００μｌの０．５Ｍトリス−ＨＣＬ ｐＨ９、０．１％トリトン×１００（残存している可能性のある活性群を非活性化するため）を添加し、そして室温においてローラー上で２時間インキュベートする。
９． ＰＢＳ中の１ｍｌの０．１％トリトン×１００で３×１０分間洗浄する。
１０． １ｍｌのＰＢＳで２×１０分間洗浄する。
１１． ２０μｌのＩＮＳＰ０５２結合ビーズを８つの１．５ｍｌエッペンドルフチューブ中に入れる。
１２． ６００μｌの血漿＋６００μｌＰＢＳ中の０．１％トリトン＋５６μｌの２５×プロテアーゼ阻害剤を混合し（完全混合）、そしてビーズ中に添加する。
ａ．Ｃｔｒｌ血清
ｂ．ＬＰＳ血清
ｉｉｉ）洗浄し、そしてビーズから溶出させる。
１３． 洗浄及び溶出溶液を調製し、そしてこれらを濾過した。
１４． 上清を除去し、そして結合ビーズの新たなセットとともに可能なインキュべーションのために−８０℃で貯蔵した。
１５． 各エッペンドルフ中に２×１００μｌのＰＢＳを添加し、同じ試料を１つだけのエッペンドルフに移し、２つのエッペンドルフの合計を得た。
１６． ビーズを１×５分間４００μｌ及び１×５分間５００μｌの０．２Ｍ尿素／０．１％ＣＨＡＰＳ／０．２Ｍ ＮａＣｌ／５０ｍＭ トリス ｐＨ７．５で洗浄し、洗浄溶液を保ち、そしてＳＥＬＤＩで分析した。
１７． ビーズを２×５分間１ｍｌの１×ＰＢＳで洗浄した。
１８． ２００μｌの５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡ（０．２ｍｌのＨ２０、０．５ｍｌの１００％ＡＣＮ、０．３ｍｌの１％ＴＦＡ）で溶出した。３０秒間静かにボルテックスし、３分間回転させ、そして再度３０秒間静かにボルテックスした。溶出液を分離エッペンドルフ中においた。
１９． ビーズを４℃で３時間置き、２００μｌの５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡを添加し、そして溶出手順をやり直した。
２０． 更に、２００μｌの５０％アセトニトリル、０．３％ＴＦＡを添加し、そして溶出手順をやり直した。
２１． 溶出液１のために３μｌ及び溶出液２及び３のために６μｌをＮＰ２０スポット上においた。乾燥させた。２×５×上げ下げ（up-and-down）、Ｈ２０で洗浄した。乾燥させた。０．８μｌの１００％ＳＰＡを添加した。
２２． 低及び高分子量タンパク質を、分離ＳＥＬＤＩプロトコルで分析した。
ａ．低：８００−８−２−３０−１６０−１６
ｂ．高：２００−８−２０−１６０−１６０−５０
２３． ゲル電気泳動及び銀染色で多様な溶液を観察した。
【０１５３】
ｃ）ビーズ溶出液の逆相ＨＰＬＣ画分
ＬＰＳ血漿（２１１２０４由来）と共にインキュベートしたＩＮＳＰ０５２結合ビーズの溶出液を、ＨＰＬＣカラムを介して操作した。パラメーターは以下を使用した：
カラム：
Ｃ４（ブチル）カラム（逆相）、２．１
溶出液Ａ：０．１％ＴＦＡ
溶出液Ｂ：０．１％ＴＦＡ、９０％アセトニトリル
洗浄カラム：
３０分 ０〜９０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、０．２ｍｌ／分
注入試料：
０．１％ＴＦＡ中に再懸濁した１００μｌの凍結乾燥試料
その後、５分間溶媒Ａ（０．１％ＴＦＡ）
溶出：
１０５分溶出 ０〜９０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、０．２ｍｌ／分
５分溶出 ９０％アセトニトリル、０．１％ＴＦＡ、０．２ｍｌ／分
１０分洗浄 ０．１％ＴＦＡ
１分の画分を回収した。各画分をＳＥＬＤＩで分析した。２００μｌ中１０μｌがＮＰ２０プロテインチップスポット上で吸収されるとき、最も高いＨＰＬＣピークだけが見える。従って、より小さなピークに対応する画分を凍結乾燥し、１５μｌの０．３ＲＦＡ、５０％アセトニトリル中で再懸濁し、そして５μｌをチップに添加した。
【０１５４】
ｄ）ＭＡＬＤＩのためのラピジェスト(RAPIGEST）タンパク質消化
１． 該画分（２００μｌ）を別々に凍結乾燥させた。
２． 再懸濁するために５０μｌを使用し、そして４つの画分を併せた。該チューブをさらに前の容量に添加した５０μｌで洗浄した。
３． 該資料を凍結乾燥させた。
該試料を５０μｌの０．２ｗ／ｖラピジェスト(Rapigest)中に再懸濁し、そしてラピジェスト(Rapigest)プロトコルに従った。
【０１５５】
ＩＩＩ．結果
２０、５０、５３及び５６ｋＤａのタンパク質ピークは、固定化したｓＩＮＳＰ０５２を伴うアレイスポットに結合するように見えたが、固定化したコントロールタンパク質、ＩＬ−１８を伴うアレイスポットには結合しなかった。ＬＰＳ刺激化血漿は、一般に、コントロール血漿と比較して結合パートナーのより高いピーク（より結合性）を示した。血漿試料は、血清と比較して、固定化したｓＩＮＳＰ０５２においてインキュベートした場合、より高いピークを与えた。
【０１５６】
従って、該マウスペプチド配列は、ＭＳ／ＭＳデータをMascotプログラムに転送し、そして屋内で利用可能なタンパク質データベース中で行われる検索後に決定した。いくつかの結合パートナーは以下のとおり同定した：
−プロパージン。プロパージンサイズ（４９９５９Ｄａ）は、５９ｋＤａの観察されたＳＥＬＤＩマスと一致した（該タンパク質はグリコシル化されている）；
−マンノース結合レクチンＣ前駆体（ＭＢＬ−Ｃ）；２５ｋＤａのサイズは、ゲルバンド（約３０ｋＤａ）と相関した。該タンパク質は、ジスルフィド結合を介するタイトなポリマーを形成し、ＳＥＬＤＩにおいて５０．６ｋＤａのピークを説明する。
−８１ｋＤａのサイズを伴う、ＭＵＳＣＲＡＲＦ ＮＩＤ又はＲａ反応因子（ＲａＲＦ）のＰ１００セリンプロテアーゼ；
−アンチトロンビンＩＩＩ（５２ｋＤａ）；
−補体因子Ｈ前駆体（１４３ｋＤａ）；
−アルブミン１（断片）（６７ｋＤａ）及び
−セリンプロテアーゼ−２と会合したマンノース結合レクチン（７７ｋＤＡ）。
【０１５７】
予想外に、全ての結合パートナーは、補体経路由来のタンパク質、特にヒトプロパージン、マンノース結合レクチンＣ（ＭＢＬ−Ｃ）、ＭＡＳＰ１、ＭＡＳＰ２、アンチトロンビンＩＩＩ、補体因子Ｈ及びアルブミンに相当した。この度、国際出願ＷＯ２００３／０９３３１６及びＰＣＴ／ＧＢ／２００４／００４７７２のポリヌクレオチド又は対応するポリペプチドのこの度特徴付けられたこれらの驚くべき特性は、これらを薬剤又は医薬組成物の調製に特に適当とする。
【０１５８】
実施例３−マウスモデル
ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの生物活性は、Chu ら(Gene-engineered models for genetic manipulation and functional analysis of the cardiovascular system in mice. Chang Gung Med J. 2003 Dec;26(12):868-78.)、 Ma ら(Neurocardiovascular regulation in mice: experimental approaches and novel findings. Clin Exp Pharmacol Physiol. 2003 Nov;30(11):885-93.) 又はSvenson ら(Invited review: Identifying new mouse models of cardiovascular disease: a review of high-throughput screens of mutagenized and inbred strains. J Appl Physiol. 2003 Apr;94(4): 1650-9; discussion 1673.)に説明されるとおり、循環器疾患のマウスモデル中で試験することができる。
【０１５９】
あるいは、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの生物活性は、Cluff ら(Synthetic toll-like receptor 4 agonists stimulate innate resistance to infectious challenge. Infect Immun. 2005 May;73(5):3044-52)、Ahmed ら(Mycetoma caused by Madurella mycetomatis: a neglected infectious burden. Lancet Infect Dis. 2004 Sep;4(9):566-74.)、 Schriewer ら(Mouse models for studying orthopoxvirus respiratory infections. Methods MoI Biol. 2004;269:289-308.) 又はDavis ら(Breaking the species barrier: use of SCID mouse- human chimeras for the study of human infectious diseases. Cell Microbiol. 2003 Dec;5(12):849-60.)に説明されるとおり、感染疾患のマウスモデル中で試験することができる。
【０１６０】
あるいは、ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの生物活性は、Kikuchi ら(A transgenic mouse model of autoimmune glomerulonephritis and necrotizing arteritis associated with cryoglobulinemia. J Immunol. 2002 Oct 15;169(8):4644-50.)、Nordstrand ら(Streptokinase as a mediator of acute post-streptococcal glomerulonephritis in an experimental mouse model. Infect Immun. 1998 Jan;66(1):315-21.)、 又は Rondeau E. ([A new model of extramembranous glomerulonephritis in the mouse after a single injection of anti-aminopeptidase A monoclonal antibodies] Nephrologie. 1992;13(3):138.)に説明されるとおり、糸球体腎炎のマウスモデル中で試験することができる。
【０１６１】
【表４】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用。
【請求項２】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェントな条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、使用。
【請求項３】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用。
【請求項４】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェントな条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、使用。
【請求項５】
前記ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドが、配列番号２２の残基２、７１、１０５、１３４、１３９及び／又は１５６においてグルコシル化されている、請求項１又は請求項３に記載の使用。
【請求項６】
前記融合タンパク質が、免疫グロブリン（Ｉｇ）融合物を含んで成る、請求項１又は請求項３に記載の使用。
【請求項７】
前記融合タンパク質がＦｃ融合物である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記融合タンパク質が、配列番号３０から成る、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
前記官能性誘導体が、１又は複数の官能基に付随する少なくとも１の部分を含む、請求項１又は請求項３に記載の使用。
【請求項１０】
前記部分が、ポリエチレン部分である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記核酸部分が、発現ベクター中に含まれる、請求項２又は請求項４に記載の使用。
【請求項１２】
前記ベクターが、遺伝子治療ベクターである、請求項１１に記載の使用又は医薬組成物。
【請求項１３】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤又は医薬組成物の調製のために、細胞内における請求項１に記載のＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの内在的な産生を誘発及び／又は増強するためのベクターの使用。
【請求項１４】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤又は医薬組成物の調製のための請求項２に記載のＩＮＳＰ０５２核酸分子を含んで成る細胞の使用。
【請求項１５】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤又は医薬組成物の調製のための請求項１に記載のＩＮＳＰ０５２ポリペプチドを発現する細胞の使用。
【請求項１６】
前記薬剤又は医薬組成物が、更に、同時、順次又は別々の使用のためのインターフェロンを含んで成る、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
前記インターフェロンがインターフェロン−βである、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記薬剤又は医薬組成物が、更に、同時、順次又は別々の使用のための腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニストを含んで成る、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１９】
前記ＴＮＦアンタゴニストが、ＴＢＰＩ及び／又はＴＢＰＩＩである、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記薬剤又は医薬組成物が、更に、同時、順次又は別々の使用のための抗感染剤及び／又は抗血液凝固剤を含んで成る、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２１】
前記抗感染剤が、ペンタミジン、抗生物質、コリスチン、アミノグリコシド又はアンホテリシンＢから成る群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
前記抗血液凝固剤が、ニトレート、ニトログリセリン、イソソルビド、ジニトレート、イソソルビドモノニトレート、ビタミンＣ又はＥ、β−ブロッカー、プロプラノロール、ラベタロール、アセブトロール、アテノロール、メトプロロール、ビソプロロール、カルベジロール、抗凝固薬、ヘパリン、ワルファリン、抗血小板薬、アスピリン、糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体アンタゴニスト、クロピドグレル、ＮＳＡＩＤ、エノキサパリン、ダルテパリン、レビパリン、アブシキシマブ、エプチフィバチド、ラミフィバン、チロフィバン、アブシキシマブ、クロピドグレル、チクロピジン、ヒルジン、ビバリルジン、アルガトロバン、ダナパロイド、スタチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害因子、ラミプリル、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ホシノプリル、カルシウムチャネルブロッカー、ベラパミル、ニフェジピン、ニカルジピン、アムロジピン、ジルチアゼム、ベプリジル、ラノラジン、ニコランジル、抗生物質、テトラサイクリン、キノロン、葉酸、血栓溶解薬、組換え組織プラスミノーゲン活性化因子（ｒｔ−Ｐａｓ）、アルテプラーゼ、アクティバーゼ、レテプラーゼ、フィブリン−依存薬、アンクロッド、バトロキソビン、チエノピリジン、クロピドグレル、チクロピジン、チエノピリジン、直接トロンビン阻害因子（ＤＴＩ）、レピルジン、デシルジン、イノガトラン、エフェガトラン、キシメラガトラン、抗線溶薬、トラネキサム酸、又はεアミノ−カプロン酸から成る群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２３】
前記感染疾患が、全身性真菌疾患、リケッチア病、クラミジア病、寄生虫感染症、ウイルス疾患、膿瘍、ヒト免疫不全ウイルス感染症、菌血症、敗血症性ショック、性行為感染症又は細菌疾患から選択される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２４】
前記細菌疾患が、グラム陽性球菌により生じる疾患、グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患、グラム陽性桿菌により生じる疾患、グラム陰性桿菌により生じる疾患、嫌気性桿菌により生じる疾患、スピロヘータにより生じる疾患、又はマイコバクテリアにより生じる疾患から選択される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記疾患が、前記グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患が、髄膜炎、菌血症、尿道炎、子宮頚管炎、直腸炎、咽頭炎、卵管炎、精巣上体炎、淋病感染症、急性細菌性髄膜炎又は髄膜炎菌感染症から選択される、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記寄生虫感染症が、腸外原虫感染症、自由生活アメーバーによる感染症、腸管原虫感染症、線虫（回虫）感染症、吸虫（Trematode）（Fluke）感染症又は条虫（サナダムシ）感染症から選択される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２７】
前記ウイルス疾患が、呼吸性ウイルス疾患、ヘルペスウイルス感染症、中枢神経系ウイルス疾患、アルボウイルス又はアレナウイルス疾患から選択される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２８】
前記プロパージン関連疾患が、糸球体疾患である、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２９】
前記糸球体疾患が、腎炎症候群、ネフローゼ症候群、原発性糸球体疾患、続発性腎疾患から選択される、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
前記原発性糸球体疾患が、微小変化群、巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、糸球体間質増殖性糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、急速進行性糸球体腎炎、又は繊維性糸球体腎炎から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記腎炎症候群が、血尿、高血圧、腎不全、浮腫、急性糸球体腎炎、一過性糸球体腎炎、感染後糸球体腎炎、劇症性糸球体腎炎、急速進行性糸球体腎炎（ＲＰＧＮ）、低悪性度糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、半月体形成性糸球体腎炎、免疫不足ＲＰＧＮ、免疫複合体ＲＰＧＮ、抗−ＧＢＭ抗体疾患自己免疫、原発性腎臓血尿性−蛋白尿症候群、無症候性血尿性−蛋白尿症候群、慢性血尿性−蛋白尿症候群、慢性糸球体腎炎、緩徐進行性糸球体疾患から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３２】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための方法であって、任意的な医薬的に許容される担体と一緒に、有効量の請求項１に記載のＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又は請求項２に記載のＩＮＳＰ０５２核酸を、これを必要とする患者に投与することを含んで成る、方法。
【請求項１】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用。
【請求項２】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェントな条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、使用。
【請求項３】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの使用であって、ここで該ポリペプチドが：
ａ）配列番号１６から成るポリペプチド、又は
ｂ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかを含んで成るポリペプチド、又は
ｃ）配列番号２０、配列番号２２、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかから成る可溶形態、又は
ｄ）配列番号２２、配列番号２４若しくは配列番号２６のいずれかから成る成熟形態、又は
ｅ）配列番号２９から成るヒスチジンタグ形態、又は
ｆ）上記（ａ）〜（ｅ）のポリペプチドのいずれかのグリコシル化形態、ここで該ポリペプチドは１又は複数の部位においてグリコシル化されている、又は
ｇ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列は、上記（ａ）〜（ｆ）の少なくとも１の対応する配列に対して、少なくとも４０％、５０％、６０％、７０％、８０％若しくは９０％の同一性を有し、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｈ）上記（ａ）〜（ｆ）のポリペプチドのいずれかのムテイン、ここで該アミノ酸配列中のいずれかの変化が、（ａ）〜（ｆ）中のアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換であり、そしてＩＮＳＰ０５２生物活性を保持する、又は
ｉ）上記（ａ）〜（ｈ）のポリペプチドのいずれかの塩、アイソフォーム、融合タンパク質、官能性誘導体、活性画分、円順列変異誘導体、
から選択される、使用。
【請求項４】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための医薬組成物の調製のためのＩＮＳＰ０５２核酸分子の使用であって、該核酸が：
ａ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、若しくは配列番号２５のいずれかにおいて記載される核酸配列、又は
ｂ）中程度のストリンジェントな条件下又は高度のストリンジェントな条件下において（ａ）の核酸配列の補体に対してハイブリダイズする核酸配列、又は
ｃ）上記（ａ）又は（ｂ）のいずれかの核酸配列、ここで該核酸配列は、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２若しくは配列番号３３のいずれかにおけるアミノ酸配列に対する保存的アミノ酸置換を有するアミノ酸配列をコードする、
から成る群から選択される、使用。
【請求項５】
前記ＩＮＳＰ０５２ポリペプチドが、配列番号２２の残基２、７１、１０５、１３４、１３９及び／又は１５６においてグルコシル化されている、請求項１又は請求項３に記載の使用。
【請求項６】
前記融合タンパク質が、免疫グロブリン（Ｉｇ）融合物を含んで成る、請求項１又は請求項３に記載の使用。
【請求項７】
前記融合タンパク質がＦｃ融合物である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記融合タンパク質が、配列番号３０から成る、請求項７に記載の使用。
【請求項９】
前記官能性誘導体が、１又は複数の官能基に付随する少なくとも１の部分を含む、請求項１又は請求項３に記載の使用。
【請求項１０】
前記部分が、ポリエチレン部分である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記核酸部分が、発現ベクター中に含まれる、請求項２又は請求項４に記載の使用。
【請求項１２】
前記ベクターが、遺伝子治療ベクターである、請求項１１に記載の使用又は医薬組成物。
【請求項１３】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤又は医薬組成物の調製のために、細胞内における請求項１に記載のＩＮＳＰ０５２ポリペプチドの内在的な産生を誘発及び／又は増強するためのベクターの使用。
【請求項１４】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤又は医薬組成物の調製のための請求項２に記載のＩＮＳＰ０５２核酸分子を含んで成る細胞の使用。
【請求項１５】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための薬剤又は医薬組成物の調製のための請求項１に記載のＩＮＳＰ０５２ポリペプチドを発現する細胞の使用。
【請求項１６】
前記薬剤又は医薬組成物が、更に、同時、順次又は別々の使用のためのインターフェロンを含んで成る、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１７】
前記インターフェロンがインターフェロン−βである、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記薬剤又は医薬組成物が、更に、同時、順次又は別々の使用のための腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニストを含んで成る、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１９】
前記ＴＮＦアンタゴニストが、ＴＢＰＩ及び／又はＴＢＰＩＩである、請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記薬剤又は医薬組成物が、更に、同時、順次又は別々の使用のための抗感染剤及び／又は抗血液凝固剤を含んで成る、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２１】
前記抗感染剤が、ペンタミジン、抗生物質、コリスチン、アミノグリコシド又はアンホテリシンＢから成る群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
前記抗血液凝固剤が、ニトレート、ニトログリセリン、イソソルビド、ジニトレート、イソソルビドモノニトレート、ビタミンＣ又はＥ、β−ブロッカー、プロプラノロール、ラベタロール、アセブトロール、アテノロール、メトプロロール、ビソプロロール、カルベジロール、抗凝固薬、ヘパリン、ワルファリン、抗血小板薬、アスピリン、糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ受容体アンタゴニスト、クロピドグレル、ＮＳＡＩＤ、エノキサパリン、ダルテパリン、レビパリン、アブシキシマブ、エプチフィバチド、ラミフィバン、チロフィバン、アブシキシマブ、クロピドグレル、チクロピジン、ヒルジン、ビバリルジン、アルガトロバン、ダナパロイド、スタチン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害因子、ラミプリル、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ホシノプリル、カルシウムチャネルブロッカー、ベラパミル、ニフェジピン、ニカルジピン、アムロジピン、ジルチアゼム、ベプリジル、ラノラジン、ニコランジル、抗生物質、テトラサイクリン、キノロン、葉酸、血栓溶解薬、組換え組織プラスミノーゲン活性化因子（ｒｔ−Ｐａｓ）、アルテプラーゼ、アクティバーゼ、レテプラーゼ、フィブリン−依存薬、アンクロッド、バトロキソビン、チエノピリジン、クロピドグレル、チクロピジン、チエノピリジン、直接トロンビン阻害因子（ＤＴＩ）、レピルジン、デシルジン、イノガトラン、エフェガトラン、キシメラガトラン、抗線溶薬、トラネキサム酸、又はεアミノ−カプロン酸から成る群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２３】
前記感染疾患が、全身性真菌疾患、リケッチア病、クラミジア病、寄生虫感染症、ウイルス疾患、膿瘍、ヒト免疫不全ウイルス感染症、菌血症、敗血症性ショック、性行為感染症又は細菌疾患から選択される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２４】
前記細菌疾患が、グラム陽性球菌により生じる疾患、グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患、グラム陽性桿菌により生じる疾患、グラム陰性桿菌により生じる疾患、嫌気性桿菌により生じる疾患、スピロヘータにより生じる疾患、又はマイコバクテリアにより生じる疾患から選択される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記疾患が、前記グラム陰性好気性菌球菌により生じる疾患が、髄膜炎、菌血症、尿道炎、子宮頚管炎、直腸炎、咽頭炎、卵管炎、精巣上体炎、淋病感染症、急性細菌性髄膜炎又は髄膜炎菌感染症から選択される、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記寄生虫感染症が、腸外原虫感染症、自由生活アメーバーによる感染症、腸管原虫感染症、線虫（回虫）感染症、吸虫（Trematode）（Fluke）感染症又は条虫（サナダムシ）感染症から選択される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２７】
前記ウイルス疾患が、呼吸性ウイルス疾患、ヘルペスウイルス感染症、中枢神経系ウイルス疾患、アルボウイルス又はアレナウイルス疾患から選択される、請求項２３に記載の使用。
【請求項２８】
前記プロパージン関連疾患が、糸球体疾患である、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項２９】
前記糸球体疾患が、腎炎症候群、ネフローゼ症候群、原発性糸球体疾患、続発性腎疾患から選択される、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
前記原発性糸球体疾患が、微小変化群、巣状分節性糸球体硬化症、膜性腎症、膜性増殖性糸球体腎炎、糸球体間質増殖性糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、急速進行性糸球体腎炎、又は繊維性糸球体腎炎から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記腎炎症候群が、血尿、高血圧、腎不全、浮腫、急性糸球体腎炎、一過性糸球体腎炎、感染後糸球体腎炎、劇症性糸球体腎炎、急速進行性糸球体腎炎（ＲＰＧＮ）、低悪性度糸球体腎炎、ＩｇＡ腎症、半月体形成性糸球体腎炎、免疫不足ＲＰＧＮ、免疫複合体ＲＰＧＮ、抗−ＧＢＭ抗体疾患自己免疫、原発性腎臓血尿性−蛋白尿症候群、無症候性血尿性−蛋白尿症候群、慢性血尿性−蛋白尿症候群、慢性糸球体腎炎、緩徐進行性糸球体疾患から選択される、請求項２９に記載の使用。
【請求項３２】
感染症、プロパージン関連疾患、ＭＢＬ２−関連疾患、ＭＡＳＰ１−関連疾患、ＭＡＳＰ２−関連疾患、アンチトロンビンＩＩＩ−関連疾患、補体因子Ｈ−関連疾患及び／又はアルブミン−関連疾患の治療及び／又は予防のための方法であって、任意的な医薬的に許容される担体と一緒に、有効量の請求項１に記載のＩＮＳＰ０５２ポリペプチド又は請求項２に記載のＩＮＳＰ０５２核酸を、これを必要とする患者に投与することを含んで成る、方法。
【公表番号】特表２００８−５４０３８５（Ｐ２００８−５４０３８５Ａ）
【公表日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５０９４５４（Ｐ２００８−５０９４５４）
【出願日】平成１８年５月４日（２００６．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００６／０６２０６３
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１２０１６０
【国際公開日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【出願人】（５０７３４８７１３）ラボラトワール セローノ ソシエテ アノニム (29)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年５月４日（２００６．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００６／０６２０６３
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１２０１６０
【国際公開日】平成１８年１１月１６日（２００６．１１．１６）
【出願人】（５０７３４８７１３）ラボラトワール セローノ ソシエテ アノニム (29)
【Ｆターム（参考）】
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