本発明は、ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量を実質的に変更することなく、ｃ−Ｒｅｌ依存性サイトカイン産生を調節する組成物及び方法を対象にする。本発明は、ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量が実質的に変化せずにｃ−Ｒｅｌの細胞内局在性が変化することをアッセイして判定されるｃ−Ｒｅｌ活性のモジュレーターのスクリーニングも対象にする。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞中でｃ−Ｒｅｌの細胞内局在を変更する分子を識別する方法であって、
（ａ）前記細胞を１つ以上の候補分子に接触させることと、
（ｂ）前記細胞中でｃ−Ｒｅｌ分子の局在を検出することと、を含み、
ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量を前記１つ以上の候補分子に接触されない細胞中の前記量に対して実質的に変更せずに、核に局在したｃ−Ｒｅｌの量が増加又は減少することは、前記候補分子がｃ−Ｒｅｌの細胞内局在を変更することを示す方法。
【請求項２】
細胞中でｃ−Ｒｅｌの細胞内局在を変更する分子を識別する方法であって、
（ａ）前記細胞中で１つ以上の候補分子を組み換え発現することと、
（ｂ）前記細胞中でｃ−Ｒｅｌ分子の局在を検出することと、を含み、
ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量を前記１つ以上の候補分子が発現されない細胞中の前記量に対して実質的に変更せずに、核に局在したｃ−Ｒｅｌ量が増加又は減少することは、前記候補分子がｃ−Ｒｅｌの細胞内局在を変更することを示す方法。
【請求項３】
ステップ（ｂ）は、前記細胞を、ｃ−Ｒｅｌの抗体又はこの抗体の結合領域、及び前記抗体の蛍光標識化された結合パートナーに、免疫特異的結合に導く条件で接触させることを含む請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ステップ（ｂ）は、前記細胞を、ｃ−Ｒｅｌの蛍光標識化された抗体又はこの抗体の結合領域に、免疫特異的結合に導く条件で接触させることを含む請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
ステップ（ｂ）は、前記細胞から単離された核タンパク質を、質量分析法によって配列決定することを含む請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
前記細胞は、培養細胞である請求項１又は２に記載の方法。
【請求項７】
細胞中でｃ−Ｒｅｌの細胞内局在を変更する分子を識別する方法であって、
（ａ）１つ以上の候補分子を前記細胞に微量注入することと、
（ｂ）前記細胞中でｃ−Ｒｅｌ分子の局在を検出することと、を含み、
ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量を前記１つ以上の候補分子が微量注入されない細胞中の前記量に対して実質的に変更せずに、核に局在したｃ−Ｒｅｌ量が増加又は減少することは、前記候補分子がｃ−Ｒｅｌの細胞内局在を変更することを示す方法。
【請求項８】
ｃ−Ｒｅｌ活性を直接又は間接的に調節する分子をスクリーニングする方法であって、
（ａ）ｃ−Ｒｅｌを発現する細胞を、１つ以上の候補分子に接触させることと、
（ｂ）ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量を前記候補分子に接触されない細胞中の前記レベルに対して実質的に変更せずに、前記細胞中で核に局在したｃ−Ｒｅｌのレベルを検出することと、を含み、
前記候補分子の存在下で核に局在したｃ−Ｒｅｌのレベルが高い又は低いことは、前記分子がｃ−Ｒｅｌの活性を調節することを示す方法。
【請求項９】
ｃ−Ｒｅｌ活性を直接又は間接的に調節する分子をスクリーニングする方法であって、
（ａ）ｃ−Ｒｅｌを発現する細胞中で、１つ以上の候補分子を組み換え発現することと、
（ｂ）ＮＦκＢの発現レベル及び／又はＩκＢの量を前記候補分子が発現されない細胞中の前記レベルに対して実質的に変更せずに、前記細胞中で核に局在したｃ−Ｒｅｌのレベルを検出することと、を含み、
前記候補分子の存在下で核に局在したｃ−Ｒｅｌのレベルが高い又は低いことは、前記分子がｃ−Ｒｅｌの活性を調節することを示す方法。
【請求項１０】
前記候補分子は、核へのｃ−Ｒｅｌ局在の量を減少させ、それによりｃ−Ｒｅｌ活性の候補阻害剤となる請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
前記候補分子は、核へのｃ−Ｒｅｌ局在の量を増加させ、それによりｃ−Ｒｅｌ活性の候補アゴニストとなる請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１２】
前記候補分子は、固定ランダムペプチドライブラリに由来する請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１３】
前記核へのｃ−Ｒｅｌ局在は、前記細胞を、ｃ−Ｒｅｌに結合する分子、及びｃ−Ｒｅｌ以外の核特異的タンパク質に結合する分子に、結合に導く条件で接触させることと、それが起こる、同じ細胞内部位への分子のいかなる結合も検出することを含む方法によって検出される請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１４】
ステップ（ｂ）は、ｃ−Ｒｅｌの蛍光標識化された抗体又はこの抗体の結合領域と、細胞を、免疫特異的結合に導く条件で接触させることを含む請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１５】
核へのｃ−Ｒｅｌの移動を阻害するが、ＮＦκＢの発現及び／又はＩκＢの量を実質的に変更しない化合物。
【請求項１６】
請求項１５に記載の化合物、及び、薬理学的に許容できるキャリア又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１７】
成長ホルモン又は成長ホルモン分泌促進物質を更に含む請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
ＴＮＦアンタゴニストを更に含む請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
ＩＬ−１２産生に関連する疾患又は障害を治療又は回復する方法であって、請求項１７に記載の組成物を、前記疾患又は障害を治療又は回復するのに十分な量で、必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項２０】
成長ホルモン、成長ホルモン分泌促進物質、ＴＮＦアンタゴニスト、抗炎症剤、及び／又は免疫調節剤を同時投与することを更に含む請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
必要であると識別された患者において、ＩＬ−１２産生に関連する疾患又は障害を治療又は回復する方法であって、請求項１７に記載の組成物を、前記疾患又は障害を治療又は回復するのに十分な量で、必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項２２】
必要であると識別された患者に投与するために標識化された請求項１５に記載の化合物を含むキット。

【図１ａ】

【図１ｂ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【公表番号】特表２００７−５１４４１４（Ｐ２００７−５１４４１４Ａ）
【公表日】平成１９年６月７日（２００７．６．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５３９９８６（Ｐ２００６−５３９９８６）
【出願日】平成１６年１１月１０日（２００４．１１．１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３８２４１
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０４６６１９
【国際公開日】平成１７年５月２６日（２００５．５．２６）
【出願人】（５０４１５１８４８）シンタ　ファーマシューティカルズ　コーポレーション (72)
【Ｆターム（参考）】