本発明は、以下を含む細胞集団の定性的および/または定量的タンパク質発現プロファイル、特に、示差的タンパク質発現プロファイルを作成するための分析用プラットフォームおよびそれを用いて行う方法に関する:
-１以上の細胞集団の可溶化液を作成すること、該可溶化液はそれぞれの細胞集団によって発現される複数のタンパク質を含む、
-実質的に平面の固体支持体を提供すること、
-希釈または非希釈形態にて該固体支持体に直接的に、または、該固体支持体上にアプライされた接着促進層上に、少量の細胞可溶化液を別々の部位に沈着させ、それによって該固体支持体上の別々の測定領域の１以上の１次元または２次元アレイを作成すること、
-例えば、シグナル伝達系路の大域解析または、最高の特異性、選択性および親和性についてのタンパク質標的に対する抗体セット/ライブラリーのスクリーニングのために、別々の測定領域における細胞可溶化液に含まれる検出すべきタンパク質の特異的結合パートナーとして複数の結合試薬をアプライすること、および適当であるならば、該１以上の測定領域のアレイに１以上の検出試薬をアプライすること、該結合試薬および該検出試薬は、１以上のアレイの別々の測定領域に逐次的にアプライされるか、または検出試薬が結合試薬に結合した後、単一添加工程にてアプライされる、そして、
-該１以上のアレイの別々の測定領域から生じる光シグナルを局所的に分解した様式で測定および記録すること、
ここで該実質的に平面の固体支持体は無孔性であり、かつ、アプライしてもよい接着促進層は厚さ1μm未満である。 （もっと読む）

血球抗原を遺伝子型特定する方法であって、哺乳動物種の個体からのＤＮＡを多重ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）に付して、前記血球抗原のヌクレオチド多型の部位を含む少なくとも２つの異なる血球抗原の遺伝子座の領域を増幅し且つ検出可能にラベル付けすること、そしてこのようにして増幅され且つラベル付けされたＤＮＡフラグメントを使用して前記血球抗原のそれぞれについて遺伝子型を決定することを含むところの方法。前記多重ＰＣＲは、遺伝子型特定されるべき各血球抗原のための少なくとも１つの対の血球抗原特異的キメラプライマーと、少なくとも１つの検出可能にラベル付けされたユニバーサルプライマー、好ましくは検出可能にラベル付けされたユニバーサルプライマーの１つの対との使用を含む。前記ユニバーサルプライマーは前記哺乳動物種のＤＮＡにおいて生じないユニーク配列を有する。各キメラプライマー対は、左キメラプライマーと右キメラプライマーとを含み、それらの夫々は３’末端に血球抗原特異的部分及び５’末端にユニバーサル部分を含む。前記キメラプライマーの前記ユニバーサル部分の塩基配列は、前記少なくとも１つのユニバーサルプライマーの塩基配列に対応する。前記キメラプライマー対の前記血球抗原特異的部分は、前記血球抗原のヌクレオチド多型の部位を含む血球抗原の遺伝子座の領域を囲む。この方法によって血球抗原を遺伝子型特定するためのキット。血球抗原特異的キメラプライマー対のセット及び血球抗原対立遺伝子特異的オリゴヌクレオチドプローブのセット。 （もっと読む）

治療剤（例えば、サイトカイン、リンホカインおよび免疫毒素）への患者の耐容性を予測するための方法が、開示される。この方法は、脈管漏出症候群（ＶＬＳ）のインビトロモデルを利用して、問題の薬剤の効果を、内皮細胞（ＥＣ）のコンフルエントな単層を横切る大型タンパク質の透過性において評価する。本発明の方法は、内皮細胞単層を通したタンパク質の漏出をモニタリングするアッセイシステムを、問題の治療後の耐容性を予測するために利用する。このアッセイは、種々の免疫治療に対するヒトにおける耐容性を予測するために特に適している。
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本発明は、低分子化合物の検出のための方法およびその特異的バイオチップを開示する。本発明のバイオチップは、固相支持体、およびその固相支持体に固定されたキャリア結合低分子化合物を備える。本発明はまた、本発明のバイオチップを使用した低分子化合物の検出のための方法およびキットを提供する。本発明は、低分子化合物を検出するためのバイオチップを提供し、このバイオチップは、固相支持体およびキャリアと低分子化合物との結合体を備える。ここで、上記結合体は、上記固相支持体の表面に固定されている。 （もっと読む）

試料中の生物学的因子の量または活性を減少させるように設計された処理プロセスを検証するための生物学的インジケータに、キナーゼが使用される。指標は、滅菌処理の検証に使用され得る。ＡＤＰを含む基質からのＡＴＰの形成は、ルミノメーターでルシフェリン／ルシフェラーゼシステムを介して測定される。Sulfolobus acidocaldarius由来の熱安定性アデニル酸キナーゼは、伝染性海綿状脳症因子を不活性化するための手順の検証に特に適している。
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本発明は、野生型ヒトＡＧＴと比較したときに、（ａ）ＤＮＡ相互作用の低下；（ｂ）もはや核に限定されない、真核細胞での発現タンパク質の局在化；（ｃ）各種宿主における溶解性タンパク質としての発現収率の向上および安定性の向上；（ｄ）酸化条件下での安定性の向上；（ｅ）基質との反応後の細胞内での安定性の向上；（ｆ）基質との反応前後の細胞外部での安定性の向上；（ｇ）試験管内溶解度の向上；（ｈ）Ｏ^６−アルキルグアニン基質に対する反応性の向上；（ｉ）ＤＮＡベース基質に対する反応性の低下；および（ｊ）Ｎ^９−置換Ｏ^６−アルキルグアニン基質に対する反応性の低下；から選択された２つ以上の利点を示す、ＡＧＴ突然変異体に関する。上記の向上した特性を備えたこのようなＡＧＴ突然変異体は、野生型ヒトＡＧＴの１〜２５個のアミノ酸が他のアミノ酸によって置換され、場合により連続鎖からの１〜５個のアミノ酸が１、２、または３つの位置で欠損または付加され、および／またはＮ末端の１〜４個のアミノ酸またはＣ末端の１〜４０個のアミノ酸が欠損している突然変異体である。本発明は更に、本発明のＡＧＴ突然変異体を有する融合タンパク質に組み込まれている対象となるタンパク質を検出および／または操作する方法に関する。本発明の別の目的は、このようなＡＧＴ突然変異体および対象となるタンパク質を含むＡＧＴ融合タンパク質である。 （もっと読む）

本発明は、ヒトまたは非ヒトの生物学的サンプル中の細胞の増殖状態を評価する方法であって、クロマチン構築因子−１（略してＣＡＦ−１）サブユニットを増殖マーカーとして用いる工程を包含する方法に関する。癌診断または予後、および治療中の腫瘍応答のモニタリングのための適用。 （もっと読む）

本発明は、凝集アッセイ法、特にクロマトグラフ排除アッセイ法およびそれらの使用法に関する。本発明は、試験装置の特定の無作為でない位置に蓄積された、結合した検出可能な特異的結合試薬の集合体のクロマトグラフ排除を使用することによる、被験試料中の1種または複数の関心のある被検体の存在を決定する新規方法を含む。試験される試料中に関心のある被検体が存在しない場合、特異的検出可能な結合試薬の集合体は形成されず、従ってクロマトグラフィー媒体から排除されず、明確で容易に識別できる事象を生じる。本発明は特に、診療所または自宅における疾患の検出または治療のモニタリングのための簡易な試験装置に適用可能である。

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一酸化窒素や亜鉛イオンなどを特異的かつ効率的に捕捉して蛍光を発する蛍光プローブを提供する。
下記の一般式(I):
[化1]


〔R¹及びR²は水素原子又は下記の式(A)：
[化2]


〔X¹〜X⁴は水素原子、アルキル基、又はアミノ基の保護基を示し、m及びnは0又は1を示す）で表される基を示し；R³及びR⁴は水素原子、C_1-6アルキル基、又はC_1-6アルコキシ基を示し；R⁵〜R¹²は水素原子、スルホ基、ホスホ基、ハロゲン原子、又はC_1-6アルキル基を示し；R¹³及びR¹⁴はC_1-18アルキル基を示し；Z¹は酸素原子、硫黄原子、又は-N(R¹⁵)-(R¹⁵は水素原子又はC_1-6アルキル基を示す）を示し；Y¹及びY²は-C(=O)-、-C(=S)-、又は-C(R¹⁶)(R¹⁷)-（R¹⁶及びR¹⁷はC_1-6アルキル基を示す）を示し；M^-は電荷の中和に必要な個数の対イオンを示す〕で表される化合物。 （もっと読む）

効果な装置を必要とすることなく単一高分子を隔離、検出、および配置するための装置および方法が提供される。開示される装置および方法は、分子が特定のミクロン以下のエリアに手早くおよび効率的に運ばれることを可能にする。そのようなデバイスは、例えば、対象となる分子のシークエンスが決定される分析を実行する際に、有用である。 （もっと読む）

一つの局面において、本発明は、発現されるときにレポーター分子と共発現されるポリペプチドを産生する改変遺伝物質を含む、遺伝子改変細胞またはそのような細胞を含む非ヒト生物を提供し、ここでポリペプチドは造血細胞の最終分化に関連する。好ましくは、遺伝物質遺伝子は、Blimp対立遺伝子またはその一部、フラグメントもしくは機能的な形態である。さらに、B細胞系列細胞におけるレポーター分子の同定は、そのような細胞がASCへの分化に決定付けされている、またはASCに分化したことを示す。または、T細胞系列の細胞におけるレポーター分子活性は、これらの細胞が活性化されていることを示す。従って、本明細書において記載のように、リンパ球におけるBlimpの存在は、細胞が最終分化する、または最終分化に決定付けられていることを示す。例示的なT細胞としては、CD4^＋ T細胞およびCD8^＋ T細胞が含まれ、かつ例示的なB細胞は、ASCである。 （もっと読む）

本発明の目的は、薬剤耐性癌細胞を検出可能な新たな遺伝子マーカーを見いだし、かつ、当該マーカーを用いた薬剤耐性癌細胞の効率的かつ網羅的な検出手段を提供することである。本発明では、特に副作用が重篤で、癌患者に投与する頻度が高い制癌剤として、カンプトテシン類、シスプラチン類、エトポシド類、アドリアマイシン（ＡＤＭ）およびシトシンアラビノシド類の薬剤耐性癌細胞株と親癌細胞株における遺伝子増幅または欠失を解析することにより、癌細胞の薬剤耐性獲得に関連する新たな遺伝子マーカーとして、ＡＢＣＡ３遺伝子、ＡＢＣＢ６遺伝子、ＡＢＣＢ８遺伝子、ＡＢＣＢ１０遺伝子、ＡＢＣＣ４遺伝子、ＡＢＣＣ９遺伝子、ＡＢＣＤ３遺伝子、ＡＢＣＤ４遺伝子、ＡＢＣＥ１遺伝子、ＡＢＣＦ２遺伝子、ＢＣＬ２Ｌ２、ＢＣＬ２Ｌ１０、ＢＣＬ２Ｌ１、および、ＢＣＬ２Ａ１からなる群のＡＢＣトランスポーター系遺伝子またはＢＣＬ２ファミリー遺伝子から選ばれる１種以上の遺伝子の増幅を検出することにより、当該被験癌細胞における制癌剤に対する薬剤耐性の獲得を検出し得ることを見いだした。 （もっと読む）

ルミネセンス発生／ルミネセンス非発生多重アッセイにおける酵素媒介反応に関する少なくとも１種の分子の存在又は量を検出する方法を提供する。
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本発明はサンプル中の逆転写酵素（RT）の存在および酵素活性を検出する方法を提供する。この方法は、一般に、標識されたデオキシヌクレオチドの存在下で逆転写酵素PCRアッセイを実施することを伴う。RNAテンプレートおよび伸長中のcDNAプライマーを含む分子構造または複合体にデオキシヌクレオチドが取り込まれる。ある態様では、デオキシヌクレオチドを検出可能な部分で標識する。捕捉部分を含有させて反応完了後に複合体を表面上に固定化させ、分子構造、ひいては逆転写酵素の存在の検出を容易にしてもよい。ある態様では、検出可能な部分は化学発光部分、例えばアクリジニウム色素であり、検出可能な部分からの化学発光を刺激し、放射される光を検出することによってアッセイを測定する。種々の態様では、アッセイはサンプル中に存在する逆転写酵素のサブタイプの判定、または抗レトロウイルスリード化合物についてのスクリーニングに有用である。また、アッセイを行うためのキットも開示する。
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液体試料中の標的物質と粒子表面に固定された反応物質との遭遇確率を高め、反応効率を向上させることができる、粒子三次元配列体を利用した反応容器、及び該反応容器を利用した反応装置を提供することを目的とし、本発明により提供される反応容器は、液体試料を収容し得る反応室を有する反応容器本体と、前記反応室内に収納された固体支持体と、表面に所定の反応物質が固定された複数の粒子とを備えた反応容器であって、前記粒子が、前記固体支持体の表面に固定された状態で前記反応室内に三次元に配列していることを特徴とする。 （もっと読む）

本発明は、5-HT2受容体と呼ばれるセロトニン受容体ファミリーに関連した筋萎縮、心肥大、心不全および／または原発性肺高血圧症を治療および予防するための方法を提供する。本発明は、5-HT2受容体の調節因子が筋萎縮、心不全、心肥大および／または原発性肺高血圧症を阻害または治療できることをさらに実証する。 （もっと読む）

本発明は、分析における分析物の定量検出または定性検出のための方法、およびそのための適切な試薬、特にホモジニアスな結合試験に関する。本発明に係る分析物特異的な結合パートナーＲ１は、シグナルを形成する系の成分に連結した特異的結合パートナーＸに関する特異的結合部位を１個より多く含み、一方で、第二の分析物特異的結合パートナーＲ２は、同様にシグナルを形成する系の成分に連結した特異的結合パートナーＹに関する特異的結合部位を１個より多く含む。 （もっと読む）

金属イオンリン酸リガンドの特異的結合及び蛍光性ポリマースーパークエンチングを用いた、キナーゼ、ホスファターゼ及びプロテアーゼ酵素活性のための試薬及びアッセイについて説明する。本アッセイは、ペプチド及びタンパク質基質を用いて、キナーゼ、ホスファターゼ及びプロテアーゼ酵素活性を測定するための一般的なプラットホームを提供する。ＤＮＡハイブリダイゼーションをベースとした試薬及びアッセイ、並びにアプタマー、抗体及び他のリガンドを用いたタンパク質用の試薬及びアッセイについても説明する。
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本発明は、アッセイにおいてアナライトを定量的及び定性的に検出する方法、並びにそのために適切な試薬、特に、１個又は幾つかのアナライト特異的結合パートナーが結合しており、そしてシグナル生成系の成分に関連している特異的結合パートナーＸ又はＹのための追加の結合部位が備えられている担体分子に関する。このような複合体の、特に均一系結合試験における使用も開示されている。 （もっと読む）

任意のポリペプチドあるいは大分子複合体の同定と定量に有用な、コアプタマー構築物セットを利用した組成物と方法が開示される。大分子構築物のポリペプチドの固有のエピトープに結合するアプタマー構築物が作製される。これらアプタマー構築物は、エピトープ結合部位、コアプタマー結合部位、および検出可能な標識を含む。同族ポリペプチド、被分析物−ポリペプチド複合体、あるいはその他の大分子複合体の存在下で、コアプタマーは互いに結合して検出可能なシグナルを生み出す。コアプタマー構築物はリンカーで連結されて二価アプタマー構築物を産生してもよい。
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