アクチニディアおよびステロイドによって構成されている組合せ療法、ならびにこれらの使用
（１）アレルギー性および非アレルギー性の炎症性の障害もしくは疾患の予防および／または処置、（２）そのような障害もしくは疾患の少なくとも１つの症状の軽減、および／または（３）哺乳類における免疫応答の調節のための、アクチニディア調製物および１つ以上のステロイドの組合せ、ならびに当該組合せの使用が開示されている。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔関連出願に対する相互参照〕
本願は、35 U.S.C. §119 (e)に基づいて米国仮出願第６０／８８５，２１０号（出願日：２００７年１月１６日）からの優先権の利益を主張する。また、本願は、米国特許出願第１１／８１７，２１６号（出願日：２００７年８月２７日）の一部継続出願である。米国特許出願第１１／８１７，２１６号は、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００６４３７号の、35 U.S.C. § 371に基づく国内段階出願であり、米国仮出願第６０／６５６，８３８号（出願日：２００５年２月２５日）および米国仮出願第６０／６５６，８３９号（出願日：２００５年２月２５日）のそれぞれに対する優先権の利益を主張する。米国仮出願第６０／８８５，２１０号、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００６４３７号、米国仮出願第６０／６５６，８３８号、および米国仮出願第６０／６５６，８３９号のそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
〔技術分野〕
本発明は、（１）アレルギー性および非アレルギー性の炎症性の障害または疾患の予防および／または処置、（２）そのような障害または疾患の少なくとも１つの症状の軽減、および／または（３）動物における免疫応答の調節のための、アクチニディアおよび１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）の組合せに関する。
【０００３】
〔背景技術〕
炎症に関する疾患は、その存在によって組織の損傷、ときには組織死を誘導し得る特定の細胞種および媒介物の流入によって特徴づけられている。炎症に関する疾患は、それらが特定の組織および系（例えば、呼吸器系、皮膚、関節、心臓血管系、または中枢神経系）を冒す場合に特に有害である。上記疾患は、呼吸器系において呼吸障害、低酸素症、高炭酸血症および肺組織の損傷を起こし得る。また、上記疾患は、皮膚においてかゆみ（掻痒）、皮膚損傷、腫脹、および鱗屑を起こし得る。また、上記疾患は、関節において軟骨、膠原質および骨の侵食および破損を起こし得る。また、上記疾患は、心臓血管系において心筋梗塞を起こし得る。また、上記疾患は、中枢神経系において認知力の低下およびアルツハイマー病を起こし得る。
【０００４】
アレルギー性（アトピー性）疾患は、免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）によって部分的に媒介されると同時に、２型のＴ細胞（Ｔｈ２）、肥満細胞および好酸球がまた、疾患の過程において重要な役割を果たすことが示されている（Maggi E., Immunotechnology, 3:233-244, 1998; Pawankar R., Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol., 1:3-6, 2001; Vercelli D., Clin. Allergy Immunol., 16:179-196, 2002）。“Ｔｈ２”として知られているＴリンパ球の一部によって産生されるサイトカインとしては、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、およびＩＬ−１３が挙げられる。“Ｔｈ１”として知られているＴリンパ球によって産生されるサイトカインとしては、ＩＦＮγ、ＩＬ−１２が挙げられ、これらは、Ｔｈ２経路を負に制御することが報告されている。
【０００５】
アトピー性皮膚炎（ＡＤ）は、ＩｇＥレベルの上昇をともなう掻痒性および湿疹性の皮膚損傷によって特徴付けられる、慢性および再発性の炎症性皮膚疾患である。ＡＤの発生率は、世界的に幼児および小児において増大すると考えられている。ＡＤ患者の皮膚損傷は、炎症性細胞（Ｔリンパ球、単核球／マクロファージ、好酸球および肥満細胞が挙げられる）の浸潤によって特徴付けられる。これらの細胞は、種々のサイトカインおよびケモカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、エオタキシンおよびＴＡＲＣ）の放出を介して、ＡＤの病原性および進行に関与している。多くの細胞種の中でも、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０およびＩＬ−１３を産生するＴｈ２細胞は、上記疾患の経過における初期段階において重要な役割を果たしている（Leung, 1997, Clin Exp Immunol 107(suppl. 1):25-30）。
【０００６】
また、ＡＤは、イヌにおける２番目に主要な（イヌ科の動物の個体群の１０％）アレルギーである（Scott et al., Small Animal Dermatology 5th Ed, WB Saunders, 1995: 500-18）。イヌ科の動物において、ＡＤは、典型的に顔、脚、耳を冒す掻痒および皮膚損傷を示し、容易に全身性になり得る。典型的にイヌにおけるＡＤは、加齢とともに悪化する傾向がある。ＡＤに冒されている動物は、これらの患者の生活の質を著しく低下させる、再発性の皮膚感染および耳感染に苦しむ。
【０００７】
ＡＤが発症率の高い疾患である事実にもかかわらず、この疾患の病原性の理解が乏しく、この疾患に冒されている患者にとって有効な治療の選択肢が限られている。グルココルチコイドおよびシクロスポリンのような全身性の処置は、イヌおよびヒトにとって非常に有効であり得る（Olivry et al., Vet. Dermatol 2000; 11: 47）が、副作用の可能性がある（Ryffel et al., 1983, Arch. Toxicol 1983; 53: 107-41）。グルココルチコイドは、妥当な価格であるが、慢性的に使用すると有効性が小さくなる傾向がある（上述のScott et al）。経口のシクロスポリンは、大型のコンパニオンアニマル（例えば、大型の血統犬）において非常に高価であり得る。抗ヒスタミンが使用され得るが、成功率はしばしば不十分である（上述のScott et al）。脱感作は、活動期（season）が長い場合に行われるが、臨床的な改善は、通常には治療の開始から６〜９ヶ月間にわたってしか認められない。最後に、現在、利用可能な局所性の薬剤はすべて、局部的な軽減および一時的な軽減しか提供しない。したがって、ＡＤの徴候および症状（特にヒトおよびイヌ科の動物における）を軽減するための、安全性が高い有効な処置の同定は、非常に役立つものであろう。
【０００８】
喘息は、呼吸器系に悪影響を及ぼす他の重要なアトピー性疾患であり、世界中で数百万の人々が罹患している疾患である。喘息は、周期的に呼吸量が制限されること、および／または過剰な気道の狭窄を生じる種々の刺激に対する応答性亢進によって特徴付けられる。他の特徴としては、気道の炎症、好酸球増加症および気道繊維症が挙げられ得る。増大した気道の反応性亢進は、いくつかの細胞種（Ｔリンパ球および好酸球が挙げられる）に関連する複合的な炎症性カスケードから生じると考えられる。アレルギー性の喘息において、Ｔｈ２サイトカインは、Ｔｈ１サイトカインよりも優勢である。
【０００９】
低下した血清中のＩｇＥレベルがアレルギー性の症状を改善し得るという仮説が、キメラ抗ＩｇＥ抗体（ＣＧＰ−５１９０１）および組換えヒト化モノクロナル抗体（ｒｈｉＭＡＢ−Ｅ２５）を用いた臨床試験によって証明されている（Fahy et al., Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 155:1828-1834, 1997）。ＩｇＥの合成および分泌を阻害するジアシルベンズイミダゾール類似物および細菌性の多糖類について、米国特許第６，３６９，０９１号および米国特許出願公開第２００２００４１８８５号にそれぞれ記載されている。
【００１０】
また、炎症は、骨関節炎において中心的な役割を果たす。関節炎において、骨および軟骨の再構成の代謝過程は、組織破壊と組織修復との間に不均衡が生じるような変化を受ける。有力な原因をなす１つが食事脂肪（特にアラキドン酸）の変化した物質代謝であるという、医学的な評価が確立している。正常な軟骨と異なって、ＯＡ軟骨は、大量のＰＧＥ２１７、および一連のサイトカイン（ＩＬ−１β、ＩＬ−８およびＩＬ−６が挙げられる）だけでなく、他の炎症性の媒介因子（例えば、ＬＴＢ４およびリポキシン）を突発的に産生する。関節炎において、アラキドン酸（ＡＡ）の代謝によって過剰のロイコトリエンが産生され、軟骨のタンパク質基質を分解する酵素であるマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の発現および／または活性を次々に増大させる（Martel-Pelletier et al., 2004）。さらに、完全には理解されていない様式において、変化した脂肪酸の代謝が、関節痛および炎症を誘発する炎症性サイトカインであるＩＬ−１βおよびＴＮＦαの過剰産生の原因となっている。
【００１１】
また、炎症は心臓血管系疾患における中心的な役割を果たしており、炎症および免疫の活性化がアテローム性動脈硬化症に対する危険性の増大と関連付けられている。通常のアレルギー性疾患（例えば、アレルギー性の鼻炎および喘息）と、頚動脈のアテローム性動脈硬化症ならびに頚動脈および大腿動脈における強い内膜中膜複合体肥厚の５年間にわたる発達および進行との間に相関関係がある。アレルギー性の障害を有している患者は、強い内膜中膜複合体肥厚およびアテローム性動脈硬化症の発達および進行の危険性が非常に高い。通常のアレルギー性疾患およびアレルギーの主要な構成要素（例えば、ヒトのアテローム発生において活動的なロイコトリエンまたは肥満細胞）を有している患者に共通して、アテローム性動脈硬化症の増大が観察された。したがって、免疫系媒介性の慢性炎症性疾患は、アテローム性動脈硬化症の増大した危険性と関連付けられている。
【００１２】
韓国特許出願第９２−１１７５２号には、ビフラボノイド（例えば、ロニセラ ジャポニカから単離された４’−Ｏ−メチルオクナフラボン）を含んでいる抗炎症性、抗アレルギー性および抗リューマチ性の薬剤について開示されている。当該特許文献には、アレルギーまたは炎症と関連付けられている種々の症状の処置における有効性が示されている。韓国特許第１００７４４号には、ギンコ ビローバの葉から単離された種々のビフラボノイド化合物を含んでいる抗炎症性、抗アレルギー性および抗リューマチ性の薬剤について開示されている。シーゲスベッキア グラブレシェンス（Siegesbeckia glabrescens）を含んでいる種々の漢方薬の処方物が、ＩｇＥを低減させる活性を有していることについて報告されている（Kim et al., Phytother. Res., 15:572-576, 2001）。さらに、多くの薬草が、ヒスタミン放出阻害剤または抗炎症性化合物の豊富な原料であることが見出されている。
【００１３】
Kim et al.,による米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号には、耐寒性の（hardy）キウィフルーツ（アクチニディア アルグタ（Actinidia arguta）、アクチニディア ポリガマ（Actinidia polygama）、アクチニディア コロミクタ（Actinidia kolomikta））の水溶性抽出物および酢酸エチル抽出物の全体を含んでいる抽出物が、Ｔｈ１サイトカインおよびＩｇＧ２ａの血清中濃度を上昇させ、肥満細胞からのヒスタミンの放出を阻害し、アレルギー性の炎症性反応を抑制することについて開示されている。アレルギー性の上記炎症性反応としては、アレルギー性の炎症および気道の反応性亢進のアレルゲン感作マウスモデル、およびラットの足水腫アッセイ（上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号を参照のこと）における炎症性反応が挙げられる。
【００１４】
アレルギー性障害の処置用の他の従来の薬剤としては、抗ヒスタミン、ステロイド性もしくは非ステロイド性の抗炎症性の薬剤およびロイコトリエンアンタゴニストが挙げられる。しかし、これらの薬剤は、重大な副作用（感染に対する感受性の増大、肝臓毒性、薬剤誘導肺疾患および骨髄の機能低下が挙げられるが、これらに限定されない）の可能性を有している。したがって、このような薬剤は、炎症および特にアレルギー性の炎症の処置に対する臨床用途に制限される。抗炎症剤および症状軽減剤の使用には、それらの副作用または炎症性応答の根本的な原因に作用できないことから、深刻な問題がある。
【００１５】
害が少なく有効性の高い、炎症を処置する薬剤が、求められ続けている。したがって、より少なく副作用、より少ない毒性および炎症の根本的な原因に対するより高い特異性を有している新たな生成物に対する必要性が依然として残っている。
【００１６】
〔発明の概要〕
本発明の一実施形態は、哺乳類における免疫応答を制御するための方法に関する。当該方法は、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物および少なくとも１つのステロイドの哺乳類における免疫応答を制御するために十分な量を、哺乳類に投与する工程を包含している。
【００１７】
本発明の他の実施形態は、哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減する方法に関する。当該方法は、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物および少なくとも１つのステロイドの哺乳類における炎症性の上記症状を軽減するために十分な量を、哺乳類に投与する工程を包含している。炎症性の上記症状としては、掻痒、発赤、滲出および外被形成、肥厚、脱毛症、ならびに皮膚の腫脹が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１８】
本発明の上述した実施形態のいずれかの一態様において、耐寒性キウィフルーツとしては、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマが挙げられ、好ましい実施形態において、アクチニディア アルグタが挙げられる。
【００１９】
本発明の上述したいずれかの実施形態の一態様において、上記耐寒性キウィフルーツ調製物は、耐寒性キウィフルーツの抽出物である。例えば、耐寒性キウィフルーツ調製物は、蒸留水における抽出または非極性溶媒における抽出によって生成される。一態様において、そのような調製物は、水抽出物のクロマトグラフィー精製によって生成される。上記調製物のいずれかにおいて、クロマトグラフィー精製は、逆相クロマトグラフィー溶媒、または順相クロマトグラフィー溶媒の使用を含み得る。
【００２０】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、ステロイドは、天然に生じるステロイドを包含している。他の態様において、ステロイドは合成ステロイドを包含している。他の態様において、ステロイドは、動物性のステロイド、植物性のステロイドおよび真菌性のステロイドから選択される。一態様において、ステロイドは、コルチコステロイドを包含している。
【００２１】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、哺乳類は、Ｔｈ１応答の増強および／またはＴｈ２応答の抑制が所望される状態になっているか、または当該状態になる危険性がある。一態様において、哺乳類は、アレルギー性疾患または非アレルギー性の炎症性疾患にかかっているか、または当該疾患になる危険性がある。アレルギー性疾患の一例は、ロイコトリエンによって制御される疾患である。一態様において、アレルギー性疾患は、アトピー性皮膚炎、喘息、食品アレルギー、アレルギー性鼻炎、および慢性の蕁麻疹から選択される。
【００２２】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、担体、免疫賦活剤、または賦形剤とともに、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの一方または両方を、哺乳類に投与することを包含している。
【００２３】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの一方または両方を、錠剤、粉剤、発泡錠剤、発泡粉剤、カプセル剤、液体剤、懸濁剤、顆粒剤またはシロップ剤として、哺乳類に投与することを包含している。
【００２４】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を１つ以上の健康食品に含めて、上記哺乳類に与えることを包含している。
【００２５】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、局所用の組成物として上記耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含している。
【００２６】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を飼料または飼料の成分に含めて上記哺乳類に与えることを包含している。
【００２７】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、ステロイドとともに同じ組成物に調合されている。
【００２８】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、ステロイドとは別個の組成物として調合されるが、ステロイドと同時に投与される。
【００２９】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの投与期間に続いて、哺乳類が、ステロイドをともなわずに耐寒性キウィフルーツ調製物の投与を受ける。例えば、耐寒性キウィフルーツ調製物単独の投与に先立つ、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの、哺乳類に対する投与期間は、１日間〜数年間までの任意の時間の区切りであり得る。耐寒性キウィフルーツ調製物単独の、哺乳類に対する投与の期間は、１日間〜数年間までの任意の時間の区切りであり得る。
【００３０】
本発明のさらに他の実施形態は、哺乳類における免疫応答を調節するためか、または哺乳類における炎症の症状の少なくとも１つを軽減するための組成物に関する。当該組成物は、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物および少なくとも１つのステロイドを含んでいる。一態様において、組成物は、薬学的組成物、健康食品、食品の成分、動物の飼料および美容組成物から選択される。
【００３１】
この実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツは、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタおよびアクチニディア ポリガマから選択される。
【００３２】
この実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、耐寒性のキウィフルーツの抽出物である。一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、蒸留水における抽出、または非極性溶媒における抽出によって生成される。一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、水性抽出物のクロマトグラフィー精製によって生成される。一態様において、クロマトグラフィー精製は、逆相クロマトグラフィー溶媒の使用を含んでいる。一態様において、クロマトグラフィー精製は、順相クロマトグラフィー溶媒の使用を含んでいる。
【００３３】
この実施形態の一態様において、ステロイドは、天然に生じるステロイドを包含している。一態様において、ステロイドは、合成ステロイドを包含している。他の態様において、ステロイドは、動物性のステロイド、植物性のステロイドおよび真菌性のステロイドからなる群から選択される。一態様において、ステロイドはコルチコステロイドである。
【００３４】
この実施形態の一態様において、組成物は、経口投与用として調合されている。一態様において、組成物は、局所投与用として調合されている。
【００３５】
本発明の他の実施形態は、上述の組成物および本明細書に記載の他の組成物を含んでいる動物の飼料製品に関する。これらの組成物は、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドを含んでいる。一態様において、動物の飼料製品は、ペットフード、家畜用飼料、ペットトリート（pet treat）、ペットチュー（pet chew）および栄養補助食品から選択される。
【００３６】
〔図面の簡単な説明〕
図１は、大量のＰＧ１０２Ｔ（この凍結されたか、または乾燥されたキウィフルーツの濃縮物はまた、ＦＤ００１と呼ばれる（ＦＧは食品等級の基材を指す））を生成するために使用されるプロセスの概略図である。
【００３７】
図２は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、１０個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００３８】
図３は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ０１（ＰＧ１０２Ｔ）の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）抽出物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、１０個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００３９】
図４は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの果汁の濃縮物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、１０個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４０】
図５Ａおよび５Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３およびＩＦＮγの産生の相対度に対する、公知の免疫抑制剤化合物の３つの投与量の活性を示している。シクロスポリンは、０．００８３、０．０８３および４．１５μＭにおいて試験され、デキサメタゾンは０．０１、０．１および１μＭにおいて試験された（図５Ａ）。各点は、１０個体のマウスの膵細胞からのデータの平均値を示している。ケルセチンは、１．０、１０および２５μＭにおいて試験され、各点は２個体のマウスの膵細胞からのデータの平均値を表している（図５Ｂ）。サイトカインレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。
【００４１】
図６Ａおよび６Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図６Ａ）およびＩＦＮγ（図６Ｂ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１、ＦＤ００１の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）の抽出物およびこのプロセスから得られる水性の残余物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４２】
図７Ａおよび７Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図７Ａ）およびＩＦＮγ（図７Ｂ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１およびＦＤ００１の粉末の形態（カプセル剤に使用するために調製された）の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４３】
図８Ａおよび８Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図８Ａ）およびＩＦＮγ（図８Ｂ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの種々の調製物の影響を示している。ＦＤ００１、果汁の濃縮物、未乾燥の果実を水煮することによって調製された抽出物、および室温にいて果実を水抽出した抽出物のそれぞれは、３つの投与量に関して試験された。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４４】
図９Ａおよび９Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図９Ａ）およびＩＦＮγ（図９Ｂ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの植物体の種々の部位の調製物の影響を示している。ＦＤ００１、果汁の濃縮物、Ｈ２Ｏにおいて外皮、根もしくは茎を煮沸することによって調製された個々の抽出物およびＦＤ００１のそれぞれは、３つの投与量に関して試験された。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４５】
図１０Ａ〜１０Ｃは、ヒトの臨床試験の１日目〜１４日目の間に生じた分布の推移を強調表示している。当該臨床試験において、被験者は、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）に関する医師による全体的な評価（ＰＧＡ）によって評価されるときに、ＡＤのための処置に正に応答した（採点の基準は図１０Ｃに示されている）。被験者は、プラシーボまたは６００ｍｇのＦＤ００１（ＰＧ１０２Ｔ）を毎日、投与され（図１０Ａおよび１０Ｂのそれぞれ）、同時に局所に対するステロイド処置を用いた。
【００４６】
図１１は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図９Ａ）およびＩＦＮγ（図９Ｂ）の産生の相対度に対する、Ｃ−１８逆相媒体から得られた、濃縮された種々のクロマトグラフィー画分（区切りＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ６）の影響を示している。
【００４７】
〔本発明の詳細な説明〕
本発明は、耐寒性キウィフルーツ調製物（後ほど定義づけられる）およびステロイドの組合せが、驚くほどの相乗作用を与えて、アトピー性皮膚炎の症状を大きく緩和し得るという本発明の発見に関する。さらに、ステロイドの使用が中止された後に、アトピー性皮膚炎の症状の緩和がステロイドなしで維持され得、したがってキウィフルーツ調製物は、組合せ療法に続く単独療法として機能したことを観察した。これらの結果は、アトピー性皮膚炎にかかっているイヌ科の動物において観察され、理論に縛られずに、アトピー性皮膚炎および他の炎症媒介性の障害もしくは疾患、特にアトピー性（アレルギー性）の障害もしくは疾患にかかっている他の哺乳類の患者（例えば、ヒト）に拡張可能であると考えられる。
【００４８】
さらに、本発明は、中程度のアトピー性皮膚炎にかかっている成人のヒト患者に対する、本明細書に記載のＡ．アルグタの水溶性抽出物の粉末形態の投与が、臨床徴候の医師による全体的な等級を有為に低下させたことを示している。意外にも、患者自身によって評価された特定の臨床症状（発赤）において有為な低下が達せられ、ステロイドを使用したが、耐寒性キウィフルーツの抽出物を受けなかった患者と比べて、局所的にステロイドを同時に使用したこれらの患者における他の臨床症状において、重篤度の低下傾向が認められた。この改善は、患者の生活の質を向上させた。
【００４９】
同時に、これらの結果は、ステロイドに基づく療法と、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツとの調製物の組合せが、耐寒性キウィフルーツまたはステロイド療法のいずれかを使用した場合と比べて、アトピー性疾患の処置において高い有効性を提供することを示している。本発明者らのデータは、耐寒性キウィフルーツ調製物が、アトピー性疾患または他免疫調節不全と関連するの疾患を処置するための、他の治療剤を用いた補助的療法として使用され得ること、ならびにキウィフルーツ調製物が、ステロイドの使用中止後に単独療法として使用され得ることを示している。本発明のこのような組合せの組成物および組合せの逐次投与手順は、特にアトピー性の障害を有している患者および炎症媒介性の障害を有している患者において、他の薬理療法および栄養療法の有効性を向上させるために使用され得る。そして、重要なことに、組合せの組成物および組合せの逐次投与手順は、重大な副作用を有し得る従来の療法（例えば、ステロイド）のみに患者が頼る必要性を少なくさせ得る。実際に、ステロイドを使用する量、期間の長さ、および／または頻度を減少させる能力と同時に、アトピー性障害の（複数の）症状における改善の維持または増大は、そのような障害を有している任意の患者にとって大きな利益をもたらす。
【００５０】
したがって、一実施形態において、本発明は、同時使用のための単一の組成物、または同時使用もしくは逐次使用のための独立した組成物（１つの組成物の逐次使用は他の組成物と同時であり得る）として、ともに提供されるキウィフルーツ調製物とステロイドとの組合せ、または逐次使用の後または前における併用に関する。組成物としては、薬学的組成物；栄養補助組成物；健康食品製品、健康食品もしくは健康飲料（治療食が挙げられる）、または食品成分（ヒトおよび動物（家庭内のペット）の食品成分が挙げられる）として有用な組成物、またはこれらとともに有用な組成物；または美容組成物が挙げられ得るが、これらに限定されない。組成物のさらなる詳細について、後述されている。
【００５１】
本発明は、免疫調節活性を有するキウィフルーツの組成物を提供するための、マタタビ科の任意の種、および特にアクチニディア属の任意の種（Ａ．チネンシス（chinesis）もしくはＡ．デリシオサ（deliciosa）として知られる通常のキウィ、およびＡ．アルグタ、Ａ．ポリガマもしくはＡ．コロミクタとして知られる耐寒性のキウィ）の使用を包含する。好ましくは、キウィは耐寒性キウィフルーツである。用語“キウィフルーツ”は、アクチニディア属の任意の種を一般的に指すために使用され得、上述のような耐寒性キウィフルーツのメンバーおよび上述のような通常のキウィフルーツを包含する。
【００５２】
マタタビ科に属している種として、３０種以上が報告されている。なかでも、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサは、“キウィ”と呼ばれており、よく知られている食用の果実である。本明細書において“通常のキウィ”または“通常のキウィフルーツ”という言及は、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサを指すことが意図される。本発明によれば、“耐寒性キウィフルーツ”または“耐寒性のキウィ”との言及は、Ａ．アルグタ、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタ、またはＡ．アルグタ、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタの生物活性を有している、これらと関連するマタタビ科の他の種のうちのいずれかを指す。マタタビ科の他の種は、米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号、国際公開第２００６／０９３７９３号、または特にフルーツまたはそれらの調製物の抗アレルギー特性および免疫応答／サイトカイン／ロイコトリエン−調節特性に関して、本明細書に記載されている。“キウィフルーツ”または“キウィフルーツ調製物”に対する通常の言及は、アクチニディア（通常および耐寒性キウィフルーツが挙げられる）の任意の種を指すことを意図される。
【００５３】
マタタビ科に属しているアクチニディア アルグタ、アクチニディア ポリガマおよびアクチニディア コロミクタは、シベリア、中国の北部、日本、北朝鮮および韓国に天然に分布している。Ａ．アルグタおよび他の同属種（例えば、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタ）は、肝疾患、胃腸疾患、および泌尿器結石を処置するための“ミフド（mihudo）”と呼ばれる毒性のない内漢方薬の材料として使用されている（Seoul National University Natural Products Science, Tradi-Medi Data Base, dongbang media Co. Ltd. 1999）。上述のように、米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号には、アクチニディアの耐寒性キウィフルーツ種の種々の抽出物を用いたアレルギー疾患および非アレルギー性の炎症性疾患の処置および予防について開示されている。
【００５４】
しかし、本発明者らの研究以前には、哺乳類の免疫系の調節不全と関連付けられるアトピー性疾患または他の障害に対する確立された処置（例えば、ステロイド療法）の有効性に対する、耐寒性キウィフルーツ組成物の影響について何ら報告がなかった。本発明者らは、キウィフルーツ調製物およびステロイドの組合せが、アトピー性皮膚炎といった炎症性の障害の処置において付加的な効果、特に相乗効果を提供することの認識が重要であると考えている。さらに、本発明者らは、ステロイドとの組合せの使用後における、キウィフルーツ組成物単独の（単独療法としての）使用がアトピー性皮膚炎といったアトピー性または炎症性の障害の処置にとって有効な単独療法であり得ることの発見が重要であると考えている。この驚くべき発見が本発明の基礎を成している。
【００５５】
（本発明の調製物、調合物、活性成分および組成物）
本発明の目的は、キウィフルーツ調製物および１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいるか、それらから実質的になるか、またはそれらからなる組成物を提供することである。代替可能に、キウィフルーツ調製物は、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物（後述する）が挙げられる）を含んでいるか、それらから実質的になるか、またはそれらからなる第２の組成物とともにか、またはそれに続いて使用される。好ましくは、ステロイドおよび耐寒性キウィフルーツ組成物が、同じ組成物において使用されるか、または同時に使用される。一実施形態において、組合せ使用の期間は、キウィフルーツを単独に用いた単独療法の期間の後または前であり得る。本発明の組成物は、薬学的組成物；栄養補助組成物；栄養免疫賦活剤もしくは栄養補助食品；食品添加物、食品成分もしくは飼料（任意のペットフードが挙げられる）；健康食品（飲料または食品原料、および治療食が挙げられる）；または美容組成物として提供され得る。
【００５６】
一態様において、組成物は、耐寒性キウィフルーツもしくは本明細書に記載の通常のキウィ（すなわち果実、果実の全体、茎、葉、外皮、もしくは根の任意の部分が挙げられ、任意の調製物、濃縮物もしくは抽出物（任意の粗製抽出物、水溶性の総抽出物または酢酸エチル抽出物が挙げられる））またはこれらの濃縮物（乾燥調製物、非抽出の加工済調製物、生の果実、果汁またはこれらの任意の抽出物、濃縮物もしくはクロマトグラフィー画分が挙げられる）の、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）との混合物を含んでいるか、から実質的になるか、またはからなるか、または組成物（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）と同時もしくは逐次に使用される組成物として提供される。
【００５７】
本発明の任意の組成物もしくは調製物、または本発明に使用される組成物もしくは調製物（本明細書に記載の抽出物が挙げられる）において、耐寒性キウィフルーツまたはアクチニディアの他の種の１つ以上の部分（果実（“液果”、または“キウィ液果”とも呼ばれる）、これらの葉、茎、外皮および根が挙げられるが、これらに限定されない）を使用し得る。
【００５８】
耐寒性キウィフルーツの水溶性の総抽出物および酢酸エチル抽出物を作製するために使用される抽出処理の１つが、米国特許出願公開第第２００４／００３７９０９号に記載されている。また、抽出、濃縮または処理の代替的な方法によって作製される耐寒性キウィフルーツ調製物は、免疫調節活性、および特に抗原（すなわちアレルゲン）に対するサイトカイン産生を抑制する能力を有している組成物をもたらす。そのような代替的な調製物としては、果汁濃縮物、未乾燥の果実の濃縮物、未乾燥の果実の煮沸した濃縮物およびクロマトグラフィー技術によって濃縮された調製物が挙げられるが、これらに限定されない。米国特許出願公開第第２００４／００３７９０９号に記載されているものに加えて、そのような調製物は、本発明において有用である。
【００５９】
耐寒性キウィフルーツの植物体の果実以外の部分の抽出物または調製物は、果実の水溶性抽出物または酢酸エチル抽出物と比べて、等価な免疫調節活性または優れた免疫調節活性を有している。例えば、耐寒性キウィフルーツの植物体の茎、根および外皮の抽出物は、アレルゲンに感作されたマウスに由来する抗原刺激脾細胞によるサイトカイン産生を抑制するために有効である。
【００６０】
本発明に使用される耐寒性キウィフルーツ調製物のいずれかにおいて、耐寒性キウィフルーツを乾燥させる処理工程は、耐寒性キウィフルーツの生物活性を増強させる重要な要素である。したがって、未抽出の乾燥させた耐寒性キウィフルーツ（例えば、耐寒性キウィフルーツの乾燥させた薄片）は、耐寒性キウィフルーツの抽出物に以前からある生物活性を有し得る。したがって、本発明は、乾燥させた耐寒性キウィフルーツの任意の形態（前もって乾燥させた耐寒性キウィフルーツのから作製された抽出物が挙げられる）の、本発明の方法のいずれか（哺乳類における免疫応答の調節、または炎症、特にアレルギー性の炎症と関連している疾患もしくは障害の少なくとも１つの症状の改善）において使用するための薬剤としての、または組成物を調製するための使用を包含している。
【００６１】
他の実施形態において、通常のキウィフルーツ（例えば、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサ）の調製物は、本発明に有用である。当該調製物としては、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツに関して認識されている生物学的な特性の少なくともいくつかを有し得る果実の一部、果実の全体、茎、葉、外皮または根の任意の調製物（これらの任意の調製物もしくは抽出物（乾燥させた調製物、未抽出の加工済の調製物、未乾燥の果実、果汁が挙げられる）、またはこれらの任意の抽出物、濃縮物もしくは画分が挙げられる）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６２】
本明細書における抽出物に対する一般的な言及は、好適な溶媒を用いて所望の活性成分を取り出し、それから溶媒のいくらか、すべてまたはほぼすべてを蒸発させ、規定の基準に残余量または粉末を調整することによって典型的に得られる物質（例えば、耐寒性キウィフルーツ）の濃縮された調製物を指す。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に公開されるように、用語“抽出物”は、用語“濃縮物”と交換可能に使用され得る。いくつかの実施形態において、本明細書における粗製抽出物に対する言及は、水、低級アルコール（例えば、メタノールおよびエタノールなど）、好ましくは蒸留水または５０〜９０％のエタノール、より好ましくは７０％エタノールを用いて、耐寒性キウィフルーツ調製物を抽出することによって得られる耐寒性キウィフルーツの抽出物を指す。それらから得られる非極性溶媒に可溶性の抽出物は、非極性溶媒（例えば、ヘキサン、酢酸エチルまたはジクロロメタンの溶媒）を用いて溶媒抽出物をさらに抽出することによって入手され得る。粗製抽出物の作製および評価のための特定の手法について、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載されており、そのような手法のすべては、参照によって本明細書に援用される。本発明に係る耐寒性キウィフルーツの好ましい生物活性を追跡するか、評価するかまたは確認する付加的な生物アッセイは、本明細書における実施例に説明されており、インビトロアッセイおよびインビボアッセイの両方が挙げられる。
【００６３】
本発明によれば、“ＦＤ００１”に対する言及は、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツ（例えば、Ａ．アルグタ）から、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に本質的に記載の通りに調製された（文献の実施例１を参照すればよい）水溶性の全抽出物（本明細書において濃縮物とも呼ばれ得る）を一般的に指す。しかし、ＦＤ００１は、そのような抽出物の大規模生成物を指す（水溶性抽出物の処理工程は実質的に類似であるが、大規模生成に適合されている）。そのような水溶性の全抽出物は、Ａ．アルグタから典型的に調製されるが、等価な水溶性の全抽出物が他の耐寒性キウィフルーツ（Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタが挙げられるが、これらに限定されない）から調製され得ることは当業者に明らかである。他の抽出物（酢酸エチル抽出物が挙げられる）が耐寒性キウィフルーツから調製され得る。酢酸エチル画分について、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に開示されており、当業者に公知の従来の方法を用いたクロロホルム（必要に応じて）、酢酸エチルおよびｎ−ブタノール用いる、上述の水溶性抽出物の連続的な溶媒分離によって生成され得る。
【００６４】
本発明のいくつかの実施形態において、抽出物もしくは濃縮物または他の調製物の処理または調製における工程として、特に果汁が乾燥される場合に、本発明の抽出物もしくは濃縮物または他の調製物は、アクチニディアの任意の種から生成され得る。したがって、耐寒性キウィフルーツまたは必要に応じて他のアクチニディアの種のそのような抽出物を含んでいる組成物を提供することが、本発明の目的である。組成物の他の添加物、材料および成分、ならびに本明細書に記載の投薬および投与の計画は、同様に本発明の目的に適用される。
【００６５】
本明細書に記載の任意の組成物の調製において、本明細書に記載の抽出物（上述のような抽出物または濃縮物が特に挙げられる）に加えて、本発明の範囲には、耐寒性キウィフルーツの果実の全体、または未抽出の加工済の果実調製物（未乾燥の果実、（乾燥または生の）みじん切りにした果実、（乾燥または生の）煮沸した果実、熱処理した果実、乾燥果実、圧搾した果実、凍結させた果実、濃縮した果実が挙げられるが、これらに限定されない）の使用が包含される。したがって、耐寒性キウィフルーツの果実の全体、または必ずしも抽出されていない同じ手法において加工（例えば、乾燥、煮沸など）され得る果実調製物を含んでいる組成物を提供することは、本発明の目的である。したがって、一実施形態において、本発明は、未抽出の耐寒性キウィフルーツおよび／または通常のキウィフルーツ調製物に関する。本明細書に記載のそのような組成物のいずれかは、本発明の任意の方法における使用のために意図される。組成物の他の添加物、材料および成分、ならびに本明細書に記載の投薬および投与の計画は、同様に本発明の目的に適用される。
【００６６】
さらに、本明細書に記載の任意の組成物の調製において、本明細書に記載の抽出物に加えて、本発明には、耐寒性キウィフルーツの任意の部分から任意の好適な処理によって生成される耐寒性キウィフルーツまたは通常のキウィフルーツの果汁の使用が含まれる。果汁は、果実から直接的に生成されて（すなわち希釈または濃縮されずに）使用され得るか、果汁は希釈され得るか、または果汁濃縮物を生成するために濃縮され得る。そのような濃縮は、溶出溶媒の使用には関連し得ない。例えば、実施例に記載のように、未乾燥のキウィフルーツは、従来のジューサーにかけられ得る。ジューサーは、果実から外被を取り除いて、種子、果肉および果汁の混合物を生じ得る。それから、この混合物は、（例えば、遠心分離または圧搾によって）処理されて、固体から果汁を取り出し得る。そして必要に応じて、この果汁が（例えば、蒸発、蒸留、限外ろ過などによって）濃縮されて、濃縮された果汁（すなわち果汁濃縮物）を提供する。そのような組成物は、本発明の任意の方法における使用のために意図される。組成物の他の添加物、材料および成分、ならびに本明細書に記載の投薬および投与の計画は、同様に本発明の目的に適用される。
【００６７】
本明細書に記載の任意の組成物において、米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載の抽出物に対する代替物として、本発明には、耐寒性キウィフルーツを処理した他の生成物（果実（乾燥果実が挙げられる）の室温における水抽出物；室温より低い温度の水において実施された耐寒性キウィフルーツの水抽出物；根、葉、茎もしくは外皮の水抽出物もしくは他の抽出物；または抽出前に乾燥されていない（すなわち未抽出の未乾燥の果実）果実、葉、茎、外被のいずれかの水抽出物もしくは濃縮物または他の抽出物が挙げられるが、これらに限定されない）の使用が包含される。耐寒性キウィフルーツは、０℃〜８０℃の範囲の任意の水温（室温およびそれより低い温度（例えば、約０℃〜約２５℃））において抽出され得る。
【００６８】
本発明によれば、“乾燥した耐寒性キウィフルーツ”または“乾燥したキウィフルーツ”という一般的な記載は、任意の処理によって乾燥されている耐寒性キウィフルーツまたは他のキウィフルーツ（例えば、通常のキウィ）の任意の形態を包含している。したがって、乾燥したキウィフルーツは、キウィフルーツの乾燥した任意の部分（果実、葉、根など）を包含しており、乾燥した果実の全体、乾燥した果実の薄片、みじん切りにした乾燥した果実、および乾燥し、濃縮された果実、ならびに抽出されている物質が抽出前にまず乾燥されているキウィフルーツの任意の抽出物を包含している。抽出物自身は、乾燥されるか、またはさらに処理される必要はないが、一般的に、組成物への調合および保存のためには抽出物にとって最も好ましい形態である。さらなる使用のために抽出物をさらに濃縮する好ましい方法としては、蒸発、蒸留、限外ろ過、逆相浸透、沈降、固相への吸着および固相からの溶出、クロマトグラフィー精製、ならびに他の溶媒への抽出が挙げられるが、これらに限定されない。さらなる使用のために溶出物または濃縮物を乾燥させる好ましい方法としては、乾燥免疫賦活剤または賦形剤（例えば、マルトデキストリン、微小結晶セルロースおよびスターチ）を用いるか、または用いないトレイ乾燥、噴霧乾燥、および凍結乾燥が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、本発明の使用にとって好ましい乾燥したキウィフルーツは、後に抽出されない乾燥したキウィフルーツ調製物（抽出されることなく本発明の組成物または方法に使用されるキウィフルーツ）である。一態様において、耐寒性キウィフルーツは、室温〜８０℃において風乾されるか、−１７０℃〜室温において真空乾燥される。
【００６９】
したがって、本明細書に記載の組成物および方法は、任意の耐寒性キウィフルーツ（または通常のキウィフルーツ）の使用（耐寒性キウィフルーツ（または通常のキウィフルーツ）の果実の任意の部分、茎、葉、外皮、根もしくは他の部分、これらの任意の抽出物、濃縮物もしくは画分、果実の全体もしくは未抽出の加工済の果実、果汁の任意の形態、またはこれらの任意の抽出物、濃縮物もしくは画分、ならびに耐寒性キウィフルーツ（または通常のキウィフルーツ）の植物体の一部（植物体の一部としては、果実、茎、葉、外皮および／または根が挙げられる）および乾燥工程を含む処理を用いて調製されている植物体の一部の使用が挙げられる）に適用される。
【００７０】
本発明によれば、本発明の組成物における活性成分に相当する１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいる組成物が提供される。用語“ステロイド”は、本明細書に記載されているか、および／または当該分野において公知の多くの任意のステロイド、またはステロイドに基づく化合物もしくは組成物を一般的に指す。そのようなステロイド組成物は、上述の耐寒性キウィフルーツまたは通常のキウィフルーツ調製物を含んでいるような同じ組成物であり得るか、耐寒性キウィフルーツまたは通常のキウィフルーツ調製物と同時にか、および／またはその後に使用することを意図されている別の組成物であり得る。
【００７１】
本発明によれば、ステロイドは、４つの縮合環を有する炭素骨格によって特徴付けられている液体のテルペノイドと定義づけされる。異なるステロイドは、これらの環に結合されている官能基が異なっている。数百の異なるステロイドが植物、動物および真菌において同定されている。ステロイドは、ステロールラノステロール（動物または真菌）またはステロールシクロアルテノール（植物）のいずれかから誘導される。２つのステロールは、トリテルペンスクアレンの環化によって誘導される。ステロイドとしては、任意の天然に存在するステロイドまたは合成ステロイド（動物ステロイド、植物ステロイドおよび真菌ステロイド、ならびにこれらの官能基の誘導体が挙げられる）が挙げられるが、これらに限定されない。動物ステロイドとしては、昆虫ステロイド（例えばエクジステロンといったエクジステロイド）、および脊椎動物のステロイドが挙げられるが、これらに限定されない。脊椎動物のステロイドとしては、性ステロイド（例えば、アンドロゲン、エストロゲン、黄体ホルモン）、コルチコステロイド（例えば、グルココルチコイドおよびミネラロコルチコイド）、および同化ステロイドが挙げられるが、これらに限定されない。植物ステロイドとしては、フィトステロールおよびバルシノステロイド（barssinosteroids）が挙げられるが、これらに限定されない。真菌のステロイドとしては、エルゴステロンが挙げられるが、これに限定されない。本発明の好ましい実施形態において、本発明の組成物において有用なステロイドは、抗炎症性活性を有している任意のステロイドである。
【００７２】
コルチコステロイドは、本発明における使用にとって特に好ましいステロイドである。本発明における使用にとって好ましいいくつかのステロイドおよびそれらの誘導体としては、アムシノニド、ベータメタゾン、ベータメタゾンジプロピオネート、ベータメタゾンバレレート、ブデソニド、クロベタゾール、クロベタゾールアセテート、クロベタゾールブチレート、クロベタゾール １７−プロピオネート、コルチゾン、デフラザコルト、デソキシメタゾン、ジフルコルトロンバレレート、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、デソニド、フロエート、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンブチレート、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、ヒドロコルチゾンバレレート、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、およびハロベタゾールプロピオネートが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
当業者は、哺乳類、特にヒト、コンパニオンアニマルまたは食用の家畜に使用される任意のステロイドが本発明に好適であり得ることを正しく理解する。
【００７４】
ステロイドは、任意の種類の投与（最もしばしば経口投与または局所投与）のために調合され得る。ステロイド、およびステロイドに基づく化合物もしくは組成物は、天然および／または合成的に、誘導体化され得るか、入手され得るか、または生成され得る。
【００７５】
本明細書に記載の任意の化合物、調製物もしくは薬剤（本発明における使用のための耐寒性キウィフルーツ調製物またはステロイドが挙げられる）の生物活性または生物学的作用は、当該化合物、調製物または薬剤によって示されるか、または果たされる任意の（複数の）機能を指し、当該機能は、インビボ（すなわち、当該化合物、調製物または薬剤が使用される天然の生理学的環境）またはインビトロ（すなわち、実験条件）において測定されるか、または観察されるように、当該化合物、調製物または薬剤の天然に生じる形態に起因する。例えば化合物、調製物もしくは薬剤の処理、調製もしくは精製の変更による、化合物、調製物もしくは薬剤の修飾は、天然に生じる化合物、調製物もしくは薬剤と同じ生物活性を有している化合物、調製物もしくは薬剤、または天然に生じる化合物、調製物もしくは薬剤と比べて低下した生物活性もしくは増加した生物活性を有している化合物、調製物もしくは薬剤を生じさせ得る。
【００７６】
上述のように、キウィフルーツ調製物、好ましくは耐寒性キウィフルーツ調製物は、患者（すなわち哺乳類）におけるＴｈ１免疫応答およびＴｈ２免疫応答を選択的に調節するための使用に関して、本発明の活性成分の１つである。そのような組成物は、以下の（ａ）〜（ｎ）の活性の少なくとも１つから選択される生物活性を有している。（ａ）患者におけるＩｇＥ産生Ｂ細胞の数を低下させる活性；（ｂ）患者において（例えば、血清または血漿において）産生されるＩｇＥ量を低下させる活性；（ｃ）少なくとも１つのＴｈ２サイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０）の産生および／または濃度を低下させる活性；（ｄ）少なくとも１つのＴｈ１サイトカイン（例えば、ＩＬ−１２、ＩＦＮγ）の濃度を低下させる活性；（ｅ）転写調節因子ＧＡＴＡ−３の発現レベルを低下させる活性；（ｆ）転写調節因子Ｔ−ｂｅｔの発現レベルを低下させる活性；（ｇ）転写調節因子ＮＦＡＴｃ２の発現レベルを低下させる活性；（ｈ）患者におけるＩｇＧ２ａ産生Ｂ細胞の数を増加させる活性；（ｉ）患者において産生されるＩｇＧ２ａの量を増加させる活性；（ｊ）特に炎症部位において、Ｔｈ１ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＦＮγ＋）の産生または活性を増強させる活性；（ｋ）特に炎症部位において、Ｔｈ２ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＬ−４＋）の産生または活性を低下させる活性；（ｌ）患者におけるＩｇＧ１産生Ｂ細胞の数を低下させる活性；（ｍ）患者において産生されるＩｇＧ１の量を低下させる活性；（ｎ）患者における少なくとも１つのロイコトリエンの産生量を低下させる活性。
【００７７】
本発明の組成物または組成物の組合せの生物活性は、哺乳類における免疫応答の調節、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答の調節、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答の増強および／またはＴｈ２応答の抑制を含み得る。本発明の組成物または組成物の組合せに使用される活性成分は、種々の障害および疾患の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。当該障害および疾患としては、アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがんが挙げられるが、これらに限定されない。このような症状、疾患および障害について、以下に詳述する。
【００７８】
本発明によれば、栄養学的（栄養補助的）な用途（すなわち栄養学的組成物）としては、個体の健康または生物の成長過程を維持、安定化、促進、増強または改善する栄養物および栄養学的薬剤の補給に関する本発明の任意の用途が挙げられる。治療用途（すなわち治療組成物または薬学的組成物）としては、個体の健康な状態から逸脱している疾患または障害の予防、処置、管理、治療、軽減または治癒に関する本発明の任意の用途が挙げられる。そして、治療用途は薬学的用途と交換可能に使用され得る。本発明の他の用途としては、例えば、本質的に治療的／薬学的、または栄養学的であると見做され得るか、見做され得ない美容用途が挙げられる。
【００７９】
したがって、本発明の１つの目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、栄養学的組成物、治療組成物（もしくは薬学的組成物）、または美容組成物を提供することである。そのような組成物は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような組成物は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８０】
本発明の他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、健康食品または食品成分（また、食品添加物と記載される場合もある）を提供することである。そのような健康食品または食品成分は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような健康食品または食品成分は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８１】
本発明の他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、治療食を提供することである。そのような治療食は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような治療食は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。本発明およびＦＤＡによれば、治療食は、医師の管理下において消費されるか、または投与されるために、明確な栄養要求が立証されている疾患の特定の食餌管理が意図されて、調合されている食品である。したがって、本明細書において使用されるとき、用語“治療食”および“健康食品”は、ある状況において交換可能に使用され得る。特に、治療食は、健康食品の分類の一部であり、ここで、治療食は、上述のように、医師の管理下において消費されるか、または投与されるために、明確な栄養要求が立証されている疾患の特定の食餌管理が意図されて、調合されている。
【００８２】
本発明のさらに他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、動物の飼料または飼料の成分（また、飼料または食品添加物と記載される場合もある）を提供することである。そのような動物の飼料または飼料の成分は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような動物の飼料または飼料の成分は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８３】
本発明のさらなる他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、局所的な組成物または美容組成物を提供することである。そのような局所的な組成物または美容組成物は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような局所的な組成物または美容組成物は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８４】
本明細書に記載の任意の組成物、成分、添加物または薬剤は、少なくとも１つの従来の担体、免疫賦活剤または希釈剤を付加的に含み得る。例えば、本発明に係る組成物は、薬学的に受容可能な担体、免疫賦活剤または希釈剤を含み得る。調合物は、充填剤、抗凝固剤、潤滑剤、湿潤剤、香料添加剤、乳化剤および保存剤などを付加的に含み得る。本発明の組成物は、患者に投与された後に、（複数の）活性成分の迅速な放出、徐放または遅延した放出を提供するように調合され得る。
【００８５】
例えば、本発明の組成物は、注入剤を製造するために一般的に使用される油、プロピレングリコールまたは他の溶媒に溶解され得る。担体の好適な例としては、生理食塩水、ポリエチレングリコール、エタノール、植物油、ミリスチン酸イソプロピルなどが挙げられるが、これらの担体に限定されない。局所投与のために、本発明の化合物は、軟膏またはクリーム剤の形態に調合され得る。
【００８６】
典型的に、免疫賦活剤は、特異的な抗原に対する動物の免疫応答を一般的に増強する物質である。好適な免疫賦活剤としては、フロインドアジュバント；他の細菌の細胞壁成分；アルミニウム塩；カルシウム塩；シリカ；ポリヌクレオチド；変性毒素；血清タンパク質；ウイルス被覆タンパク質；他の最近由来調製物；γインターフェロン；ブロック共重合体の免疫賦活剤（例えば、Hunter’s Titermaxアジュバント（CytRx（登録商標）、inc. Norcross, GAから入手可能））；Ribiアジュバント（Ribi ImmunoChem Research, Inc、Hamilton、MT）；ならびにサポニンおよびそれらの誘導体（例えば、Quil A（Sugerfos Biosector A/S、デンマークから入手可能））が挙げられる。
【００８７】
典型的に、担体は、動物における治療組成物の半減期を延ばす化合物である。好適な担体としては、重合制御された放出調合物、生分解性のインプラント、リポソーム、油、エステル、およびグリコールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
本発明の好適な賦形剤としては、薬剤または化合物を輸送するか、またはその輸送を助けるが、動物における細胞、組織または部位を特に標的としない賦形剤または調合物（また、非標的化担体とも呼ばれる）が挙げられる。その多くが希釈剤でもある薬学的に受容可能な賦形剤の例としては、水、リン酸緩衝化食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、血清含有溶液、ハンクス溶液、生理学的に緩衝化された他の水性の溶液、油、エステルおよびグリコールが挙げられるが、これらに限定されない。水性の担体は、例えば化学的な安定性および等張性を向上させることによって、受容物の生理学的条件に近づけるために要求される好適な補助物質を含有し得る。本発明の組成物は、従来の方法によって滅菌され得るか、および／または凍結乾燥され得る。
【００８９】
本発明の組成物または調合物は、薬学的な用途、または栄養補助的（nutraceutical）／栄養学的／栄養補助的（supplement）用途における使用にとって好適な任意の形態に調製され得る。当該形態は、例えば、経口投与形態（発泡性の錠剤、発泡性の粉剤、粉剤、錠剤、カプセル剤、軟カプセル剤、水性の薬剤、シロップ剤、エリキシル丸剤、粉剤、サチェット（sachet）、顆粒剤）、局所調製物（クリーム剤、軟膏、ローション剤、ゲル剤、香膏（balm）、膏薬、ペースト剤、噴霧溶液剤およびエアロゾルなど）、または注入用調製物（溶液剤、懸濁剤、乳剤）である。薬学的組成物、および栄養補助的（nutraceutical）／栄養学的／栄養補助的（supplement）組成物は、任意の動物（ヒト、コンパニオンアニマル／家畜（例えば、イヌ、ネコ）、食用の家畜および他の動物が挙げられるが、これらに限定されない）に対する使用のために調合され得る。
【００９０】
また、一実施形態において、本発明の組成物は、耐寒性キウィフルーツ調製物および／またはステロイド（本発明のステロイドに基づく組成物が挙げられる）を含んでいる健康食品（治療食が挙げられる）として、提供され得る。健康食品は、食品、粉末、顆粒、錠剤、チューイングタブレット（chewing tablet）、カプセルまたは飲料などとして提供され得る。また、小児用の食品または乳児食は、本発明の組成物に包含され、例えば、調整された粉ミルク、乳児用の調合物、および調整された乳児食もしくは小児用の食品である。
【００９１】
本発明の調製物、組成物または薬剤が健康食製品に導入され得る好適な食料製品としては、ファインベーカリー製品、ブレッドおよびロール、朝食用のシリアル、加工済および未加工のチーズ、調味料（ケチャップ、マヨネーズなど）、乳製品（牛乳、ヨーグルト）、プディングおよび寒天のデザート、炭酸飲料、茶、飲料の粉末混合物、加工済の魚介製品、果実から作られた飲料（フルーツジュースが挙げられる）、野菜から作られた飲料（野菜ジュースが挙げられる）、チューイングガム、堅い菓子類、冷凍した乳製品、加工済の肉製品、ナッツスプレッドおよびナッツから作られたスプレッド、パスタ、加工済の鶏食肉製品、グレイビーソースおよびソース、ポテトチップスおよび他のチップスもしくはクリスプ、チョコレートおよび他の菓子類（クッキー、キャンディー、リコリス菓子）、アイスクリーム、乾燥食品、カット済および加工済の食料品（例えば、果実および野菜）、香辛料、アルコール飲料、ヌードル、発酵食品、スープおよびスープ混合物、大豆から作られた製品（ミルク、飲料、クリーム、ホワイトナー）、植物油から作られたスプレッド、ならびに野菜から作られた飲料が挙げられるが、これらに限定されない。また、本発明の組成物は、食品とともに使用され得る（例えば、食品の盛り付け時、または食品を調製するときに、食品の上に乗せられ得るか、食品に注がれ得るか、または食品に混合され得る）。
【００９２】
組成物、特に上述のように特定される組成物を含んでいる美容調合物は、任意の形態（例えば、美容液、ローション剤、クリーム剤、精油、化粧液、乳剤、パック、石鹸、シャンプー、リンス、洗顔剤、身体の洗浄溶液、洗浄溶液、トリートメント、ゲル、バーム、および噴霧溶液）に調製され得る。
【００９３】
本発明のさらなる他の目的は、動物の飼料または飼料の成分（ときには飼料の添加物とも呼ばれる）を提供することである。当該動物の飼料または飼料の成分は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物、および／または本発明の１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいる。飼料の成分は、必要に応じて、動物の飼料製品に調合され得るか、または動物の飼料ととも使用され得るか、もしくは混合され得る食料の製品、粉末、顆粒、錠剤、液体、乳剤、ペーストなど（例えば、動物の飼料に降りかけられるか、もしくは混合される粉末、または動物の飼料に加えられる液滴）として提供され得る。動物の飼料としては、動物（家庭内のペット（コンパニオンアニマル）および食用の家畜）に使用される任意の飼料製品または飼料の添加物が挙げられ、動物の食品もしくは固形飼料（例えば、ドッグフード、キャットフード、ウシの飼料など）、ビスケット、トリート、骨、チュー、ペースト、錠剤、粉末、水への添加物などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９４】
本発明の組成物または調製物のうちのいずれかは、上述の障害または疾患のうちのいずれかの少なくとも１つの症状の予防、処置、改善および／または軽減のための付加的な治療剤または栄養免疫賦活剤／栄養剤（付加的な活性成分）とともにさらに構成され得るか、または使用され得る。当該障害または疾患としては、アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがんが挙げられるが、これらに限定されない。耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド／ステロイドに基づく化合物を除いた活性成分としては、薬学的に活性な薬剤および／または栄養学的に活性な薬剤が挙げられ得る。活性な薬剤は、所望される付加的な栄養学的特性、および／または治療学的特性および／または薬学的特性の少なくとも１つを、本明細書に記載のキウィフルーツ調製物および／またはステロイド組成物に加えて、組成物に対して典型的に提供する。好ましい付加的な活性剤としては、抗炎症性化合物、抗アレルギー性化合物、または患者に利益をもたらすために免疫応答を調節し得る任意の他の化合物もしくは組成物が挙げられるが、これらに限定されない。当該利益は、疾患または障害（例えば、アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状を軽減（緩和、減退、抑制）することによってもたらされる。付加的な薬剤（付加的な活性薬剤が挙げられる）は、任意の有効量において、組成物、調製物、成分、添加物または本発明の他の調合物に含められ得る。有効量は、上記薬剤によって与えられる所望の影響（例えば、対象の健康および栄養状態に対する影響（例えば、治療効果または栄養学的効果）、食味に対する影響、芳香に対する影響、視覚的な影響）を達成するために十分な量である。当業者であれば、付加的な薬剤の好適な量を決定して本発明の組成物に加えることができる。
【００９５】
例えば、本発明の組成物は、１つ以上の治療剤（例えば、医薬品）（本明細書において活性薬剤とも呼ばれ得る）を含み得る。当該治療剤は、免疫応答の調節によって処置され得るか、もしくは改善され得る障害もしくは疾患を処置するためにか、またはそれらの症状を軽減するために使用される。そのような付加的な治療剤としては、抗ヒスタミン（任意の種類（全身性、局所性、吸入用）のＨ１ブロッカーおよびＨ２ブロッカーが挙げられる）、抗体（例えば、抗ＩｇＥ、抗ＩＬ−１０）、抗生物質、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、β−アゴニスト（長期間または短期間にわたって作用する）、ロイコトリエン修飾因子（阻害剤または受容体アンタゴニスト）、サイトカインもしくはサイトカイン受容体のアンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクリミル、テオフィリン、カフェイン、カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン、Ｔ細胞機能の阻害剤および他の抗炎症剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９６】
また、本発明によって提供されるか、または本発明に使用される組成物のうちのいずれかは、活性薬剤として１つ以上の天然物を含み得る。当該天然物としては、脂肪酸およびポリケチド；有機酸および種々の小さな有機化合物；芳香族アミノ酸およびフェニルプロパノイド；直鎖および環状のペプチド、デプシペプチド、および他のアミノ酸誘導体；ヌクレオシドおよびヌクレオチド；炭水化物；タンパク質、細胞および細胞断片；漢方薬および香辛料；鉱物；滅菌剤；調味剤；ビタミン；電解質；ならびに他の天然の作用物質が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
本発明の組成物に加えられ得る他の成分（化合物または薬剤）としては、合成香味料、着色剤、加工剤、アルギニン酸もしくはそれらの塩、有機酸、保護コロイド粘着剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、保存剤、グリセリン、アルコール、炭酸化剤、または調合物（任意の投与方法による栄養学的使用または治療的使用のための）、食品、飼料もしくは飼料添加物または飲料の任意の必須な他の薬剤が挙げられる。
【００９８】
本発明の組成物と組み合わせるか、または本発明の組成物に加えるための特に好ましい成分（活性な作用物）としては、プロバイオティクス；細菌の細胞壁および断片；乳漿；タウリン；アラニン；カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン；脂肪酸（例えば、共役リノール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、α−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、ステアリドン酸）；イノシトール；ウコン；クルクミン；ロスマリン酸；メチルスルホニルメタン（ＭＳＭ）；チョウセンニンジン；ショウガ；プロアントシアニジン；β−カロテン；および主要な生物活性成分として使用されるもの以外のキウィフルーツの異なる種（マタタビ科の任意のメンバー、および特にアクチニディア属の任意のメンバーが挙げられる）の任意の他の調製物が挙げられるが、これらに限定されない。アクチニディア属の任意のメンバーとしては、通常のキウィ種（例えば、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサ）、および耐寒性キウィフルーツ種（例えば、Ａ．アルグタ、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタ）が挙げられる。
【００９９】
脂肪酸およびポリケチドとしては、飽和脂肪酸（例えば、α−リポ酸（Ｒ、ＳおよびＲ，Ｓ））；不飽和脂肪酸（例えば、共役リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、α−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、ステアリドン酸）；脂肪酸エステル；モノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリド（上述の脂肪酸の任意の組合せから構成される）；アセチレン型脂肪酸；分枝鎖脂肪酸；プロスタグランジン；トロンボキサン；ロイコトリエン；芳香族ポリケチド；マクロライドおよびポリエーテル；脂質抽出物（例えば、魚油、エキウム油、ボリジ油、オリーブオイル）；ならびにレチシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１００】
有機酸および種々の小さな有機化合物としては、クエン酸；フマル酸；グアヤコール；メチルスルホニルメタン（ＭＳＭ）；およびアスコルビン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０１】
芳香族アミノ酸およびフェニルプロパノイドとしては、芳香族アミノ酸および安息香酸（例えば、安息香酸、没食子酸、ゲンチシン酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、プロトカテク酸、バニリン酸、サリチル酸、シリング酸）；桂皮酸（例えば、ヒドロキシチロゾール、クルクミン、ロスマリン酸、ａｒ−ツルメロン、カフェー酸；オイゲノール；クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸、桂皮酸、フェルラ酸、ｏ−クマル酸、ｐ−クマル酸）；リグナンおよびリグニン；フェニルプロペン；クマリン；スチリルピロン；フラボノイド（例えば、アントシアニジン（例えば、デルフィニジン）；プロアントシアニジン；カテキン（例えば、カテキン、エピカテキンおよびテアフラビン）；フラボノール（例えば、ナリンゲニン）；カルコン（例えば、フロレチン）；イソフラボン（例えば、ビテキシン））；スチルベン；フラボノリグナン；イソフラボノイド；ならびにテルペノイドキニン（例えば、Ｋビタミン、およびトコトリエノールといったトコフェノール（ビタミンＥ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０２】
テルペノイドとしては、モノテルペン（例えば、β−ピネン、ボルネオール、カルバクロール、ゲラニオール、チモール、１，８−シネオール、テルピネオール）；イリドイド（例えば、モノトロペイン）；β−イオノン（例えば、Ａビタミンに対する炭素１３の前駆体）；セスキテルペン（例えば、カリオフィレン、ファルネソール）；ジテルペン（例えば、Ａビタミン）；セステルテルペン；トリテルペン（例えば、α−アミリン、ルペオール、ウルソル酸）；テトラテルペン；ならびにカロテノイド（例えば、リコペン、β−カロテン、ルテイン、アスタキサンチン、カンタキサンチン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０３】
アルカロイドとしては、ピロリジンアルカロイド、ピペリジンアルカロイド、キノリジジンアルカロイド、インドリジジンアルカロイド、ピリジンアルカロイド、フェニルエチルアミン、テトラヒドロイソキノリンアルカロイド、ガランタミン、インドールアルカロイド、β−カルボリンアルカロイド、テルペノイドインドールアルカロイド、キノリンアルカロイド、ピロロインドールアルカロイド、アーガットアルカロイド、キナゾリンアルカロイド、キノリンおよびアクリジンアルカロイド、イミダゾールアルカロイド、ピペリジンアルカロイド、エフェドリン、カプサイシン、ピリジンモノテルペンアルカロイド、アコニチン、プリンアルカロイド、（例えば、アラントイン、カフェイン、テオフィリン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０４】
コリンおよびポリフィリンとしては、Ｂビタミンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
直鎖および環状のペプチド、デプシペプチドならびに他のアミノ酸誘導体としては、単純なアミノ酸およびそれらの誘導体（例えば、Ｌ−アセチルカルニチン、コリン、タウリン、アラニン、カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン）、環状のデプシペプチド、β−ラクタム、青酸グリコシド、グルコシノレート、システインスルホキシドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０６】
炭水化物としては、単糖（例えば、イノシトール）、多糖（例えば、フルクト−オリゴ糖（例えば、任意の鎖長のインスリン）；ガラクト−オリゴ糖；キチンおよびキトサン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０７】
本発明の組成物において有用な天然物質の例としては、タンパク質（例えば、乳漿タンパク質および超酸化物不均化酵素）；細胞および細胞断片（例えば、生物にとって意義のあるプロバイオティクス、未処置の微生物（例えば、ラクトバチルス ｓｐｐ．）、細菌の細胞および細胞壁断片、真菌／酵母の細胞および細胞壁断片）；漢方薬および香辛料（例えば、チョウセンニンジン、ファン（huang）、ウコン、ローズマリー、ショウガ）；鉱物（例えば、Ｋ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｂ、Ｓｉ、Ｓｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。また、任意のこれらの化合物の代謝物および誘導体が、本発明によって包含される。
【０１０８】
多くの付加的な化合物、薬剤および成分が、本発明の組成物の調合に使用され得る。そのような化合物、薬剤および成分としては、種々の有機酸、リン酸塩、抗酸化剤、水溶性ビタミン、脂溶性ビタミン、ペプチドポリマー、多糖のポリマー、スフィンゴ脂質、海草の抽出物、藻類の抽出物、オイル成分（エステルオイル、炭化水素油オイル、シリコンオイル、フッ化物油、動物油、植物油）、湿潤剤、界面活性剤、有機もしくは無機の染料、有機物の粉末、紫外線吸収剤、保存剤、防腐剤、植物の抽出物、ｐＨ調節剤、アルコール、顔料、香料、解熱剤、汗止め、および蒸留水が挙げられるが、これらに限定されない。そのような成分は、上述の組成物のうちのいずれかに対して加えられ得る。一実施形態において、他の成分の量は、組成物の総量において０．０１％〜５％、より好ましくは０．０１％〜３％の範囲である。そのような成分は、従来の文献に記載の方法によって取得され得る。
【０１０９】
一実施形態において、本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物の好適な量および用量としては、患者の体重１ｋｇにつき約０．１ｇ〜約１０ｇの量、好ましくは体重１ｋｇ、１日につき約１ｇ〜約３ｇの耐寒性キウィフルーツの量が挙げられる。上記用量が、１日に１回、１日に２回、または必要に応じてより長い期間（例えば、数日、１週間、１ヶ月など）に投与され得る。本明細書に記載の組成物に関して、本発明の組成物に使用される耐寒性キウィフルーツ調製物は、当該組成物の総重量に対して、約０．０１重量％〜１００重量％の間、好ましくは約０．０１重量％〜約９５重量％の間、より好ましくは０．５重量％〜８０重量％の間（０．０１重量％〜１００重量％の間の、０．０１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の量であるべきである。一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、上記組成物の総重量に対して、約０．０１〜５０％の耐寒性キウィフルーツを含有し得る。好適な量または用量は、投与の目的、または処置される障害もしくは疾患、ならびに対象の体重、重篤度、薬剤の形態、投与経路および投与期間に依存して変わり得、当業者によって選択され得る。
【０１１０】
一実施形態において、本発明に使用される耐寒性キウィフルーツ調製物は、約２０％〜９０％（２０％〜９０％の間の、１％区切りの任意の値が挙げられる）の高濃縮された液体、粉末または顆粒として任意の組成物に含有され得る。
【０１１１】
上記組成物における付加的な成分の比率は、一般的に、上記組成物の１００重量％のうちの約０〜２０重量％（０％〜１００％の間の、１％区切りの任意の値が挙げられる）の範囲である。
【０１１２】
一実施形態において、美容組成物は、当該組成物の総重量に対して約０．０１〜３０％、より好ましくは０．０１〜５％（０．０１％〜３０％の間の、１％区切りの任意の値が挙げられる）の量の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいる。
【０１１３】
食品、食品成分または飲料に加えられている、耐寒性キウィフルーツを含んでいる組成物は、食品、食品成分または飲料の総重量の約０．１〜９５重量％、好ましくは１〜８０重量％（０．１〜９５重量％の間の、０．１重量％区切りの任意の値が挙げられる）、または飲料組成物の１００ｍｌにつき約１〜３０ｇ、好ましくは３〜１０ｇ（１ｇ〜３０ｇの間の、１ｇ区切りの任意の値が挙げられる）の範囲の量が含まれ得る。
【０１１４】
一実施形態において、本発明の健康食品は、組成物の総重量に対して０．０１〜８０％、好ましくは１〜５０％（０．０１％〜８０％の間の、０．１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいる。
【０１１５】
一実施形態において、本発明の健康飲料は、組成物の総重量に対して約０．０１〜約２０％（０．０１％〜２０％の間の、０．１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の耐寒性キウィフルーツ組成物を含んでいる。本発明の健康飲料組成物は、飲料における他の成分を特に限定することなく、上述の耐寒性キウィフルーツ組成物を必須の成分として含有している。ここで、他の成分は、従来の飲料に添加され得るような種々の甘味料および／または調味料であり得る。
【０１１６】
食品成分は、付着、噴霧または混合によって食品に加えられ得る。添加される成分の組成物の総量に対する量は、一般的に、本組成物の１００重量％につき、約０．０１〜２０重量％（２０重量％〜１００重量％の間の、１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の範囲であり得る。また、食品成分または食品添加物は、飼料（例えば、動物の飼料）とともに、当該飼料の総乾燥重量の１ｋｇにつき約５〜１００ｇ（５ｇ〜１００ｇの間の、１ｇ区切りの任意の値が挙げられる）の量が混合され得る。
【０１１７】
ステロイド（ステロイドから作られた本発明の化合物または組成物が挙げられる）の好適な用量としては、患者の体重の１ｋｇにつき０．００１μｇ〜１０ｍｇ、および０．０００１μｇ〜１０ｍｇの間の、０．００１μｇ区切りの任意の用量（すなわち０．００１μｇ、０．００２μｇ、０．００３μｇ．．．１．１００μｇ、１．１０１μｇなど）が挙げられ得る。種々の対象（種々の動物が挙げられる）の処置にとって好適なステロイドの用量は、当該分野において公知である。好適な用量は、実施例においてヒトおよびイヌに関して説明されている。本発明が個体に投与されるストロイドの量を低下させること、および／またはステロイド組成物を用いた処置の期間および／または頻度を低下させることについて認識されるだろう。
【０１１８】
（本発明の方法）
したがって、本発明の目的は、患者（個体）における免疫応答を選択的に調節する方法、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節する方法、より詳細には、哺乳類におけるＴｈ１応答を増強し、および／または哺乳類におけるＴｈ２免疫応答を抑制する方法を提供することである。そのような方法は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがんが挙げられるが、これらに限定されない）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減にとって有用である。そのような方法は、本発明の単一または複数の組成物の投与または提供によって利益をこうむる個体（患者、対象、動物）に対する、本明細書に記載の本発明の単一または複数の組成物の投与または提供を包含している。詳細には、本発明の方法は、キウィフルーツ調製物、および１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいるか、実質的にそれらからなる、またはこれらからなる組成物の投与または提供を包含している。代替可能に、キウィフルーツ調製物は、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいるか、実質的にそれらからなる、またはこれらからなる第２の組成物とともにか、および／または当該第２の組成物を用いて逐次的に、投与されるか、または提供される。逐次的な投与は、所望の結果を得るために必要に応じて、同時期に（同じ投与期間内に）行われ得るか、または数日間、数週間もしくは数ヶ月間を空けて行われ得る。好ましくは、ステロイドおよび耐寒性キウィフルーツの組成物は、同じ組成物にともに含めて使用されるか、または同時に使用される。一実施形態において、組合せ（耐寒性キウィフルーツおよびステロイド）の使用の期間は、キウィフルーツ調製物を用いた単独療法の期間の前または後であり得る。本発明の組成物の詳細については上述の通りである。
【０１１９】
本発明の特定の実施形態において、キウィフルーツ調製物およびステロイド調製物の組合せの投与によって、炎症、特にアレルギー性の炎症と関連する疾患または障害の症状の少なくとも１つ、好ましくは１つ以上が、軽減（緩和、減退、除去、抑制など）される。そのような症状としては、哺乳類における、かゆみ（掻痒）、発赤（紅斑）、滲出および外被形成（皮膚剥離）、肥厚（苔癬化）、抜け毛（脱毛症）、および／または皮膚の腫脹が挙げられるが、これらに限定されない。また、炎症の他の任意の症状が本発明を用いて軽減され得る。従来のステロイド療法と耐寒性キウィフルーツ調製物の組合せの使用が、アレルギー疾患（例えば、アレルギー性皮膚炎）の症状の軽減に対して相乗効果を有していること、および本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物の使用が、アレルギー性疾患（例えば、アレルギー性皮膚炎）の処置において、従来のステロイド療法に対する補助的な療法として少なくとも役立つことを、本発明者らは見出している。
【０１２０】
また、上記組成物の投与または提供、特に本明細書に記載の組合せ療法（耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドに基づく療法）は、本明細書において生物活性と表現されている以下の（ａ）〜（ｍ）の検出可能または測定可能な結果の少なくとも１つを生じる。（ａ）患者におけるＩｇＥを産生するＢ細胞の数を低下させる活性；（ｂ）患者において（例えば、血清または血漿において）産生されるＩｇＥの量を低下させる活性；（ｃ）少なくとも１つのＴｈ２サイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０）の産生および／またはレベルを低下させる活性；（ｄ）少なくとも１つのＴｈ１サイトカイン（例えば、ＩＬ−１２、ＩＦＮγ）の産生および／またはレベルを増加させる活性；（ｅ）転写調節因子ＧＡＴＡ−３の発現レベルを低下させる活性；（ｆ）転写調節因子Ｔ−ｂｅｔの発現レベルを増加させる活性；（ｇ）転写調節因子ＮＦＡＴｃ２の発現レベルを増加させる活性；（ｈ）患者におけるＩｇＧ２ａを産生するＢ細胞の数を増加させる活性；（ｉ）患者において産生されるＩｇＧ２ａの量を増加させる活性；（ｊ）特に炎症性部位における、Ｔｈ１ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＦＮγ＋）の産生を増加させるか、活性を増強させる活性；（ｋ）特に炎症性部位における、Ｔｈ２ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＬ−４＋）の産生または活性を低下させる活性；（ｌ）患者におけるＩｇＧ１を産生するＢ細胞の数を低下させる活性；（ｍ）患者において産生されるＩｇＧ１２の量を低下させる活性；および／または（ｎ）患者における少なくとも１つのロイコトリエンのレベルまたは産生を低下させる活性。本発明の（複数の）組成物の投与または提供の結果としての、個体の健康状態の改善、または個体に対する利益が、本発明によって包含され、本発明の組成物および方法の有用な結果である。当該改善または利益は、特にアレルギーまたは炎症の任意の症状の軽減、個体の免疫応答における好ましい任意の変化、および／または本明細書に記載されている好ましい任意の他の生物活性の検出よって評価される。
【０１２１】
本発明の一態様において、本発明の（複数の）組成物の投与または提供、特に本明細書に記載の組合せ療法（耐寒性キウィフルーツ調製物、およびステロイドに基づく療法）によって、患者におけるロイコトリエンの産生が低下し、これによって、患者におけるロイコトリエンと関連する障害または疾患の少なくとも１つの症状が処置または軽減される。ロイコトリエンと関連する障害または疾患としては、喘息、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、慢性の蕁麻疹、およびアレルギー性皮膚炎が挙げられるが、これらに限定されない。この実施形態において、好ましい投与経路としては、全身性の投与経路に加えて、経口投与、吸入投与、局所性投与が挙げられる。
【０１２２】
したがって、上述の方法は、本明細書に記載のような免疫応答の調節が患者にとって利益をもたらすか、そのように予測される、任意の疾患もしくは障害の予防および／または処置、および／またはこれらの任意の症状の軽減のために使用され得る。また、本発明は、ステロイド療法のおよび／または任意の他の療法、特に従来の療法の、患者における使用の量および頻度を低下させるための、本発明の組成物の投与または提供を包含する。
【０１２３】
したがって、本発明の目的は、哺乳類におけるアレルギー性疾患および非アレルギー性の炎症性疾患を処置および／または予防する方法を提供することである。当該方法は、本明細書に記載の任意のキウィフルーツ調製物の有効量を上記哺乳類に投与する工程を包含している。上記工程において、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）がともに（同時および／または逐次的に）投与される。そのような組成物は、典型的に薬学的に受容可能な担体を含んでいる。
【０１２４】
本明細書に使用されるとき、“疾患から保護される”という表現は、疾患の症状を緩和（軽減）すること；疾患の発症を減らすこと；および／または疾患の重篤度を下げることを指す。患者の保護は、本発明の（複数の）組成物の能力（患者に投与された場合における、疾患の発症を予防する能力、および／または疾患の症状、徴候もしくは原因の少なくとも１つ、好ましくは１つ以上を軽減する能力）を指し得る。好ましくは、症状の軽減の結果として、患者は、生活の質が改善された状態になり、健康状態が改善され、潜在的に害のある療法、不快な療法または他の点おいて有害な療法の使用（量および頻度）を減らすことができるか、および／または本発明の組成物および方法を使用する前ほどの疾患または障害に見舞われることがなくなる（治療の完全な治療が含まれ得る）。したがって、疾患から患者を保護することは、疾患の発生を予防すること（予防的な処置）、および最も典型的に、疾患の治癒よりむしろ、疾患の症状を和らげるための、疾患にかかっている患者の処置（治療上の処置）の両方を包含している。疾患から患者を保護すること、または他の療法の効果を高めることは、好ましい効果が得られるように所定の活性を制御することによって実現される。好ましい効果は、当業者および／または患者を処置する熟練した臨床医によって容易に評価され得る。“疾患”という用語は、哺乳類の正常な健康状態からの任意の異常を指し、疾患には、疾患の症状が存在する状態、および異常（例えば、感染、遺伝子の変異、遺伝的な欠失など）が存在しているが、症状がまだ顕在化していない状態が含まれる。
【０１２５】
本発明によれば、アレルギー性疾患としては、喘息、アレルギー性の気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性の気管支炎、気管支拡張症、過敏性肺炎、アレルギー性の副鼻腔炎、過敏症、アレルギー性鼻炎、アレルギー性の結膜炎、アトピー性の皮膚炎、伝染性の皮膚炎、慢性の蕁麻疹、昆虫アレルギー、食物アレルギー、および薬物アレルギーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
一実施形態において、アレルギー性疾患はアトピー性の皮膚炎である。この実施形態において、本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいるか、実質的にそれらからなる、それからなる組成物の投与に加えて、患者は、アトピー性の皮膚炎に対する従来のステロイド療法を用いて（同時または逐次的な投与によって）、付随して処置される。本発明のこの実施形態において、耐寒性キウィフルーツ調製物、および／またはステロイド組成物は、最も好ましくは経口投与または局所投与によって投与されるが、本発明は、このような投与経路に限定されない。
【０１２７】
一実施形態において、アレルギー性疾患は喘息である。この実施形態において、本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいるか、実質的にそれらからなる、それからなる組成物の投与に加えて、患者は、喘息に対する従来のステロイド療法（吸入ステロイドの投薬が挙げられるが、これに限定されない）を用いて（同時または逐次的な投与によって）、付随して処置される。また、他の喘息制御剤が使用され得る。本発明のこの実施形態において、耐寒性キウィフルーツ調製物、および／またはステロイド組成物は、最も好ましくは経口投与または吸入投与によって投与されるが、本発明は、このような投与経路に限定されない。ステロイド療法は、任意の好適な方法、最も好ましくは経口投与または吸入投与によって投与される。
【０１２８】
本発明によれば、非アレルギー性の皮膚炎の疾患としては、炎症によって起こる皮膚の種々の異常（例えば、丘疹および座瘡など）が挙げられるが、これらに限定されない。上述の組成物は、例えば従来のステロイドに基づく療法と併用して投与される場合に、患者における皮膚炎予防、処置および／または改善に有用である。
【０１２９】
本明細書に記載の組成物および方法を用いて予防され得るか、または処置され得る他の非アレルギー性の炎症性疾患としては、種々の皮膚炎の障害、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、網膜炎、胃炎、網膜症、肝炎、腸炎、膵炎、腎炎、およびＴｈ２型の免疫応答の低下および／またはＴｈ１型の免疫応答の亢進が有効である類似の障害が挙げられるが、これらに限定されない。上述のように、上記組成物は、特に従来のステロイド療法を用いて同時または逐次的に投与される場合に、当該疾患、障害またはこれらの症状の予防、処置および／または改善にとって有効ある。
【０１３０】
ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）の投与に加えて、疾患または障害を処置または予防するための上述の方法のうちのいずれかにおいて、耐寒性キウィフルーツ調製物は、特定の障害の処置に有効な他の療法または組成物と併せて（同時および／または逐次的に）、投与され得る。これらの実施形態において、付加的な組成物または療法を用いた耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド療法の組合せは、患者における症状の改善、回復または軽減を促進するための従来の療法に対する免疫賦活剤として役立ち得る。しかし、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド療法の組合せに関して見出されているように、付加的な組成物または療法を用いた耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド療法の組合せが、単独の治療方法のうちのいずれかの使用を超えて相乗効果を提供し得ることについて、本発明によって認識される。この他に、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物の使用の、ステロイド療法との組合せは、単回ごとのステロイドの投与量および／またはステロイド投与の頻度を低下できるという利点を提供し、本発明の耐寒性キウィフルーツ／ステロイド療法と同時に使用される他の療法の投与量および投与頻度を付加的に低下できる。ステロイドおよび他の療法が所望されない副作用としばしば関連しているので、そのような成分の使用を減らす能力は、患者にとって大きな利益を提供する。
【０１３１】
本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物とともに使用され得る付加的な従来の薬剤または療法の特に好ましい典型としては、脂肪酸（より長鎖の脂肪酸（１８以上の炭素鎖を有している脂肪酸が挙げられる））、抗ヒスタミン（全身性、局所性、吸入性の任意の型が挙げられる）、抗体（例えば、抗ＩｇＥ、抗ＩＬ−１０）、抗生物質、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、β−アゴニスト（長期間または短期間にわたって作用する）、ロイコトリエン修飾因子（阻害剤または受容体アンタゴニスト）、サイトカインもしくはサイトカイン受容体のアンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクリミル、テオフィリン、カフェイン、カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン、ショウガ、クルクミン、カテキン、フラボノール、フラボノイド、ポリフェノール、Ｔ細胞機能の阻害剤および他の抗炎症剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３２】
本発明の方法において、組成物は、脊椎動物門、哺乳類網に属する任意の動物（霊長類目、げっ歯類目、食用の家畜、ウマおよび家庭内のペットが挙げられるが、これらに限定されない）に、投与され得るか、または提供され得る。保護するための好ましい患者は、家庭内のペット（例えば、コンパニオンアニマル（イヌおよびネコが挙げられるが、これらに限定されない））およびヒトであり、ヒトであることが特に好ましい。すべての投与形態が意図されている。本発明によれば、“患者”、“対象”および“個体”という用語は、交換可能に使用され得る。
【０１３３】
本発明によれば、効果的な投与手順（すなわち効果的な様式において組成物を投与すること）は、炎症の制御、または患者における疾患もしくは障害の症状に関して所望の結果をもたらす好適な用量のパラメータおよび投与の形態を含んでいる。効果的な用量のパラメータは、特定の疾患または障害について、当該技術において標準的な方法を用いて決定され得る。当該方法としては、例えば、生存率、副作用（すなわち毒性）、および疾患の進行もしくは退行の測定が挙げられる。
【０１３４】
本発明の組成物は、１日に２、３、４回またはそれ以上；一日に１回（毎日）；１週間に２、３、４、５または６回；毎週；隔週；毎月；有効であると判断される他の任意の間隔において投与され得る。投与は、必要に応じた基準に基づいて、一定の期間（通常は数日間、数週間または数ヶ月間と見積もられる）、または患者の生涯にわたって行われ得る。
【０１３５】
本発明の一態様において、上記方法は、同じ組成物（同時に投与される）または個々の組成物（逐次的に投与される）のいずれかとして、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）と耐寒性キウィフルーツ調製物との組合せの投与期間を包含している。当該投与期間は、耐寒性キウィフルーツ調製物の単独投与の期間の後および／または前にある。同時投与の期間中に、耐寒性キウィフルーツ調製物は、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）と実質的に同時に（例えば、それぞれの日の同じ時点またはほぼ同じ時点に）か、または同じ投与日程の異なる時点に（例えば、単回投与日程が毎日であれば、同じ日のうちの異なる時点に）に投与され得る。単独療法に対する組合せ療法の投与期間は、患者の反応性に基づいて決定され得るが、臨床医によって決定される通りに、１週間（例えば、必要に応じて繰り返される、１週間にわたる組合せ療法の毎日の投与に続いて、１週間にわたる単独療法の毎日の実施）、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、およびそれ以上の期間の交代間隔を包含し得る。交代の投与期間は、同じ時間の長さである必要はない。例えば、組合せ療法は、１つの投与期間（例えば、４週間）にわたって実施され得、それから単独療法は、症状の継続的な改善または改善の維持が認められなくなるまで（数週間または数ヶ月間であり得る）投与され得る。続いて、組み合わせ療法が必要に応じて投与され得る。さらに、キウィフルーツ調製物に関して必要な用量は、ステロイドに基づく療法に必要な用量と異なり得るが、これは、臨床医が決定し得る範囲内の事項である。
【０１３６】
投与経路としては、インビボ経路およびエクスビボ経路が挙げられるが、最も一般的にインビボ投与が挙げられる。エクスビボは、制御工程の一部を患者の体外において実施することを指す。インビボ経路としては、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、結節内（intranodal）投与、歯冠内投与、動脈内投与（例えば、頚動脈内）、皮下投与、経皮送達、気管内投与、関節内投与、心室内投与、吸入（例えば、エアロゾル）、頭蓋内投与、脊髄内投与、眼球内投与、耳投与、鼻腔内投与、経口投与、肺投与、カテーテルによる注入、皮内注入、くも膜下腔内注入、硬膜外注入、脳室内注入、および組織への直接注入が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の一実施形態において、組成物は、非経口経路（例えば、皮下、皮内、静脈内、筋肉内および腹腔内の経路）によって投与される。静脈内、腹腔内、皮下および筋肉内の投与は、当該分野において標準的な方法を用いて実施され得る。耳からの送達としては、点耳薬が挙げられ得、鼻腔内送達としては、点鼻薬または鼻腔内注入が挙げられ得、眼球内送達としては、点眼薬が挙げられ得る。また、エアロゾル（吸入）送達は、当該分野において標準的な方法を用いて実施され得る（例えば、その全体が参照によって本明細書に援用されるStribling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 189:11277-11281, 1992を参照すればよい）。例えば、一実施形態において、本発明の組成物またはワクチンは、好適な吸入装置または噴霧器を用いて噴霧送達に好適な組成物に調合され得る。経口送達は、動物の消化管における消化酵素による消化に耐性を有している担体に対して、本発明の組成物を、例えば錠剤またはカプセル剤として複合化すること、および食品、飼料および飲料製品に調合されることによって実施され得る。そのような担体の例としては、合成樹脂のカプセルもしくは錠剤、または当業者に公知のような食品の原料が挙げられる。直接的な注入技術は、化合物の部位特異的な投与にとって特に有効である。経口送達または局所的な送達は、本発明に係る送達または投与の特に好ましい経路である。粘膜の免疫性を調節する投与経路は、ウイルス感染およびいくつかのアレルギー性の障害の処置に有用である。そのような経路としては、気管支、皮内、筋肉内、鼻腔内、他の吸入性、直腸、皮下、局所性、経皮、膣および尿道口の経路が挙げられる。
【０１３７】
本発明は、以下の実施例によってより詳細に説明される。しかし、どのようにしても、本発明がこれらの実施例に限定されないことが理解されるべきである。
【０１３８】
〔実施例〕
（実施例１）
以下の実施例において、後述の実施例において使用されるＡ．アルグタを含んでいる種々の調製物の調製について示している。
【０１３９】
植物材料
アクチニディア アルグタ（サルナシ（（Sieb. Et Zucc.） Planch. ex Miq.）（マタタビ科）の栽培変種“アナナスナヤ（Ananasnaya）”）の茎（stems）（ケイン（canes）およびスパー（spurs）からなる）、根および外皮が、ハースト食用小果実の農場（シェリダン、OR）において採取された。証拠標本（＃５１８６４０）が、コロラド大学（ボールダー、CO）のUniversity of Colorado Herbarium、収集管理者のティム ホーガン氏によって認証され、同じ施設に寄託された。植物材料は、４８時間にわたって風乾され、抽出または他の処理まで室温において保存された。
【０１４０】
熟してすぐに食用に供せられるＡ．アルグタの果実が、ハースト食用小果実の農場において採取され、直ちに凍結され、出荷され、抽出または他の処理の前まで凍結させて（−２０℃）保存された。
【０１４１】
抽出物および他の調製物
茎の粉末（１２６．６ｇ）、根の粉末（７９．０ｇ）、および細かく切った外皮（１２６．２ｇ）のそれぞれは、蒸留水（１Ｌ）を用いて、９４℃において４時間にわたって抽出された。それから、混合物がろ過され、ろ液がロータリーエバポレータによって乾燥するまで濃縮されて、茎の抽出物（９．９ｇ）、根の抽出物（８．６ｇ）および外被の抽出物（２．４ｇ）を生じた。
【０１４２】
２０の凍結したＡ．アルグタの果実（１５４．４ｇ）が室温において解凍され、圧搾され、蒸留水（１Ｌ）を用いて、９１℃において５時間にわたって抽出された。混合物がろ過され、ろ液が濃縮されて“煮沸した”新鮮果実の抽出物（１２．８ｇ）を生じた。
【０１４３】
さらなる凍結した未乾燥のキウィフルーツ（３４１．６ｇ）が解凍され、ジューサーにかけられた。ジューサーによって果実から表皮が取り除かれて、種子、果肉および果汁の混合物を生じた。混合物は遠心分離されて（３０分間、〜３５００ｒｐｍ）、１５０ｍＬの果汁を生じた。この果汁がロータリーエバポレータによって乾燥するまで濃縮されて、果汁の濃縮物（２４．２ｇ）を生じた。
【０１４４】
上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載されている大量の抽出物の等価物を生成するために、キウィフルーツの生産規模での抽出が実施された（Sungil Bioex Co., Ltd., Bibomg, Korea）。凍結したキウィフルーツ（１２４２ｋｇ）がスライスされ（１／４から３／８の厚さ）、対流乾燥器（６５〜８０℃）において５〜２０％の含水率まで乾燥された。乾燥した果実（２３９ｋｇ）のバッチ抽出（図１）が、抽出装填物を支持するための内部ろ過フィルタを有しているジャケットつきのステンレス鋼の反応器において実施された。外部の濃縮器は、抽出中における水の損失を防ぐために使用された。抽出溶媒（水）の量は、抽出される乾燥した果実の重量の５〜１０倍を基準にした。抽出容器の内容物は、反応器のジャケットに蒸気を導入することによって、２時間にわたって０〜９０℃まで加熱された。それから、水（９０℃）は、４〜１２時間にわたって外部の循環ループを用いたバイオマスを通して再循環された。続いて、消耗したバイオマスは、処分するために取り除かれ、水性の抽出物が１０μｍのフィルタに通してろ過された。それから、ろ液は、外部の濃縮器および抽出物の受液器を備えている、攪拌されたステンレス鋼の反応器において、５５〜６５℃の真空中（〜６００ｍｍＨｇ）において濃縮された。ひとたび材料が濃縮されると、抽出物を滅菌するためにさらに３０分間にわたって８０℃に維持された。ＰＧ１０２Ｔの等価物である生成された物質（１０１ｋｇ）は、ＦＤ００１と命名された。３ｋｇのこの物質は、さらなる試験のために取りおかれた。優良医薬品製造基準が加工を通して使用された。
【０１４５】
カプセル充填に適し、本明細書に記載の臨床用途に有用な粉末の物質を作るために、上述のように製造されたＦＤ００１の濃縮物（９８ｋｇ）が、水平パドル攪拌器にポンプを用いて注入され、算出された固形分に基づいて等しい重量の微小結晶セルロース（ＭＣＣ）と混合された。これに続いて、固形の混合物は、ステンレス鋼のトレイに移され、２４時間にわたって強制熱風乾燥器（７０〜８０℃）におかれた。それから、乾燥したかたまりの固形物は、フィッツミル型のハンマーミルにおいて挽かれて、４０メッシュ（mesh）の粉末（１１８ｋｇ）を生じた。この物質は、３００ｍｇサイズまたは６００ｍｇサイズのカプセル剤として封入された（米国のＧＭＰ研究所、アナハイム、CA）。カプセル剤のそれぞれは、イヌおよびヒトの臨床試験における使用のために、ＦＤ００１およびＭＣＣの１：１の混合物を含んでいる。
【０１４６】
上述した最初の工程においてスライスされ、乾燥された（しかし、バッチ抽出されていない）、生産規模での物質から得られた乾燥したＡ．アルグタ果実（７．０ｇ）は、粉末にされ、この物質は、水（２５０ｍＬ）を用いて、２５℃において４時間にわたって抽出された。混合物はろ過され、ろ液はロータリーエバポレータによって乾燥するまで濃縮されて、乾燥した果実の室温における水抽出物（４．２ｇ）を生じた。
【０１４７】
ＦＤ００１（７９．９ｇ）は、１．５Ｌの蒸留したＨ２Ｏと混合され、この溶液は、１回につき５００ｍＬの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）を用いて４回にわたって連続的に抽出された。混合性の有機層および水性層は、真空条件において乾燥するまで濃縮されて、ＥｔＯＡｃ濃縮物（７．４ｇ）および水性の残余物（４１．５ｇ）を生じた。
【０１４８】
ＦＤ００１（２１．４５ｇ）は、ＤＩ水に溶解され、ろ過された。ろ液は、約４．５ｃｍ（内径）×１０ｃｍの重力カラムにおけるＣ−１８の逆相充填剤に装填された。カラムは、５００ｍｌの水を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ１）、続いて５００ｍｌの２５％のメタノール水溶液を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ２）、５００ｍｌの５０％のメタノール水溶液を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ３）、５０００ｍｌの７５％のメタノール水溶液を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ４）、５００ｍｌの１００％のメタノールを用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ５）、５００ｍｌの１００％のＤＣＭを用いて溶出された（Ｃｕｔ Ｆ６）。溶出物が回収され、乾燥するまで真空中において蒸発させられて、１４．１６ｍｇのＣｕｔ Ｆ１、６９０ｍｇのＣｕｔ Ｆ２、２３０ｍｇのＣｕｔ Ｆ３、３０ｍｇのＣｕｔ Ｆ４、８３ｍｇのＣｕｔ Ｆ５および３５０ｍｇのＣｕｔ Ｆ６を生じた。全体の回収率は７２．４重量％であった。
【０１４９】
（実施例２）
以下の実施例において、Ａ．アルグタ調製物における免疫調節活性のインビトロ試験について説明する。
【０１５０】
この研究の目的は、オボアルブミン（ＯＶＡ、グレードＶ、Sigma）に感作させたマウスに由来する脾細胞培養株における、Ａ．アルグタから生成された種々の抽出物および調製物の相対的なサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＦＮγ）産生能を、ＥＬＩＳＡ分析（Quantikineキット、Ｒ＆Ｄシステム）を用いて比較することである。以下の試料（上述の実施例１に説明した通りに調製された）：ＦＤ００１（ＰＧ１０２Ｔ）、果汁濃縮物およびＥｔＯＡｃ抽出物が試験された。
【０１５１】
脾細胞の単離および培養
メスのＢａｌｂ／ｃマウス（Harlan、インディアナポリス、IN）が、０日目および１４日目における２０μｇのＯＶＡのＩＰ注射によって感作された。２４日目に頚部脱臼によって安楽死させた後に、脾臓が個々のマウスから無菌的に摘出され、無菌技術を用いて脾細胞培養株を作るために直ちに処理された。脾臓は、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝化のＲＰＭＩ−１６４０の存在下において、３ｃｃのシリンジからプランジャーを用いて７０ミクロンのナイロンのメッシュの格子に通して組織をゆっくりと押し出すことによって、分離された。大きな細胞の凝集物は、ＦＣＳ勾配を用いて生成した懸濁液から除去された。それから、脾細胞は遠心分離され（１５００ｒｐｍ、１５分間）、生じた細胞のペレットがＲＢＣ溶解緩衝液を用いて処理（１０分間、室温）されて、混入している赤血球を除去した。それから、ＲＢＣ溶解緩衝液の大部分が遠心分離（１５００ｒｐｍ、５分間）によって除去され、それからペレット化した脾細胞が１０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝化のＲＰＭＩ−１６４０を用いて３回にわたって洗浄された。最後の洗浄の後に、ペレット化した脾細胞は、５×１０６細胞／ｍｌの最終的な細胞密度を実現するように設計された１０％のＦＣＳおよびＰｅｎｎ／Ｓｔｒｅｐを含有している大量のＲＰＭＩ−１６４０（完全培地）に懸濁された。各分析のために５×１０６の脾細胞が２４ウェルプレートの個々のウェルに入れられた。３日目にこれらのウェルから上清が回収され、実験結果の測定に備えて凍結された。
【０１５２】
また、対照の脾細胞培養株が、未処置の（感作されていない）マウスから、上述のようにして確立され、２４ウェルプレートの各ウェルに入れられて５×１０６細胞／ｍｌの最終的な細胞密度にされた。これらの脾細胞は、１０％のウシ胎児血清およびＰｅｎｎ／Ｓｔｒｅｐを含有しているＲＰＭＩ−１６４０において確立され、さらなる処理を受けなかった。３日目にこれらのウェルから上清が回収され、凍結されて陰性実験対照になった。
【０１５３】
Ａ．アルグタ調製物を用いた脾細胞培養物の刺激
１０匹のＯＶＡ感作マウスが試験された各調製物のために使用された。各マウスから得られた脾細胞は、２４ウェルプレートの別々の８つのウェルに入れられた（５×１０６細胞／ｍＬ）。各ウェルには１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび０．５％のＤＭＳＯを含有しているＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っており、当該培地には、試験中の特定の試験調製物のぞれぞれが、含まれていないか、または選択された濃度だけ含まれている。３組のウェルのぞれぞれは、０．２５、１．０または１０ｍｇ／ｍＬのいずれかの濃度のＡ．アルグタ調製物を用いて処理された。陽性対照として供するために、７番目のウェルは、強力なグルココルチコイド抗炎症薬であるデキサメタゾン（ＤＥＸ）の２μＭを用いて処理された。８番目のウェルにはさらなる処理をせずに、これをＯＶＡのみの実験の対照にした。３日間にわたって培養した後に、ＯＶＡ感作マウスごとの個々の８つのウェルのそれぞれから得られた上清が回収され、凍結された。これらの上清は、培養培地に存在するＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＦＮγのレベルを測定するために使用された。
【０１５４】
培養上清におけるサイトカインレベルの測定
Ａ．アルグタ調製物処理の脾細胞、ＤＥＸ処理の脾細胞、ＯＶＡ処理のみの脾細胞および感作なしの対照マウスから得られた未処理の脾細胞に由来する培養上清は、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された。２つのＥＬＩＳＡプレートウェルが各サイトカインレベルの測定に利用された。
【０１５５】
結果
このインビトロの実験から、ＦＤ００１における活性（図２）、Ａ．アルグタのＥｔＯＡｃ抽出物における活性（図３）、およびＡ．アルグタの果汁濃縮物における活性（図４）が、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載の耐寒性キウィフルーツ調製物の活性と実質的に同様であることを確認した。３つの調製物（１０ｍｇ／ｍＬ）のすべてが、サイトカインＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、およびＩＦＮγの抑制を、種々な程度において引き起こした。最も顕著な効果は、試験された試料のすべてについてＩＬ−１３およびＩＦＮγにみられ、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載の以前のインビトロ試験と一致していた。活性がＥｔＯＡｃ抽出物において観察されたので、ＦＤ００１に存在する活性成分は有機溶媒に溶出され、従来のクロマトグラフィー法によってさらに精製され得る。また、注目に値するのは、果汁濃縮物が脾細胞によるサイトカイン産生を抑制したことであり、上述の米国特許出公開第２００４／００３７９０９号に示されているキウィフルーツの抽出物が耐寒性キウィフルーツの活性な調製物を生成するための唯一の条件ではないことを示している。なお、果汁濃縮物においてサイトカインの抑制が相対的に低いことが明らかであり、ＦＤ００１の調製に使用された乾燥または加熱処理が活性の増強に重要であり得ることを示唆している。
【０１５６】
（実施例３）
以下の実施例において、Ａ．アルグタの果実以外の部分の抽出物およびＡ／アルグタの他の果実調製物のインビトロ活性の比較について説明する。
【０１５７】
この実験の目的は、果実以外の植物の部分または果実の他の調製物（すなわち上述の米国特許出公開第２００４／００３７９０９号に記載の抽出物以外）から生成されているＡ．アルグタ抽出物の、オボアルブミン感作マウスに由来する脾細胞培養株におけるサイトカイン（ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）産生を調節する能力を、ＥＬＩＳＡ分析を用いて評価することである。以下の試料（上述した通りに調製された）：実施例１に記載の通りに調製されたＡ．アルグタの茎、根および外皮の水抽出物；“煮沸した”未乾燥の果実の調製物；実施例１に記載の通りに調製された果汁濃縮物；実施例１に記載の通りに調製されたＦＤ００１粉末（後述する臨床試験に使用された）；乾燥したＡ．アルグタの室温における水抽出物；実施例１に記載の通りに調製されたＥｔＯＡｃ抽出物；および実施例１に記載の水性残余物が試験された。さらに、公知の３つの免疫抑制化合物、シクロスポリン、デキサメタゾンおよびケルセチンの活性が対照として評価された。
【０１５８】
脾細胞の単離および培養
脾細胞の調製は、実施例２において上述した方法と同様に実施された。
【０１５９】
Ａ．アルグタ調製物を用いた脾細胞培養物の刺激
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、試験される抽出物または調製物の分析に利用された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。キウィフルーツ調製物は、１．０、３．０および１０ｍｇ／ｍＬの濃度において試験された。
【０１６０】
シクロスポリン、ケルセチンおよびデキサメタゾン分析
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、ケルセチンを除く各化合物の分析に利用された。ケルセチンの分析において、２匹のＯＶＡ感作マウスのみから得られた脾細胞が試験された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。シクロスポリンは、０．００８３、０．０８３および４．１５μＭの濃度において試験された。デキサメタゾンは、０．０１、０．１および１μＭの濃度において試験された。ケルセチンは、１、１０および２５μＭの濃度において試験された。強力なグルココルチコイド抗炎症薬である１μＭのデキサメタゾンを用いて処理されたウェルを、試験の陽性対照にした。１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地のみを受けているウェルを試験のＯＶＡのみの対照にした。３日間にわたる培養の後に、上清が回収され、凍結された。これらの上清は、試験された実験条件下における、種々の培養培地に存在するＩＬ−１３およびＩＦＮγのレベルを測定するために使用された。
【０１６１】
培養上清におけるサイトカインレベルの測定
すべての処理に関するウェルおよび対照のウェルから得られた培養上清におけるサイトカインレベルは、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された。２つのＥＬＩＳＡプレートウェルが各サイトカインレベルの測定に利用された。
【０１６２】
実施例２に記載のインビトロ試験の結果に基づいて、ＩＬ−１３およびＩＦＮγの発現のみが、試験物質が有している活性のレベルを評価するため分析された。
【０１６３】
結果
上述のように、Ａ．アルグタ試験物質の濃度が上昇するにつれて、試験されたサイトカインの抑制が強くなった。抑制は、ＩＦＮγに対して全体的に顕著であった。所定の免疫抑制化合物の活性は、このアッセイにおいてＡ．アルグタ調製物と同様であった。ペプチドのクロスポリン、およびグルココルチコイドステロイドのデキサメタゾンは。図５Ａに示すように強い活性（＜１μＭ）を示した。フラボノイドのケルセチンは、やや高めの濃度範囲（１〜２５μＭ、図５Ｂ）において強い活性を示した。ＦＤ００１から活性成分を抽出する、ＥｔＯＡｃの能力について、さらに確認し、それを図６Ａおよび６Ｂに示した。興味深いことに、活性が水性残余物にも存在することが観察され、極性成分および非極性成分の両方がインビボにおける免疫抑制効果を担っていることを示している。イヌおよびヒトの臨床試験（後述する）において使用される物質であるＦＤ００１の粉末は、図７Ａおよび７Ｂに示されるように、このアッセイにおいて活性であることが確認された。
【０１６４】
実施例２に記載のように、上述の米国特許出公開第２００４／００３７９０９号に記載の手法以外の、キウィフルーツ抽出物の他の調製方法が検討された。果実から得られた抽出物（乾燥されているか、もしくは未乾燥であるか、または熱水もしくは室温の水において抽出された）のすべては、図８Ａおよび８Ｂから分かるように、このアッセイにおいて同様の活性を示した。この分析に基づいて、本発明者らは、治療を目的とする耐寒性キウィフルーツを調製するための種々の実行可能な代替方法があると考えている。
【０１６５】
興味深いことに、Ａ．アルグタの外皮、根および茎から調製された熱水の抽出物は、このアッセイにおいて、ＦＤ００１および果汁の濃縮物と比べて、同等の活性または優れた活性を示した（図９Ａおよび９Ｂ）。これらの結果は、これらの他の植物の部分が、免疫マーカーの調節または炎症誘発性のサイトカインの抑制に関して、治療学的に興味深い化合物の他の原料であり得ることを示している。
【０１６６】
（実施例４）
以下の実施例は、ＦＤ００１のＣ−１８クロマトグラフィー精製から回収された画分のインビトロ活性の比較について説明する。
【０１６７】
この実験の目的は、オボアルブミン感作マウスに由来する脾細胞培養株におけるサイトカイン（ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）産生を調節するＦＤ００１の画分の生物活性を、ＥＬＩＳＡ分析を用いて評価することであった。ＦＤ００１の画分は、溶媒の極性の低下にしたがって溶出するＣ−１８クロマトグラフィーカラムによる精製後の画分である。以下の試料（上述のように調製された）：画分ｃｕｔ Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３、Ｆ４、Ｆ５およびＦ６が試験された。さらに、公知の３つの免疫抑制化合物、シクロスポリン、デキサメタゾンおよびケルセチンの活性が、ＦＤ００１の等価物であるＳＧ０５−０２１７Ａの基準対照飼料とともに、対照として評価された。
【０１６８】
脾細胞の単離および培養
脾細胞の調製は、実施例３において上述した同じ方法において実施された。
【０１６９】
Ａ．アルグタ調製物を用いた脾細胞培養物の刺激
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、試験される抽出物または調製物の分析に利用された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。キウィフルーツ調製物は、１．０、３．０および１０ｍｇ／ｍＬの濃度において試験された。
【０１７０】
シクロスポリン、ケルセチンおよびデキサメタゾン分析
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、ケルセチンを除く各化合物の分析に利用された。ケルセチンの分析において、２匹のＯＶＡ感作マウスのみから得られた脾細胞が試験された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。シクロスポリンは、０．００８３、０．０８３および４．１５μＭの濃度において試験された。デキサメタゾンは、０．０１、０．１および１μＭの濃度において試験された。ケルセチンは、１、１０および２５μＭの濃度において試験された。強力なグルココルチコイド抗炎症薬である１μＭのデキサメタゾンを用いて処理されたウェルを、試験の陽性対照にした。１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地のみを受けているウェルを試験のＯＶＡのみの対照にした。３日間にわたる培養の後に、上清が回収され、凍結された。これらの上清は、試験された実験条件下における、種々の培養培地に存在するＩＬ−１３およびＩＦＮγのレベルを測定するために使用された。
【０１７１】
培養上清におけるサイトカインレベルの測定
すべての処理に関するウェルおよび対照のウェルから得られた培養上清におけるサイトカインレベルは、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された。２つのＥＬＩＳＡプレートウェルが各サイトカインレベルの測定に利用された。上述の実施例３に示されているように、ＩＬ−１３およびＩＦＮγの発現のみが、試験物質が有している活性のレベルを評価するため分析された。
【０１７２】
結果
この実験によって、ＩＬ−１３およびＩＦＮγのより強い抑制がこのアッセイにおけるＡ．アルグタ調製物から観察されたことが示された。このクロマトグラフィー精製技術がＦＤ００１から活性成分を抽出する能力について、図１１に示されるように、さらに確認された。ＦＤ００１に対する基準物質であるＳＧ０５−０２１７Ａと比べて、４／５のＣｕｔは、実質的にサイトカイン（ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）のより強い抑制剤である。
【０１７３】
これらのデータは、治療を目的とする耐寒性キウィフルーツを調製するための種々の実行可能な代替方法があることを示している。
【０１７４】
（実施例５）
以下の実施例において、中程度の重篤度のアトピー性にかかっている成人の患者におけるＦＤ００１の有効性の二重盲検、プラシーボ対照、外来患者の試験の結果について説明する。
【０１７５】
この試験の目的は、中程度の重篤度のアトピー性（ＡＤ）にかかっている少数の成人の有志者における、４２日間にわたって経口的に投与されたＦＤ００１（ＰＧ１０２Ｔ）の有効性の証拠を得ることであった。この試験の第２の目的は、ＦＤ００１に対する応答の許容度および変動性を評価することであった。
【０１７６】
試験計画
被験者は、２つの６００ｍｇのカプセルに入っている（実施例１に記載の通りに調製された）ＦＤ００１の粉末（総用量が６００ｍｇのＦＤ００１）、またはＭＣＣからなるプラシーボの２つのカプセルを、試験の１日目から始めて４２日間にわたって、朝に摂取した。１人を除いてすべての試験参加者は、試験の開始時に、ステロイド療法（経口または局所性の種々の形態）を併用していた。被験者には、１４日後にステロイド薬の使用を中止するように指示した。４つの時点（適格性の検査のための来診時；試験の１、１４および４２日目）において、日常の生化学検査および血液学のために採血された。尿は日常の尿検査のために４日おきに採取された。有効性の評価は。各来診後の検査時に行われた。被験者は、全体的に健康な１９〜６５歳の男性または女性であった。被験者は、医師による全体的な評価（Feldman and Krueger, Annals of the Rheumatic Diseases, 64:ii65-ii68, 2005）のスコアが、０〜４の度合いに対して３と定義づけられている中程度の重篤度の進行中のアトピー性皮膚炎にかかっている。被験者は、最小でも体表面積（ＢＳＡ）の１０％においてＡＤを有している。被験者は、ＡＤの処置のために局所性のステロイドを使用中であり、育児中または妊娠中ではない。安全性および許容度が、有害反応の報告、ならびに標準的な血液化学、血液学および尿検査を用いて評価された。
【０１７７】
統計学的方法
コクラン マンテル−ヘンツェル検定（Armitage et al., Statistical Methods in Medical Research, 4th Ed., Blackwell, Oxford, 2002）を用いた解析にともなう一次的な有効性の変量は、医師による全体的な評価にある基準からの、４２日目における変化である。第２の変量は、ＡＤの徴候（紅斑、硬化、滲出／外皮形成、および掻痒）の基準、および２標本ｔ−検定を用いて解析される総ＢＳＡの基準からの、４２日目における変化である。記述統計量が、基準のすべて、ならびに１、１４、２８および４２日目における処置群ごとの基準より後の試験データについて表されている。これらの統計量は、標本の大きさ、平均値、標準偏差、頻度、割合および必要に応じて信頼区間を含んでいる。被験者の自己評価調査票からの結果は、処置群ごとに総計されて表されている。試験期間中に生じた有害事象はいずれも記録された。有害事象の記述は、発生日、事象の終了日または継続した日、事象の重篤度、要因、取られた対応、取られた療法、および結果を含んでいる。これらのデータは、有害事象を報告している患者の番号、生体の器官系（body system）、重症度（severity）、重大さ（seriousness）、試験物質との関係によって分類された。処置群間の比較は、試験期間中にＭｅｄＲＡ項目（Medical Dictionary for Regulatory Activities. http://www.meddramsso.com）に分類されている１つ以上の有害事象を有している被験者の頻度を一覧にすることによって成された。
【０１７８】
検査値に関する要約した記述統計値およびそれらに関連する基準（１日目）からの変化は、臨床検査評価のすべてについて決定された。さらに、“推移の表”が作成された。推移の表は、試験の進行中に検査パラメータの変化（例えば、検査基準範囲に基づいて、正常から高くなる変化）を起こした被験者の数および割合を示している。以下の局所性のステロイドは、アトピー性皮膚炎の症状の処置に一般的に使用される。＊＊の印のあるものは、この臨床試験において何人かの個体によって使用された。
【０１７９】
＋＋ベタメタゾンジプロピオネート（ジプロレン）、＊＊０．０５％のクロベタゾル １７−プロピオネート（デルモベート）、＊＊ハロベタゾルプロピオネート（ウルトラベート）、０．１％のハルシノニド（ハログ）、０．１％のアムシノニド（シクロコルト）、０．５ｍｇのベタメタゾンジプロピオネート（ジプロレン、ジェネリクス）、０．０５％のベタメタゾンバレレート（ベタデルム、セレストデルム、プレベックス）、０．２５％のデソキシメタゾン（デソキシ、トピコルト）、０．１％のジフルオロコルトロンバレレート（ネリゾン）、０．２５％のフルオシノンロンアセトニド（デルマ、フルオデルム、シナラー）、＊＊０．０５％のフルオシノニド（リデモル、リデックス、タイデルム、チアモル、トプシン）、ハルシノニド（ハログ）、＊＊０．１％のモメタゾンフロエート（エロコン）、＊＊０．５％のトリアムシノロン，デソニド（デソウェン）、＊＊０．２％のヒドロコルチゾンバレレート（ウェストコルト）、０．１％のプレドニカルベート（デルマトップ）および１．０％のヒドロコルチゾン（コルタイド）。
【０１８０】
表１は、試験において試験物質（ＦＤ００１またはプラシーボ）と組み合わせて、最も高頻度に使用されたステロイドに基づいて臨床試験から亜集団を抜き出したものである。
【０１８１】
【表１】
【０１８２】
有効性の結果
試験を完了させるために最初の１７人の被験者に対して実施された中間解析の結果、２つの二次的な有効性の指標：紅斑（ｐ＝０．１３、ＩＴＴ １７）および硬化（ｐ＝０．０９、ＩＴＴ １７）に強い統計学的な傾向を生じた。中間解析の時点において、統計的な差異は、この小さな標本の大きさにおいて一次的な有効性の指標において検出されなかった。
【０１８３】
４２日目の最終的な解析において、一次的な有効性の変量（医師による全体的な評価）または二次的な有効性の変量（ＡＤの徴候における基準線からの変化およびＢＳＡに関する変化の割合）に関して処置した群の間に統計的な有意差は認められなかった。しかし、１４日目に有意な分布の変移が一次的な有効性の指標において観察された。１日目から１４日目の間に生じているこの変移は、プラシーボの受容者および試験物質の受容者のそれぞれの応答について、図１０Ａおよび１０Ｂにおいて認められ得る（ＰＧＡの採点化の基準が示されている）。被験者が分析の１４日目に関して応答群および非応答群に分類された場合（表１、群Ａ）、応答者はＦＤ００１処置群において高い割合を有して認められ、非応答者はプラシーボ処置群において高い割合を有して認められた。これらの結果は、より強いステロイドを使用している被験者（群Ｂ）が除外された場合、および中程度から穏やかなステロイド処置を続けている被験者（原Ｃ）について、比較的に一貫して維持されていた。補足的なこの後の分析によって、一次的なＰＧＡの指標（ｐ＝０．０２）、および１４日目における発赤に対する被験者の自己評価（ｐ＝０．０３）について統計的な有意性が明らかになった。さらに、強い統計的な傾向が、１４日目における疥癬についての自己評価および滲出／外皮形成についての臨床徴候評価において検出された（それぞれｐ＝０．０８およびｐ＝０．０７）。処置群に認められた有効性は、４２日目までに消失したＰＧＡ指標を介して、プラシーボ群と比較された。
【０１８４】
これらの結果は、局所性のステロイド療法に対する免疫賦活剤としてのＦＤ００１の使用が、ＡＤの処置に利益をもたらすことを示している。１、１４および４２日目における検査の試験結果は、実施された試験（臨床化学、差異を有する全血球計算値、凝固、間接ビリルビン、および尿の顕微鏡観察が挙げられる）のいずれに関しても安全性がないことと関連する傾向を示した。ＩｇＥ、Ｃ反応性タンパク質、または好酸球計算値について処置群の間に差は認められなかった。
【０１８５】
安全性の結果
重大な有害事象は、ＦＤ００１処理またはプラシーボのいずれに関しても報告されなかった。ＦＤ００１において１２の重大ではない事象があり、プラシーボにおいて１３の重大ではない事象があった。これらの内訳は、ＦＤ００１において１０の軽度の事象、および２の重度の事象であり、プラシーボにおいての１３の軽度の事象であった。試験物質またはプラシーボに対して問題があると見做される事象またはこれらに関連する事象は、なかった。
【０１８６】
結論
分布の大きな推移が、１４日目における一次指標（ＰＧＡ）に認められた。この理由に関して、後の解析が、１４日目の時点における処置した群に統計的な有意差を示したこの時点について実施された。さらに、いくつかの二次指標は、統計的に有意な傾向（自己評価における紅斑、ｐ＝０．０３）または統計的に大きな傾向（自己評価における掻痒の改善、ｐ＝０．０３およびＡＤ評価の徴候における滲出／外皮形成、ｐ＝０．０７）を示した。試験において報告された深刻な有害事象はなかった。試験物質群およびプラシーボ群の両方において報告された有害事象の数は同程度であり、試験物質に起因していなかった。臨床検査値において検出された安全性に関わる懸念はなかった。これらのデータは、Ａ．アルグタの果実抽出物が受容者にとって安全であり、十分に許容され、ステロイド療法に対する免疫賦活剤として有益であるという前臨床の哺乳類の試験およびヒトの事例調査を再確認している。
【０１８７】
（実施例６）
以下の実施例において、アトピーのイヌのＣＡＤＥＳＩスコア（Olivry et al., Vet. Dermatol., 13:77-87, 2002; Hanifin et al., Exp. Dermatol., 10:11-18, 2001; Kunz et al., Dermatology, 1997, 195, 10-19）を低下させるための耐寒性キウィフルーツ抽出物の使用を評価する、無作為化した二重盲検のプラシーボ対照試験について説明する。
【０１８８】
この試験の第１の目的は、イヌにおけるアトピー性皮膚炎（ＡＤ）にとって標準的なステロイド処置に対する補助療法として、Ａ．アルグタの果実抽出物（濃縮物）であるＦＤ００１の有効性を評価することであった。処置に対する応答は、ＣＡＤＥＳＩの等級および罹患者の掻痒の評価を組み込んでいる臨床治験担当医の全体的な評価を用いて評価された。
【０１８９】
試験の付加的な目的は、ＡＤの臨床徴候の管理におけるステロイド使用の必要性を低下させる単独療法として、キウィフルーツ抽出物の有効性を評価することであった。
【０１９０】
試験の第３の目的は、この処置の起こり得る副作用を評価することであった。
【０１９１】
実験計画および方法
仮説を確かめるために、無作為化した二重盲検のプラシーボ対照臨床試験が行われた。
【０１９２】
Ａ．動物
自然発生的な疾患を有している約６０匹のイヌが選ばれた。
試験対象患者基準：
１．すべてのイヌは、ＡＤ皮膚疾患を除いて、身体検査において健康であると判定された。
２．軽度から中程度の重症度の非季節性のＡＤ（１〜６年の病歴）の診断は、病歴、矛盾のない臨床徴候、他の疾患の排除、最も一般的な皮膚の５７のアレルゲンを用いた皮内の皮膚試験における少なくとも３つの陽性反応に基づいて行われた。
３．ノミの制御処理（１ヶ月間の効果×最小１ヶ月）。
４．食品成分の可能性を除外するための食品試験＊または十分な食品試験の履歴（過去２年以内）。
５．必要に応じて、何匹かのイヌが疥癬に対する処置を受けた。
６．すべての適格なイヌは、以下の期間にわたって併用する薬物療法を受けた：
・すべての抗ヒスタミンを２週間
・持続型の注入可能なステロイド（例えば、デポメドロール）を２ヶ月間
・局所性のステロイドを２週間
・経口のステロイド（掻痒が再度、悪化したときに必要とされる）を５〜１４日間
・経口のＣｓＡを１ヶ月間
・必須の脂肪酸補助物のすべてを１ヶ月間＊＊
・洗髪剤または抗生物質を使用し続ける（試験期間には使用されない）。
７．動物は、試験に登録される前に、任意の二次的感染のおそれが除去された。
８．基準線の最小のＣＡＤＥＳＩスコアが２５である。
９．イヌは、試験期間中に同じ食餌を継続させる必要があった。
１０．飼い主は、試験の開始前にクライアントの同意に署名する必要があった。
試験除外患者基準：
１．ＭＲＳＡ／ＭＲＳＩの病歴。
２．事前に全身性疾患にかかっている動物（抑制された甲状腺機能低下症を除く）。
３．特別に重篤なＡＤにかかっている動物。
４．最初の２週間のステロイド療法に対する非応答が続くか、または完全寛解する。
５．薬用の洗髪剤を必要とする動物。
６．処置が疾患を安定化しており、少なくとも１年にわたって進行中ではない限り、同時のアレルゲン特異的な免疫療法を必要とする動物。
＊食品試験は、イヌの特定の食事性の病歴に基づいているが、タンパク質および炭水化物の新たな供給源を取り入れた。イヌは、８週間にわたって食品試験食（例えば、Innovative Veterinary Dietsによって製造されている鹿肉およびジャガイモの食餌）を受け取れる状態におかれた。掻痒および感染の再発を試験中に監視した。試験中に掻痒および感染の再発が認められると、食物アレルギーが除外される。掻痒および感染の再発が消失または減少した場合、動物は以前の食餌を用いてふたたび試験され、７日間まで感染の再発または掻痒に関して監視された。したがって、潜在的に臨床的に見てＡＤと思われ得る他の掻痒性の皮膚疾患は、登録の前に除外されるか、または制御される（例えば、ノミアレルギー）。
＊＊シクロスポリンおよび脂肪酸に関して、４週間の治療の中止期間をおいた。
【０１９３】
Ｂ．実験計画
選択されたイヌは、１：１の割合において試験物質またはプラシーボの２群に、無作為に分けられた。したがって、約３０匹のイヌが試験物質を受け、約３０匹のイヌがプラシーボを受けた。グループ化は、無作為化され、飼い主および治験担当医師には伏せられた。
【０１９４】
１．試験物質
一方の処理群は、１日に１回、３０ｍｇ／ｋｇの用量のキウィフルーツ抽出物／濃縮物（実施例１に記載のアクチニディア アルグタのＦＤ００１調製物）を受け、他方の処理群は、プラシーボを受けた。試験物質およびプラシーボの両方は、飼い主によってイヌに投与されるカプセル剤に調合された。カプセル剤は、カプセルとして与えるか、または食品の上に乗せられ得る。
【０１９５】
２．ステロイド処理
両方の試験群は、試験１日目に開始して試験１４日目まで、標準的な低用量の経口ステロイド（プレドニゾロン）を単独に用いて安定化され、試験１４日目に、イヌが適格のままであるか否かを再評価した。ステロイド投与は以下のように実施された：
・１〜３日目：２ｍｇ／ｋｇのＢＩＤ
・４〜１４日目：１日おきに２ｍｇ／ｋｇ
（１４日目にイヌが継続して基準を満たしていれば）
・１５〜４２日目：１日おきに２ｍｇ／ｋｇ＋指定の試験物質
ステロイド処置に関する最初の２週間の終わりに、ステロイド応答性、残余のＡＤの徴候および症状について評価された（ＣＡＤＥＳＩは、０を超えていて、初期のＣＡＤＥＳＩより小さい必要がある）。
【０１９６】
３．第１段階の試験手法
最初の２週間の終わりに、治験担当医師は、ＣＡＤＥＳＩスコアを介してＡＤの徴候および症状、ならびに飼い主の掻痒に関する日誌を評価する。イヌに４週間の補助療法の期間を継続させるためには、治験担当医師の全体的な評価は、以下のように：
・ＣＡＤＥＳＩスコアは、イヌがいまだに損傷を有していることを反映している
・掻痒に関する日誌が１日目完全には回復していないことを示している
ＡＤの徴候および症状の改善を示しているが、完全に回復を示していないことが求められた。
【０１９７】
上述の基準に適合していれば、イヌは、組合せ療法に組み込まれ、指定の試験物質を毎日受けるとともに、１日おきに０．２ｍｇ／ｋｇの用量のプレドニゾロンを受けた。イヌの飼い主は、第１段階における残りの試験期間（４週間）にわたって経口ステロイドの支給を受けた。
【０１９８】
イヌが標準的なステロイド処置に反応しなかった場合、試験への参加が解除され、目的の登録数に達するまで他のイヌが選ばれた。
【０１９９】
６週間にわたる処置（最初の２週間のステロイド療法および４週間の組合せ療法）の期間中に、イヌは、事象の予定に記載されている間隔をおいて、ＣＡＤＥＳＩの等級および掻痒に関する日誌を用いて評価された。６週間の処置期間の終わりに、各群におけるイヌは、ＣＡＤＥＳＩスコア、臨床症状および飼い主によってつけられた掻痒の日誌に関して比較された。ＣＡＤＥＳＩスコアに改善が認められ、治験担当医師に良好な候補と判断されたイヌは、この手順の第２段階（キウィ果実の単独療法）にとって適格とされた。
【０２００】
血液試料が、採取されて安全性および二次指標が評価された。全血球計算値、化学物質レベル、合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベル、およびＴＡＲＣに関する検査が事象の予定に特定されている時点に実施された。ＣＢＣ、化学検査は直ちに実施された（コロラド州立大学において）。合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベルおよびＴＡＲＣのサンプルは−７０℃に凍結された。
【０２０１】
４．第２段階の試験手法
第２段階に進んだイヌは、４週間の非盲検の単独療法を開始した。グループ化に関して第２段階の終了まで伏せられたままなので、第１段階からプラシーボおよび試験物質のイヌは、そのまま登録された。４週間の経過前にイヌがＡＤの徴候の再発したか、または医療の助けを必要とした場合、第２段階の処置が失敗したとみなし、それらのイヌには試験を中止させた。第２段階においてその改善を維持したイヌは、第２段階の処置の応答者と見做された。
【０２０２】
血液試料が採取されて、安全性および二次指標を評価した。全血球計算値、化学物質レベル、合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベル、およびＴＡＲＣに関する検査が事象の予定に特定されている時点に実施された。
【０２０３】
【表２】
【０２０４】
【表３】
【０２０５】
５．罹患者による有効性の評価
掻痒に関するスコア（高い数値ほどより重篤な掻痒であることを意味する０〜５の等級）は、飼い主によって毎週、割り当てられた（表２）。
【０２０６】
【表４】
【０２０７】
６．治験担当医師による有効性の臨床評価
紅斑、苔蘚化および表面剥離は、イヌのアトピー性皮膚炎の重症度指数（ＣＡＤＥＳＩ、表３）を用いて、各処理期間の１、１４、２８、３５および４２日目に治験担当医師によって評価され、採点された。この点数化システムは、イヌにおけるＡＤの重篤度を評価するために、以前に使用され（Olivry et al. Vet. Dermatol 2000; 11: 47）、ヒトのＡＤに使用された採点法から採用された（Hanifin et al., Exp Dermatol 2001; 10 (1): 11-8; Kunz et al., Dermatology 1997; 195 (1): 10-9）。０〜３の等級が各パラメータについて使用された（０＝なし、１＝軽度、２＝中程度、３＝重度）。したがって、評価される領域に関して、３つの点数の合計は０〜９の範囲である。合計のスコアは０〜３６０の範囲であった。この試験における一次指標は、ＣＡＤＥＳＩスコアおよび掻痒に関する日誌を用いた、治験担当医師による全体的な評価であった。処置の不成功は、ＣＡＤＥＳＩスコアが基準（１日目）に戻るか、またはＡＤの悪化もしくは二次感染の発生に関連してより高くなる、と定義づけられた。損傷領域の細胞診断が、各ＣＡＤＥＳＩ評価のとき（毎週）実施された。ＣＡＤＥＳＩスコアに改善を示さなかった被験体は、処置の不成功と見做された。
【０２０８】
イヌは、以下のいずれかに該当した場合に試験を中止させられた：
・飼い主がこの手順に同意しなかった
・被験体が処置を必要とする二次感染を起こした
・掻痒が、局所的な領域において、自己多発化（self-mutilation）が生じるほどに重篤化した。
【０２０９】
二次指標は、掻痒の割合および安全性の検査を含んでいる。
【０２１０】
ＣＡＤＥＳＩスコアが改善し、２〜６週間の処置期間（補助療法の期間）に医療の助けを必要としなかったイヌは、応答者と判断され、この手順の第２段階に適格であった。医療の助けを必要としたイヌは試験から外され、処置の不成功または非応答者と評価された。治験担当医師によって支給された試験物質および標準的なステロイドの他に、抗ヒスタミンなどのさらなる薬物は、イヌが処置の不成功に分類されない限り、処置期間中に割り当てられなかった。
【０２１１】
７．血液試料
処置期間の１、１４および４２日目に、全血球計算値、化学物質レベル、合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベル、およびＴＡＲＣのために採血された。
【０２１２】
８．安全性の計量値
安全性は、副作用の発生および検査プロファイル基づいて評価された。全血球計算値（ＣＢＣ ｗ／差異）ａＰＴＴ、および化学検査プロファイルのための試料は、１、１４および４２日目に採血された。
【０２１３】
９．統計値
データは、一次指標に関してχ二乗検定によって解析され、二次指標（例えば、ＣＡＤＥＳＩ、掻痒の割合）について分散分析によって解析された。解析計画に関するさらなる詳細は、この手順における統計解析計画書に見られ得る。中間分析は、目標の登録数の半数が試験を終えたときに実施された。ｐ＜０．０５は、有意であるとみなされた。
【０２１４】
要約および結果：概要
この試験は、観察された集団におけるＥＦＦ１００１の試験物質活性の証拠を提供し、ＥＦＦ１００１が、イヌのＡＤの徴候および症状の維持および管理の他に、ステロイドの使用を控えさせるために、見込みのある有用な補助的な単独療法の製品であることを示唆している。この試験において、ステロイドなしの状態のまま、第２段階においてＡＤの状態を維持または改善したイヌの大部分が、第１段階における組合せ処置（すなわち低用量のステロイドおよびＥＦＦ１００１）の受容者であった。
【０２１５】
第１段階のイヌの試験の要約
試験には、米国内の４つの動物病院から７７匹のイヌが登録された。この試験に登録されたイヌは、１〜６年間にわたる軽度から中程度の重篤度の非季節性のアトピー性皮膚炎と診断された。第１段階は、アトピー性皮膚炎を安定化させるために低用量（０．２ｍｇ／ｋｇ）のステロイドのみを導入した２週間を含む、６週間の処置期間であった。１４日目に、試験において、第１段階の残りの４週間にわたって低用量のステロイド（ｑＥＯＤステロイドの投与）とともに、３０ｍｇ／ｋｇのＥＦＦ１００１またはプラシーボが導入された。頻繁な来診（すなわち、およそ毎週）によって、ＣＡＤＥＳＩおよび掻痒の測定を試験の全体を通して一貫して継続することが保証された。
【０２１６】
登録されたイヌの７１％（５５／７７）が第１段階を終了した。掻痒における改善（部分的な一次指標）がＥＦＦ１００１を受けたイヌに認められた（ｐ＝０．０５９４）。第１段階の４２日目に、ＥＦＦ１００９群におけるＣＡＤＥＳＩスコアがプラシーボ群よりも改善したが（−６．９対−４．０）、群の間の差には統計的に有意ではなかった（ｐ＝０．４３７１）。
【０２１７】
第１段階を終えているイヌの６４％（３５／５５）が第２段階；４週間にわたってＥＦＦ１００１単独（単独療法）の処置相に進められた。第１段階から第２段階に進んだイヌのプラシーボおよび試験物質のおおよそ等しい集団は、それらの処置の割り当てが伏せられたままの治験担当医師によって決定されているので、その適合性のみに基づいていた。治験担当医師は、イヌのＣＡＤＥＳＩスコア、掻痒のスコア、全体的な状態および飼い主の評価に強く依存していた。
【０２１８】
安全性の結果
サイト＃２におけるイヌに関して試験中に１つの重大な有害事象が報告されたが、試験物質には関連がなかった。＃１４０のイヌは、２匹の他のイヌとの乱闘において受けた傷のために入院し、死亡した。他の重大な有害事象または重大ではない有害事象は報告されなかった。
【０２１９】
第２段階のイヌの試験の要約
３５匹のイヌ（第１段階から、１８匹のＥＦＦ１００１受容者 対 １７匹のプラシーボ受容者）が、第２段階（すべてのイヌがＥＦＦ１００１のみを受ける単独処置期間）に入った。第１段階からのＥＦＦ１００１受容者にとっての有意な効果として、第２段階において第１段階におけるプラシーボの受容者よりも、３．５倍の利益を受けている（ＲＲ＝３．５４；ＯＲ＝１６．２６、ｐ＝０．０００６、フィッシャーの直接確率検定）ようだと認められた。第２段階に入った３５匹のイヌのうち、１９匹が、ＣＡＤＥＳＩスコアおよび掻痒スコアに関連する状態を維持できたか、または改善でき、さらにこれらのうちの１５匹（７９％）は、第１段階においてＥＦＦ１００１受容者であった。これに対し、第１段階においてプラシーボ受容者であったイヌのほとんどは、第２段階においてＡＤ徴候が再発し、医療の助けを必要とした（ＥＦＦ１００１群における１９％に対して、８１％）。これは、０．０００２のｐ値を有して、第２段階における受容者の数において、統計的に優位な差を生じた（第１段階のプラシーボ受容者において５．９％に対して、第１段階のＥＦＦ１００１受容者において６６．７％）。この結果は、ＥＦＦ１００１を用いた付加的な処置および低容量のステロイドの４週間の後（第１段階）、ステロイドおよびプラシーボを用いて最初に処理された（第１段階）イヌと比べて、被験体が、疾患の安定化をより長期にわたって受け、ステロイドの使用が控えられることを示している。
【０２２０】
第１段階において状態が悪化していたイヌが第２段階に進まなかったので、プラシーボ受容者の群の第１段階におけるＣＡＤＥＳＩスコアの平均値は、第２段階の開始時に下がった。第２段階の７日目まで、これらの第１段階のプラシーボのイヌのほとんどが、増大したＣＡＤＥＳＩに基づいて発赤の症状を示したことが明らかであった。これに対して、第１段階のＥＦＦ１００１群のイヌのほとんどは、第２段階のうちに再発しなかった。基準線として第２段階の開始時を用いた場合、プラシーボ群の再発現象は、処置群と比べて、第２段階の２１日目（プラシーボにおける１１．７対ＥＦＦ１００１における１．８、ｐ＝０．０４６）および２８日目（それぞれ１４．４対０．８、ｐ＝０．０２）（欠測値の補完を用いた）において、統計的に有意である（表１３．２）。
【０２２１】
ＥＦＦ１００１群におけるイヌは、第１段階におけるプラシーボを超えて、掻痒スコアにおける有意な改善を受け（−０．４に対してプラシーボにおける＋０．１、ｐ＝０．０６）、第２段階を通して利益を受け続けた（表１２．１）。第２段階の開始時を基準線として用いた場合に、プラシーボ群の掻痒スコアは、２１日目（プラシーボにおける０．４対ＥＦＦ１００１受容者における−０．１）および２８日目（それぞれ０．５対−０．２）（欠測値の補完を用いた）の両方において、処置群と比べて悪化した（表１３．２）。
【０２２２】
人道的使用に基づく処置の継続
第２段階を終えた１９匹のイヌのうち１３匹（または６４％）の飼い主は、試験期間の終了後に、繰返しの単独療法の処置を依頼した。これらのイヌの７７％は第１段階におけるＥＦＦ１００１受容者であった。人道的使用の試験物質は６週間の間隔を空けて支給され、掻痒に関する日誌の作成が依頼された。これまで、試験イヌ（＃１２７、サイト＃２）に関して記録されている、ＥＦＦ１００１の使用が最も長く継続しているのは、１年を超えており、このイヌのＡＤ症状の管理に有望と思われる状態が継続している。このデータは、ばくろおよび初期の補助的な処置の持続が、ＡＤの徴候および症状の管理におけるＥＦＦ１００１の継続的な有効性の重要な要素であり、ステロイドの使用を控える助けになることを、強く示唆している。
【０２２３】
結論
ステロイド療法および本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物の組合せの有効性は、いずれか単独の療法を用いて観察された結果と比べて、ＡＤにかかっているイヌの処置における上記組合せの療法の非常に優れた有益な効果を示すことによって証明されている。さらに、キウィフルーツ調製物は、キウィフルーツ調製物およびステロイドの組合せの使用の後に用いられた場合、有効な単独療法になる。理論に縛られることなく、本発明者らは、キウィフルーツ調製物が、ステロイドと共同作用して、ＡＤの処置において優れた治療結果を提供すると考える。したがって、ＦＤ００１および本明細書に記載の他のキウィフルーツ調製物は、ステロイドに基づく療法と併用して投与される場合、またはステロイドに基づく療法との併用使用に続く単独療法として使用される場合に、ＡＤにかかっているイヌに対する治療上の利益を増強させ、付加的な利益として、イヌにおけるＡＤの管理に使用されるステロイドの使用量を低減させる。より少量および／またはより低頻度のステロイドを使用させる能力は、ステロイドの使用に伴って生じる副作用を低減させるという顕著な利点を有している。抽出物は、カプセル剤、食品と混合された粉末として、または食品の成分として投与され得る。キウィフルーツ調製物を有している栄養補助食品は、単独に用いた場合、または低用量のステロイドと組み合わせて用いた場合に、アトピーのイヌの健康な皮膚の維持に効果的である。
【０２２４】
アレルギー、アトピー性皮膚炎の症状の１つは、子供における通常の皮膚疾患であり、出生から６ヶ月間に認められることが多い（Spergel and Paller, J. Allergy Clin. Immunol., 112:S128-S139, 2003）。ＡＤの有病率は、他のアトピー性疾患（喘息が挙げられる）世界的に増加傾向にある（Larsen and Hanikin, Immunology and Allergy Clinics of North America, 22:1-25, 2002; Wollenberg et al., Clin. Exp. Dermatol., 25:530-534, 2000; Mannino et al., Mor Mortal Wkly Rep CDC Surveill Summ., 47:1-27, 1998; Linneberg et al., Allergy, 55:767-772, 2000）。ＡＤ患者は、生活の質に対して深刻な負の影響を受け、現在使用可能な処置は、有害な副作用の原因、ならびに家族および社会の両方にとって経済的な負担であり得る。アトピーの皮膚を冒す症状は、アトピーの進行の開始を示していることが多い。種々の長期的な研究に基づいて、ＡＤ患者のおよそ半数が、特に重度のＡＤを伴って喘息になり、２／３がアレルギー性鼻炎になる（Leung et al., J. Clin. Invest., 113:651-657, 2004; Spergel et al., J. Clin. Invest., 101:1614-1622, 1998）。ＡＤに対する安全かつ有効な処置の同定は、非常に歓迎される。また、ＦＤ００１の有効性は、ステロイド、またはＡＤ、喘息もしくはアレルギー性鼻炎の管理に使用される他の薬剤量または力価を低減させ得る。
【０２２５】
後の試験の被験体のように、本発明は、ステロイド療法をともなう補助的な処置のための、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツ調製物の使用が意図される。当該処置に続いて、ＡＤ、喘息、アレルギー性鼻炎、または他のロイコトリエン媒介障害（例えば、食物アレルギーおよび慢性の蕁麻疹）にとっての耐寒性キウィフルーツの単独療法が行われ得る。本発明を論理的に拡大すれば、任意の小哺乳類（例えばイヌ、実施例７を参照すればよい）におけるアレルギー性の障害に対する処置としての、ステロイド療法と組み合わせた耐寒性キウィフルーツの使用は、さらに検討され得る。
【０２２６】
本明細書に記載の各文献または公開物は、その全体が参照によって本明細書に援用される。
【０２２７】
本発明の種々の実施形態が詳細に説明されている。これらの実施形態の変更および適合が当業者に思い浮かべられることは明らかである。しかし、そのような変更および適合が後述する特許請求の範囲に記載のように本発明の範囲内にあることは、明白に理解される。
【図面の簡単な説明】
【０２２８】
【図１】大量のＰＧ１０２Ｔ（この凍結されたか、または乾燥されたキウィフルーツの濃縮物はまた、ＦＤ００１と呼ばれる（ＦＧは食品等級の基材を指す））を生成するために使用されるプロセスの概略図である。
【図２】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図３】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ０１（ＰＧ１０２Ｔ）の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）抽出物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図４】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの果汁の濃縮物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図５Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３およびＩＦＮγの産生の相対度に対する、デキサメタゾンの３つの投与量の活性を示す図である。
【図５Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３およびＩＦＮγの産生の相対度に対する、ケルセチンの３つの投与量の活性を示す図である。
【図６Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、ＦＤ００１、ＦＤ００１の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）の抽出物およびこのプロセスから得られる水性の残余物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図６Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、ＦＤ００１、ＦＤ００１の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）の抽出物およびこのプロセスから得られる水性の残余物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図７Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、ＦＤ００１およびＦＤ００１の粉末の形態（カプセル剤に使用するために調製された）の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図７Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、ＦＤ００１およびＦＤ００１の粉末の形態（カプセル剤に使用するために調製された）の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図８Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの種々の調製物の影響を示す図である。
【図８Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの種々の調製物の影響を示す図である。
【図９Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの植物体の種々の部位の調製物の影響を示す図である。
【図９Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの植物体の種々の部位の調製物の影響を示す図である。
【図１０Ａ】ヒトの臨床試験の１日目〜１４日目の間に生じた分布の推移を強調表示している図である。
【図１０Ｂ】ヒトの臨床試験の１日目〜１４日目の間に生じた分布の推移を強調表示している図である。
【図１０Ｃ】図１０Ａおよび１０Ｂにおける、採点の基準を示す図である。
【図１１】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図９Ａ）およびＩＦＮγ（図９Ｂ）の産生の相対度に対する、Ｃ−１８逆相媒体から得られた、濃縮された種々のクロマトグラフィー画分（区切りＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ６）の影響を示し図である。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔関連出願に対する相互参照〕
本願は、35 U.S.C. §119 (e)に基づいて米国仮出願第６０／８８５，２１０号（出願日：２００７年１月１６日）からの優先権の利益を主張する。また、本願は、米国特許出願第１１／８１７，２１６号（出願日：２００７年８月２７日）の一部継続出願である。米国特許出願第１１／８１７，２１６号は、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００６４３７号の、35 U.S.C. § 371に基づく国内段階出願であり、米国仮出願第６０／６５６，８３８号（出願日：２００５年２月２５日）および米国仮出願第６０／６５６，８３９号（出願日：２００５年２月２５日）のそれぞれに対する優先権の利益を主張する。米国仮出願第６０／８８５，２１０号、ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００６４３７号、米国仮出願第６０／６５６，８３８号、および米国仮出願第６０／６５６，８３９号のそれぞれは、参照によってその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
〔技術分野〕
本発明は、（１）アレルギー性および非アレルギー性の炎症性の障害または疾患の予防および／または処置、（２）そのような障害または疾患の少なくとも１つの症状の軽減、および／または（３）動物における免疫応答の調節のための、アクチニディアおよび１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）の組合せに関する。
【０００３】
〔背景技術〕
炎症に関する疾患は、その存在によって組織の損傷、ときには組織死を誘導し得る特定の細胞種および媒介物の流入によって特徴づけられている。炎症に関する疾患は、それらが特定の組織および系（例えば、呼吸器系、皮膚、関節、心臓血管系、または中枢神経系）を冒す場合に特に有害である。上記疾患は、呼吸器系において呼吸障害、低酸素症、高炭酸血症および肺組織の損傷を起こし得る。また、上記疾患は、皮膚においてかゆみ（掻痒）、皮膚損傷、腫脹、および鱗屑を起こし得る。また、上記疾患は、関節において軟骨、膠原質および骨の侵食および破損を起こし得る。また、上記疾患は、心臓血管系において心筋梗塞を起こし得る。また、上記疾患は、中枢神経系において認知力の低下およびアルツハイマー病を起こし得る。
【０００４】
アレルギー性（アトピー性）疾患は、免疫グロブリンＥ（ＩｇＥ）によって部分的に媒介されると同時に、２型のＴ細胞（Ｔｈ２）、肥満細胞および好酸球がまた、疾患の過程において重要な役割を果たすことが示されている（Maggi E., Immunotechnology, 3:233-244, 1998; Pawankar R., Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol., 1:3-6, 2001; Vercelli D., Clin. Allergy Immunol., 16:179-196, 2002）。“Ｔｈ２”として知られているＴリンパ球の一部によって産生されるサイトカインとしては、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、およびＩＬ−１３が挙げられる。“Ｔｈ１”として知られているＴリンパ球によって産生されるサイトカインとしては、ＩＦＮγ、ＩＬ−１２が挙げられ、これらは、Ｔｈ２経路を負に制御することが報告されている。
【０００５】
アトピー性皮膚炎（ＡＤ）は、ＩｇＥレベルの上昇をともなう掻痒性および湿疹性の皮膚損傷によって特徴付けられる、慢性および再発性の炎症性皮膚疾患である。ＡＤの発生率は、世界的に幼児および小児において増大すると考えられている。ＡＤ患者の皮膚損傷は、炎症性細胞（Ｔリンパ球、単核球／マクロファージ、好酸球および肥満細胞が挙げられる）の浸潤によって特徴付けられる。これらの細胞は、種々のサイトカインおよびケモカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、エオタキシンおよびＴＡＲＣ）の放出を介して、ＡＤの病原性および進行に関与している。多くの細胞種の中でも、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０およびＩＬ−１３を産生するＴｈ２細胞は、上記疾患の経過における初期段階において重要な役割を果たしている（Leung, 1997, Clin Exp Immunol 107(suppl. 1):25-30）。
【０００６】
また、ＡＤは、イヌにおける２番目に主要な（イヌ科の動物の個体群の１０％）アレルギーである（Scott et al., Small Animal Dermatology 5th Ed, WB Saunders, 1995: 500-18）。イヌ科の動物において、ＡＤは、典型的に顔、脚、耳を冒す掻痒および皮膚損傷を示し、容易に全身性になり得る。典型的にイヌにおけるＡＤは、加齢とともに悪化する傾向がある。ＡＤに冒されている動物は、これらの患者の生活の質を著しく低下させる、再発性の皮膚感染および耳感染に苦しむ。
【０００７】
ＡＤが発症率の高い疾患である事実にもかかわらず、この疾患の病原性の理解が乏しく、この疾患に冒されている患者にとって有効な治療の選択肢が限られている。グルココルチコイドおよびシクロスポリンのような全身性の処置は、イヌおよびヒトにとって非常に有効であり得る（Olivry et al., Vet. Dermatol 2000; 11: 47）が、副作用の可能性がある（Ryffel et al., 1983, Arch. Toxicol 1983; 53: 107-41）。グルココルチコイドは、妥当な価格であるが、慢性的に使用すると有効性が小さくなる傾向がある（上述のScott et al）。経口のシクロスポリンは、大型のコンパニオンアニマル（例えば、大型の血統犬）において非常に高価であり得る。抗ヒスタミンが使用され得るが、成功率はしばしば不十分である（上述のScott et al）。脱感作は、活動期（season）が長い場合に行われるが、臨床的な改善は、通常には治療の開始から６〜９ヶ月間にわたってしか認められない。最後に、現在、利用可能な局所性の薬剤はすべて、局部的な軽減および一時的な軽減しか提供しない。したがって、ＡＤの徴候および症状（特にヒトおよびイヌ科の動物における）を軽減するための、安全性が高い有効な処置の同定は、非常に役立つものであろう。
【０００８】
喘息は、呼吸器系に悪影響を及ぼす他の重要なアトピー性疾患であり、世界中で数百万の人々が罹患している疾患である。喘息は、周期的に呼吸量が制限されること、および／または過剰な気道の狭窄を生じる種々の刺激に対する応答性亢進によって特徴付けられる。他の特徴としては、気道の炎症、好酸球増加症および気道繊維症が挙げられ得る。増大した気道の反応性亢進は、いくつかの細胞種（Ｔリンパ球および好酸球が挙げられる）に関連する複合的な炎症性カスケードから生じると考えられる。アレルギー性の喘息において、Ｔｈ２サイトカインは、Ｔｈ１サイトカインよりも優勢である。
【０００９】
低下した血清中のＩｇＥレベルがアレルギー性の症状を改善し得るという仮説が、キメラ抗ＩｇＥ抗体（ＣＧＰ−５１９０１）および組換えヒト化モノクロナル抗体（ｒｈｉＭＡＢ−Ｅ２５）を用いた臨床試験によって証明されている（Fahy et al., Am. J. Respir. Crit. Care. Med., 155:1828-1834, 1997）。ＩｇＥの合成および分泌を阻害するジアシルベンズイミダゾール類似物および細菌性の多糖類について、米国特許第６，３６９，０９１号および米国特許出願公開第２００２００４１８８５号にそれぞれ記載されている。
【００１０】
また、炎症は、骨関節炎において中心的な役割を果たす。関節炎において、骨および軟骨の再構成の代謝過程は、組織破壊と組織修復との間に不均衡が生じるような変化を受ける。有力な原因をなす１つが食事脂肪（特にアラキドン酸）の変化した物質代謝であるという、医学的な評価が確立している。正常な軟骨と異なって、ＯＡ軟骨は、大量のＰＧＥ２１７、および一連のサイトカイン（ＩＬ−１β、ＩＬ−８およびＩＬ−６が挙げられる）だけでなく、他の炎症性の媒介因子（例えば、ＬＴＢ４およびリポキシン）を突発的に産生する。関節炎において、アラキドン酸（ＡＡ）の代謝によって過剰のロイコトリエンが産生され、軟骨のタンパク質基質を分解する酵素であるマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の発現および／または活性を次々に増大させる（Martel-Pelletier et al., 2004）。さらに、完全には理解されていない様式において、変化した脂肪酸の代謝が、関節痛および炎症を誘発する炎症性サイトカインであるＩＬ−１βおよびＴＮＦαの過剰産生の原因となっている。
【００１１】
また、炎症は心臓血管系疾患における中心的な役割を果たしており、炎症および免疫の活性化がアテローム性動脈硬化症に対する危険性の増大と関連付けられている。通常のアレルギー性疾患（例えば、アレルギー性の鼻炎および喘息）と、頚動脈のアテローム性動脈硬化症ならびに頚動脈および大腿動脈における強い内膜中膜複合体肥厚の５年間にわたる発達および進行との間に相関関係がある。アレルギー性の障害を有している患者は、強い内膜中膜複合体肥厚およびアテローム性動脈硬化症の発達および進行の危険性が非常に高い。通常のアレルギー性疾患およびアレルギーの主要な構成要素（例えば、ヒトのアテローム発生において活動的なロイコトリエンまたは肥満細胞）を有している患者に共通して、アテローム性動脈硬化症の増大が観察された。したがって、免疫系媒介性の慢性炎症性疾患は、アテローム性動脈硬化症の増大した危険性と関連付けられている。
【００１２】
韓国特許出願第９２−１１７５２号には、ビフラボノイド（例えば、ロニセラ ジャポニカから単離された４’−Ｏ−メチルオクナフラボン）を含んでいる抗炎症性、抗アレルギー性および抗リューマチ性の薬剤について開示されている。当該特許文献には、アレルギーまたは炎症と関連付けられている種々の症状の処置における有効性が示されている。韓国特許第１００７４４号には、ギンコ ビローバの葉から単離された種々のビフラボノイド化合物を含んでいる抗炎症性、抗アレルギー性および抗リューマチ性の薬剤について開示されている。シーゲスベッキア グラブレシェンス（Siegesbeckia glabrescens）を含んでいる種々の漢方薬の処方物が、ＩｇＥを低減させる活性を有していることについて報告されている（Kim et al., Phytother. Res., 15:572-576, 2001）。さらに、多くの薬草が、ヒスタミン放出阻害剤または抗炎症性化合物の豊富な原料であることが見出されている。
【００１３】
Kim et al.,による米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号には、耐寒性の（hardy）キウィフルーツ（アクチニディア アルグタ（Actinidia arguta）、アクチニディア ポリガマ（Actinidia polygama）、アクチニディア コロミクタ（Actinidia kolomikta））の水溶性抽出物および酢酸エチル抽出物の全体を含んでいる抽出物が、Ｔｈ１サイトカインおよびＩｇＧ２ａの血清中濃度を上昇させ、肥満細胞からのヒスタミンの放出を阻害し、アレルギー性の炎症性反応を抑制することについて開示されている。アレルギー性の上記炎症性反応としては、アレルギー性の炎症および気道の反応性亢進のアレルゲン感作マウスモデル、およびラットの足水腫アッセイ（上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号を参照のこと）における炎症性反応が挙げられる。
【００１４】
アレルギー性障害の処置用の他の従来の薬剤としては、抗ヒスタミン、ステロイド性もしくは非ステロイド性の抗炎症性の薬剤およびロイコトリエンアンタゴニストが挙げられる。しかし、これらの薬剤は、重大な副作用（感染に対する感受性の増大、肝臓毒性、薬剤誘導肺疾患および骨髄の機能低下が挙げられるが、これらに限定されない）の可能性を有している。したがって、このような薬剤は、炎症および特にアレルギー性の炎症の処置に対する臨床用途に制限される。抗炎症剤および症状軽減剤の使用には、それらの副作用または炎症性応答の根本的な原因に作用できないことから、深刻な問題がある。
【００１５】
害が少なく有効性の高い、炎症を処置する薬剤が、求められ続けている。したがって、より少なく副作用、より少ない毒性および炎症の根本的な原因に対するより高い特異性を有している新たな生成物に対する必要性が依然として残っている。
【００１６】
〔発明の概要〕
本発明の一実施形態は、哺乳類における免疫応答を制御するための方法に関する。当該方法は、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物および少なくとも１つのステロイドの哺乳類における免疫応答を制御するために十分な量を、哺乳類に投与する工程を包含している。
【００１７】
本発明の他の実施形態は、哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減する方法に関する。当該方法は、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物および少なくとも１つのステロイドの哺乳類における炎症性の上記症状を軽減するために十分な量を、哺乳類に投与する工程を包含している。炎症性の上記症状としては、掻痒、発赤、滲出および外被形成、肥厚、脱毛症、ならびに皮膚の腫脹が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１８】
本発明の上述した実施形態のいずれかの一態様において、耐寒性キウィフルーツとしては、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマが挙げられ、好ましい実施形態において、アクチニディア アルグタが挙げられる。
【００１９】
本発明の上述したいずれかの実施形態の一態様において、上記耐寒性キウィフルーツ調製物は、耐寒性キウィフルーツの抽出物である。例えば、耐寒性キウィフルーツ調製物は、蒸留水における抽出または非極性溶媒における抽出によって生成される。一態様において、そのような調製物は、水抽出物のクロマトグラフィー精製によって生成される。上記調製物のいずれかにおいて、クロマトグラフィー精製は、逆相クロマトグラフィー溶媒、または順相クロマトグラフィー溶媒の使用を含み得る。
【００２０】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、ステロイドは、天然に生じるステロイドを包含している。他の態様において、ステロイドは合成ステロイドを包含している。他の態様において、ステロイドは、動物性のステロイド、植物性のステロイドおよび真菌性のステロイドから選択される。一態様において、ステロイドは、コルチコステロイドを包含している。
【００２１】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、哺乳類は、Ｔｈ１応答の増強および／またはＴｈ２応答の抑制が所望される状態になっているか、または当該状態になる危険性がある。一態様において、哺乳類は、アレルギー性疾患または非アレルギー性の炎症性疾患にかかっているか、または当該疾患になる危険性がある。アレルギー性疾患の一例は、ロイコトリエンによって制御される疾患である。一態様において、アレルギー性疾患は、アトピー性皮膚炎、喘息、食品アレルギー、アレルギー性鼻炎、および慢性の蕁麻疹から選択される。
【００２２】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、担体、免疫賦活剤、または賦形剤とともに、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの一方または両方を、哺乳類に投与することを包含している。
【００２３】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの一方または両方を、錠剤、粉剤、発泡錠剤、発泡粉剤、カプセル剤、液体剤、懸濁剤、顆粒剤またはシロップ剤として、哺乳類に投与することを包含している。
【００２４】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を１つ以上の健康食品に含めて、上記哺乳類に与えることを包含している。
【００２５】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、局所用の組成物として上記耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含している。
【００２６】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、投与する工程は、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を飼料または飼料の成分に含めて上記哺乳類に与えることを包含している。
【００２７】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、ステロイドとともに同じ組成物に調合されている。
【００２８】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、ステロイドとは別個の組成物として調合されるが、ステロイドと同時に投与される。
【００２９】
本発明のいずれかの実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの投与期間に続いて、哺乳類が、ステロイドをともなわずに耐寒性キウィフルーツ調製物の投与を受ける。例えば、耐寒性キウィフルーツ調製物単独の投与に先立つ、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドの、哺乳類に対する投与期間は、１日間〜数年間までの任意の時間の区切りであり得る。耐寒性キウィフルーツ調製物単独の、哺乳類に対する投与の期間は、１日間〜数年間までの任意の時間の区切りであり得る。
【００３０】
本発明のさらに他の実施形態は、哺乳類における免疫応答を調節するためか、または哺乳類における炎症の症状の少なくとも１つを軽減するための組成物に関する。当該組成物は、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物および少なくとも１つのステロイドを含んでいる。一態様において、組成物は、薬学的組成物、健康食品、食品の成分、動物の飼料および美容組成物から選択される。
【００３１】
この実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツは、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタおよびアクチニディア ポリガマから選択される。
【００３２】
この実施形態の一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、耐寒性のキウィフルーツの抽出物である。一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、蒸留水における抽出、または非極性溶媒における抽出によって生成される。一態様において、耐寒性キウィフルーツ調製物は、水性抽出物のクロマトグラフィー精製によって生成される。一態様において、クロマトグラフィー精製は、逆相クロマトグラフィー溶媒の使用を含んでいる。一態様において、クロマトグラフィー精製は、順相クロマトグラフィー溶媒の使用を含んでいる。
【００３３】
この実施形態の一態様において、ステロイドは、天然に生じるステロイドを包含している。一態様において、ステロイドは、合成ステロイドを包含している。他の態様において、ステロイドは、動物性のステロイド、植物性のステロイドおよび真菌性のステロイドからなる群から選択される。一態様において、ステロイドはコルチコステロイドである。
【００３４】
この実施形態の一態様において、組成物は、経口投与用として調合されている。一態様において、組成物は、局所投与用として調合されている。
【００３５】
本発明の他の実施形態は、上述の組成物および本明細書に記載の他の組成物を含んでいる動物の飼料製品に関する。これらの組成物は、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドを含んでいる。一態様において、動物の飼料製品は、ペットフード、家畜用飼料、ペットトリート（pet treat）、ペットチュー（pet chew）および栄養補助食品から選択される。
【００３６】
〔図面の簡単な説明〕
図１は、大量のＰＧ１０２Ｔ（この凍結されたか、または乾燥されたキウィフルーツの濃縮物はまた、ＦＤ００１と呼ばれる（ＦＧは食品等級の基材を指す））を生成するために使用されるプロセスの概略図である。
【００３７】
図２は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、１０個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００３８】
図３は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ０１（ＰＧ１０２Ｔ）の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）抽出物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、１０個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００３９】
図４は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの果汁の濃縮物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、１０個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４０】
図５Ａおよび５Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３およびＩＦＮγの産生の相対度に対する、公知の免疫抑制剤化合物の３つの投与量の活性を示している。シクロスポリンは、０．００８３、０．０８３および４．１５μＭにおいて試験され、デキサメタゾンは０．０１、０．１および１μＭにおいて試験された（図５Ａ）。各点は、１０個体のマウスの膵細胞からのデータの平均値を示している。ケルセチンは、１．０、１０および２５μＭにおいて試験され、各点は２個体のマウスの膵細胞からのデータの平均値を表している（図５Ｂ）。サイトカインレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。
【００４１】
図６Ａおよび６Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図６Ａ）およびＩＦＮγ（図６Ｂ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１、ＦＤ００１の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）の抽出物およびこのプロセスから得られる水性の残余物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４２】
図７Ａおよび７Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図７Ａ）およびＩＦＮγ（図７Ｂ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１およびＦＤ００１の粉末の形態（カプセル剤に使用するために調製された）の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示している。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４３】
図８Ａおよび８Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図８Ａ）およびＩＦＮγ（図８Ｂ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの種々の調製物の影響を示している。ＦＤ００１、果汁の濃縮物、未乾燥の果実を水煮することによって調製された抽出物、および室温にいて果実を水抽出した抽出物のそれぞれは、３つの投与量に関して試験された。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４４】
図９Ａおよび９Ｂは、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図９Ａ）およびＩＦＮγ（図９Ｂ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの植物体の種々の部位の調製物の影響を示している。ＦＤ００１、果汁の濃縮物、Ｈ２Ｏにおいて外皮、根もしくは茎を煮沸することによって調製された個々の抽出物およびＦＤ００１のそれぞれは、３つの投与量に関して試験された。サイトカインのレベルは、ＥＬＩＳＡによって測定された。各点は、８個体のマウスからのデータの平均値を表している。
【００４５】
図１０Ａ〜１０Ｃは、ヒトの臨床試験の１日目〜１４日目の間に生じた分布の推移を強調表示している。当該臨床試験において、被験者は、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）に関する医師による全体的な評価（ＰＧＡ）によって評価されるときに、ＡＤのための処置に正に応答した（採点の基準は図１０Ｃに示されている）。被験者は、プラシーボまたは６００ｍｇのＦＤ００１（ＰＧ１０２Ｔ）を毎日、投与され（図１０Ａおよび１０Ｂのそれぞれ）、同時に局所に対するステロイド処置を用いた。
【００４６】
図１１は、インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図９Ａ）およびＩＦＮγ（図９Ｂ）の産生の相対度に対する、Ｃ−１８逆相媒体から得られた、濃縮された種々のクロマトグラフィー画分（区切りＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ６）の影響を示している。
【００４７】
〔本発明の詳細な説明〕
本発明は、耐寒性キウィフルーツ調製物（後ほど定義づけられる）およびステロイドの組合せが、驚くほどの相乗作用を与えて、アトピー性皮膚炎の症状を大きく緩和し得るという本発明の発見に関する。さらに、ステロイドの使用が中止された後に、アトピー性皮膚炎の症状の緩和がステロイドなしで維持され得、したがってキウィフルーツ調製物は、組合せ療法に続く単独療法として機能したことを観察した。これらの結果は、アトピー性皮膚炎にかかっているイヌ科の動物において観察され、理論に縛られずに、アトピー性皮膚炎および他の炎症媒介性の障害もしくは疾患、特にアトピー性（アレルギー性）の障害もしくは疾患にかかっている他の哺乳類の患者（例えば、ヒト）に拡張可能であると考えられる。
【００４８】
さらに、本発明は、中程度のアトピー性皮膚炎にかかっている成人のヒト患者に対する、本明細書に記載のＡ．アルグタの水溶性抽出物の粉末形態の投与が、臨床徴候の医師による全体的な等級を有為に低下させたことを示している。意外にも、患者自身によって評価された特定の臨床症状（発赤）において有為な低下が達せられ、ステロイドを使用したが、耐寒性キウィフルーツの抽出物を受けなかった患者と比べて、局所的にステロイドを同時に使用したこれらの患者における他の臨床症状において、重篤度の低下傾向が認められた。この改善は、患者の生活の質を向上させた。
【００４９】
同時に、これらの結果は、ステロイドに基づく療法と、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツとの調製物の組合せが、耐寒性キウィフルーツまたはステロイド療法のいずれかを使用した場合と比べて、アトピー性疾患の処置において高い有効性を提供することを示している。本発明者らのデータは、耐寒性キウィフルーツ調製物が、アトピー性疾患または他免疫調節不全と関連するの疾患を処置するための、他の治療剤を用いた補助的療法として使用され得ること、ならびにキウィフルーツ調製物が、ステロイドの使用中止後に単独療法として使用され得ることを示している。本発明のこのような組合せの組成物および組合せの逐次投与手順は、特にアトピー性の障害を有している患者および炎症媒介性の障害を有している患者において、他の薬理療法および栄養療法の有効性を向上させるために使用され得る。そして、重要なことに、組合せの組成物および組合せの逐次投与手順は、重大な副作用を有し得る従来の療法（例えば、ステロイド）のみに患者が頼る必要性を少なくさせ得る。実際に、ステロイドを使用する量、期間の長さ、および／または頻度を減少させる能力と同時に、アトピー性障害の（複数の）症状における改善の維持または増大は、そのような障害を有している任意の患者にとって大きな利益をもたらす。
【００５０】
したがって、一実施形態において、本発明は、同時使用のための単一の組成物、または同時使用もしくは逐次使用のための独立した組成物（１つの組成物の逐次使用は他の組成物と同時であり得る）として、ともに提供されるキウィフルーツ調製物とステロイドとの組合せ、または逐次使用の後または前における併用に関する。組成物としては、薬学的組成物；栄養補助組成物；健康食品製品、健康食品もしくは健康飲料（治療食が挙げられる）、または食品成分（ヒトおよび動物（家庭内のペット）の食品成分が挙げられる）として有用な組成物、またはこれらとともに有用な組成物；または美容組成物が挙げられ得るが、これらに限定されない。組成物のさらなる詳細について、後述されている。
【００５１】
本発明は、免疫調節活性を有するキウィフルーツの組成物を提供するための、マタタビ科の任意の種、および特にアクチニディア属の任意の種（Ａ．チネンシス（chinesis）もしくはＡ．デリシオサ（deliciosa）として知られる通常のキウィ、およびＡ．アルグタ、Ａ．ポリガマもしくはＡ．コロミクタとして知られる耐寒性のキウィ）の使用を包含する。好ましくは、キウィは耐寒性キウィフルーツである。用語“キウィフルーツ”は、アクチニディア属の任意の種を一般的に指すために使用され得、上述のような耐寒性キウィフルーツのメンバーおよび上述のような通常のキウィフルーツを包含する。
【００５２】
マタタビ科に属している種として、３０種以上が報告されている。なかでも、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサは、“キウィ”と呼ばれており、よく知られている食用の果実である。本明細書において“通常のキウィ”または“通常のキウィフルーツ”という言及は、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサを指すことが意図される。本発明によれば、“耐寒性キウィフルーツ”または“耐寒性のキウィ”との言及は、Ａ．アルグタ、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタ、またはＡ．アルグタ、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタの生物活性を有している、これらと関連するマタタビ科の他の種のうちのいずれかを指す。マタタビ科の他の種は、米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号、国際公開第２００６／０９３７９３号、または特にフルーツまたはそれらの調製物の抗アレルギー特性および免疫応答／サイトカイン／ロイコトリエン−調節特性に関して、本明細書に記載されている。“キウィフルーツ”または“キウィフルーツ調製物”に対する通常の言及は、アクチニディア（通常および耐寒性キウィフルーツが挙げられる）の任意の種を指すことを意図される。
【００５３】
マタタビ科に属しているアクチニディア アルグタ、アクチニディア ポリガマおよびアクチニディア コロミクタは、シベリア、中国の北部、日本、北朝鮮および韓国に天然に分布している。Ａ．アルグタおよび他の同属種（例えば、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタ）は、肝疾患、胃腸疾患、および泌尿器結石を処置するための“ミフド（mihudo）”と呼ばれる毒性のない内漢方薬の材料として使用されている（Seoul National University Natural Products Science, Tradi-Medi Data Base, dongbang media Co. Ltd. 1999）。上述のように、米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号には、アクチニディアの耐寒性キウィフルーツ種の種々の抽出物を用いたアレルギー疾患および非アレルギー性の炎症性疾患の処置および予防について開示されている。
【００５４】
しかし、本発明者らの研究以前には、哺乳類の免疫系の調節不全と関連付けられるアトピー性疾患または他の障害に対する確立された処置（例えば、ステロイド療法）の有効性に対する、耐寒性キウィフルーツ組成物の影響について何ら報告がなかった。本発明者らは、キウィフルーツ調製物およびステロイドの組合せが、アトピー性皮膚炎といった炎症性の障害の処置において付加的な効果、特に相乗効果を提供することの認識が重要であると考えている。さらに、本発明者らは、ステロイドとの組合せの使用後における、キウィフルーツ組成物単独の（単独療法としての）使用がアトピー性皮膚炎といったアトピー性または炎症性の障害の処置にとって有効な単独療法であり得ることの発見が重要であると考えている。この驚くべき発見が本発明の基礎を成している。
【００５５】
（本発明の調製物、調合物、活性成分および組成物）
本発明の目的は、キウィフルーツ調製物および１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいるか、それらから実質的になるか、またはそれらからなる組成物を提供することである。代替可能に、キウィフルーツ調製物は、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物（後述する）が挙げられる）を含んでいるか、それらから実質的になるか、またはそれらからなる第２の組成物とともにか、またはそれに続いて使用される。好ましくは、ステロイドおよび耐寒性キウィフルーツ組成物が、同じ組成物において使用されるか、または同時に使用される。一実施形態において、組合せ使用の期間は、キウィフルーツを単独に用いた単独療法の期間の後または前であり得る。本発明の組成物は、薬学的組成物；栄養補助組成物；栄養免疫賦活剤もしくは栄養補助食品；食品添加物、食品成分もしくは飼料（任意のペットフードが挙げられる）；健康食品（飲料または食品原料、および治療食が挙げられる）；または美容組成物として提供され得る。
【００５６】
一態様において、組成物は、耐寒性キウィフルーツもしくは本明細書に記載の通常のキウィ（すなわち果実、果実の全体、茎、葉、外皮、もしくは根の任意の部分が挙げられ、任意の調製物、濃縮物もしくは抽出物（任意の粗製抽出物、水溶性の総抽出物または酢酸エチル抽出物が挙げられる））またはこれらの濃縮物（乾燥調製物、非抽出の加工済調製物、生の果実、果汁またはこれらの任意の抽出物、濃縮物もしくはクロマトグラフィー画分が挙げられる）の、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）との混合物を含んでいるか、から実質的になるか、またはからなるか、または組成物（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）と同時もしくは逐次に使用される組成物として提供される。
【００５７】
本発明の任意の組成物もしくは調製物、または本発明に使用される組成物もしくは調製物（本明細書に記載の抽出物が挙げられる）において、耐寒性キウィフルーツまたはアクチニディアの他の種の１つ以上の部分（果実（“液果”、または“キウィ液果”とも呼ばれる）、これらの葉、茎、外皮および根が挙げられるが、これらに限定されない）を使用し得る。
【００５８】
耐寒性キウィフルーツの水溶性の総抽出物および酢酸エチル抽出物を作製するために使用される抽出処理の１つが、米国特許出願公開第第２００４／００３７９０９号に記載されている。また、抽出、濃縮または処理の代替的な方法によって作製される耐寒性キウィフルーツ調製物は、免疫調節活性、および特に抗原（すなわちアレルゲン）に対するサイトカイン産生を抑制する能力を有している組成物をもたらす。そのような代替的な調製物としては、果汁濃縮物、未乾燥の果実の濃縮物、未乾燥の果実の煮沸した濃縮物およびクロマトグラフィー技術によって濃縮された調製物が挙げられるが、これらに限定されない。米国特許出願公開第第２００４／００３７９０９号に記載されているものに加えて、そのような調製物は、本発明において有用である。
【００５９】
耐寒性キウィフルーツの植物体の果実以外の部分の抽出物または調製物は、果実の水溶性抽出物または酢酸エチル抽出物と比べて、等価な免疫調節活性または優れた免疫調節活性を有している。例えば、耐寒性キウィフルーツの植物体の茎、根および外皮の抽出物は、アレルゲンに感作されたマウスに由来する抗原刺激脾細胞によるサイトカイン産生を抑制するために有効である。
【００６０】
本発明に使用される耐寒性キウィフルーツ調製物のいずれかにおいて、耐寒性キウィフルーツを乾燥させる処理工程は、耐寒性キウィフルーツの生物活性を増強させる重要な要素である。したがって、未抽出の乾燥させた耐寒性キウィフルーツ（例えば、耐寒性キウィフルーツの乾燥させた薄片）は、耐寒性キウィフルーツの抽出物に以前からある生物活性を有し得る。したがって、本発明は、乾燥させた耐寒性キウィフルーツの任意の形態（前もって乾燥させた耐寒性キウィフルーツのから作製された抽出物が挙げられる）の、本発明の方法のいずれか（哺乳類における免疫応答の調節、または炎症、特にアレルギー性の炎症と関連している疾患もしくは障害の少なくとも１つの症状の改善）において使用するための薬剤としての、または組成物を調製するための使用を包含している。
【００６１】
他の実施形態において、通常のキウィフルーツ（例えば、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサ）の調製物は、本発明に有用である。当該調製物としては、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツに関して認識されている生物学的な特性の少なくともいくつかを有し得る果実の一部、果実の全体、茎、葉、外皮または根の任意の調製物（これらの任意の調製物もしくは抽出物（乾燥させた調製物、未抽出の加工済の調製物、未乾燥の果実、果汁が挙げられる）、またはこれらの任意の抽出物、濃縮物もしくは画分が挙げられる）が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６２】
本明細書における抽出物に対する一般的な言及は、好適な溶媒を用いて所望の活性成分を取り出し、それから溶媒のいくらか、すべてまたはほぼすべてを蒸発させ、規定の基準に残余量または粉末を調整することによって典型的に得られる物質（例えば、耐寒性キウィフルーツ）の濃縮された調製物を指す。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に公開されるように、用語“抽出物”は、用語“濃縮物”と交換可能に使用され得る。いくつかの実施形態において、本明細書における粗製抽出物に対する言及は、水、低級アルコール（例えば、メタノールおよびエタノールなど）、好ましくは蒸留水または５０〜９０％のエタノール、より好ましくは７０％エタノールを用いて、耐寒性キウィフルーツ調製物を抽出することによって得られる耐寒性キウィフルーツの抽出物を指す。それらから得られる非極性溶媒に可溶性の抽出物は、非極性溶媒（例えば、ヘキサン、酢酸エチルまたはジクロロメタンの溶媒）を用いて溶媒抽出物をさらに抽出することによって入手され得る。粗製抽出物の作製および評価のための特定の手法について、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載されており、そのような手法のすべては、参照によって本明細書に援用される。本発明に係る耐寒性キウィフルーツの好ましい生物活性を追跡するか、評価するかまたは確認する付加的な生物アッセイは、本明細書における実施例に説明されており、インビトロアッセイおよびインビボアッセイの両方が挙げられる。
【００６３】
本発明によれば、“ＦＤ００１”に対する言及は、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツ（例えば、Ａ．アルグタ）から、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に本質的に記載の通りに調製された（文献の実施例１を参照すればよい）水溶性の全抽出物（本明細書において濃縮物とも呼ばれ得る）を一般的に指す。しかし、ＦＤ００１は、そのような抽出物の大規模生成物を指す（水溶性抽出物の処理工程は実質的に類似であるが、大規模生成に適合されている）。そのような水溶性の全抽出物は、Ａ．アルグタから典型的に調製されるが、等価な水溶性の全抽出物が他の耐寒性キウィフルーツ（Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタが挙げられるが、これらに限定されない）から調製され得ることは当業者に明らかである。他の抽出物（酢酸エチル抽出物が挙げられる）が耐寒性キウィフルーツから調製され得る。酢酸エチル画分について、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に開示されており、当業者に公知の従来の方法を用いたクロロホルム（必要に応じて）、酢酸エチルおよびｎ−ブタノール用いる、上述の水溶性抽出物の連続的な溶媒分離によって生成され得る。
【００６４】
本発明のいくつかの実施形態において、抽出物もしくは濃縮物または他の調製物の処理または調製における工程として、特に果汁が乾燥される場合に、本発明の抽出物もしくは濃縮物または他の調製物は、アクチニディアの任意の種から生成され得る。したがって、耐寒性キウィフルーツまたは必要に応じて他のアクチニディアの種のそのような抽出物を含んでいる組成物を提供することが、本発明の目的である。組成物の他の添加物、材料および成分、ならびに本明細書に記載の投薬および投与の計画は、同様に本発明の目的に適用される。
【００６５】
本明細書に記載の任意の組成物の調製において、本明細書に記載の抽出物（上述のような抽出物または濃縮物が特に挙げられる）に加えて、本発明の範囲には、耐寒性キウィフルーツの果実の全体、または未抽出の加工済の果実調製物（未乾燥の果実、（乾燥または生の）みじん切りにした果実、（乾燥または生の）煮沸した果実、熱処理した果実、乾燥果実、圧搾した果実、凍結させた果実、濃縮した果実が挙げられるが、これらに限定されない）の使用が包含される。したがって、耐寒性キウィフルーツの果実の全体、または必ずしも抽出されていない同じ手法において加工（例えば、乾燥、煮沸など）され得る果実調製物を含んでいる組成物を提供することは、本発明の目的である。したがって、一実施形態において、本発明は、未抽出の耐寒性キウィフルーツおよび／または通常のキウィフルーツ調製物に関する。本明細書に記載のそのような組成物のいずれかは、本発明の任意の方法における使用のために意図される。組成物の他の添加物、材料および成分、ならびに本明細書に記載の投薬および投与の計画は、同様に本発明の目的に適用される。
【００６６】
さらに、本明細書に記載の任意の組成物の調製において、本明細書に記載の抽出物に加えて、本発明には、耐寒性キウィフルーツの任意の部分から任意の好適な処理によって生成される耐寒性キウィフルーツまたは通常のキウィフルーツの果汁の使用が含まれる。果汁は、果実から直接的に生成されて（すなわち希釈または濃縮されずに）使用され得るか、果汁は希釈され得るか、または果汁濃縮物を生成するために濃縮され得る。そのような濃縮は、溶出溶媒の使用には関連し得ない。例えば、実施例に記載のように、未乾燥のキウィフルーツは、従来のジューサーにかけられ得る。ジューサーは、果実から外被を取り除いて、種子、果肉および果汁の混合物を生じ得る。それから、この混合物は、（例えば、遠心分離または圧搾によって）処理されて、固体から果汁を取り出し得る。そして必要に応じて、この果汁が（例えば、蒸発、蒸留、限外ろ過などによって）濃縮されて、濃縮された果汁（すなわち果汁濃縮物）を提供する。そのような組成物は、本発明の任意の方法における使用のために意図される。組成物の他の添加物、材料および成分、ならびに本明細書に記載の投薬および投与の計画は、同様に本発明の目的に適用される。
【００６７】
本明細書に記載の任意の組成物において、米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載の抽出物に対する代替物として、本発明には、耐寒性キウィフルーツを処理した他の生成物（果実（乾燥果実が挙げられる）の室温における水抽出物；室温より低い温度の水において実施された耐寒性キウィフルーツの水抽出物；根、葉、茎もしくは外皮の水抽出物もしくは他の抽出物；または抽出前に乾燥されていない（すなわち未抽出の未乾燥の果実）果実、葉、茎、外被のいずれかの水抽出物もしくは濃縮物または他の抽出物が挙げられるが、これらに限定されない）の使用が包含される。耐寒性キウィフルーツは、０℃〜８０℃の範囲の任意の水温（室温およびそれより低い温度（例えば、約０℃〜約２５℃））において抽出され得る。
【００６８】
本発明によれば、“乾燥した耐寒性キウィフルーツ”または“乾燥したキウィフルーツ”という一般的な記載は、任意の処理によって乾燥されている耐寒性キウィフルーツまたは他のキウィフルーツ（例えば、通常のキウィ）の任意の形態を包含している。したがって、乾燥したキウィフルーツは、キウィフルーツの乾燥した任意の部分（果実、葉、根など）を包含しており、乾燥した果実の全体、乾燥した果実の薄片、みじん切りにした乾燥した果実、および乾燥し、濃縮された果実、ならびに抽出されている物質が抽出前にまず乾燥されているキウィフルーツの任意の抽出物を包含している。抽出物自身は、乾燥されるか、またはさらに処理される必要はないが、一般的に、組成物への調合および保存のためには抽出物にとって最も好ましい形態である。さらなる使用のために抽出物をさらに濃縮する好ましい方法としては、蒸発、蒸留、限外ろ過、逆相浸透、沈降、固相への吸着および固相からの溶出、クロマトグラフィー精製、ならびに他の溶媒への抽出が挙げられるが、これらに限定されない。さらなる使用のために溶出物または濃縮物を乾燥させる好ましい方法としては、乾燥免疫賦活剤または賦形剤（例えば、マルトデキストリン、微小結晶セルロースおよびスターチ）を用いるか、または用いないトレイ乾燥、噴霧乾燥、および凍結乾燥が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、本発明の使用にとって好ましい乾燥したキウィフルーツは、後に抽出されない乾燥したキウィフルーツ調製物（抽出されることなく本発明の組成物または方法に使用されるキウィフルーツ）である。一態様において、耐寒性キウィフルーツは、室温〜８０℃において風乾されるか、−１７０℃〜室温において真空乾燥される。
【００６９】
したがって、本明細書に記載の組成物および方法は、任意の耐寒性キウィフルーツ（または通常のキウィフルーツ）の使用（耐寒性キウィフルーツ（または通常のキウィフルーツ）の果実の任意の部分、茎、葉、外皮、根もしくは他の部分、これらの任意の抽出物、濃縮物もしくは画分、果実の全体もしくは未抽出の加工済の果実、果汁の任意の形態、またはこれらの任意の抽出物、濃縮物もしくは画分、ならびに耐寒性キウィフルーツ（または通常のキウィフルーツ）の植物体の一部（植物体の一部としては、果実、茎、葉、外皮および／または根が挙げられる）および乾燥工程を含む処理を用いて調製されている植物体の一部の使用が挙げられる）に適用される。
【００７０】
本発明によれば、本発明の組成物における活性成分に相当する１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいる組成物が提供される。用語“ステロイド”は、本明細書に記載されているか、および／または当該分野において公知の多くの任意のステロイド、またはステロイドに基づく化合物もしくは組成物を一般的に指す。そのようなステロイド組成物は、上述の耐寒性キウィフルーツまたは通常のキウィフルーツ調製物を含んでいるような同じ組成物であり得るか、耐寒性キウィフルーツまたは通常のキウィフルーツ調製物と同時にか、および／またはその後に使用することを意図されている別の組成物であり得る。
【００７１】
本発明によれば、ステロイドは、４つの縮合環を有する炭素骨格によって特徴付けられている液体のテルペノイドと定義づけされる。異なるステロイドは、これらの環に結合されている官能基が異なっている。数百の異なるステロイドが植物、動物および真菌において同定されている。ステロイドは、ステロールラノステロール（動物または真菌）またはステロールシクロアルテノール（植物）のいずれかから誘導される。２つのステロールは、トリテルペンスクアレンの環化によって誘導される。ステロイドとしては、任意の天然に存在するステロイドまたは合成ステロイド（動物ステロイド、植物ステロイドおよび真菌ステロイド、ならびにこれらの官能基の誘導体が挙げられる）が挙げられるが、これらに限定されない。動物ステロイドとしては、昆虫ステロイド（例えばエクジステロンといったエクジステロイド）、および脊椎動物のステロイドが挙げられるが、これらに限定されない。脊椎動物のステロイドとしては、性ステロイド（例えば、アンドロゲン、エストロゲン、黄体ホルモン）、コルチコステロイド（例えば、グルココルチコイドおよびミネラロコルチコイド）、および同化ステロイドが挙げられるが、これらに限定されない。植物ステロイドとしては、フィトステロールおよびバルシノステロイド（barssinosteroids）が挙げられるが、これらに限定されない。真菌のステロイドとしては、エルゴステロンが挙げられるが、これに限定されない。本発明の好ましい実施形態において、本発明の組成物において有用なステロイドは、抗炎症性活性を有している任意のステロイドである。
【００７２】
コルチコステロイドは、本発明における使用にとって特に好ましいステロイドである。本発明における使用にとって好ましいいくつかのステロイドおよびそれらの誘導体としては、アムシノニド、ベータメタゾン、ベータメタゾンジプロピオネート、ベータメタゾンバレレート、ブデソニド、クロベタゾール、クロベタゾールアセテート、クロベタゾールブチレート、クロベタゾール １７−プロピオネート、コルチゾン、デフラザコルト、デソキシメタゾン、ジフルコルトロンバレレート、デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、デソニド、フロエート、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、ハルシノニド、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾンブチレート、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、ヒドロコルチゾンバレレート、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、およびハロベタゾールプロピオネートが挙げられるが、これらに限定されない。
【００７３】
当業者は、哺乳類、特にヒト、コンパニオンアニマルまたは食用の家畜に使用される任意のステロイドが本発明に好適であり得ることを正しく理解する。
【００７４】
ステロイドは、任意の種類の投与（最もしばしば経口投与または局所投与）のために調合され得る。ステロイド、およびステロイドに基づく化合物もしくは組成物は、天然および／または合成的に、誘導体化され得るか、入手され得るか、または生成され得る。
【００７５】
本明細書に記載の任意の化合物、調製物もしくは薬剤（本発明における使用のための耐寒性キウィフルーツ調製物またはステロイドが挙げられる）の生物活性または生物学的作用は、当該化合物、調製物または薬剤によって示されるか、または果たされる任意の（複数の）機能を指し、当該機能は、インビボ（すなわち、当該化合物、調製物または薬剤が使用される天然の生理学的環境）またはインビトロ（すなわち、実験条件）において測定されるか、または観察されるように、当該化合物、調製物または薬剤の天然に生じる形態に起因する。例えば化合物、調製物もしくは薬剤の処理、調製もしくは精製の変更による、化合物、調製物もしくは薬剤の修飾は、天然に生じる化合物、調製物もしくは薬剤と同じ生物活性を有している化合物、調製物もしくは薬剤、または天然に生じる化合物、調製物もしくは薬剤と比べて低下した生物活性もしくは増加した生物活性を有している化合物、調製物もしくは薬剤を生じさせ得る。
【００７６】
上述のように、キウィフルーツ調製物、好ましくは耐寒性キウィフルーツ調製物は、患者（すなわち哺乳類）におけるＴｈ１免疫応答およびＴｈ２免疫応答を選択的に調節するための使用に関して、本発明の活性成分の１つである。そのような組成物は、以下の（ａ）〜（ｎ）の活性の少なくとも１つから選択される生物活性を有している。（ａ）患者におけるＩｇＥ産生Ｂ細胞の数を低下させる活性；（ｂ）患者において（例えば、血清または血漿において）産生されるＩｇＥ量を低下させる活性；（ｃ）少なくとも１つのＴｈ２サイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０）の産生および／または濃度を低下させる活性；（ｄ）少なくとも１つのＴｈ１サイトカイン（例えば、ＩＬ−１２、ＩＦＮγ）の濃度を低下させる活性；（ｅ）転写調節因子ＧＡＴＡ−３の発現レベルを低下させる活性；（ｆ）転写調節因子Ｔ−ｂｅｔの発現レベルを低下させる活性；（ｇ）転写調節因子ＮＦＡＴｃ２の発現レベルを低下させる活性；（ｈ）患者におけるＩｇＧ２ａ産生Ｂ細胞の数を増加させる活性；（ｉ）患者において産生されるＩｇＧ２ａの量を増加させる活性；（ｊ）特に炎症部位において、Ｔｈ１ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＦＮγ＋）の産生または活性を増強させる活性；（ｋ）特に炎症部位において、Ｔｈ２ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＬ−４＋）の産生または活性を低下させる活性；（ｌ）患者におけるＩｇＧ１産生Ｂ細胞の数を低下させる活性；（ｍ）患者において産生されるＩｇＧ１の量を低下させる活性；（ｎ）患者における少なくとも１つのロイコトリエンの産生量を低下させる活性。
【００７７】
本発明の組成物または組成物の組合せの生物活性は、哺乳類における免疫応答の調節、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答の調節、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答の増強および／またはＴｈ２応答の抑制を含み得る。本発明の組成物または組成物の組合せに使用される活性成分は、種々の障害および疾患の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。当該障害および疾患としては、アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがんが挙げられるが、これらに限定されない。このような症状、疾患および障害について、以下に詳述する。
【００７８】
本発明によれば、栄養学的（栄養補助的）な用途（すなわち栄養学的組成物）としては、個体の健康または生物の成長過程を維持、安定化、促進、増強または改善する栄養物および栄養学的薬剤の補給に関する本発明の任意の用途が挙げられる。治療用途（すなわち治療組成物または薬学的組成物）としては、個体の健康な状態から逸脱している疾患または障害の予防、処置、管理、治療、軽減または治癒に関する本発明の任意の用途が挙げられる。そして、治療用途は薬学的用途と交換可能に使用され得る。本発明の他の用途としては、例えば、本質的に治療的／薬学的、または栄養学的であると見做され得るか、見做され得ない美容用途が挙げられる。
【００７９】
したがって、本発明の１つの目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、栄養学的組成物、治療組成物（もしくは薬学的組成物）、または美容組成物を提供することである。そのような組成物は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような組成物は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８０】
本発明の他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、健康食品または食品成分（また、食品添加物と記載される場合もある）を提供することである。そのような健康食品または食品成分は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような健康食品または食品成分は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８１】
本発明の他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、治療食を提供することである。そのような治療食は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような治療食は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。本発明およびＦＤＡによれば、治療食は、医師の管理下において消費されるか、または投与されるために、明確な栄養要求が立証されている疾患の特定の食餌管理が意図されて、調合されている食品である。したがって、本明細書において使用されるとき、用語“治療食”および“健康食品”は、ある状況において交換可能に使用され得る。特に、治療食は、健康食品の分類の一部であり、ここで、治療食は、上述のように、医師の管理下において消費されるか、または投与されるために、明確な栄養要求が立証されている疾患の特定の食餌管理が意図されて、調合されている。
【００８２】
本発明のさらに他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、動物の飼料または飼料の成分（また、飼料または食品添加物と記載される場合もある）を提供することである。そのような動物の飼料または飼料の成分は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような動物の飼料または飼料の成分は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８３】
本発明のさらなる他の目的は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）とともに調合されているか、および／または１つ以上のステロイドを用いて逐次的に与えられる、局所的な組成物または美容組成物を提供することである。そのような局所的な組成物または美容組成物は、哺乳類における免疫応答を調節するために、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節するために、より詳細には哺乳類におけるＴｈ１応答を増強させるためにか、および／または哺乳類におけるＴｈ２を抑制するために使用され得る。また、そのような局所的な組成物または美容組成物は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減に有用である。
【００８４】
本明細書に記載の任意の組成物、成分、添加物または薬剤は、少なくとも１つの従来の担体、免疫賦活剤または希釈剤を付加的に含み得る。例えば、本発明に係る組成物は、薬学的に受容可能な担体、免疫賦活剤または希釈剤を含み得る。調合物は、充填剤、抗凝固剤、潤滑剤、湿潤剤、香料添加剤、乳化剤および保存剤などを付加的に含み得る。本発明の組成物は、患者に投与された後に、（複数の）活性成分の迅速な放出、徐放または遅延した放出を提供するように調合され得る。
【００８５】
例えば、本発明の組成物は、注入剤を製造するために一般的に使用される油、プロピレングリコールまたは他の溶媒に溶解され得る。担体の好適な例としては、生理食塩水、ポリエチレングリコール、エタノール、植物油、ミリスチン酸イソプロピルなどが挙げられるが、これらの担体に限定されない。局所投与のために、本発明の化合物は、軟膏またはクリーム剤の形態に調合され得る。
【００８６】
典型的に、免疫賦活剤は、特異的な抗原に対する動物の免疫応答を一般的に増強する物質である。好適な免疫賦活剤としては、フロインドアジュバント；他の細菌の細胞壁成分；アルミニウム塩；カルシウム塩；シリカ；ポリヌクレオチド；変性毒素；血清タンパク質；ウイルス被覆タンパク質；他の最近由来調製物；γインターフェロン；ブロック共重合体の免疫賦活剤（例えば、Hunter’s Titermaxアジュバント（CytRx（登録商標）、inc. Norcross, GAから入手可能））；Ribiアジュバント（Ribi ImmunoChem Research, Inc、Hamilton、MT）；ならびにサポニンおよびそれらの誘導体（例えば、Quil A（Sugerfos Biosector A/S、デンマークから入手可能））が挙げられる。
【００８７】
典型的に、担体は、動物における治療組成物の半減期を延ばす化合物である。好適な担体としては、重合制御された放出調合物、生分解性のインプラント、リポソーム、油、エステル、およびグリコールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
本発明の好適な賦形剤としては、薬剤または化合物を輸送するか、またはその輸送を助けるが、動物における細胞、組織または部位を特に標的としない賦形剤または調合物（また、非標的化担体とも呼ばれる）が挙げられる。その多くが希釈剤でもある薬学的に受容可能な賦形剤の例としては、水、リン酸緩衝化食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液、血清含有溶液、ハンクス溶液、生理学的に緩衝化された他の水性の溶液、油、エステルおよびグリコールが挙げられるが、これらに限定されない。水性の担体は、例えば化学的な安定性および等張性を向上させることによって、受容物の生理学的条件に近づけるために要求される好適な補助物質を含有し得る。本発明の組成物は、従来の方法によって滅菌され得るか、および／または凍結乾燥され得る。
【００８９】
本発明の組成物または調合物は、薬学的な用途、または栄養補助的（nutraceutical）／栄養学的／栄養補助的（supplement）用途における使用にとって好適な任意の形態に調製され得る。当該形態は、例えば、経口投与形態（発泡性の錠剤、発泡性の粉剤、粉剤、錠剤、カプセル剤、軟カプセル剤、水性の薬剤、シロップ剤、エリキシル丸剤、粉剤、サチェット（sachet）、顆粒剤）、局所調製物（クリーム剤、軟膏、ローション剤、ゲル剤、香膏（balm）、膏薬、ペースト剤、噴霧溶液剤およびエアロゾルなど）、または注入用調製物（溶液剤、懸濁剤、乳剤）である。薬学的組成物、および栄養補助的（nutraceutical）／栄養学的／栄養補助的（supplement）組成物は、任意の動物（ヒト、コンパニオンアニマル／家畜（例えば、イヌ、ネコ）、食用の家畜および他の動物が挙げられるが、これらに限定されない）に対する使用のために調合され得る。
【００９０】
また、一実施形態において、本発明の組成物は、耐寒性キウィフルーツ調製物および／またはステロイド（本発明のステロイドに基づく組成物が挙げられる）を含んでいる健康食品（治療食が挙げられる）として、提供され得る。健康食品は、食品、粉末、顆粒、錠剤、チューイングタブレット（chewing tablet）、カプセルまたは飲料などとして提供され得る。また、小児用の食品または乳児食は、本発明の組成物に包含され、例えば、調整された粉ミルク、乳児用の調合物、および調整された乳児食もしくは小児用の食品である。
【００９１】
本発明の調製物、組成物または薬剤が健康食製品に導入され得る好適な食料製品としては、ファインベーカリー製品、ブレッドおよびロール、朝食用のシリアル、加工済および未加工のチーズ、調味料（ケチャップ、マヨネーズなど）、乳製品（牛乳、ヨーグルト）、プディングおよび寒天のデザート、炭酸飲料、茶、飲料の粉末混合物、加工済の魚介製品、果実から作られた飲料（フルーツジュースが挙げられる）、野菜から作られた飲料（野菜ジュースが挙げられる）、チューイングガム、堅い菓子類、冷凍した乳製品、加工済の肉製品、ナッツスプレッドおよびナッツから作られたスプレッド、パスタ、加工済の鶏食肉製品、グレイビーソースおよびソース、ポテトチップスおよび他のチップスもしくはクリスプ、チョコレートおよび他の菓子類（クッキー、キャンディー、リコリス菓子）、アイスクリーム、乾燥食品、カット済および加工済の食料品（例えば、果実および野菜）、香辛料、アルコール飲料、ヌードル、発酵食品、スープおよびスープ混合物、大豆から作られた製品（ミルク、飲料、クリーム、ホワイトナー）、植物油から作られたスプレッド、ならびに野菜から作られた飲料が挙げられるが、これらに限定されない。また、本発明の組成物は、食品とともに使用され得る（例えば、食品の盛り付け時、または食品を調製するときに、食品の上に乗せられ得るか、食品に注がれ得るか、または食品に混合され得る）。
【００９２】
組成物、特に上述のように特定される組成物を含んでいる美容調合物は、任意の形態（例えば、美容液、ローション剤、クリーム剤、精油、化粧液、乳剤、パック、石鹸、シャンプー、リンス、洗顔剤、身体の洗浄溶液、洗浄溶液、トリートメント、ゲル、バーム、および噴霧溶液）に調製され得る。
【００９３】
本発明のさらなる他の目的は、動物の飼料または飼料の成分（ときには飼料の添加物とも呼ばれる）を提供することである。当該動物の飼料または飼料の成分は、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物、および／または本発明の１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいる。飼料の成分は、必要に応じて、動物の飼料製品に調合され得るか、または動物の飼料ととも使用され得るか、もしくは混合され得る食料の製品、粉末、顆粒、錠剤、液体、乳剤、ペーストなど（例えば、動物の飼料に降りかけられるか、もしくは混合される粉末、または動物の飼料に加えられる液滴）として提供され得る。動物の飼料としては、動物（家庭内のペット（コンパニオンアニマル）および食用の家畜）に使用される任意の飼料製品または飼料の添加物が挙げられ、動物の食品もしくは固形飼料（例えば、ドッグフード、キャットフード、ウシの飼料など）、ビスケット、トリート、骨、チュー、ペースト、錠剤、粉末、水への添加物などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９４】
本発明の組成物または調製物のうちのいずれかは、上述の障害または疾患のうちのいずれかの少なくとも１つの症状の予防、処置、改善および／または軽減のための付加的な治療剤または栄養免疫賦活剤／栄養剤（付加的な活性成分）とともにさらに構成され得るか、または使用され得る。当該障害または疾患としては、アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがんが挙げられるが、これらに限定されない。耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド／ステロイドに基づく化合物を除いた活性成分としては、薬学的に活性な薬剤および／または栄養学的に活性な薬剤が挙げられ得る。活性な薬剤は、所望される付加的な栄養学的特性、および／または治療学的特性および／または薬学的特性の少なくとも１つを、本明細書に記載のキウィフルーツ調製物および／またはステロイド組成物に加えて、組成物に対して典型的に提供する。好ましい付加的な活性剤としては、抗炎症性化合物、抗アレルギー性化合物、または患者に利益をもたらすために免疫応答を調節し得る任意の他の化合物もしくは組成物が挙げられるが、これらに限定されない。当該利益は、疾患または障害（例えば、アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがん）の少なくとも１つの症状を軽減（緩和、減退、抑制）することによってもたらされる。付加的な薬剤（付加的な活性薬剤が挙げられる）は、任意の有効量において、組成物、調製物、成分、添加物または本発明の他の調合物に含められ得る。有効量は、上記薬剤によって与えられる所望の影響（例えば、対象の健康および栄養状態に対する影響（例えば、治療効果または栄養学的効果）、食味に対する影響、芳香に対する影響、視覚的な影響）を達成するために十分な量である。当業者であれば、付加的な薬剤の好適な量を決定して本発明の組成物に加えることができる。
【００９５】
例えば、本発明の組成物は、１つ以上の治療剤（例えば、医薬品）（本明細書において活性薬剤とも呼ばれ得る）を含み得る。当該治療剤は、免疫応答の調節によって処置され得るか、もしくは改善され得る障害もしくは疾患を処置するためにか、またはそれらの症状を軽減するために使用される。そのような付加的な治療剤としては、抗ヒスタミン（任意の種類（全身性、局所性、吸入用）のＨ１ブロッカーおよびＨ２ブロッカーが挙げられる）、抗体（例えば、抗ＩｇＥ、抗ＩＬ−１０）、抗生物質、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、β−アゴニスト（長期間または短期間にわたって作用する）、ロイコトリエン修飾因子（阻害剤または受容体アンタゴニスト）、サイトカインもしくはサイトカイン受容体のアンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクリミル、テオフィリン、カフェイン、カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン、Ｔ細胞機能の阻害剤および他の抗炎症剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９６】
また、本発明によって提供されるか、または本発明に使用される組成物のうちのいずれかは、活性薬剤として１つ以上の天然物を含み得る。当該天然物としては、脂肪酸およびポリケチド；有機酸および種々の小さな有機化合物；芳香族アミノ酸およびフェニルプロパノイド；直鎖および環状のペプチド、デプシペプチド、および他のアミノ酸誘導体；ヌクレオシドおよびヌクレオチド；炭水化物；タンパク質、細胞および細胞断片；漢方薬および香辛料；鉱物；滅菌剤；調味剤；ビタミン；電解質；ならびに他の天然の作用物質が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
本発明の組成物に加えられ得る他の成分（化合物または薬剤）としては、合成香味料、着色剤、加工剤、アルギニン酸もしくはそれらの塩、有機酸、保護コロイド粘着剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、保存剤、グリセリン、アルコール、炭酸化剤、または調合物（任意の投与方法による栄養学的使用または治療的使用のための）、食品、飼料もしくは飼料添加物または飲料の任意の必須な他の薬剤が挙げられる。
【００９８】
本発明の組成物と組み合わせるか、または本発明の組成物に加えるための特に好ましい成分（活性な作用物）としては、プロバイオティクス；細菌の細胞壁および断片；乳漿；タウリン；アラニン；カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン；脂肪酸（例えば、共役リノール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、α−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、ステアリドン酸）；イノシトール；ウコン；クルクミン；ロスマリン酸；メチルスルホニルメタン（ＭＳＭ）；チョウセンニンジン；ショウガ；プロアントシアニジン；β−カロテン；および主要な生物活性成分として使用されるもの以外のキウィフルーツの異なる種（マタタビ科の任意のメンバー、および特にアクチニディア属の任意のメンバーが挙げられる）の任意の他の調製物が挙げられるが、これらに限定されない。アクチニディア属の任意のメンバーとしては、通常のキウィ種（例えば、Ａ．チネンシスまたはＡ．デリシオサ）、および耐寒性キウィフルーツ種（例えば、Ａ．アルグタ、Ａ．ポリガマおよびＡ．コロミクタ）が挙げられる。
【００９９】
脂肪酸およびポリケチドとしては、飽和脂肪酸（例えば、α−リポ酸（Ｒ、ＳおよびＲ，Ｓ））；不飽和脂肪酸（例えば、共役リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、γ−リノレン酸、α−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、ステアリドン酸）；脂肪酸エステル；モノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリド（上述の脂肪酸の任意の組合せから構成される）；アセチレン型脂肪酸；分枝鎖脂肪酸；プロスタグランジン；トロンボキサン；ロイコトリエン；芳香族ポリケチド；マクロライドおよびポリエーテル；脂質抽出物（例えば、魚油、エキウム油、ボリジ油、オリーブオイル）；ならびにレチシンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１００】
有機酸および種々の小さな有機化合物としては、クエン酸；フマル酸；グアヤコール；メチルスルホニルメタン（ＭＳＭ）；およびアスコルビン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０１】
芳香族アミノ酸およびフェニルプロパノイドとしては、芳香族アミノ酸および安息香酸（例えば、安息香酸、没食子酸、ゲンチシン酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、プロトカテク酸、バニリン酸、サリチル酸、シリング酸）；桂皮酸（例えば、ヒドロキシチロゾール、クルクミン、ロスマリン酸、ａｒ−ツルメロン、カフェー酸；オイゲノール；クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸、桂皮酸、フェルラ酸、ｏ−クマル酸、ｐ−クマル酸）；リグナンおよびリグニン；フェニルプロペン；クマリン；スチリルピロン；フラボノイド（例えば、アントシアニジン（例えば、デルフィニジン）；プロアントシアニジン；カテキン（例えば、カテキン、エピカテキンおよびテアフラビン）；フラボノール（例えば、ナリンゲニン）；カルコン（例えば、フロレチン）；イソフラボン（例えば、ビテキシン））；スチルベン；フラボノリグナン；イソフラボノイド；ならびにテルペノイドキニン（例えば、Ｋビタミン、およびトコトリエノールといったトコフェノール（ビタミンＥ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０２】
テルペノイドとしては、モノテルペン（例えば、β−ピネン、ボルネオール、カルバクロール、ゲラニオール、チモール、１，８−シネオール、テルピネオール）；イリドイド（例えば、モノトロペイン）；β−イオノン（例えば、Ａビタミンに対する炭素１３の前駆体）；セスキテルペン（例えば、カリオフィレン、ファルネソール）；ジテルペン（例えば、Ａビタミン）；セステルテルペン；トリテルペン（例えば、α−アミリン、ルペオール、ウルソル酸）；テトラテルペン；ならびにカロテノイド（例えば、リコペン、β−カロテン、ルテイン、アスタキサンチン、カンタキサンチン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０３】
アルカロイドとしては、ピロリジンアルカロイド、ピペリジンアルカロイド、キノリジジンアルカロイド、インドリジジンアルカロイド、ピリジンアルカロイド、フェニルエチルアミン、テトラヒドロイソキノリンアルカロイド、ガランタミン、インドールアルカロイド、β−カルボリンアルカロイド、テルペノイドインドールアルカロイド、キノリンアルカロイド、ピロロインドールアルカロイド、アーガットアルカロイド、キナゾリンアルカロイド、キノリンおよびアクリジンアルカロイド、イミダゾールアルカロイド、ピペリジンアルカロイド、エフェドリン、カプサイシン、ピリジンモノテルペンアルカロイド、アコニチン、プリンアルカロイド、（例えば、アラントイン、カフェイン、テオフィリン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０４】
コリンおよびポリフィリンとしては、Ｂビタミンが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
直鎖および環状のペプチド、デプシペプチドならびに他のアミノ酸誘導体としては、単純なアミノ酸およびそれらの誘導体（例えば、Ｌ−アセチルカルニチン、コリン、タウリン、アラニン、カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン）、環状のデプシペプチド、β−ラクタム、青酸グリコシド、グルコシノレート、システインスルホキシドが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０６】
炭水化物としては、単糖（例えば、イノシトール）、多糖（例えば、フルクト−オリゴ糖（例えば、任意の鎖長のインスリン）；ガラクト−オリゴ糖；キチンおよびキトサン）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０７】
本発明の組成物において有用な天然物質の例としては、タンパク質（例えば、乳漿タンパク質および超酸化物不均化酵素）；細胞および細胞断片（例えば、生物にとって意義のあるプロバイオティクス、未処置の微生物（例えば、ラクトバチルス ｓｐｐ．）、細菌の細胞および細胞壁断片、真菌／酵母の細胞および細胞壁断片）；漢方薬および香辛料（例えば、チョウセンニンジン、ファン（huang）、ウコン、ローズマリー、ショウガ）；鉱物（例えば、Ｋ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｂ、Ｓｉ、Ｓｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。また、任意のこれらの化合物の代謝物および誘導体が、本発明によって包含される。
【０１０８】
多くの付加的な化合物、薬剤および成分が、本発明の組成物の調合に使用され得る。そのような化合物、薬剤および成分としては、種々の有機酸、リン酸塩、抗酸化剤、水溶性ビタミン、脂溶性ビタミン、ペプチドポリマー、多糖のポリマー、スフィンゴ脂質、海草の抽出物、藻類の抽出物、オイル成分（エステルオイル、炭化水素油オイル、シリコンオイル、フッ化物油、動物油、植物油）、湿潤剤、界面活性剤、有機もしくは無機の染料、有機物の粉末、紫外線吸収剤、保存剤、防腐剤、植物の抽出物、ｐＨ調節剤、アルコール、顔料、香料、解熱剤、汗止め、および蒸留水が挙げられるが、これらに限定されない。そのような成分は、上述の組成物のうちのいずれかに対して加えられ得る。一実施形態において、他の成分の量は、組成物の総量において０．０１％〜５％、より好ましくは０．０１％〜３％の範囲である。そのような成分は、従来の文献に記載の方法によって取得され得る。
【０１０９】
一実施形態において、本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物の好適な量および用量としては、患者の体重１ｋｇにつき約０．１ｇ〜約１０ｇの量、好ましくは体重１ｋｇ、１日につき約１ｇ〜約３ｇの耐寒性キウィフルーツの量が挙げられる。上記用量が、１日に１回、１日に２回、または必要に応じてより長い期間（例えば、数日、１週間、１ヶ月など）に投与され得る。本明細書に記載の組成物に関して、本発明の組成物に使用される耐寒性キウィフルーツ調製物は、当該組成物の総重量に対して、約０．０１重量％〜１００重量％の間、好ましくは約０．０１重量％〜約９５重量％の間、より好ましくは０．５重量％〜８０重量％の間（０．０１重量％〜１００重量％の間の、０．０１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の量であるべきである。一実施形態において、本発明の薬学的組成物は、上記組成物の総重量に対して、約０．０１〜５０％の耐寒性キウィフルーツを含有し得る。好適な量または用量は、投与の目的、または処置される障害もしくは疾患、ならびに対象の体重、重篤度、薬剤の形態、投与経路および投与期間に依存して変わり得、当業者によって選択され得る。
【０１１０】
一実施形態において、本発明に使用される耐寒性キウィフルーツ調製物は、約２０％〜９０％（２０％〜９０％の間の、１％区切りの任意の値が挙げられる）の高濃縮された液体、粉末または顆粒として任意の組成物に含有され得る。
【０１１１】
上記組成物における付加的な成分の比率は、一般的に、上記組成物の１００重量％のうちの約０〜２０重量％（０％〜１００％の間の、１％区切りの任意の値が挙げられる）の範囲である。
【０１１２】
一実施形態において、美容組成物は、当該組成物の総重量に対して約０．０１〜３０％、より好ましくは０．０１〜５％（０．０１％〜３０％の間の、１％区切りの任意の値が挙げられる）の量の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいる。
【０１１３】
食品、食品成分または飲料に加えられている、耐寒性キウィフルーツを含んでいる組成物は、食品、食品成分または飲料の総重量の約０．１〜９５重量％、好ましくは１〜８０重量％（０．１〜９５重量％の間の、０．１重量％区切りの任意の値が挙げられる）、または飲料組成物の１００ｍｌにつき約１〜３０ｇ、好ましくは３〜１０ｇ（１ｇ〜３０ｇの間の、１ｇ区切りの任意の値が挙げられる）の範囲の量が含まれ得る。
【０１１４】
一実施形態において、本発明の健康食品は、組成物の総重量に対して０．０１〜８０％、好ましくは１〜５０％（０．０１％〜８０％の間の、０．１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいる。
【０１１５】
一実施形態において、本発明の健康飲料は、組成物の総重量に対して約０．０１〜約２０％（０．０１％〜２０％の間の、０．１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の耐寒性キウィフルーツ組成物を含んでいる。本発明の健康飲料組成物は、飲料における他の成分を特に限定することなく、上述の耐寒性キウィフルーツ組成物を必須の成分として含有している。ここで、他の成分は、従来の飲料に添加され得るような種々の甘味料および／または調味料であり得る。
【０１１６】
食品成分は、付着、噴霧または混合によって食品に加えられ得る。添加される成分の組成物の総量に対する量は、一般的に、本組成物の１００重量％につき、約０．０１〜２０重量％（２０重量％〜１００重量％の間の、１重量％区切りの任意の値が挙げられる）の範囲であり得る。また、食品成分または食品添加物は、飼料（例えば、動物の飼料）とともに、当該飼料の総乾燥重量の１ｋｇにつき約５〜１００ｇ（５ｇ〜１００ｇの間の、１ｇ区切りの任意の値が挙げられる）の量が混合され得る。
【０１１７】
ステロイド（ステロイドから作られた本発明の化合物または組成物が挙げられる）の好適な用量としては、患者の体重の１ｋｇにつき０．００１μｇ〜１０ｍｇ、および０．０００１μｇ〜１０ｍｇの間の、０．００１μｇ区切りの任意の用量（すなわち０．００１μｇ、０．００２μｇ、０．００３μｇ．．．１．１００μｇ、１．１０１μｇなど）が挙げられ得る。種々の対象（種々の動物が挙げられる）の処置にとって好適なステロイドの用量は、当該分野において公知である。好適な用量は、実施例においてヒトおよびイヌに関して説明されている。本発明が個体に投与されるストロイドの量を低下させること、および／またはステロイド組成物を用いた処置の期間および／または頻度を低下させることについて認識されるだろう。
【０１１８】
（本発明の方法）
したがって、本発明の目的は、患者（個体）における免疫応答を選択的に調節する方法、詳細には哺乳類におけるＴｈ２免疫応答および／またはＴｈ１免疫応答を調節する方法、より詳細には、哺乳類におけるＴｈ１応答を増強し、および／または哺乳類におけるＴｈ２免疫応答を抑制する方法を提供することである。そのような方法は、種々の障害および疾患（アレルギー性疾患、非アレルギー性の炎症性疾患、ウイルス感染およびがんが挙げられるが、これらに限定されない）の少なくとも１つの症状の処置、予防、改善および／または軽減にとって有用である。そのような方法は、本発明の単一または複数の組成物の投与または提供によって利益をこうむる個体（患者、対象、動物）に対する、本明細書に記載の本発明の単一または複数の組成物の投与または提供を包含している。詳細には、本発明の方法は、キウィフルーツ調製物、および１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいるか、実質的にそれらからなる、またはこれらからなる組成物の投与または提供を包含している。代替可能に、キウィフルーツ調製物は、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）を含んでいるか、実質的にそれらからなる、またはこれらからなる第２の組成物とともにか、および／または当該第２の組成物を用いて逐次的に、投与されるか、または提供される。逐次的な投与は、所望の結果を得るために必要に応じて、同時期に（同じ投与期間内に）行われ得るか、または数日間、数週間もしくは数ヶ月間を空けて行われ得る。好ましくは、ステロイドおよび耐寒性キウィフルーツの組成物は、同じ組成物にともに含めて使用されるか、または同時に使用される。一実施形態において、組合せ（耐寒性キウィフルーツおよびステロイド）の使用の期間は、キウィフルーツ調製物を用いた単独療法の期間の前または後であり得る。本発明の組成物の詳細については上述の通りである。
【０１１９】
本発明の特定の実施形態において、キウィフルーツ調製物およびステロイド調製物の組合せの投与によって、炎症、特にアレルギー性の炎症と関連する疾患または障害の症状の少なくとも１つ、好ましくは１つ以上が、軽減（緩和、減退、除去、抑制など）される。そのような症状としては、哺乳類における、かゆみ（掻痒）、発赤（紅斑）、滲出および外被形成（皮膚剥離）、肥厚（苔癬化）、抜け毛（脱毛症）、および／または皮膚の腫脹が挙げられるが、これらに限定されない。また、炎症の他の任意の症状が本発明を用いて軽減され得る。従来のステロイド療法と耐寒性キウィフルーツ調製物の組合せの使用が、アレルギー疾患（例えば、アレルギー性皮膚炎）の症状の軽減に対して相乗効果を有していること、および本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物の使用が、アレルギー性疾患（例えば、アレルギー性皮膚炎）の処置において、従来のステロイド療法に対する補助的な療法として少なくとも役立つことを、本発明者らは見出している。
【０１２０】
また、上記組成物の投与または提供、特に本明細書に記載の組合せ療法（耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイドに基づく療法）は、本明細書において生物活性と表現されている以下の（ａ）〜（ｍ）の検出可能または測定可能な結果の少なくとも１つを生じる。（ａ）患者におけるＩｇＥを産生するＢ細胞の数を低下させる活性；（ｂ）患者において（例えば、血清または血漿において）産生されるＩｇＥの量を低下させる活性；（ｃ）少なくとも１つのＴｈ２サイトカイン（例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０）の産生および／またはレベルを低下させる活性；（ｄ）少なくとも１つのＴｈ１サイトカイン（例えば、ＩＬ−１２、ＩＦＮγ）の産生および／またはレベルを増加させる活性；（ｅ）転写調節因子ＧＡＴＡ−３の発現レベルを低下させる活性；（ｆ）転写調節因子Ｔ−ｂｅｔの発現レベルを増加させる活性；（ｇ）転写調節因子ＮＦＡＴｃ２の発現レベルを増加させる活性；（ｈ）患者におけるＩｇＧ２ａを産生するＢ細胞の数を増加させる活性；（ｉ）患者において産生されるＩｇＧ２ａの量を増加させる活性；（ｊ）特に炎症性部位における、Ｔｈ１ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＦＮγ＋）の産生を増加させるか、活性を増強させる活性；（ｋ）特に炎症性部位における、Ｔｈ２ Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋、ＩＬ−４＋）の産生または活性を低下させる活性；（ｌ）患者におけるＩｇＧ１を産生するＢ細胞の数を低下させる活性；（ｍ）患者において産生されるＩｇＧ１２の量を低下させる活性；および／または（ｎ）患者における少なくとも１つのロイコトリエンのレベルまたは産生を低下させる活性。本発明の（複数の）組成物の投与または提供の結果としての、個体の健康状態の改善、または個体に対する利益が、本発明によって包含され、本発明の組成物および方法の有用な結果である。当該改善または利益は、特にアレルギーまたは炎症の任意の症状の軽減、個体の免疫応答における好ましい任意の変化、および／または本明細書に記載されている好ましい任意の他の生物活性の検出よって評価される。
【０１２１】
本発明の一態様において、本発明の（複数の）組成物の投与または提供、特に本明細書に記載の組合せ療法（耐寒性キウィフルーツ調製物、およびステロイドに基づく療法）によって、患者におけるロイコトリエンの産生が低下し、これによって、患者におけるロイコトリエンと関連する障害または疾患の少なくとも１つの症状が処置または軽減される。ロイコトリエンと関連する障害または疾患としては、喘息、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、慢性の蕁麻疹、およびアレルギー性皮膚炎が挙げられるが、これらに限定されない。この実施形態において、好ましい投与経路としては、全身性の投与経路に加えて、経口投与、吸入投与、局所性投与が挙げられる。
【０１２２】
したがって、上述の方法は、本明細書に記載のような免疫応答の調節が患者にとって利益をもたらすか、そのように予測される、任意の疾患もしくは障害の予防および／または処置、および／またはこれらの任意の症状の軽減のために使用され得る。また、本発明は、ステロイド療法のおよび／または任意の他の療法、特に従来の療法の、患者における使用の量および頻度を低下させるための、本発明の組成物の投与または提供を包含する。
【０１２３】
したがって、本発明の目的は、哺乳類におけるアレルギー性疾患および非アレルギー性の炎症性疾患を処置および／または予防する方法を提供することである。当該方法は、本明細書に記載の任意のキウィフルーツ調製物の有効量を上記哺乳類に投与する工程を包含している。上記工程において、１つ以上のステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）がともに（同時および／または逐次的に）投与される。そのような組成物は、典型的に薬学的に受容可能な担体を含んでいる。
【０１２４】
本明細書に使用されるとき、“疾患から保護される”という表現は、疾患の症状を緩和（軽減）すること；疾患の発症を減らすこと；および／または疾患の重篤度を下げることを指す。患者の保護は、本発明の（複数の）組成物の能力（患者に投与された場合における、疾患の発症を予防する能力、および／または疾患の症状、徴候もしくは原因の少なくとも１つ、好ましくは１つ以上を軽減する能力）を指し得る。好ましくは、症状の軽減の結果として、患者は、生活の質が改善された状態になり、健康状態が改善され、潜在的に害のある療法、不快な療法または他の点おいて有害な療法の使用（量および頻度）を減らすことができるか、および／または本発明の組成物および方法を使用する前ほどの疾患または障害に見舞われることがなくなる（治療の完全な治療が含まれ得る）。したがって、疾患から患者を保護することは、疾患の発生を予防すること（予防的な処置）、および最も典型的に、疾患の治癒よりむしろ、疾患の症状を和らげるための、疾患にかかっている患者の処置（治療上の処置）の両方を包含している。疾患から患者を保護すること、または他の療法の効果を高めることは、好ましい効果が得られるように所定の活性を制御することによって実現される。好ましい効果は、当業者および／または患者を処置する熟練した臨床医によって容易に評価され得る。“疾患”という用語は、哺乳類の正常な健康状態からの任意の異常を指し、疾患には、疾患の症状が存在する状態、および異常（例えば、感染、遺伝子の変異、遺伝的な欠失など）が存在しているが、症状がまだ顕在化していない状態が含まれる。
【０１２５】
本発明によれば、アレルギー性疾患としては、喘息、アレルギー性の気管支肺アスペルギルス症、アレルギー性の気管支炎、気管支拡張症、過敏性肺炎、アレルギー性の副鼻腔炎、過敏症、アレルギー性鼻炎、アレルギー性の結膜炎、アトピー性の皮膚炎、伝染性の皮膚炎、慢性の蕁麻疹、昆虫アレルギー、食物アレルギー、および薬物アレルギーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
一実施形態において、アレルギー性疾患はアトピー性の皮膚炎である。この実施形態において、本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいるか、実質的にそれらからなる、それからなる組成物の投与に加えて、患者は、アトピー性の皮膚炎に対する従来のステロイド療法を用いて（同時または逐次的な投与によって）、付随して処置される。本発明のこの実施形態において、耐寒性キウィフルーツ調製物、および／またはステロイド組成物は、最も好ましくは経口投与または局所投与によって投与されるが、本発明は、このような投与経路に限定されない。
【０１２７】
一実施形態において、アレルギー性疾患は喘息である。この実施形態において、本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでいるか、実質的にそれらからなる、それからなる組成物の投与に加えて、患者は、喘息に対する従来のステロイド療法（吸入ステロイドの投薬が挙げられるが、これに限定されない）を用いて（同時または逐次的な投与によって）、付随して処置される。また、他の喘息制御剤が使用され得る。本発明のこの実施形態において、耐寒性キウィフルーツ調製物、および／またはステロイド組成物は、最も好ましくは経口投与または吸入投与によって投与されるが、本発明は、このような投与経路に限定されない。ステロイド療法は、任意の好適な方法、最も好ましくは経口投与または吸入投与によって投与される。
【０１２８】
本発明によれば、非アレルギー性の皮膚炎の疾患としては、炎症によって起こる皮膚の種々の異常（例えば、丘疹および座瘡など）が挙げられるが、これらに限定されない。上述の組成物は、例えば従来のステロイドに基づく療法と併用して投与される場合に、患者における皮膚炎予防、処置および／または改善に有用である。
【０１２９】
本明細書に記載の組成物および方法を用いて予防され得るか、または処置され得る他の非アレルギー性の炎症性疾患としては、種々の皮膚炎の障害、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、網膜炎、胃炎、網膜症、肝炎、腸炎、膵炎、腎炎、およびＴｈ２型の免疫応答の低下および／またはＴｈ１型の免疫応答の亢進が有効である類似の障害が挙げられるが、これらに限定されない。上述のように、上記組成物は、特に従来のステロイド療法を用いて同時または逐次的に投与される場合に、当該疾患、障害またはこれらの症状の予防、処置および／または改善にとって有効ある。
【０１３０】
ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）の投与に加えて、疾患または障害を処置または予防するための上述の方法のうちのいずれかにおいて、耐寒性キウィフルーツ調製物は、特定の障害の処置に有効な他の療法または組成物と併せて（同時および／または逐次的に）、投与され得る。これらの実施形態において、付加的な組成物または療法を用いた耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド療法の組合せは、患者における症状の改善、回復または軽減を促進するための従来の療法に対する免疫賦活剤として役立ち得る。しかし、耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド療法の組合せに関して見出されているように、付加的な組成物または療法を用いた耐寒性キウィフルーツ調製物およびステロイド療法の組合せが、単独の治療方法のうちのいずれかの使用を超えて相乗効果を提供し得ることについて、本発明によって認識される。この他に、本明細書に記載の（複数の）耐寒性キウィフルーツ調製物の使用の、ステロイド療法との組合せは、単回ごとのステロイドの投与量および／またはステロイド投与の頻度を低下できるという利点を提供し、本発明の耐寒性キウィフルーツ／ステロイド療法と同時に使用される他の療法の投与量および投与頻度を付加的に低下できる。ステロイドおよび他の療法が所望されない副作用としばしば関連しているので、そのような成分の使用を減らす能力は、患者にとって大きな利益を提供する。
【０１３１】
本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物とともに使用され得る付加的な従来の薬剤または療法の特に好ましい典型としては、脂肪酸（より長鎖の脂肪酸（１８以上の炭素鎖を有している脂肪酸が挙げられる））、抗ヒスタミン（全身性、局所性、吸入性の任意の型が挙げられる）、抗体（例えば、抗ＩｇＥ、抗ＩＬ−１０）、抗生物質、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、β−アゴニスト（長期間または短期間にわたって作用する）、ロイコトリエン修飾因子（阻害剤または受容体アンタゴニスト）、サイトカインもしくはサイトカイン受容体のアンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクリミル、テオフィリン、カフェイン、カルボベンジロキシ−β−アラニルタウリン、ショウガ、クルクミン、カテキン、フラボノール、フラボノイド、ポリフェノール、Ｔ細胞機能の阻害剤および他の抗炎症剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３２】
本発明の方法において、組成物は、脊椎動物門、哺乳類網に属する任意の動物（霊長類目、げっ歯類目、食用の家畜、ウマおよび家庭内のペットが挙げられるが、これらに限定されない）に、投与され得るか、または提供され得る。保護するための好ましい患者は、家庭内のペット（例えば、コンパニオンアニマル（イヌおよびネコが挙げられるが、これらに限定されない））およびヒトであり、ヒトであることが特に好ましい。すべての投与形態が意図されている。本発明によれば、“患者”、“対象”および“個体”という用語は、交換可能に使用され得る。
【０１３３】
本発明によれば、効果的な投与手順（すなわち効果的な様式において組成物を投与すること）は、炎症の制御、または患者における疾患もしくは障害の症状に関して所望の結果をもたらす好適な用量のパラメータおよび投与の形態を含んでいる。効果的な用量のパラメータは、特定の疾患または障害について、当該技術において標準的な方法を用いて決定され得る。当該方法としては、例えば、生存率、副作用（すなわち毒性）、および疾患の進行もしくは退行の測定が挙げられる。
【０１３４】
本発明の組成物は、１日に２、３、４回またはそれ以上；一日に１回（毎日）；１週間に２、３、４、５または６回；毎週；隔週；毎月；有効であると判断される他の任意の間隔において投与され得る。投与は、必要に応じた基準に基づいて、一定の期間（通常は数日間、数週間または数ヶ月間と見積もられる）、または患者の生涯にわたって行われ得る。
【０１３５】
本発明の一態様において、上記方法は、同じ組成物（同時に投与される）または個々の組成物（逐次的に投与される）のいずれかとして、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）と耐寒性キウィフルーツ調製物との組合せの投与期間を包含している。当該投与期間は、耐寒性キウィフルーツ調製物の単独投与の期間の後および／または前にある。同時投与の期間中に、耐寒性キウィフルーツ調製物は、ステロイド（ステロイドに基づく化合物または組成物が挙げられる）と実質的に同時に（例えば、それぞれの日の同じ時点またはほぼ同じ時点に）か、または同じ投与日程の異なる時点に（例えば、単回投与日程が毎日であれば、同じ日のうちの異なる時点に）に投与され得る。単独療法に対する組合せ療法の投与期間は、患者の反応性に基づいて決定され得るが、臨床医によって決定される通りに、１週間（例えば、必要に応じて繰り返される、１週間にわたる組合せ療法の毎日の投与に続いて、１週間にわたる単独療法の毎日の実施）、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、およびそれ以上の期間の交代間隔を包含し得る。交代の投与期間は、同じ時間の長さである必要はない。例えば、組合せ療法は、１つの投与期間（例えば、４週間）にわたって実施され得、それから単独療法は、症状の継続的な改善または改善の維持が認められなくなるまで（数週間または数ヶ月間であり得る）投与され得る。続いて、組み合わせ療法が必要に応じて投与され得る。さらに、キウィフルーツ調製物に関して必要な用量は、ステロイドに基づく療法に必要な用量と異なり得るが、これは、臨床医が決定し得る範囲内の事項である。
【０１３６】
投与経路としては、インビボ経路およびエクスビボ経路が挙げられるが、最も一般的にインビボ投与が挙げられる。エクスビボは、制御工程の一部を患者の体外において実施することを指す。インビボ経路としては、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、結節内（intranodal）投与、歯冠内投与、動脈内投与（例えば、頚動脈内）、皮下投与、経皮送達、気管内投与、関節内投与、心室内投与、吸入（例えば、エアロゾル）、頭蓋内投与、脊髄内投与、眼球内投与、耳投与、鼻腔内投与、経口投与、肺投与、カテーテルによる注入、皮内注入、くも膜下腔内注入、硬膜外注入、脳室内注入、および組織への直接注入が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の一実施形態において、組成物は、非経口経路（例えば、皮下、皮内、静脈内、筋肉内および腹腔内の経路）によって投与される。静脈内、腹腔内、皮下および筋肉内の投与は、当該分野において標準的な方法を用いて実施され得る。耳からの送達としては、点耳薬が挙げられ得、鼻腔内送達としては、点鼻薬または鼻腔内注入が挙げられ得、眼球内送達としては、点眼薬が挙げられ得る。また、エアロゾル（吸入）送達は、当該分野において標準的な方法を用いて実施され得る（例えば、その全体が参照によって本明細書に援用されるStribling et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 189:11277-11281, 1992を参照すればよい）。例えば、一実施形態において、本発明の組成物またはワクチンは、好適な吸入装置または噴霧器を用いて噴霧送達に好適な組成物に調合され得る。経口送達は、動物の消化管における消化酵素による消化に耐性を有している担体に対して、本発明の組成物を、例えば錠剤またはカプセル剤として複合化すること、および食品、飼料および飲料製品に調合されることによって実施され得る。そのような担体の例としては、合成樹脂のカプセルもしくは錠剤、または当業者に公知のような食品の原料が挙げられる。直接的な注入技術は、化合物の部位特異的な投与にとって特に有効である。経口送達または局所的な送達は、本発明に係る送達または投与の特に好ましい経路である。粘膜の免疫性を調節する投与経路は、ウイルス感染およびいくつかのアレルギー性の障害の処置に有用である。そのような経路としては、気管支、皮内、筋肉内、鼻腔内、他の吸入性、直腸、皮下、局所性、経皮、膣および尿道口の経路が挙げられる。
【０１３７】
本発明は、以下の実施例によってより詳細に説明される。しかし、どのようにしても、本発明がこれらの実施例に限定されないことが理解されるべきである。
【０１３８】
〔実施例〕
（実施例１）
以下の実施例において、後述の実施例において使用されるＡ．アルグタを含んでいる種々の調製物の調製について示している。
【０１３９】
植物材料
アクチニディア アルグタ（サルナシ（（Sieb. Et Zucc.） Planch. ex Miq.）（マタタビ科）の栽培変種“アナナスナヤ（Ananasnaya）”）の茎（stems）（ケイン（canes）およびスパー（spurs）からなる）、根および外皮が、ハースト食用小果実の農場（シェリダン、OR）において採取された。証拠標本（＃５１８６４０）が、コロラド大学（ボールダー、CO）のUniversity of Colorado Herbarium、収集管理者のティム ホーガン氏によって認証され、同じ施設に寄託された。植物材料は、４８時間にわたって風乾され、抽出または他の処理まで室温において保存された。
【０１４０】
熟してすぐに食用に供せられるＡ．アルグタの果実が、ハースト食用小果実の農場において採取され、直ちに凍結され、出荷され、抽出または他の処理の前まで凍結させて（−２０℃）保存された。
【０１４１】
抽出物および他の調製物
茎の粉末（１２６．６ｇ）、根の粉末（７９．０ｇ）、および細かく切った外皮（１２６．２ｇ）のそれぞれは、蒸留水（１Ｌ）を用いて、９４℃において４時間にわたって抽出された。それから、混合物がろ過され、ろ液がロータリーエバポレータによって乾燥するまで濃縮されて、茎の抽出物（９．９ｇ）、根の抽出物（８．６ｇ）および外被の抽出物（２．４ｇ）を生じた。
【０１４２】
２０の凍結したＡ．アルグタの果実（１５４．４ｇ）が室温において解凍され、圧搾され、蒸留水（１Ｌ）を用いて、９１℃において５時間にわたって抽出された。混合物がろ過され、ろ液が濃縮されて“煮沸した”新鮮果実の抽出物（１２．８ｇ）を生じた。
【０１４３】
さらなる凍結した未乾燥のキウィフルーツ（３４１．６ｇ）が解凍され、ジューサーにかけられた。ジューサーによって果実から表皮が取り除かれて、種子、果肉および果汁の混合物を生じた。混合物は遠心分離されて（３０分間、〜３５００ｒｐｍ）、１５０ｍＬの果汁を生じた。この果汁がロータリーエバポレータによって乾燥するまで濃縮されて、果汁の濃縮物（２４．２ｇ）を生じた。
【０１４４】
上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載されている大量の抽出物の等価物を生成するために、キウィフルーツの生産規模での抽出が実施された（Sungil Bioex Co., Ltd., Bibomg, Korea）。凍結したキウィフルーツ（１２４２ｋｇ）がスライスされ（１／４から３／８の厚さ）、対流乾燥器（６５〜８０℃）において５〜２０％の含水率まで乾燥された。乾燥した果実（２３９ｋｇ）のバッチ抽出（図１）が、抽出装填物を支持するための内部ろ過フィルタを有しているジャケットつきのステンレス鋼の反応器において実施された。外部の濃縮器は、抽出中における水の損失を防ぐために使用された。抽出溶媒（水）の量は、抽出される乾燥した果実の重量の５〜１０倍を基準にした。抽出容器の内容物は、反応器のジャケットに蒸気を導入することによって、２時間にわたって０〜９０℃まで加熱された。それから、水（９０℃）は、４〜１２時間にわたって外部の循環ループを用いたバイオマスを通して再循環された。続いて、消耗したバイオマスは、処分するために取り除かれ、水性の抽出物が１０μｍのフィルタに通してろ過された。それから、ろ液は、外部の濃縮器および抽出物の受液器を備えている、攪拌されたステンレス鋼の反応器において、５５〜６５℃の真空中（〜６００ｍｍＨｇ）において濃縮された。ひとたび材料が濃縮されると、抽出物を滅菌するためにさらに３０分間にわたって８０℃に維持された。ＰＧ１０２Ｔの等価物である生成された物質（１０１ｋｇ）は、ＦＤ００１と命名された。３ｋｇのこの物質は、さらなる試験のために取りおかれた。優良医薬品製造基準が加工を通して使用された。
【０１４５】
カプセル充填に適し、本明細書に記載の臨床用途に有用な粉末の物質を作るために、上述のように製造されたＦＤ００１の濃縮物（９８ｋｇ）が、水平パドル攪拌器にポンプを用いて注入され、算出された固形分に基づいて等しい重量の微小結晶セルロース（ＭＣＣ）と混合された。これに続いて、固形の混合物は、ステンレス鋼のトレイに移され、２４時間にわたって強制熱風乾燥器（７０〜８０℃）におかれた。それから、乾燥したかたまりの固形物は、フィッツミル型のハンマーミルにおいて挽かれて、４０メッシュ（mesh）の粉末（１１８ｋｇ）を生じた。この物質は、３００ｍｇサイズまたは６００ｍｇサイズのカプセル剤として封入された（米国のＧＭＰ研究所、アナハイム、CA）。カプセル剤のそれぞれは、イヌおよびヒトの臨床試験における使用のために、ＦＤ００１およびＭＣＣの１：１の混合物を含んでいる。
【０１４６】
上述した最初の工程においてスライスされ、乾燥された（しかし、バッチ抽出されていない）、生産規模での物質から得られた乾燥したＡ．アルグタ果実（７．０ｇ）は、粉末にされ、この物質は、水（２５０ｍＬ）を用いて、２５℃において４時間にわたって抽出された。混合物はろ過され、ろ液はロータリーエバポレータによって乾燥するまで濃縮されて、乾燥した果実の室温における水抽出物（４．２ｇ）を生じた。
【０１４７】
ＦＤ００１（７９．９ｇ）は、１．５Ｌの蒸留したＨ２Ｏと混合され、この溶液は、１回につき５００ｍＬの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）を用いて４回にわたって連続的に抽出された。混合性の有機層および水性層は、真空条件において乾燥するまで濃縮されて、ＥｔＯＡｃ濃縮物（７．４ｇ）および水性の残余物（４１．５ｇ）を生じた。
【０１４８】
ＦＤ００１（２１．４５ｇ）は、ＤＩ水に溶解され、ろ過された。ろ液は、約４．５ｃｍ（内径）×１０ｃｍの重力カラムにおけるＣ−１８の逆相充填剤に装填された。カラムは、５００ｍｌの水を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ１）、続いて５００ｍｌの２５％のメタノール水溶液を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ２）、５００ｍｌの５０％のメタノール水溶液を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ３）、５０００ｍｌの７５％のメタノール水溶液を用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ４）、５００ｍｌの１００％のメタノールを用いて溶出され（Ｃｕｔ Ｆ５）、５００ｍｌの１００％のＤＣＭを用いて溶出された（Ｃｕｔ Ｆ６）。溶出物が回収され、乾燥するまで真空中において蒸発させられて、１４．１６ｍｇのＣｕｔ Ｆ１、６９０ｍｇのＣｕｔ Ｆ２、２３０ｍｇのＣｕｔ Ｆ３、３０ｍｇのＣｕｔ Ｆ４、８３ｍｇのＣｕｔ Ｆ５および３５０ｍｇのＣｕｔ Ｆ６を生じた。全体の回収率は７２．４重量％であった。
【０１４９】
（実施例２）
以下の実施例において、Ａ．アルグタ調製物における免疫調節活性のインビトロ試験について説明する。
【０１５０】
この研究の目的は、オボアルブミン（ＯＶＡ、グレードＶ、Sigma）に感作させたマウスに由来する脾細胞培養株における、Ａ．アルグタから生成された種々の抽出物および調製物の相対的なサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＦＮγ）産生能を、ＥＬＩＳＡ分析（Quantikineキット、Ｒ＆Ｄシステム）を用いて比較することである。以下の試料（上述の実施例１に説明した通りに調製された）：ＦＤ００１（ＰＧ１０２Ｔ）、果汁濃縮物およびＥｔＯＡｃ抽出物が試験された。
【０１５１】
脾細胞の単離および培養
メスのＢａｌｂ／ｃマウス（Harlan、インディアナポリス、IN）が、０日目および１４日目における２０μｇのＯＶＡのＩＰ注射によって感作された。２４日目に頚部脱臼によって安楽死させた後に、脾臓が個々のマウスから無菌的に摘出され、無菌技術を用いて脾細胞培養株を作るために直ちに処理された。脾臓は、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝化のＲＰＭＩ−１６４０の存在下において、３ｃｃのシリンジからプランジャーを用いて７０ミクロンのナイロンのメッシュの格子に通して組織をゆっくりと押し出すことによって、分離された。大きな細胞の凝集物は、ＦＣＳ勾配を用いて生成した懸濁液から除去された。それから、脾細胞は遠心分離され（１５００ｒｐｍ、１５分間）、生じた細胞のペレットがＲＢＣ溶解緩衝液を用いて処理（１０分間、室温）されて、混入している赤血球を除去した。それから、ＲＢＣ溶解緩衝液の大部分が遠心分離（１５００ｒｐｍ、５分間）によって除去され、それからペレット化した脾細胞が１０ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝化のＲＰＭＩ−１６４０を用いて３回にわたって洗浄された。最後の洗浄の後に、ペレット化した脾細胞は、５×１０６細胞／ｍｌの最終的な細胞密度を実現するように設計された１０％のＦＣＳおよびＰｅｎｎ／Ｓｔｒｅｐを含有している大量のＲＰＭＩ−１６４０（完全培地）に懸濁された。各分析のために５×１０６の脾細胞が２４ウェルプレートの個々のウェルに入れられた。３日目にこれらのウェルから上清が回収され、実験結果の測定に備えて凍結された。
【０１５２】
また、対照の脾細胞培養株が、未処置の（感作されていない）マウスから、上述のようにして確立され、２４ウェルプレートの各ウェルに入れられて５×１０６細胞／ｍｌの最終的な細胞密度にされた。これらの脾細胞は、１０％のウシ胎児血清およびＰｅｎｎ／Ｓｔｒｅｐを含有しているＲＰＭＩ−１６４０において確立され、さらなる処理を受けなかった。３日目にこれらのウェルから上清が回収され、凍結されて陰性実験対照になった。
【０１５３】
Ａ．アルグタ調製物を用いた脾細胞培養物の刺激
１０匹のＯＶＡ感作マウスが試験された各調製物のために使用された。各マウスから得られた脾細胞は、２４ウェルプレートの別々の８つのウェルに入れられた（５×１０６細胞／ｍＬ）。各ウェルには１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび０．５％のＤＭＳＯを含有しているＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っており、当該培地には、試験中の特定の試験調製物のぞれぞれが、含まれていないか、または選択された濃度だけ含まれている。３組のウェルのぞれぞれは、０．２５、１．０または１０ｍｇ／ｍＬのいずれかの濃度のＡ．アルグタ調製物を用いて処理された。陽性対照として供するために、７番目のウェルは、強力なグルココルチコイド抗炎症薬であるデキサメタゾン（ＤＥＸ）の２μＭを用いて処理された。８番目のウェルにはさらなる処理をせずに、これをＯＶＡのみの実験の対照にした。３日間にわたって培養した後に、ＯＶＡ感作マウスごとの個々の８つのウェルのそれぞれから得られた上清が回収され、凍結された。これらの上清は、培養培地に存在するＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、ＩＦＮγのレベルを測定するために使用された。
【０１５４】
培養上清におけるサイトカインレベルの測定
Ａ．アルグタ調製物処理の脾細胞、ＤＥＸ処理の脾細胞、ＯＶＡ処理のみの脾細胞および感作なしの対照マウスから得られた未処理の脾細胞に由来する培養上清は、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された。２つのＥＬＩＳＡプレートウェルが各サイトカインレベルの測定に利用された。
【０１５５】
結果
このインビトロの実験から、ＦＤ００１における活性（図２）、Ａ．アルグタのＥｔＯＡｃ抽出物における活性（図３）、およびＡ．アルグタの果汁濃縮物における活性（図４）が、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載の耐寒性キウィフルーツ調製物の活性と実質的に同様であることを確認した。３つの調製物（１０ｍｇ／ｍＬ）のすべてが、サイトカインＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３、およびＩＦＮγの抑制を、種々な程度において引き起こした。最も顕著な効果は、試験された試料のすべてについてＩＬ−１３およびＩＦＮγにみられ、上述の米国特許出願公開第２００４／００３７９０９号に記載の以前のインビトロ試験と一致していた。活性がＥｔＯＡｃ抽出物において観察されたので、ＦＤ００１に存在する活性成分は有機溶媒に溶出され、従来のクロマトグラフィー法によってさらに精製され得る。また、注目に値するのは、果汁濃縮物が脾細胞によるサイトカイン産生を抑制したことであり、上述の米国特許出公開第２００４／００３７９０９号に示されているキウィフルーツの抽出物が耐寒性キウィフルーツの活性な調製物を生成するための唯一の条件ではないことを示している。なお、果汁濃縮物においてサイトカインの抑制が相対的に低いことが明らかであり、ＦＤ００１の調製に使用された乾燥または加熱処理が活性の増強に重要であり得ることを示唆している。
【０１５６】
（実施例３）
以下の実施例において、Ａ．アルグタの果実以外の部分の抽出物およびＡ／アルグタの他の果実調製物のインビトロ活性の比較について説明する。
【０１５７】
この実験の目的は、果実以外の植物の部分または果実の他の調製物（すなわち上述の米国特許出公開第２００４／００３７９０９号に記載の抽出物以外）から生成されているＡ．アルグタ抽出物の、オボアルブミン感作マウスに由来する脾細胞培養株におけるサイトカイン（ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）産生を調節する能力を、ＥＬＩＳＡ分析を用いて評価することである。以下の試料（上述した通りに調製された）：実施例１に記載の通りに調製されたＡ．アルグタの茎、根および外皮の水抽出物；“煮沸した”未乾燥の果実の調製物；実施例１に記載の通りに調製された果汁濃縮物；実施例１に記載の通りに調製されたＦＤ００１粉末（後述する臨床試験に使用された）；乾燥したＡ．アルグタの室温における水抽出物；実施例１に記載の通りに調製されたＥｔＯＡｃ抽出物；および実施例１に記載の水性残余物が試験された。さらに、公知の３つの免疫抑制化合物、シクロスポリン、デキサメタゾンおよびケルセチンの活性が対照として評価された。
【０１５８】
脾細胞の単離および培養
脾細胞の調製は、実施例２において上述した方法と同様に実施された。
【０１５９】
Ａ．アルグタ調製物を用いた脾細胞培養物の刺激
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、試験される抽出物または調製物の分析に利用された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。キウィフルーツ調製物は、１．０、３．０および１０ｍｇ／ｍＬの濃度において試験された。
【０１６０】
シクロスポリン、ケルセチンおよびデキサメタゾン分析
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、ケルセチンを除く各化合物の分析に利用された。ケルセチンの分析において、２匹のＯＶＡ感作マウスのみから得られた脾細胞が試験された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。シクロスポリンは、０．００８３、０．０８３および４．１５μＭの濃度において試験された。デキサメタゾンは、０．０１、０．１および１μＭの濃度において試験された。ケルセチンは、１、１０および２５μＭの濃度において試験された。強力なグルココルチコイド抗炎症薬である１μＭのデキサメタゾンを用いて処理されたウェルを、試験の陽性対照にした。１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地のみを受けているウェルを試験のＯＶＡのみの対照にした。３日間にわたる培養の後に、上清が回収され、凍結された。これらの上清は、試験された実験条件下における、種々の培養培地に存在するＩＬ−１３およびＩＦＮγのレベルを測定するために使用された。
【０１６１】
培養上清におけるサイトカインレベルの測定
すべての処理に関するウェルおよび対照のウェルから得られた培養上清におけるサイトカインレベルは、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された。２つのＥＬＩＳＡプレートウェルが各サイトカインレベルの測定に利用された。
【０１６２】
実施例２に記載のインビトロ試験の結果に基づいて、ＩＬ−１３およびＩＦＮγの発現のみが、試験物質が有している活性のレベルを評価するため分析された。
【０１６３】
結果
上述のように、Ａ．アルグタ試験物質の濃度が上昇するにつれて、試験されたサイトカインの抑制が強くなった。抑制は、ＩＦＮγに対して全体的に顕著であった。所定の免疫抑制化合物の活性は、このアッセイにおいてＡ．アルグタ調製物と同様であった。ペプチドのクロスポリン、およびグルココルチコイドステロイドのデキサメタゾンは。図５Ａに示すように強い活性（＜１μＭ）を示した。フラボノイドのケルセチンは、やや高めの濃度範囲（１〜２５μＭ、図５Ｂ）において強い活性を示した。ＦＤ００１から活性成分を抽出する、ＥｔＯＡｃの能力について、さらに確認し、それを図６Ａおよび６Ｂに示した。興味深いことに、活性が水性残余物にも存在することが観察され、極性成分および非極性成分の両方がインビボにおける免疫抑制効果を担っていることを示している。イヌおよびヒトの臨床試験（後述する）において使用される物質であるＦＤ００１の粉末は、図７Ａおよび７Ｂに示されるように、このアッセイにおいて活性であることが確認された。
【０１６４】
実施例２に記載のように、上述の米国特許出公開第２００４／００３７９０９号に記載の手法以外の、キウィフルーツ抽出物の他の調製方法が検討された。果実から得られた抽出物（乾燥されているか、もしくは未乾燥であるか、または熱水もしくは室温の水において抽出された）のすべては、図８Ａおよび８Ｂから分かるように、このアッセイにおいて同様の活性を示した。この分析に基づいて、本発明者らは、治療を目的とする耐寒性キウィフルーツを調製するための種々の実行可能な代替方法があると考えている。
【０１６５】
興味深いことに、Ａ．アルグタの外皮、根および茎から調製された熱水の抽出物は、このアッセイにおいて、ＦＤ００１および果汁の濃縮物と比べて、同等の活性または優れた活性を示した（図９Ａおよび９Ｂ）。これらの結果は、これらの他の植物の部分が、免疫マーカーの調節または炎症誘発性のサイトカインの抑制に関して、治療学的に興味深い化合物の他の原料であり得ることを示している。
【０１６６】
（実施例４）
以下の実施例は、ＦＤ００１のＣ−１８クロマトグラフィー精製から回収された画分のインビトロ活性の比較について説明する。
【０１６７】
この実験の目的は、オボアルブミン感作マウスに由来する脾細胞培養株におけるサイトカイン（ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）産生を調節するＦＤ００１の画分の生物活性を、ＥＬＩＳＡ分析を用いて評価することであった。ＦＤ００１の画分は、溶媒の極性の低下にしたがって溶出するＣ−１８クロマトグラフィーカラムによる精製後の画分である。以下の試料（上述のように調製された）：画分ｃｕｔ Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３、Ｆ４、Ｆ５およびＦ６が試験された。さらに、公知の３つの免疫抑制化合物、シクロスポリン、デキサメタゾンおよびケルセチンの活性が、ＦＤ００１の等価物であるＳＧ０５−０２１７Ａの基準対照飼料とともに、対照として評価された。
【０１６８】
脾細胞の単離および培養
脾細胞の調製は、実施例３において上述した同じ方法において実施された。
【０１６９】
Ａ．アルグタ調製物を用いた脾細胞培養物の刺激
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、試験される抽出物または調製物の分析に利用された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。キウィフルーツ調製物は、１．０、３．０および１０ｍｇ／ｍＬの濃度において試験された。
【０１７０】
シクロスポリン、ケルセチンおよびデキサメタゾン分析
８匹のＯＶＡ感作マウス（８つの複製）から得られた脾細胞は、ケルセチンを除く各化合物の分析に利用された。ケルセチンの分析において、２匹のＯＶＡ感作マウスのみから得られた脾細胞が試験された。各マウスから得られた５×１０６の脾細胞は、２４ウェルプレートの別々のウェルに入れられた。ウェルごとに、１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地が入っている。シクロスポリンは、０．００８３、０．０８３および４．１５μＭの濃度において試験された。デキサメタゾンは、０．０１、０．１および１μＭの濃度において試験された。ケルセチンは、１、１０および２５μＭの濃度において試験された。強力なグルココルチコイド抗炎症薬である１μＭのデキサメタゾンを用いて処理されたウェルを、試験の陽性対照にした。１００μｇ／ｍＬのＯＶＡおよび２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）を含有している１ｍｌのＲＰＭＩ−１６４０完全培地のみを受けているウェルを試験のＯＶＡのみの対照にした。３日間にわたる培養の後に、上清が回収され、凍結された。これらの上清は、試験された実験条件下における、種々の培養培地に存在するＩＬ−１３およびＩＦＮγのレベルを測定するために使用された。
【０１７１】
培養上清におけるサイトカインレベルの測定
すべての処理に関するウェルおよび対照のウェルから得られた培養上清におけるサイトカインレベルは、ＥＬＩＳＡアッセイによって測定された。２つのＥＬＩＳＡプレートウェルが各サイトカインレベルの測定に利用された。上述の実施例３に示されているように、ＩＬ−１３およびＩＦＮγの発現のみが、試験物質が有している活性のレベルを評価するため分析された。
【０１７２】
結果
この実験によって、ＩＬ−１３およびＩＦＮγのより強い抑制がこのアッセイにおけるＡ．アルグタ調製物から観察されたことが示された。このクロマトグラフィー精製技術がＦＤ００１から活性成分を抽出する能力について、図１１に示されるように、さらに確認された。ＦＤ００１に対する基準物質であるＳＧ０５−０２１７Ａと比べて、４／５のＣｕｔは、実質的にサイトカイン（ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）のより強い抑制剤である。
【０１７３】
これらのデータは、治療を目的とする耐寒性キウィフルーツを調製するための種々の実行可能な代替方法があることを示している。
【０１７４】
（実施例５）
以下の実施例において、中程度の重篤度のアトピー性にかかっている成人の患者におけるＦＤ００１の有効性の二重盲検、プラシーボ対照、外来患者の試験の結果について説明する。
【０１７５】
この試験の目的は、中程度の重篤度のアトピー性（ＡＤ）にかかっている少数の成人の有志者における、４２日間にわたって経口的に投与されたＦＤ００１（ＰＧ１０２Ｔ）の有効性の証拠を得ることであった。この試験の第２の目的は、ＦＤ００１に対する応答の許容度および変動性を評価することであった。
【０１７６】
試験計画
被験者は、２つの６００ｍｇのカプセルに入っている（実施例１に記載の通りに調製された）ＦＤ００１の粉末（総用量が６００ｍｇのＦＤ００１）、またはＭＣＣからなるプラシーボの２つのカプセルを、試験の１日目から始めて４２日間にわたって、朝に摂取した。１人を除いてすべての試験参加者は、試験の開始時に、ステロイド療法（経口または局所性の種々の形態）を併用していた。被験者には、１４日後にステロイド薬の使用を中止するように指示した。４つの時点（適格性の検査のための来診時；試験の１、１４および４２日目）において、日常の生化学検査および血液学のために採血された。尿は日常の尿検査のために４日おきに採取された。有効性の評価は。各来診後の検査時に行われた。被験者は、全体的に健康な１９〜６５歳の男性または女性であった。被験者は、医師による全体的な評価（Feldman and Krueger, Annals of the Rheumatic Diseases, 64:ii65-ii68, 2005）のスコアが、０〜４の度合いに対して３と定義づけられている中程度の重篤度の進行中のアトピー性皮膚炎にかかっている。被験者は、最小でも体表面積（ＢＳＡ）の１０％においてＡＤを有している。被験者は、ＡＤの処置のために局所性のステロイドを使用中であり、育児中または妊娠中ではない。安全性および許容度が、有害反応の報告、ならびに標準的な血液化学、血液学および尿検査を用いて評価された。
【０１７７】
統計学的方法
コクラン マンテル−ヘンツェル検定（Armitage et al., Statistical Methods in Medical Research, 4th Ed., Blackwell, Oxford, 2002）を用いた解析にともなう一次的な有効性の変量は、医師による全体的な評価にある基準からの、４２日目における変化である。第２の変量は、ＡＤの徴候（紅斑、硬化、滲出／外皮形成、および掻痒）の基準、および２標本ｔ−検定を用いて解析される総ＢＳＡの基準からの、４２日目における変化である。記述統計量が、基準のすべて、ならびに１、１４、２８および４２日目における処置群ごとの基準より後の試験データについて表されている。これらの統計量は、標本の大きさ、平均値、標準偏差、頻度、割合および必要に応じて信頼区間を含んでいる。被験者の自己評価調査票からの結果は、処置群ごとに総計されて表されている。試験期間中に生じた有害事象はいずれも記録された。有害事象の記述は、発生日、事象の終了日または継続した日、事象の重篤度、要因、取られた対応、取られた療法、および結果を含んでいる。これらのデータは、有害事象を報告している患者の番号、生体の器官系（body system）、重症度（severity）、重大さ（seriousness）、試験物質との関係によって分類された。処置群間の比較は、試験期間中にＭｅｄＲＡ項目（Medical Dictionary for Regulatory Activities. http://www.meddramsso.com）に分類されている１つ以上の有害事象を有している被験者の頻度を一覧にすることによって成された。
【０１７８】
検査値に関する要約した記述統計値およびそれらに関連する基準（１日目）からの変化は、臨床検査評価のすべてについて決定された。さらに、“推移の表”が作成された。推移の表は、試験の進行中に検査パラメータの変化（例えば、検査基準範囲に基づいて、正常から高くなる変化）を起こした被験者の数および割合を示している。以下の局所性のステロイドは、アトピー性皮膚炎の症状の処置に一般的に使用される。＊＊の印のあるものは、この臨床試験において何人かの個体によって使用された。
【０１７９】
＋＋ベタメタゾンジプロピオネート（ジプロレン）、＊＊０．０５％のクロベタゾル １７−プロピオネート（デルモベート）、＊＊ハロベタゾルプロピオネート（ウルトラベート）、０．１％のハルシノニド（ハログ）、０．１％のアムシノニド（シクロコルト）、０．５ｍｇのベタメタゾンジプロピオネート（ジプロレン、ジェネリクス）、０．０５％のベタメタゾンバレレート（ベタデルム、セレストデルム、プレベックス）、０．２５％のデソキシメタゾン（デソキシ、トピコルト）、０．１％のジフルオロコルトロンバレレート（ネリゾン）、０．２５％のフルオシノンロンアセトニド（デルマ、フルオデルム、シナラー）、＊＊０．０５％のフルオシノニド（リデモル、リデックス、タイデルム、チアモル、トプシン）、ハルシノニド（ハログ）、＊＊０．１％のモメタゾンフロエート（エロコン）、＊＊０．５％のトリアムシノロン，デソニド（デソウェン）、＊＊０．２％のヒドロコルチゾンバレレート（ウェストコルト）、０．１％のプレドニカルベート（デルマトップ）および１．０％のヒドロコルチゾン（コルタイド）。
【０１８０】
表１は、試験において試験物質（ＦＤ００１またはプラシーボ）と組み合わせて、最も高頻度に使用されたステロイドに基づいて臨床試験から亜集団を抜き出したものである。
【０１８１】
【表１】
【０１８２】
有効性の結果
試験を完了させるために最初の１７人の被験者に対して実施された中間解析の結果、２つの二次的な有効性の指標：紅斑（ｐ＝０．１３、ＩＴＴ １７）および硬化（ｐ＝０．０９、ＩＴＴ １７）に強い統計学的な傾向を生じた。中間解析の時点において、統計的な差異は、この小さな標本の大きさにおいて一次的な有効性の指標において検出されなかった。
【０１８３】
４２日目の最終的な解析において、一次的な有効性の変量（医師による全体的な評価）または二次的な有効性の変量（ＡＤの徴候における基準線からの変化およびＢＳＡに関する変化の割合）に関して処置した群の間に統計的な有意差は認められなかった。しかし、１４日目に有意な分布の変移が一次的な有効性の指標において観察された。１日目から１４日目の間に生じているこの変移は、プラシーボの受容者および試験物質の受容者のそれぞれの応答について、図１０Ａおよび１０Ｂにおいて認められ得る（ＰＧＡの採点化の基準が示されている）。被験者が分析の１４日目に関して応答群および非応答群に分類された場合（表１、群Ａ）、応答者はＦＤ００１処置群において高い割合を有して認められ、非応答者はプラシーボ処置群において高い割合を有して認められた。これらの結果は、より強いステロイドを使用している被験者（群Ｂ）が除外された場合、および中程度から穏やかなステロイド処置を続けている被験者（原Ｃ）について、比較的に一貫して維持されていた。補足的なこの後の分析によって、一次的なＰＧＡの指標（ｐ＝０．０２）、および１４日目における発赤に対する被験者の自己評価（ｐ＝０．０３）について統計的な有意性が明らかになった。さらに、強い統計的な傾向が、１４日目における疥癬についての自己評価および滲出／外皮形成についての臨床徴候評価において検出された（それぞれｐ＝０．０８およびｐ＝０．０７）。処置群に認められた有効性は、４２日目までに消失したＰＧＡ指標を介して、プラシーボ群と比較された。
【０１８４】
これらの結果は、局所性のステロイド療法に対する免疫賦活剤としてのＦＤ００１の使用が、ＡＤの処置に利益をもたらすことを示している。１、１４および４２日目における検査の試験結果は、実施された試験（臨床化学、差異を有する全血球計算値、凝固、間接ビリルビン、および尿の顕微鏡観察が挙げられる）のいずれに関しても安全性がないことと関連する傾向を示した。ＩｇＥ、Ｃ反応性タンパク質、または好酸球計算値について処置群の間に差は認められなかった。
【０１８５】
安全性の結果
重大な有害事象は、ＦＤ００１処理またはプラシーボのいずれに関しても報告されなかった。ＦＤ００１において１２の重大ではない事象があり、プラシーボにおいて１３の重大ではない事象があった。これらの内訳は、ＦＤ００１において１０の軽度の事象、および２の重度の事象であり、プラシーボにおいての１３の軽度の事象であった。試験物質またはプラシーボに対して問題があると見做される事象またはこれらに関連する事象は、なかった。
【０１８６】
結論
分布の大きな推移が、１４日目における一次指標（ＰＧＡ）に認められた。この理由に関して、後の解析が、１４日目の時点における処置した群に統計的な有意差を示したこの時点について実施された。さらに、いくつかの二次指標は、統計的に有意な傾向（自己評価における紅斑、ｐ＝０．０３）または統計的に大きな傾向（自己評価における掻痒の改善、ｐ＝０．０３およびＡＤ評価の徴候における滲出／外皮形成、ｐ＝０．０７）を示した。試験において報告された深刻な有害事象はなかった。試験物質群およびプラシーボ群の両方において報告された有害事象の数は同程度であり、試験物質に起因していなかった。臨床検査値において検出された安全性に関わる懸念はなかった。これらのデータは、Ａ．アルグタの果実抽出物が受容者にとって安全であり、十分に許容され、ステロイド療法に対する免疫賦活剤として有益であるという前臨床の哺乳類の試験およびヒトの事例調査を再確認している。
【０１８７】
（実施例６）
以下の実施例において、アトピーのイヌのＣＡＤＥＳＩスコア（Olivry et al., Vet. Dermatol., 13:77-87, 2002; Hanifin et al., Exp. Dermatol., 10:11-18, 2001; Kunz et al., Dermatology, 1997, 195, 10-19）を低下させるための耐寒性キウィフルーツ抽出物の使用を評価する、無作為化した二重盲検のプラシーボ対照試験について説明する。
【０１８８】
この試験の第１の目的は、イヌにおけるアトピー性皮膚炎（ＡＤ）にとって標準的なステロイド処置に対する補助療法として、Ａ．アルグタの果実抽出物（濃縮物）であるＦＤ００１の有効性を評価することであった。処置に対する応答は、ＣＡＤＥＳＩの等級および罹患者の掻痒の評価を組み込んでいる臨床治験担当医の全体的な評価を用いて評価された。
【０１８９】
試験の付加的な目的は、ＡＤの臨床徴候の管理におけるステロイド使用の必要性を低下させる単独療法として、キウィフルーツ抽出物の有効性を評価することであった。
【０１９０】
試験の第３の目的は、この処置の起こり得る副作用を評価することであった。
【０１９１】
実験計画および方法
仮説を確かめるために、無作為化した二重盲検のプラシーボ対照臨床試験が行われた。
【０１９２】
Ａ．動物
自然発生的な疾患を有している約６０匹のイヌが選ばれた。
試験対象患者基準：
１．すべてのイヌは、ＡＤ皮膚疾患を除いて、身体検査において健康であると判定された。
２．軽度から中程度の重症度の非季節性のＡＤ（１〜６年の病歴）の診断は、病歴、矛盾のない臨床徴候、他の疾患の排除、最も一般的な皮膚の５７のアレルゲンを用いた皮内の皮膚試験における少なくとも３つの陽性反応に基づいて行われた。
３．ノミの制御処理（１ヶ月間の効果×最小１ヶ月）。
４．食品成分の可能性を除外するための食品試験＊または十分な食品試験の履歴（過去２年以内）。
５．必要に応じて、何匹かのイヌが疥癬に対する処置を受けた。
６．すべての適格なイヌは、以下の期間にわたって併用する薬物療法を受けた：
・すべての抗ヒスタミンを２週間
・持続型の注入可能なステロイド（例えば、デポメドロール）を２ヶ月間
・局所性のステロイドを２週間
・経口のステロイド（掻痒が再度、悪化したときに必要とされる）を５〜１４日間
・経口のＣｓＡを１ヶ月間
・必須の脂肪酸補助物のすべてを１ヶ月間＊＊
・洗髪剤または抗生物質を使用し続ける（試験期間には使用されない）。
７．動物は、試験に登録される前に、任意の二次的感染のおそれが除去された。
８．基準線の最小のＣＡＤＥＳＩスコアが２５である。
９．イヌは、試験期間中に同じ食餌を継続させる必要があった。
１０．飼い主は、試験の開始前にクライアントの同意に署名する必要があった。
試験除外患者基準：
１．ＭＲＳＡ／ＭＲＳＩの病歴。
２．事前に全身性疾患にかかっている動物（抑制された甲状腺機能低下症を除く）。
３．特別に重篤なＡＤにかかっている動物。
４．最初の２週間のステロイド療法に対する非応答が続くか、または完全寛解する。
５．薬用の洗髪剤を必要とする動物。
６．処置が疾患を安定化しており、少なくとも１年にわたって進行中ではない限り、同時のアレルゲン特異的な免疫療法を必要とする動物。
＊食品試験は、イヌの特定の食事性の病歴に基づいているが、タンパク質および炭水化物の新たな供給源を取り入れた。イヌは、８週間にわたって食品試験食（例えば、Innovative Veterinary Dietsによって製造されている鹿肉およびジャガイモの食餌）を受け取れる状態におかれた。掻痒および感染の再発を試験中に監視した。試験中に掻痒および感染の再発が認められると、食物アレルギーが除外される。掻痒および感染の再発が消失または減少した場合、動物は以前の食餌を用いてふたたび試験され、７日間まで感染の再発または掻痒に関して監視された。したがって、潜在的に臨床的に見てＡＤと思われ得る他の掻痒性の皮膚疾患は、登録の前に除外されるか、または制御される（例えば、ノミアレルギー）。
＊＊シクロスポリンおよび脂肪酸に関して、４週間の治療の中止期間をおいた。
【０１９３】
Ｂ．実験計画
選択されたイヌは、１：１の割合において試験物質またはプラシーボの２群に、無作為に分けられた。したがって、約３０匹のイヌが試験物質を受け、約３０匹のイヌがプラシーボを受けた。グループ化は、無作為化され、飼い主および治験担当医師には伏せられた。
【０１９４】
１．試験物質
一方の処理群は、１日に１回、３０ｍｇ／ｋｇの用量のキウィフルーツ抽出物／濃縮物（実施例１に記載のアクチニディア アルグタのＦＤ００１調製物）を受け、他方の処理群は、プラシーボを受けた。試験物質およびプラシーボの両方は、飼い主によってイヌに投与されるカプセル剤に調合された。カプセル剤は、カプセルとして与えるか、または食品の上に乗せられ得る。
【０１９５】
２．ステロイド処理
両方の試験群は、試験１日目に開始して試験１４日目まで、標準的な低用量の経口ステロイド（プレドニゾロン）を単独に用いて安定化され、試験１４日目に、イヌが適格のままであるか否かを再評価した。ステロイド投与は以下のように実施された：
・１〜３日目：２ｍｇ／ｋｇのＢＩＤ
・４〜１４日目：１日おきに２ｍｇ／ｋｇ
（１４日目にイヌが継続して基準を満たしていれば）
・１５〜４２日目：１日おきに２ｍｇ／ｋｇ＋指定の試験物質
ステロイド処置に関する最初の２週間の終わりに、ステロイド応答性、残余のＡＤの徴候および症状について評価された（ＣＡＤＥＳＩは、０を超えていて、初期のＣＡＤＥＳＩより小さい必要がある）。
【０１９６】
３．第１段階の試験手法
最初の２週間の終わりに、治験担当医師は、ＣＡＤＥＳＩスコアを介してＡＤの徴候および症状、ならびに飼い主の掻痒に関する日誌を評価する。イヌに４週間の補助療法の期間を継続させるためには、治験担当医師の全体的な評価は、以下のように：
・ＣＡＤＥＳＩスコアは、イヌがいまだに損傷を有していることを反映している
・掻痒に関する日誌が１日目完全には回復していないことを示している
ＡＤの徴候および症状の改善を示しているが、完全に回復を示していないことが求められた。
【０１９７】
上述の基準に適合していれば、イヌは、組合せ療法に組み込まれ、指定の試験物質を毎日受けるとともに、１日おきに０．２ｍｇ／ｋｇの用量のプレドニゾロンを受けた。イヌの飼い主は、第１段階における残りの試験期間（４週間）にわたって経口ステロイドの支給を受けた。
【０１９８】
イヌが標準的なステロイド処置に反応しなかった場合、試験への参加が解除され、目的の登録数に達するまで他のイヌが選ばれた。
【０１９９】
６週間にわたる処置（最初の２週間のステロイド療法および４週間の組合せ療法）の期間中に、イヌは、事象の予定に記載されている間隔をおいて、ＣＡＤＥＳＩの等級および掻痒に関する日誌を用いて評価された。６週間の処置期間の終わりに、各群におけるイヌは、ＣＡＤＥＳＩスコア、臨床症状および飼い主によってつけられた掻痒の日誌に関して比較された。ＣＡＤＥＳＩスコアに改善が認められ、治験担当医師に良好な候補と判断されたイヌは、この手順の第２段階（キウィ果実の単独療法）にとって適格とされた。
【０２００】
血液試料が、採取されて安全性および二次指標が評価された。全血球計算値、化学物質レベル、合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベル、およびＴＡＲＣに関する検査が事象の予定に特定されている時点に実施された。ＣＢＣ、化学検査は直ちに実施された（コロラド州立大学において）。合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベルおよびＴＡＲＣのサンプルは−７０℃に凍結された。
【０２０１】
４．第２段階の試験手法
第２段階に進んだイヌは、４週間の非盲検の単独療法を開始した。グループ化に関して第２段階の終了まで伏せられたままなので、第１段階からプラシーボおよび試験物質のイヌは、そのまま登録された。４週間の経過前にイヌがＡＤの徴候の再発したか、または医療の助けを必要とした場合、第２段階の処置が失敗したとみなし、それらのイヌには試験を中止させた。第２段階においてその改善を維持したイヌは、第２段階の処置の応答者と見做された。
【０２０２】
血液試料が採取されて、安全性および二次指標を評価した。全血球計算値、化学物質レベル、合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベル、およびＴＡＲＣに関する検査が事象の予定に特定されている時点に実施された。
【０２０３】
【表２】
【０２０４】
【表３】
【０２０５】
５．罹患者による有効性の評価
掻痒に関するスコア（高い数値ほどより重篤な掻痒であることを意味する０〜５の等級）は、飼い主によって毎週、割り当てられた（表２）。
【０２０６】
【表４】
【０２０７】
６．治験担当医師による有効性の臨床評価
紅斑、苔蘚化および表面剥離は、イヌのアトピー性皮膚炎の重症度指数（ＣＡＤＥＳＩ、表３）を用いて、各処理期間の１、１４、２８、３５および４２日目に治験担当医師によって評価され、採点された。この点数化システムは、イヌにおけるＡＤの重篤度を評価するために、以前に使用され（Olivry et al. Vet. Dermatol 2000; 11: 47）、ヒトのＡＤに使用された採点法から採用された（Hanifin et al., Exp Dermatol 2001; 10 (1): 11-8; Kunz et al., Dermatology 1997; 195 (1): 10-9）。０〜３の等級が各パラメータについて使用された（０＝なし、１＝軽度、２＝中程度、３＝重度）。したがって、評価される領域に関して、３つの点数の合計は０〜９の範囲である。合計のスコアは０〜３６０の範囲であった。この試験における一次指標は、ＣＡＤＥＳＩスコアおよび掻痒に関する日誌を用いた、治験担当医師による全体的な評価であった。処置の不成功は、ＣＡＤＥＳＩスコアが基準（１日目）に戻るか、またはＡＤの悪化もしくは二次感染の発生に関連してより高くなる、と定義づけられた。損傷領域の細胞診断が、各ＣＡＤＥＳＩ評価のとき（毎週）実施された。ＣＡＤＥＳＩスコアに改善を示さなかった被験体は、処置の不成功と見做された。
【０２０８】
イヌは、以下のいずれかに該当した場合に試験を中止させられた：
・飼い主がこの手順に同意しなかった
・被験体が処置を必要とする二次感染を起こした
・掻痒が、局所的な領域において、自己多発化（self-mutilation）が生じるほどに重篤化した。
【０２０９】
二次指標は、掻痒の割合および安全性の検査を含んでいる。
【０２１０】
ＣＡＤＥＳＩスコアが改善し、２〜６週間の処置期間（補助療法の期間）に医療の助けを必要としなかったイヌは、応答者と判断され、この手順の第２段階に適格であった。医療の助けを必要としたイヌは試験から外され、処置の不成功または非応答者と評価された。治験担当医師によって支給された試験物質および標準的なステロイドの他に、抗ヒスタミンなどのさらなる薬物は、イヌが処置の不成功に分類されない限り、処置期間中に割り当てられなかった。
【０２１１】
７．血液試料
処置期間の１、１４および４２日目に、全血球計算値、化学物質レベル、合計のアレルゲン特異的ＩｇＥレベル、およびＴＡＲＣのために採血された。
【０２１２】
８．安全性の計量値
安全性は、副作用の発生および検査プロファイル基づいて評価された。全血球計算値（ＣＢＣ ｗ／差異）ａＰＴＴ、および化学検査プロファイルのための試料は、１、１４および４２日目に採血された。
【０２１３】
９．統計値
データは、一次指標に関してχ二乗検定によって解析され、二次指標（例えば、ＣＡＤＥＳＩ、掻痒の割合）について分散分析によって解析された。解析計画に関するさらなる詳細は、この手順における統計解析計画書に見られ得る。中間分析は、目標の登録数の半数が試験を終えたときに実施された。ｐ＜０．０５は、有意であるとみなされた。
【０２１４】
要約および結果：概要
この試験は、観察された集団におけるＥＦＦ１００１の試験物質活性の証拠を提供し、ＥＦＦ１００１が、イヌのＡＤの徴候および症状の維持および管理の他に、ステロイドの使用を控えさせるために、見込みのある有用な補助的な単独療法の製品であることを示唆している。この試験において、ステロイドなしの状態のまま、第２段階においてＡＤの状態を維持または改善したイヌの大部分が、第１段階における組合せ処置（すなわち低用量のステロイドおよびＥＦＦ１００１）の受容者であった。
【０２１５】
第１段階のイヌの試験の要約
試験には、米国内の４つの動物病院から７７匹のイヌが登録された。この試験に登録されたイヌは、１〜６年間にわたる軽度から中程度の重篤度の非季節性のアトピー性皮膚炎と診断された。第１段階は、アトピー性皮膚炎を安定化させるために低用量（０．２ｍｇ／ｋｇ）のステロイドのみを導入した２週間を含む、６週間の処置期間であった。１４日目に、試験において、第１段階の残りの４週間にわたって低用量のステロイド（ｑＥＯＤステロイドの投与）とともに、３０ｍｇ／ｋｇのＥＦＦ１００１またはプラシーボが導入された。頻繁な来診（すなわち、およそ毎週）によって、ＣＡＤＥＳＩおよび掻痒の測定を試験の全体を通して一貫して継続することが保証された。
【０２１６】
登録されたイヌの７１％（５５／７７）が第１段階を終了した。掻痒における改善（部分的な一次指標）がＥＦＦ１００１を受けたイヌに認められた（ｐ＝０．０５９４）。第１段階の４２日目に、ＥＦＦ１００９群におけるＣＡＤＥＳＩスコアがプラシーボ群よりも改善したが（−６．９対−４．０）、群の間の差には統計的に有意ではなかった（ｐ＝０．４３７１）。
【０２１７】
第１段階を終えているイヌの６４％（３５／５５）が第２段階；４週間にわたってＥＦＦ１００１単独（単独療法）の処置相に進められた。第１段階から第２段階に進んだイヌのプラシーボおよび試験物質のおおよそ等しい集団は、それらの処置の割り当てが伏せられたままの治験担当医師によって決定されているので、その適合性のみに基づいていた。治験担当医師は、イヌのＣＡＤＥＳＩスコア、掻痒のスコア、全体的な状態および飼い主の評価に強く依存していた。
【０２１８】
安全性の結果
サイト＃２におけるイヌに関して試験中に１つの重大な有害事象が報告されたが、試験物質には関連がなかった。＃１４０のイヌは、２匹の他のイヌとの乱闘において受けた傷のために入院し、死亡した。他の重大な有害事象または重大ではない有害事象は報告されなかった。
【０２１９】
第２段階のイヌの試験の要約
３５匹のイヌ（第１段階から、１８匹のＥＦＦ１００１受容者 対 １７匹のプラシーボ受容者）が、第２段階（すべてのイヌがＥＦＦ１００１のみを受ける単独処置期間）に入った。第１段階からのＥＦＦ１００１受容者にとっての有意な効果として、第２段階において第１段階におけるプラシーボの受容者よりも、３．５倍の利益を受けている（ＲＲ＝３．５４；ＯＲ＝１６．２６、ｐ＝０．０００６、フィッシャーの直接確率検定）ようだと認められた。第２段階に入った３５匹のイヌのうち、１９匹が、ＣＡＤＥＳＩスコアおよび掻痒スコアに関連する状態を維持できたか、または改善でき、さらにこれらのうちの１５匹（７９％）は、第１段階においてＥＦＦ１００１受容者であった。これに対し、第１段階においてプラシーボ受容者であったイヌのほとんどは、第２段階においてＡＤ徴候が再発し、医療の助けを必要とした（ＥＦＦ１００１群における１９％に対して、８１％）。これは、０．０００２のｐ値を有して、第２段階における受容者の数において、統計的に優位な差を生じた（第１段階のプラシーボ受容者において５．９％に対して、第１段階のＥＦＦ１００１受容者において６６．７％）。この結果は、ＥＦＦ１００１を用いた付加的な処置および低容量のステロイドの４週間の後（第１段階）、ステロイドおよびプラシーボを用いて最初に処理された（第１段階）イヌと比べて、被験体が、疾患の安定化をより長期にわたって受け、ステロイドの使用が控えられることを示している。
【０２２０】
第１段階において状態が悪化していたイヌが第２段階に進まなかったので、プラシーボ受容者の群の第１段階におけるＣＡＤＥＳＩスコアの平均値は、第２段階の開始時に下がった。第２段階の７日目まで、これらの第１段階のプラシーボのイヌのほとんどが、増大したＣＡＤＥＳＩに基づいて発赤の症状を示したことが明らかであった。これに対して、第１段階のＥＦＦ１００１群のイヌのほとんどは、第２段階のうちに再発しなかった。基準線として第２段階の開始時を用いた場合、プラシーボ群の再発現象は、処置群と比べて、第２段階の２１日目（プラシーボにおける１１．７対ＥＦＦ１００１における１．８、ｐ＝０．０４６）および２８日目（それぞれ１４．４対０．８、ｐ＝０．０２）（欠測値の補完を用いた）において、統計的に有意である（表１３．２）。
【０２２１】
ＥＦＦ１００１群におけるイヌは、第１段階におけるプラシーボを超えて、掻痒スコアにおける有意な改善を受け（−０．４に対してプラシーボにおける＋０．１、ｐ＝０．０６）、第２段階を通して利益を受け続けた（表１２．１）。第２段階の開始時を基準線として用いた場合に、プラシーボ群の掻痒スコアは、２１日目（プラシーボにおける０．４対ＥＦＦ１００１受容者における−０．１）および２８日目（それぞれ０．５対−０．２）（欠測値の補完を用いた）の両方において、処置群と比べて悪化した（表１３．２）。
【０２２２】
人道的使用に基づく処置の継続
第２段階を終えた１９匹のイヌのうち１３匹（または６４％）の飼い主は、試験期間の終了後に、繰返しの単独療法の処置を依頼した。これらのイヌの７７％は第１段階におけるＥＦＦ１００１受容者であった。人道的使用の試験物質は６週間の間隔を空けて支給され、掻痒に関する日誌の作成が依頼された。これまで、試験イヌ（＃１２７、サイト＃２）に関して記録されている、ＥＦＦ１００１の使用が最も長く継続しているのは、１年を超えており、このイヌのＡＤ症状の管理に有望と思われる状態が継続している。このデータは、ばくろおよび初期の補助的な処置の持続が、ＡＤの徴候および症状の管理におけるＥＦＦ１００１の継続的な有効性の重要な要素であり、ステロイドの使用を控える助けになることを、強く示唆している。
【０２２３】
結論
ステロイド療法および本発明の耐寒性キウィフルーツ調製物の組合せの有効性は、いずれか単独の療法を用いて観察された結果と比べて、ＡＤにかかっているイヌの処置における上記組合せの療法の非常に優れた有益な効果を示すことによって証明されている。さらに、キウィフルーツ調製物は、キウィフルーツ調製物およびステロイドの組合せの使用の後に用いられた場合、有効な単独療法になる。理論に縛られることなく、本発明者らは、キウィフルーツ調製物が、ステロイドと共同作用して、ＡＤの処置において優れた治療結果を提供すると考える。したがって、ＦＤ００１および本明細書に記載の他のキウィフルーツ調製物は、ステロイドに基づく療法と併用して投与される場合、またはステロイドに基づく療法との併用使用に続く単独療法として使用される場合に、ＡＤにかかっているイヌに対する治療上の利益を増強させ、付加的な利益として、イヌにおけるＡＤの管理に使用されるステロイドの使用量を低減させる。より少量および／またはより低頻度のステロイドを使用させる能力は、ステロイドの使用に伴って生じる副作用を低減させるという顕著な利点を有している。抽出物は、カプセル剤、食品と混合された粉末として、または食品の成分として投与され得る。キウィフルーツ調製物を有している栄養補助食品は、単独に用いた場合、または低用量のステロイドと組み合わせて用いた場合に、アトピーのイヌの健康な皮膚の維持に効果的である。
【０２２４】
アレルギー、アトピー性皮膚炎の症状の１つは、子供における通常の皮膚疾患であり、出生から６ヶ月間に認められることが多い（Spergel and Paller, J. Allergy Clin. Immunol., 112:S128-S139, 2003）。ＡＤの有病率は、他のアトピー性疾患（喘息が挙げられる）世界的に増加傾向にある（Larsen and Hanikin, Immunology and Allergy Clinics of North America, 22:1-25, 2002; Wollenberg et al., Clin. Exp. Dermatol., 25:530-534, 2000; Mannino et al., Mor Mortal Wkly Rep CDC Surveill Summ., 47:1-27, 1998; Linneberg et al., Allergy, 55:767-772, 2000）。ＡＤ患者は、生活の質に対して深刻な負の影響を受け、現在使用可能な処置は、有害な副作用の原因、ならびに家族および社会の両方にとって経済的な負担であり得る。アトピーの皮膚を冒す症状は、アトピーの進行の開始を示していることが多い。種々の長期的な研究に基づいて、ＡＤ患者のおよそ半数が、特に重度のＡＤを伴って喘息になり、２／３がアレルギー性鼻炎になる（Leung et al., J. Clin. Invest., 113:651-657, 2004; Spergel et al., J. Clin. Invest., 101:1614-1622, 1998）。ＡＤに対する安全かつ有効な処置の同定は、非常に歓迎される。また、ＦＤ００１の有効性は、ステロイド、またはＡＤ、喘息もしくはアレルギー性鼻炎の管理に使用される他の薬剤量または力価を低減させ得る。
【０２２５】
後の試験の被験体のように、本発明は、ステロイド療法をともなう補助的な処置のための、本明細書に記載の耐寒性キウィフルーツ調製物の使用が意図される。当該処置に続いて、ＡＤ、喘息、アレルギー性鼻炎、または他のロイコトリエン媒介障害（例えば、食物アレルギーおよび慢性の蕁麻疹）にとっての耐寒性キウィフルーツの単独療法が行われ得る。本発明を論理的に拡大すれば、任意の小哺乳類（例えばイヌ、実施例７を参照すればよい）におけるアレルギー性の障害に対する処置としての、ステロイド療法と組み合わせた耐寒性キウィフルーツの使用は、さらに検討され得る。
【０２２６】
本明細書に記載の各文献または公開物は、その全体が参照によって本明細書に援用される。
【０２２７】
本発明の種々の実施形態が詳細に説明されている。これらの実施形態の変更および適合が当業者に思い浮かべられることは明らかである。しかし、そのような変更および適合が後述する特許請求の範囲に記載のように本発明の範囲内にあることは、明白に理解される。
【図面の簡単な説明】
【０２２８】
【図１】大量のＰＧ１０２Ｔ（この凍結されたか、または乾燥されたキウィフルーツの濃縮物はまた、ＦＤ００１と呼ばれる（ＦＧは食品等級の基材を指す））を生成するために使用されるプロセスの概略図である。
【図２】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ００１の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図３】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、ＦＤ０１（ＰＧ１０２Ｔ）の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）抽出物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図４】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるサイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３およびＩＦＮγ）の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの果汁の濃縮物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図５Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３およびＩＦＮγの産生の相対度に対する、デキサメタゾンの３つの投与量の活性を示す図である。
【図５Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３およびＩＦＮγの産生の相対度に対する、ケルセチンの３つの投与量の活性を示す図である。
【図６Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、ＦＤ００１、ＦＤ００１の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）の抽出物およびこのプロセスから得られる水性の残余物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図６Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、ＦＤ００１、ＦＤ００１の酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）の抽出物およびこのプロセスから得られる水性の残余物の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図７Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、ＦＤ００１およびＦＤ００１の粉末の形態（カプセル剤に使用するために調製された）の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図７Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、ＦＤ００１およびＦＤ００１の粉末の形態（カプセル剤に使用するために調製された）の３つの投与量（０．２５、１．０および１０ｍｇ／ｍＬ）の影響を示す図である。
【図８Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの種々の調製物の影響を示す図である。
【図８Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの種々の調製物の影響を示す図である。
【図９Ａ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３の産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの植物体の種々の部位の調製物の影響を示す図である。
【図９Ｂ】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＦＮγの産生の相対度に対する、Ａ．アルグタの植物体の種々の部位の調製物の影響を示す図である。
【図１０Ａ】ヒトの臨床試験の１日目〜１４日目の間に生じた分布の推移を強調表示している図である。
【図１０Ｂ】ヒトの臨床試験の１日目〜１４日目の間に生じた分布の推移を強調表示している図である。
【図１０Ｃ】図１０Ａおよび１０Ｂにおける、採点の基準を示す図である。
【図１１】インビトロにおいて３日間にわたってばくろした後のＯＶＡ刺激マウスの膵細胞によるＩＬ−１３（図９Ａ）およびＩＦＮγ（図９Ｂ）の産生の相対度に対する、Ｃ−１８逆相媒体から得られた、濃縮された種々のクロマトグラフィー画分（区切りＦ１、Ｆ２、Ｆ３およびＦ６）の影響を示し図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳類における免疫応答を調節するために十分な量の、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物を哺乳類に投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水性の抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における免疫応答を制御する、方法。
【請求項２】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、低級アルキルアルコール、水およびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、工程（ｂ）が、当該逆相カラムから１つ以上の溶媒を用いて溶出させることを包含しており、当該溶媒が、水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択され、（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
哺乳類における免疫応答を調節するために十分な量の、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物を哺乳類に投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における免疫応答を制御する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項８に記載の方法。
【請求項８】
上記耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
上記耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
上記哺乳類は、Ｔｈ１応答の増強および／またはＴｈ２応答の抑制が望まれる状態を有しているか、または当該状態になる危険性がある、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
上記哺乳類は、アレルギー性疾患もしくは非アレルギー性の炎症性疾患にかかっているか、またはアレルギー性疾患もしくは非アレルギー性の炎症性疾患にかかる危険にさらされている、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
上記アレルギー性疾患がロイコトリエンによって制御される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
上記アレルギー性疾患が、アトピー性皮膚炎、喘息、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、および慢性の蕁麻疹からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
上記アレルギー性疾患がアトピー性皮膚炎である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
上記投与することが、担体、免疫賦活剤または賦形剤とともに上記耐寒性キウィフルーツ調製物を上記哺乳類に投与することを包含している、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
上記投与することが、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を錠剤、粉剤、発泡錠剤、発泡粉剤、カプセル剤、液体剤、懸濁剤、顆粒剤またはシロップ剤として、上記哺乳類に与えることを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
上記投与することが、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を１つ以上の健康食品に含めて、上記哺乳類に与えることを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
上記投与することが、局所用の組成物として上記耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
上記投与することが、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を飼料または飼料の成分に含めて上記哺乳類に与えることを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
ステロイド、抗ヒスタミン、抗体、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、ロイコトリエン修飾因子、サイトカインもしくはサイトカイン受容体アンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミル、カフェイン、テオフィリン、カルボベンゾキシ β−アラニルタウリン、およびＴ細胞機能の阻害剤からなる群から選択される付加的な成分を上記哺乳類に投与することをさらに包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、上記付加的な成分とともに同じ組成物として調合されている、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物は、上記付加的な成分とは別個の組成物として調合されるが、上記付加的な成分と同時に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物および上記付加的な成分の投与の期間に続いて、上記哺乳類が、上記付加的な成分をともなわずに上記耐寒性キウィフルーツ調製物の投与を受ける、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物の単独投与の前の、上記耐寒性キウィフルーツ調製物および上記付加的な成分の哺乳類に対する投与の期間が、１日間〜数年間である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物および上記付加的な成分の投与に続く、上記耐寒性キウィフルーツ調製物単独の哺乳類に対する投与の期間が、１日間〜数年間である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
炎症性の症状を軽減するために十分な量の耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程および；（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減する、方法。
【請求項２７】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、低級アルキルアルコール、水およびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される１つ以上の溶媒を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
炎症性の症状を軽減するために十分な量の耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いてカラムから溶出させる工程および；（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減する、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
炎症性の上記症状が、掻痒、発赤、滲出および外被形成、肥厚、脱毛症、ならびに皮膚の腫脹からなる群から選択される、請求項２６〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における免疫応答を調節するか、または哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減させる、組成物。
【請求項３７】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、水、低級アルキルアルコールおよびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される１つ以上の溶媒を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３９】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水性抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、請求項３６に記載の組成物。
【請求項４０】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
薬学的組成物、健康食品、食品成分、動物の飼料、および美容組成物からなる群から選択される、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４６】
耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマからなる群から選択される、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４７】
耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタである、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４８】
経口投与用として調合されている、請求項３６に記載の組成物。
【請求項４９】
局所投与用として調合されている、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５０】
請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物を含んでいる、動物の飼料製品。
【請求項５１】
ペットフード、家畜用飼料、ペットトリート、ペットチューおよび栄養補助食品からなる群から選択される、請求項３６〜４４に記載の動物の飼料製品。
【請求項５２】
ステロイド、抗ヒスタミン、抗体、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、ロイコトリエン修飾因子、サイトカインもしくはサイトカイン受容体アンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミル、カフェイン、テオフィリン、カルボベンゾキシ β−アラニルタウリン、およびＴ細胞機能の阻害剤からなる群から選択される付加的な成分をさらに含んでいる、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５３】
（ａ）耐寒性キウィフルーツ調製物の水抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、耐寒性キウィフルーツ調製物を製造する、方法。
【請求項５４】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、低級アルキルアルコール、水およびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
（ａ）耐寒性キウィフルーツ調製物の水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される１つ以上の溶媒を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
（ａ）耐寒性キウィフルーツ調製物の水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、請求項５３に記載の方法
【請求項５７】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマからなる群から選択される、請求項５３〜６１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１】
哺乳類における免疫応答を調節するために十分な量の、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物を哺乳類に投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水性の抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における免疫応答を制御する、方法。
【請求項２】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、低級アルキルアルコール、水およびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、工程（ｂ）が、当該逆相カラムから１つ以上の溶媒を用いて溶出させることを包含しており、当該溶媒が、水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択され、（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
哺乳類における免疫応答を調節するために十分な量の、少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物を哺乳類に投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における免疫応答を制御する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項８に記載の方法。
【請求項８】
上記耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
上記耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタである、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
上記哺乳類は、Ｔｈ１応答の増強および／またはＴｈ２応答の抑制が望まれる状態を有しているか、または当該状態になる危険性がある、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
上記哺乳類は、アレルギー性疾患もしくは非アレルギー性の炎症性疾患にかかっているか、またはアレルギー性疾患もしくは非アレルギー性の炎症性疾患にかかる危険にさらされている、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
上記アレルギー性疾患がロイコトリエンによって制御される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
上記アレルギー性疾患が、アトピー性皮膚炎、喘息、食物アレルギー、アレルギー性鼻炎、および慢性の蕁麻疹からなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
上記アレルギー性疾患がアトピー性皮膚炎である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
上記投与することが、担体、免疫賦活剤または賦形剤とともに上記耐寒性キウィフルーツ調製物を上記哺乳類に投与することを包含している、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
上記投与することが、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を錠剤、粉剤、発泡錠剤、発泡粉剤、カプセル剤、液体剤、懸濁剤、顆粒剤またはシロップ剤として、上記哺乳類に与えることを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
上記投与することが、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を１つ以上の健康食品に含めて、上記哺乳類に与えることを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
上記投与することが、局所用の組成物として上記耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
上記投与することが、上記耐寒性キウィフルーツ調製物を飼料または飼料の成分に含めて上記哺乳類に与えることを包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
ステロイド、抗ヒスタミン、抗体、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、ロイコトリエン修飾因子、サイトカインもしくはサイトカイン受容体アンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミル、カフェイン、テオフィリン、カルボベンゾキシ β−アラニルタウリン、およびＴ細胞機能の阻害剤からなる群から選択される付加的な成分を上記哺乳類に投与することをさらに包含している、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、上記付加的な成分とともに同じ組成物として調合されている、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物は、上記付加的な成分とは別個の組成物として調合されるが、上記付加的な成分と同時に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物および上記付加的な成分の投与の期間に続いて、上記哺乳類が、上記付加的な成分をともなわずに上記耐寒性キウィフルーツ調製物の投与を受ける、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物の単独投与の前の、上記耐寒性キウィフルーツ調製物および上記付加的な成分の哺乳類に対する投与の期間が、１日間〜数年間である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物および上記付加的な成分の投与に続く、上記耐寒性キウィフルーツ調製物単独の哺乳類に対する投与の期間が、１日間〜数年間である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
炎症性の症状を軽減するために十分な量の耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程および；（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減する、方法。
【請求項２７】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、低級アルキルアルコール、水およびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される１つ以上の溶媒を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
炎症性の症状を軽減するために十分な量の耐寒性キウィフルーツ調製物を投与することを包含しており、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いてカラムから溶出させる工程および；（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減する、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
炎症性の上記症状が、掻痒、発赤、滲出および外被形成、肥厚、脱毛症、ならびに皮膚の腫脹からなる群から選択される、請求項２６〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
少なくとも１つの耐寒性キウィフルーツ調製物を含んでおり、
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、哺乳類における免疫応答を調節するか、または哺乳類における炎症性の症状の少なくとも１つを軽減させる、組成物。
【請求項３７】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、水、低級アルキルアルコールおよびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される１つ以上の溶媒を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３９】
上記耐寒性キウィフルーツ調製物が、（ａ）耐寒性キウィフルーツの水性抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している製法によって製造されている、請求項３６に記載の組成物。
【請求項４０】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
薬学的組成物、健康食品、食品成分、動物の飼料、および美容組成物からなる群から選択される、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４６】
耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマからなる群から選択される、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４７】
耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタである、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４８】
経口投与用として調合されている、請求項３６に記載の組成物。
【請求項４９】
局所投与用として調合されている、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５０】
請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物を含んでいる、動物の飼料製品。
【請求項５１】
ペットフード、家畜用飼料、ペットトリート、ペットチューおよび栄養補助食品からなる群から選択される、請求項３６〜４４に記載の動物の飼料製品。
【請求項５２】
ステロイド、抗ヒスタミン、抗体、シクロスポリン、抗真菌剤、呼吸機能制御剤、鎮痛剤、ロイコトリエン修飾因子、サイトカインもしくはサイトカイン受容体アンタゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、クロモグリク酸ナトリウム、ネドクロミル、カフェイン、テオフィリン、カルボベンゾキシ β−アラニルタウリン、およびＴ細胞機能の阻害剤からなる群から選択される付加的な成分をさらに含んでいる、請求項３６〜４４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５３】
（ａ）耐寒性キウィフルーツ調製物の水抽出物をクロマトグラフィーカラムに入れる工程；（ｂ）１つ以上の溶媒を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、耐寒性キウィフルーツ調製物を製造する、方法。
【請求項５４】
上記クロマトグラフィーカラムが逆相カラムであり、上記溶媒が、低級アルキルアルコール、水およびジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
（ａ）耐寒性キウィフルーツ調製物の水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水、約１５％〜約３５％のメタノール、約４０％〜約６０％のメタノール、約６５％〜約８５％のメタノール、約９０％〜約１００％のメタノール、および約９０％〜約１００％のジクロロメタン（ＤＣＭ）からなる群から選択される１つ以上の溶媒を用いて、上記逆相カラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
（ａ）耐寒性キウィフルーツ調製物の水抽出物を逆相カラムに入れる工程；（ｂ）水を用いてカラムから溶出させる工程；および（ｃ）溶出物を回収する工程を包含している、請求項５３に記載の方法
【請求項５７】
約１５％〜約３５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
約４０％〜約６０％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
約６５％〜約８５％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
約９０％〜約１００％のメタノールの水溶液を用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
約９０％〜約１００％のＤＣＭを用いて溶出する工程、および溶出物を回収する工程をさらに包含している、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
耐寒性キウィフルーツが、アクチニディア アルグタ、アクチニディア コロミクタ、およびアクチニディア ポリガマからなる群から選択される、請求項５３〜６１のいずれか１項に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図６Ａ】
【図６Ｂ】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０Ａ】
【図１０Ｂ】
【図１０Ｃ】
【図１１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図６Ａ】
【図６Ｂ】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０Ａ】
【図１０Ｂ】
【図１０Ｃ】
【図１１】
【公表番号】特表２０１１−５１００１６（Ｐ２０１１−５１００１６Ａ）
【公表日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５４３２５２（Ｐ２０１０−５４３２５２）
【出願日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３１１４１
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０９１９１５
【国際公開日】平成２１年７月２３日（２００９．７．２３）
【出願人】（５０７０１７１６３）エフィカス メディカル フーズ アンド ニュートリション エルエルシー (2)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３１１４１
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０９１９１５
【国際公開日】平成２１年７月２３日（２００９．７．２３）
【出願人】（５０７０１７１６３）エフィカス メディカル フーズ アンド ニュートリション エルエルシー (2)
【Ｆターム（参考）】
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