血管内皮増殖因子阻害剤

【課題】新規血管内皮増殖因子阻害剤の提供。
【解決手段】本発明はヨクイニンエキス(Coix extract)、クロレラエキス(Chlorella Extract)及びトルメンチラエキス(Tormentilla Extract)から成る群から選ばれる１又は複数種の生薬エキスを活性成分として含有することを特徴とする血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）発現阻害剤を提供する。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は生薬ヨクイニンエキス(Coix extract)、クロレラエキス(Chlorella Extract)及びトルメンチラエキス(Tormentilla Extract)から成る群から選ばれる１又は複数種の生薬エキスを活性成分として含有することを特徴とする血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）発現阻害剤を提供する。
【背景技術】
【０００２】
血管新生とは、血管が新たに形成される現象をいう。血管は、組織又は器官においてタンパク質分解酵素の働きにより血管の基底膜が分解されることで血管内皮細胞が遊走し、増殖して細胞外マトリックスに接着し、その血管内皮細胞が分化して血管腔を形成することにより新たに形成される。血管新生は、創傷治癒過程のような正常反応の他に、癌の増殖や転移、糖尿病性網膜症、血管新生緑内障、炎症性皮膚疾患、乾癬、リウマチ様関節炎、変形性関節炎、加齢性黄斑変性症、慢性気管支炎、粥状動脈硬化症、心筋梗塞等の様々な疾患の病因、又は病態の悪化に関与していることでも知られる。また、最近になって皮膚の血管系における内皮細胞も皮膚の老化に関与していることが報告されている（国際公開公報ＷＯ２００３／０８４３０２）。
【０００３】
血管新生因子のうち、血管内皮増殖因子「ＶＥＧＦ」は、血管内皮細胞の増殖誘導と生存維持、血管透過性の亢進、血圧の調節、血小板による遊走、マクロファージに対する走化性などをはじめとして、血管新生のみならず、血管・血液・凝固系など多彩に機能している。血管内皮細胞のＶＥＧＦの発現又は活性を阻害する化合物は血管新生阻害剤として、上記癌、糖尿病性網膜症、各種関節炎をはじめとする様々疾患の治癒や予防、あるいは皮膚老化の予防、改善のための薬剤として期待される。
【０００４】
【特許文献１】国際公開公報ＷＯ２００３／０８４３０２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の課題は、新規血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）阻害剤の提供にある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は鋭意検討の結果、生薬ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキスから成る群から選ばれる１又は複数種の生薬エキスがＶＥＧＦの発現を阻害することを見出した。
【０００７】
従って、本発明は生薬ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキスから成る群から選ばれる１又は複数種の生薬エキス（Linden Extract)を活性成分として含有することを特徴とする、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）発現阻害剤を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
ＶＥＧＦの発現を阻害する生薬のスクリーニングは、下記の実施例、実験１において詳細に記載の通り、ＶＥＧＦプロモーターの下流にルシフェラーゼをレポーター遺伝子として結合させたＤＮＡ構築体を導入したＨａＣａｔ細胞株に各種候補薬剤を作用させ、ルシフェラーゼ活性の測定を行い、そのルシフェラーゼ活性の抑制をもってＶＥＧＦ発現阻害とし、ＶＥＧＦ発現阻害活性を有する薬剤を有効薬剤として選定することで行なった。また、このようにして選定された薬剤について、正常細胞における実際のＶＥＧＦ発現阻害効果の有無の確認も行った。
【０００９】
その結果、ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキスがＶＥＧＦ発現を有意に阻害することが見出され、有効なＶＥＧＦ阻害剤であると結論づけられた。
【００１０】
ヨクイニンエキス(Coix Extract)：ハトムギ(Coix lacryma-jobi Linne var. ma-yuen Stapt (Gramineae)）の種皮を除いた種子の抽出エキス。主成分として、グルタミン酸、ロイシン、チロシンなどのアミノ酸の他、コイキセノライドを含む。天然ミネラルを多く含み、肌の保湿効果に優れることで知られる。
クロレラエキス（Chlorella Extract)：淡水中に生息する単細胞植物クロレラ（Chlorella vulgaris Chick (Chlorellaceae)）より得られる抽出エキス。主成分として、アミノ酸、ビタミンを多く含む。細胞分裂作用、抗腫瘍作用などをもつことで知られる。
トルメンチラエキス（Tormentilla Extract)：バラ科の植物トルメンチラ（Potentilla tormentilla Schrk (Rosaceae))の根から得られる抽出エキス。過剰な酸化を抑制する、活性酸素消去作用をもつことで知られる。
【００１１】
上記エキスは常法により得ることができ、例えば各エキスの起源となる植物を抽出溶媒とともに浸漬または加熱還流した後、濾過し、濃縮して得ることができる。抽出溶媒としては、通常抽出に用いられる溶媒であれば任意に用いることができ、例えば、水、メタノール、エタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン等のアルコール類、含水アルコール類、クロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン等の有機溶媒等を、それぞれ単独あるいは組み合わせて用いることができる。上記溶媒で抽出して得られたエキスをそのまま、あるいは濃縮したエキスを吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ポーラスポリマー（例えばアンバーライトＸＡＤ−２）のカラムにて吸着させた後、メタノールまたはエタノールで溶出し、濃縮したものも使用することができる。また分配法、例えば水／酢酸エチルで抽出したエキス等も用いられる。
【００１２】
本発明のＶＥＧＦ発現阻害剤は、創傷治癒の促進、血管内皮細胞の新生、成長、増殖が関与する癌の増殖や転移、糖尿病性網膜症、血管新生緑内障、炎症性皮膚疾患、乾癬、リウマチ様関節炎、変形性関節炎、加齢性黄斑変性症、慢性気管支炎、粥状動脈硬化症、心筋梗塞等の疾患の治療及び予防、血管内皮細胞の新生、成長、増殖を原因とする老化の予防、改善等に有効な医薬品又は化粧品として利用できる。尚、血管内皮細胞の新生、成長、増殖を原因とする老化とは、皮膚傷害や紫外線に対する暴露による光老化等を意味する。
【００１３】
光老化とは、一般に日光に対する被曝が繰り返された結果として認められる皮膚の外見及び機能の変化を意味する。日光の構成要素である紫外線（ＵＶ）、特に中間ＵＶ（ＵＶＢと呼ばれる、波長２９０−３２０nm）が主として光老化を引き起こす。光老化を引き起こすのに必要なＵＶＢの被曝量は現在のところ知られていない。しかしながら、紅斑や日焼けを引き起こすレベルでのＵＶＢに対する繰り返しの被曝が、通常光老化に結びつく。臨床的には、光老化は肌荒れ、しわの形成、斑の着色、土色化、たるみの形成、毛細管拡張症の発症、ほくろの発生、紫斑病の発症、傷つき易くなる、萎縮、繊維症的色素除去領域の発生、前悪性腫瘍及び悪性腫瘍の発症等として特定され得る。光老化は普通、顔、耳、頭、首、と手のような、日光に習慣的に曝される皮膚に起こる。
【００１４】
本発明のＶＥＧＦ発現阻害剤は、その使用目的に合わせて用量、用法、剤型を適宜決定することが可能である。例えば、本発明のＶＥＧＦ発現阻害剤の投与形態は、経口、非経口、外用等であってよい。剤型としては、例えば錠剤、粉剤、カプセル剤、顆粒剤、エキス剤、シロップ剤等の経口投与剤、又は注射剤、点滴剤、若しくは坐剤等の非経口投与剤軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等の外用剤を挙げることができる。
【００１５】
本発明のＶＥＧＦ発現阻害剤中のシナノキエキスの配合量は、用途に応じて適宜決定できるが、一般には阻害剤全量中、乾燥物として0.0001〜20.0質量％、好ましくは0.0001〜10.0質量％である。
【００１６】
また、本発明のＶＥＧＦ発現阻害剤中には、上記生薬シナノキエキス以外に、例えば、通常の食品や医薬品に使用される賦形剤、防湿剤、防腐剤、強化剤、増粘剤、乳化剤、酸化防止剤、甘味料、酸味料、調味料、着色料、香料等、化粧品等に通常用いられる美白剤、保湿剤、油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色剤、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００１７】
その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、カリンの果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸等の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類、レチノイン酸、レチノール、酢酸レチノール、パルミチン酸レチノール等のビタミンA類なども適宜配合することができる。
【実施例】
【００１８】
次に実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。なお、本発明はこれにより限定されるものではない。配合量は質量％である。
【００１９】
実験１．
ＶＥＧＦ発現阻害剤活性を有する生薬のスクリーニング
ＶＥＧＦプロモーターの下流にルシフェラーゼコード遺伝子をレポーター遺伝子として結合させたＤＮＡ構築体をＨａＣａＴ細胞に安定的に導入した細胞株を用いた。上記細胞株をＤＭＥＭ（Invitrogen社）（１０％のＦＢＳ（ＩＣＮ社）及び400μg/mlのＧ418（Promega社）含有）培地に懸濁し、２４穴プレートに１穴あたり４×１０⁴細胞となるように播種し、５％ＣＯ₂、３７℃培養した。約２４時間後、候補薬剤としての各種植物抽出物乾燥物をＤＭＳＯ（和光純薬工業）中に溶解させたものを、培養液に対する終濃度として１０^-4、１０^-3、１０^-2％を加えて２４時間培養した。培養上清液を除去後、細胞をＰＢＳで洗浄し、Luciferase Assay System（Promega社)を用いてルシフェラーゼ活性測定を行なった。
尚、細胞のルシフェラーゼ活性を測定するために終濃度10μg/mlのHoechst 33342（(Sigma社）を用いてウェル当たりのＤＮＡ量を測定した。これをウェル当たりの細胞数の指標とし、細胞当たりのルシフェラーゼ活性を求めた。
その結果、実験した各種植物抽出物のうち、ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキス（丸善製薬由来）がＶＥＧＦの発現を濃度依存式に阻害することが示された。その結果を図１に示す。コントロールは、候補薬剤の代わりにＤＭＳＯのみを作用させたものである。
【００２０】
実験２．
正常細胞におけるＶＥＧＦタンパク質定量
実験１のルシフェラーゼアッセイによりプロモーター活性の抑制効果の認められた生薬シナノキエキスについて、正常細胞における実際のＶＥＧＦタンパク質発現阻害効果の有無を確認した。
正常ヒトケラチノサイト（クラボウ）をＫＧＭ培地（クラボウ）に懸濁し、２４穴プレートに１穴あたり４×１０⁴細胞となるように播種し、５％ＣＯ₂、３７℃培養した。約２４時間後、シナノキエキス乾燥物をＤＭＳＯ（和光純薬工業）中に溶解させたものを、培養液に対する終濃度として１０^-3、３．３×１０^-3、１０^-2％を加えて２４時間培養した。培養上清液中のＶＥＧＦタンパク質をＥＬＩＳＡ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ社）を用いて測定した。
その結果、ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキスがＶＥＧＦの発現を濃度依存式に阻害することが確認された。その結果を図２に示す。コントロールは、候補薬剤の代わりにＤＭＳＯのみを作用させたものである。
【００２１】
（実施例１）クリーム
（配合成分）（質量％）
（１）ステアリン酸５．０
（２）ステアリルアルコール４．０
（３）イソプロピルミリステート１８．０
（４）グリセリンモノステアリン酸エステル３．０
（５）プロピレングリコール１０．０
（６）ヨクイニンエキス０．０１
（７）苛性カリ０．２
（８）亜硫酸水素ナトリウム０．０１
（９）防腐剤適量
（１０）香料適量
（１１）イオン交換水残余
（製法）（１１）に（５）〜（７）を加え溶解し、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（４）、（８）〜（１０）を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を徐々に加え、全部加え終わってからしばらくその温度に保ち、反応を起こさせる。その後、ホモミキサーで均一に乳化し、よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００２２】
（実施例２）クリーム
（配合成分）（質量％）
（１）ステアリン酸２．０
（２）ステアリルアルコール７．０
（３）水添ラノリン２．０
（４）スクワラン５．０
（５）２−オクチルドデシルアルコール６．０
（６）ポリオキシエチレン（２５モル）セチルアルコールエーテル３．０
（７）グリセリンモノステアリン酸エステル２．０
（８）プロピレングリコール５．０
（９）クロレラエキス０．０５
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０３
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）（１３）に（８）を加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（７）、（９）〜（１２）を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００２３】
（実施例３）クリーム
（配合成分）（質量％）
（１）固形パラフィン５．０
（２）ミツロウ１０．０
（３）ワセリン１５．０
（４）流動パラフィン４１．０
（５）グリセリンモノステアリン酸エステル２．０
（６）ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノラウリル酸エステル２．０
（７）石鹸粉末０．１
（８）硼砂０．２
（９）トルメンチラエキス０．０５
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０３
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）（１３）に（７）、（８）を加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（６）、（９）〜（１３）を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相をかき混ぜながら徐々に加え反応を行う。反応終了後、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００２４】
（実施例４）乳液
（配合成分）（質量％）
（１）ステアリン酸２．５
（２）セチルアルコール１．５
（３）ワセリン５．０
（４）流動パラフィン１０．０
（５）ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル２．０
（６）ポリエチレングリコール１５００３．０
（７）トリエタノールアミン１．０
（８）カルボキシビニルポリマー０．０５
（「カーボポール941」、B.F.Goodrich社）
（９）ヨクイニンエキス０．０１
（１０）クロレラエキス０．０１
（１１）亜硫酸水素ナトリウム０．０１
（１２）エチルパラベン０．３
（１３）香料適量
（１４）イオン交換水残余
（製法）少量の（１４）に（８）を溶解する（Ａ相）。一方、残りの（１４）に（６）、（７）を加え、加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。（１）〜（５）、（９）〜（１４）を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え、予備乳化を行い、Ａ相を加えホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００２５】
（実施例５）乳液
（配合成分）（質量％）
（１）マイクロクリスタリンワックス１．０
（２）ミツロウ２．０
（３）ラノリン２０．０
（４）流動パラフィン１０．０
（５）スクワラン５．０
（６）ソルビタンセスキオレイン酸エステル４．０
（７）ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノオレイン酸エステル１．０
（８）プロピレングリコール７．０
（９）トルメンチラエキス１．０
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０１
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）（１３）に（８）を加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（７）、（９）〜（１２）を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。油相をかき混ぜながらこれに水相を徐々に加え、ホモミキサーで均一に乳化する。乳化後、よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００２６】
（実施例６）ゼリー
（配合成分）（質量％）
（１）９５％エチルアルコール１０．０
（２）ジプロピレングリコール１５．０
（３）ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテル２．０
（４）カルボキシビニルポリマー１．０
（「カーボポール940」、B.F.Goodrich社）
（５）苛性ソーダ０．１５
（６）Ｌ−アルギニン０．１
（７）ヨクイニンエキス７．０
（８）２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム０．０５
（９）エチレンジアミンテトラアセテート・3Na・2水０．０５
（１０）メチルパラベン０．２
（１１）香料適量
（１２）イオン交換水残余
（製法）（１２）に（４）を均一に溶解する（水相）。一方、（１）に（７）、（３）を溶解し、これを水相に添加する。次いでここに（２）、（８）〜（１１）を加えた後、（５）、（６）で中和させ増粘する。
【００２７】
（実施例７）美容液
（配合成分）（質量％）
（Ａ相）
エチルアルコール（９５％）１０．０
ポリオキシエチレン（２０モル）オクチルドデカノール１．０
パントテニールエチルエーテル０．１
クロレラエキス１．５
メチルパラベン０．１５
（Ｂ相）
水酸化カリウム０．１
（Ｃ相）
グリセリン５．０
ジプロピレングリコール１０．０
亜硫酸水素ナトリウム０．０３
カルボキシビニルポリマー０．２
（「カーボポール940」、B.F.Goodrich社）
精製水残余
（製法）Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加えた後、容器に充填する。
【００２８】
（実施例８）パック
（配合成分）（質量％）
（Ａ相）
ジプロピレングリコール５．０
ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油５．０
（Ｂ相）
トルメンチラエキス０．０１
オリーブ油５．０
酢酸トコフェロール０．２
エチルパラベン０．２
香料０．２
（Ｃ相）
亜硫酸水素ナトリウム０．０３
ポリビニルアルコール（ケン化度90、重合度2,000）１３．０
エタノール７．０
精製水残余
（製法）Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加えた後、容器に充填する。
【００２９】
（実施例９）固形ファンデーション
（配合成分）（質量％）
（１）タルク４３．１
（２）カオリン１５．０
（３）セリサイト１０．０
（４）亜鉛華７．０
（５）二酸化チタン３．８
（６）黄色酸化鉄２．９
（７）黒色酸化鉄０．２
（８）スクワラン８．０
（９）イソステアリン酸４．０
（１０）モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン３．０
（１１）オクタン酸イソセチル２．０
（１２）ヨクイニンエキス１．０
（１３）防腐剤適量
（１４）香料適量
（製法）（１）〜（７）の粉末成分をブレンダーで十分混合し、これに（８）〜（１１）の油性成分、（１２）、（１３）、（１４）を加えよく混練した後、容器に充填、成型する。
【００３０】
（実施例１０）乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（配合成分）（質量％）
（粉体部）
二酸化チタン１０．３
セリサイト５．４
カオリン３．０
黄色酸化鉄０．８
ベンガラ０．３
黒色酸化鉄０．２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン１１．５
流動パラフィン４．５
ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン４．０
（水相）
精製水５１．０
１，３−ブチレングリコール４．５
クロレラエキス１．５
ソルビタンセスキオレイン酸エステル３．０
防腐剤適量
香料適量
（製法）水相を加熱攪拌後、十分に混合粉砕した粉体部を添加してホモミキサー処理する。さらに加熱混合した油相を加えてホモミキサー処理した後、攪拌しながら香料を添加し、室温まで冷却する。
【００３１】
（実施例１１）クリーム
（配合成分）（質量％）
（１）ステアリン酸５．０
（２）ステアリルアルコール４．０
（３）イソプロピルミリステート１８．０
（４）グリセリンモノステアリン酸エステル３．０
（５）プロピレングリコール１０．０
（６）トルメンチラエキス０．０１
（７）苛性カリ０．２
（８）亜硫酸水素ナトリウム０．０１
（９）防腐剤適量
（１０）香料適量
（１１）イオン交換水残余
（製法）（１１）に（５）〜（７）を加え溶解し、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（４）、（８）〜（１０）を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を徐々に加え、全部加え終わってからしばらくその温度に保ち、反応を起こさせる。その後、ホモミキサーで均一に乳化し、よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００３２】
（実施例１２）クリーム
（配合成分）（質量％）
（１）ステアリン酸２．０
（２）ステアリルアルコール７．０
（３）水添ラノリン２．０
（４）スクワラン５．０
（５）２−オクチルドデシルアルコール６．０
（６）ポリオキシエチレン（２５モル）セチルアルコールエーテル３．０
（７）グリセリンモノステアリン酸エステル２．０
（８）プロピレングリコール５．０
（９）ヨクイニンエキス０．０５
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０３
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）（１３）に（８）を加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（７）、（９）〜（１２）を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００３３】
（実施例1３）クリーム
（配合成分）（質量％）
（１）固形パラフィン５．０
（２）ミツロウ１０．０
（３）ワセリン１５．０
（４）流動パラフィン４１．０
（５）グリセリンモノステアリン酸エステル２．０
（６）ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノラウリル酸エステル２．０
（７）石鹸粉末０．１
（８）硼砂０．２
（９）クロレラエキス０．０５
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０３
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）（１３）に（７）、（８）を加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（６）、（９）〜（１３）を混合し加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相をかき混ぜながら徐々に加え反応を行う。反応終了後、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００３４】
（実施例１４）乳液
（配合成分）（質量％）
（１）ステアリン酸２．５
（２）セチルアルコール１．５
（３）ワセリン５．０
（４）流動パラフィン１０．０
（５）ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル２．０
（６）ポリエチレングリコール１５００３．０
（７）トリエタノールアミン１．０
（８）カルボキシビニルポリマー０．０５
（「カーボポール941」、B.F.Goodrich社）
（９）トルメンチラエキス０．０１
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０１
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）少量の（１３）に（８）を溶解する（Ａ相）。一方、残りの（１３）に（６）、（７）を加え、加熱溶解して７０℃に保つ（水相）。（１）〜（５）、（９）〜（１２）を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。水相に油相を加え、予備乳化を行い、Ａ相を加えホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００３５】
（実施例１５）乳液
（配合成分）（質量％）
（１）マイクロクリスタリンワックス１．０
（２）ミツロウ２．０
（３）ラノリン２０．０
（４）流動パラフィン１０．０
（５）スクワラン５．０
（６）ソルビタンセスキオレイン酸エステル４．０
（７）ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノオレイン酸エステル１．０
（８）プロピレングリコール７．０
（９）ヨクイニンエキス１．０
（１０）亜硫酸水素ナトリウム０．０１
（１１）エチルパラベン０．３
（１２）香料適量
（１３）イオン交換水残余
（製法）（１３）に（８）を加え、加熱して７０℃に保つ（水相）。一方、（１）〜（７）、（９）〜（１２）を混合し、加熱融解して７０℃に保つ（油相）。油相をかき混ぜながらこれに水相を徐々に加え、ホモミキサーで均一に乳化する。乳化後、よくかき混ぜながら３０℃まで冷却する。
【００３６】
（実施例１６）ゼリー
（配合成分）（質量％）
（１）９５％エチルアルコール１０．０
（２）ジプロピレングリコール１５．０
（３）ポリオキシエチレン（５０モル）オレイルアルコールエーテル２．０
（４）カルボキシビニルポリマー１．０
（「カーボポール940」、B.F.Goodrich社）
（５）苛性ソーダ０．１５
（６）Ｌ−アルギニン０．１
（７）クロレラエキス７．０
（８）２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノンスルホン酸ナトリウム０．０５
（９）エチレンジアミンテトラアセテート・3Na・2水０．０５
（１０）メチルパラベン０．２
（１１）香料適量
（１２）イオン交換水残余
（製法）（１２）に（４）を均一に溶解する（水相）。一方、（１）に（７）、（３）を溶解し、これを水相に添加する。次いでここに（２）、（８）〜（１１）を加えた後、（５）、（６）で中和させ増粘する。
【００３７】
（実施例１７）美容液
（配合成分）（質量％）
（Ａ相）
エチルアルコール（９５％）１０．０
ポリオキシエチレン（２０モル）オクチルドデカノール１．０
パントテニールエチルエーテル０．１
トルメンチラエキス１．５
メチルパラベン０．１５
（Ｂ相）
水酸化カリウム０．１
（Ｃ相）
グリセリン５．０
ジプロピレングリコール１０．０
亜硫酸水素ナトリウム０．０３
カルボキシビニルポリマー０．２
（「カーボポール940」、B.F.Goodrich社）
精製水残余
（製法）Ａ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ｃ相にＡ相を加えて可溶化する。次いでＢ相を加えた後、容器に充填する。
【００３８】
（実施例１８）パック
（配合成分）（質量％）
（Ａ相）
ジプロピレングリコール５．０
ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油５．０
（Ｂ相）
ヨクイニンエキス０．０１
オリーブ油５．０
酢酸トコフェロール０．２
エチルパラベン０．２
香料０．２
（Ｃ相）
亜硫酸水素ナトリウム０．０３
ポリビニルアルコール（ケン化度90、重合度2,000）１３．０
エタノール７．０
精製水残余
（製法）Ａ相、Ｂ相、Ｃ相をそれぞれ均一に溶解し、Ａ相にＢ相を加えて可溶化する。次いでこれをＣ相に加えた後、容器に充填する。
【００３９】
（実施例１９）固形ファンデーション
（配合成分）（質量％）
（１）タルク４３．１
（２）カオリン１５．０
（３）セリサイト１０．０
（４）亜鉛華７．０
（５）二酸化チタン３．８
（６）黄色酸化鉄２．９
（７）黒色酸化鉄０．２
（８）スクワラン８．０
（９）イソステアリン酸４．０
（１０）モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン３．０
（１１）オクタン酸イソセチル２．０
（１２）クロレラエキス１．０
（１３）防腐剤適量
（１４）香料適量
（製法）（１）〜（７）の粉末成分をブレンダーで十分混合し、これに（８）〜（１１）の油性成分、（１２）、（１３）、（１４）を加えよく混練した後、容器に充填、成型する。
【００４０】
（実施例２０）乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（配合成分）（質量％）
（粉体部）
二酸化チタン１０．３
セリサイト５．４
カオリン３．０
黄色酸化鉄０．８
ベンガラ０．３
黒色酸化鉄０．２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン１１．５
流動パラフィン４．５
ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン４．０
（水相）
精製水５１．０
１，３−ブチレングリコール４．５
トルメンチラエキス１．５
ソルビタンセスキオレイン酸エステル３．０
防腐剤適量
香料適量
（製法）水相を加熱攪拌後、十分に混合粉砕した粉体部を添加してホモミキサー処理する。さらに加熱混合した油相を加えてホモミキサー処理した後、攪拌しながら香料を添加し、室温まで冷却する。
【００４１】
（実施例２１）注射剤
ヨクイニンエキス１００mg
マルトシル−β−シクロデキストリン７２６mg
水酸化ナトリウム３３．３μg
注射用蒸留水全量５．０ml
（製法）マルトシル−β−シクロデキストリン７２６mgを溶解させた注射用蒸留水にヨクイニンエキス１００mgを加えた。そこに水酸化ナトリウム（３３．３μg）の水溶液を加えて全量を５mlになるように調製した後、濾過した。これをバイアルに充填した後、凍結乾燥して注射剤を得た。
【００４２】
（実施例２２）錠剤
クロレラエキス 1ｇ
ポリエチレングリコール6000 10ｇ
ラウリル硫酸ナトリウム 1.5ｇ
トウモロコシデンプン 3ｇ
乳糖 25ｇ
ステアリン酸マグネシウム 0.5ｇ
（製法）上記成分を秤量する。ポリエチレングリコール6000を70〜80℃に加熱し、そこにクロレラエキス、ラウリル硫酸ナトリウム、トウモロコシデンプンおよび乳糖を混合した後、冷却する。固化した混合物を粉砕器にかけ造粒し、顆粒を得る。顆粒をステアリン酸マグネシウムと混合後、圧縮打錠して重量250mgの錠剤とする。
【００４３】
（実施例２３）錠剤
トルメンチラエキス 3ｇ
乳糖 55ｇ
ジャガイモデンプン 12ｇ
ポリビニルアルコール 1.5ｇ
ステアリン酸マグネシウム 1.5ｇ
（製法）上記の成分を秤量する。トルメンチラエキス、乳糖、ジャガイモデンプンを均一に混合する。混合物にポリビニルアルコールの水溶液を加え、湿式顆粒造粒法により顆粒を調製する。顆粒を乾燥し、ステアリン酸マグネシウムを混合後、圧縮打錠して重量200mgの錠剤とする。
【００４４】
（実施例２４）カプセル剤
ヨクイニンエキス 1ｇ
乳糖 25ｇ
トウモロコシデンプン 5ｇ
微結晶セルロース 9.5ｇ
ステアリン酸マグネシウム 0.5ｇ
（製法）上記の成分を秤量する。ステアリン酸マグネシウム以外の４成分を均一に混合する。ステアリン酸マグネシウムを加えた後、さらに数分間混合する。混合物をハードカプセルに200mgずつ充填し、カプセル剤とする。
【００４５】
（実施例２５）散剤
クロレラエキス２ｇ
乳糖 79ｇ
ステアリン酸マグネシウム 1ｇ
（製法）上記成分を秤量する。すべての成分を均一に混合して散剤とする。
【００４６】
（実施例２６）坐剤
トルメンチラエキス 1ｇ
ポリエチレングリコール1500 18ｇ
ポリエチレングリコール4000 72ｇ
（製法）熔融法によって１ｇの直腸坐剤とする。
【００４７】
（実施例２７）注射剤
トルメンチラエキス 0.1ｇ
塩化ナトリウム 0.9ｇ
水酸化ナトリウム適量
注射用水 100mL
（製法）上記成分を秤量する。３成分を注射用水に溶解、ろ過滅菌後、10mLアンプルに５mLずつ分注し、熔封して注射剤とする。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】ルシフェラーゼアッセイによるＶＥＧＦ発現阻害剤活性を有する生薬のスクリーニングの結果を示す。
【図２】ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキスの正常細胞に対するＶＥＧＦタンパク質発現の影響を示す。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヨクイニンエキス、クロレラエキス及びトルメンチラエキスから成る群から選ばれる１又は複数種の生薬エキスを活性成分として含有することを特徴とする、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）発現阻害剤。

【図１】