本開示は、免疫増強および／または免疫抑制のための組成物および方法に関する。ある実施形態において、本開示は、免疫増強に（例えば、ワクチンアジュバントとして）、敗血症の治療に、または免疫低下状態の対象の治療にＴＡＭ受容体阻害剤を使用する方法に関する。免疫増強剤をスクリーニングする方法も開示される。他の実施形態において、本開示は、免疫抑制に（例えば、自己免疫障害の治療として）、アレルギーの治療に、または対象の移植片対宿主病の治療に、ＴＡＭ受容体作動薬を使用する方法に関する。免疫抑制剤をスクリーニングする方法も開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の免疫応答を増強する方法であって、
免疫増強を必要とする対象に治療的有効量のＴＡＭ受容体阻害剤を投与し、それによって前記対象の前記免疫応答を増強する工程
を含む方法。
【請求項２】
対象の免疫応答を抑制する方法であって、
免疫抑制を必要とする対象に治療的有効量のＴＡＭ受容体作動薬を投与し、それによって前記対象の前記免疫応答を抑制する工程
を含む方法。
【請求項３】
前記ＴＡＭ受容体が、Ｔｙｒｏ３、Ａｘｌ、またはＭｅｒである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が約５０μＭ未満のＩＣ５０を有するか、または前記ＴＡＭ作動薬が約５０μＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が約1ｐＭ〜約５μＭのＩＣ５０を有するか、または前記ＴＡＭ作動薬が約1ｐＭ〜約５μＭのＥＣ５０を有する、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が、Ｔｙｒｏ３、Ａｘｌ、またはＭｅｒの細胞内ＡＴＰ結合部位に結合する、請求項１または３〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が、ＭＰ４７０、ＳＧＩ-ＡＸＬ-２７７、ＡＸＬ-１、ＡＸＬ-２、ＡＸＬ-３、ＡＸＬ-４、ＡＸＬ-５、ＡＸＬ-６、ＡＸＬ-７、ＡＸＬ-８、ＡＸＬ-９、またはこれらの誘導体である、請求項１または３〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が、以下の化学構造を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法：
【化１】

（ここで、Ｒは水素またはメチル基である。）
【請求項９】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が、前記ＴＡＭ受容体の細胞外ドメインまたはＴＡＭ受容体リガンドに結合する、請求項１または３〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が、小分子阻害剤、モノクローナル抗体、またはｓｉＲＮＡである、請求項１、３〜６、または８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤がＧａｓ６またはプロテインＳに結合し、Ｇａｓ６もしくはプロテインＳの前記ＴＡＭ受容体の前記細胞外ドメインへの結合および／または前記ＴＡＭ受容体の活性化を妨害する、請求項１、３〜５、または９〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記方法が、
対象に治療的有効量のワクチンを投与し、それによって前記ワクチンに対する免疫応答を増強する工程をさらに含む
請求項１または３〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＴＡＭ受容体阻害剤が、前記ワクチンと実質的に同時に前記対象に投与される、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記ワクチンが、前記対象の腫瘍に対して活性化された樹状細胞（ＤＣ）を含む、請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
前記方法が、前記対象の腫瘍を治療する方法、免疫抑制の疾患を治療する方法、または敗血症を治療する方法である、請求項１または３〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象が、重症敗血症、敗血症性ショック、ＳＩＲＳ、または重症ＳＩＲＳを有する、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記方法が、感染症の治療を必要とする対象の感染症を治療する方法である、請求項１、３〜１３、または１５〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記対象が、免疫低下状態または免疫抑制状態である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＴＡＭ受容体作動薬が、ＧＡＳ６、プロテインＳ、アミノ末端切断型ＧＡＳ６、アミノ末端切断型プロテインＳ、前記ＴＡＭ受容体の細胞外ドメインに結合し、前記ＴＡＭ受容体を架橋し、ＴＡＭ受容体二量体となって前記ＴＡＭ受容体を活性化することができる抗体、または前記ＴＡＭ受容体の細胞外ドメインに結合し、前記ＴＡＭ受容体を活性化することができる小分子である、請求項２〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＴＡＭ受容体作動薬が、１つのＧｌａドメインまたはＥＧＦドメインも有さず、前記ＴＡＭ受容体を活性化することができるＧａｓ６タンパク質またはプロテインＳタンパク質である、請求項２〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記方法が、
前記対象に治療的有効量の免疫抑制剤を投与し、それによって前記対象の前記免疫応答を抑制する工程をさらに含む
請求項２〜５または１９〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＴＡＭ受容体作動薬が、前記免疫抑制剤と実質的に同時に前記対象に投与される、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記方法が、自己免疫疾患、アレルギー、移植片対宿主（ＧＶＨ）病、または移植片拒絶反応を治療または予防する方法である、請求項２〜５または１９〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記自己免疫疾患が、関節リウマチ、橋本甲状腺炎、悪性貧血、クローン病、潰瘍性大腸炎、乾癬、腎線維症、肺線維症、肝線維症、アジソン病、Ｉ型糖尿病、全身性エリテマトーデス、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、多発性硬化症、重症筋無力症、ライター症候群、またはグレーブス病である、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
免疫調整剤をスクリーニングする方法であって、
ＴＡＭ受容体を発現する細胞を試験薬剤と接触させる工程、および
（ａ）前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を変化させるかどうか、または
（ｂ）前記試験薬剤がリガンドのＴＡＭ受容体への結合を阻害するかどうか
を決定する工程であって、ＴＡＭ受容体活性を増大させるかまたはリガンドのＴＡＭ受容体への結合を増強する試験薬剤が免疫抑制剤として同定され、かつＴＡＭ受容体活性を阻害するかまたはリガンドのＴＡＭ受容体への結合を低下させるもしくは阻害する試験薬剤が免疫増強剤として同定される工程
を含む方法。
【請求項２６】
前記ＴＡＭ受容体が、Ｔｙｒｏ３、Ａｘｌ、またはＭｅｒである、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
さらなる解析のために免疫増強剤または免疫抑制剤であることが示される試験薬剤を選択する工程をさらに含む、請求項２５〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
細胞が実験用哺乳動物のものであり、前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程が前記試験薬剤を前記哺乳動物に投与する工程を含む、請求項２５〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記方法が、免疫増強剤をスクリーニングする方法であり、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を阻害するかどうかを決定する工程が
前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程、ならびに
前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程が
ｉ．対照と比較した場合にＴＡＭ自己リン酸化を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＡＭ自己リン酸化の低下は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を阻害することを示す）、
ｉｉ．対照と比較した場合にＴＬＲ誘導性のサイトカイン産生を変化させるかどうか（ここで対照と比較して、前記試験薬剤の存在下での前記ＴＬＲ誘導性のサイトカイン産生の増大は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を阻害することを示す）、
ｉｉｉ．対照と比較した場合にＴＬＲ誘導性のＭＡＰキナーゼ活性化刺激を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＬＲ誘導性のＭＡＰキナーゼ活性化刺激の増大は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を阻害することを示す）、および／または
ｉｖ．対照と比較した場合にＴＬＲ誘導性のＮＦκＢ活性化を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＬＲ誘導性のＮＦκＢ活性化の増大は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を阻害することを示す）
を決定する工程を含む
請求項２５〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記方法が、免疫抑制剤をスクリーニングする方法であり、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を増大させるかどうかを決定する工程が
前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程、ならびに
前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程が
ｉ．ＴＡＭ自己リン酸化の対照レベルと比較した場合にＴＡＭ自己リン酸化を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＡＭ自己リン酸化の増大は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を増大させることを示す）、
ｉｉ．対照と比較した場合にＴＬＲ誘導性のサイトカイン産生を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＬＲ誘導性のサイトカイン産生の減少は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を増大させることを示す）、
ｉｉｉ．対照と比較した場合にＴＬＲ誘導性のＭＡＰキナーゼ活性化刺激を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＬＲ誘導性のＭＡＰキナーゼ活性化刺激の減少は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を増大させることを示す）、および／または
ｉｖ．対照と比較した場合にＴＬＲ誘導性のＮＦκＢ活性化を変化させるかどうか（ここで前記対照と比較して、前記試験薬剤の存在下でのＴＬＲ誘導性のＮＦκＢ活性化の減少は、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を増大させることを示す）
を決定する工程を含む
請求項２５〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記対照が、前記試験薬剤と接触していない細胞について得られる値であるかまたは参照値である、請求項２９〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を変化させるかどうかを決定する工程が
（ａ）前記細胞を前記試験薬剤と接触させる前にＳＯＣＳ１発現とＳＯＣＳ３発現の対照レベルを測定する工程、
（ｂ）前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程、および
（ｃ）前記細胞を前記試験薬剤と接触させる工程が、ＳＯＣＳ１発現とＳＯＣＳ３発現の前記対照レベルと比較した場合にＳＯＣＳ１発現とＳＯＣＳ３発現を変化させるかどうかを決定する工程であって、前記対照レベルと比較して、前記試験薬剤の存在下でのＳＯＣＳ１発現とＳＯＣＳ３発現の低下が、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を阻害し、このような試験薬剤が免疫増強剤として同定されるということを示し、前記対照レベルと比較して、前記試験薬剤の存在下でのＳＯＣＳ１発現とＳＯＣＳ３発現の増大が、前記試験薬剤がＴＡＭ受容体活性を増大させ、このような試験薬剤が免疫抑制剤として同定されるということを示す工程を含む
請求項２５〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記方法が、免疫抑制剤をスクリーニングする方法であり、前記ＴＡＭ受容体を発現する細胞を前記試験薬剤と接触させる工程が、前記細胞をＴＡＭ受容体作動薬の存在下で前記試験薬剤と接触させる工程を含む、請求項２５〜２８、または３０〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＴＡＭ受容体作動薬が、Ｇａｓ６、アミノ末端切断型Ｇａｓ６、プロテインＳ、またはアミノ末端切断型プロテインＳである、請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
前記ＴＡＭ受容体作動薬が、前記ＴＡＭ受容体の前記細胞外ドメインに結合し、前記ＴＡＭ受容体を架橋し、ＴＡＭ受容体二量体となって前記ＴＡＭ受容体を活性化する抗体である、請求項３４記載の方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図１Ｈ】

【図１Ｉ】

【図１Ｊ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図２Ｄ】

【図２Ｅ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図４Ｄ】

【図４Ｅ】

【図４Ｆ】

【図４Ｇ】

【図４Ｈ】

【図４Ｉ】

【図４Ｊ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図５Ｃ】

【図５Ｄ】

【図５Ｅ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図８Ｃ】

【図８Ｄ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図９Ｃ】

【図９Ｄ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１０Ｄ】

【図１１】

【図１２】

【公表番号】特表２０１１−５１４８８１（Ｐ２０１１−５１４８８１Ａ）
【公表日】平成２３年５月１２日（２０１１．５．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３３３０５（Ｐ２０１０−５３３３０５）
【出願日】平成２０年１１月７日（２００８．１１．７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０８２９１１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／００８４１１
【国際公開日】平成２２年１月２１日（２０１０．１．２１）
【出願人】（５１０１２６５４２）ザ　ソルク　インスティテュート　フォー　バイオロジカル　スタディーズ (1)
【Ｆターム（参考）】