ＡＫＴ活性の阻害剤
新規な１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル化合物、かかる化合物のプロテインキナーゼＢ活性の阻害剤としての使用、および癌および関節炎の治療における使用が見出された。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規な１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル化合物、係る化合物のプロテインキナーゼＢ（以下、ＰＫＢ／Ａｋｔ、ＰＫＢまたはＡｋｔという）活性の阻害剤として、ならびに癌および関節炎の治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
本発明は、１以上のセリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢとしても知られる）の１以上のイソ型の活性の阻害剤である１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル含有化合物に関する。本発明は、また、かかる化合物を含む医薬組成物、および癌および関節炎の治療において本化合物を用いる方法に関する（Ｌｉｕら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３：３１７−２２（２００３））。
アポトーシス（プログラムされた細胞死）は、胚発生および変性ニューロン疾患、心血管疾患および癌などの種々の疾患の病因において重要な役割を果たす。近年の研究は、プログラムされた細胞死の調節または実行に関与する種々のプロ−および抗−アポトーシス遺伝子産物の同定に至った。抗−アポトーシス遺伝子、例えば、Ｂｃｌ２またはＢｃｌ−ｘＬの発現は、種々の刺激によって誘導されるアポトーシス細胞死を阻害する。一方、プロ−アポトーシス遺伝子、例えば、ＢａｘまたはＢａｄの発現は、プログラムされた細胞死をもたらす（Ａｄａｍｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１：１３２２−１３２６（１９９８））。プログラムされた細胞死の実行は、カスパーゼ−３、カスパーゼ−７、カスパーゼ−８およびカスパーゼ−９等を包含するカスパーゼ−１関連プロテイナーゼによって媒介される（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１：１３１２−１３１６（１９９８））。
【０００３】
ホスファチジルイノシトール３’−ＯＨキナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ／ＰＫＢ経路は、細胞生存／細胞死の調節に重要なようである（Ｋｕｌｉｋら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１７：１５９５−１６０６（１９９７）；Ｆｒａｎｋｅら、Ｃｅｌｌ，８８：４３５−４３７（１９９７）；Ｋａｕｆｆｍａｎｎ−Ｚｅｈら、Ｎａｔｕｒｅ ３８５：５４４−５４８（１９９７）Ｈｅｍｍｉｎｇｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５：６２８−６３０（１９９７）；Ｄｕｄｅｋら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５：６６１−６６５（１９９７））。血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）、神経生長因子（ＮＧＦ）およびインスリン様生長因子−１（ＩＧＦ−ｌ）などの生存因子は、ＰＩ３Ｋの活性を誘導することによる種々の条件下での細胞生存を促進する（Ｋｕｌｉｋら、１９９７，Ｈｅｍｍｉｎｇｓ １９９７）。活性化されたＰＩ３Ｋは、ホスファチジルイノシトール（３，４，５）−トリホスフェート（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３）の産生を誘導し、次いで、それは、プレクストリン相同（ＰＨ）−ドメインを含有するセリン／スレオニンキナーゼＡｋｔに結合し、その活性化を促進する（Ｆｒａｎｋｅら、Ｃｅｌｌ，８１：７２７−７３６（１９９５）；Ｈｅｍｍｉｎｇｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７７：５３４（１９９７）；Ｄｏｗｎｗａｒｄ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１０：２６２−２６７（１９９８），Ａｌｅｓｓｉら、ＥＭＢＯ Ｊ．１５：６５４１−６５５１（１９９６））。ＰＩ３Ｋの特異的阻害剤またはドミナント・ネガティブＡｋｔ／ＰＫＢ変異体は、これらの成長因子またはサイトカインの生存促進活性を破壊する。ＰＩ３Ｋの阻害剤（ＬＹ２９４００２またはウォートマニン（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ））は、上流のキナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの活性化を阻害した。さらに、構成的に活性なＰＩ３ＫまたはＡｋｔ／ＰＫＢ変異体の導入は、細胞が通常はアポトーシス細胞死を受ける条件下で細胞生存を促進する（Ｋｕｌｉｋら、１９９７，Ｄｕｄｅｋら、１９９７）。
【０００４】
ヒト腫瘍におけるＡｋｔレベルの分析は、Ａｋｔ２が有意数の卵巣癌（Ｊ．Ｑ．Ｃｈｅｕｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：９２６７−９２７１（１９９２））および膵臓癌（Ｊ．Ｑ．Ｃｈｅｕｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３：３６３６−３６４１（１９９６））において過剰発現することを示した。同様に、Ａｋｔ３は、乳癌および前立腺癌細胞系統において過剰発現することが見出された（Ｎａｋａｔａｎｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２１５２８−２１５３２（１９９９））。Ａｋｔ−２が卵巣癌腫の１２％で過剰発現すること、およびＡｋｔの増幅が未分化腫瘍の５０％において特に頻繁であることが明らかにされ、また、Ａｋｔが腫瘍攻撃に関連しうることが示唆された（Ｂｅｌｌａｃｏｓａら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６４，ｐｐ．２８０−２８５，１９９５）。Ａｋｔ１キナーゼ活性の増加は、乳癌、卵巣癌および前立腺癌において報告された（Ｓｕｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５９：４３１−７（２００１））。
【０００５】
腫瘍抑制因子ＰＴＥＮ（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３の３’ホスフェートを特異的に除去するタンパク質および脂質ホスファターゼ）は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路の負のレギュレーターである（Ｌｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：１９４３−１９４７（１９９７），Ｓｔａｍｂｏｌｉｃら、Ｃｅｌｌ ９５：２９−３９（１９９８），Ｓｕｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｉ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ． ９６：６１９９−６２０４（１９９９））。ＰＴＥＮの生殖細胞系統変異は、コーデン（Ｃｏｗｄｅｎ）病などのヒトの癌症候群の原因となる（Ｌｉａｗら、Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １６：６４−６７（１９９７））。ＰＴＥＮは、ヒトの腫瘍の大きな割合において欠失しており、機能的ＰＴＥＮを持たない腫瘍細胞系統は、高レベルの活性化Ａｋｔを示す（Ｌｉら、上掲、Ｇｕｌｄｂｅｒｇら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５７：３６６０−３６６３（１９９７）、Ｒｉｓｉｎｇｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５７：４７３６−４７３８（１９９７））。
【０００６】
これらの観察は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路が腫瘍形成における細胞生存またはアポトーシスの調節に重要な役割を果たすことを明らかにする。
セカンドメッセンジャーによって調節されるセリン／スレオニンプロテインキナーゼのＡｋｔ／ＰＫＢサブファミリーの３つのメンバーが同定され、各々、Ａｋｔ１／ＰＫＢα、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγと称された。該イソ型は、特に、触媒ドメインをコードしている領域において相同である。Ａｋｔ／ＰＫＢは、ＰＩ３Ｋシグナル伝達に対する応答において起こるリン酸化事象によって活性化される。ＰＩ３Ｋは、膜イノシトールリン脂質をリン酸化し、それにより、セカンドメッセンジャーホスファチジル−イノシトール３，４，５−トリホスフェートおよびホスファチジルイノシトール３，４−ビスホスフェートを生じ、それらは、Ａｋｔ／ＰＫＢのＰＨドメインに結合することが分かった。Ａｋｔ／ＰＫＢ活性化の現在のモデルは、３’−リン酸化ホスホイノシチドによって膜に対して該酵素が補充され、ここで、上流キナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位のリン酸化が起こることを提唱する（Ｂ．Ａ．Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：６２８−６３０（１９９７）；Ｂ．Ａ．Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：５３４（１９９７）；Ｊ．Ｄｏｗｎｗａｒｄ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７９：６７３−６７４（１９９８））。
【０００７】
Ａｋｔ１／ＰＫＢαのリン酸化は、２つの調節部位、触媒ドメイン活性化ループにおけるＴｈｒ３Ｏ８およびカルボキシ末端付近のＳｅｒ４７３において起こる（Ｄ．Ｒ．Ａｌｅｓｓｉら、ＥＭＢＯ Ｊ．１５：６５４１−６５５１（１９９６）およびＲ．Ｍｅｉｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：３０４９１−３０４９７（１９９７））。同等の調節リン酸化部位は、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγにおいて起こる。Ａｋｔ／ＰＫＢを活性化ループ部位でリン酸化する上流キナーゼがクローン化され、３’―ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ１（ＰＤＫ１）と命名された。ＰＤＫ１は、Ａｋｔ／ＰＫＢだけでなく、ｐ７０リボソームＳ６キナーゼ、ｐ９０ＲＳＫ、血清およびグルココルチコイド−調節性キナーゼ（ＳＧＫ）、およびプロテインキナーゼＣもリン酸化する。カルボキシ末端付近のＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位をリン酸化している上流キナーゼはまだ同定されていないが、近年の報告では、インテグリン−結合型キナーゼ（ＩＬＫ−１）、セリン／スレオニンプロテインキナーゼ、または自己リン酸化のための役割が示唆される。
【０００８】
Ａｋｔ活性化および活性の阻害は、ＰＩ３ＫをＬＹ２９４００２およびウォートマニン等の阻害剤で阻害することによって達成することができる。しかしながら、ＰＩ３Ｋ阻害は、３つのＡｋｔイソ酵素の全てだけでなく、ＰｄｔＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３に依存する他のＰＨドメイン含有シグナル伝達分子、例えば、チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーにも無差別に影響を及ぼす可能性がある。さらに、ＡｋｔがＰＩ３Ｋに無関係の成長シグナルによって活性化できることが開示された。
【０００９】
別法では、Ａｋｔ活性は、上流キナーゼＰＤＫ１の活性を遮断することによって阻害することができる。化合物ＵＣＮ−０１は、報告されたＰＤＫ１の阻害剤である（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３７５（２）：２５５（２００３））。また、ＰＤＫ１の阻害は、その活性がＰＤＫ１に依存する複数のプロテインキナーゼ、例えば、不定型ＰＫＣイソ形、ＳＧＫおよびＳ６キナーゼの阻害をもたらすであろう（Ｗｉｌｌｉａｍｓら、Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．１０：４３９−４４８（２０００））。
【００１０】
Ａｋｔの小型分子阻害剤は、腫瘍の治療、特に、活性化されたＡｋｔを伴う腫瘍（例えば、ＰＴＥＮ ｎｕｌｌ腫瘍およびｒａｓ変異を有する腫瘍）の治療において有用である。ＰＴＥＮは、Ａｋｔの重要な負のレギュレーターであり、その機能は、乳癌および前立腺癌腫、神経膠芽腫、ならびにＢａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群（Ｍａｅｈａｍａ，Ｔ．ら、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７０：２４７（２００１））、コーデン病（Ｐａｒｓｏｎｓ，Ｒ．；Ｓｉｍｐｓｏｎ，Ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ）、２２２（Ｔｕｍｏｒ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ Ｇｅｎｅｓ，Ｖｏｌｕｍｅ １）：１４７（２００３））およびＬｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病（Ｂａｃｋｍａｎ，Ｓ．ら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１２（５）：５１６（２００２））を包含するいくつかの癌症候群を包含する多くの癌において喪失している。Ａｋｔ３は、エストロゲン受容体欠失乳癌およびアンドロゲン独立性前立腺癌系統においてアップレギュレートされ、Ａｋｔ２は、膵臓および卵巣癌腫において過剰発現している。Ａｋｔ１は、胃癌において増幅し（Ｓｔａａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：５０３４−７（１９８７））、乳癌においてアップレギュレートされる（Ｓｔａｌら、Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５：Ｒ３７−Ｒ４４（２００３））。したがって、小型分子Ａｋｔ阻害剤は、これらの型の癌ならびに他の型の癌の治療に有用であることが予想される。Ａｋｔ阻害剤は、また、さらなる化学療法剤と組み合わせて有用である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、Ａｋｔ／ＰＫＢの阻害剤である新規な化合物を提供することである。
また、本発明の目的は、医薬担体および本発明の方法において有用な化合物を含む医薬組成物を提供することである。
また、本発明の目的は、かかるＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害剤を投与することを特徴とする癌の治療のための方法を提供することにある。
また、本発明の目的は、かかるＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害剤を投与することを特徴とする関節炎を治療するための方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の概要
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
（Ｉ）
［式中、
Ｒ４Ｒ５は、独立して、水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜６員環を形成し；
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３およびＲ３’は、各々、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または、
Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’のうち１つは、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチルまたはシクロペンチルを形成し、
但し、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’のうち少なくとも２つは、水素，水素であり；Ｒ４およびＲ５がそれらが結合している窒素と一緒になって５〜６員環を形成する場合、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’の３つ全ては、水素，水素である］
で示される新規化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグに関する。
【００１３】
本発明は、式（Ｉ）のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を必要とする対象に投与することを特徴とする、癌の治療方法に関する。
本発明は、式（Ｉ）のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を必要とする対象に投与することを特徴とする、関節炎の治療方法に関する。
【００１４】
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物がＡｋｔ／ＰＫＢの阻害剤として活性であるという知見に関する。
本発明のさらなる態様において、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の調製において有用な新規な製法が提供される。
【００１５】
本発明には、医薬担体および本発明の方法において有用な化合物を含む医薬組成物が包含される。
また、本発明には、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物とさらなる活性成分を同時投与する方法も包含される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
出願日２００４年７月２８日、国際公開第ＷＯ２００５／０１１７００号および国際公開日２００５年２月１０日であり、そのスキーム、方法およびアッセイが出典明示により、本明細書の一部とされる国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号は、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル含有化合物、ならびにその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグを、特に癌および関節炎の治療において、セリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢともいう）の阻害剤として有用であるとして開示し、請求する。国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号は、特に、本発明の範囲内の化合物のいずれも開示しない。
【００１７】
今回、式（Ｉ）の化合物が、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示された最も構造的に関連のある化合物であると考えられるものを越える利益を示すことを見出した。
【００１８】
例えば、本発明の実施例３、４および７〜１８は、一般に、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示された最も構造的に関連のある化合物と考えられるものと比較した場合、正常細胞成長の阻害を越える腫瘍細胞成長の阻害に対する活性増加および選択性増加を示す。該活性増加および選択性増加は、より幅広い治療領域をもたらすことが予想される。さらに、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示される化合物は、一般に、貧水溶性を示す。該貧溶性の一態様は、これらの化合物が静脈内（以下、ＩＶという）投与に適した医薬投与形態に処方される能力に悪影響を及ぼすことである。一般に、正常細胞成長の阻害を越える腫瘍細胞成長の阻害に対する増加した活性および増加した選択性を有することに加え、本発明の実施例３、４および７〜１８の化合物は、ＩＶ投与用投与形態に処方するのに適当であると考えられる溶解性を示す。静脈内投与は、本発明の化合物を投与するための有益な方法である。
【００１９】
国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の化合物は、セリン／スレオニンキナーゼ、ＡＫＴ（プロテインキナーゼＢともいう）の阻害剤として有用であるが、式（Ｉ）の化合物、特に、実施例３、４および７〜１８の化合物は、有益な特性、例えば、適当な溶解性、活性、選択性、クリアランスおよび曝露を示し、それらは全て該化合物を、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号に開示される最も構造的に関連した化合物であると考えられるものを越えて有益にする。
【００２０】
本発明は、上記の式（Ｉ）の化合物に関する。
式（Ｉ）の本発明の化合物は、Ａｋｔ／ＰＫＢ活性を阻害する。特に、本明細書中に開示される化合物は、３つのＡｋｔ／ＰＫＢイソ型の各々を阻害する。
【００２１】
式（Ｉ）の本発明の化合物のなかには、式中、
Ｒ４Ｒ５が独立して、水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜６員環を形成し；
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３およびＲ３’は、各々、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され；但し、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’の少なくとも２つは、水素，水素であり；Ｒ４およびＲ５がそれらが結合している窒素と一緒になって５〜６員環を形成する場合、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’の３つ全てが水素，水素である
化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２２】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロブチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２−（−）−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；および
４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２３】
式（Ｉ）の化合物は、本発明の医薬組成物に含まれ、本発明の方法において使用される。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、置換基、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロ−２Ｈ−チオピランおよび−Ｃ１−Ｃ４アルキルは、１個のフッ素原子から、該置換基が過フッ素化されるまでの数のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜８個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜３個のフッ素原子で置換されていてもよい。
【００２５】
本明細書中で使用される場合、「過フッ素化された」なる語は、水素原子の全てがフッ素原子で置き換わった置換基を意味する。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、「５〜６員環」なる語は、結合している窒素と共に非芳香環を形成する４または５員の炭素鎖を意味し、該環の炭素原子は、１個のフッ素原子から、該環の炭素原子が過フッ素化されるまでの数のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該環の炭素原子は、１〜８個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該環の炭素原子は、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該環の炭素原子は、１〜３個のフッ素原子で置換されていてもよい。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、「−Ｃ１−Ｃ４アルキル」なる語は、１〜４個の炭素原子を含有している直鎖または分枝鎖の飽和または不飽和炭化水素鎖を意味する。本明細書中で使用される場合、−Ｃ１−Ｃ４アルキルの例は、−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−ＣＦ３、−Ｃ（ＣＨ３）３、−（ＣＨ２）３−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ２、および−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３を包含する。
【００２８】
別記しない限り、本明細書中に開示される化合物は、また、該構造の立体化学的形態、すなわち、各不斉中心についてＲおよびＳ配置の全てを包含する。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学異性体ならびにエナンチオマーおよびジアステレオマー混合物は、本発明の範囲内である。
【００２９】
本明細書中で使用される場合、「治療」なる語およびその派生語は、予防的および治療的療法を意味する。
【００３０】
本明細書中で使用される場合、「有効量」なる語およびその派生語は、例えば、研究者または臨床医によって、探求されている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を顕在化するであろう薬物または医薬の量を意味する。さらに、「治療上有効量」なる語およびその派生語は、かかる量を服用していない対応する対象と比べて、疾患、障害または副作用の改善された治療、治癒、予防または緩和、あるいは疾患または障害の進行速度の減少をもたらすいずれかの量を意味する。該用語は、また、正常な生理学的機能を増加するのに有効な量をその範囲に包含する。
【００３１】
式Ｉの新規化合物は、下記スキーム１において示されるように、または類似の方法によって調製される。出発材料は全て、市販品であるか、または当業者によって市販の出発材料から容易に調製される。
【００３２】
スキーム１
【化２】
（ａ）Ｂｒ２，ＮａＯＡｃ；（ｂ）ＥｔＮＨ２；（ｃ）ＳｎＣｌ２，ＨＣｌ；（ｄ）シアノ酢酸エチル，１９０℃；（ｅ）ＮａＮＯ２，ＨＣｌ；（ｆ）ＮＨ２ＯＨ；（ｇ）Ｅｔ３Ｎ，ジオキサン；（ｈ）ｎ−ＢｕＬｉ，ＴＨＦ；（ｉ）Ｂ（ＯＭｅ）３；（ｊ）Ｈ２Ｏ２，ＮａＯＨ；（ｋ）（３−ヒドロキシプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル，ＤＥＡＤ，ポリマー結合型ＰＰｈ３，ＣＨ２Ｃｌ２；（ｌ）Ｐｄ（ＰＰｈ３）４，ｉＰｒ２ＮＨ，ジオキサン，１００℃；（ｍ）ＴＦＡ，ＣＨ２Ｃｌ２
【００３３】
式（Ｉ）の化合物は、スキーム１に示される方法と類似の方法において調製することができる。酢酸ナトリウム中において緩衝化された臭素を用いる３−ニトロ−４−エトキシピリジン（１−スキーム １）の臭素化により、３−ブロモ−４−（エチルオキシ）−５−ニトロピリジンを得る（２−スキーム １）。該変換を実施するための別法が存在し、当業者に既知である。これらの方法は、標準的な有機合成テキスト、例えば、Ｌａｒｏｃｋ，”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，ＶＣＨ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）において編集されている。次いで、エトキシ基をエタノールなどの極性溶媒中、第１アミン、例えば、エチルアミンで置き換えて、３−スキーム１のような化合物を得る。液状アミンを用いる場合、該反応は、溶媒の不在下で実施することができる。ニトロ基の還元および付随するクロロ基の導入は、塩化スズ（ＩＩ）を用いて、Ｋｅｌｌｅｙら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８（２０），４１３１−３４によって記載された方法にしたがって達成される。対応する５−ブロモ−２−クロロジアミノピリジンは、適当な酸またはエステル、例えば、シアノ酢酸エチルと共に濃縮する。加熱を継続して脱水環化反応に影響を及ぼして、４−スキーム１のようなイミダゾピリジンを得る。濃ＨＣｌ中におけるＮａＮＯ２との反応、続く、ヒドロキシルアミンとの反応によりビス−オキシムを得、それがトリエチルアミンなどの適当な塩基の存在下で脱水環化して５−スキーム１のようなアミノフラザンを得る。該ヒドロキシル基は、ｎ−ブチルリチウムなどの適当な塩基を用いるハロゲン−金属交換によってアリールアニオンを生じ、該アニオンをホウ酸トリメチルなどの適当なホウ素親電子物質と反応させ、得られたアリールボロネートを水性塩基中、過酸化水素などの適当な酸化剤で酸化することによって導入されて、６−スキーム１のようなイミダゾピリジノールを得る。グリニャール試薬などの他の塩基もまた、ハロゲン金属交換に影響を及ぼすために使用できる。該イミダゾピリジノールのエーテル化を、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８１，１）によって記載された方法を用い、（３−ヒドロキシプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチルなどの適当なアルコールを用いて行って、７−スキーム１のようなエーテルを得る。７−スキーム１のような適当なハロゲン化アリールをジオキサン等の適当な溶媒中、ジ−イソプロピルアミンなどの適当な塩基の存在下、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウムなどの適当な触媒および末端アルキンで処理して、８−スキーム１のような対応するアリールアルキンを得る。保護基の除去は、塩化メチレンなどの極性溶媒中、プロトン酸またはルイス酸、例えば、トリフルオロ酢酸を用いて達成され、それにより、９−スキーム１のような式（Ｉ）の化合物を得る。
【００３４】
本明細書中で使用される場合、「同時投与」なる語およびその派生語は、本明細書中に記載されるＡＫＴ阻害化合物と、化学療法および放射線治療を包含する癌の治療に有用であることが知られている、または関節炎の治療に有用であることが知られているさらなる活性成分とを同時に投与すること、またはいずれかの方法で別々に連続的に投与することを意味する。本明細書中で使用される場合、「さらなる活性成分」なる語は、癌または関節炎の治療が必要な患者に投与した場合に有益な特性を示すことが知られている、または有益な特性を示すことが立証されたいずれかの化合物または治療剤を包含する。好ましくは、同時に投与しない場合、該化合物は互いに密接した時間間隔で投与される。さらに、該化合物が同じ投与形態で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、１の化合物を局所投与し、他方の化合物を経口投与してもよい。
【００３５】
典型的には、治療されている感受性腫瘍に対する活性を有するいずれかの抗新生物剤を本発明における癌の治療において同時投与してもよい。かかる薬剤の例は、Ｖ．Ｔ．ＤｅｖｉｔａおよびＳ．Ｈｅｌｌｍａｎ（編集者）によるＣａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，第６版（２００１年２月１５日），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓにおいて見出すことができる。当業者は、関与する薬物および癌の特徴に基づき、どの薬剤の組み合わせが有用であるかを認識することができるであろう。本発明において有用な典型的な抗新生物剤は、限定するものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの抗微小管剤、白金配位錯体、ナイトロジェンマスタード、オキサザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソウレアおよびトリアゼンなどのアルキル化剤、アントラサイクリン、アクチノマイシンおよびブレオマイシンなどの抗生物質、エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗物質、カムプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤を包含する。
【００３６】
本発明のＡＫＴ阻害化合物と組み合わせて使用される、または同時に投与されるさらなる活性成分（抗新生物剤）の例は、化学療法剤である。
抗微小管または抗有糸分裂剤は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期の間の腫瘍細胞の微小管に対して活性な周期特異性薬剤である。抗微小管剤の例は、限定するものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドを包含する。
天然資源に由来するジテルペノイドは、細胞周期のＧ２／Ｍ期で作動する周期特異性抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβ−チュービュリンサブユニットと結合することによって、該タンパク質を安定化すると考えられる。次いで、該タンパク質の分解は、有糸分裂が阻止されること、および続く細胞死によって阻害されるようである。ジテルペノイドの例は、限定するものではないが、パクリタキセルおよびその類似物ドセタキセルを包含する。
【００３７】
パクリタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセテート２−ベンゾエート１３−エステルは、タイヘイヨウイチイの木Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａから単離された天然ジテルペン産物であり、注射溶液ＴＡＸＯＬＲ（登録商標）として市販されている。それは、テルペン類のタキサンファミリーの一員である。１９７１年に、Ｗａｎｉらによって初めて単離され（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ，Ｓｏｃ．，９３：２３２５．１９７１）、彼らは、その構造を化学的およびＸ線結晶学的方法によって特徴付けた。その活性の一メカニズムは、チュービュリンに結合することのできるパクリタキセルの能力に関連し、それにより、癌細胞成長を阻害する（Ｓｃｈｉｆｆら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ，Ａｃａｄ，Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：１５６１−１５６５（１９８０）；Ｓｃｈｉｆｆら、Ｎａｔｕｒｅ，２７７：６６５−６６７（１９７９）；Ｋｕｍａｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ，Ｃｈｅｍ，２５６：１０４３５−１０４４１（１９８１））。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性の概説については、Ｄ．Ｇ．Ｉ．Ｋｉｎｇｓｔｏｎら、Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｖｏｌ．２６，タイトル”Ｎｅｗ ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９８６”，Ａｔｔａｕｒ−Ｒａｈｍａｎ，Ｐ．Ｗ．Ｌｅ Ｑｕｅｓｎｅ，Ｅｄｓ．（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８６）ｐｐ２１９−２３５を参照のこと。
【００３８】
パクリタキセルは、米国において難治性の卵巣癌の治療（Ｍａｒｋｍａｎら、Ｙａｌｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６４：５８３，１９９１；ＭｃＧｕｉｒｅら、Ａｎｎ．ｌｎｔｅｍ，Ｍｅｄ．，１１１：２７３，１９８９）、および乳癌の治療（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，８３：１７９７，１９９１）における臨床的使用が認可されている。それは、皮膚における新生物（Ｅｉｎｚｉｇら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２０：４６）および頭頚部癌腫（Ｆｏｒａｓｔｉｒｅら、Ｓｅｍ．Ｏｎｃｏｌ．，２０：５６，１９９０）の治療に対する可能性のある候補物質である。該化合物は、また、多嚢胞性腎臓病（Ｗｏｏら、Ｎａｔｕｒｅ，３６８：７５０．１９９４）、肺癌およびマラリアの治療に対する可能性も示す。パクリタキセルでの患者の処理は、閾値濃度（５０ｎＭ）（Ｋｅａｒｎｓ，Ｃ．Ｍ．ら、Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，３（６） ｐ．１６−２３，１９９５）を越えて投与する期間に関連した骨髄抑制（多細胞系統，Ｉｇｎｏｆｆ，Ｒ．Ｊ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ，１９９８）をもたらす。
【００３９】
ドセタキセル、５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−アセテート２−ベンゾエートとの（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル，１３−エステル三水和物は、注射溶液ＴＡＸＯＴＥＲＥＲとして市販されている。ドセタキセルは、乳癌の治療に必要とされる。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの木の針葉から抽出された天然前駆体１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを用いて調製される、パクリタキセル（上を参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量規定毒性は、好中球減少である。
【００４０】
ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウ由来の周期特異性抗新生物剤である。ビンカアルカロイドは、チュービュリンに特異的に結合することによって、細胞周期のＭ期（有糸分裂）で作用する。結果として、結合型チュービュリン分子は、微小管中に重合することができない。有糸分裂は、中期に阻止されると考えられ、その後に細胞死がもたらされる。ビンカアルカロイドの例は、限定するものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチンおよびビノレルビンを包含する。
【００４１】
ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射溶液ＶＥＬＢＡＮＲとして市販されている。それは、第一に、睾丸癌およびホジキン病を包含する種々のリンパ腫ならびにリンパ球性および組織球性リンパ腫の治療において必要とされるが、種々の充実性腫瘍の二次治療としての可能性が示される。骨髄抑制は、ビンブラスチンの用量規定副作用である。
【００４２】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチン，２２−オキソ−，サルフェートは、注射溶液ＯＮＣＯＶＩＮＲとして市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に必要とされ、また、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療方針において使用が見出された。脱毛および神経学的影響は、ビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、それほどではないが、骨髄抑制および胃腸粘膜炎影響が起こる。
【００４３】
ビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ＊，Ｒ＊）−２，３−ジヒドロキシブタンジオエート（１：２）（塩）］は、酒石酸ビノレルビンの注射溶液（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥＲ）として市販されており、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤、例えば、シスプラスチンと組み合わせて、種々の充実性腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行した乳癌、およびホルモン難治性前立腺癌の治療において必要とされる。骨髄抑制は、ビノレルビンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００４４】
白金配位錯体は、非周期特異性抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化し、ＤＮＡと鎖内および鎖間架橋を形成し、それにより、腫瘍に対し不利益な生物学的影響を引き起こす。白金配位錯体の例は、限定するものではないが、シスプラチンおよびカルボプラチンを包含する。
【００４５】
シスプラチン、シス−ジアミンジクロロ白金は、注射溶液ＰＬＡＴＩＮＯＬＲとして市販されている。シスプラチンは、主に、転移性睾丸および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に必要とされる。シスプラチンの一次用量規定副作用は、水和および利尿によって調節されうる腎臓毒性、および内耳神経毒性である。
【００４６】
カルボプラチン、白金ジアミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］は、注射溶液ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮＲとして市販されている。カルボプラチンは、主として進行性卵巣癌腫の一次および二次治療において必要とされる。骨髄抑制は、カルボプラチンの用量規定毒性である。
【００４７】
アルキル化剤は、非周期特異性抗癌剤であり、強い親電子物質である。典型的には、アルキル化剤は、アルキル化によって、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核性基を介してＤＮＡに対する共有結合を形成する。かかるアルキル化は、核酸機能を崩壊し、それにより、細胞死に導く。アルキル化剤の例は、限定するものではないが、シクロホスファミド、メルファランおよびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード、ブスルファンなどのスルホン酸アルキル、カルムスチンなどのニトロソウレア、およびダカルバジンなどのトリアゼンを包含する。
【００４８】
シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射溶液または錠剤として、ＣＹＴＯＸＡＮＲとして市販されている。シクロホスファミドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫および白血病の治療において必要とされる。脱毛、吐き気、嘔吐および白血球減少は、シクロホスファミドの最も一般的な用量規定副作用である。
【００４９】
メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射溶液または錠剤として、ＡＬＫＥＲＡＮＲとして市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および卵巣の切除不能上皮癌腫の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、メルファランの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５０】
クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ＬＥＵＫＥＲＡＮＲ錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ球性白血病、およびリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫およびホジキン病などの悪性リンパ腫の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、クロラムブシルの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５１】
ブスルファン、１，４−ブタンジオールジメタンスルホネートは、ＭＹＬＥＲＡＮＲ錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、ブスルファンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５２】
カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレアは、単一バイアルの凍結乾燥製品として、ＢｉＣＮＵＲとして市販されている。カルムスチンは、単一薬剤として、または脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫のための他の薬剤と組み合わせて、待機的治療に必要とされる。骨髄抑制の遅延は、カルムスチンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５３】
ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、単一バイアル製品として、ＤＴＩＣ−ＤｏｍｅＲとして市販されている。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療に必要とされ、ホジキン病の二次治療のための他の薬剤と組み合わせて使用される。吐き気、嘔吐および食欲不振は、ダカルバジンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５４】
抗生物質抗新生物剤は、周期特異性薬剤であり、ＤＮＡに結合または介在する。典型的には、かかる作用は、安定なＤＮＡ複合体または鎖分解をもたらし、それが核酸の通常の機能を崩壊し、その結果、細胞死に導く。抗生物質抗新生物剤の例は、限定するものではないが、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン、ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントラサイクリン、およびブレオマイシンを包含する。
【００５５】
ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、ＣＯＳＭＥＧＥＮＲとして注射可能形態で市販されている。ダクチノマイシンは、Ｗｉｌｍ腫瘍および横紋筋肉腫の治療に必要とされる。吐き気、嘔吐および食欲不振は、ダクチノマイシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５６】
ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射可能形態としてＤＡＵＮＯＸＯＭＥＲまたは注射液としてＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥＲとして市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療において軽減誘導のために必要とされる。骨髄抑制は、ダウノルビシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５７】
ドキソルビシン（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、注射可能形態として、ＲＵＢＥＸＲまたはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ ＲＤＦＲとして市販されている。ドキソルビシンは、主として、急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽急性白血病の治療に必要とされるが、いくつかの充実性腫瘍およびリンパ腫の治療においても有用な成分である。骨髄抑制は、ドキソルビシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５８】
ブレノマイシン、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓの株から単離された細胞毒性グリコペプチド抗生物質の混合物は、ＢＬＥＮＯＸＡＮＥＲとして市販されている。ブレオマイシンは、単一薬剤として、または他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮細胞癌腫、リンパ腫、および睾丸癌腫の待機的治療として必要とされる。肺および皮膚毒性は、ブレオマイシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５９】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、限定するものではないが、エピポドフィロトキシンを包含する。
エピポドフィロトキシンは、マンドレーク植物に由来する周期特異性抗新生物剤である。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩおよびＤＮＡと三重複合体を形成し、ＤＮＡ鎖崩壊を引き起こすことによって、細胞周期のＳおよびＧ２期において細胞に影響を及ぼす。鎖崩壊が蓄積し、次いで細胞死が起こる。エピポドフィロトキシンの例は、限定するものではないが、エトポシドおよびテニポシドを包含する。
【００６０】
エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射溶液またはカプセルとして、ＶｅＰＥＳＩＤＲとして市販されており、一般に、ＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、睾丸癌および非小細胞肺癌の治療において必要とされる。骨髄抑制は、エトポシドの最も一般的な用量規定副作用である。白血球減少の発生は、血小板減少より重篤な傾向にある。
【００６１】
テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射溶液として、ＶＵＭＯＮＲとして市販されており、一般に、ＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、子供の急性白血病の治療において必要とされる。骨髄抑制は、テニポシドの最も一般的な用量規定副作用である。テニポシドは、白血球減少および血小板減少の両方を誘導することができる。
【００６２】
代謝拮抗抗新生物剤は、ＤＮＡ合成を阻害することによって、またはプリンもしくはピリミジン塩基合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成阻害することによって、細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）に作用する周期特異性抗新生物剤である。結果として、Ｓ期が進行せず、その結果、細胞死が起こる。代謝拮抗抗新生物剤の例は、限定するものではないが、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メカプトプリン、チオグアニンおよびゲムシタビンを包含する。
【００６３】
５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルの投与は、チミジレート合成の阻害を導き、また、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方に組み込まれる。その結果、典型的には、細胞死が起こる。５−フルオロウラシルは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、胸部、結腸、直腸、胃および膵臓の癌腫の治療において必要とされる。骨髄抑制および粘膜炎は、５−フルオロウラシルの用量規定副作用である。他のフルオロピリミジン類似体は、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸を包含する。
【００６４】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、ＣＹＴＯＳＡＲ−ＵＲとして市販されており、一般に、Ａｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは、成長しているＤＮＡ鎖中へのシタラビンの末端組み込みによって、ＤＮＡ鎖伸長を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示すと考えられる。シタラビンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。他のシチジン類似体は、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）を包含する。シタラビンは、白血球減少、血小板減少および粘膜炎を誘導する。
【００６５】
メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬＲとして市販されている。メルカプトプリンは、今だ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。メルカプトプリンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。骨髄抑制および胃腸粘膜炎は、高用量でのメルカプトプリンの予想される副作用である。有用なメルカプトプリン類似体は、アザチオプリンである。
【００６６】
チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、ＴＡＢＬＯＩＤＲとして市販されている。チオグアニンは、今だ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。チオグアニンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。白血球減少、血小板減少および貧血を包含する骨髄抑制は、チオグアニン投与の最も一般的な用量規定副作用である。しかしながら、胃腸の副作用が起こり、用量が制限されることがある。他のプリン類似体は、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、フルダラビンホスフェート、およびクラドリビンを包含する。
【００６７】
ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）は、ＧＥＭＺＡＲＲとして市販されている。ゲムシタビンは、Ｇ１／Ｓ境界を経る細胞の進行を阻害することによって、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。ゲムシタビンは、局所的進行性の非小細胞肺癌の治療においてシスプラチンと組み合わせて用いられ、局所的進行性の膵臓癌の治療において単独で用いられる。白血球減少、血小板減少および貧血を包含する骨髄抑制は、ゲムシタビン投与の最も一般的な用量規定副作用である。
【００６８】
メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジレートの合成に必要なジヒドロ葉酸還元酵素の阻害によって、ＤＮＡ合成、修復および／または複製を阻害することにより、Ｓ期で特異的に細胞周期影響を示す。メトトレキサートは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、および胸部、頭部、頚部、卵巣および膀胱の癌腫の治療において必要とされる。骨髄抑制（白血球減少、血小板減少および貧血）および粘膜炎は、メトトレキサート投与の予想される副作用である。
【００６９】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を包含するカンプトテシンは、トポイソメラーゼＩ阻害剤として入手可能であるか、または開発下にある。カンプトテシン細胞毒活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連すると考えられる。カンプトテシンの例は、限定するものではないが、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態を包含する。
【００７０】
イリノテシンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射溶液ＣＡＭＰＴＯＳＡＲＲとして市販されている。
【００７１】
イリノテカンは、その活性な代謝産物ＳＮ−３８と共に、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体である。トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリノテカンまたはＳＮ−３８三重複合体と複製酵素との相互作用によって引き起こされる修復不可能な二重鎖崩壊の結果として、細胞毒性が起こると考えられる。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療のために必要とされる。イリノテカンＨＣｌの用量規定副作用は、好中球減少を包含する骨髄抑制、および下痢を包含するＧＩ影響である。
【００７２】
トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射溶液ＨＹＣＡＭＴＩＮＲとして市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体であり、ＤＮＡ分子のねじれひずみに応答してトポイソメラーゼＩによって引き起こされる一本鎖崩壊の再ライゲーションを防ぐ。トポテカンは、卵巣癌および小細胞肺癌の転移性癌腫の二次治療に必要とされる。トポテカンＨＣｌの用量規定副作用は、骨髄抑制、主として好中球減少である。
【００７３】
また、ラセミ混合物（Ｒ，Ｓ）形態ならびにＲおよびＳエナンチオマーを包含する現在開発中の下記の式Ａ：
【化３】
で示されるカンプトテシン誘導体は、化学名「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ，Ｓ）−カンプトテシン（ラセミ混合物）」または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ）−カンプトテシン（Ｒエナンチオマー）」または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（Ｓエナンチオマー）によって知られている。かかる化合物ならびに関連化合物は、製造法も含め、米国特許第６，０６３，９２３号、第５，３４２，９４７号、第５，５５９，２３５号、第５，４９１，２３７号および出願中の米国特許出願第０８／９７７，２１７号（１９９７年１１月２４日出願）に記載されている。
【００７４】
ホルモンおよびホルモン類似体は、ホルモンと癌の成長および／または成長不足との間に関係がある癌の治療に有用な化合物である。癌治療に有用なホルモンおよびホルモン類似体の例は、限定するものではないが、子供の悪性リンパ腫および急性白血病の治療に有用なプレドニソンおよびプレドニソロンなどのアドレノコルチコステロイド；アミノグルテチミドおよび他のアロマターゼ阻害剤、例えば、アナストロゾール、レトラゾール、ボラゾール、および副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含有するホルモン依存性乳癌の治療に有用なエキセメスタン；プロゲストリン（ｐｒｏｇｅｓｔｒｉｎ）、例えば、ホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌の治療に有用な酢酸メゲストロール；エストロゲン、アンドロゲン、および抗アンドロゲン、例えば、前立腺癌および良性前立腺肥大の治療に有用なフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンおよび５α−レダクターゼ、例えば、フィナステリドおよびデゥタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）；抗エストロゲン、例えば、ホルモン依存性乳癌および他の感受性癌の治療に有用なタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、ならびに米国特許第５，６８１，８３５号、第５，８７７，２１９号および第６，２０７，７１６号に記載のような選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）；および前立腺癌の治療のための性腺刺激ホルモン放出性ホルモン（ＧｎＲＨ）および黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するその類似体、例えば、ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば、酢酸ゴセレリンおよびルプロリドを包含する。
【００７５】
シグナル変換経路阻害剤は、細胞内変換を喚起する化学的過程を遮断または阻害する阻害剤である。本明細書中で使用される場合、該変化は、細胞増殖または分化である。本発明において有用なシグナル変換阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ、非受容体チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカー、セリン／スレオニンキナーゼ、ホスホチジルイノシトール−３キナーゼ、ｍｙｏ−イノシトールシグナル伝達、およびＲａｓオンコジーンの阻害剤を包含する。
【００７６】
いくつかのプロテインチロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与する種々のタンパク質における特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する。かかるプロテインチロシンキナーゼは、受容体または非受容体キナーゼとして幅広く分類することができる。
【００７７】
受容体チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメインおよびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通型タンパク質である。受容体チロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与し、一般に、成長因子受容体と呼ばれる。例えば過剰発現または変異による、これらのキナーゼの多くの不適当または制御されない活性化、すなわち、異常型のキナーゼ成長因子受容体活性は、制御されない細胞成長をもたらすことが示された。したがって、かかるキナーゼの異常な活性は、悪性組織成長に関連している。結果として、かかるキナーゼの阻害剤は、癌治療法を提供することができた。成長因子受容体は、例えば、表皮成長因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様および表皮成長因子相同ドメインを有するチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン成長因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体、およびＲＥＴプロトオンコジーンを包含する。いくつかの成長受容体阻害剤は、開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびアンチセンスオリゴヌクレオチドを包含する。成長因子受容体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Ｋａｔｈ，Ｊｏｈｎ Ｃ．，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）１０（６）：８０３−８１８；Ｓｈａｗｖｅｒら、ＤＤＴ Ｖｏｌ２，Ｎｏ．２ Ｆｅｂｒｕａｒｙ １９９７；およびＬｏｆｔｓ，Ｆ．Ｊ．ら、”Ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｓ ｔａｒｇｅｔｓ”，Ｎｅｗ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｗｏｒｋｍａｎ，ＰａｕｌおよびＫｅｒｒ，Ｄａｖｉｄ編，ＣＲＣ ｐｒｅｓｓ １９９４，Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。
【００７８】
成長因子受容体キナーゼではないチロシンキナーゼは、非受容体チロシンキナーゼと称される。本発明において有用な非受容体チロシンキナーゼは、抗癌薬の標的または潜在的標的であり、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（焦点接着キナーゼ）、Ｂｒｕｔｏｎｓチロシンキナーゼ、およびＢｃｒ−Ａｂｌを包含する。かかる非受容体キナーゼおよび非受容体チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Ｓｉｎｈ，Ｓ．およびＣｏｒｅｙ，Ｓ．Ｊ．，（１９９９） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ８ （５）：４６５−８０；およびＢｏｌｅｎ，Ｊ．Ｂ．，Ｂｒｕｇｇｅ，Ｊ．Ｓ．，（１９９７）Ａｎｎｕａｌ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１５：３７１−４０４に記載されている。
【００７９】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカーは、ＰＩ３−Ｋ ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰを包含する種々の酵素またはアダプタータンパク質において結合しているＳＨ２またはＳＨ３ドメインを崩壊する薬剤である。抗癌薬の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Ｓｍｉｔｈｇａｌｌ，Ｔ．Ｅ．（１９９５），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．３４（３）１２５−３２において考察されている。
【００８０】
セリン／スレオニンキナーゼの阻害剤は、ＭＡＰキナーゼカスケードブロッカーを包含し、それは、Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ（ＭＥＫｓ）、および細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫｓ）のブロッカー；およびＰＫＣ（アルファ、ベータ、ガンマ、イプシロン、ミュー、ラムダ、イオータ、ゼータ）のブロッカーを包含するプロテインキナーゼＣファミリーメンバーのブロッカーを包含する。ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ａｋｔキナーゼファミリーメンバー、およびＴＧＦベータ受容体キナーゼのブロッカーを包含する。かかるセリン／スレオニンキナーゼおよびその阻害剤は、Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｔａｙａ，Ｓ．，Ｋａｉｂｕｃｈｉ，Ｋ．，（１９９９），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．１２６（５）７９９−８０３；Ｂｒｏｄｔ，Ｐ，Ｓａｍａｎｉ，Ａ．，およびＮａｖａｂ，Ｒ．（２０００），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６０．１１０１−１１０７；Ｍａｓｓａｇｕｅ，Ｊ．，Ｗｅｉｓ−Ｇａｒｃｉａ，Ｆ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｒｖｅｙｓ．２７：４１−６４；Ｐｈｉｌｉｐ，Ｐ．Ａ．，およびＨａｒｒｉｓ，Ａ．Ｌ．（１９９５），Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ． ７８：３−２７，Ｌａｃｋｅｙ，Ｋ．ら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙｌｅｔｔｅｒｓ，（１０），２０００，２２３−２２６；米国特許第６，２６８，３９１号；およびＭａｒｔｉｎｅｚ−Ｉａｃａｃｉ，Ｌ．ら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ（２０００），８８（１），４４−５２に記載されている。
【００８１】
ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫおよびＫｕのブロッカーを包含するホスホチジルイノシトール−３キナーゼファミリーのメンバーの阻害剤は、また、本発明において有用でありうる。かかるキナーゼは、Ａｂｒａｈａｍ，Ｒ．Ｔ．（１９９６），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．８（３）４１２−８；Ｃａｎｍａｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｌｉｍ，Ｄ．Ｓ．（１９９８），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １７（２５）３３０１−３３０８；Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｓ．Ｐ．（１９９７），Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ．２９（７）：９３５−８；およびＺｈｏｎｇ，Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓ，（２０００）６０（６），１５４１−１５４５において考察されている。
【００８２】
また、本発明は、ミオイノシトールシグナル伝達阻害剤、例えば、ホスホリパーゼＣブロッカーおよびミオイノシトール類似物に関する。かかるシグナル阻害剤は、Ｐｏｗｉｓ，Ｇ．およびＫｏｚｉｋｏｗｓｋｉ Ａ．、（１９９４）Ｎｅｗ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｅｄ．，Ｐａｕｌ Ｗｏｒｋｍａｎ ａｎｄ Ｄａｖｉｄ Ｋｅｒｒ，ＣＲＣ ｐｒｅｓｓ １９９４，Ｌｏｎｄｏｎにおいて記載されている。
【００８３】
シグナル変換経路阻害剤の別の群は、Ｒａｓオンコジーンの阻害剤である。かかる阻害剤は、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼおよびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法を包含する。かかる阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含有する細胞においてｒａｓ活性化を遮断し、それにより、抗増殖剤として作用することが示された。Ｒａｓオンコジーン阻害は、Ｓｃｈａｒｏｖｓｋｙ，Ｏ．Ｇ．，Ｒｏｚａｄｏｓ，Ｖ．Ｒ．，Ｇｅｒｖａｓｏｎｉ，Ｓ．Ｉ．Ｍａｔａｒ，Ｐ．（２０００），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．７（４）２９２−８；Ａｓｈｂｙ，Ｍ．Ｎ．（１９９８），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ．９（２）９９−１０２；およびＢｉｏＣｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，（１９８９）１４２３（３）：１９−３０において考察されている。
【００８４】
上記のように、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体アンタゴニストもまた、シグナル変換阻害剤として作用しうる。該群のシグナル変換経路阻害剤は、受容体チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用を包含する。例えば、Ｉｍｃｌｏｎｅ Ｃ２２５ ＥＧＦＲ特異的抗体（Ｇｒｅｅｎ，Ｍ．Ｃ．ら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ．Ｒｅｖ．，（２０００），２６（４），２６９−２８６参照）、ＨｅｒｃｅｐｔｉｎＲ（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：ｅｒｂＢ Ｆａｍｉｌｙ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｎｉａｓｅｓ，Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２０００，２（３），１７６−１８３参照）、および２ＣＢ ＶＥＧＦＲ２特異的抗体（Ｂｒｅｋｋｅｎ，Ｒ．Ａ．ら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＶＥＧＦＲ２ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉ−ＶＥＧＦ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｌｏｃｋｓ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０００）６０，５１１７−５１２４参照）がある。
【００８５】
非受容体キナーゼ脈管形成阻害剤もまた、本発明において有用でありうる。脈管形成関連ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害剤は、シグナル変換阻害剤に関して上記で考察されている（どちらの受容体も受容体チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害剤は、脈管形成、主にＶＥＧＦ発現を阻害することが示されたので、一般に、脈管形成はｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達に関係する。したがって、非受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、本発明の化合物と組み合わせて使用してもよい。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体チロシンキナーゼ）を認識しないが、そのリガンドに結合する抗−ＶＥＧＦ抗体、脈管形成を阻害するであろうインテグリン（アルファｖ、ベータ３）の小型分子阻害剤、エンドスタチンおよびアンジオスタチン（非−ＲＴＫ）もまた、開示される化合物と組み合わせて有用であることが分かる（Ｂｒｕｎｓ ＣＪら、（２０００），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，６０：２９２６−２９３５；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ ＡＢ，Ｗｉｎｋｌｅｒ ＭＥおよびＤｅｒｙｎｃｋ Ｒ．（１９８６），Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３２：１２５０−１２５３； Ｙｅｎ Ｌら、（２０００），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９：３４６０−３４６９参照）。
【００８６】
免疫治療方法において使用される薬剤もまた、式（Ｉ）の化合物と組み合わせて有用でありうる。免疫応答を生じるための多くの免疫学的方策がある。これらの方策は、一般に、腫瘍ワクチン化の領域にある。免疫学的アプローチの効力は、小型分子阻害剤を用いるシグナル伝達経路の組み合わせた阻害を通して大いに増強されうる。ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫学的／腫瘍ワクチンアプローチの考察は、Ｒｅｉｌｌｙ ＲＴら、（２０００），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６０：３５６９−３５７６；およびＣｈｅｎ Ｙ，Ｈｕ Ｄ，Ｅｌｉｎｇ ＤＪ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＪおよびＫｉｐｐｓ ＴＪ．（１９９８），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８：１９６５−１９７１において見出される。
【００８７】
プロアポトーシス管理において用いられる薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）もまた、本発明の組み合わせにおいて使用されうる。タンパク質のＢｃｌ−２ファミリーのメンバーは、アポトーシスを阻害する。したがって、ｂｃｌ−２のアップレギュレーションは、化学耐性に関連する。研究により、表皮成長因子（ＥＧＦ）がｂｃｌ−２ファミリーの抗−アポトーシスメンバー（すなわち、ｍｃｌ−１）を刺激することが示された。したがって、腫瘍においてｂｃｌ−２の発現をダウンレギュレーションすることが計画された方策、すなわち、Ｇｅｎｔａ’ｓ Ｇ３１３９ ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチドは、臨床上の利益を明らかにし、現在、第ＩＩ／ＩＩＩ相試験にある。ｂｃｌ−２に対するアンチセンスオリゴヌクレオチド法を用いるかかるプロアポトーシス法は、Ｗａｔｅｒ ＪＳら、（２０００），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１８：１８１２−１８２３；およびＫｉｔａｄａ Ｓら、（１９９４），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．４：７１−７９において考察されている。
【００８８】
細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の調節に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるプロテインキナーゼのファミリー、およびサイクリンと名付けられたタンパク質のファミリーとのそれらの相互作用は、真核生物の細胞周期の進行を調節する。種々のサイクリン／ＣＤＫ複合体の配位活性化および不活性化は、細胞周期の正常な進行に必要である。細胞周期シグナル伝達のいくつかの阻害剤は、開発下にある。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６を包含するサイクリン依存性キナーゼの例およびその阻害剤が、例えば、Ｒｏｓａｎｉａら、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）１０（２）：２１５−２３０に記載されている。
【００８９】
一の具体例において、本発明の癌治療法は、式Ｉの化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグと、少なくとも１つの抗新生物剤、例えば、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択される抗新生物剤との同時投与を包含する。
【００９０】
本発明の医薬上活性な化合物は、ＡＫＴ阻害剤として活性なので、それらは、癌および関節炎の治療において治療上有用性を示す。
【００９１】
適当には、本発明は、脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される癌を治療またはかかる癌の重篤度を軽減する方法に関する。
【００９２】
適当には、本発明は、卵巣癌、膵臓癌および前立腺癌から選択される癌の治療またはかかる癌の重篤度を軽減する方法に関する。
【００９３】
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）の単離および精製
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を発現している昆虫細胞を２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、２０ｍＭ イミダゾール（ｐＨ７．５）中にｐｏｌｙｔｒｏｎを用いて溶解させた（５ｍＬ溶解バッファー／ｇ 細胞）。細胞破片を２８，０００ｘｇで３０分間遠心分離することによって除去した。上清を４．５ミクロンのフィルターで濾過し、次いで、予め溶解バッファーで平衡化したニッケル−キレートカラム上に負荷した。該カラムを５カラム容量（ＣＶ）の溶解バッファー、次いで、５ＣＶの２０％バッファーＢ（ここに、バッファーＢは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，１００ｍＭ ＮａＣｌ，３００ｍＭ イミダゾール、ｐＨ７．５である）で洗浄した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）は、１０ＣＶにわたるバッファーＢの２０−１００％直線勾配で溶出された。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（１３６−４８０）溶出フラクションをプールし、３倍量のバッファーＣ（ここに、バッファーＣは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５である）で希釈した。次いで、該試料を、バッファーＣで予め平衡化したＱ−セファロースＨＰカラム上のクロマトグラフィーに付した。該カラムを５ＣＶのバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄ（ここに、バッファーＤは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，１０００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．５である）で段階溶出した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）含有フラクションをプールし、１０−ｋＤａ分子量カットオフ濃縮器で濃縮した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，２００ｍＭ ＮａＣｌ，１ｍＭ ＤＴＴ（ｐＨ７．５）で予め平衡化したＳｕｐｅｒｄｅｘ７５ゲル濾過カラム上のクロマトグラフィーに付した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）フラクションを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析法を用いて試験した。該タンパク質をプールし、濃縮し、−８０℃で冷凍した。
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ２（ａａ １３８−４８１）およびＨｉｓタグ付加ＡＫＴ３（ａａ １３５−４７９）も同様に、単離および精製した。
【００９４】
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ酵素アッセイ
本発明の化合物を基質リン酸化アッセイにおいて、ＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について試験した。該アッセイは、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する小型分子有機化合物の能力について試験する。基質リン酸化アッセイは、ＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを利用する。ＡＫＴ１、２および３は、また、Ｕｐｓｔａｔｅ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．から入手可能である。該方法は、ビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基上へのＡＴＰ由来のガンマ−ホスフェートの移動を触媒する単離酵素の能力を測定する。基質リン酸化は、下記の手法によって検出された。
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートで行った。１０ｎＭ活性化ＡＫＴ酵素を、５０ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、２０ｍＭ ＭｇＣｌ２、４μＭ ＡＴＰ、８μＭペプチド、０．０４μＣｉ［ｇ−３３Ｐ］ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴ、および１００％ＤＭＳＯ中における１μｌの試験化合物を含有するアッセイ容量２０μｌ中、室温で４０分間インキュベートした。５０μｌのＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋を含有しないＤｕｌｂｅｃｃｏ ＰＢＳ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０μＭ ＡＴＰ、２．５ｍｇ／ｍｌストレプトアビジンで被覆したＳＰＡビーズ）の添加によって、反応を停止した。プレートを密閉し、ビーズを一晩沈澱させ、次いで、プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）においてカウントした。
用量応答データをデータ換算式１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）
［式中、Ｕは未知の値であり、Ｃ１は、ＤＭＳＯについて得られた平均対照値であり、Ｃ２は、０．１Ｍ ＥＤＴＡについて得られた平均対照値である］
で算出した％対照として、化合物濃度に対してプロットした。データを、
ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））
［式中、Ｖｍａｘは、上位の漸近線であり、ＫはＩＣ５０である］
によって表される曲線にフィットさせる。
【００９５】
全長ヒト（ＦＬ）ＡＫＴ１のクローニング
全長ヒトＡＫＴ１遺伝子を、ミリスチル化ＡＫＴ１−ＥＲを含有するプラスミド（Ｒｏｂｅｒｔ Ｔ． Ａｂｒａｈａｍ， Ｄｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｕｎｄｅｒ ＭＴＡからの贈呈品。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １９９８ Ｖｏｌｕｍｅ １８ ｐ．５６９９に記載）から、５’プライマー：配列番号２
５’ ＴＡＴＡＴＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＡＧＣＧＡＣＧＴＧＧＣ ３’
および３’プライマー：配列番号３
ＡＡＡＴＴＴＣＴＣＧＡＧＴＣＡＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＧＧ ３’
を用いてＰＣＲによって増幅した。５’プライマーはＢａｍＨＩ部位を、３’プライマーはＸｈｏＩ部位をクローニング目的で含んでいた。得られたＰＣＲ産物をｐｃＤＮＡ３中で、ＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとしてサブクローニングした。システイン２５をコードしている配列（ＴＧＣ）における変異を、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅＲ部位特異的変異誘発キット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）を用いる部位特異的変異誘発によって、アルギニン２５をコードしている野生型ＡＫＴ１配列（ＣＧＣ）に変化させた。ＡＫＴ１変異誘発プライマー：配列番号４
５’ ＡＣＣＴＧＧＣＧＧＣＣＡＣＧＣＴＡＣＴＴＣＣＴＣＣ
および選択プライマー：配列番号５
５’ ＣＴＣＧＡＧＣＡＴＧＣＡＡＣＴＡＧＡＧＧＧＣＣ（ｐｃＤＮＡ３のマルチプルクローニング部位におけるＸｂａＩ部位を破壊するために設計された）
を製造者の指示に従って用いた。発現／精製目的で、ＡＫＴ１をＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとして単離し、ｐＦａｓｔｂａｃＨＴｂ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の
ＢａｍＨＩ ＸｈｏＩ部位中にクローニングした。
【００９６】
ＦＬヒトＡＫＴ１の発現
発現は、ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎのＢＡＣ−ｔｏ−ＢＡＣバキュロウイルス発現システム（カタログ番号１０３５９−０１６）を用いて行った。簡単に言うと、１）ｃＤＮＡをＦａｓｔＢａｃベクターからｂａｃｍｉｄ ＤＮＡ中へ移入させ、２）ｂａｃｍｉｄ ＤＮＡを単離し、Ｓｆ９昆虫細胞をトランスフェクトするために用い、３）ウイルスをＳｆ９細胞中で産生させ、４）Ｔ． ｎｉ細胞を該ウイルスに感染させ、精製に付した。
【００９７】
ＦＬヒトＡＫＴ１の精製
全長ＡＫＴ１の精製のために、１３０ｇのｓｆ９細胞（バッチ番号４１６４６Ｗ０２）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌおよび２０ｍＭイミダゾールを含有する溶解バッファー（バッファーＡ，１Ｌ，ｐＨ７．５）中に再懸濁した。細胞溶解をＡｖｅｓｔｉｎ（１５Ｋ−２０Ｋ ｐｓｉで２回）によって行った。細胞破片を１６Ｋ ｒｐｍで１時間遠心分離することによって除去し、上清を４℃で一晩、１０ｍｌのニッケルセファロースＨＰビーズにバッチ結合させた。次いで、ビーズをカラムに移し、結合した物質をバッファーＢ（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３００ｍＭ イミダゾール、ｐＨ７．５）で溶出した。ＡＫＴ溶出フラクションをプールし、バッファーＣ（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５）を用いて３倍量に希釈した。該試料を濾過し、バッファーＣで予め平衡化した１０ｍＬのＱ−ＨＰカラム上で２ｍＬ／分にてクロマトグラフィーに付した。
Ｑ−ＨＰカラムを３カラム容量（ＣＶ）のバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄ（ここに、バッファーＤは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５である）を用いて段階溶出した。５ｍＬフラクションを回収した。ＡＫＴ含有フラクションをプールし、５ｍｌに濃縮した。次いで、該タンパク質を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５で予め平衡化した１２０ｍｌのＳｕｐｅｒｄｅｘ７５サイジングカラムに負荷した。２．５ｍＬのフラクションを回収した。
ＡＫＴ１溶出フラクションをプールし、アリコート（１ｍｌ）に分け、−８０℃で保存した。質量分析およびＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を用いて、精製した全長ＡＫＴ１の純度および同定を確認した。
全長（ＦＬ）ＡＫＴ２および（ＦＬ）ＡＫＴ３を同様に、単離および精製した。
【００９８】
全長ＡＫＴ酵素アッセイ
本発明の化合物をＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について、基質リン酸化アッセイにおいて試験した。該アッセイは、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する小型分子有機化合物の能力について試験する。基質リン酸化アッセイは、ＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを利用する。該方法は、ビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基上へのＡＴＰ由来のガンマ−ホスフェートの移動を触媒する単離酵素の能力を測定する。基質リン酸化は、下記の手法によって検出された。
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートで行った。１０ｎＭ活性化ＡＫＴ酵素を、５０ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、２０ｍＭ ＭｇＣｌ２、４μＭ ＡＴＰ、８μＭペプチド、０．０４μＣｉ［ｇ−３３Ｐ］ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴ、および１００％ＤＭＳＯ中における１μｌの試験化合物を含有するアッセイ容量２０μｌ中、室温で４０分間インキュベートした。５０μｌのＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋を含有しないＤｕｌｂｅｃｃｏ ＰＢＳ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０μＭ ＡＴＰ、２．５ｍｇ／ｍｌストレプトアビジンで被覆したＳＰＡビーズ）の添加によって、反応を停止した。プレートを密閉し、ビーズを一晩沈澱させ、次いで、プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）においてカウントした。
用量応答データをデータ換算式１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）
［式中、Ｕは未知の値であり、Ｃ１は、ＤＭＳＯについて得られた平均対照値であり、Ｃ２は、０．１Ｍ ＥＤＴＡについて得られた平均対照値である］
で算出した％対照として、化合物濃度に対してプロットした。データを、
ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））
［式中、Ｖｍａｘは、上位の漸近線であり、ＫはＩＣ５０である］
によって表される曲線にフィットさせる。
【００９９】
実施例１の化合物は、上記の全長ＡＫＴ酵素アッセイにおいて、ＩＣ５０（μＭ）活性がＦＬ ＡＫＴ１に対し０．００３μｍ、ＦＬ ＡＫＴ２に対し０．０２５μｍであることが明らかになった。
実施例２の化合物は、上記の全長ＡＫＴ酵素アッセイにおいて、ＩＣ５０（μＭ）活性がＦＬ ＡＫＴ１に対し０．００２μＭ、ＦＬ ＡＫＴ２に対し０．０１６μＭであることが明らかになった。
【０１００】
本発明の実施例１〜１８の化合物の腫瘍細胞系統および正常細胞系統に対する活性および溶解度を、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において調製された最も構造的に関連のある化合物であると考えられるものと比較した。詳細には、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１４０の化合物（化合物４−（１−エチル−７−｛［３−（４−モルホリニル）プロピル］オキシ｝−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｒという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１５１の化合物（化合物 １−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｓという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１５２の化合物（化合物 ４−（１−エチル−７−｛［２−（４−モルホリニル）エチル］オキシ｝−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｔという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１７の化合物（化合物 ４−［１−エチル−７−（ピペリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−フラザン−３−イルアミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｕという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１２７の化合物（化合物 ４−｛１−エチル−４−フェニル−７−［（３−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ−［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｖという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２１５の化合物（化合物 ４−［７−［（４−アミノブチル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｗという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２２２の化合物（化合物 ４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−［（３−アミノプロピル）オキシ］−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｘという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２２３の化合物（化合物 ４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（４−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｙという））、および国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２６５の化合物（化合物 ４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（｛２−［４−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミノ）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール（以下、化合物Ｚという））である。
化合物Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号に記載されるように調製することができる。
【０１０１】
細胞アッセイ：メチレンブルー成長阻害アッセイ
該アッセイに使用された腫瘍細胞系統は、ＢＴ４７４（ヒト乳癌）およびＬＮＣａＰ（前立腺癌のリンパ節転移）であった。ＨＦＦ（正常ヒト包皮繊維芽細胞）もまた、包含された。全細胞系統を、１０％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ２２４００−０７１）中３７℃にて、給湿５％ＣＯ２インキュベーター中で培養した。トリプシン／ＥＤＴＡを用いて細胞を採取し、血球計を用いてカウントし、９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ ３５−３０７５）中、１００μＬ／ウェルにて、下記の密度で播種した：ＢＴ４７４ １５，０００細胞／ウェル、ＬＮＣａＰ ５，０００細胞／ウェルおよびＨＦＦ ５，０００細胞／ウェル。ＤＭＳＯ中における化合物の１０ｍＭストックを９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ Ｃｏｒｎｉｎｇ ３３６３）において、９つの３倍希釈によってＤＭＳＯ中に連続希釈し、−８０℃で保存した。次の日、化合物希釈物を解凍し、各４μＬを６６２μＬのＲＰＭＩ１６４０＋１００μｇ／ｍＬゲンタマイシン中に移し、その結果、最終的に必要とされる試験濃度の２倍濃度になった。ＲＰＭＩ１６４０に希釈した化合物１００μＬを全細胞系統に加えた。対照を包含する全ウェル中におけるＤＭＳＯの最終濃度は、０．３％であった。細胞を３７℃にて、５％ＣＯ２中で３日間インキュベートした。培地を吸引によって除去した。細胞量を、８０μＬメチレンブルー（Ｓｉｇｍａ Ｍ９１４０、５０：５０のエタノール：水中における０．５％）で細胞を染色し、室温で１時間インキュベートすることによって概算した。染料を吸引し、プレートを水に浸漬することによってリンスし、次いで、風乾した。１００μＬの可溶化溶液（ＰＢＳ中における１％ Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム塩、Ｓｉｇｍａ Ｌ５１２５）を加え、室温で少なくとも３０分間インキュベートすることによって、細胞から染色液を遊離させた。プレートを振盪し、６２０ｎｍでの光学密度をマイクロプレートリーダーにおいて測定した。細胞成長の阻害パーセントをビヒクルで処理した対照ウェルに基づいて算出した。細胞成長の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ５０）は、非線形回帰（Ｌｅｖｅｎｂｅｒｇ−Ｍａｒｑｕａｄｔ）および等式 ｙ＝Ｖｍａｘ＊（１−（ｘ＾ｎ／Ｋ＾ｎ＋ｘ＾ｎ）））＋Ｙ２を用いて求められた。［参考文献：Ｍａｇｅｒ，Ｍ．Ｅ．（１９７２） Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ］
【０１０２】
【表１】
【０１０３】
本発明の範囲内の医薬上活性な化合物は、必要とする哺乳動物、特にヒトにおいて、ＡＫＴ阻害剤として有用である。
したがって、本発明は、有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物もしくはプロドラッグを投与することを特徴とする、癌、関節炎、およびＡＫＴ阻害を必要とする他の状態を治療する方法を提供する。式（Ｉ）の化合物は、また、その明らかとなったＡｋｔ阻害剤として作用する能力のために、上記の病態を治療する方法に提供される。該薬物は、必要とする患者に、限定するものではないが、静脈内、筋内、経口、皮下、皮内および非経口を包含するいずれかの都合のよい投与経路によって投与すればよい。
【０１０４】
本発明の医薬上活性な化合物は、カプセル、錠剤、または注射製剤などの都合のよい投与形態中に組み込まれる。固形または液体医薬担体が用いられる。固形担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸を包含する。液体担体は、シロップ、落花生油、オリーブ油、セーライン、および水を包含する。同様に、担体は、いずれかの徐放性材料、例えば、単独またはワックスと組み合わせたモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを包含する。固形担体の量は、幅広く変化するが、好ましくは、投与単位当たり約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、例えば、製剤はシロップ、エリキシル、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌注射液、例えば、アンプル、または水性もしくは非水性液体懸濁の形態である。
【０１０５】
医薬製剤は、材料を適宜、錠剤形態の場合、混合、造粒、および圧縮（必要に応じ）し、または混合、充填および溶解して所望の経口または非経口製品を得ることを含む製薬分野の化学者の従来の技術にしたがって製造される。
上記の医薬投与単位中における本発明の医薬上活性な化合物の用量は、好ましくは、活性化合物量で０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇから選択される、効力のある非毒性の量である。Ａｋｔ阻害剤を必要とするヒト患者を治療する場合、選択された用量は、好ましくは、１日に１〜６回、経口または非経口投与される。非経口投与の好ましい形態は、局所、直腸、経皮、注射、および点滴による連続的投与を包含する。ヒトへの投与のための経口および／または非経口投与単位は、好ましくは、０．０５〜３５００ｍｇの活性化合物を含有する。
【０１０６】
投与されるべき最適な投与量は、当業者によって容易に決定され、使用される特定のＡｋｔ阻害剤、製剤の強度、投与様式、および病態の進行度によって変化する。患者の年齢、体重、食事、および投与時間を包含する治療されている特定の患者に依存する付加的な因子は、投与量の調整の必要をもたらす。
【０１０７】
ヒトを包含する哺乳動物におけるＡｋｔ阻害活性を誘導する本発明の方法は、かかる活性を必要とする対象に、本発明の医薬上活性な化合物の有効なＡｋｔ阻害量を投与することを特徴とする。
本発明は、また、Ａｋｔ阻害剤として有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０８】
本発明は、また、治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、癌の治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、関節炎の治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含むＡｋｔ阻害剤として有用な医薬組成物を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含む癌の治療において有用な医薬組成物を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含む関節炎の治療において有用な医薬組成物を提供する。
【０１０９】
本発明の化合物を本発明にしたがって投与する場合、許容できない毒物学的影響は予想されない。
さらに、本発明の医薬上活性な化合物は、さらなる活性成分、例えば、癌または関節炎を治療することが知られている他の化合物、またはＡｋｔ阻害剤と組み合わせて使用すると有用であることが知られている化合物と同時投与することができる。
【０１１０】
さらに工夫することなく、当業者は、上記の記載を用いて、本発明をその完全な範囲まで利用することができると確信する。
【実施例】
【０１１１】
したがって、下記の実施例は、単なる例示として解釈されるべきものであり、いかなる方法においても、本発明の範囲を限定するものではない。
実験詳細
実施例１〜１８の化合物は、スキーム１または類似の方法によって容易に製造される。
【０１１２】
中間体ＶＩＩ
【化４】
【０１１３】
２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−オールの調製
ａ）５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ４−エチル−ピリジン−３，４−ジアミン（ＩＩ）
３−ブロモ−５−ニトロピリジン−４−イルアミン（Ｉ，７００ｇ，２．８６ｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（７Ｌ）中に溶解し、８５℃に加熱した。塩化スズ（ＩＩ）（１６２６ｇ，８．５８ｍｏｌ）を徐々に加えた。反応物を１時間熱還流し、次いで、一晩かけて周囲温度に冷却した。得られた黄色沈殿物を濾過によって収集し、氷水（５Ｌ）中に懸濁し、混合物を１２Ｎ ＮａＯＨでｐＨ１２に調整した。得られた溶液をＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ４Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物（ＩＩ）を得た（５５０ｇ、７７％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２５０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１４】
ｂ）Ｎ−［５−ブロモ−２−クロロ−４−（エチルアミノ）−３−ピリジニル］−２−シアノアセトアミド（ＩＩＩ）
５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ４−エチル−ピリジン−３，４−ジアミン（ＩＩ，５５０ｇ，２．２１ｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５．５Ｌ）中溶液に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（６３４．５ｇ，３．３１ｍｏｌ）、シアノ酢酸（２８２ｇ，３．３１ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（８９７ｇ，８．８４ｍｏｌ）を加えた。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩およびシアノ酢酸の添加時に、有意な発熱（〜２０℃）が観察された。周囲温度で２時間攪拌後、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣を温かいＥｔＯＡｃ（４０℃，２０Ｌ）および水（４０℃，８Ｌ）で抽出した。水相をＥｔＯＡｃ（１０Ｌ）を加えて洗浄し、合わせた有機抽出物を水（１０Ｌ）で洗浄した。有機抽出物を減圧下で濃縮してスラリーを得、濾過した。固体をＥｔＯＡｃで洗浄し、乾燥させて、所望の化合物（ＩＩＩ）を白色結晶性固体として得た（５３４ｇ、７６％収率）。さらに精製することなく、これを次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋） ｍ／ｚ ３１７（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１５】
ｃ）（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−アセトニトリル（Ｖ）
Ｎ−［５−ブロモ−２−クロロ−４−（エチルアミノ）−３−ピリジニル］−２−シアノアセトアミドＩＩＩ（４５８ｇ，１．４５ｍｏｌ）の氷酢酸（４．６Ｌ）中溶液を１００℃に加熱した。３時間後、ＬＣ／ＭＳ分析が、（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）アセトニトリル（ＩＶ）への変換が完了したことを示した。周囲温度に冷却後、反応物に硝酸ナトリウム（２３０ｇ，３．３４ｍｏｌ）を徐々に加えた。〜１０℃の発熱と共に、激しい気体発生および泡立ちが観察された。周囲温度で１６時間攪拌後、固体を濾過によって収集し、一定重量になるまで乾燥させて、所望の生成物（Ｖ）を薄黄色固体として得た（５４５ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋） ｍ／ｚ ３２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１６】
ｄ）４−（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン（ＶＩ）
（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−アセトニトリル（Ｖ，５４５ｇ，１．４５ｍｏｌ）のジオキサン（５Ｌ）中混合物に、トリエチルアミン（１Ｌ）およびヒドロキシルアミン（１４３ｇ，水中５５％）を加えた。反応物を６時間熱還流した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して茶色固体を得た。固体をメタノール（１Ｌ）中に懸濁し、懸濁液を６５℃で０．５時間攪拌した。固体を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の化合物（ＶＩ）を得た（３２１ｇ、７０％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３４３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１７】
ｅ）２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−オール（ＶＩＩ）
４−（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン（ＶＩ，５０ｇ，０．１４ｍｏｌ）のＴＨＦ（１Ｌ）中懸濁液を乾燥−氷／アセトン浴中で、内温が−７５℃以下になるまで冷却した。塩化イソプロピルマグネシウム（２２５ｍＬ，エーテル中２Ｍ，０．４５ｍｏｌ）を、反応温度が−７０℃以下に維持される速度でゆっくりと加えた。さらに１０分後、ホウ酸トリメチル（５４ｍＬ，０．４８ｍｏｌ）を加え、反応を乾燥−氷／アセトン浴中で１時間維持した。該浴を取り外し、反応物を周囲温度に戻した。１８時間後、得られた黄色懸濁液を０℃に冷却した。３０％過酸化水素（２５０ｍＬ）および３Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）の溶液を反応温度が４０℃以下に維持されるような速度で加えた。次いで、該氷浴を取り外し、反応物を周囲温度で２時間、激しく攪拌した。大量の有機溶媒を減圧下で除去し、水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。得られた懸濁液を３０分間攪拌後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えた。さらに１時間攪拌後、固体を濾過によって収集した。濾過ケークを水、酢酸エチル、トルエンおよび酢酸エチルで連続的に洗浄した。固体を一定重量になるまで乾燥させて、所望の化合物（ＶＩＩ）を薄黄色固体として得た（３５．９ｇ、８８％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２８１．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１８】
実施例１
【化５】
【０１１９】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−｛７−［（３−ブロモプロピル）オキシ］−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
中間体ＶＩＩ（１．９８ｇ，７．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、炭酸セシウム（７．０１ｇ，２１．５ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、周囲温度にて、１，３−ジブロモプロパン（３．７０ｍＬ，３６．２ｍｍｏｌ）を加えた。さらに３０分後、反応物を６０℃で２０時間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をテトラヒドロフランに溶解した。ヘキサンを加え、得られた沈殿物を収集し、乾燥させて、所望の化合物を得た（２．０４ｇ、７２％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０１．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２０】
ｂ）４−（４−クロロ−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）（０．３０ｇ，０．７５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、ピペリジン（０．４０ｍＬ，４．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で２０時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、得られた沈殿物を濾過によって収集した。濾液を真空下で濃縮し、残渣をエタノールおよびへキサンでトリチュレートした。得られた沈殿物を濾過によって収集し、合わせた沈殿物を乾燥させて、所望の物質を得た（０．２９ｇ、９５％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０６．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２１】
ｃ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例１（ｂ）の化合物（０．２９ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．３５ｍＬ，３．５８ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１４ｇ，０．１２ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２２ｍＬ，１．４７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２２ｍＬ，１．５８ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た（０．２７ｇ）。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．１８ｇ、５６％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５４．２（Ｍ＋Ｈ）＋ 分析：Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ３２ＨＣｌ・２Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，４９．１１；Ｈ，６．６３；Ｎ，１７．４３。実測値：Ｃ，４９．２５；Ｈ，６．３４；Ｎ，１７．４３。
【０１２２】
実施例２
【化６】
【０１２３】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−（４−クロロ−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）の化合物（０．３１ｇ，０．７６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、ピロリジン（０．３２ｍＬ，３．９２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で２０時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、得られた沈澱を濾過によって収集した。濾液を真空下で濃縮し、残渣をエタノールおよびへキサンでトリチュレートした。得られた沈殿物を濾過によって収集し、合わせた沈澱物を乾燥させて、所望の物質を得た（０．２８ｇ、９３％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２４】
ｂ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例２（ａ）の化合物（０．２７ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．３５ｍＬ，３．５８ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１７ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２５ｍＬ，１．６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２５ｍＬ，１．８０ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．２１ｇ、６７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．４（Ｍ＋Ｈ）＋ 分析：Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ３・２ＨＣｌ・１．５Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，４８．９８；Ｈ，６．３５；Ｎ，１８．１７。実測値：Ｃ，４８．６４；Ｈ，６．１０；Ｎ，１８．０５。
【０１２５】
実施例３
【化７】
【０１２６】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−（４−クロロ−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）の化合物（０．３１ｇ，０．７６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、シクロペンチルアミン（０．４０ｍＬ，４．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、得られた沈殿物を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の物質を得た（０．２６ｇ、８２％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０６．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２７】
ｂ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例３（ａ）の化合物（０．３１ｇ，０．７７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．４０ｍＬ，４．０９ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１９ｇ，０．１６ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２５ｍＬ，１．６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２５ｍＬ，１．８０ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．２１ｇ、５９％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５４．２（Ｍ＋Ｈ）＋ 分析：Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ３・２ＨＣｌ・１．５Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，４９．９１；Ｈ，６．５６；Ｎ，１７．７１。実測値：Ｃ，５０．３０；Ｈ，６．２４；Ｎ，１７．８５。
【０１２８】
実施例４
【化８】
【０１２９】
４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）［（１Ｒ）−１−（２−ヒドロキシエチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
（３Ｒ）−３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−４−メチルペンタン酸（１．０ｇ，４．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液に、０℃にて、ボラン（１９．２ｍＬ，ＴＨＦ中１Ｍ，１９．２ｍｍｏｌ）を１５分かけて加えた。反応物を−１５℃で５５時間維持し、次いで０℃に温め、９：１ メタノール／酢酸（１０ｍＬ）の滴下によってクエンチした。減圧下で溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルと１Ｎ ＨＣｌの間に分配した。水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を水、１Ｎ ＮａＯＨ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得た（０．５５ｇ、５９％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。
【０１３０】
ｂ）［（１Ｒ）−１−（２−ブロモエチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例４（ａ）の化合物（０．５１ｇ，２．４０ｍｍｏｌ）およびＣＢｒ４（１．６０ｇ，４．７０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍＬ）中溶液に、−２０℃にて、ＰＰｈ３（１．３０ｇ，４．９０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液を滴下した。反応物を周囲温度に温め、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の化合物を得た（０．３３ｇ、５１％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９３（ｄｄ，Ｊ＝１１．８７，６．８２Ｈｚ，６Ｈ）１．４４−１．５２（ｍ，９Ｈ）１．７７（ｄｄ，Ｊ＝１２．７６，６．４４Ｈｚ，１Ｈ）１．８７（ｍ，１Ｈ）２．０７（ｍ，１Ｈ）３．３９−３．５０（ｍ，２Ｈ）３．５８（ｍ，１Ｈ）４．３５（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．１１Ｈｚ，１Ｈ）
【０１３１】
ｃ）［（１Ｒ）−１−（２−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝エチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
中間体ＶＩＩの化合物（０．３３ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）中溶液に、無水炭酸セシウム（１．１６ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）および実施例４（ｂ）の化合物（０．３３ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３５℃で２０時間加熱した。周囲温度に冷却後、飽和塩化アンモニウムを加え、混合物を酢酸エチルで抽出板。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）によって、所望の化合物を得た（０．５７ｇ（定量的））。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３２】
ｄ）４−［７−［（３−アミノ−４−メチルペンチル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例４（ｃ）の化合物（０．５７ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）、ジオキサン（３０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．５３ｍＬ，０．３６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．４９ｍＬ，３．６０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０５ｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０２ｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．３０ｇ，３．６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．１３ｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を入れた。該反応容器を密閉し、８０℃で１６時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却した後、飽和ＮＨ４Ｃｌを加え、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）に付して、［１−（２−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝エチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチルを得た。これをメタノール（５ｍＬ）中に溶解し、周囲温度で２時間、ジエチルエーテル中における飽和ＨＣｌ（４０ｍＬ）で処理した。得られた沈殿物を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を得た（０．３８ｇ、７５％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３３】
実施例５
【化９】
【０１３４】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロブチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−（７−｛［３−（１−アゼチジニル）プロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）の化合物（０．２４ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、シクロブチルアミン（０．２７ｍＬ，３．２２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、溶媒を真空下で除去し、残渣をエタノールおよびヘキサンでトリチュレートした。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の物質を得た（０．２０ｇ、８５％収率）。これを精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３５】
ｂ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（１−アゼチジニル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例５（ａ）の化合物（０．２０ｇ，０．５２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．３０ｍＬ，３．０７ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１３ｇ，０．１１ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２０ｍＬ，１．３４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２０ｍＬ，１．４４ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−８０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．０７ｇ、２９％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３６】
実施例６
【化１０】
【０１３７】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩の調製
ａ）４−（７−｛［（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチルプロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ポリマー結合型トリフェニルホスフィン（４．１７ｇ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ，６．６７ｍｍｏｌ）および（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチル−１−プロパノール（１．０２ｇ，６．６７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中懸濁液に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．９２ｍＬ，６．１４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を滴下した。３０分後、中間体化合物ＶＩＩ（０．７５ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中溶液をゆっくりと加えた。反応混合物を１０℃に２時間温めた。反応物を濾過し、消費した樹脂をＣＨ２Ｃｌ２およびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルおよびヘキサンでトリチュレートして、所望の物質を得た（１．６ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３８】
ｂ）４−（４−クロロ−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
厚壁圧力容器に実施例６（ａ）の化合物（０．１７ｇ，０．４２ｍｍｏｌ）、シクロプロピルアミン（０．４１ｍＬ，５．８０ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（３ｍＬ）を入れた。反応容器を密閉し、６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物をオフホワイト色の固体として得た（０．０８ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３９】
ｃ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩
厚壁圧力容器に実施例６（ｂ）の化合物（０．０８ｇ，０．２１ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（５ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（５ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．１０ｍＬ，０．６７ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１０ｍＬ，０．７２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ，１．０３ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０１ｇ，０．００７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした後、該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物を黄色固体として得た（０．０８ｇ、５７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４０】
実施例７
【化１１】
【０１４１】
４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩の調製
ａ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２，２−ジメチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
ポリマー結合型トリフェニルホスフィン（３．１２ｇ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ，５．０ｍｍｏｌ）および（３−ヒドロキシ−２，２−ジメチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（０．８１ｇ，４．００ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）中懸濁液に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．６６ｍＬ，４．４０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を滴下した。５０分後、中間体ＶＩＩの化合物（０．５６ｇ，２．００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９０ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中溶液をゆっくりと加えた。反応混合物を周囲温度に温め、一晩攪拌した。反応物を濾過し、消費した樹脂をＣＨ２Ｃｌ２およびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（１０−４０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の生成物を得た（０．３４ｇ、４０％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４２】
ｂ）４−｛７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例７（ａ）の化合物（０．１４ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）に、３０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）を加えた。周囲温度で１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物を白色固体として得た（０．１３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３６６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４３】
ｃ）４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩
厚壁圧力容器に実施例７（ｂ）の化合物（０．１３ｇ，０．３５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（５ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（５ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．１０ｍＬ，０．６７ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１０ｍＬ，０．７２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ，１．０３ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０１ｇ，０．００７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした後、該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、標題化合物を薄黄色固体として得た（０．１２ｇ、５２％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４４】
実施例８
【化１２】
【０１４５】
４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−（７−｛［（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチルプロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ジクロロメタン（１００ｍＬ）中におけるポリマー結合型トリフェニルホスフィン（４．１７ｇ，６．６７ｍｍｏｌ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ負荷）および（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチル−１−プロパノール（０．６９ｍＬ，６．６７ｍｍｏｌ）に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．９２ｍＬ，６．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液を滴下した。反応物を室温に温めた。室温で５０分後、中間体ＶＩＩ（０．７５ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液を添加漏斗を介して反応混合物に加えた。反応物をさらに２時間攪拌した。樹脂を濾過によって除去し、ジクロロメタンおよびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。酢酸エチルおよびヘキサンでのトリチュレーションにより、所望の生成物を薄黄色固体として得た（１．６０ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４６】
ｂ）（（２Ｓ）−３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２−メチルプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例８（ａ）の化合物（０．５０ｇ，０．８３ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．９０ｇ，４．１５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．３５ｇ，４．１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中混合物を６０℃で２時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。次いで、有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得た。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋
【０１４７】
ｃ）４−（７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例８（ｂ）の化合物に、ＣＨ２Ｃｌ２中における５０％ＴＦＡ（６ｍＬ）を加えた。室温で１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物を白色固体として得た（８６ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３５２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４８】
ｄ）４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に実施例８（ｃ）の化合物（８６ｍｇ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（１００μＬ）、トリエチルアミン（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、所望の化合物をオフホワイト色固体として得た（５８ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４００（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４９】
実施例９
【化１３】
【０１５０】
４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）［（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
（３Ｓ）−３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸（１．００ｇ，４．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３５ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、ボラン−テトラヒドロフラン錯体（ＴＨＦ中における１．０Ｍ溶液，２５ｍＬ，２５．０ｍｍｏｌ）をシリンジを介して２分間かけて加えた。得られた反応混合物を次いで、０℃で８時間攪拌した。メタノールおよび酢酸（９：１，１５ｍＬ）の混合物を注意深く添加することによって、反応をクエンチした。反応物を周囲温度に温め、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（７５ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ ＨＣｌ（２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で連続的に洗浄した。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮して、所望の生成物を得（０．５３ｇ）、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。
【０１５１】
ｂ）［（１Ｓ）−３−ブロモ−１−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ａ）の化合物（０．５３ｇ，２．８１ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（１．１２ｇ，３．３７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、固体トリフェニルホスフィン（０．９２ｇ，３．５１ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で１．５時間後、溶媒を減圧下で除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（４０：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ，シリカゲル）によって単離して、所望の物質を白色結晶性固体として得た（０．４７ｇ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１８（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．９１−２．１３（ｍ，２Ｈ），３．３５−３．５１（ｍ，２Ｈ），３．７２−３．９１（ｍ，１Ｈ），４．２５−４．５０（ｍ，１Ｈ）
【０１５２】
ｃ）（（１Ｓ）−３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−メチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｂ）の化合物（０．４６ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、中間体ＶＩＩ（０．５２ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．５０ｇ，４．６１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１７ｍＬ）中混合物を窒素下、３５℃で１６時間攪拌した。次いで、該混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空下で濃縮して、粗生成物を得（０．８４ｇ）、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５３】
ｄ）（（１Ｓ）−３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−メチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｃ）の化合物（０．８３ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．４５ｍＬ，４．６１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５４ｍＬ，１１．１ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．５５ｍＬ，３．６９ｍｍｏｌ）、亜鉛粉末（０．１２ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．２３ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１１ｇ，０．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中混合物を密閉フラスコ中、窒素雰囲気下、８０℃で２．５時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、水（１５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３ｘ７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（３０：１〜２０：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ，シリカゲル）、次いで、エーテル／ヘキサンからの結晶化により、所望の物質をオフホワイト色固体として得た（０．７４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５００．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５４】
ｅ）４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例９（ｄ）の化合物（０．１５ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）中溶液を周囲温度で、ＨＣｌの１，４−ジオキサン中溶液（４Ｎ，２．２５ｍＬ，９．０ｍｍｏｌ）で処理した。１８時間攪拌後、エーテルおよびヘキサンを加えた。得られた沈殿物を濾過によって単離し、乾燥エーテルで洗浄して、標題化合物を薄黄褐色固体として得た（９４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４００．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５５】
実施例１０
【化１４】
【０１５６】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−｛７−［（３−ブロモプロピル）オキシ］−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
中間体ＶＩＩ（１．７９ｇ，６．３８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７５ｍＬ）中溶液に、炭酸セシウム（６．３４ｇ，１９．４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、１，３−ジブロモプロパン（３．５０ｍＬ，３４．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で１８時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。ＴＨＦおよびヘキサンからのトリチュレーションにより、所望の物質を固体として得た（１．９２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０１．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５７】
ｂ）４−［４−クロロ−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１０（ａ）の化合物（０．３３ｇ，０．８２ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中溶液に、シクロプロピルメチルアミン（０．３１ｇ，４．３２ｍｍｏｌ）を加えた。６０℃で１８時間加熱後、反応物を冷却し、溶媒を減圧下で除去した。ＴＨＦおよびヘキサンからのトリチュレーションにより、所望の物質を固体として得た（０．３４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５８】
ｃ）４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に脱気したＤＭＳＯ（２ｍＬ）、ＤＢＵ（０．２８ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（０．２０ｇ，１．９８ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．４３ｇ，５．１０ｍｍｏｌ）、実施例１０（ｂ）の化合物（０．３４ｇ，０．８７ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．２１ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を入れた。反応容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。混合物を焼結ガラス漏斗を通過させ、溶媒を濾液から減圧下で除去した。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）に付して、所望の化合物を固体として得た（０．１２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５９】
実施例１１
【化１５】
【０１６０】
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ペンチル
ＤＭＦ（５ｍＬ）中における中間体ＶＩＩ（０．２８ｇ，１．００ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．６５ｇ，２．００ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−ペンチル（０．６４ｇ，１．５０ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で２時間攪拌した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５３５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６１】
ｂ）［２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ペンチル］イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１１（ａ）の化合物（０．５ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．６５ｇ，３．０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．９８ｇ，３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中混合物を６０℃で１．５時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（５％〜３０％ＥｔＯＡＣ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の化合物を白色固体として得た（０．１３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６２】
ｃ）４−（７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１１（ｂ）の化合物（０．１３ｇ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中における３０％ＴＦＡを加えた。１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって、所望の化合物を白色固体として得た（８４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６３】
ｄ）４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１１（ｃ）の化合物（８４ｍｇ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．１０ｍＬ）、亜鉛粉末（５ｍｇ）、ＮａＩ（５ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）のＤＭＳＯ（３ｍＬ）中混合物を密閉フラスコ中、窒素雰囲気下、８０℃で３時間加熱した。１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって、所望の化合物を黄色固体として得た（６６ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６４】
実施例１２
【化１６】
【０１６５】
４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−メチルペンチル
実施例１１（ａ）の化合物の製法と類似の方法で、中間体ＶＩＩ（０．５０ｇ，１．７８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．８７ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸４−メチル−２−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）ペンチル（１．１７ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）から、所望の化合物を白色固体として得た（０．４４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５４９（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６６】
ｂ）４−（７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１１（ｂ）および１１（ｃ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１２（ａ）の化合物（０．１３ｇ，０．２３ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．２９ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．４５ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）から、所望の物質を固体として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６７】
ｃ）４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１１（ｄ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１２（ｂ）の化合物（８４ｍｇ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．１５ｍＬ）、亜鉛粉末（５ｍｇ）、ＮａＩ（５ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）から、所望の化合物を白色固体として得た（８１ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６８】
実施例１３
【化１７】
【０１６９】
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ヘキシル
実施例１１（ａ）の化合物の製法と類似の方法で、中間体ＶＩＩ（０．２０ｇ，０．７１ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．４８ｇ，１．４２ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−ヘキシル（０．４７ｇ，１．０７ｍｍｏｌ）から所望の化合物を得、これをさらに精製することなく次工程に用いた。
【０１７０】
ｂ）［２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ヘキシル］イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１１（ｂ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１３（ａ）の化合物、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．９２ｇ，４．２６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．３８ｇ，４．２６ｍｍｏｌ）から、所望の化合物を蝋状白色固体として得た（０．３８ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４９４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７１】
ｃ）４−（７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１１（ｃ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１３（ｂ）の化合物（０．３８ｇ）から所望の化合物を白色固体として得た（０．１３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７２】
ｄ）４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１１（ｄ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１３（ｃ）の化合物（０．１３ｇ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．１５ｍＬ）、亜鉛粉末（５ｍｇ）、ＮａＩ（５ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）から、所望の化合物を黄色固体として得た（１１３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７３】
実施例１４
【化１８】
【０１７４】
（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）１，１−ジメチルエチル［３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］
中間体ＶＩＩの化合物（３００ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）、［３−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（３９８ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８７１ｍｇ，２．６７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）中混合物を窒素下、３７℃で１６時間攪拌した。次いで、混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ１５ｍＬ）で洗浄した。合わせた水性洗浄液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機抽出物を次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空下で濃縮して粗生成物を得（＞６００ｍｇ）、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５３８．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７５】
ｂ）［３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例１４（ａ）の化合物（５７５ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．２６ｍＬ，２．６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．８９ｍＬ，６．４１ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．３２ｍＬ，２．１４ｍｍｏｌ）、亜鉛粉末（７０ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（１６０ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６２ｍｇ，５３．４μｍｏｌ）の混合物を密閉管中、窒素下、８１℃で２．５時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、水（９０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで、合わせた水性洗浄液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機抽出物を次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空下で濃縮した。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（３０：１〜２０：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）により、所望の化合物を得た（５８０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５８６．３（Ｍ＋Ｈ）＋
４５０ｍｇのラセミ混合物を分取キラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム，２１ｍｍ内径ｘ２５０ｍｍ，１５ｍＬ／分，９０：５：５：０．１ ヘプタン：エタノール：メタノール：イソプロピルアミン移動相，ＵＶ検出２５４ｎｍ）に付すことによって、エナンチオマーを単離して、Ｅ−１（保持時間 １７分，１８１ｍｇ）およびＥ２（保持時間 ２２分，１５８ｍｇ）を得た。
【０１７６】
Ｅ１：１８１ｍｇ。キラルＨＰＬＣ分析により、９９．９％ｅｅ（ｔＲ＝１７分，Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム，２１ｍｍ内径 ｘ ２５０ｍｍ，１５ｍＬ／分，９０：５：５：０．１ ヘプタン：エタノール：メタノール：イソプロピルアミン移動相，ＵＶ検出 ２５４ｎｍ）。
Ｅ２：１５８ｍｇ。キラルＨＰＬＣ分析により、９７．８％ｅｅ（ｔＲ＝２２分，Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム，２１ｍｍ内径 ｘ ２５０ｍｍ，１５ｍＬ／分，９０：５：５：０．１ ヘプタン：エタノール：メタノール：イソプロピルアミン移動相，ＵＶ検出 ２５４ｎｍ）。
【０１７７】
ｃ）（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１４（ｂ）の化合物Ｅ２（１５８ｍｇ，０．２７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）中溶液を周囲温度で、塩酸（１，４−ジオキサン中における４Ｎ溶液，２ｍＬ，８．０ｍｍｏｌ）で１６時間処理した。得られた沈澱を濾過によって除去し、真空下、６０℃で１時間乾燥させて、標題物質をオフホワイト色固体として得た（１３３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４８６．５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７８】
実施例１５
【化１９】
【０１７９】
４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）｛［１−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）シクロプロピル］メチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
ジクロロメタン（３０ｍＬ）中におけるポリマー結合型トリフェニルホスフィン（１．５６ｇ，２．５０ｍｍｏｌ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ負荷）および｛［１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル］メチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（０．４８ｍＬ，２．３２ｍｍｏｌ）に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．３３ｍＬ，２．２０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液を滴下した。反応物を室温に温めた。室温で５０分後、添加漏斗を介して中間体ＶＩＩ（０．２８ｇ，１．００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）中溶液を反応混合物に加えた。反応物を一晩攪拌した。樹脂を濾過によって除去し、ジクロロメタンおよびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）によって、所望の化合物を得た（０．５０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８０】
ｂ）４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１５（ａ）の化合物（０．５０ｇ）に、４０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）を加えた。室温で１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取逆相ＨＰＬＣ（ＹＭＣ／ＯＤＳ−Ａカラム，５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって、所望の化合物を白色固体として得た（０．１７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３６４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８１】
ｃ）４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に、実施例１５（ｂ）の化合物（１６６ｍｇ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（１００μＬ）、トリエチルアミン（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を加えた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、８０℃で３．５時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、所望の化合物をオフホワイト色固体として得た（１３０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８２】
実施例１６
【化２０】
【０１８３】
４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝ヘキシル
中間体ＶＩＩの化合物（１５０ｍｇ，０．５３ｍｍｏｌ）、４−メチルベンゼンスルホン酸３−ヒドロキシヘキシル（２１６ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）（１，３−ヘキサンジオールおよび塩化ｐ−トリルスルホニルから調製された）、トリフェニルホスフィン（０．１３６ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中懸濁液に、室温で、ＤＩＡＤ（０．１２５ｍＬ，０．６４ｍｍｏｌ）を滴下した。１．５時間後、さらにトリフェニルホスフィン（０．１３６ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（０．１２５ｍＬ，０．６４ｍｍｏｌ）を加えた。さらに１．５時間後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）によって、所望の物質を濃黄色ゴムとして得た（０．５７ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５３５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８４】
ｂ）４−（７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ＤＭＦ（４ｍＬ）中における実施例１６（ａ）の化合物（２３５ｍｇ）に、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（４３４ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（７０５ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃に３時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄した後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を４０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）で処理した。１時間後、再び溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ／ＯＤＳ−Ａカラム，５０ｍｍｘ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）により、所望の化合物を白色固体としてとして得た（１４１ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８５】
ｃ）４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に、実施例１６（ｃ）の化合物（１４１ｍｇ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（１００μＬ）、トリエチルアミン（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍｘ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、標題化合物をオフホワイト色固体として得た（１１０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８６】
実施例１７
【化２１】
【０１８７】
４−［７−［（３−アミノ−２−（−）−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）２−フルオロ−１，３−プロパンジオール
水素化ホウ素ナトリウム（０．７６ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、塩化カルシウム（１．７５ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温に温め、１時間攪拌した。次いで、混合物を−１０℃に冷却し、フルオロプロパン二酸ジメチル（２．００ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応物を室温に温め、１０時間攪拌した。次いで、反応物を−１０℃に冷却し、濃ＨＣｌ（２．５ｍＬ）をゆっくりと加えた。反応物を濾過し、酢酸エチル（３ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。減圧下、合わせた有機濾液から溶媒を除去して、所望の物質を油として得た（１．５０ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ９５．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８８】
ｂ）ビス（４−メチルベンゼンスルホン酸）２−フルオロ−１，３−プロパンジイル
実施例１７（ａ）の化合物（１．５０ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）のピリジン（２０ｍＬ）中攪拌溶液に、−１０℃にて、塩化４−メチルベンゼンスルホニル（７．６０ｇ，４０．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温に温め、１２時間攪拌した。該溶液を１Ｎ ＨＣｌで洗浄し、酢酸エチル（３ｘ２５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（０〜７０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の化合物を得た（１．２０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０３．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８９】
ｃ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−２−フルオロプロピル
実施例１７（ｂ）の化合物（０．３０ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．２０ｇ，０．８４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．３７ｇ，１．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）中混合物を窒素下、５０℃で１６時間攪拌した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。該有機溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、所望のラセミ生成物を得た（０．１９ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４８．２（Ｍ＋Ｈ）＋
該エナンチオマーを、分取キラルＨＰＬＣ（４インチばね付きｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ（２０ミクロン）カラム；１００％メタノール）によって単離した。
Ｅ１：キラルＨＰＬＣ分析により、９９．５％ｅｅ；
［α］２１Ｄ＋１１．１（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）
Ｅ２：キラルＨＰＬＣ分析により、９８％ｅｅ；
［α］２１Ｄ−１０．６（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）
【０１９０】
ｄ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２−フルオロプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１７（ｃ）の化合物（Ｅ２，０．５０ｇ，１．１２ｍｍｏｌ）、中間体ＶＩＩの化合物（０．３０ｇ，１．１０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．５５ｇ，１．７０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）中混合物を窒素下、５０℃で１６時間攪拌した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、次いで、水（３ｘ１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＯＤＳ−Ａカラム，３０ｍｍ内径ｘ７５ｍｍ，２０ｍＬ／分，勾配，Ａ：水−０．１％トリフルオロ酢酸，Ｂ：アセトニトリル−０．１％トリフルオロ酢酸，１２分間で１０−９０％アセトニトリル，ＵＶ検出 ２５４ｎｍ）により、所望の化合物をオフホワイト色固体として得た（０．６０ｇ、９２％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５５５．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９１】
ｅ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２−フルオロプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
厚壁圧力容器に、実施例１７（ｄ）の化合物（０．１４ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０２ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０４ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２０ｍＬ，１．３２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１５ｍＬ，１．０７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．２０ｍＬ，２．０７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（５ｍＬ）中における（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０４ｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を入れた。窒素で１０分間パージした後、反応容器を密閉し、８０℃で２．５時間加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、薄黄色残渣を得た。該粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０−１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３，シリカゲル）に付して、所望の化合物を薄黄色固体として得た（０．１０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ６０４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９２】
ｆ）４−［７−［（３−アミノ−２−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１７（ｅ）の化合物（０．４８ｇ，０．７９ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）中溶液に、メタノール中における４Ｎ ＨＣｌ（３．５ｍＬ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度で３時間後、溶媒を減圧下で除去した。残渣をジクロロメタンでトリチュレートし、固体を濾過によって収集して、標題化合物を薄黄色固体として得た（０．２７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９３】
実施例１８
【化２２】
【０１９４】
４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）３−シクロヘキシル−３−ヒドロキシプロピル−４−メチルベンゼンスルホネート
ＴＨＦ（７５ｍＬ）中における３−シクロヘキシル−３−オキソ−プロピオン酸エチルエステル（１２．５ｇ，１２．６３ｍｍｏｌ）を０℃に冷却した。水素化アルミニウムリチウムのＴＨＦ中溶液（１５ｍＬ，３０ｍｍｏｌ，ＴＨＦ中２Ｍ）を注意深く加え、反応物を一晩かけて周囲温度に戻した。反応を水（１．２ｍＬ）、１５％水性ＮａＯＨ（１．２ｍＬ）および水（３．６ｍＬ）の連続的添加によってクエンチした。該懸濁液を室温で１時間よく攪拌した。固体を濾過によって除去した。溶媒を濾液から減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）によって、１−シクロヘキシル−１，３−プロパンジオールを無色油として得た（０．７６ｇ）。
１−シクロヘキシル−１，３−プロパンジオール（０．７６ｇ，４．８２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．１ｍＬ，７．９１ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（７３．６ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中溶液に、０℃にて、塩化ｐ−トルエンスルホニル（１．０８ｇ，５．６９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を加えた。反応物を一晩で室温に戻した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）に付して、所望の化合物を得た（１．２７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３１３．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９５】
ｂ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−シクロヘキシルプロピル
実施例１８（ａ）の化合物 ３−シクロヘキシル−３−ヒドロキシプロピル−４−メチルベンゼンスルホネート（１．２７ｇ，４．０８ｍｍｏｌ）および中間体ＶＩＩの化合物（１．０１ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中溶液に、０℃にて、トリフェニルホスフィン（１．７５ｇ，６．６７ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（１．５ｍＬ，７．７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を周囲温度に温めた。２日後、さらにトリフェニルホスフィン（１．６５ｇ，６．２９ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（０．８０ｍＬ，４．１３ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度でさらに５時間後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の物質を得た（３．０７ｇ）。これには、１，２−ヒドラジンジカルボン酸ビス（１−メチルエチル）が混入していたが、さらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５７５．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９６】
ｃ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−シクロヘキシルプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１８（ｂ）の化合物（０．９５ｇ，１．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、イミドジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．７４ｇ，３．３９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．６４ｇ，５．０３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の物質を得た（０．１２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ６２０．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９７】
ｄ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−シクロヘキシルプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
厚壁圧力容器に、実施例１８（ｃ）の化合物（１２３ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ，１．０２ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（５６ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（６０μＬ，０．４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（６０μＬ，０．４３ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を加えた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、９０℃で４時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍｘ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、所望の化合物を油として得た（７６．８ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ６６８．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９８】
ｅ）４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１８（ｄ）の化合物（７６．８ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を２５％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２中で１時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をメタノール（２ｍＬ）中に溶解した。ジエチルエーテル中における４Ｎ塩酸溶液を加えた。周囲温度１時間静置後、得られた沈澱を収集し、真空デシケーター中で乾燥させて、標題化合物を得た（３８．４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９９】
実施例１９ カプセル組成物
本発明の化合物を投与するための経口投与形態は、標準的な２片のハードゼラチンカプセルに下表Ｉに示される分量で成分を充填することによって製造される。
【０２００】
【表２】
【０２０１】
実施例２０ 注射可能な非経口組成物
本発明の化合物を投与するための注射可能形態は、１．５重量％の４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩（実施例４の化合物）を水中における１０容量％のプロピレングリコール中で攪拌することによって製造される。
【０２０２】
実施例２１ 錠剤組成物
下表ＩＩに示されるシュークロース、硫酸カルシウム二水和物およびＡｋｔ阻害剤を示される分量で、１０％ゼラチン溶液と共に混合および造粒する。該湿潤顆粒をスクリーンし、乾燥させ、デンプン、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーンし、打錠する。
【０２０３】
【表３】
【０２０４】
本発明の好ましい具体例を上記に示したが、本発明は本明細書中に開示される正確な指示に限定されないものであり、また、特許請求の範囲の範囲内に伴う全ての変更に対する権利を保有するものと解釈されるべきである。
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新規な１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル化合物、係る化合物のプロテインキナーゼＢ（以下、ＰＫＢ／Ａｋｔ、ＰＫＢまたはＡｋｔという）活性の阻害剤として、ならびに癌および関節炎の治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
本発明は、１以上のセリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢとしても知られる）の１以上のイソ型の活性の阻害剤である１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル含有化合物に関する。本発明は、また、かかる化合物を含む医薬組成物、および癌および関節炎の治療において本化合物を用いる方法に関する（Ｌｉｕら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３：３１７−２２（２００３））。
アポトーシス（プログラムされた細胞死）は、胚発生および変性ニューロン疾患、心血管疾患および癌などの種々の疾患の病因において重要な役割を果たす。近年の研究は、プログラムされた細胞死の調節または実行に関与する種々のプロ−および抗−アポトーシス遺伝子産物の同定に至った。抗−アポトーシス遺伝子、例えば、Ｂｃｌ２またはＢｃｌ−ｘＬの発現は、種々の刺激によって誘導されるアポトーシス細胞死を阻害する。一方、プロ−アポトーシス遺伝子、例えば、ＢａｘまたはＢａｄの発現は、プログラムされた細胞死をもたらす（Ａｄａｍｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１：１３２２−１３２６（１９９８））。プログラムされた細胞死の実行は、カスパーゼ−３、カスパーゼ−７、カスパーゼ−８およびカスパーゼ−９等を包含するカスパーゼ−１関連プロテイナーゼによって媒介される（Ｔｈｏｒｎｂｅｒｒｙら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１：１３１２−１３１６（１９９８））。
【０００３】
ホスファチジルイノシトール３’−ＯＨキナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ／ＰＫＢ経路は、細胞生存／細胞死の調節に重要なようである（Ｋｕｌｉｋら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１７：１５９５−１６０６（１９９７）；Ｆｒａｎｋｅら、Ｃｅｌｌ，８８：４３５−４３７（１９９７）；Ｋａｕｆｆｍａｎｎ−Ｚｅｈら、Ｎａｔｕｒｅ ３８５：５４４−５４８（１９９７）Ｈｅｍｍｉｎｇｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５：６２８−６３０（１９９７）；Ｄｕｄｅｋら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５：６６１−６６５（１９９７））。血小板由来の成長因子（ＰＤＧＦ）、神経生長因子（ＮＧＦ）およびインスリン様生長因子−１（ＩＧＦ−ｌ）などの生存因子は、ＰＩ３Ｋの活性を誘導することによる種々の条件下での細胞生存を促進する（Ｋｕｌｉｋら、１９９７，Ｈｅｍｍｉｎｇｓ １９９７）。活性化されたＰＩ３Ｋは、ホスファチジルイノシトール（３，４，５）−トリホスフェート（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３）の産生を誘導し、次いで、それは、プレクストリン相同（ＰＨ）−ドメインを含有するセリン／スレオニンキナーゼＡｋｔに結合し、その活性化を促進する（Ｆｒａｎｋｅら、Ｃｅｌｌ，８１：７２７−７３６（１９９５）；Ｈｅｍｍｉｎｇｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７７：５３４（１９９７）；Ｄｏｗｎｗａｒｄ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１０：２６２−２６７（１９９８），Ａｌｅｓｓｉら、ＥＭＢＯ Ｊ．１５：６５４１−６５５１（１９９６））。ＰＩ３Ｋの特異的阻害剤またはドミナント・ネガティブＡｋｔ／ＰＫＢ変異体は、これらの成長因子またはサイトカインの生存促進活性を破壊する。ＰＩ３Ｋの阻害剤（ＬＹ２９４００２またはウォートマニン（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ））は、上流のキナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの活性化を阻害した。さらに、構成的に活性なＰＩ３ＫまたはＡｋｔ／ＰＫＢ変異体の導入は、細胞が通常はアポトーシス細胞死を受ける条件下で細胞生存を促進する（Ｋｕｌｉｋら、１９９７，Ｄｕｄｅｋら、１９９７）。
【０００４】
ヒト腫瘍におけるＡｋｔレベルの分析は、Ａｋｔ２が有意数の卵巣癌（Ｊ．Ｑ．Ｃｈｅｕｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：９２６７−９２７１（１９９２））および膵臓癌（Ｊ．Ｑ．Ｃｈｅｕｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９３：３６３６−３６４１（１９９６））において過剰発現することを示した。同様に、Ａｋｔ３は、乳癌および前立腺癌細胞系統において過剰発現することが見出された（Ｎａｋａｔａｎｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２１５２８−２１５３２（１９９９））。Ａｋｔ−２が卵巣癌腫の１２％で過剰発現すること、およびＡｋｔの増幅が未分化腫瘍の５０％において特に頻繁であることが明らかにされ、また、Ａｋｔが腫瘍攻撃に関連しうることが示唆された（Ｂｅｌｌａｃｏｓａら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６４，ｐｐ．２８０−２８５，１９９５）。Ａｋｔ１キナーゼ活性の増加は、乳癌、卵巣癌および前立腺癌において報告された（Ｓｕｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５９：４３１−７（２００１））。
【０００５】
腫瘍抑制因子ＰＴＥＮ（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３の３’ホスフェートを特異的に除去するタンパク質および脂質ホスファターゼ）は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路の負のレギュレーターである（Ｌｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：１９４３−１９４７（１９９７），Ｓｔａｍｂｏｌｉｃら、Ｃｅｌｌ ９５：２９−３９（１９９８），Ｓｕｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｉ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ． ９６：６１９９−６２０４（１９９９））。ＰＴＥＮの生殖細胞系統変異は、コーデン（Ｃｏｗｄｅｎ）病などのヒトの癌症候群の原因となる（Ｌｉａｗら、Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １６：６４−６７（１９９７））。ＰＴＥＮは、ヒトの腫瘍の大きな割合において欠失しており、機能的ＰＴＥＮを持たない腫瘍細胞系統は、高レベルの活性化Ａｋｔを示す（Ｌｉら、上掲、Ｇｕｌｄｂｅｒｇら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５７：３６６０−３６６３（１９９７）、Ｒｉｓｉｎｇｅｒら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５７：４７３６−４７３８（１９９７））。
【０００６】
これらの観察は、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路が腫瘍形成における細胞生存またはアポトーシスの調節に重要な役割を果たすことを明らかにする。
セカンドメッセンジャーによって調節されるセリン／スレオニンプロテインキナーゼのＡｋｔ／ＰＫＢサブファミリーの３つのメンバーが同定され、各々、Ａｋｔ１／ＰＫＢα、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγと称された。該イソ型は、特に、触媒ドメインをコードしている領域において相同である。Ａｋｔ／ＰＫＢは、ＰＩ３Ｋシグナル伝達に対する応答において起こるリン酸化事象によって活性化される。ＰＩ３Ｋは、膜イノシトールリン脂質をリン酸化し、それにより、セカンドメッセンジャーホスファチジル−イノシトール３，４，５−トリホスフェートおよびホスファチジルイノシトール３，４−ビスホスフェートを生じ、それらは、Ａｋｔ／ＰＫＢのＰＨドメインに結合することが分かった。Ａｋｔ／ＰＫＢ活性化の現在のモデルは、３’−リン酸化ホスホイノシチドによって膜に対して該酵素が補充され、ここで、上流キナーゼによるＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位のリン酸化が起こることを提唱する（Ｂ．Ａ．Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：６２８−６３０（１９９７）；Ｂ．Ａ．Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７６：５３４（１９９７）；Ｊ．Ｄｏｗｎｗａｒｄ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７９：６７３−６７４（１９９８））。
【０００７】
Ａｋｔ１／ＰＫＢαのリン酸化は、２つの調節部位、触媒ドメイン活性化ループにおけるＴｈｒ３Ｏ８およびカルボキシ末端付近のＳｅｒ４７３において起こる（Ｄ．Ｒ．Ａｌｅｓｓｉら、ＥＭＢＯ Ｊ．１５：６５４１−６５５１（１９９６）およびＲ．Ｍｅｉｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：３０４９１−３０４９７（１９９７））。同等の調節リン酸化部位は、Ａｋｔ２／ＰＫＢβおよびＡｋｔ３／ＰＫＢγにおいて起こる。Ａｋｔ／ＰＫＢを活性化ループ部位でリン酸化する上流キナーゼがクローン化され、３’―ホスホイノシチド依存性プロテインキナーゼ１（ＰＤＫ１）と命名された。ＰＤＫ１は、Ａｋｔ／ＰＫＢだけでなく、ｐ７０リボソームＳ６キナーゼ、ｐ９０ＲＳＫ、血清およびグルココルチコイド−調節性キナーゼ（ＳＧＫ）、およびプロテインキナーゼＣもリン酸化する。カルボキシ末端付近のＡｋｔ／ＰＫＢの調節部位をリン酸化している上流キナーゼはまだ同定されていないが、近年の報告では、インテグリン−結合型キナーゼ（ＩＬＫ−１）、セリン／スレオニンプロテインキナーゼ、または自己リン酸化のための役割が示唆される。
【０００８】
Ａｋｔ活性化および活性の阻害は、ＰＩ３ＫをＬＹ２９４００２およびウォートマニン等の阻害剤で阻害することによって達成することができる。しかしながら、ＰＩ３Ｋ阻害は、３つのＡｋｔイソ酵素の全てだけでなく、ＰｄｔＩｎｓ（３，４，５）−Ｐ３に依存する他のＰＨドメイン含有シグナル伝達分子、例えば、チロシンキナーゼのＴｅｃファミリーにも無差別に影響を及ぼす可能性がある。さらに、ＡｋｔがＰＩ３Ｋに無関係の成長シグナルによって活性化できることが開示された。
【０００９】
別法では、Ａｋｔ活性は、上流キナーゼＰＤＫ１の活性を遮断することによって阻害することができる。化合物ＵＣＮ−０１は、報告されたＰＤＫ１の阻害剤である（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３７５（２）：２５５（２００３））。また、ＰＤＫ１の阻害は、その活性がＰＤＫ１に依存する複数のプロテインキナーゼ、例えば、不定型ＰＫＣイソ形、ＳＧＫおよびＳ６キナーゼの阻害をもたらすであろう（Ｗｉｌｌｉａｍｓら、Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．１０：４３９−４４８（２０００））。
【００１０】
Ａｋｔの小型分子阻害剤は、腫瘍の治療、特に、活性化されたＡｋｔを伴う腫瘍（例えば、ＰＴＥＮ ｎｕｌｌ腫瘍およびｒａｓ変異を有する腫瘍）の治療において有用である。ＰＴＥＮは、Ａｋｔの重要な負のレギュレーターであり、その機能は、乳癌および前立腺癌腫、神経膠芽腫、ならびにＢａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群（Ｍａｅｈａｍａ，Ｔ．ら、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７０：２４７（２００１））、コーデン病（Ｐａｒｓｏｎｓ，Ｒ．；Ｓｉｍｐｓｏｎ，Ｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ）、２２２（Ｔｕｍｏｒ Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ Ｇｅｎｅｓ，Ｖｏｌｕｍｅ １）：１４７（２００３））およびＬｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病（Ｂａｃｋｍａｎ，Ｓ．ら、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１２（５）：５１６（２００２））を包含するいくつかの癌症候群を包含する多くの癌において喪失している。Ａｋｔ３は、エストロゲン受容体欠失乳癌およびアンドロゲン独立性前立腺癌系統においてアップレギュレートされ、Ａｋｔ２は、膵臓および卵巣癌腫において過剰発現している。Ａｋｔ１は、胃癌において増幅し（Ｓｔａａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：５０３４−７（１９８７））、乳癌においてアップレギュレートされる（Ｓｔａｌら、Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５：Ｒ３７−Ｒ４４（２００３））。したがって、小型分子Ａｋｔ阻害剤は、これらの型の癌ならびに他の型の癌の治療に有用であることが予想される。Ａｋｔ阻害剤は、また、さらなる化学療法剤と組み合わせて有用である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、Ａｋｔ／ＰＫＢの阻害剤である新規な化合物を提供することである。
また、本発明の目的は、医薬担体および本発明の方法において有用な化合物を含む医薬組成物を提供することである。
また、本発明の目的は、かかるＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害剤を投与することを特徴とする癌の治療のための方法を提供することにある。
また、本発明の目的は、かかるＡｋｔ／ＰＫＢ活性の阻害剤を投与することを特徴とする関節炎を治療するための方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の概要
本発明は、式（Ｉ）：
【化１】
（Ｉ）
［式中、
Ｒ４Ｒ５は、独立して、水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜６員環を形成し；
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３およびＲ３’は、各々、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか、または、
Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’のうち１つは、それらが結合している炭素と一緒になって、シクロプロピル、シクロブチルまたはシクロペンチルを形成し、
但し、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’のうち少なくとも２つは、水素，水素であり；Ｒ４およびＲ５がそれらが結合している窒素と一緒になって５〜６員環を形成する場合、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’の３つ全ては、水素，水素である］
で示される新規化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグに関する。
【００１３】
本発明は、式（Ｉ）のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を必要とする対象に投与することを特徴とする、癌の治療方法に関する。
本発明は、式（Ｉ）のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の有効量を必要とする対象に投与することを特徴とする、関節炎の治療方法に関する。
【００１４】
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物がＡｋｔ／ＰＫＢの阻害剤として活性であるという知見に関する。
本発明のさらなる態様において、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物の調製において有用な新規な製法が提供される。
【００１５】
本発明には、医薬担体および本発明の方法において有用な化合物を含む医薬組成物が包含される。
また、本発明には、本発明のＡｋｔ／ＰＫＢ阻害化合物とさらなる活性成分を同時投与する方法も包含される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
出願日２００４年７月２８日、国際公開第ＷＯ２００５／０１１７００号および国際公開日２００５年２月１０日であり、そのスキーム、方法およびアッセイが出典明示により、本明細書の一部とされる国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号は、１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル含有化合物、ならびにその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグを、特に癌および関節炎の治療において、セリン／スレオニンキナーゼ、Ａｋｔ（プロテインキナーゼＢともいう）の阻害剤として有用であるとして開示し、請求する。国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号は、特に、本発明の範囲内の化合物のいずれも開示しない。
【００１７】
今回、式（Ｉ）の化合物が、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示された最も構造的に関連のある化合物であると考えられるものを越える利益を示すことを見出した。
【００１８】
例えば、本発明の実施例３、４および７〜１８は、一般に、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示された最も構造的に関連のある化合物と考えられるものと比較した場合、正常細胞成長の阻害を越える腫瘍細胞成長の阻害に対する活性増加および選択性増加を示す。該活性増加および選択性増加は、より幅広い治療領域をもたらすことが予想される。さらに、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において開示される化合物は、一般に、貧水溶性を示す。該貧溶性の一態様は、これらの化合物が静脈内（以下、ＩＶという）投与に適した医薬投与形態に処方される能力に悪影響を及ぼすことである。一般に、正常細胞成長の阻害を越える腫瘍細胞成長の阻害に対する増加した活性および増加した選択性を有することに加え、本発明の実施例３、４および７〜１８の化合物は、ＩＶ投与用投与形態に処方するのに適当であると考えられる溶解性を示す。静脈内投与は、本発明の化合物を投与するための有益な方法である。
【００１９】
国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の化合物は、セリン／スレオニンキナーゼ、ＡＫＴ（プロテインキナーゼＢともいう）の阻害剤として有用であるが、式（Ｉ）の化合物、特に、実施例３、４および７〜１８の化合物は、有益な特性、例えば、適当な溶解性、活性、選択性、クリアランスおよび曝露を示し、それらは全て該化合物を、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号に開示される最も構造的に関連した化合物であると考えられるものを越えて有益にする。
【００２０】
本発明は、上記の式（Ｉ）の化合物に関する。
式（Ｉ）の本発明の化合物は、Ａｋｔ／ＰＫＢ活性を阻害する。特に、本明細書中に開示される化合物は、３つのＡｋｔ／ＰＫＢイソ型の各々を阻害する。
【００２１】
式（Ｉ）の本発明の化合物のなかには、式中、
Ｒ４Ｒ５が独立して、水素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択されるか；またはＲ４およびＲ５は、それらが結合している窒素と一緒になって、５〜６員環を形成し；
Ｒ１、Ｒ１’、Ｒ２、Ｒ２’、Ｒ３およびＲ３’は、各々、独立して、水素、フッ素、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、および−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択され；但し、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’の少なくとも２つは、水素，水素であり；Ｒ４およびＲ５がそれらが結合している窒素と一緒になって５〜６員環を形成する場合、Ｒ１Ｒ１’、Ｒ２Ｒ２’およびＲ３Ｒ３’の３つ全てが水素，水素である
化合物、および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２２】
本発明の式（Ｉ）の化合物のなかには、
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロブチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２−（−）−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；および
４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグが包含される。
【００２３】
式（Ｉ）の化合物は、本発明の医薬組成物に含まれ、本発明の方法において使用される。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、置換基、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロ−２Ｈ−チオピランおよび−Ｃ１−Ｃ４アルキルは、１個のフッ素原子から、該置換基が過フッ素化されるまでの数のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜８個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該置換基は、１〜３個のフッ素原子で置換されていてもよい。
【００２５】
本明細書中で使用される場合、「過フッ素化された」なる語は、水素原子の全てがフッ素原子で置き換わった置換基を意味する。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、「５〜６員環」なる語は、結合している窒素と共に非芳香環を形成する４または５員の炭素鎖を意味し、該環の炭素原子は、１個のフッ素原子から、該環の炭素原子が過フッ素化されるまでの数のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該環の炭素原子は、１〜８個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該環の炭素原子は、１〜５個のフッ素原子で置換されていてもよい。適当には、該環の炭素原子は、１〜３個のフッ素原子で置換されていてもよい。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、「−Ｃ１−Ｃ４アルキル」なる語は、１〜４個の炭素原子を含有している直鎖または分枝鎖の飽和または不飽和炭化水素鎖を意味する。本明細書中で使用される場合、−Ｃ１−Ｃ４アルキルの例は、−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２−ＣＦ３、−Ｃ（ＣＨ３）３、−（ＣＨ２）３−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ２、および−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３を包含する。
【００２８】
別記しない限り、本明細書中に開示される化合物は、また、該構造の立体化学的形態、すなわち、各不斉中心についてＲおよびＳ配置の全てを包含する。したがって、本発明の化合物の単一の立体化学異性体ならびにエナンチオマーおよびジアステレオマー混合物は、本発明の範囲内である。
【００２９】
本明細書中で使用される場合、「治療」なる語およびその派生語は、予防的および治療的療法を意味する。
【００３０】
本明細書中で使用される場合、「有効量」なる語およびその派生語は、例えば、研究者または臨床医によって、探求されている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を顕在化するであろう薬物または医薬の量を意味する。さらに、「治療上有効量」なる語およびその派生語は、かかる量を服用していない対応する対象と比べて、疾患、障害または副作用の改善された治療、治癒、予防または緩和、あるいは疾患または障害の進行速度の減少をもたらすいずれかの量を意味する。該用語は、また、正常な生理学的機能を増加するのに有効な量をその範囲に包含する。
【００３１】
式Ｉの新規化合物は、下記スキーム１において示されるように、または類似の方法によって調製される。出発材料は全て、市販品であるか、または当業者によって市販の出発材料から容易に調製される。
【００３２】
スキーム１
【化２】
（ａ）Ｂｒ２，ＮａＯＡｃ；（ｂ）ＥｔＮＨ２；（ｃ）ＳｎＣｌ２，ＨＣｌ；（ｄ）シアノ酢酸エチル，１９０℃；（ｅ）ＮａＮＯ２，ＨＣｌ；（ｆ）ＮＨ２ＯＨ；（ｇ）Ｅｔ３Ｎ，ジオキサン；（ｈ）ｎ−ＢｕＬｉ，ＴＨＦ；（ｉ）Ｂ（ＯＭｅ）３；（ｊ）Ｈ２Ｏ２，ＮａＯＨ；（ｋ）（３−ヒドロキシプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル，ＤＥＡＤ，ポリマー結合型ＰＰｈ３，ＣＨ２Ｃｌ２；（ｌ）Ｐｄ（ＰＰｈ３）４，ｉＰｒ２ＮＨ，ジオキサン，１００℃；（ｍ）ＴＦＡ，ＣＨ２Ｃｌ２
【００３３】
式（Ｉ）の化合物は、スキーム１に示される方法と類似の方法において調製することができる。酢酸ナトリウム中において緩衝化された臭素を用いる３−ニトロ−４−エトキシピリジン（１−スキーム １）の臭素化により、３−ブロモ−４−（エチルオキシ）−５−ニトロピリジンを得る（２−スキーム １）。該変換を実施するための別法が存在し、当業者に既知である。これらの方法は、標準的な有機合成テキスト、例えば、Ｌａｒｏｃｋ，”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，ＶＣＨ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）において編集されている。次いで、エトキシ基をエタノールなどの極性溶媒中、第１アミン、例えば、エチルアミンで置き換えて、３−スキーム１のような化合物を得る。液状アミンを用いる場合、該反応は、溶媒の不在下で実施することができる。ニトロ基の還元および付随するクロロ基の導入は、塩化スズ（ＩＩ）を用いて、Ｋｅｌｌｅｙら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５，３８（２０），４１３１−３４によって記載された方法にしたがって達成される。対応する５−ブロモ−２−クロロジアミノピリジンは、適当な酸またはエステル、例えば、シアノ酢酸エチルと共に濃縮する。加熱を継続して脱水環化反応に影響を及ぼして、４−スキーム１のようなイミダゾピリジンを得る。濃ＨＣｌ中におけるＮａＮＯ２との反応、続く、ヒドロキシルアミンとの反応によりビス−オキシムを得、それがトリエチルアミンなどの適当な塩基の存在下で脱水環化して５−スキーム１のようなアミノフラザンを得る。該ヒドロキシル基は、ｎ−ブチルリチウムなどの適当な塩基を用いるハロゲン−金属交換によってアリールアニオンを生じ、該アニオンをホウ酸トリメチルなどの適当なホウ素親電子物質と反応させ、得られたアリールボロネートを水性塩基中、過酸化水素などの適当な酸化剤で酸化することによって導入されて、６−スキーム１のようなイミダゾピリジノールを得る。グリニャール試薬などの他の塩基もまた、ハロゲン金属交換に影響を及ぼすために使用できる。該イミダゾピリジノールのエーテル化を、Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ １９８１，１）によって記載された方法を用い、（３−ヒドロキシプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチルなどの適当なアルコールを用いて行って、７−スキーム１のようなエーテルを得る。７−スキーム１のような適当なハロゲン化アリールをジオキサン等の適当な溶媒中、ジ−イソプロピルアミンなどの適当な塩基の存在下、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウムなどの適当な触媒および末端アルキンで処理して、８−スキーム１のような対応するアリールアルキンを得る。保護基の除去は、塩化メチレンなどの極性溶媒中、プロトン酸またはルイス酸、例えば、トリフルオロ酢酸を用いて達成され、それにより、９−スキーム１のような式（Ｉ）の化合物を得る。
【００３４】
本明細書中で使用される場合、「同時投与」なる語およびその派生語は、本明細書中に記載されるＡＫＴ阻害化合物と、化学療法および放射線治療を包含する癌の治療に有用であることが知られている、または関節炎の治療に有用であることが知られているさらなる活性成分とを同時に投与すること、またはいずれかの方法で別々に連続的に投与することを意味する。本明細書中で使用される場合、「さらなる活性成分」なる語は、癌または関節炎の治療が必要な患者に投与した場合に有益な特性を示すことが知られている、または有益な特性を示すことが立証されたいずれかの化合物または治療剤を包含する。好ましくは、同時に投与しない場合、該化合物は互いに密接した時間間隔で投与される。さらに、該化合物が同じ投与形態で投与されるかどうかは問題ではなく、例えば、１の化合物を局所投与し、他方の化合物を経口投与してもよい。
【００３５】
典型的には、治療されている感受性腫瘍に対する活性を有するいずれかの抗新生物剤を本発明における癌の治療において同時投与してもよい。かかる薬剤の例は、Ｖ．Ｔ．ＤｅｖｉｔａおよびＳ．Ｈｅｌｌｍａｎ（編集者）によるＣａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，第６版（２００１年２月１５日），Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓにおいて見出すことができる。当業者は、関与する薬物および癌の特徴に基づき、どの薬剤の組み合わせが有用であるかを認識することができるであろう。本発明において有用な典型的な抗新生物剤は、限定するものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの抗微小管剤、白金配位錯体、ナイトロジェンマスタード、オキサザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソウレアおよびトリアゼンなどのアルキル化剤、アントラサイクリン、アクチノマイシンおよびブレオマイシンなどの抗生物質、エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗物質、カムプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤を包含する。
【００３６】
本発明のＡＫＴ阻害化合物と組み合わせて使用される、または同時に投与されるさらなる活性成分（抗新生物剤）の例は、化学療法剤である。
抗微小管または抗有糸分裂剤は、細胞周期のＭ期または有糸分裂期の間の腫瘍細胞の微小管に対して活性な周期特異性薬剤である。抗微小管剤の例は、限定するものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドを包含する。
天然資源に由来するジテルペノイドは、細胞周期のＧ２／Ｍ期で作動する周期特異性抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβ−チュービュリンサブユニットと結合することによって、該タンパク質を安定化すると考えられる。次いで、該タンパク質の分解は、有糸分裂が阻止されること、および続く細胞死によって阻害されるようである。ジテルペノイドの例は、限定するものではないが、パクリタキセルおよびその類似物ドセタキセルを包含する。
【００３７】
パクリタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセテート２−ベンゾエート１３−エステルは、タイヘイヨウイチイの木Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａから単離された天然ジテルペン産物であり、注射溶液ＴＡＸＯＬＲ（登録商標）として市販されている。それは、テルペン類のタキサンファミリーの一員である。１９７１年に、Ｗａｎｉらによって初めて単離され（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ，Ｓｏｃ．，９３：２３２５．１９７１）、彼らは、その構造を化学的およびＸ線結晶学的方法によって特徴付けた。その活性の一メカニズムは、チュービュリンに結合することのできるパクリタキセルの能力に関連し、それにより、癌細胞成長を阻害する（Ｓｃｈｉｆｆら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ，Ａｃａｄ，Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：１５６１−１５６５（１９８０）；Ｓｃｈｉｆｆら、Ｎａｔｕｒｅ，２７７：６６５−６６７（１９７９）；Ｋｕｍａｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ，Ｃｈｅｍ，２５６：１０４３５−１０４４１（１９８１））。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性の概説については、Ｄ．Ｇ．Ｉ．Ｋｉｎｇｓｔｏｎら、Ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｖｏｌ．２６，タイトル”Ｎｅｗ ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９８６”，Ａｔｔａｕｒ−Ｒａｈｍａｎ，Ｐ．Ｗ．Ｌｅ Ｑｕｅｓｎｅ，Ｅｄｓ．（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，１９８６）ｐｐ２１９−２３５を参照のこと。
【００３８】
パクリタキセルは、米国において難治性の卵巣癌の治療（Ｍａｒｋｍａｎら、Ｙａｌｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，６４：５８３，１９９１；ＭｃＧｕｉｒｅら、Ａｎｎ．ｌｎｔｅｍ，Ｍｅｄ．，１１１：２７３，１９８９）、および乳癌の治療（Ｈｏｌｍｅｓら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．，８３：１７９７，１９９１）における臨床的使用が認可されている。それは、皮膚における新生物（Ｅｉｎｚｉｇら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，２０：４６）および頭頚部癌腫（Ｆｏｒａｓｔｉｒｅら、Ｓｅｍ．Ｏｎｃｏｌ．，２０：５６，１９９０）の治療に対する可能性のある候補物質である。該化合物は、また、多嚢胞性腎臓病（Ｗｏｏら、Ｎａｔｕｒｅ，３６８：７５０．１９９４）、肺癌およびマラリアの治療に対する可能性も示す。パクリタキセルでの患者の処理は、閾値濃度（５０ｎＭ）（Ｋｅａｒｎｓ，Ｃ．Ｍ．ら、Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，３（６） ｐ．１６−２３，１９９５）を越えて投与する期間に関連した骨髄抑制（多細胞系統，Ｉｇｎｏｆｆ，Ｒ．Ｊ．ら、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ，１９９８）をもたらす。
【００３９】
ドセタキセル、５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−アセテート２−ベンゾエートとの（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル，１３−エステル三水和物は、注射溶液ＴＡＸＯＴＥＲＥＲとして市販されている。ドセタキセルは、乳癌の治療に必要とされる。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの木の針葉から抽出された天然前駆体１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを用いて調製される、パクリタキセル（上を参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量規定毒性は、好中球減少である。
【００４０】
ビンカアルカロイドは、ツルニチニチソウ由来の周期特異性抗新生物剤である。ビンカアルカロイドは、チュービュリンに特異的に結合することによって、細胞周期のＭ期（有糸分裂）で作用する。結果として、結合型チュービュリン分子は、微小管中に重合することができない。有糸分裂は、中期に阻止されると考えられ、その後に細胞死がもたらされる。ビンカアルカロイドの例は、限定するものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチンおよびビノレルビンを包含する。
【００４１】
ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射溶液ＶＥＬＢＡＮＲとして市販されている。それは、第一に、睾丸癌およびホジキン病を包含する種々のリンパ腫ならびにリンパ球性および組織球性リンパ腫の治療において必要とされるが、種々の充実性腫瘍の二次治療としての可能性が示される。骨髄抑制は、ビンブラスチンの用量規定副作用である。
【００４２】
ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチン，２２−オキソ−，サルフェートは、注射溶液ＯＮＣＯＶＩＮＲとして市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に必要とされ、また、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療方針において使用が見出された。脱毛および神経学的影響は、ビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、それほどではないが、骨髄抑制および胃腸粘膜炎影響が起こる。
【００４３】
ビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ＊，Ｒ＊）−２，３−ジヒドロキシブタンジオエート（１：２）（塩）］は、酒石酸ビノレルビンの注射溶液（ＮＡＶＥＬＢＩＮＥＲ）として市販されており、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤、例えば、シスプラスチンと組み合わせて、種々の充実性腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行した乳癌、およびホルモン難治性前立腺癌の治療において必要とされる。骨髄抑制は、ビノレルビンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００４４】
白金配位錯体は、非周期特異性抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化し、ＤＮＡと鎖内および鎖間架橋を形成し、それにより、腫瘍に対し不利益な生物学的影響を引き起こす。白金配位錯体の例は、限定するものではないが、シスプラチンおよびカルボプラチンを包含する。
【００４５】
シスプラチン、シス−ジアミンジクロロ白金は、注射溶液ＰＬＡＴＩＮＯＬＲとして市販されている。シスプラチンは、主に、転移性睾丸および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に必要とされる。シスプラチンの一次用量規定副作用は、水和および利尿によって調節されうる腎臓毒性、および内耳神経毒性である。
【００４６】
カルボプラチン、白金ジアミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］は、注射溶液ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮＲとして市販されている。カルボプラチンは、主として進行性卵巣癌腫の一次および二次治療において必要とされる。骨髄抑制は、カルボプラチンの用量規定毒性である。
【００４７】
アルキル化剤は、非周期特異性抗癌剤であり、強い親電子物質である。典型的には、アルキル化剤は、アルキル化によって、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核性基を介してＤＮＡに対する共有結合を形成する。かかるアルキル化は、核酸機能を崩壊し、それにより、細胞死に導く。アルキル化剤の例は、限定するものではないが、シクロホスファミド、メルファランおよびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード、ブスルファンなどのスルホン酸アルキル、カルムスチンなどのニトロソウレア、およびダカルバジンなどのトリアゼンを包含する。
【００４８】
シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射溶液または錠剤として、ＣＹＴＯＸＡＮＲとして市販されている。シクロホスファミドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫および白血病の治療において必要とされる。脱毛、吐き気、嘔吐および白血球減少は、シクロホスファミドの最も一般的な用量規定副作用である。
【００４９】
メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射溶液または錠剤として、ＡＬＫＥＲＡＮＲとして市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および卵巣の切除不能上皮癌腫の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、メルファランの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５０】
クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ＬＥＵＫＥＲＡＮＲ錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ球性白血病、およびリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫およびホジキン病などの悪性リンパ腫の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、クロラムブシルの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５１】
ブスルファン、１，４−ブタンジオールジメタンスルホネートは、ＭＹＬＥＲＡＮＲ錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待機的治療に必要とされる。骨髄抑制は、ブスルファンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５２】
カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソウレアは、単一バイアルの凍結乾燥製品として、ＢｉＣＮＵＲとして市販されている。カルムスチンは、単一薬剤として、または脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫のための他の薬剤と組み合わせて、待機的治療に必要とされる。骨髄抑制の遅延は、カルムスチンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５３】
ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、単一バイアル製品として、ＤＴＩＣ−ＤｏｍｅＲとして市販されている。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療に必要とされ、ホジキン病の二次治療のための他の薬剤と組み合わせて使用される。吐き気、嘔吐および食欲不振は、ダカルバジンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５４】
抗生物質抗新生物剤は、周期特異性薬剤であり、ＤＮＡに結合または介在する。典型的には、かかる作用は、安定なＤＮＡ複合体または鎖分解をもたらし、それが核酸の通常の機能を崩壊し、その結果、細胞死に導く。抗生物質抗新生物剤の例は、限定するものではないが、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン、ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントラサイクリン、およびブレオマイシンを包含する。
【００５５】
ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、ＣＯＳＭＥＧＥＮＲとして注射可能形態で市販されている。ダクチノマイシンは、Ｗｉｌｍ腫瘍および横紋筋肉腫の治療に必要とされる。吐き気、嘔吐および食欲不振は、ダクチノマイシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５６】
ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射可能形態としてＤＡＵＮＯＸＯＭＥＲまたは注射液としてＣＥＲＵＢＩＤＩＮＥＲとして市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療において軽減誘導のために必要とされる。骨髄抑制は、ダウノルビシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５７】
ドキソルビシン（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−ｌｙｘｏ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、注射可能形態として、ＲＵＢＥＸＲまたはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ ＲＤＦＲとして市販されている。ドキソルビシンは、主として、急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽急性白血病の治療に必要とされるが、いくつかの充実性腫瘍およびリンパ腫の治療においても有用な成分である。骨髄抑制は、ドキソルビシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５８】
ブレノマイシン、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｕｓの株から単離された細胞毒性グリコペプチド抗生物質の混合物は、ＢＬＥＮＯＸＡＮＥＲとして市販されている。ブレオマイシンは、単一薬剤として、または他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮細胞癌腫、リンパ腫、および睾丸癌腫の待機的治療として必要とされる。肺および皮膚毒性は、ブレオマイシンの最も一般的な用量規定副作用である。
【００５９】
トポイソメラーゼＩＩ阻害剤は、限定するものではないが、エピポドフィロトキシンを包含する。
エピポドフィロトキシンは、マンドレーク植物に由来する周期特異性抗新生物剤である。エピポドフィロトキシンは、典型的には、トポイソメラーゼＩＩおよびＤＮＡと三重複合体を形成し、ＤＮＡ鎖崩壊を引き起こすことによって、細胞周期のＳおよびＧ２期において細胞に影響を及ぼす。鎖崩壊が蓄積し、次いで細胞死が起こる。エピポドフィロトキシンの例は、限定するものではないが、エトポシドおよびテニポシドを包含する。
【００６０】
エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射溶液またはカプセルとして、ＶｅＰＥＳＩＤＲとして市販されており、一般に、ＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、睾丸癌および非小細胞肺癌の治療において必要とされる。骨髄抑制は、エトポシドの最も一般的な用量規定副作用である。白血球減少の発生は、血小板減少より重篤な傾向にある。
【００６１】
テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン ９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射溶液として、ＶＵＭＯＮＲとして市販されており、一般に、ＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、子供の急性白血病の治療において必要とされる。骨髄抑制は、テニポシドの最も一般的な用量規定副作用である。テニポシドは、白血球減少および血小板減少の両方を誘導することができる。
【００６２】
代謝拮抗抗新生物剤は、ＤＮＡ合成を阻害することによって、またはプリンもしくはピリミジン塩基合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成阻害することによって、細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）に作用する周期特異性抗新生物剤である。結果として、Ｓ期が進行せず、その結果、細胞死が起こる。代謝拮抗抗新生物剤の例は、限定するものではないが、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メカプトプリン、チオグアニンおよびゲムシタビンを包含する。
【００６３】
５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルの投与は、チミジレート合成の阻害を導き、また、ＲＮＡおよびＤＮＡの両方に組み込まれる。その結果、典型的には、細胞死が起こる。５−フルオロウラシルは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、胸部、結腸、直腸、胃および膵臓の癌腫の治療において必要とされる。骨髄抑制および粘膜炎は、５−フルオロウラシルの用量規定副作用である。他のフルオロピリミジン類似体は、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸を包含する。
【００６４】
シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、ＣＹＴＯＳＡＲ−ＵＲとして市販されており、一般に、Ａｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは、成長しているＤＮＡ鎖中へのシタラビンの末端組み込みによって、ＤＮＡ鎖伸長を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示すと考えられる。シタラビンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。他のシチジン類似体は、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）を包含する。シタラビンは、白血球減少、血小板減少および粘膜炎を誘導する。
【００６５】
メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、ＰＵＲＩＮＥＴＨＯＬＲとして市販されている。メルカプトプリンは、今だ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。メルカプトプリンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。骨髄抑制および胃腸粘膜炎は、高用量でのメルカプトプリンの予想される副作用である。有用なメルカプトプリン類似体は、アザチオプリンである。
【００６６】
チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、ＴＡＢＬＯＩＤＲとして市販されている。チオグアニンは、今だ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。チオグアニンは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、急性白血病の治療において必要とされる。白血球減少、血小板減少および貧血を包含する骨髄抑制は、チオグアニン投与の最も一般的な用量規定副作用である。しかしながら、胃腸の副作用が起こり、用量が制限されることがある。他のプリン類似体は、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、フルダラビンホスフェート、およびクラドリビンを包含する。
【００６７】
ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）は、ＧＥＭＺＡＲＲとして市販されている。ゲムシタビンは、Ｇ１／Ｓ境界を経る細胞の進行を阻害することによって、Ｓ期での細胞周期特異性を示す。ゲムシタビンは、局所的進行性の非小細胞肺癌の治療においてシスプラチンと組み合わせて用いられ、局所的進行性の膵臓癌の治療において単独で用いられる。白血球減少、血小板減少および貧血を包含する骨髄抑制は、ゲムシタビン投与の最も一般的な用量規定副作用である。
【００６８】
メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジレートの合成に必要なジヒドロ葉酸還元酵素の阻害によって、ＤＮＡ合成、修復および／または複製を阻害することにより、Ｓ期で特異的に細胞周期影響を示す。メトトレキサートは、単一薬剤として、または他の化学療法剤と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、および胸部、頭部、頚部、卵巣および膀胱の癌腫の治療において必要とされる。骨髄抑制（白血球減少、血小板減少および貧血）および粘膜炎は、メトトレキサート投与の予想される副作用である。
【００６９】
カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を包含するカンプトテシンは、トポイソメラーゼＩ阻害剤として入手可能であるか、または開発下にある。カンプトテシン細胞毒活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連すると考えられる。カンプトテシンの例は、限定するものではないが、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態を包含する。
【００７０】
イリノテシンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射溶液ＣＡＭＰＴＯＳＡＲＲとして市販されている。
【００７１】
イリノテカンは、その活性な代謝産物ＳＮ−３８と共に、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体である。トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリノテカンまたはＳＮ−３８三重複合体と複製酵素との相互作用によって引き起こされる修復不可能な二重鎖崩壊の結果として、細胞毒性が起こると考えられる。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療のために必要とされる。イリノテカンＨＣｌの用量規定副作用は、好中球減少を包含する骨髄抑制、および下痢を包含するＧＩ影響である。
【００７２】
トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射溶液ＨＹＣＡＭＴＩＮＲとして市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体に結合するカンプトテシンの誘導体であり、ＤＮＡ分子のねじれひずみに応答してトポイソメラーゼＩによって引き起こされる一本鎖崩壊の再ライゲーションを防ぐ。トポテカンは、卵巣癌および小細胞肺癌の転移性癌腫の二次治療に必要とされる。トポテカンＨＣｌの用量規定副作用は、骨髄抑制、主として好中球減少である。
【００７３】
また、ラセミ混合物（Ｒ，Ｓ）形態ならびにＲおよびＳエナンチオマーを包含する現在開発中の下記の式Ａ：
【化３】
で示されるカンプトテシン誘導体は、化学名「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ，Ｓ）−カンプトテシン（ラセミ混合物）」または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｒ）−カンプトテシン（Ｒエナンチオマー）」または「７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０（Ｓ）−カンプトテシン（Ｓエナンチオマー）によって知られている。かかる化合物ならびに関連化合物は、製造法も含め、米国特許第６，０６３，９２３号、第５，３４２，９４７号、第５，５５９，２３５号、第５，４９１，２３７号および出願中の米国特許出願第０８／９７７，２１７号（１９９７年１１月２４日出願）に記載されている。
【００７４】
ホルモンおよびホルモン類似体は、ホルモンと癌の成長および／または成長不足との間に関係がある癌の治療に有用な化合物である。癌治療に有用なホルモンおよびホルモン類似体の例は、限定するものではないが、子供の悪性リンパ腫および急性白血病の治療に有用なプレドニソンおよびプレドニソロンなどのアドレノコルチコステロイド；アミノグルテチミドおよび他のアロマターゼ阻害剤、例えば、アナストロゾール、レトラゾール、ボラゾール、および副腎皮質癌およびエストロゲン受容体を含有するホルモン依存性乳癌の治療に有用なエキセメスタン；プロゲストリン（ｐｒｏｇｅｓｔｒｉｎ）、例えば、ホルモン依存性乳癌および子宮内膜癌の治療に有用な酢酸メゲストロール；エストロゲン、アンドロゲン、および抗アンドロゲン、例えば、前立腺癌および良性前立腺肥大の治療に有用なフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロンおよび５α−レダクターゼ、例えば、フィナステリドおよびデゥタステリド（ｄｕｔａｓｔｅｒｉｄｅ）；抗エストロゲン、例えば、ホルモン依存性乳癌および他の感受性癌の治療に有用なタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、ならびに米国特許第５，６８１，８３５号、第５，８７７，２１９号および第６，２０７，７１６号に記載のような選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）；および前立腺癌の治療のための性腺刺激ホルモン放出性ホルモン（ＧｎＲＨ）および黄体形成ホルモン（ＬＨ）および／または卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の放出を刺激するその類似体、例えば、ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば、酢酸ゴセレリンおよびルプロリドを包含する。
【００７５】
シグナル変換経路阻害剤は、細胞内変換を喚起する化学的過程を遮断または阻害する阻害剤である。本明細書中で使用される場合、該変化は、細胞増殖または分化である。本発明において有用なシグナル変換阻害剤は、受容体チロシンキナーゼ、非受容体チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカー、セリン／スレオニンキナーゼ、ホスホチジルイノシトール−３キナーゼ、ｍｙｏ−イノシトールシグナル伝達、およびＲａｓオンコジーンの阻害剤を包含する。
【００７６】
いくつかのプロテインチロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与する種々のタンパク質における特定のチロシル残基のリン酸化を触媒する。かかるプロテインチロシンキナーゼは、受容体または非受容体キナーゼとして幅広く分類することができる。
【００７７】
受容体チロシンキナーゼは、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメインおよびチロシンキナーゼドメインを有する膜貫通型タンパク質である。受容体チロシンキナーゼは、細胞成長の調節に関与し、一般に、成長因子受容体と呼ばれる。例えば過剰発現または変異による、これらのキナーゼの多くの不適当または制御されない活性化、すなわち、異常型のキナーゼ成長因子受容体活性は、制御されない細胞成長をもたらすことが示された。したがって、かかるキナーゼの異常な活性は、悪性組織成長に関連している。結果として、かかるキナーゼの阻害剤は、癌治療法を提供することができた。成長因子受容体は、例えば、表皮成長因子受容体（ＥＧＦｒ）、血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦｒ）、ｅｒｂＢ２、ｅｒｂＢ４、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦｒ）、免疫グロブリン様および表皮成長因子相同ドメインを有するチロシンキナーゼ（ＴＩＥ−２）、インスリン成長因子−Ｉ（ＩＧＦＩ）受容体、マクロファージコロニー刺激因子（ｃｆｍｓ）、ＢＴＫ、ｃｋｉｔ、ｃｍｅｔ、繊維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）受容体、Ｔｒｋ受容体（ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢおよびＴｒｋＣ）、エフリン（ｅｐｈ）受容体、およびＲＥＴプロトオンコジーンを包含する。いくつかの成長受容体阻害剤は、開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤およびアンチセンスオリゴヌクレオチドを包含する。成長因子受容体および成長因子受容体機能を阻害する薬剤は、例えば、Ｋａｔｈ，Ｊｏｈｎ Ｃ．，Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）１０（６）：８０３−８１８；Ｓｈａｗｖｅｒら、ＤＤＴ Ｖｏｌ２，Ｎｏ．２ Ｆｅｂｒｕａｒｙ １９９７；およびＬｏｆｔｓ，Ｆ．Ｊ．ら、”Ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｓ ｔａｒｇｅｔｓ”，Ｎｅｗ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｗｏｒｋｍａｎ，ＰａｕｌおよびＫｅｒｒ，Ｄａｖｉｄ編，ＣＲＣ ｐｒｅｓｓ １９９４，Ｌｏｎｄｏｎに記載されている。
【００７８】
成長因子受容体キナーゼではないチロシンキナーゼは、非受容体チロシンキナーゼと称される。本発明において有用な非受容体チロシンキナーゼは、抗癌薬の標的または潜在的標的であり、ｃＳｒｃ、Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｊａｋ、ｃＡｂｌ、ＦＡＫ（焦点接着キナーゼ）、Ｂｒｕｔｏｎｓチロシンキナーゼ、およびＢｃｒ−Ａｂｌを包含する。かかる非受容体キナーゼおよび非受容体チロシンキナーゼ機能を阻害する薬剤は、Ｓｉｎｈ，Ｓ．およびＣｏｒｅｙ，Ｓ．Ｊ．，（１９９９） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ８ （５）：４６５−８０；およびＢｏｌｅｎ，Ｊ．Ｂ．，Ｂｒｕｇｇｅ，Ｊ．Ｓ．，（１９９７）Ａｎｎｕａｌ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１５：３７１−４０４に記載されている。
【００７９】
ＳＨ２／ＳＨ３ドメインブロッカーは、ＰＩ３−Ｋ ｐ８５サブユニット、Ｓｒｃファミリーキナーゼ、アダプター分子（Ｓｈｃ、Ｃｒｋ、Ｎｃｋ、Ｇｒｂ２）およびＲａｓ−ＧＡＰを包含する種々の酵素またはアダプタータンパク質において結合しているＳＨ２またはＳＨ３ドメインを崩壊する薬剤である。抗癌薬の標的としてのＳＨ２／ＳＨ３ドメインは、Ｓｍｉｔｈｇａｌｌ，Ｔ．Ｅ．（１９９５），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．３４（３）１２５−３２において考察されている。
【００８０】
セリン／スレオニンキナーゼの阻害剤は、ＭＡＰキナーゼカスケードブロッカーを包含し、それは、Ｒａｆキナーゼ（ｒａｆｋ）、マイトジェンまたは細胞外調節キナーゼ（ＭＥＫｓ）、および細胞外調節キナーゼ（ＥＲＫｓ）のブロッカー；およびＰＫＣ（アルファ、ベータ、ガンマ、イプシロン、ミュー、ラムダ、イオータ、ゼータ）のブロッカーを包含するプロテインキナーゼＣファミリーメンバーのブロッカーを包含する。ＩｋＢキナーゼファミリー（ＩＫＫａ、ＩＫＫｂ）、ＰＫＢファミリーキナーゼ、ａｋｔキナーゼファミリーメンバー、およびＴＧＦベータ受容体キナーゼのブロッカーを包含する。かかるセリン／スレオニンキナーゼおよびその阻害剤は、Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｔａｙａ，Ｓ．，Ｋａｉｂｕｃｈｉ，Ｋ．，（１９９９），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．１２６（５）７９９−８０３；Ｂｒｏｄｔ，Ｐ，Ｓａｍａｎｉ，Ａ．，およびＮａｖａｂ，Ｒ．（２０００），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６０．１１０１−１１０７；Ｍａｓｓａｇｕｅ，Ｊ．，Ｗｅｉｓ−Ｇａｒｃｉａ，Ｆ．（１９９６）Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｒｖｅｙｓ．２７：４１−６４；Ｐｈｉｌｉｐ，Ｐ．Ａ．，およびＨａｒｒｉｓ，Ａ．Ｌ．（１９９５），Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ． ７８：３−２７，Ｌａｃｋｅｙ，Ｋ．ら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙｌｅｔｔｅｒｓ，（１０），２０００，２２３−２２６；米国特許第６，２６８，３９１号；およびＭａｒｔｉｎｅｚ−Ｉａｃａｃｉ，Ｌ．ら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ（２０００），８８（１），４４−５２に記載されている。
【００８１】
ＰＩ３−キナーゼ、ＡＴＭ、ＤＮＡ−ＰＫおよびＫｕのブロッカーを包含するホスホチジルイノシトール−３キナーゼファミリーのメンバーの阻害剤は、また、本発明において有用でありうる。かかるキナーゼは、Ａｂｒａｈａｍ，Ｒ．Ｔ．（１９９６），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．８（３）４１２−８；Ｃａｎｍａｎ，Ｃ．Ｅ．，Ｌｉｍ，Ｄ．Ｓ．（１９９８），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １７（２５）３３０１−３３０８；Ｊａｃｋｓｏｎ，Ｓ．Ｐ．（１９９７），Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ．２９（７）：９３５−８；およびＺｈｏｎｇ，Ｈ．ら、Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓ，（２０００）６０（６），１５４１−１５４５において考察されている。
【００８２】
また、本発明は、ミオイノシトールシグナル伝達阻害剤、例えば、ホスホリパーゼＣブロッカーおよびミオイノシトール類似物に関する。かかるシグナル阻害剤は、Ｐｏｗｉｓ，Ｇ．およびＫｏｚｉｋｏｗｓｋｉ Ａ．、（１９９４）Ｎｅｗ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ｅｄ．，Ｐａｕｌ Ｗｏｒｋｍａｎ ａｎｄ Ｄａｖｉｄ Ｋｅｒｒ，ＣＲＣ ｐｒｅｓｓ １９９４，Ｌｏｎｄｏｎにおいて記載されている。
【００８３】
シグナル変換経路阻害剤の別の群は、Ｒａｓオンコジーンの阻害剤である。かかる阻害剤は、ファルネシルトランスフェラーゼ、ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼおよびＣＡＡＸプロテアーゼの阻害剤、ならびにアンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイムおよび免疫療法を包含する。かかる阻害剤は、野生型変異体ｒａｓを含有する細胞においてｒａｓ活性化を遮断し、それにより、抗増殖剤として作用することが示された。Ｒａｓオンコジーン阻害は、Ｓｃｈａｒｏｖｓｋｙ，Ｏ．Ｇ．，Ｒｏｚａｄｏｓ，Ｖ．Ｒ．，Ｇｅｒｖａｓｏｎｉ，Ｓ．Ｉ．Ｍａｔａｒ，Ｐ．（２０００），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．７（４）２９２−８；Ａｓｈｂｙ，Ｍ．Ｎ．（１９９８），Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ．９（２）９９−１０２；およびＢｉｏＣｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，（１９８９）１４２３（３）：１９−３０において考察されている。
【００８４】
上記のように、受容体キナーゼリガンド結合に対する抗体アンタゴニストもまた、シグナル変換阻害剤として作用しうる。該群のシグナル変換経路阻害剤は、受容体チロシンキナーゼの細胞外リガンド結合ドメインに対するヒト化抗体の使用を包含する。例えば、Ｉｍｃｌｏｎｅ Ｃ２２５ ＥＧＦＲ特異的抗体（Ｇｒｅｅｎ，Ｍ．Ｃ．ら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ Ｓｏｌｉｄ Ｔｕｍｏｒｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔ．Ｒｅｖ．，（２０００），２６（４），２６９−２８６参照）、ＨｅｒｃｅｐｔｉｎＲ（登録商標）ｅｒｂＢ２抗体（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ：ｅｒｂＢ Ｆａｍｉｌｙ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｎｉａｓｅｓ，Ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，２０００，２（３），１７６−１８３参照）、および２ＣＢ ＶＥＧＦＲ２特異的抗体（Ｂｒｅｋｋｅｎ，Ｒ．Ａ．ら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＶＥＧＦＲ２ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ａ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉ−ＶＥＧＦ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｌｏｃｋｓ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｍｉｃｅ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．（２０００）６０，５１１７−５１２４参照）がある。
【００８５】
非受容体キナーゼ脈管形成阻害剤もまた、本発明において有用でありうる。脈管形成関連ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ２の阻害剤は、シグナル変換阻害剤に関して上記で考察されている（どちらの受容体も受容体チロシンキナーゼである）。ｅｒｂＢ２およびＥＧＦＲの阻害剤は、脈管形成、主にＶＥＧＦ発現を阻害することが示されたので、一般に、脈管形成はｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲシグナル伝達に関係する。したがって、非受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、本発明の化合物と組み合わせて使用してもよい。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体チロシンキナーゼ）を認識しないが、そのリガンドに結合する抗−ＶＥＧＦ抗体、脈管形成を阻害するであろうインテグリン（アルファｖ、ベータ３）の小型分子阻害剤、エンドスタチンおよびアンジオスタチン（非−ＲＴＫ）もまた、開示される化合物と組み合わせて有用であることが分かる（Ｂｒｕｎｓ ＣＪら、（２０００），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，６０：２９２６−２９３５；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ ＡＢ，Ｗｉｎｋｌｅｒ ＭＥおよびＤｅｒｙｎｃｋ Ｒ．（１９８６），Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３２：１２５０−１２５３； Ｙｅｎ Ｌら、（２０００），Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９：３４６０−３４６９参照）。
【００８６】
免疫治療方法において使用される薬剤もまた、式（Ｉ）の化合物と組み合わせて有用でありうる。免疫応答を生じるための多くの免疫学的方策がある。これらの方策は、一般に、腫瘍ワクチン化の領域にある。免疫学的アプローチの効力は、小型分子阻害剤を用いるシグナル伝達経路の組み合わせた阻害を通して大いに増強されうる。ｅｒｂＢ２／ＥＧＦＲに対する免疫学的／腫瘍ワクチンアプローチの考察は、Ｒｅｉｌｌｙ ＲＴら、（２０００），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６０：３５６９−３５７６；およびＣｈｅｎ Ｙ，Ｈｕ Ｄ，Ｅｌｉｎｇ ＤＪ，Ｒｏｂｂｉｎｓ ＪおよびＫｉｐｐｓ ＴＪ．（１９９８），Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５８：１９６５−１９７１において見出される。
【００８７】
プロアポトーシス管理において用いられる薬剤（例えば、ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチド）もまた、本発明の組み合わせにおいて使用されうる。タンパク質のＢｃｌ−２ファミリーのメンバーは、アポトーシスを阻害する。したがって、ｂｃｌ−２のアップレギュレーションは、化学耐性に関連する。研究により、表皮成長因子（ＥＧＦ）がｂｃｌ−２ファミリーの抗−アポトーシスメンバー（すなわち、ｍｃｌ−１）を刺激することが示された。したがって、腫瘍においてｂｃｌ−２の発現をダウンレギュレーションすることが計画された方策、すなわち、Ｇｅｎｔａ’ｓ Ｇ３１３９ ｂｃｌ−２アンチセンスオリゴヌクレオチドは、臨床上の利益を明らかにし、現在、第ＩＩ／ＩＩＩ相試験にある。ｂｃｌ−２に対するアンチセンスオリゴヌクレオチド法を用いるかかるプロアポトーシス法は、Ｗａｔｅｒ ＪＳら、（２０００），Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１８：１８１２−１８２３；およびＫｉｔａｄａ Ｓら、（１９９４），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓ．Ｄｅｖ．４：７１−７９において考察されている。
【００８８】
細胞周期シグナル伝達阻害剤は、細胞周期の調節に関与する分子を阻害する。サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と呼ばれるプロテインキナーゼのファミリー、およびサイクリンと名付けられたタンパク質のファミリーとのそれらの相互作用は、真核生物の細胞周期の進行を調節する。種々のサイクリン／ＣＤＫ複合体の配位活性化および不活性化は、細胞周期の正常な進行に必要である。細胞周期シグナル伝達のいくつかの阻害剤は、開発下にある。例えば、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６を包含するサイクリン依存性キナーゼの例およびその阻害剤が、例えば、Ｒｏｓａｎｉａら、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２０００）１０（２）：２１５−２３０に記載されている。
【００８９】
一の具体例において、本発明の癌治療法は、式Ｉの化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグと、少なくとも１つの抗新生物剤、例えば、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択される抗新生物剤との同時投与を包含する。
【００９０】
本発明の医薬上活性な化合物は、ＡＫＴ阻害剤として活性なので、それらは、癌および関節炎の治療において治療上有用性を示す。
【００９１】
適当には、本発明は、脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される癌を治療またはかかる癌の重篤度を軽減する方法に関する。
【００９２】
適当には、本発明は、卵巣癌、膵臓癌および前立腺癌から選択される癌の治療またはかかる癌の重篤度を軽減する方法に関する。
【００９３】
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）の単離および精製
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を発現している昆虫細胞を２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、２０ｍＭ イミダゾール（ｐＨ７．５）中にｐｏｌｙｔｒｏｎを用いて溶解させた（５ｍＬ溶解バッファー／ｇ 細胞）。細胞破片を２８，０００ｘｇで３０分間遠心分離することによって除去した。上清を４．５ミクロンのフィルターで濾過し、次いで、予め溶解バッファーで平衡化したニッケル−キレートカラム上に負荷した。該カラムを５カラム容量（ＣＶ）の溶解バッファー、次いで、５ＣＶの２０％バッファーＢ（ここに、バッファーＢは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，１００ｍＭ ＮａＣｌ，３００ｍＭ イミダゾール、ｐＨ７．５である）で洗浄した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）は、１０ＣＶにわたるバッファーＢの２０−１００％直線勾配で溶出された。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（１３６−４８０）溶出フラクションをプールし、３倍量のバッファーＣ（ここに、バッファーＣは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５である）で希釈した。次いで、該試料を、バッファーＣで予め平衡化したＱ−セファロースＨＰカラム上のクロマトグラフィーに付した。該カラムを５ＣＶのバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄ（ここに、バッファーＤは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，１０００ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．５である）で段階溶出した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）含有フラクションをプールし、１０−ｋＤａ分子量カットオフ濃縮器で濃縮した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，２００ｍＭ ＮａＣｌ，１ｍＭ ＤＴＴ（ｐＨ７．５）で予め平衡化したＳｕｐｅｒｄｅｘ７５ゲル濾過カラム上のクロマトグラフィーに付した。Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ１（ａａ １３６−４８０）フラクションを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析法を用いて試験した。該タンパク質をプールし、濃縮し、−８０℃で冷凍した。
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ２（ａａ １３８−４８１）およびＨｉｓタグ付加ＡＫＴ３（ａａ １３５−４７９）も同様に、単離および精製した。
【００９４】
Ｈｉｓタグ付加ＡＫＴ酵素アッセイ
本発明の化合物を基質リン酸化アッセイにおいて、ＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について試験した。該アッセイは、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する小型分子有機化合物の能力について試験する。基質リン酸化アッセイは、ＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを利用する。ＡＫＴ１、２および３は、また、Ｕｐｓｔａｔｅ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．から入手可能である。該方法は、ビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基上へのＡＴＰ由来のガンマ−ホスフェートの移動を触媒する単離酵素の能力を測定する。基質リン酸化は、下記の手法によって検出された。
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートで行った。１０ｎＭ活性化ＡＫＴ酵素を、５０ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、２０ｍＭ ＭｇＣｌ２、４μＭ ＡＴＰ、８μＭペプチド、０．０４μＣｉ［ｇ−３３Ｐ］ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴ、および１００％ＤＭＳＯ中における１μｌの試験化合物を含有するアッセイ容量２０μｌ中、室温で４０分間インキュベートした。５０μｌのＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋を含有しないＤｕｌｂｅｃｃｏ ＰＢＳ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０μＭ ＡＴＰ、２．５ｍｇ／ｍｌストレプトアビジンで被覆したＳＰＡビーズ）の添加によって、反応を停止した。プレートを密閉し、ビーズを一晩沈澱させ、次いで、プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）においてカウントした。
用量応答データをデータ換算式１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）
［式中、Ｕは未知の値であり、Ｃ１は、ＤＭＳＯについて得られた平均対照値であり、Ｃ２は、０．１Ｍ ＥＤＴＡについて得られた平均対照値である］
で算出した％対照として、化合物濃度に対してプロットした。データを、
ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））
［式中、Ｖｍａｘは、上位の漸近線であり、ＫはＩＣ５０である］
によって表される曲線にフィットさせる。
【００９５】
全長ヒト（ＦＬ）ＡＫＴ１のクローニング
全長ヒトＡＫＴ１遺伝子を、ミリスチル化ＡＫＴ１−ＥＲを含有するプラスミド（Ｒｏｂｅｒｔ Ｔ． Ａｂｒａｈａｍ， Ｄｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｕｎｄｅｒ ＭＴＡからの贈呈品。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １９９８ Ｖｏｌｕｍｅ １８ ｐ．５６９９に記載）から、５’プライマー：配列番号２
５’ ＴＡＴＡＴＡＧＧＡＴＣＣＡＴＧＡＧＣＧＡＣＧＴＧＧＣ ３’
および３’プライマー：配列番号３
ＡＡＡＴＴＴＣＴＣＧＡＧＴＣＡＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＣＴＧＧ ３’
を用いてＰＣＲによって増幅した。５’プライマーはＢａｍＨＩ部位を、３’プライマーはＸｈｏＩ部位をクローニング目的で含んでいた。得られたＰＣＲ産物をｐｃＤＮＡ３中で、ＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとしてサブクローニングした。システイン２５をコードしている配列（ＴＧＣ）における変異を、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅＲ部位特異的変異誘発キット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）を用いる部位特異的変異誘発によって、アルギニン２５をコードしている野生型ＡＫＴ１配列（ＣＧＣ）に変化させた。ＡＫＴ１変異誘発プライマー：配列番号４
５’ ＡＣＣＴＧＧＣＧＧＣＣＡＣＧＣＴＡＣＴＴＣＣＴＣＣ
および選択プライマー：配列番号５
５’ ＣＴＣＧＡＧＣＡＴＧＣＡＡＣＴＡＧＡＧＧＧＣＣ（ｐｃＤＮＡ３のマルチプルクローニング部位におけるＸｂａＩ部位を破壊するために設計された）
を製造者の指示に従って用いた。発現／精製目的で、ＡＫＴ１をＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩフラグメントとして単離し、ｐＦａｓｔｂａｃＨＴｂ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の
ＢａｍＨＩ ＸｈｏＩ部位中にクローニングした。
【００９６】
ＦＬヒトＡＫＴ１の発現
発現は、ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎのＢＡＣ−ｔｏ−ＢＡＣバキュロウイルス発現システム（カタログ番号１０３５９−０１６）を用いて行った。簡単に言うと、１）ｃＤＮＡをＦａｓｔＢａｃベクターからｂａｃｍｉｄ ＤＮＡ中へ移入させ、２）ｂａｃｍｉｄ ＤＮＡを単離し、Ｓｆ９昆虫細胞をトランスフェクトするために用い、３）ウイルスをＳｆ９細胞中で産生させ、４）Ｔ． ｎｉ細胞を該ウイルスに感染させ、精製に付した。
【００９７】
ＦＬヒトＡＫＴ１の精製
全長ＡＫＴ１の精製のために、１３０ｇのｓｆ９細胞（バッチ番号４１６４６Ｗ０２）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌおよび２０ｍＭイミダゾールを含有する溶解バッファー（バッファーＡ，１Ｌ，ｐＨ７．５）中に再懸濁した。細胞溶解をＡｖｅｓｔｉｎ（１５Ｋ−２０Ｋ ｐｓｉで２回）によって行った。細胞破片を１６Ｋ ｒｐｍで１時間遠心分離することによって除去し、上清を４℃で一晩、１０ｍｌのニッケルセファロースＨＰビーズにバッチ結合させた。次いで、ビーズをカラムに移し、結合した物質をバッファーＢ（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、３００ｍＭ イミダゾール、ｐＨ７．５）で溶出した。ＡＫＴ溶出フラクションをプールし、バッファーＣ（２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５）を用いて３倍量に希釈した。該試料を濾過し、バッファーＣで予め平衡化した１０ｍＬのＱ−ＨＰカラム上で２ｍＬ／分にてクロマトグラフィーに付した。
Ｑ−ＨＰカラムを３カラム容量（ＣＶ）のバッファーＣで洗浄し、次いで、５ＣＶの１０％Ｄ、５ＣＶの２０％Ｄ、５ＣＶの３０％Ｄ、５ＣＶの５０％Ｄおよび５ＣＶの１００％Ｄ（ここに、バッファーＤは、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５である）を用いて段階溶出した。５ｍＬフラクションを回収した。ＡＫＴ含有フラクションをプールし、５ｍｌに濃縮した。次いで、該タンパク質を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５で予め平衡化した１２０ｍｌのＳｕｐｅｒｄｅｘ７５サイジングカラムに負荷した。２．５ｍＬのフラクションを回収した。
ＡＫＴ１溶出フラクションをプールし、アリコート（１ｍｌ）に分け、−８０℃で保存した。質量分析およびＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を用いて、精製した全長ＡＫＴ１の純度および同定を確認した。
全長（ＦＬ）ＡＫＴ２および（ＦＬ）ＡＫＴ３を同様に、単離および精製した。
【００９８】
全長ＡＫＴ酵素アッセイ
本発明の化合物をＡＫＴ１、２および３プロテインセリンキナーゼ阻害活性について、基質リン酸化アッセイにおいて試験した。該アッセイは、ペプチド基質のセリンリン酸化を阻害する小型分子有機化合物の能力について試験する。基質リン酸化アッセイは、ＡＫＴ１、２または３の触媒ドメインを利用する。該方法は、ビオチン化合成ペプチド配列番号１（ビオチン−ａｈｘ−ＡＲＫＲＥＲＡＹＳＦＧＨＨＡ−アミド）のセリン残基上へのＡＴＰ由来のガンマ−ホスフェートの移動を触媒する単離酵素の能力を測定する。基質リン酸化は、下記の手法によって検出された。
アッセイは、３８４ウェルＵ底白色プレートで行った。１０ｎＭ活性化ＡＫＴ酵素を、５０ｍＭ ＭＯＰＳ、ｐＨ７．５、２０ｍＭ ＭｇＣｌ２、４μＭ ＡＴＰ、８μＭペプチド、０．０４μＣｉ［ｇ−３３Ｐ］ＡＴＰ／ウェル、１ｍＭ ＣＨＡＰＳ、２ｍＭ ＤＴＴ、および１００％ＤＭＳＯ中における１μｌの試験化合物を含有するアッセイ容量２０μｌ中、室温で４０分間インキュベートした。５０μｌのＳＰＡビーズミックス（Ｍｇ２＋およびＣａ２＋を含有しないＤｕｌｂｅｃｃｏ ＰＢＳ、０．１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５ｍＭ ＥＤＴＡ、５０μＭ ＡＴＰ、２．５ｍｇ／ｍｌストレプトアビジンで被覆したＳＰＡビーズ）の添加によって、反応を停止した。プレートを密閉し、ビーズを一晩沈澱させ、次いで、プレートをＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐｃｏｕｎｔマイクロプレートシンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｍｅｒｉｄｅｎ，ＣＴ）においてカウントした。
用量応答データをデータ換算式１００＊（Ｕ１−Ｃ２）／（Ｃ１−Ｃ２）
［式中、Ｕは未知の値であり、Ｃ１は、ＤＭＳＯについて得られた平均対照値であり、Ｃ２は、０．１Ｍ ＥＤＴＡについて得られた平均対照値である］
で算出した％対照として、化合物濃度に対してプロットした。データを、
ｙ＝（（Ｖｍａｘ＊ｘ）／（Ｋ＋ｘ））
［式中、Ｖｍａｘは、上位の漸近線であり、ＫはＩＣ５０である］
によって表される曲線にフィットさせる。
【００９９】
実施例１の化合物は、上記の全長ＡＫＴ酵素アッセイにおいて、ＩＣ５０（μＭ）活性がＦＬ ＡＫＴ１に対し０．００３μｍ、ＦＬ ＡＫＴ２に対し０．０２５μｍであることが明らかになった。
実施例２の化合物は、上記の全長ＡＫＴ酵素アッセイにおいて、ＩＣ５０（μＭ）活性がＦＬ ＡＫＴ１に対し０．００２μＭ、ＦＬ ＡＫＴ２に対し０．０１６μＭであることが明らかになった。
【０１００】
本発明の実施例１〜１８の化合物の腫瘍細胞系統および正常細胞系統に対する活性および溶解度を、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号において調製された最も構造的に関連のある化合物であると考えられるものと比較した。詳細には、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１４０の化合物（化合物４−（１−エチル−７−｛［３−（４−モルホリニル）プロピル］オキシ｝−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｒという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１５１の化合物（化合物 １−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｓという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１５２の化合物（化合物 ４−（１−エチル−７−｛［２−（４−モルホリニル）エチル］オキシ｝−４−フェニル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｔという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１７の化合物（化合物 ４−［１−エチル−７−（ピペリジン−４−イルオキシ）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−フラザン−３−イルアミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｕという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例１２７の化合物（化合物 ４−｛１−エチル−４−フェニル−７−［（３−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ−［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミントリフルオロアセテート（以下、化合物Ｖという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２１５の化合物（化合物 ４−［７−［（４−アミノブチル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｗという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２２２の化合物（化合物 ４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−［（３−アミノプロピル）オキシ］−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｘという））、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２２３の化合物（化合物 ４−｛２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−［（４−ピペリジニルメチル）オキシ］−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル｝−２−メチル−３−ブチン−２−オールトリフルオロアセテート（以下、化合物Ｙという））、および国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号の実施例２６５の化合物（化合物 ４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（｛２−［４−（メチルオキシ）フェニル］エチル｝アミノ）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール（以下、化合物Ｚという））である。
化合物Ｒ、Ｓ、Ｔ、Ｕ、Ｖ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＺは、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２４３４０号に記載されるように調製することができる。
【０１０１】
細胞アッセイ：メチレンブルー成長阻害アッセイ
該アッセイに使用された腫瘍細胞系統は、ＢＴ４７４（ヒト乳癌）およびＬＮＣａＰ（前立腺癌のリンパ節転移）であった。ＨＦＦ（正常ヒト包皮繊維芽細胞）もまた、包含された。全細胞系統を、１０％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ ２２４００−０７１）中３７℃にて、給湿５％ＣＯ２インキュベーター中で培養した。トリプシン／ＥＤＴＡを用いて細胞を採取し、血球計を用いてカウントし、９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ ３５−３０７５）中、１００μＬ／ウェルにて、下記の密度で播種した：ＢＴ４７４ １５，０００細胞／ウェル、ＬＮＣａＰ ５，０００細胞／ウェルおよびＨＦＦ ５，０００細胞／ウェル。ＤＭＳＯ中における化合物の１０ｍＭストックを９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ Ｃｏｒｎｉｎｇ ３３６３）において、９つの３倍希釈によってＤＭＳＯ中に連続希釈し、−８０℃で保存した。次の日、化合物希釈物を解凍し、各４μＬを６６２μＬのＲＰＭＩ１６４０＋１００μｇ／ｍＬゲンタマイシン中に移し、その結果、最終的に必要とされる試験濃度の２倍濃度になった。ＲＰＭＩ１６４０に希釈した化合物１００μＬを全細胞系統に加えた。対照を包含する全ウェル中におけるＤＭＳＯの最終濃度は、０．３％であった。細胞を３７℃にて、５％ＣＯ２中で３日間インキュベートした。培地を吸引によって除去した。細胞量を、８０μＬメチレンブルー（Ｓｉｇｍａ Ｍ９１４０、５０：５０のエタノール：水中における０．５％）で細胞を染色し、室温で１時間インキュベートすることによって概算した。染料を吸引し、プレートを水に浸漬することによってリンスし、次いで、風乾した。１００μＬの可溶化溶液（ＰＢＳ中における１％ Ｎ−ラウロイルサルコシンナトリウム塩、Ｓｉｇｍａ Ｌ５１２５）を加え、室温で少なくとも３０分間インキュベートすることによって、細胞から染色液を遊離させた。プレートを振盪し、６２０ｎｍでの光学密度をマイクロプレートリーダーにおいて測定した。細胞成長の阻害パーセントをビヒクルで処理した対照ウェルに基づいて算出した。細胞成長の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ５０）は、非線形回帰（Ｌｅｖｅｎｂｅｒｇ−Ｍａｒｑｕａｄｔ）および等式 ｙ＝Ｖｍａｘ＊（１−（ｘ＾ｎ／Ｋ＾ｎ＋ｘ＾ｎ）））＋Ｙ２を用いて求められた。［参考文献：Ｍａｇｅｒ，Ｍ．Ｅ．（１９７２） Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ］
【０１０２】
【表１】
【０１０３】
本発明の範囲内の医薬上活性な化合物は、必要とする哺乳動物、特にヒトにおいて、ＡＫＴ阻害剤として有用である。
したがって、本発明は、有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物もしくはプロドラッグを投与することを特徴とする、癌、関節炎、およびＡＫＴ阻害を必要とする他の状態を治療する方法を提供する。式（Ｉ）の化合物は、また、その明らかとなったＡｋｔ阻害剤として作用する能力のために、上記の病態を治療する方法に提供される。該薬物は、必要とする患者に、限定するものではないが、静脈内、筋内、経口、皮下、皮内および非経口を包含するいずれかの都合のよい投与経路によって投与すればよい。
【０１０４】
本発明の医薬上活性な化合物は、カプセル、錠剤、または注射製剤などの都合のよい投与形態中に組み込まれる。固形または液体医薬担体が用いられる。固形担体は、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム二水和物、白土、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸を包含する。液体担体は、シロップ、落花生油、オリーブ油、セーライン、および水を包含する。同様に、担体は、いずれかの徐放性材料、例えば、単独またはワックスと組み合わせたモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを包含する。固形担体の量は、幅広く変化するが、好ましくは、投与単位当たり約２５ｍｇ〜約１ｇである。液体担体を用いる場合、例えば、製剤はシロップ、エリキシル、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌注射液、例えば、アンプル、または水性もしくは非水性液体懸濁の形態である。
【０１０５】
医薬製剤は、材料を適宜、錠剤形態の場合、混合、造粒、および圧縮（必要に応じ）し、または混合、充填および溶解して所望の経口または非経口製品を得ることを含む製薬分野の化学者の従来の技術にしたがって製造される。
上記の医薬投与単位中における本発明の医薬上活性な化合物の用量は、好ましくは、活性化合物量で０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇから選択される、効力のある非毒性の量である。Ａｋｔ阻害剤を必要とするヒト患者を治療する場合、選択された用量は、好ましくは、１日に１〜６回、経口または非経口投与される。非経口投与の好ましい形態は、局所、直腸、経皮、注射、および点滴による連続的投与を包含する。ヒトへの投与のための経口および／または非経口投与単位は、好ましくは、０．０５〜３５００ｍｇの活性化合物を含有する。
【０１０６】
投与されるべき最適な投与量は、当業者によって容易に決定され、使用される特定のＡｋｔ阻害剤、製剤の強度、投与様式、および病態の進行度によって変化する。患者の年齢、体重、食事、および投与時間を包含する治療されている特定の患者に依存する付加的な因子は、投与量の調整の必要をもたらす。
【０１０７】
ヒトを包含する哺乳動物におけるＡｋｔ阻害活性を誘導する本発明の方法は、かかる活性を必要とする対象に、本発明の医薬上活性な化合物の有効なＡｋｔ阻害量を投与することを特徴とする。
本発明は、また、Ａｋｔ阻害剤として有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
【０１０８】
本発明は、また、治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、癌の治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、関節炎の治療において有用な医薬の製造における式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含むＡｋｔ阻害剤として有用な医薬組成物を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含む癌の治療において有用な医薬組成物を提供する。
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物および医薬上許容される担体を含む関節炎の治療において有用な医薬組成物を提供する。
【０１０９】
本発明の化合物を本発明にしたがって投与する場合、許容できない毒物学的影響は予想されない。
さらに、本発明の医薬上活性な化合物は、さらなる活性成分、例えば、癌または関節炎を治療することが知られている他の化合物、またはＡｋｔ阻害剤と組み合わせて使用すると有用であることが知られている化合物と同時投与することができる。
【０１１０】
さらに工夫することなく、当業者は、上記の記載を用いて、本発明をその完全な範囲まで利用することができると確信する。
【実施例】
【０１１１】
したがって、下記の実施例は、単なる例示として解釈されるべきものであり、いかなる方法においても、本発明の範囲を限定するものではない。
実験詳細
実施例１〜１８の化合物は、スキーム１または類似の方法によって容易に製造される。
【０１１２】
中間体ＶＩＩ
【化４】
【０１１３】
２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−オールの調製
ａ）５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ４−エチル−ピリジン−３，４−ジアミン（ＩＩ）
３−ブロモ−５−ニトロピリジン−４−イルアミン（Ｉ，７００ｇ，２．８６ｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（７Ｌ）中に溶解し、８５℃に加熱した。塩化スズ（ＩＩ）（１６２６ｇ，８．５８ｍｏｌ）を徐々に加えた。反応物を１時間熱還流し、次いで、一晩かけて周囲温度に冷却した。得られた黄色沈殿物を濾過によって収集し、氷水（５Ｌ）中に懸濁し、混合物を１２Ｎ ＮａＯＨでｐＨ１２に調整した。得られた溶液をＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ４Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物（ＩＩ）を得た（５５０ｇ、７７％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２５０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１４】
ｂ）Ｎ−［５−ブロモ−２−クロロ−４−（エチルアミノ）−３−ピリジニル］−２−シアノアセトアミド（ＩＩＩ）
５−ブロモ−２−クロロ−Ｎ４−エチル−ピリジン−３，４−ジアミン（ＩＩ，５５０ｇ，２．２１ｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５．５Ｌ）中溶液に、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（６３４．５ｇ，３．３１ｍｏｌ）、シアノ酢酸（２８２ｇ，３．３１ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（８９７ｇ，８．８４ｍｏｌ）を加えた。１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩およびシアノ酢酸の添加時に、有意な発熱（〜２０℃）が観察された。周囲温度で２時間攪拌後、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣を温かいＥｔＯＡｃ（４０℃，２０Ｌ）および水（４０℃，８Ｌ）で抽出した。水相をＥｔＯＡｃ（１０Ｌ）を加えて洗浄し、合わせた有機抽出物を水（１０Ｌ）で洗浄した。有機抽出物を減圧下で濃縮してスラリーを得、濾過した。固体をＥｔＯＡｃで洗浄し、乾燥させて、所望の化合物（ＩＩＩ）を白色結晶性固体として得た（５３４ｇ、７６％収率）。さらに精製することなく、これを次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋） ｍ／ｚ ３１７（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１５】
ｃ）（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−アセトニトリル（Ｖ）
Ｎ−［５−ブロモ−２−クロロ−４−（エチルアミノ）−３−ピリジニル］−２−シアノアセトアミドＩＩＩ（４５８ｇ，１．４５ｍｏｌ）の氷酢酸（４．６Ｌ）中溶液を１００℃に加熱した。３時間後、ＬＣ／ＭＳ分析が、（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）アセトニトリル（ＩＶ）への変換が完了したことを示した。周囲温度に冷却後、反応物に硝酸ナトリウム（２３０ｇ，３．３４ｍｏｌ）を徐々に加えた。〜１０℃の発熱と共に、激しい気体発生および泡立ちが観察された。周囲温度で１６時間攪拌後、固体を濾過によって収集し、一定重量になるまで乾燥させて、所望の生成物（Ｖ）を薄黄色固体として得た（５４５ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋） ｍ／ｚ ３２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１６】
ｄ）４−（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン（ＶＩ）
（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−ヒドロキシイミノ−アセトニトリル（Ｖ，５４５ｇ，１．４５ｍｏｌ）のジオキサン（５Ｌ）中混合物に、トリエチルアミン（１Ｌ）およびヒドロキシルアミン（１４３ｇ，水中５５％）を加えた。反応物を６時間熱還流した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮して茶色固体を得た。固体をメタノール（１Ｌ）中に懸濁し、懸濁液を６５℃で０．５時間攪拌した。固体を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の化合物（ＶＩ）を得た（３２１ｇ、７０％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３４３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１７】
ｅ）２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−オール（ＶＩＩ）
４−（７−ブロモ−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン（ＶＩ，５０ｇ，０．１４ｍｏｌ）のＴＨＦ（１Ｌ）中懸濁液を乾燥−氷／アセトン浴中で、内温が−７５℃以下になるまで冷却した。塩化イソプロピルマグネシウム（２２５ｍＬ，エーテル中２Ｍ，０．４５ｍｏｌ）を、反応温度が−７０℃以下に維持される速度でゆっくりと加えた。さらに１０分後、ホウ酸トリメチル（５４ｍＬ，０．４８ｍｏｌ）を加え、反応を乾燥−氷／アセトン浴中で１時間維持した。該浴を取り外し、反応物を周囲温度に戻した。１８時間後、得られた黄色懸濁液を０℃に冷却した。３０％過酸化水素（２５０ｍＬ）および３Ｎ ＮａＯＨ（１００ｍＬ）の溶液を反応温度が４０℃以下に維持されるような速度で加えた。次いで、該氷浴を取り外し、反応物を周囲温度で２時間、激しく攪拌した。大量の有機溶媒を減圧下で除去し、水相を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ３に酸性化した。得られた懸濁液を３０分間攪拌後、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えた。さらに１時間攪拌後、固体を濾過によって収集した。濾過ケークを水、酢酸エチル、トルエンおよび酢酸エチルで連続的に洗浄した。固体を一定重量になるまで乾燥させて、所望の化合物（ＶＩＩ）を薄黄色固体として得た（３５．９ｇ、８８％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ２８１．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１１８】
実施例１
【化５】
【０１１９】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−｛７−［（３−ブロモプロピル）オキシ］−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
中間体ＶＩＩ（１．９８ｇ，７．０７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、炭酸セシウム（７．０１ｇ，２１．５ｍｍｏｌ）を加えた。３０分後、周囲温度にて、１，３−ジブロモプロパン（３．７０ｍＬ，３６．２ｍｍｏｌ）を加えた。さらに３０分後、反応物を６０℃で２０時間加熱した。周囲温度に冷却後、反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をテトラヒドロフランに溶解した。ヘキサンを加え、得られた沈殿物を収集し、乾燥させて、所望の化合物を得た（２．０４ｇ、７２％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０１．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２０】
ｂ）４−（４−クロロ−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）（０．３０ｇ，０．７５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、ピペリジン（０．４０ｍＬ，４．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で２０時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、得られた沈殿物を濾過によって収集した。濾液を真空下で濃縮し、残渣をエタノールおよびへキサンでトリチュレートした。得られた沈殿物を濾過によって収集し、合わせた沈殿物を乾燥させて、所望の物質を得た（０．２９ｇ、９５％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０６．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２１】
ｃ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピペリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例１（ｂ）の化合物（０．２９ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．３５ｍＬ，３．５８ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１４ｇ，０．１２ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２２ｍＬ，１．４７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２２ｍＬ，１．５８ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た（０．２７ｇ）。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．１８ｇ、５６％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５４．２（Ｍ＋Ｈ）＋ 分析：Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ３２ＨＣｌ・２Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，４９．１１；Ｈ，６．６３；Ｎ，１７．４３。実測値：Ｃ，４９．２５；Ｈ，６．３４；Ｎ，１７．４３。
【０１２２】
実施例２
【化６】
【０１２３】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−（４−クロロ−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）の化合物（０．３１ｇ，０．７６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、ピロリジン（０．３２ｍＬ，３．９２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で２０時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、得られた沈澱を濾過によって収集した。濾液を真空下で濃縮し、残渣をエタノールおよびへキサンでトリチュレートした。得られた沈殿物を濾過によって収集し、合わせた沈澱物を乾燥させて、所望の物質を得た（０．２８ｇ、９３％収率）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２４】
ｂ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−７−｛［３−（１−ピロリジニル）プロピル］オキシ｝−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例２（ａ）の化合物（０．２７ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．３５ｍＬ，３．５８ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１７ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２５ｍＬ，１．６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２５ｍＬ，１．８０ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．２１ｇ、６７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．４（Ｍ＋Ｈ）＋ 分析：Ｃ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ３・２ＨＣｌ・１．５Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，４８．９８；Ｈ，６．３５；Ｎ，１８．１７。実測値：Ｃ，４８．６４；Ｈ，６．１０；Ｎ，１８．０５。
【０１２５】
実施例３
【化７】
【０１２６】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−（４−クロロ−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）の化合物（０．３１ｇ，０．７６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、シクロペンチルアミン（０．４０ｍＬ，４．０５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、得られた沈殿物を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の物質を得た（０．２６ｇ、８２％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０６．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１２７】
ｂ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例３（ａ）の化合物（０．３１ｇ，０．７７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．４０ｍＬ，４．０９ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１９ｇ，０．１６ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２５ｍＬ，１．６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２５ｍＬ，１．８０ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．２１ｇ、５９％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５４．２（Ｍ＋Ｈ）＋ 分析：Ｃ２３Ｈ３１Ｎ７Ｏ３・２ＨＣｌ・１．５Ｈ２Ｏの計算値：Ｃ，４９．９１；Ｈ，６．５６；Ｎ，１７．７１。実測値：Ｃ，５０．３０；Ｈ，６．２４；Ｎ，１７．８５。
【０１２８】
実施例４
【化８】
【０１２９】
４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）［（１Ｒ）−１−（２−ヒドロキシエチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
（３Ｒ）−３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−４−メチルペンタン酸（１．０ｇ，４．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液に、０℃にて、ボラン（１９．２ｍＬ，ＴＨＦ中１Ｍ，１９．２ｍｍｏｌ）を１５分かけて加えた。反応物を−１５℃で５５時間維持し、次いで０℃に温め、９：１ メタノール／酢酸（１０ｍＬ）の滴下によってクエンチした。減圧下で溶媒を除去し、残渣を酢酸エチルと１Ｎ ＨＣｌの間に分配した。水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を水、１Ｎ ＮａＯＨ、水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得た（０．５５ｇ、５９％収率）。これをさらに精製することなく次工程に用いた。
【０１３０】
ｂ）［（１Ｒ）−１−（２−ブロモエチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例４（ａ）の化合物（０．５１ｇ，２．４０ｍｍｏｌ）およびＣＢｒ４（１．６０ｇ，４．７０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍＬ）中溶液に、−２０℃にて、ＰＰｈ３（１．３０ｇ，４．９０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液を滴下した。反応物を周囲温度に温め、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の化合物を得た（０．３３ｇ、５１％収率）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ０．９３（ｄｄ，Ｊ＝１１．８７，６．８２Ｈｚ，６Ｈ）１．４４−１．５２（ｍ，９Ｈ）１．７７（ｄｄ，Ｊ＝１２．７６，６．４４Ｈｚ，１Ｈ）１．８７（ｍ，１Ｈ）２．０７（ｍ，１Ｈ）３．３９−３．５０（ｍ，２Ｈ）３．５８（ｍ，１Ｈ）４．３５（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．１１Ｈｚ，１Ｈ）
【０１３１】
ｃ）［（１Ｒ）−１−（２−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝エチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
中間体ＶＩＩの化合物（０．３３ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）中溶液に、無水炭酸セシウム（１．１６ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）および実施例４（ｂ）の化合物（０．３３ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３５℃で２０時間加熱した。周囲温度に冷却後、飽和塩化アンモニウムを加え、混合物を酢酸エチルで抽出板。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）によって、所望の化合物を得た（０．５７ｇ（定量的））。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３２】
ｄ）４−［７−［（３−アミノ−４−メチルペンチル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例４（ｃ）の化合物（０．５７ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）、ジオキサン（３０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．５３ｍＬ，０．３６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．４９ｍＬ，３．６０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０５ｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０２ｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．３０ｇ，３．６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．１３ｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を入れた。該反応容器を密閉し、８０℃で１６時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却した後、飽和ＮＨ４Ｃｌを加え、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２，シリカゲル）に付して、［１−（２−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝エチル）−２−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチルを得た。これをメタノール（５ｍＬ）中に溶解し、周囲温度で２時間、ジエチルエーテル中における飽和ＨＣｌ（４０ｍＬ）で処理した。得られた沈殿物を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を得た（０．３８ｇ、７５％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３３】
実施例５
【化９】
【０１３４】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロブチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩の調製
ａ）４−（７−｛［３−（１−アゼチジニル）プロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１（ａ）の化合物（０．２４ｇ，０．６１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）中懸濁液に、シクロブチルアミン（０．２７ｍＬ，３．２２ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、溶媒を真空下で除去し、残渣をエタノールおよびヘキサンでトリチュレートした。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、所望の物質を得た（０．２０ｇ、８５％収率）。これを精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３５】
ｂ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（１−アゼチジニル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩
厚壁圧力容器に実施例５（ａ）の化合物（０．２０ｇ，０．５２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（０．３０ｍＬ，３．０７ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１３ｇ，０．１１ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０１ｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０２ｇ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２０ｍＬ，１．３４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２０ｍＬ，１．４４ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（２ｍＬ）を入れた。該混合物をアルゴンで１０分間パージした。次いで、圧力容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。反応物を一晩かけて周囲温度に冷却し、濾過して固体を除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−８０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の物質をトリフルオロ酢酸塩として得た。固体をメタノール中に溶解し、エーテル中における２Ｎ ＨＣｌで処理した。得られた沈澱を濾過によって収集し、乾燥させて、標題化合物を白色固体として得た（０．０７ｇ、２９％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３６】
実施例６
【化１０】
【０１３７】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩の調製
ａ）４−（７−｛［（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチルプロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ポリマー結合型トリフェニルホスフィン（４．１７ｇ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ，６．６７ｍｍｏｌ）および（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチル−１−プロパノール（１．０２ｇ，６．６７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）中懸濁液に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．９２ｍＬ，６．１４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を滴下した。３０分後、中間体化合物ＶＩＩ（０．７５ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中溶液をゆっくりと加えた。反応混合物を１０℃に２時間温めた。反応物を濾過し、消費した樹脂をＣＨ２Ｃｌ２およびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルおよびヘキサンでトリチュレートして、所望の物質を得た（１．６ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３８】
ｂ）４−（４−クロロ−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
厚壁圧力容器に実施例６（ａ）の化合物（０．１７ｇ，０．４２ｍｍｏｌ）、シクロプロピルアミン（０．４１ｍＬ，５．８０ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（３ｍＬ）を入れた。反応容器を密閉し、６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物をオフホワイト色の固体として得た（０．０８ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１３９】
ｃ）４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［（２Ｓ）−３−（シクロプロピルアミノ）−２−メチルプロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩
厚壁圧力容器に実施例６（ｂ）の化合物（０．０８ｇ，０．２１ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（５ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（５ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．１０ｍＬ，０．６７ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１０ｍＬ，０．７２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ，１．０３ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０１ｇ，０．００７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした後、該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物を黄色固体として得た（０．０８ｇ、５７％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４０】
実施例７
【化１１】
【０１４１】
４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩の調製
ａ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２，２−ジメチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
ポリマー結合型トリフェニルホスフィン（３．１２ｇ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ，５．０ｍｍｏｌ）および（３−ヒドロキシ−２，２−ジメチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（０．８１ｇ，４．００ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）中懸濁液に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．６６ｍＬ，４．４０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を滴下した。５０分後、中間体ＶＩＩの化合物（０．５６ｇ，２．００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（９０ｍＬ）およびＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中溶液をゆっくりと加えた。反応混合物を周囲温度に温め、一晩攪拌した。反応物を濾過し、消費した樹脂をＣＨ２Ｃｌ２およびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（１０−４０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の生成物を得た（０．３４ｇ、４０％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４２】
ｂ）４−｛７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例７（ａ）の化合物（０．１４ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）に、３０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）を加えた。周囲温度で１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物を白色固体として得た（０．１３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３６６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４３】
ｃ）４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール ビス−トリフルオロ酢酸塩
厚壁圧力容器に実施例７（ｂ）の化合物（０．１３ｇ，０．３５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（５ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（５ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．１０ｍＬ，０．６７ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１０ｍＬ，０．７２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ，１．０３ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０１ｇ，０．００７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした後、該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、標題化合物を薄黄色固体として得た（０．１２ｇ、５２％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４４】
実施例８
【化１２】
【０１４５】
４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−（７−｛［（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチルプロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ジクロロメタン（１００ｍＬ）中におけるポリマー結合型トリフェニルホスフィン（４．１７ｇ，６．６７ｍｍｏｌ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ負荷）および（２Ｒ）−３−ブロモ−２−メチル−１−プロパノール（０．６９ｍＬ，６．６７ｍｍｏｌ）に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．９２ｍＬ，６．１４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液を滴下した。反応物を室温に温めた。室温で５０分後、中間体ＶＩＩ（０．７５ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）およびジクロロメタン（１０ｍＬ）中溶液を添加漏斗を介して反応混合物に加えた。反応物をさらに２時間攪拌した。樹脂を濾過によって除去し、ジクロロメタンおよびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。酢酸エチルおよびヘキサンでのトリチュレーションにより、所望の生成物を薄黄色固体として得た（１．６０ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４６】
ｂ）（（２Ｓ）−３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２−メチルプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例８（ａ）の化合物（０．５０ｇ，０．８３ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．９０ｇ，４．１５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．３５ｇ，４．１５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中混合物を６０℃で２時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。次いで、有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得た。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５２（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）＋
【０１４７】
ｃ）４−（７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例８（ｂ）の化合物に、ＣＨ２Ｃｌ２中における５０％ＴＦＡ（６ｍＬ）を加えた。室温で１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって精製して、所望の化合物を白色固体として得た（８６ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３５２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４８】
ｄ）４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に実施例８（ｃ）の化合物（８６ｍｇ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（１００μＬ）、トリエチルアミン（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、所望の化合物をオフホワイト色固体として得た（５８ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４００（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１４９】
実施例９
【化１３】
【０１５０】
４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）［（１Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
（３Ｓ）−３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）ブタン酸（１．００ｇ，４．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３５ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、ボラン−テトラヒドロフラン錯体（ＴＨＦ中における１．０Ｍ溶液，２５ｍＬ，２５．０ｍｍｏｌ）をシリンジを介して２分間かけて加えた。得られた反応混合物を次いで、０℃で８時間攪拌した。メタノールおよび酢酸（９：１，１５ｍＬ）の混合物を注意深く添加することによって、反応をクエンチした。反応物を周囲温度に温め、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル（７５ｍＬ）中に溶解し、１Ｎ ＨＣｌ（２５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）で連続的に洗浄した。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮して、所望の生成物を得（０．５３ｇ）、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。
【０１５１】
ｂ）［（１Ｓ）−３−ブロモ−１−メチルプロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ａ）の化合物（０．５３ｇ，２．８１ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（１．１２ｇ，３．３７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、固体トリフェニルホスフィン（０．９２ｇ，３．５１ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で１．５時間後、溶媒を減圧下で除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（４０：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ，シリカゲル）によって単離して、所望の物質を白色結晶性固体として得た（０．４７ｇ）。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．１８（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ），１．９１−２．１３（ｍ，２Ｈ），３．３５−３．５１（ｍ，２Ｈ），３．７２−３．９１（ｍ，１Ｈ），４．２５−４．５０（ｍ，１Ｈ）
【０１５２】
ｃ）（（１Ｓ）−３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−メチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｂ）の化合物（０．４６ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、中間体ＶＩＩ（０．５２ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．５０ｇ，４．６１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１７ｍＬ）中混合物を窒素下、３５℃で１６時間攪拌した。次いで、該混合物を酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ３０ｍＬ）で抽出し、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空下で濃縮して、粗生成物を得（０．８４ｇ）、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５３】
ｄ）（（１Ｓ）−３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−メチルプロピル）カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例９（ｃ）の化合物（０．８３ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．４５ｍＬ，４．６１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５４ｍＬ，１１．１ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．５５ｍＬ，３．６９ｍｍｏｌ）、亜鉛粉末（０．１２ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．２３ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．１１ｇ，０．０９ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中混合物を密閉フラスコ中、窒素雰囲気下、８０℃で２．５時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、水（１５０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３ｘ７５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（３０：１〜２０：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ，シリカゲル）、次いで、エーテル／ヘキサンからの結晶化により、所望の物質をオフホワイト色固体として得た（０．７４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５００．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５４】
ｅ）４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例９（ｄ）の化合物（０．１５ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）中溶液を周囲温度で、ＨＣｌの１，４−ジオキサン中溶液（４Ｎ，２．２５ｍＬ，９．０ｍｍｏｌ）で処理した。１８時間攪拌後、エーテルおよびヘキサンを加えた。得られた沈殿物を濾過によって単離し、乾燥エーテルで洗浄して、標題化合物を薄黄褐色固体として得た（９４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４００．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５５】
実施例１０
【化１４】
【０１５６】
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−｛７−［（３−ブロモプロピル）オキシ］−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル｝−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
中間体ＶＩＩ（１．７９ｇ，６．３８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（７５ｍＬ）中溶液に、炭酸セシウム（６．３４ｇ，１９．４ｍｍｏｌ）を添加し、次いで、１，３−ジブロモプロパン（３．５０ｍＬ，３４．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃で１８時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。ＴＨＦおよびヘキサンからのトリチュレーションにより、所望の物質を固体として得た（１．９２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０１．０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５７】
ｂ）４−［４−クロロ−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１０（ａ）の化合物（０．３３ｇ，０．８２ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中溶液に、シクロプロピルメチルアミン（０．３１ｇ，４．３２ｍｍｏｌ）を加えた。６０℃で１８時間加熱後、反応物を冷却し、溶媒を減圧下で除去した。ＴＨＦおよびヘキサンからのトリチュレーションにより、所望の物質を固体として得た（０．３４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９２．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５８】
ｃ）４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に脱気したＤＭＳＯ（２ｍＬ）、ＤＢＵ（０．２８ｇ，１．８４ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（０．２０ｇ，１．９８ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．４３ｇ，５．１０ｍｍｏｌ）、実施例１０（ｂ）の化合物（０．３４ｇ，０．８７ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．２１ｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を入れた。反応容器を密閉し、９０℃で３時間加熱した。混合物を焼結ガラス漏斗を通過させ、溶媒を濾液から減圧下で除去した。残渣を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）に付して、所望の化合物を固体として得た（０．１２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４０．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１５９】
実施例１１
【化１５】
【０１６０】
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ペンチル
ＤＭＦ（５ｍＬ）中における中間体ＶＩＩ（０．２８ｇ，１．００ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．６５ｇ，２．００ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−ペンチル（０．６４ｇ，１．５０ｍｍｏｌ）の混合物を４０℃で２時間攪拌した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、所望の物質を得、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５３５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６１】
ｂ）［２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ペンチル］イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１１（ａ）の化合物（０．５ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．６５ｇ，３．０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．９８ｇ，３．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）中混合物を６０℃で１．５時間加熱した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（５％〜３０％ＥｔＯＡＣ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の化合物を白色固体として得た（０．１３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６２】
ｃ）４−（７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１１（ｂ）の化合物（０．１３ｇ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中における３０％ＴＦＡを加えた。１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって、所望の化合物を白色固体として得た（８４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６３】
ｄ）４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１１（ｃ）の化合物（８４ｍｇ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．１０ｍＬ）、亜鉛粉末（５ｍｇ）、ＮａＩ（５ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）のＤＭＳＯ（３ｍＬ）中混合物を密閉フラスコ中、窒素雰囲気下、８０℃で３時間加熱した。１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって、所望の化合物を黄色固体として得た（６６ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６４】
実施例１２
【化１６】
【０１６５】
４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）−４−メチルペンチル
実施例１１（ａ）の化合物の製法と類似の方法で、中間体ＶＩＩ（０．５０ｇ，１．７８ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．８７ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸４−メチル−２−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）ペンチル（１．１７ｇ，２．６７ｍｍｏｌ）から、所望の化合物を白色固体として得た（０．４４ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５４９（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６６】
ｂ）４−（７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１１（ｂ）および１１（ｃ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１２（ａ）の化合物（０．１３ｇ，０．２３ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．２９ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．４５ｇ，１．３７ｍｍｏｌ）から、所望の物質を固体として得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６７】
ｃ）４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１１（ｄ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１２（ｂ）の化合物（８４ｍｇ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．１５ｍＬ）、亜鉛粉末（５ｍｇ）、ＮａＩ（５ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）から、所望の化合物を白色固体として得た（８１ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１６８】
実施例１３
【化１７】
【０１６９】
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ヘキシル
実施例１１（ａ）の化合物の製法と類似の方法で、中間体ＶＩＩ（０．２０ｇ，０．７１ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（０．４８ｇ，１．４２ｍｍｏｌ）および４−メチルベンゼンスルホン酸２−（｛［（４−メチルフェニル）スルホニル］オキシ｝メチル）−ヘキシル（０．４７ｇ，１．０７ｍｍｏｌ）から所望の化合物を得、これをさらに精製することなく次工程に用いた。
【０１７０】
ｂ）［２−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）ヘキシル］イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１１（ｂ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１３（ａ）の化合物、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．９２ｇ，４．２６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．３８ｇ，４．２６ｍｍｏｌ）から、所望の化合物を蝋状白色固体として得た（０．３８ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４９４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７１】
ｃ）４−（７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１１（ｃ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１３（ｂ）の化合物（０．３８ｇ）から所望の化合物を白色固体として得た（０．１３ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３９４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７２】
ｄ）４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１１（ｄ）の化合物の製法と類似の方法で、実施例１３（ｃ）の化合物（０．１３ｇ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．１０ｍＬ）、ＤＢＵ（０．１５ｍＬ）、亜鉛粉末（５ｍｇ）、ＮａＩ（５ｍｇ）および（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）から、所望の化合物を黄色固体として得た（１１３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７３】
実施例１４
【化１８】
【０１７４】
（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）１，１−ジメチルエチル［３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］
中間体ＶＩＩの化合物（３００ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）、［３−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（３９８ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（８７１ｍｇ，２．６７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（８ｍＬ）中混合物を窒素下、３７℃で１６時間攪拌した。次いで、混合物を酢酸エチル（４０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ１５ｍＬ）で洗浄した。合わせた水性洗浄液を酢酸エチル（２０ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機抽出物を次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空下で濃縮して粗生成物を得（＞６００ｍｇ）、これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５３８．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７５】
ｂ）［３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
実施例１４（ａ）の化合物（５７５ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．２６ｍＬ，２．６７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．８９ｍＬ，６．４１ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．３２ｍＬ，２．１４ｍｍｏｌ）、亜鉛粉末（７０ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（１６０ｍｇ，１．０７ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６２ｍｇ，５３．４μｍｏｌ）の混合物を密閉管中、窒素下、８１℃で２．５時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、水（９０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を水（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで、合わせた水性洗浄液を酢酸エチル（１００ｍＬ）で逆抽出した。合わせた有機抽出物を次いで、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、真空下で濃縮した。シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（３０：１〜２０：１ ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）により、所望の化合物を得た（５８０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５８６．３（Ｍ＋Ｈ）＋
４５０ｍｇのラセミ混合物を分取キラルＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム，２１ｍｍ内径ｘ２５０ｍｍ，１５ｍＬ／分，９０：５：５：０．１ ヘプタン：エタノール：メタノール：イソプロピルアミン移動相，ＵＶ検出２５４ｎｍ）に付すことによって、エナンチオマーを単離して、Ｅ−１（保持時間 １７分，１８１ｍｇ）およびＥ２（保持時間 ２２分，１５８ｍｇ）を得た。
【０１７６】
Ｅ１：１８１ｍｇ。キラルＨＰＬＣ分析により、９９．９％ｅｅ（ｔＲ＝１７分，Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム，２１ｍｍ内径 ｘ ２５０ｍｍ，１５ｍＬ／分，９０：５：５：０．１ ヘプタン：エタノール：メタノール：イソプロピルアミン移動相，ＵＶ検出 ２５４ｎｍ）。
Ｅ２：１５８ｍｇ。キラルＨＰＬＣ分析により、９７．８％ｅｅ（ｔＲ＝２２分，Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム，２１ｍｍ内径 ｘ ２５０ｍｍ，１５ｍＬ／分，９０：５：５：０．１ ヘプタン：エタノール：メタノール：イソプロピルアミン移動相，ＵＶ検出 ２５４ｎｍ）。
【０１７７】
ｃ）（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１４（ｂ）の化合物Ｅ２（１５８ｍｇ，０．２７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）中溶液を周囲温度で、塩酸（１，４−ジオキサン中における４Ｎ溶液，２ｍＬ，８．０ｍｍｏｌ）で１６時間処理した。得られた沈澱を濾過によって除去し、真空下、６０℃で１時間乾燥させて、標題物質をオフホワイト色固体として得た（１３３ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４８６．５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１７８】
実施例１５
【化１９】
【０１７９】
４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）｛［１−（｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝メチル）シクロプロピル］メチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル
ジクロロメタン（３０ｍＬ）中におけるポリマー結合型トリフェニルホスフィン（１．５６ｇ，２．５０ｍｍｏｌ，１．６ｍｍｏｌ／ｇ負荷）および｛［１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル］メチル｝カルバミン酸１，１−ジメチルエチル（０．４８ｍＬ，２．３２ｍｍｏｌ）に、０℃にて、ＤＥＡＤ（０．３３ｍＬ，２．２０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液を滴下した。反応物を室温に温めた。室温で５０分後、添加漏斗を介して中間体ＶＩＩ（０．２８ｇ，１．００ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）中溶液を反応混合物に加えた。反応物を一晩攪拌した。樹脂を濾過によって除去し、ジクロロメタンおよびＴＨＦで徹底的に洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）によって、所望の化合物を得た（０．５０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８０】
ｂ）４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル］−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
実施例１５（ａ）の化合物（０．５０ｇ）に、４０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）を加えた。室温で１時間後、溶媒を減圧下で除去した。分取逆相ＨＰＬＣ（ＹＭＣ／ＯＤＳ−Ａカラム，５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって、所望の化合物を白色固体として得た（０．１７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３６４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８１】
ｃ）４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に、実施例１５（ｂ）の化合物（１６６ｍｇ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（１００μＬ）、トリエチルアミン（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を加えた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、８０℃で３．５時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍ ｘ ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、所望の化合物をオフホワイト色固体として得た（１３０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８２】
実施例１６
【化２０】
【０１８３】
４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝ヘキシル
中間体ＶＩＩの化合物（１５０ｍｇ，０．５３ｍｍｏｌ）、４−メチルベンゼンスルホン酸３−ヒドロキシヘキシル（２１６ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）（１，３−ヘキサンジオールおよび塩化ｐ−トリルスルホニルから調製された）、トリフェニルホスフィン（０．１３６ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中懸濁液に、室温で、ＤＩＡＤ（０．１２５ｍＬ，０．６４ｍｍｏｌ）を滴下した。１．５時間後、さらにトリフェニルホスフィン（０．１３６ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（０．１２５ｍＬ，０．６４ｍｍｏｌ）を加えた。さらに１．５時間後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）によって、所望の物質を濃黄色ゴムとして得た（０．５７ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５３５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８４】
ｂ）４−（７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１，２，５−オキサジアゾール−３−アミン
ＤＭＦ（４ｍＬ）中における実施例１６（ａ）の化合物（２３５ｍｇ）に、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（４３４ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（７０５ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を６０℃に３時間加熱した。室温に冷却後、反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄した後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を４０％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）で処理した。１時間後、再び溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ／ＯＤＳ−Ａカラム，５０ｍｍｘ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）により、所望の化合物を白色固体としてとして得た（１４１ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３８０（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８５】
ｃ）４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
厚壁圧力容器に、実施例１６（ｃ）の化合物（１４１ｍｇ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（１０ｍｇ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（１００μＬ）、トリエチルアミン（１００μＬ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を入れた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、８０℃で３時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍｘ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、標題化合物をオフホワイト色固体として得た（１１０ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４２８（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８６】
実施例１７
【化２１】
【０１８７】
４−［７−［（３−アミノ−２−（−）−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）２−フルオロ−１，３−プロパンジオール
水素化ホウ素ナトリウム（０．７６ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）中攪拌溶液に、０℃にて、塩化カルシウム（１．７５ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温に温め、１時間攪拌した。次いで、混合物を−１０℃に冷却し、フルオロプロパン二酸ジメチル（２．００ｇ，１３．３ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。反応物を室温に温め、１０時間攪拌した。次いで、反応物を−１０℃に冷却し、濃ＨＣｌ（２．５ｍＬ）をゆっくりと加えた。反応物を濾過し、酢酸エチル（３ｘ２５ｍＬ）で洗浄した。減圧下、合わせた有機濾液から溶媒を除去して、所望の物質を油として得た（１．５０ｇ）。これをさらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ９５．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８８】
ｂ）ビス（４−メチルベンゼンスルホン酸）２−フルオロ−１，３−プロパンジイル
実施例１７（ａ）の化合物（１．５０ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）のピリジン（２０ｍＬ）中攪拌溶液に、−１０℃にて、塩化４−メチルベンゼンスルホニル（７．６０ｇ，４０．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温に温め、１２時間攪拌した。該溶液を１Ｎ ＨＣｌで洗浄し、酢酸エチル（３ｘ２５ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（０〜７０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の化合物を得た（１．２０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０３．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１８９】
ｃ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−（｛［（１，１−ジメチルエチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）−２−フルオロプロピル
実施例１７（ｂ）の化合物（０．３０ｇ，０．７０ｍｍｏｌ）、イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）（０．２０ｇ，０．８４ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．３７ｇ，１．２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）中混合物を窒素下、５０℃で１６時間攪拌した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（３ｘ１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。該有機溶液をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、所望のラセミ生成物を得た（０．１９ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４４８．２（Ｍ＋Ｈ）＋
該エナンチオマーを、分取キラルＨＰＬＣ（４インチばね付きｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ（２０ミクロン）カラム；１００％メタノール）によって単離した。
Ｅ１：キラルＨＰＬＣ分析により、９９．５％ｅｅ；
［α］２１Ｄ＋１１．１（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）
Ｅ２：キラルＨＰＬＣ分析により、９８％ｅｅ；
［α］２１Ｄ−１０．６（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）
【０１９０】
ｄ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２−フルオロプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１７（ｃ）の化合物（Ｅ２，０．５０ｇ，１．１２ｍｍｏｌ）、中間体ＶＩＩの化合物（０．３０ｇ，１．１０ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（０．５５ｇ，１．７０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）中混合物を窒素下、５０℃で１６時間攪拌した。反応物を周囲温度に冷却後、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、次いで、水（３ｘ１５ｍＬ）およびブライン（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｃｋ ＯＤＳ−Ａカラム，３０ｍｍ内径ｘ７５ｍｍ，２０ｍＬ／分，勾配，Ａ：水−０．１％トリフルオロ酢酸，Ｂ：アセトニトリル−０．１％トリフルオロ酢酸，１２分間で１０−９０％アセトニトリル，ＵＶ検出 ２５４ｎｍ）により、所望の化合物をオフホワイト色固体として得た（０．６０ｇ、９２％収率）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５５５．２（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９１】
ｅ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−２−フルオロプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
厚壁圧力容器に、実施例１７（ｄ）の化合物（０．１４ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（０．０２ｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、ＮａＩ（０．０４ｇ，０．２７ｍｍｏｌ）、ＤＢＵ（０．２０ｍＬ，１．３２ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（０．１５ｍＬ，１．０７ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチン−２−オール（０．２０ｍＬ，２．０７ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（５ｍＬ）中における（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（０．０４ｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を入れた。窒素で１０分間パージした後、反応容器を密閉し、８０℃で２．５時間加熱した。反応物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、薄黄色残渣を得た。該粗残渣をフラッシュクロマトグラフィー（０−１０％ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３，シリカゲル）に付して、所望の化合物を薄黄色固体として得た（０．１０ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ６０４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９２】
ｆ）４−［７−［（３−アミノ−２−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１７（ｅ）の化合物（０．４８ｇ，０．７９ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍＬ）中溶液に、メタノール中における４Ｎ ＨＣｌ（３．５ｍＬ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度で３時間後、溶媒を減圧下で除去した。残渣をジクロロメタンでトリチュレートし、固体を濾過によって収集して、標題化合物を薄黄色固体として得た（０．２７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４０４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９３】
実施例１８
【化２２】
【０１９４】
４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オールの調製
ａ）３−シクロヘキシル−３−ヒドロキシプロピル−４−メチルベンゼンスルホネート
ＴＨＦ（７５ｍＬ）中における３−シクロヘキシル−３−オキソ−プロピオン酸エチルエステル（１２．５ｇ，１２．６３ｍｍｏｌ）を０℃に冷却した。水素化アルミニウムリチウムのＴＨＦ中溶液（１５ｍＬ，３０ｍｍｏｌ，ＴＨＦ中２Ｍ）を注意深く加え、反応物を一晩かけて周囲温度に戻した。反応を水（１．２ｍＬ）、１５％水性ＮａＯＨ（１．２ｍＬ）および水（３．６ｍＬ）の連続的添加によってクエンチした。該懸濁液を室温で１時間よく攪拌した。固体を濾過によって除去した。溶媒を濾液から減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）によって、１−シクロヘキシル−１，３−プロパンジオールを無色油として得た（０．７６ｇ）。
１−シクロヘキシル−１，３−プロパンジオール（０．７６ｇ，４．８２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．１ｍＬ，７．９１ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（７３．６ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）中溶液に、０℃にて、塩化ｐ−トルエンスルホニル（１．０８ｇ，５．６９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中溶液を加えた。反応物を一晩で室温に戻した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）に付して、所望の化合物を得た（１．２７ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３１３．３（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９５】
ｂ）４−メチルベンゼンスルホン酸３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−シクロヘキシルプロピル
実施例１８（ａ）の化合物 ３−シクロヘキシル−３−ヒドロキシプロピル−４−メチルベンゼンスルホネート（１．２７ｇ，４．０８ｍｍｏｌ）および中間体ＶＩＩの化合物（１．０１ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中溶液に、０℃にて、トリフェニルホスフィン（１．７５ｇ，６．６７ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（１．５ｍＬ，７．７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を周囲温度に温めた。２日後、さらにトリフェニルホスフィン（１．６５ｇ，６．２９ｍｍｏｌ）およびＤＩＡＤ（０．８０ｍＬ，４．１３ｍｍｏｌ）を加えた。周囲温度でさらに５時間後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の物質を得た（３．０７ｇ）。これには、１，２−ヒドラジンジカルボン酸ビス（１−メチルエチル）が混入していたが、さらに精製することなく、次工程に用いた。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ５７５．４（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９６】
ｃ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−４−クロロ−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−シクロヘキシルプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
実施例１８（ｂ）の化合物（０．９５ｇ，１．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、イミドジカルボン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．７４ｇ，３．３９ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．６４ｇ，５．０３ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６０℃で１８時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却後、溶媒を減圧下で除去した。フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン，シリカゲル）により、所望の物質を得た（０．１２ｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ６２０．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９７】
ｄ）（３−｛［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−４−（３−ヒドロキシ−３−メチル−１−ブチン−１−イル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−７−イル］オキシ｝−３−シクロヘキシルプロピル）イミドジカルボン酸ビス（１，１−ジメチルエチル）
厚壁圧力容器に、実施例１８（ｃ）の化合物（１２３ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）、２−メチル−３−ブチ−２−オール（１００μＬ，１．０２ｍｍｏｌ）、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（５６ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）、Ｚｎ粉末（１０ｍｇ）、ＮａＩ（１０ｍｇ）、ＤＢＵ（６０μＬ，０．４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（６０μＬ，０．４３ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（３ｍＬ）を加えた。該混合物を窒素で１０分間パージした。該容器を密閉し、９０℃で４時間加熱した。反応物を室温に冷却し、生成物を分取ＨＰＬＣ（ＹＭＶ／ＯＤＳ−Ａカラム、５０ｍｍｘ２０ｍｍ内径；５−９０％アセトニトリル／水（０．１％ＴＦＡ）；２０ｍＬ／分；２１４ｎｍ）によって単離して、所望の化合物を油として得た（７６．８ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ６６８．６（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９８】
ｅ）４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール
実施例１８（ｄ）の化合物（７６．８ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を２５％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２中で１時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をメタノール（２ｍＬ）中に溶解した。ジエチルエーテル中における４Ｎ塩酸溶液を加えた。周囲温度１時間静置後、得られた沈澱を収集し、真空デシケーター中で乾燥させて、標題化合物を得た（３８．４ｍｇ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋
【０１９９】
実施例１９ カプセル組成物
本発明の化合物を投与するための経口投与形態は、標準的な２片のハードゼラチンカプセルに下表Ｉに示される分量で成分を充填することによって製造される。
【０２００】
【表２】
【０２０１】
実施例２０ 注射可能な非経口組成物
本発明の化合物を投与するための注射可能形態は、１．５重量％の４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール二塩酸塩（実施例４の化合物）を水中における１０容量％のプロピレングリコール中で攪拌することによって製造される。
【０２０２】
実施例２１ 錠剤組成物
下表ＩＩに示されるシュークロース、硫酸カルシウム二水和物およびＡｋｔ阻害剤を示される分量で、１０％ゼラチン溶液と共に混合および造粒する。該湿潤顆粒をスクリーンし、乾燥させ、デンプン、タルクおよびステアリン酸と混合し、スクリーンし、打錠する。
【０２０３】
【表３】
【０２０４】
本発明の好ましい具体例を上記に示したが、本発明は本明細書中に開示される正確な指示に限定されないものであり、また、特許請求の範囲の範囲内に伴う全ての変更に対する権利を保有するものと解釈されるべきである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２−（−）−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；および
４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグから選択される化合物。
【請求項２】
請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグおよび医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを医薬上許容される担体と結合させることを特徴とする、医薬上許容される担体および有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグを含む医薬組成物の調製方法。
【請求項４】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項５】
哺乳動物がヒトである請求項４記載の方法。
【請求項６】
癌が脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される請求項４記載の方法。
【請求項７】
癌および関節炎から選択される疾患または病態の治療あるいは該疾患または病態の重篤度の軽減において有用な医薬の製造における請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグの使用。
【請求項８】
治療の必要な哺乳動物に治療上有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物においてＡｋｔ活性を阻害する方法。
【請求項９】
哺乳動物がヒトである請求項８記載の方法。
【請求項１０】
治療の必要な哺乳動物に治療上有効量の
ａ）請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグ、および
ｂ）少なくとも１つの抗新生物剤
を同時投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌を治療する方法。
【請求項１１】
少なくとも１つの抗新生物剤が、本質的に、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択される請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
少なくとも１つの抗新生物剤がジテルペノイドおよびビンカアルカロイドから選択される抗微小管剤である請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも１つの抗新生物剤がジテルペノイドである請求項１０記載の方法。
【請求項１４】
少なくとも１つの抗新生物剤がビンカアルカロイドである請求項１０記載の方法。
【請求項１５】
少なくとも１つの抗新生物剤が白金配位錯体である請求項１０記載の方法。
【請求項１６】
少なくとも１つの抗新生物剤がパクリタキセル、カルボプラチンまたはビノレルビンである請求項１０記載の方法。
【請求項１７】
少なくとも１つの抗新生物剤がパクリタキセルである請求項１０記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１つの抗新生物剤がカルボプラチンである請求項１０記載の方法。
【請求項１９】
少なくとも１つの抗新生物剤がビノレルビンである請求項１０記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも１つの抗新生物剤がシグナル変換経路阻害剤である請求項１０記載の方法。
【請求項２１】
シグナル変換経路阻害剤がＶＥＧＦＲ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦＲ、ＢＴＫ、ＩＧＦＲ−１、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣおよびｃ−ｆｍｓからなる群から選択される成長因子受容体キナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
シグナル変換経路阻害剤がｒａｆｋ、ａｋｔおよびＰＫＣ−ｚｅｔａからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２３】
シグナル変換経路阻害剤がキナーゼのｓｒｃファミリーから選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２４】
シグナル変換経路阻害剤がｃ−ｓｒｃの阻害剤である請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
シグナル変換経路阻害剤がファルネシルトランスフェラーゼおよびゲラニルゲラニルトランスフェラーゼの阻害剤から選択されるＲａｓオンコジーンの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２６】
シグナル変換経路阻害剤がＰＩ３Ｋからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２７】
少なくとも１つの抗新生物剤が細胞周期シグナル伝達阻害剤である請求項１０記載の方法。
【請求項２８】
細胞周期シグナル伝達阻害剤がＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６群の阻害剤から選択される請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
治療において有用な請求項１０記載の医薬の組み合わせ。
【請求項３０】
癌の治療において有用な医薬の製造のための請求項１０記載の医薬の組み合わせの使用。
【請求項１】
４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−（シクロペンチルアミノ）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｒ）−３−アミノ−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２，２−ジメチルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（２Ｓ）−３−アミノ−２−メチルプロピル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［（３Ｓ）−３−アミノブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−（｛３−［（シクロプロピルメチル）アミノ］プロピル｝オキシ）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）−４−メチルペンチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［２−（アミノメチル）ヘキシル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
（−）−４−（２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−７−｛［３−アミノ−３−（テトラヒドロ−２Ｈ−チオピラン−４−イル）プロピル］オキシ｝−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル）−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−（｛［１−（アミノメチル）シクロプロピル］メチル｝オキシ）−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−｛［１−（２−アミノエチル）ブチル］オキシ｝−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
４−［７−［（３−アミノ−２−（−）−フルオロプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；および
４−［７−［（３−アミノ−１−シクロヘキシルプロピル）オキシ］−２−（４−アミノ−１，２，５−オキサジアゾール−３−イル）−１−エチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−４−イル］−２−メチル−３−ブチン−２−オール；
および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグから選択される化合物。
【請求項２】
請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグおよび医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを医薬上許容される担体と結合させることを特徴とする、医薬上許容される担体および有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物およびプロドラッグを含む医薬組成物の調製方法。
【請求項４】
治療の必要のある哺乳動物に治療上有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌および関節炎から選択される疾患または病態を治療あるいは該疾患または病態の重篤度を軽減する方法。
【請求項５】
哺乳動物がヒトである請求項４記載の方法。
【請求項６】
癌が脳腫瘍（神経膠腫）、神経膠芽腫、Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ症候群、コーデン病、Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ病、乳癌、結腸癌、頭頚部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫および甲状腺癌から選択される請求項４記載の方法。
【請求項７】
癌および関節炎から選択される疾患または病態の治療あるいは該疾患または病態の重篤度の軽減において有用な医薬の製造における請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグの使用。
【請求項８】
治療の必要な哺乳動物に治療上有効量の請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを特徴とする、該哺乳動物においてＡｋｔ活性を阻害する方法。
【請求項９】
哺乳動物がヒトである請求項８記載の方法。
【請求項１０】
治療の必要な哺乳動物に治療上有効量の
ａ）請求項１記載の化合物および／またはその医薬上許容される塩、水和物、溶媒和物またはプロドラッグ、および
ｂ）少なくとも１つの抗新生物剤
を同時投与することを特徴とする、該哺乳動物において癌を治療する方法。
【請求項１１】
少なくとも１つの抗新生物剤が、本質的に、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似物、シグナル変換経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ脈管形成阻害剤、免疫治療剤、プロアポトーシス剤、および細胞周期シグナル伝達阻害剤からなる群から選択される請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
少なくとも１つの抗新生物剤がジテルペノイドおよびビンカアルカロイドから選択される抗微小管剤である請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも１つの抗新生物剤がジテルペノイドである請求項１０記載の方法。
【請求項１４】
少なくとも１つの抗新生物剤がビンカアルカロイドである請求項１０記載の方法。
【請求項１５】
少なくとも１つの抗新生物剤が白金配位錯体である請求項１０記載の方法。
【請求項１６】
少なくとも１つの抗新生物剤がパクリタキセル、カルボプラチンまたはビノレルビンである請求項１０記載の方法。
【請求項１７】
少なくとも１つの抗新生物剤がパクリタキセルである請求項１０記載の方法。
【請求項１８】
少なくとも１つの抗新生物剤がカルボプラチンである請求項１０記載の方法。
【請求項１９】
少なくとも１つの抗新生物剤がビノレルビンである請求項１０記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも１つの抗新生物剤がシグナル変換経路阻害剤である請求項１０記載の方法。
【請求項２１】
シグナル変換経路阻害剤がＶＥＧＦＲ２、ＴＩＥ２、ＰＤＧＦＲ、ＢＴＫ、ＩＧＦＲ−１、ＴｒｋＡ、ＴｒｋＢ、ＴｒｋＣおよびｃ−ｆｍｓからなる群から選択される成長因子受容体キナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
シグナル変換経路阻害剤がｒａｆｋ、ａｋｔおよびＰＫＣ−ｚｅｔａからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２３】
シグナル変換経路阻害剤がキナーゼのｓｒｃファミリーから選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２４】
シグナル変換経路阻害剤がｃ−ｓｒｃの阻害剤である請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
シグナル変換経路阻害剤がファルネシルトランスフェラーゼおよびゲラニルゲラニルトランスフェラーゼの阻害剤から選択されるＲａｓオンコジーンの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２６】
シグナル変換経路阻害剤がＰＩ３Ｋからなる群から選択されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤である請求項２０記載の方法。
【請求項２７】
少なくとも１つの抗新生物剤が細胞周期シグナル伝達阻害剤である請求項１０記載の方法。
【請求項２８】
細胞周期シグナル伝達阻害剤がＣＤＫ２、ＣＤＫ４およびＣＤＫ６群の阻害剤から選択される請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
治療において有用な請求項１０記載の医薬の組み合わせ。
【請求項３０】
癌の治療において有用な医薬の製造のための請求項１０記載の医薬の組み合わせの使用。
【公表番号】特表２００９−５１７３４２（Ｐ２００９−５１７３４２Ａ）
【公表日】平成２１年４月３０日（２００９．４．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４０１７０（Ｐ２００８−５４０１７０）
【出願日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４３５１８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０５８８５２
【国際公開日】平成１９年５月２４日（２００７．５．２４）
【出願人】（５９１００２９５７）スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション (341)
【氏名又は名称原語表記】ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年４月３０日（２００９．４．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月９日（２００６．１１．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０４３５１８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０５８８５２
【国際公開日】平成１９年５月２４日（２００７．５．２４）
【出願人】（５９１００２９５７）スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション (341)
【氏名又は名称原語表記】ＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＢＥＥＣＨＡＭ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
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