ＣＲＳＰタンパク質、それらをコードする核酸分子およびその用途
【課題】 多細胞生物体の細胞の形成、分化および維持に関与するタンパク質を提供。
【解決手段】 システインに富む分泌性タンパク質(Cysteine-Rich Secreted Proteins)
と称される分泌性タンパク質およびそれをコードする核酸分子、並びにそれらの使用が、提供される。
【解決手段】 システインに富む分泌性タンパク質(Cysteine-Rich Secreted Proteins)
と称される分泌性タンパク質およびそれをコードする核酸分子、並びにそれらの使用が、提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４のアミノ酸配列の天然の対立遺伝子変異体を含んでなるポリペプチドをコードする核酸であって、５０〜６５℃における０.２×ＳＳＣ，０．１％ＳＤＳのストリンジェントな洗浄条件下で配列番号６の相補体にハイブリダイズする核酸、
ｂ）ａ）の相補体であるヌクレオチド配列を含んでなる核酸、ならびに
ｃ）ｉ）ａ）の核酸、
ｉｉ）ｂ）の核酸、および
ｉｉｉ）配列番号６の全長に亙り、配列番号６に少なくとも８０％ヌクレオチド同一性を有するヌクレオチド配列の５００個のヌクレオチドを含んでなり、かつ、細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節するポリペプチドをコードする核酸、
からなる群より選ばれる核酸を含んでなる組換え真核細胞発現ベクター、
からなる群より選ばれる単離された核酸分子。
【請求項２】
単離された核酸分子が、異種ポリペプチドをコードする核酸配列をさらに含んでなる請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項３】
請求項１のｃ）に記載の組換え真核細胞発現ベクターを含んでなる宿主細胞。
【請求項４】
請求項１に記載の核酸分子を含んでなる非ヒト宿主細胞。
【請求項５】
組換え発現ベクターが発現され、かつ、ポリペプチドが生産される条件下で請求項４に記載の宿主細胞を培養することを含んでなるポリペプチドの生産方法。
【請求項６】
ａ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４の少なくとも１５の連続するアミノ酸を含んでなるポリペプチド、
ｂ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４のアミノ酸配列の天然の対立遺伝子変異体であって、細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節し、かつ、５０〜６５℃における０.２×ＳＳＣ，０．１％ＳＤＳのストリンジェントな洗浄条件下で配列番号６にハイブリダイズする核酸によりコードされている前記天然の対立遺伝子変異体を含んでなるポリペプチド、および
ｃ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４の全長に亙り、配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４のアミノ酸配列と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列含んでなり、かつ、細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節するポリペプチド、
からなる群より選ばれる単離されたポリペプチド。
【請求項７】
配列番号５に記載のアミノ酸残基２０〜２４４を含んでなる請求項６記載の単離されたポリペプチド。
【請求項８】
請求項６に記載のポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその免疫学的活性部分。
【請求項９】
ａ）サンプルと請求項８に記載の抗体またはその免疫学的活性部分を接触させる工程、および
ｂ）前記抗体がサンプル中のポリペプチドに結合するか否かを測定し、こうしてサンプル中の前記ポリペプチドの存在を検出する工程、
をサンプル中のＣＲＳＰ−２ポリペプチドのインビトロでの検出方法。
【請求項１０】
ａ）サンプルを請求項１に記載の核酸分子に特異的に結合する核酸プローブまたはプライマーと接触させる工程、および
ｂ）前記核酸プローブまたはプライマーがサンプル中の核酸分子に結合するか否かを決定し、こうしてサンプル中の請求項１に記載の核酸分子の存在を検出する工程、
を含んでなるサンプル中の請求項１に記載の核酸分子のインビトロでの検出方法。
【請求項１１】
ａ）請求項６に記載のポリペプチドまたは請求項６に記載のポリペプチド発現細胞を試験化合物と接触させる工程、および
ｂ）前記試験化合物が請求項６に記載のポリペプチドに結合するか否かを決定する工程、を含んでなるＣＲＳＰ−２ポリペプチドに結合する化合物のインビトロでの同定方法。
【請求項１２】
ａ）ポリペプチドに対する結合の直接検出、
ｂ）競争結合アッセイを使用する結合の検出、および
ｃ）細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を検出するためのアッセイを使用する結合の検出、
からなる群より選ばれる方法を使用して前記結合が測定される請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
請求項８に記載の抗体またはその免疫学的活性部分の細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節する量とＣＲＳＰ−２ポリペプチドを接触させることを含んでなる、ＣＲＳＰ−２ポリペプチドの細胞のシグナル伝達活性のまたは細胞のＣＲＳＰ−２ポリペプチドの発現のインビトロでの調節方法。
【請求項１４】
ａ）試験化合物と請求項６に記載のポリペプチドまたは請求項６に記載のポリペプチド発現細胞を接触させる工程、および
ｂ）前記ポリペプチドの細胞のシグナル伝達または細胞の増殖活性に対する試験化合物の効果を決定し、こうしてＣＲＳＰ−２の細胞のシグナル伝達または細胞の増殖活性を調節する工程、
を含んでなるＣＲＳＰ−２の細胞のシグナル伝達または細胞の増殖活性を調節する化合物のインビトロでの同定方法。
【請求項１５】
請求項１に記載の核酸分子および製薬学的に許容され得るキャリアーを含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１６】
請求項６に記載のポリペプチドおよび製薬学的に許容され得るキャリアーを含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１７】
請求項８に記載の抗体またはその免疫学的活性部分および製薬学的に許容され得るキャリアーを含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１】
ａ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４のアミノ酸配列の天然の対立遺伝子変異体を含んでなるポリペプチドをコードする核酸であって、５０〜６５℃における０.２×ＳＳＣ，０．１％ＳＤＳのストリンジェントな洗浄条件下で配列番号６の相補体にハイブリダイズする核酸、
ｂ）ａ）の相補体であるヌクレオチド配列を含んでなる核酸、ならびに
ｃ）ｉ）ａ）の核酸、
ｉｉ）ｂ）の核酸、および
ｉｉｉ）配列番号６の全長に亙り、配列番号６に少なくとも８０％ヌクレオチド同一性を有するヌクレオチド配列の５００個のヌクレオチドを含んでなり、かつ、細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節するポリペプチドをコードする核酸、
からなる群より選ばれる核酸を含んでなる組換え真核細胞発現ベクター、
からなる群より選ばれる単離された核酸分子。
【請求項２】
単離された核酸分子が、異種ポリペプチドをコードする核酸配列をさらに含んでなる請求項１記載の単離された核酸分子。
【請求項３】
請求項１のｃ）に記載の組換え真核細胞発現ベクターを含んでなる宿主細胞。
【請求項４】
請求項１に記載の核酸分子を含んでなる非ヒト宿主細胞。
【請求項５】
組換え発現ベクターが発現され、かつ、ポリペプチドが生産される条件下で請求項４に記載の宿主細胞を培養することを含んでなるポリペプチドの生産方法。
【請求項６】
ａ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４の少なくとも１５の連続するアミノ酸を含んでなるポリペプチド、
ｂ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４のアミノ酸配列の天然の対立遺伝子変異体であって、細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節し、かつ、５０〜６５℃における０.２×ＳＳＣ，０．１％ＳＤＳのストリンジェントな洗浄条件下で配列番号６にハイブリダイズする核酸によりコードされている前記天然の対立遺伝子変異体を含んでなるポリペプチド、および
ｃ）配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４の全長に亙り、配列番号５のアミノ酸残基２０〜２４４のアミノ酸配列と少なくとも８０％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列含んでなり、かつ、細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節するポリペプチド、
からなる群より選ばれる単離されたポリペプチド。
【請求項７】
配列番号５に記載のアミノ酸残基２０〜２４４を含んでなる請求項６記載の単離されたポリペプチド。
【請求項８】
請求項６に記載のポリペプチドに特異的に結合する抗体またはその免疫学的活性部分。
【請求項９】
ａ）サンプルと請求項８に記載の抗体またはその免疫学的活性部分を接触させる工程、および
ｂ）前記抗体がサンプル中のポリペプチドに結合するか否かを測定し、こうしてサンプル中の前記ポリペプチドの存在を検出する工程、
をサンプル中のＣＲＳＰ−２ポリペプチドのインビトロでの検出方法。
【請求項１０】
ａ）サンプルを請求項１に記載の核酸分子に特異的に結合する核酸プローブまたはプライマーと接触させる工程、および
ｂ）前記核酸プローブまたはプライマーがサンプル中の核酸分子に結合するか否かを決定し、こうしてサンプル中の請求項１に記載の核酸分子の存在を検出する工程、
を含んでなるサンプル中の請求項１に記載の核酸分子のインビトロでの検出方法。
【請求項１１】
ａ）請求項６に記載のポリペプチドまたは請求項６に記載のポリペプチド発現細胞を試験化合物と接触させる工程、および
ｂ）前記試験化合物が請求項６に記載のポリペプチドに結合するか否かを決定する工程、を含んでなるＣＲＳＰ−２ポリペプチドに結合する化合物のインビトロでの同定方法。
【請求項１２】
ａ）ポリペプチドに対する結合の直接検出、
ｂ）競争結合アッセイを使用する結合の検出、および
ｃ）細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を検出するためのアッセイを使用する結合の検出、
からなる群より選ばれる方法を使用して前記結合が測定される請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
請求項８に記載の抗体またはその免疫学的活性部分の細胞のシグナル伝達または細胞の増殖を調節する量とＣＲＳＰ−２ポリペプチドを接触させることを含んでなる、ＣＲＳＰ−２ポリペプチドの細胞のシグナル伝達活性のまたは細胞のＣＲＳＰ−２ポリペプチドの発現のインビトロでの調節方法。
【請求項１４】
ａ）試験化合物と請求項６に記載のポリペプチドまたは請求項６に記載のポリペプチド発現細胞を接触させる工程、および
ｂ）前記ポリペプチドの細胞のシグナル伝達または細胞の増殖活性に対する試験化合物の効果を決定し、こうしてＣＲＳＰ−２の細胞のシグナル伝達または細胞の増殖活性を調節する工程、
を含んでなるＣＲＳＰ−２の細胞のシグナル伝達または細胞の増殖活性を調節する化合物のインビトロでの同定方法。
【請求項１５】
請求項１に記載の核酸分子および製薬学的に許容され得るキャリアーを含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１６】
請求項６に記載のポリペプチドおよび製薬学的に許容され得るキャリアーを含んでなる製薬学的組成物。
【請求項１７】
請求項８に記載の抗体またはその免疫学的活性部分および製薬学的に許容され得るキャリアーを含んでなる製薬学的組成物。
【図２】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図９】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図９】
【公開番号】特開２０１０−２２７１１０（Ｐ２０１０−２２７１１０Ａ）
【公開日】平成２２年１０月１４日（２０１０．１０．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１１１１６３（Ｐ２０１０−１１１１６３）
【出願日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【分割の表示】特願２００５−３７０２６２（Ｐ２００５−３７０２６２）の分割
【原出願日】平成１０年４月１６日（１９９８．４．１６）
【出願人】（５００１３４３７７）ミレニアム・フアーマシユーチカルズ・インコーポレーテツド (3)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１０月１４日（２０１０．１０．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年５月１３日（２０１０．５．１３）
【分割の表示】特願２００５−３７０２６２（Ｐ２００５−３７０２６２）の分割
【原出願日】平成１０年４月１６日（１９９８．４．１６）
【出願人】（５００１３４３７７）ミレニアム・フアーマシユーチカルズ・インコーポレーテツド (3)
【Ｆターム（参考）】
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