ＨＡＳ２−刺激性植物抽出物
【課題】 本発明の具体的な目的は、引き締まり性および／または弾性および／または組織水分付与性を増加し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、並びに／或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒および／または細胞の増殖、泳動もしくは分化および／または皮膚萎縮を改良し、並びに／或いは皮膚上の老化の影響を減じ、そして特に老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失、および／または萎縮瘢痕を減ずることである。
【解決手段】 本発明はヒアルロナン・シンセターゼの合成、特にヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の合成を刺激するための植物抽出物に関する。
【解決手段】 本発明はヒアルロナン・シンセターゼの合成、特にヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の合成を刺激するための植物抽出物に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年１１月１７日に出願されたフランス特許出願番号第０５１１６７２号の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、ＨＡＳ蛋白質の刺激後に、皮膚の、特別には真皮の、引き締め（ｆｉｒｍｉｎｇ）効果を特に得るための、植物抽出物を含んでなる化粧品および製薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
細胞外マトリックスは蛋白質または炭水化物源の様々な分子の複雑な網状組織よりなり、それらは細胞機能を修正するために好ましい環境に寄与する。
【０００４】
例えば増殖、泳動または分化の如き細胞事象中に、細胞外マトリックスが変化しそして適応する。多糖群では、グリコサミノグリカン類（ＧＡＧ類）、そしてこれらの中のヒアルロン酸（ＨＡ）、がこの細胞外マトリックスの重要な構造成分である。非常に高い分子量を有するこれらのＧＡＧ類は多くの生理的機能、例えば皮膚への水分付与、皮膚障壁効果の増加、および水を留めるそれらの能力による組織の回復力および弾性の増加、を有する。さらに、それらは脈管形成または血液毛管の新形成、治癒、細胞表面に位置する例えばＣＤ４４およびＲＨＡＭＭ類の如き膜受容体（ヒアルロナン介在運動用の受容体）による増殖、泳動および分化の調節において記載されてきた（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３）。
【０００５】
さらに、真皮−表皮界面におけるヒアルロン酸の存在がこれら２種の組織間の代謝交換を促進させうると思われる。最後に、ヒアルロン酸は例えばベルシカン、フィブリノーゲン並びにコラーゲンタイプＩおよびＶＩの如き他の分子との会合を可能にする（非特許文献４、非特許文献５）。
【０００６】
他のＧＡＧ類より十分に研究されてきたヒアルロン酸は、繰り返し二糖単位：Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン−β（１→４）−Ｄ−グルクロン酸β（１→３）より構成される線状多糖に類似する。それは、血漿膜の内側で、β（１→４）およびβ（１→３）結合を介して組み合わせされるＵＤＰ−Ｎ−アセチルグルコサミンおよびＵＤＰ−Ｄ−グルクロン酸の連続的添加により合成されそして次に細胞外空間内に直接分泌される（非特許文献６）。この合成は、脊椎動物における種々の染色体上に位置する３つの別個な遺伝子から転写される３種のイソ形態：ＨＡＳ１、ＨＡＳ２およびＨＡＳ３として同定されるヒアルロナン・シンセターゼ類（ＨＡＳ類）と称する単量体状の膜−結合された酵素により行われる（非特許文献６）。より特に、ＨＡＳ２蛋白質をコードする遺伝子は染色体８の上に位置しそして例えばＰＤＧＦ−ＢＢ、ＴＧＦ−β１、ＥＧＦまたはＦＧＦおよびＫＧＦの如き種々の成長因子の存在に対して敏感である。
【０００７】
ＧＡＧ類はほぼ全ての組織中で見出されそして細胞外マトリックス中のそれらの量は例えば皮膚萎縮、老化、萎縮瘢痕、および多分オステオポローシスの如きある種の条件下で大きく変動する。皮膚、そしてより特に真皮、は有機体中に存在するヒアルロン酸の合計量の約５０％を含有し（非特許文献７）そして試験は老化に関連する強い因果関係を示し、６０歳以降はヒアルロン酸合成は全く存在しないことを示した（非特許文献８）。このヒアルロン酸は真皮線維芽細胞のＨＡＳ類により合成される。
【０００８】
表皮段階では、ヒアルロン酸は角質細胞ＨＡＳ類により合成されそしてそれらの泳動、増殖および分化において役割を演ずる。ヒアルロン酸における減少は角質細胞末端分化の促進に寄与しうる表皮の薄化をもたらす。
【０００９】
化粧品または皮膚製薬学的用途のために、ある程度の数の化合物が角質細胞内で一般的にはグリコサミノグルカン類のそして特にヒアルロン酸の製造に刺激を与えるそれらの能力に関して研究されてきた。
【００１０】
ＨＡＳ２が例えばＴＮＦ−アルファ、インターフェロン−ガンマ、インターロイキン−１ベータの如き種々の物質により誘導されうることが示された（非特許文献９）後に、このようにして処置される正常な志願者からの皮膚の表皮の性質および構造に対する効果を評価するために、培養中の角質細胞のモデルに対して、種々のチームがレチノイン酸の如き物質を用いてＨＡＳ２製造を刺激することを試みた。これらの研究の結論は、全ての炎症前サイトカイン類は培養中の細胞内でＨＡＳ２の製造をそしてその結果としてヒアルロナンの製造を刺激することであった（非特許文献１０）。それ故、例えばレチノイン酸、最近では、チョウセンニンジン物質Ｋ（すなわち２０Ｏ−ベータ−Ｄ グルコピラノシル２０ Ｓプロトパナキサジオール）の如き物質が培養中の形質転換された角質細胞−タイプＨａＣａｔ細胞またはヒト線維芽細胞中のＨＡＳ２合成を刺激しうるとして最近記載されてきた（非特許文献１１）
【００１１】
【非特許文献１】Ｌｅｓｌｅｙ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７５，２５７−２６６（１９９２）
【非特許文献２】Ｐｅｃｋ Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１１１，１５９５−１６０１（１９９８）
【非特許文献３】Ａｓｓｍａｎｎ Ｖ．ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， １１１，１６８５−１６９４（１９９８）
【非特許文献４】Ｍｃ Ｄｅｖｉｔｔ ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．，３，２９４，１６７−１７０（１９９１）
【非特許文献５】Ｌｅ Ｂａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１４，２６７，１０００３−１００１０（１９９２）
【非特許文献６】Ｗｅｉｇｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２，１３９９７−１４０００（１９９７）
【非特許文献７】Ｌａｕｒｅｎｔ ｅｔ ａｌ．，ＦＡＳＥＢ Ｊ．，６，２３９７−２４０４（１９９２）
【非特許文献８】Ｇｈｅｒｓｅｔｉｃｈ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，３３，１１９−１２２（１９９４）
【非特許文献９】Ｉｊｕｉｎ ｅｔ ａｌ．２００１，Ａｒｃｈ．Ｏｒａｌ Ｂｉｏｌ．４６（８）：７６７−７２
【非特許文献１０】Ｊａｃｏｂｓｏｎ Ａ，Ｂｒｉｎｃｋ Ｊ，Ｂｒｉｓｋｉｎ ＭＪ，Ｓｐｉｃｅｒ ＡＰ ａｎｄ Ｈｅｌｄｉｎ Ｐ．２０００，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ ｓｙｎｔｈａｓｅｓ ｉｎ ｒｅｓｏｎｓｅ ｔｏ ｅｘｔｅｒｎａｌ ｓｔｉｍｕｌｉ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３４８（Ｐｔ １）：２９−３５
【非特許文献１１】Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，ＩＦＳＣＣ Ｍａｇａｚｉｎｅ ７（３９、１８９−１９６（２００４）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
発明の要旨
本発明の一つの目的は、皮膚内の、そして特に真皮内のグリコサミノグリカン類および
ヒアルロン酸の量を増加し且つ皮膚の引き締まり性（ｆｉｒｍｎｅｓｓ）を増加するために、ＨＡＳ２の発現および／または活性を刺激するための局所的に使用できる化合物、特に植物から抽出される化合物を提供することである。
【００１３】
本発明の他の目的は、特に、皮膚内で引き締まり性および／または弾性および／または組織水分付与性を改良し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒または細胞の増殖、泳動もしくは分化を改良するための上記化合物を提供することである。
【００１４】
特に、本発明の一つの目的は皮膚上の老化の影響である皮膚萎縮、特に真皮萎縮、萎縮瘢痕または老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失を減ずるための上記化合物を提供することである。
【００１５】
図面の簡単な記述
図１はトウグワの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１６】
図２はマオウの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１７】
図３はガラナの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１８】
図４はヨモギキクの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１９】
図５はインド・カイガラサルビアの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００２０】
図６はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなるクリームの１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【００２１】
図７はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなる漿液の１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
発明の詳細な記述
本発明は、第一の面で、化粧品組成物中での、ヒアルロナン・シンセターゼの発現および／または活性を刺激するための、そして特にヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の発現および／または活性を刺激するための、活性成分としての、有効量の少なくとも１種の植物抽出物の使用を記述する。ここで使用される用語「有効量」は、ここに開示されている利点を独立してまたは組み合わせて包含する、明白な利点を有意に誘発するのに十分な量の抽出物を意味する。
【００２３】
本発明は、第二の面によると、製薬学的な、そして特に皮膚製薬学的な、組成物を製造するための、ヒアルロナン・シンセターゼの発現および／または活性を刺激するための、そして特にヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の発現および／または活性を刺激するための、活性成分としての、有効量の少なくとも１種の植物抽出物の使用を記述する。
【００２４】
発明者は、「ヒアルロナン・シンセターゼ（ＨＡＳ、特にＨＡＳ２）の発現を刺激すること」により、特にヒアルロナン・シンセターゼ（ＨＡＳ、特にＨＡＳ２）の合成の刺激を意味する。
【００２５】
特に、本発明に従う活性成分は線維芽細胞内の、特にヒト線維芽細胞内の、そして特別
には例えば真皮の如きヒト皮膚組織内のＨＡＳ２蛋白質をコードする遺伝子の発現の刺激を得ることを可能にする。
【００２６】
有利には、活性成分は皮膚組織の、特に真皮の、引き締まり性および／または弾性を増加させうる。
【００２７】
有利には、活性成分は、特に真皮内の、一般的にグリコサミノグリカン類、そして特にヒアルロン酸の生成および／または量を増加させうる。
【００２８】
有利には、本発明に従う活性成分は皮膚内のいずれかの炎症反応を実質的に誘発せず、そしてその結果として局所適用、特に化粧品または皮膚製薬学的用途に適合する。ここで使用される用語「局所適用」は、皮膚組織の表面上に本発明の組成物を適用または延展することを意味する。
【００２９】
有利には、組成物は皮膚内で引き締まり性および／または弾性および／または組織水分付与性を改良し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、並びに／或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒および／または細胞の増殖、泳動もしくは分化および／または皮膚萎縮を改良することが意図される、並びに／或いは皮膚上の老化の影響を減じ、そして特に老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失、および／または萎縮瘢痕および／または老化の過程で観察される皮膚組織萎縮を減じ、特に真皮萎縮を減ずることが意図される。
【００３０】
有利には、本発明に従う化合物は皮膚組織、そして特に皮膚の薄化を減ずるために使用される。
【００３１】
有利には、本発明に従い使用される化合物は植物抽出物である。特に、活性成分は下記のものから選択される植物の抽出物でありうる：ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ
ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、またはそのような抽出物の混合物。
【００３２】
好ましくは、活性成分はトウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）の抽出物、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）の抽出物、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）の抽出物、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）の抽出物、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）の抽出物、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）の抽出物、またはそのような抽出物の混合物から選択される植物抽出物である。
【００３３】
有利には、本発明に従う化合物は皮膚組織、特に真皮の引き締まり性および／または弾性を増加するために使用される。
【００３４】
該抽出物を得るために有極性溶媒または有極性溶媒の混合物が有利に使用される。有用な抽出溶媒の中で、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、シクロへキサノール、ジエチレングリコール、ＨＯ−（ＣＨ２）２−ＯＨ、および
それらの混合物よりなる群から選択されるプロトン性溶媒を使用することができる。特にピリジン、ブタノン、アセトン、Ａｃ２Ｏ、（Ｍｅ２Ｎ）２ＣＯ、ＰｈＣＮ、ＣＨ３ＣＨ２ＣＮ、ＨＭＰＡ、ＰｈＮＯ２、ＭｅＮＯ２、ＤＭＦ、ＭｅＣＮ、スルホラン、ＤＭＳＯ、ＨＣＯＮＨ２、ＨＣＯＮＨＭｅ、ＣＨ３ＣＯＮＨＭｅ、およびそれらの混合物よりなる群から選択される有極性非プロトン性溶媒を使用することもできる。水、アルコール、例えばエタノール、プロパノール、イソプロパノールもしくはブタノール、ポリオール、例えばブチレングリコール、またはエステル、例えば酢酸エチル、或いはこれらの溶媒の混合物が好ましく使用される。上記溶媒の混合物の割合は一般的に１：１〜１：１００の間の、そして好ましくは１：１〜１：１０の間の、範囲にわたり、２５／７５混合物が例えば使用される。
【００３５】
抽出は、撹拌しおよび／または例えば３０℃〜６０℃もしくは使用される溶媒の還流温度に加熱しながら、抽出を行うことができる。抽出は一般的に大気圧において行われるが、圧力下の抽出を使用することもできる。抽出時間は当業者により査定され、そして特に抽出条件に依存する。有利には、数回の抽出が行われる。得られた部分は所望するなら特に組み合わせることができる。
【００３６】
有利には、得られた抽出物を濾過しそして次に場合により所望する品質の乾燥生成物が得られるまで濃縮および／または蒸発させることができる。
【００３７】
本発明に従う化合物は、局所組成物の、特に化粧品、皮膚製薬学的または製薬学的組成物の形態で製造される。その結果、これらの組成物のために、賦形剤は、例えば、防腐剤、皮膚緩和薬、乳化剤、界面活性剤、水分付与剤、濃稠化剤、コンディショナー、艶消し剤、安定剤、酸化防止剤、感触剤、光沢剤、膜−形成剤、溶解剤、顔料、染料、香料および日焼け止め剤よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有する。これらの賦形剤は、好ましくは、アミノ酸類およびそれらの誘導体、ポリグリセロール類、エステル類、セルロース重合体および誘導体、ラノリン誘導体、燐脂質、ラクトフェリン類、ラクトペルオキシダーゼ類、スクロース−ベース安定剤、ビタミンＥおよびその誘導体、天然および合成ワックス類、植物油類、トリグリセリド類、鹸化不能な生成物、フィトステロール類、植物エステル類、シリコーン類およびそれらの誘導体、蛋白質加水分解産物、ホホバ油およびその誘導体、脂肪可溶性／水溶性エステル類、ベタイン類、アミノオキシド類、植物抽出物、スクロースエステル類、二酸化チタン、グリシン類およびパラベン類よりなる群から選択され、そしてまた好ましくはブチレングリコール、ステアレス−２、ステアリス−２１、グリコール−１５ステアリルエーテル、セテアリルアルコール、フェノキシエタノール、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、ブチレングリコール、天然トコフェロール類、グリセロール、ナトリウムジヒドロキシセチル、イソプロピルヒドロキシセチルエーテル、ステアリン酸グリコール、トリイソノナオイン、オクチルココエート、ポリアクリルアミド、イソパラフィン、ラウレス−７、カルボマー、プロピレングリコール、グリセロール、ビサボロール、ジメチコーン、水酸化ナトリウム、ジポリヒドロキシステアリン酸ＰＥＧ−３０、カプリン酸／カプリル酸トリグリセリド類、オクタン酸セテアリル、アジピン酸ジブチル、ブドウ種油、ホホバ油、硫酸マグネシウム、ＥＤＴＡ、シクロメチコーン、キサンタンゴム、クエン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、鉱油およびワックス類、イソステアリン酸イソステアリル、ジペラルゴン酸プロピレングリコール、イソステアリン酸プロピレングリコール、ＰＥＧ−８蜜蝋、水素化されたヤシ仁油グリセリド類、水素化されたヤシ油グリセリド類、ラノリン油、ゴマ油、乳酸セチル、ラノリンアルコール、ひまし油、二酸化チタン、ラクトース、スクロース、低密度ポリエチレン、および等張性塩溶液よりなる群からも選択される。
【００３８】
有利には、上記調合物は、特に瓶またはチューブ内の、水性もしくは油性溶液、クリームまたは水性ゲルもしくは油性ゲル、特にシャワーゲル、シャンプー；ミルク；エマルジ
ョン、マイクロエマルジョンもしくはナノエマルジョン、特に水中油型もしくは油中水型もしくは複合型またはシリコーン−ベースのもの；特にガラスもしくはプラスチック瓶内または計量瓶内またはエーロゾル内の、ローション；並びにアンプル；漿液；液体石鹸；皮膚クレンジングバー；軟膏；ムース；例えばスティックの形態の、特に口紅の形態の、無水の、好ましくは液体の、ペースト状のまたは固体の生成物よりなる群から選択される形態に調合される。
【００３９】
該活性成分の通常使用量は合計組成物の０．００１〜２０重量％間、好ましくは０．００１〜１０重量％間の範囲にわたり、そして合計組成物の０．０１〜１０重量％がさらにより好ましく使用される。
【００４０】
上記化合物は場合により他の活性成分と組み合わせて改良された効果を得ることができる。好ましくは、組成物が人間の皮膚組織に接触するため、いずれの追加成分および活性成分でもそのような組織への適用に適していなければならず、すなわち、組成物に導入される場合には、それらは診断医学判定の範囲内で不適切な毒性、非相容性、不安定性、アレルギー反応などのない人間の皮膚組織との接触における使用に適する。ＣＴＦＡ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｅｌｅｖｅｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００６）は、広範囲の非限定的なスキンケア産業において一般的に使用される化粧品および製薬学的成分を記載しており、それらは本発明の局所組成物中での使用に適する。これらの成分種の例は研磨剤、吸収剤、美的成分、例えば香料、顔料、彩色剤／着色剤、精油、皮膚知覚剤、収斂剤など（例えば、丁子油、メントール、ショウノウ、ユーカリ油、オイゲノール、乳酸メンチル、アメリカマンサク蒸留物）、抗−アクネ剤、抗−ケーキング剤、発泡防止剤、抗微生物剤（例えば、ブチルカルバミン酸ヨードプロピル）、酸化防止剤、結合剤、生物学的添加剤、緩衝剤、増量剤、キレート化剤、化学的添加剤、着色剤、化粧品収斂剤、化粧品殺菌剤、変性剤、薬品収斂剤、外用鎮痛剤、組成物の膜形成性質および自立性を助けるための膜形成剤または物質、例えば重合体（例えば、エイコセンおよびビニルピロリドンの共重合体）、不透明化剤、ｐＨ調節剤、噴射剤、還元剤、金属イオン封鎖剤、皮膚漂白および明色剤（例えば、ヒドロキノン、コウジ酸、アスコルビン酸、アスコルビル燐酸マグネシウム、アスコルビルグルコサミン）、皮膚−コンディショニング剤（例えば、多面的および吸蔵的を包含する湿潤剤）、皮膚潤滑および／または治癒剤（例えば、パンテノールおよび誘導体（例えば、エチルパンテノール）、アロエ・ベラ、パントテン酸およびその誘導体、アラントイン、ビサボロール、並びにグリシルリジン酸二カリウム）、皮膚処置剤、濃稠化剤、並びにビタミン類およびそれらの誘導体を包含するが、それらに限定されない。
【００４１】
別の面によると、本発明は上記組成物の使用を含んでなる化粧ケア方法に関する。
【００４２】
別の面によると、本発明は上記組成物の使用を含んでなりそして特に必要とする個体に対する有効量の少なくとも１種の上記活性成分の投与を含んでなる、製薬学的処置方法、特に皮膚製薬学的処置方法に関する。
【００４３】
上記適用は１日１回または数回、特に局所適用により行うことができる。
【００４４】
本発明の他の目的、特徴および利点は、説明用だけに示されておりそして本発明の範囲を何らかの方法で限定しえない実施例を参照する説明記述を読んだ後に当業者にはさらに容易に明らかになるであろう。
【００４５】
実施例は本発明の必須部分でありそして実施例を包含する全体的記述に基づくいずれかの先行技術に関して新規であるようないずれかの特徴もその機能およびその一般性において本発明の必須部分である。
【００４６】
さらに、実施例では、断らない限り全ての百分率は重量により示され、そして断らない限り温度は摂氏温度であり、そして断らない限り圧力は大気圧である。
【実施例】
【００４７】
実施例１：ＨＡＳ２蛋白質をコードする遺伝子の発現の刺激：
（Ａ）外科的切除から由来する腹部生検からのコラゲナーゼ抽出後に、正常なヒト線維芽細胞が得られる。
１０％の牛漿液（ハイクローン（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、２５ｍｇ／ｌのゲンタマイシン、１０００００ＩＵ／ｌのペニシリン、１ｍｇ／ｌのアンフォテリシンＢおよび５０ｍｇ／ｌのアスコルビン酸ナトリウム（シグマ（Ｓｉｇｍａ））が補充されたダルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭグルタミン安定化、インビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））より構成された線維芽細胞培養培地（ＦＣＭ）中で線維芽細胞を増殖させる。１個のウエル当たり１．５ｍｌのＦＣＭを分配させそして培養を３７℃において５％ＣＯ２下で行う。培地を１週間に３回交換する。線維芽細胞を次に１ｃｍ２当たり１００００個の細胞で２４−ウエルプレートの中に１ｍｌの線維芽細胞基本培地（プロモセル（Ｐｒｏｍｏｃｅｌｌ））内で接種しそして集密性になるまで増殖させる。
【００４８】
（Ｂ）活性剤（１％の濃度でスクリーニング方法に関して試験された）を抗生物質、抗菌・カビ剤および成長因子を含まない培養培地の中で希釈する。遺伝子の発現をリアルタイムＲＴ−ＰＣＲによりアクチン（ハウスキーピング遺伝子）に関連する各遺伝子の発現を測定することにより検出しそして無処置の負対照の％として表示する。１０μｌの５ｎｇ／μｌの全ＲＮＡｉ−を４０μｌのＰＣＲミックス（２５μｌの２ＸＳＹＢＲグリーン・バファー・ミックス、０．５μｌの酵素混合物、最終濃度である０．５μＭのセンス・プライマーおよび最終濃度である０．５μＭのアンチセンス・プライマー、および４０μｌにするのに充分な水より構成される）に加える。ＲＴ−ＰＣＲは、５０℃における３０分間の逆転写、９５℃における１５分間のポリメラーゼ活性化、および５０サイクルのＰＣＲサイクル（９５℃、１５秒間；各遺伝子に特異的なハイブリッド化温度／３０秒間；７２℃／３０秒間）の実施を包含する種々の段階で起きる。センスおよびアンチ・センスオリゴヌクレオチド類は、それぞれ、ＣＧＡＧＴＴＴＡＣＴＴＣＣＣＧＣＣＡＡＧＡおよびＣＴＴＣＣＧＣＣＴＧＣＣＡＣＡＣＴＴＡＴＴＧＡＴであり、そしてハイブリッド化温度は５６℃である。
【００４９】
評価した全ての生成物の中で、以下の生成物がＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの生成を刺激するためそれらは満足のいく結果を与える。これらの生成物は従って真皮内のＨＡＳ２合成を刺激しそして皮膚の引き締まり性を誘発するために化粧品内で使用することができる。
【００５０】
【表１】
【００５１】
従って、好ましくは有極性溶媒または有極性溶媒の混合物を用いる、場合により還流下での、好ましくは表１に挙げられた植物の部分の、抽出を行うことが好ましい。抽出が行われたら、溶液を濾過しそして場合により空間有極性溶媒または有極性溶媒の混合物の中に再溶解させてもよい。抽出前に、使用される植物の１つもしくは複数の部分を有利に粉砕することができる。
【００５２】
出発物質として使用される植物の抽出物を、溶媒、好ましくは有極性溶媒、そして好ましくは水、水／アルコールもしくはポリオールの混合物、例えば水／グリコールもしくは水／エタノール混合物、またはポリオール、またはアルコール、例えばエタノール、を用いて得ることが有利である。抽出物を好ましくは濾過しそして次に乾燥する。中程度の加
熱で、例えば４５℃で、または還流下で、抽出を行うことも可能である。抽出は好ましくは撹拌しながら行われる。抽出方法は当業者に既知である。使用される植物の部分は得ようとする抽出物に関連して変動しうる。
【００５３】
好ましくは、抽出物は切断された植物の部分から水またはエタノール中１０％（ｗ／ｗ）で、場合により還流下で、製造される。抽出は１時間にわたり行われ、溶液を次に濾過し、エタノールを除去し、そして得られた生成物を水／グリコール混合物の中に５％（ｗ／ｗ）で溶解させそして次に種々のカットオフしきい値を有するセラミックフィルターを通して限外濾過し、そして、最後に、０．４５μｍで濾過する。エタノール、酢酸エチル、ＤＭＳＯ、アセトンまたは７５％の水および２５％のブチレングリコールの混合物を水の代わりに溶媒として使用することもできる。好ましい抽出タイプは表１に示されたものである。
【００５４】
実施例２：選択された成分の１種（トウグワの抽出物−ＪＶＥＧ０２２Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図１に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの９０％より大きい刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要であり且つ非常に有意な結果である。
【００５５】
実施例３：選択された成分の１種（マオウの抽出物−ＪＶＥＧ１６６Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（マオウの抽出物）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図２に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの１５５％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５６】
実施例４：選択された成分の１種（ガラナの抽出物−ＪＶＥＧ０５６Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（ガラナの抽出物）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図３に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの５００％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５７】
実施例５：選択された成分の１種（ヨモギキクの抽出物−ＪＶＥＧ６８１Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（ヨモギキクの抽出物）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡ
Ｓ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図４に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの２６０％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５８】
実施例６：選択された成分の１種（インド・カイガラサルビアの抽出物−ＪＶＥＧ２３０４Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（インド・カイガラサルビア）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図５に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの１８０％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５９】
実施例７：細胞培養試験：
本発明のペンタジプァンドラ・ブラッゼアナ（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）の抽出物（ＪＶＥＧ０６０Ａ）、インド・カイガラサルビアの抽出物（ＪＶＥＧ ２０３Ａ）、ヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ ６８１Ａ）およびトウグワの抽出物（ＪＶＥＧ ０２２Ａ）の生成物を、それらがグルコサミノグリカン類（ＧＡＧ類、特にヒアルロン酸）の新合成を刺激するそれらの能力に関して評価する。選択された生物学的モデルは真皮同等物（ＤＥ、線維芽細胞を含んでなる収縮したコラーゲンの遊離格子）および単層培養における正常なヒト真皮線維芽細胞の培養物（ＮＨＤＦ類）である。
【００６０】
これらの効果を、選択されたモデルの線維芽細胞による新合成されたＧＡＧ部分へのトリチエーションされたグルコサミンの導入を定量化することにより、評価した。精製されたＧＡＧ部分中へのグルコサミンの導入は（主に）ヒアルロン酸を包含するほとんどのＧＡＧ類の新合成を考慮に入れる。分泌された／可溶性部分（分泌されたＧＡＧ類）に対してそしてＤＥ−必須部分（マトリックス中に貯蔵されたＧＡＧ類）に対してまたは全線維芽細胞培養物（ＮＨＤＦ）に対して、分析を行った。
【００６１】
真皮同等物
真皮同等物を製造しそして次に２％ＦＣＳを含有するＤＭＥＭ培地（インビトロゲン）の中に入れそして７日間にわたり培地を３日毎に交換しながら放置して収縮させた。ＤＥ類を引き続き試験化合物または対比化合物（ＴＧＦ−ベータ、１０ｎｇ／ｍｌ）の存在下または不存在下（対照）で４８時間または７２時間にわたり３７℃および５％ＣＯ２において、インキュベーションの終了前２４時間にトリチエーションされたグルコサミンを添加しながら、インキュベートした。
【００６２】
線維芽細胞
正常なヒト真皮線維芽細胞を完全ＤＭＥＭ培地の中に接種しそして２４時間にわたり３７℃および５％ＣＯ２において予備インキュベートし、そして培養培地を次に試験化合物または対比生成物（ＴＧＦ−ベータ、１０ｎｇ／ｍｌ）を含有するかまたは含有しない（対照）２％漿液を有するＤＭＥＭ培地で置換した。各実験条件は三重に行われた。細胞を引き続き３７℃において７２時間にわたり、インキュベーションの終了前２４時間にトリチエーションされたグルコサミンを添加しながら、インキュベートした。
【００６３】
導入された放射活性の分析
インキュベーションの終了前２４時間に、トリチエーションされたグルコサミン（Ｄ−［６−３Ｈ］−グルコサミン、１．３７Ｔｂｑ／ミリモル、３７Ｃｉ／ミリモル、３３μＣｉ／ｍｌ）を培養物に加える。グルコサミノグリカン抽出をＤＥ培養上澄み液（分泌された／可溶性部分）に対して、実際のＤＥ類内で、粉砕により（抽出された部分）、または線維芽細胞培養物内でカオトロピック緩衝液（５０ｍＭのトリス／ＨＣｌ、４Ｍのグアニジン、５ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ８．０）を用いて、行う。精製はイオン交換クロマトグラフィー、すなわち高緊縮条件下でのＱ−セファロースビーズ上のアニオン性分子の吸着、６Ｍのウレアおよび０．２ＭのＮａＣｌを用いるわずかなおよび中程度のアニオン性の分子の脱着、並びに洗浄、により行われる。担体（主としてＧＡＧ類、２ＭのＮａＣｌで溶離された）上に残存する非常にカチオン性の分子に導入された放射活性の測定は液体シンチレーションにより行われる。結果は対照と比べたグリコサミノグリカン合成における百分率変動として表示される。複合比較用のダネット試験（Ｄｕｎｎｅｔｔ‘ｓ ｔｅｓｔ）を用いる変種（アノーバ（ＡＮＯＶＡ））の分析により集団間比較を行った。
【００６４】
対比生成物であるＴＧＦ−ベータ（１０ｎｇ／ｍｌ）はＧＡＧ部分中へのグルコサミンの導入を大きく刺激した（対照と比べて４の因数による刺激）。この結果は検定を確認する。
【００６５】
この検定の実験条件下で、１％で試験された、インド・カイガラサルビアの抽出物（ＪＶＥＧ２０３Ａ）およびヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ６８１Ａ）は線維芽細胞により合成されたＧＡＧ類の部分へのグルコサミンの導入を刺激した（それぞれ、無処置対照の１５４％および１４３％、ｐ＜０．０１）。
【００６６】
表２：インビトロ培養中のヒト真皮線維芽細胞により合成されたＧＡＧ類の部分への３Ｈ−グルコサミンの導入に対する種々の処置の効果。
【表２】
【００６７】
可溶性部分
対比生成物ＴＧＦ−ベータは真皮同等物の可溶性であり且つ分泌されたＧＡＧ部分へのグルコサミンの導入を大きく刺激した（対照と比べて３の因数による刺激）。この結果は検定を確認する。
【００６８】
この検定の実験条件下で、１％で試験された、生成物であるヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ６８１Ａ）およびトウグワの抽出物（ＪＥＶＧ０２２Ａ）は真皮同等物の可溶性であり且つ分泌された部分へのグルコサミンの導入を有意に刺激した（それぞれ、２１０％、ｐ＜０．０１および１４９％、ｐ＜０．０５）。インド・カイガラサルビアの抽出物（ＪＶＥＧ２０３Ａ）もＤＥ類の可溶性ＧＡＧ部分へのグルコサミンの導入を増加させることができた（対照の１４０％）。
【００６９】
抽出された部分
ＴＧＥ−ベータは真皮同等物から抽出されたＧＡＧ部分へのグルコサミンの導入を刺激したが、可溶性部分内より穏やかであった（対照と比べて１．６の因数による刺激）。この結果は検定を確認する。
【００７０】
検定の実験条件下で、１％で試験された、生成物であるヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ６８１Ａ）は真皮同等物の抽出された部分中へのグルコサミンの導入を有意に刺激した（対照の１５０％、ｐ＜０．０１）。ＴＧＦ−ベータに関するように、この刺激は可溶性部分内より弱い。
【００７１】
表３および４：真皮同等物の線維芽細胞により合成されたＧＡＧ類の部分中へのグルコサミンの導入に対する種々の処置の効果（以下で、可溶性部分、表３、および抽出された部分、表４）。
【表３】
【００７２】
実施例８：インビボ試験
この試験の目的は、別個の適用後３０分および１日１回使用後の１ヶ月間にわたる、引き締まり性および弾性に対する本発明の生成物の効果を評価することである。皮膚の生機能性質に対する効果を、皮膚表面上の大きな対象の反動の動態記録に基づく技術であるバ
リストメーターにより評価する。
【００７３】
３秒間にわたり記録された誘発された反動を次に電気信号に翻訳し、それらを振幅により定量化しそして評価することができる。測定されたパラメーターは下記のものである：−皮膚の引き締まり性を測定する窪み（最初の衝撃に関する皮膚内へのプローブの侵入）、窪みが減少するなら、引き締まり性がある。
−曲線下の面積が回復されたエネルギーを測定する。後者は皮膚の弾性および引き締まり性の両者により影響を受け、面積内における減少が引き締まり性に相当する。
−弾性に関連する反動が消える速度を示す反動の吸収度であるアルファ：アルファが増加する場合には、弾性が減少する。
【００７４】
２種の調合物（クリームおよび漿液）を通常の使用条件下での１ヶ月間にわたる顔全体への１日２回適用により評価し、各調合物を４５〜７５歳の２０人の女性志願者に対して試験した。クリームは１％のインド・カイガラサルビアの抽出物および１％のヨモギキクの抽出物を含有するＯ／Ｗエマルジョンであり、漿液は１．５％のインド・カイガラサルビアの抽出物および１．５％のヨモギキクの抽出物を含有する乳化されたゲルであった。
【００７５】
皮膚の生機能性質の分析は、平均して志願者全てに対して、１ヶ月間にわたるクリームまたは漿液の１日２回使用後に、それぞれ１２％および７％の窪み（最初の衝撃に関する皮膚内へのプローブの侵入）における有意な減少を示した。この観察は、本発明の生成物の局所適用後の皮膚の引き締まり性における有意な改良を示す。より具体的には、クリームに関して、下記のことが観察される：
・志願者の８６％で測定された窪みにおける改良、後者における１６％の改良（最大値：−３７％）。
・アルファ計数は６２％ほど有意に増加しそして曲線下の面積は３２％ほど有意に減少する：これらの２つのパラメーターは窪みに関連しておりそしてその結果として引き締まり効果を確認する。
１ヶ月間にわたるクリームの１日２回使用後に、図６に示されているように、皮膚は１２％ほど有意に引き締まる。
【００７６】
より具体的には、漿液に関して、下記のことが観察される：
・志願者の７１％で測定された窪みにおける改良、後者における１３％の改良（最大値：−３１％）。
・アルファ計数は８％ほど有意に増加しそして曲線下の面積は１８％ほど有意に減少し、これらも皮膚の引き締まりがあることを確認する。
１ヶ月間にわたる漿液の１日２回使用後に、図７に示されているように、皮膚は７％ほど有意に引き締まる。
【００７７】
実施例９：ＨＡＳ２合成の刺激に関して選択された分子の炎症能力の不存在の評価：
レチノイン酸とは異なり、ＨＡＳ２合成を刺激するために選択された分子であるＴＮＦ−アルファおよびＩＬ１は化粧品用途に不適切な前−炎症性機構を含まない。それ故、実施例６の条件下でのインド・カイガラサルビアの抽出物の使用は、線維芽細胞培養物上で、ＨＡＳ２を刺激しうるが、同時にＨＡＳ２を刺激することが知られている前−炎症性サイトカイン類、例えばＩＬ１、ＴＮＦａまたはＴＧＦβ（実施例６の陽性対照）の合成を刺激しない（接触後４８時間の線維芽細胞培養上澄み液に対する検定）。
【表４】
【００７８】
それ故、実施例５の条件下でのヨモギキクの抽出物の使用は、線維芽細胞培養物上で、ＨＡＳ２を刺激しうるが、同時にＨＡＳ２を刺激することが知られている前−炎症性サイトカイン類、例えばＩＬ１、ＴＮＦａまたはＴＧＦβ（実施例５の陽性対照）の合成を刺激しない（接触後４８時間の線維芽細胞培養上澄み液に対する検定）。
【表５】
【００７９】
それ故、実施例１の条件下でのハウチワマメの抽出物の使用は、線維芽細胞培養物上で、ＨＡＳ２を刺激しうるが、同時にＨＡＳ２を刺激することが知られている前−炎症性サイトカイン類、例えばＩＬ１、ＴＮＦａまたはＴＧＦβ（実施例１〜７の陽性対照）の合成を刺激しない（接触後４８時間の線維芽細胞培養上澄み液に対する検定）。
【表６】
【００８０】
実施例１０：水中油型エマルジョンタイプの化粧品または製薬学的調合物中の本発明の生成物の使用：
調合物ａ：Ｏ／Ｗエマルジョン
Ａ 水 １００にする量
ブチレングリコール ２
グリセロール ３
燐酸ナトリウムジヒドロキシセチル、 ２
イソプロピルヒドロキシセチルエーテル
Ｂ ステアリン酸グリコールＳＥ １４
トリイソノナオイン ５
オクチルココエート ６
Ｃ ブチレングリコール、 ２
メチルパラベン、
エチルパラベン、
プロピルパラベン、
５．５に調節されたｐＨ
Ｄ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
調合物ｂ：Ｏ／Ｗエマルジョン
Ａ 水 １００にする量
ブチレングリコール ２
グリセロール ３
ポリアクリルアミド、 ２．８
イソパラフィン、ラウレス−７
Ｂ ブチレングリコール、 ２．５
メチルパラベン、
エチルパラベン、
プロピルパラベン； ２
フェノキシエタノール、
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、
エチルパラベン
Ｄ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
調合物ｃ：Ｏ／Ｗエマルジョン
Ａ カルボマー ０．５０
プロピレングリコール ３
グリセロール ５
水 １００にする量
Ｂ オクチルココエート ５
ビサボロール ０．３０
ジメチコーン ０．３０
Ｃ 水酸化ナトリウム １．６０
Ｄ フェノキシエタノール、 ０．５０
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、エチルパラベン、
Ｅ 香料 ０．３０
Ｆ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【００８１】
実施例１１：油中水型の調合物中の本発明の生成物の使用：
Ａ ステアリン酸ジポリヒドロキシＰＥＧ−３０ ３
カプリン酸トリグリセリド類 ３
オクタン酸セテアリル ４
アジピン酸ジブチル ３
ブドウ種油 １．５
ホホバ油 １．５
フェノキシエタノール、 ０．５
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、エチルパラベン
Ｂ グリセロール ３
ブチレングリコール ３
硫酸マグネシウム ０．５
ＥＤＴＡ ０．０５
水 １００にする量
Ｃ シクロメチコーン １
ジメチコーン １
Ｄ 香料 ０．３
Ｅ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【００８２】
実施例１２：シャンプーまたはシャワーゲルタイプの調合物中の本発明の生成物の使用：Ａ キサンタンゴム ０．８
水 １００にする量
Ｂ ブチレングリコール、 ０．５
メチルパラベン、
エチルパラベン、プロピルパラベン
フェノキシエタノール、 ０．５
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、エチルパラベン
Ｃ クエン酸 ０．８
Ｄ ラウレス硫酸ナトリウム ４０．０
Ｅ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【００８３】
実施例１３：口紅タイプおよび他の無水製品の調合物中の本発明の生成物の使用：
Ａ 鉱油 １７．０
イソステアリン酸イソステアリル ３１．５
ジペラルゴン酸プロピレングリコール ２．６
イソステアリン酸プロピレングリコール １．７
ＰＥＧ−８蜜蝋 ３．０
水素化されたヤシ仁油グリセリド類、 ３．４
水素化されたヤシグリセリド類
ラノリン油 ３．４
ゴマ油 １．７
乳酸セチル １．７
鉱油、ラノリンアルコール ３．０
Ｂ ひまし油 １００にする量
二酸化チタン ３．９
ＣＩ １５８５０：１ ０．６１６
ＣＩ ４５４１０：１ ０．２５６
ＣＩ １９１４０：１ ０．０４８
ＣＩ ７７４９１ ２．０４８
Ｃ 本発明の生成物 ０．０１−５％
【００８４】
実施例１４：水性ゲル調合物（目の周りの領域、スリミングなど）中の本発明の生成物の使用：
Ａ 水 １００にする量
カルボマー ０．５
ブチレングリコール １５
フェノキシエタノール、メチルパラベン、 ０．５
プロピルパラベン、ブチルパラベン、
エチルパラベン
Ｂ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【図面の簡単な説明】
【００８５】
【図１】図１はトウグワの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図２】図２はマオウの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図３】図３はガラナの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図４】図４はヨモギキクの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図５】図５はインド・カイガラサルビアの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図６】図６はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなるクリームの１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【図７】図７はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなる漿液の１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００５年１１月１７日に出願されたフランス特許出願番号第０５１１６７２号の優先権を主張する。
【０００２】
本発明は、ＨＡＳ蛋白質の刺激後に、皮膚の、特別には真皮の、引き締め（ｆｉｒｍｉｎｇ）効果を特に得るための、植物抽出物を含んでなる化粧品および製薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
細胞外マトリックスは蛋白質または炭水化物源の様々な分子の複雑な網状組織よりなり、それらは細胞機能を修正するために好ましい環境に寄与する。
【０００４】
例えば増殖、泳動または分化の如き細胞事象中に、細胞外マトリックスが変化しそして適応する。多糖群では、グリコサミノグリカン類（ＧＡＧ類）、そしてこれらの中のヒアルロン酸（ＨＡ）、がこの細胞外マトリックスの重要な構造成分である。非常に高い分子量を有するこれらのＧＡＧ類は多くの生理的機能、例えば皮膚への水分付与、皮膚障壁効果の増加、および水を留めるそれらの能力による組織の回復力および弾性の増加、を有する。さらに、それらは脈管形成または血液毛管の新形成、治癒、細胞表面に位置する例えばＣＤ４４およびＲＨＡＭＭ類の如き膜受容体（ヒアルロナン介在運動用の受容体）による増殖、泳動および分化の調節において記載されてきた（非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３）。
【０００５】
さらに、真皮−表皮界面におけるヒアルロン酸の存在がこれら２種の組織間の代謝交換を促進させうると思われる。最後に、ヒアルロン酸は例えばベルシカン、フィブリノーゲン並びにコラーゲンタイプＩおよびＶＩの如き他の分子との会合を可能にする（非特許文献４、非特許文献５）。
【０００６】
他のＧＡＧ類より十分に研究されてきたヒアルロン酸は、繰り返し二糖単位：Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン−β（１→４）−Ｄ−グルクロン酸β（１→３）より構成される線状多糖に類似する。それは、血漿膜の内側で、β（１→４）およびβ（１→３）結合を介して組み合わせされるＵＤＰ−Ｎ−アセチルグルコサミンおよびＵＤＰ−Ｄ−グルクロン酸の連続的添加により合成されそして次に細胞外空間内に直接分泌される（非特許文献６）。この合成は、脊椎動物における種々の染色体上に位置する３つの別個な遺伝子から転写される３種のイソ形態：ＨＡＳ１、ＨＡＳ２およびＨＡＳ３として同定されるヒアルロナン・シンセターゼ類（ＨＡＳ類）と称する単量体状の膜−結合された酵素により行われる（非特許文献６）。より特に、ＨＡＳ２蛋白質をコードする遺伝子は染色体８の上に位置しそして例えばＰＤＧＦ−ＢＢ、ＴＧＦ−β１、ＥＧＦまたはＦＧＦおよびＫＧＦの如き種々の成長因子の存在に対して敏感である。
【０００７】
ＧＡＧ類はほぼ全ての組織中で見出されそして細胞外マトリックス中のそれらの量は例えば皮膚萎縮、老化、萎縮瘢痕、および多分オステオポローシスの如きある種の条件下で大きく変動する。皮膚、そしてより特に真皮、は有機体中に存在するヒアルロン酸の合計量の約５０％を含有し（非特許文献７）そして試験は老化に関連する強い因果関係を示し、６０歳以降はヒアルロン酸合成は全く存在しないことを示した（非特許文献８）。このヒアルロン酸は真皮線維芽細胞のＨＡＳ類により合成される。
【０００８】
表皮段階では、ヒアルロン酸は角質細胞ＨＡＳ類により合成されそしてそれらの泳動、増殖および分化において役割を演ずる。ヒアルロン酸における減少は角質細胞末端分化の促進に寄与しうる表皮の薄化をもたらす。
【０００９】
化粧品または皮膚製薬学的用途のために、ある程度の数の化合物が角質細胞内で一般的にはグリコサミノグルカン類のそして特にヒアルロン酸の製造に刺激を与えるそれらの能力に関して研究されてきた。
【００１０】
ＨＡＳ２が例えばＴＮＦ−アルファ、インターフェロン−ガンマ、インターロイキン−１ベータの如き種々の物質により誘導されうることが示された（非特許文献９）後に、このようにして処置される正常な志願者からの皮膚の表皮の性質および構造に対する効果を評価するために、培養中の角質細胞のモデルに対して、種々のチームがレチノイン酸の如き物質を用いてＨＡＳ２製造を刺激することを試みた。これらの研究の結論は、全ての炎症前サイトカイン類は培養中の細胞内でＨＡＳ２の製造をそしてその結果としてヒアルロナンの製造を刺激することであった（非特許文献１０）。それ故、例えばレチノイン酸、最近では、チョウセンニンジン物質Ｋ（すなわち２０Ｏ−ベータ−Ｄ グルコピラノシル２０ Ｓプロトパナキサジオール）の如き物質が培養中の形質転換された角質細胞−タイプＨａＣａｔ細胞またはヒト線維芽細胞中のＨＡＳ２合成を刺激しうるとして最近記載されてきた（非特許文献１１）
【００１１】
【非特許文献１】Ｌｅｓｌｅｙ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７５，２５７−２６６（１９９２）
【非特許文献２】Ｐｅｃｋ Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１１１，１５９５−１６０１（１９９８）
【非特許文献３】Ａｓｓｍａｎｎ Ｖ．ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， １１１，１６８５−１６９４（１９９８）
【非特許文献４】Ｍｃ Ｄｅｖｉｔｔ ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．，３，２９４，１６７−１７０（１９９１）
【非特許文献５】Ｌｅ Ｂａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ． Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１４，２６７，１０００３−１００１０（１９９２）
【非特許文献６】Ｗｅｉｇｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２，１３９９７−１４０００（１９９７）
【非特許文献７】Ｌａｕｒｅｎｔ ｅｔ ａｌ．，ＦＡＳＥＢ Ｊ．，６，２３９７−２４０４（１９９２）
【非特許文献８】Ｇｈｅｒｓｅｔｉｃｈ ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，３３，１１９−１２２（１９９４）
【非特許文献９】Ｉｊｕｉｎ ｅｔ ａｌ．２００１，Ａｒｃｈ．Ｏｒａｌ Ｂｉｏｌ．４６（８）：７６７−７２
【非特許文献１０】Ｊａｃｏｂｓｏｎ Ａ，Ｂｒｉｎｃｋ Ｊ，Ｂｒｉｓｋｉｎ ＭＪ，Ｓｐｉｃｅｒ ＡＰ ａｎｄ Ｈｅｌｄｉｎ Ｐ．２０００，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｈｙａｌｕｒｏｎａｎ ｓｙｎｔｈａｓｅｓ ｉｎ ｒｅｓｏｎｓｅ ｔｏ ｅｘｔｅｒｎａｌ ｓｔｉｍｕｌｉ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３４８（Ｐｔ １）：２９−３５
【非特許文献１１】Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ．，ＩＦＳＣＣ Ｍａｇａｚｉｎｅ ７（３９、１８９−１９６（２００４）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
発明の要旨
本発明の一つの目的は、皮膚内の、そして特に真皮内のグリコサミノグリカン類および
ヒアルロン酸の量を増加し且つ皮膚の引き締まり性（ｆｉｒｍｎｅｓｓ）を増加するために、ＨＡＳ２の発現および／または活性を刺激するための局所的に使用できる化合物、特に植物から抽出される化合物を提供することである。
【００１３】
本発明の他の目的は、特に、皮膚内で引き締まり性および／または弾性および／または組織水分付与性を改良し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒または細胞の増殖、泳動もしくは分化を改良するための上記化合物を提供することである。
【００１４】
特に、本発明の一つの目的は皮膚上の老化の影響である皮膚萎縮、特に真皮萎縮、萎縮瘢痕または老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失を減ずるための上記化合物を提供することである。
【００１５】
図面の簡単な記述
図１はトウグワの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１６】
図２はマオウの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１７】
図３はガラナの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１８】
図４はヨモギキクの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００１９】
図５はインド・カイガラサルビアの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【００２０】
図６はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなるクリームの１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【００２１】
図７はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなる漿液の１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
発明の詳細な記述
本発明は、第一の面で、化粧品組成物中での、ヒアルロナン・シンセターゼの発現および／または活性を刺激するための、そして特にヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の発現および／または活性を刺激するための、活性成分としての、有効量の少なくとも１種の植物抽出物の使用を記述する。ここで使用される用語「有効量」は、ここに開示されている利点を独立してまたは組み合わせて包含する、明白な利点を有意に誘発するのに十分な量の抽出物を意味する。
【００２３】
本発明は、第二の面によると、製薬学的な、そして特に皮膚製薬学的な、組成物を製造するための、ヒアルロナン・シンセターゼの発現および／または活性を刺激するための、そして特にヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の発現および／または活性を刺激するための、活性成分としての、有効量の少なくとも１種の植物抽出物の使用を記述する。
【００２４】
発明者は、「ヒアルロナン・シンセターゼ（ＨＡＳ、特にＨＡＳ２）の発現を刺激すること」により、特にヒアルロナン・シンセターゼ（ＨＡＳ、特にＨＡＳ２）の合成の刺激を意味する。
【００２５】
特に、本発明に従う活性成分は線維芽細胞内の、特にヒト線維芽細胞内の、そして特別
には例えば真皮の如きヒト皮膚組織内のＨＡＳ２蛋白質をコードする遺伝子の発現の刺激を得ることを可能にする。
【００２６】
有利には、活性成分は皮膚組織の、特に真皮の、引き締まり性および／または弾性を増加させうる。
【００２７】
有利には、活性成分は、特に真皮内の、一般的にグリコサミノグリカン類、そして特にヒアルロン酸の生成および／または量を増加させうる。
【００２８】
有利には、本発明に従う活性成分は皮膚内のいずれかの炎症反応を実質的に誘発せず、そしてその結果として局所適用、特に化粧品または皮膚製薬学的用途に適合する。ここで使用される用語「局所適用」は、皮膚組織の表面上に本発明の組成物を適用または延展することを意味する。
【００２９】
有利には、組成物は皮膚内で引き締まり性および／または弾性および／または組織水分付与性を改良し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、並びに／或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒および／または細胞の増殖、泳動もしくは分化および／または皮膚萎縮を改良することが意図される、並びに／或いは皮膚上の老化の影響を減じ、そして特に老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失、および／または萎縮瘢痕および／または老化の過程で観察される皮膚組織萎縮を減じ、特に真皮萎縮を減ずることが意図される。
【００３０】
有利には、本発明に従う化合物は皮膚組織、そして特に皮膚の薄化を減ずるために使用される。
【００３１】
有利には、本発明に従い使用される化合物は植物抽出物である。特に、活性成分は下記のものから選択される植物の抽出物でありうる：ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ
ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、またはそのような抽出物の混合物。
【００３２】
好ましくは、活性成分はトウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）の抽出物、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）の抽出物、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）の抽出物、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）の抽出物、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）の抽出物、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）の抽出物、またはそのような抽出物の混合物から選択される植物抽出物である。
【００３３】
有利には、本発明に従う化合物は皮膚組織、特に真皮の引き締まり性および／または弾性を増加するために使用される。
【００３４】
該抽出物を得るために有極性溶媒または有極性溶媒の混合物が有利に使用される。有用な抽出溶媒の中で、水、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、シクロへキサノール、ジエチレングリコール、ＨＯ−（ＣＨ２）２−ＯＨ、および
それらの混合物よりなる群から選択されるプロトン性溶媒を使用することができる。特にピリジン、ブタノン、アセトン、Ａｃ２Ｏ、（Ｍｅ２Ｎ）２ＣＯ、ＰｈＣＮ、ＣＨ３ＣＨ２ＣＮ、ＨＭＰＡ、ＰｈＮＯ２、ＭｅＮＯ２、ＤＭＦ、ＭｅＣＮ、スルホラン、ＤＭＳＯ、ＨＣＯＮＨ２、ＨＣＯＮＨＭｅ、ＣＨ３ＣＯＮＨＭｅ、およびそれらの混合物よりなる群から選択される有極性非プロトン性溶媒を使用することもできる。水、アルコール、例えばエタノール、プロパノール、イソプロパノールもしくはブタノール、ポリオール、例えばブチレングリコール、またはエステル、例えば酢酸エチル、或いはこれらの溶媒の混合物が好ましく使用される。上記溶媒の混合物の割合は一般的に１：１〜１：１００の間の、そして好ましくは１：１〜１：１０の間の、範囲にわたり、２５／７５混合物が例えば使用される。
【００３５】
抽出は、撹拌しおよび／または例えば３０℃〜６０℃もしくは使用される溶媒の還流温度に加熱しながら、抽出を行うことができる。抽出は一般的に大気圧において行われるが、圧力下の抽出を使用することもできる。抽出時間は当業者により査定され、そして特に抽出条件に依存する。有利には、数回の抽出が行われる。得られた部分は所望するなら特に組み合わせることができる。
【００３６】
有利には、得られた抽出物を濾過しそして次に場合により所望する品質の乾燥生成物が得られるまで濃縮および／または蒸発させることができる。
【００３７】
本発明に従う化合物は、局所組成物の、特に化粧品、皮膚製薬学的または製薬学的組成物の形態で製造される。その結果、これらの組成物のために、賦形剤は、例えば、防腐剤、皮膚緩和薬、乳化剤、界面活性剤、水分付与剤、濃稠化剤、コンディショナー、艶消し剤、安定剤、酸化防止剤、感触剤、光沢剤、膜−形成剤、溶解剤、顔料、染料、香料および日焼け止め剤よりなる群から選択される少なくとも１種の化合物を含有する。これらの賦形剤は、好ましくは、アミノ酸類およびそれらの誘導体、ポリグリセロール類、エステル類、セルロース重合体および誘導体、ラノリン誘導体、燐脂質、ラクトフェリン類、ラクトペルオキシダーゼ類、スクロース−ベース安定剤、ビタミンＥおよびその誘導体、天然および合成ワックス類、植物油類、トリグリセリド類、鹸化不能な生成物、フィトステロール類、植物エステル類、シリコーン類およびそれらの誘導体、蛋白質加水分解産物、ホホバ油およびその誘導体、脂肪可溶性／水溶性エステル類、ベタイン類、アミノオキシド類、植物抽出物、スクロースエステル類、二酸化チタン、グリシン類およびパラベン類よりなる群から選択され、そしてまた好ましくはブチレングリコール、ステアレス−２、ステアリス−２１、グリコール−１５ステアリルエーテル、セテアリルアルコール、フェノキシエタノール、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、ブチレングリコール、天然トコフェロール類、グリセロール、ナトリウムジヒドロキシセチル、イソプロピルヒドロキシセチルエーテル、ステアリン酸グリコール、トリイソノナオイン、オクチルココエート、ポリアクリルアミド、イソパラフィン、ラウレス−７、カルボマー、プロピレングリコール、グリセロール、ビサボロール、ジメチコーン、水酸化ナトリウム、ジポリヒドロキシステアリン酸ＰＥＧ−３０、カプリン酸／カプリル酸トリグリセリド類、オクタン酸セテアリル、アジピン酸ジブチル、ブドウ種油、ホホバ油、硫酸マグネシウム、ＥＤＴＡ、シクロメチコーン、キサンタンゴム、クエン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、鉱油およびワックス類、イソステアリン酸イソステアリル、ジペラルゴン酸プロピレングリコール、イソステアリン酸プロピレングリコール、ＰＥＧ−８蜜蝋、水素化されたヤシ仁油グリセリド類、水素化されたヤシ油グリセリド類、ラノリン油、ゴマ油、乳酸セチル、ラノリンアルコール、ひまし油、二酸化チタン、ラクトース、スクロース、低密度ポリエチレン、および等張性塩溶液よりなる群からも選択される。
【００３８】
有利には、上記調合物は、特に瓶またはチューブ内の、水性もしくは油性溶液、クリームまたは水性ゲルもしくは油性ゲル、特にシャワーゲル、シャンプー；ミルク；エマルジ
ョン、マイクロエマルジョンもしくはナノエマルジョン、特に水中油型もしくは油中水型もしくは複合型またはシリコーン−ベースのもの；特にガラスもしくはプラスチック瓶内または計量瓶内またはエーロゾル内の、ローション；並びにアンプル；漿液；液体石鹸；皮膚クレンジングバー；軟膏；ムース；例えばスティックの形態の、特に口紅の形態の、無水の、好ましくは液体の、ペースト状のまたは固体の生成物よりなる群から選択される形態に調合される。
【００３９】
該活性成分の通常使用量は合計組成物の０．００１〜２０重量％間、好ましくは０．００１〜１０重量％間の範囲にわたり、そして合計組成物の０．０１〜１０重量％がさらにより好ましく使用される。
【００４０】
上記化合物は場合により他の活性成分と組み合わせて改良された効果を得ることができる。好ましくは、組成物が人間の皮膚組織に接触するため、いずれの追加成分および活性成分でもそのような組織への適用に適していなければならず、すなわち、組成物に導入される場合には、それらは診断医学判定の範囲内で不適切な毒性、非相容性、不安定性、アレルギー反応などのない人間の皮膚組織との接触における使用に適する。ＣＴＦＡ Ｃｏｓｍｅｔｉｃ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｅｌｅｖｅｎｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００６）は、広範囲の非限定的なスキンケア産業において一般的に使用される化粧品および製薬学的成分を記載しており、それらは本発明の局所組成物中での使用に適する。これらの成分種の例は研磨剤、吸収剤、美的成分、例えば香料、顔料、彩色剤／着色剤、精油、皮膚知覚剤、収斂剤など（例えば、丁子油、メントール、ショウノウ、ユーカリ油、オイゲノール、乳酸メンチル、アメリカマンサク蒸留物）、抗−アクネ剤、抗−ケーキング剤、発泡防止剤、抗微生物剤（例えば、ブチルカルバミン酸ヨードプロピル）、酸化防止剤、結合剤、生物学的添加剤、緩衝剤、増量剤、キレート化剤、化学的添加剤、着色剤、化粧品収斂剤、化粧品殺菌剤、変性剤、薬品収斂剤、外用鎮痛剤、組成物の膜形成性質および自立性を助けるための膜形成剤または物質、例えば重合体（例えば、エイコセンおよびビニルピロリドンの共重合体）、不透明化剤、ｐＨ調節剤、噴射剤、還元剤、金属イオン封鎖剤、皮膚漂白および明色剤（例えば、ヒドロキノン、コウジ酸、アスコルビン酸、アスコルビル燐酸マグネシウム、アスコルビルグルコサミン）、皮膚−コンディショニング剤（例えば、多面的および吸蔵的を包含する湿潤剤）、皮膚潤滑および／または治癒剤（例えば、パンテノールおよび誘導体（例えば、エチルパンテノール）、アロエ・ベラ、パントテン酸およびその誘導体、アラントイン、ビサボロール、並びにグリシルリジン酸二カリウム）、皮膚処置剤、濃稠化剤、並びにビタミン類およびそれらの誘導体を包含するが、それらに限定されない。
【００４１】
別の面によると、本発明は上記組成物の使用を含んでなる化粧ケア方法に関する。
【００４２】
別の面によると、本発明は上記組成物の使用を含んでなりそして特に必要とする個体に対する有効量の少なくとも１種の上記活性成分の投与を含んでなる、製薬学的処置方法、特に皮膚製薬学的処置方法に関する。
【００４３】
上記適用は１日１回または数回、特に局所適用により行うことができる。
【００４４】
本発明の他の目的、特徴および利点は、説明用だけに示されておりそして本発明の範囲を何らかの方法で限定しえない実施例を参照する説明記述を読んだ後に当業者にはさらに容易に明らかになるであろう。
【００４５】
実施例は本発明の必須部分でありそして実施例を包含する全体的記述に基づくいずれかの先行技術に関して新規であるようないずれかの特徴もその機能およびその一般性において本発明の必須部分である。
【００４６】
さらに、実施例では、断らない限り全ての百分率は重量により示され、そして断らない限り温度は摂氏温度であり、そして断らない限り圧力は大気圧である。
【実施例】
【００４７】
実施例１：ＨＡＳ２蛋白質をコードする遺伝子の発現の刺激：
（Ａ）外科的切除から由来する腹部生検からのコラゲナーゼ抽出後に、正常なヒト線維芽細胞が得られる。
１０％の牛漿液（ハイクローン（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、２５ｍｇ／ｌのゲンタマイシン、１０００００ＩＵ／ｌのペニシリン、１ｍｇ／ｌのアンフォテリシンＢおよび５０ｍｇ／ｌのアスコルビン酸ナトリウム（シグマ（Ｓｉｇｍａ））が補充されたダルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭグルタミン安定化、インビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））より構成された線維芽細胞培養培地（ＦＣＭ）中で線維芽細胞を増殖させる。１個のウエル当たり１．５ｍｌのＦＣＭを分配させそして培養を３７℃において５％ＣＯ２下で行う。培地を１週間に３回交換する。線維芽細胞を次に１ｃｍ２当たり１００００個の細胞で２４−ウエルプレートの中に１ｍｌの線維芽細胞基本培地（プロモセル（Ｐｒｏｍｏｃｅｌｌ））内で接種しそして集密性になるまで増殖させる。
【００４８】
（Ｂ）活性剤（１％の濃度でスクリーニング方法に関して試験された）を抗生物質、抗菌・カビ剤および成長因子を含まない培養培地の中で希釈する。遺伝子の発現をリアルタイムＲＴ−ＰＣＲによりアクチン（ハウスキーピング遺伝子）に関連する各遺伝子の発現を測定することにより検出しそして無処置の負対照の％として表示する。１０μｌの５ｎｇ／μｌの全ＲＮＡｉ−を４０μｌのＰＣＲミックス（２５μｌの２ＸＳＹＢＲグリーン・バファー・ミックス、０．５μｌの酵素混合物、最終濃度である０．５μＭのセンス・プライマーおよび最終濃度である０．５μＭのアンチセンス・プライマー、および４０μｌにするのに充分な水より構成される）に加える。ＲＴ−ＰＣＲは、５０℃における３０分間の逆転写、９５℃における１５分間のポリメラーゼ活性化、および５０サイクルのＰＣＲサイクル（９５℃、１５秒間；各遺伝子に特異的なハイブリッド化温度／３０秒間；７２℃／３０秒間）の実施を包含する種々の段階で起きる。センスおよびアンチ・センスオリゴヌクレオチド類は、それぞれ、ＣＧＡＧＴＴＴＡＣＴＴＣＣＣＧＣＣＡＡＧＡおよびＣＴＴＣＣＧＣＣＴＧＣＣＡＣＡＣＴＴＡＴＴＧＡＴであり、そしてハイブリッド化温度は５６℃である。
【００４９】
評価した全ての生成物の中で、以下の生成物がＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの生成を刺激するためそれらは満足のいく結果を与える。これらの生成物は従って真皮内のＨＡＳ２合成を刺激しそして皮膚の引き締まり性を誘発するために化粧品内で使用することができる。
【００５０】
【表１】
【００５１】
従って、好ましくは有極性溶媒または有極性溶媒の混合物を用いる、場合により還流下での、好ましくは表１に挙げられた植物の部分の、抽出を行うことが好ましい。抽出が行われたら、溶液を濾過しそして場合により空間有極性溶媒または有極性溶媒の混合物の中に再溶解させてもよい。抽出前に、使用される植物の１つもしくは複数の部分を有利に粉砕することができる。
【００５２】
出発物質として使用される植物の抽出物を、溶媒、好ましくは有極性溶媒、そして好ましくは水、水／アルコールもしくはポリオールの混合物、例えば水／グリコールもしくは水／エタノール混合物、またはポリオール、またはアルコール、例えばエタノール、を用いて得ることが有利である。抽出物を好ましくは濾過しそして次に乾燥する。中程度の加
熱で、例えば４５℃で、または還流下で、抽出を行うことも可能である。抽出は好ましくは撹拌しながら行われる。抽出方法は当業者に既知である。使用される植物の部分は得ようとする抽出物に関連して変動しうる。
【００５３】
好ましくは、抽出物は切断された植物の部分から水またはエタノール中１０％（ｗ／ｗ）で、場合により還流下で、製造される。抽出は１時間にわたり行われ、溶液を次に濾過し、エタノールを除去し、そして得られた生成物を水／グリコール混合物の中に５％（ｗ／ｗ）で溶解させそして次に種々のカットオフしきい値を有するセラミックフィルターを通して限外濾過し、そして、最後に、０．４５μｍで濾過する。エタノール、酢酸エチル、ＤＭＳＯ、アセトンまたは７５％の水および２５％のブチレングリコールの混合物を水の代わりに溶媒として使用することもできる。好ましい抽出タイプは表１に示されたものである。
【００５４】
実施例２：選択された成分の１種（トウグワの抽出物−ＪＶＥＧ０２２Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図１に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの９０％より大きい刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要であり且つ非常に有意な結果である。
【００５５】
実施例３：選択された成分の１種（マオウの抽出物−ＪＶＥＧ１６６Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（マオウの抽出物）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図２に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの１５５％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５６】
実施例４：選択された成分の１種（ガラナの抽出物−ＪＶＥＧ０５６Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（ガラナの抽出物）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図３に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの５００％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５７】
実施例５：選択された成分の１種（ヨモギキクの抽出物−ＪＶＥＧ６８１Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（ヨモギキクの抽出物）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡ
Ｓ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図４に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの２６０％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５８】
実施例６：選択された成分の１種（インド・カイガラサルビアの抽出物−ＪＶＥＧ２３０４Ａ）を用いて得られる効果の服用量−効果確認：
線維芽細胞を実施例１に示された通りにして製造しそして次第に増える量の選択された抽出物（インド・カイガラサルビア）の存在下でインキュベートする。ｍＲＮＡ抽出後に、ＨＡＳ２をコードするｍＲＮＡの量を実施例１に記載されている通りにしてＱ−ＲＴ−ＰＣＲを用いて検出する。結果は試験対照として使用される無処置の細胞培養物の関数として百分率活性化として示され、そして図５に示される。この活性剤に関して有意な服用量−効果が観察され、それはその活性が相対的に特異的でなければならないことを意味する。１％で使用される時には、この抽出物はＨＡＳ２ｍＲＮＡの１８０％の刺激を得ることを可能にし、それは非常に重要な結果である。
【００５９】
実施例７：細胞培養試験：
本発明のペンタジプァンドラ・ブラッゼアナ（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）の抽出物（ＪＶＥＧ０６０Ａ）、インド・カイガラサルビアの抽出物（ＪＶＥＧ ２０３Ａ）、ヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ ６８１Ａ）およびトウグワの抽出物（ＪＶＥＧ ０２２Ａ）の生成物を、それらがグルコサミノグリカン類（ＧＡＧ類、特にヒアルロン酸）の新合成を刺激するそれらの能力に関して評価する。選択された生物学的モデルは真皮同等物（ＤＥ、線維芽細胞を含んでなる収縮したコラーゲンの遊離格子）および単層培養における正常なヒト真皮線維芽細胞の培養物（ＮＨＤＦ類）である。
【００６０】
これらの効果を、選択されたモデルの線維芽細胞による新合成されたＧＡＧ部分へのトリチエーションされたグルコサミンの導入を定量化することにより、評価した。精製されたＧＡＧ部分中へのグルコサミンの導入は（主に）ヒアルロン酸を包含するほとんどのＧＡＧ類の新合成を考慮に入れる。分泌された／可溶性部分（分泌されたＧＡＧ類）に対してそしてＤＥ−必須部分（マトリックス中に貯蔵されたＧＡＧ類）に対してまたは全線維芽細胞培養物（ＮＨＤＦ）に対して、分析を行った。
【００６１】
真皮同等物
真皮同等物を製造しそして次に２％ＦＣＳを含有するＤＭＥＭ培地（インビトロゲン）の中に入れそして７日間にわたり培地を３日毎に交換しながら放置して収縮させた。ＤＥ類を引き続き試験化合物または対比化合物（ＴＧＦ−ベータ、１０ｎｇ／ｍｌ）の存在下または不存在下（対照）で４８時間または７２時間にわたり３７℃および５％ＣＯ２において、インキュベーションの終了前２４時間にトリチエーションされたグルコサミンを添加しながら、インキュベートした。
【００６２】
線維芽細胞
正常なヒト真皮線維芽細胞を完全ＤＭＥＭ培地の中に接種しそして２４時間にわたり３７℃および５％ＣＯ２において予備インキュベートし、そして培養培地を次に試験化合物または対比生成物（ＴＧＦ−ベータ、１０ｎｇ／ｍｌ）を含有するかまたは含有しない（対照）２％漿液を有するＤＭＥＭ培地で置換した。各実験条件は三重に行われた。細胞を引き続き３７℃において７２時間にわたり、インキュベーションの終了前２４時間にトリチエーションされたグルコサミンを添加しながら、インキュベートした。
【００６３】
導入された放射活性の分析
インキュベーションの終了前２４時間に、トリチエーションされたグルコサミン（Ｄ−［６−３Ｈ］−グルコサミン、１．３７Ｔｂｑ／ミリモル、３７Ｃｉ／ミリモル、３３μＣｉ／ｍｌ）を培養物に加える。グルコサミノグリカン抽出をＤＥ培養上澄み液（分泌された／可溶性部分）に対して、実際のＤＥ類内で、粉砕により（抽出された部分）、または線維芽細胞培養物内でカオトロピック緩衝液（５０ｍＭのトリス／ＨＣｌ、４Ｍのグアニジン、５ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ８．０）を用いて、行う。精製はイオン交換クロマトグラフィー、すなわち高緊縮条件下でのＱ−セファロースビーズ上のアニオン性分子の吸着、６Ｍのウレアおよび０．２ＭのＮａＣｌを用いるわずかなおよび中程度のアニオン性の分子の脱着、並びに洗浄、により行われる。担体（主としてＧＡＧ類、２ＭのＮａＣｌで溶離された）上に残存する非常にカチオン性の分子に導入された放射活性の測定は液体シンチレーションにより行われる。結果は対照と比べたグリコサミノグリカン合成における百分率変動として表示される。複合比較用のダネット試験（Ｄｕｎｎｅｔｔ‘ｓ ｔｅｓｔ）を用いる変種（アノーバ（ＡＮＯＶＡ））の分析により集団間比較を行った。
【００６４】
対比生成物であるＴＧＦ−ベータ（１０ｎｇ／ｍｌ）はＧＡＧ部分中へのグルコサミンの導入を大きく刺激した（対照と比べて４の因数による刺激）。この結果は検定を確認する。
【００６５】
この検定の実験条件下で、１％で試験された、インド・カイガラサルビアの抽出物（ＪＶＥＧ２０３Ａ）およびヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ６８１Ａ）は線維芽細胞により合成されたＧＡＧ類の部分へのグルコサミンの導入を刺激した（それぞれ、無処置対照の１５４％および１４３％、ｐ＜０．０１）。
【００６６】
表２：インビトロ培養中のヒト真皮線維芽細胞により合成されたＧＡＧ類の部分への３Ｈ−グルコサミンの導入に対する種々の処置の効果。
【表２】
【００６７】
可溶性部分
対比生成物ＴＧＦ−ベータは真皮同等物の可溶性であり且つ分泌されたＧＡＧ部分へのグルコサミンの導入を大きく刺激した（対照と比べて３の因数による刺激）。この結果は検定を確認する。
【００６８】
この検定の実験条件下で、１％で試験された、生成物であるヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ６８１Ａ）およびトウグワの抽出物（ＪＥＶＧ０２２Ａ）は真皮同等物の可溶性であり且つ分泌された部分へのグルコサミンの導入を有意に刺激した（それぞれ、２１０％、ｐ＜０．０１および１４９％、ｐ＜０．０５）。インド・カイガラサルビアの抽出物（ＪＶＥＧ２０３Ａ）もＤＥ類の可溶性ＧＡＧ部分へのグルコサミンの導入を増加させることができた（対照の１４０％）。
【００６９】
抽出された部分
ＴＧＥ−ベータは真皮同等物から抽出されたＧＡＧ部分へのグルコサミンの導入を刺激したが、可溶性部分内より穏やかであった（対照と比べて１．６の因数による刺激）。この結果は検定を確認する。
【００７０】
検定の実験条件下で、１％で試験された、生成物であるヨモギキクの抽出物（ＪＶＥＧ６８１Ａ）は真皮同等物の抽出された部分中へのグルコサミンの導入を有意に刺激した（対照の１５０％、ｐ＜０．０１）。ＴＧＦ−ベータに関するように、この刺激は可溶性部分内より弱い。
【００７１】
表３および４：真皮同等物の線維芽細胞により合成されたＧＡＧ類の部分中へのグルコサミンの導入に対する種々の処置の効果（以下で、可溶性部分、表３、および抽出された部分、表４）。
【表３】
【００７２】
実施例８：インビボ試験
この試験の目的は、別個の適用後３０分および１日１回使用後の１ヶ月間にわたる、引き締まり性および弾性に対する本発明の生成物の効果を評価することである。皮膚の生機能性質に対する効果を、皮膚表面上の大きな対象の反動の動態記録に基づく技術であるバ
リストメーターにより評価する。
【００７３】
３秒間にわたり記録された誘発された反動を次に電気信号に翻訳し、それらを振幅により定量化しそして評価することができる。測定されたパラメーターは下記のものである：−皮膚の引き締まり性を測定する窪み（最初の衝撃に関する皮膚内へのプローブの侵入）、窪みが減少するなら、引き締まり性がある。
−曲線下の面積が回復されたエネルギーを測定する。後者は皮膚の弾性および引き締まり性の両者により影響を受け、面積内における減少が引き締まり性に相当する。
−弾性に関連する反動が消える速度を示す反動の吸収度であるアルファ：アルファが増加する場合には、弾性が減少する。
【００７４】
２種の調合物（クリームおよび漿液）を通常の使用条件下での１ヶ月間にわたる顔全体への１日２回適用により評価し、各調合物を４５〜７５歳の２０人の女性志願者に対して試験した。クリームは１％のインド・カイガラサルビアの抽出物および１％のヨモギキクの抽出物を含有するＯ／Ｗエマルジョンであり、漿液は１．５％のインド・カイガラサルビアの抽出物および１．５％のヨモギキクの抽出物を含有する乳化されたゲルであった。
【００７５】
皮膚の生機能性質の分析は、平均して志願者全てに対して、１ヶ月間にわたるクリームまたは漿液の１日２回使用後に、それぞれ１２％および７％の窪み（最初の衝撃に関する皮膚内へのプローブの侵入）における有意な減少を示した。この観察は、本発明の生成物の局所適用後の皮膚の引き締まり性における有意な改良を示す。より具体的には、クリームに関して、下記のことが観察される：
・志願者の８６％で測定された窪みにおける改良、後者における１６％の改良（最大値：−３７％）。
・アルファ計数は６２％ほど有意に増加しそして曲線下の面積は３２％ほど有意に減少する：これらの２つのパラメーターは窪みに関連しておりそしてその結果として引き締まり効果を確認する。
１ヶ月間にわたるクリームの１日２回使用後に、図６に示されているように、皮膚は１２％ほど有意に引き締まる。
【００７６】
より具体的には、漿液に関して、下記のことが観察される：
・志願者の７１％で測定された窪みにおける改良、後者における１３％の改良（最大値：−３１％）。
・アルファ計数は８％ほど有意に増加しそして曲線下の面積は１８％ほど有意に減少し、これらも皮膚の引き締まりがあることを確認する。
１ヶ月間にわたる漿液の１日２回使用後に、図７に示されているように、皮膚は７％ほど有意に引き締まる。
【００７７】
実施例９：ＨＡＳ２合成の刺激に関して選択された分子の炎症能力の不存在の評価：
レチノイン酸とは異なり、ＨＡＳ２合成を刺激するために選択された分子であるＴＮＦ−アルファおよびＩＬ１は化粧品用途に不適切な前−炎症性機構を含まない。それ故、実施例６の条件下でのインド・カイガラサルビアの抽出物の使用は、線維芽細胞培養物上で、ＨＡＳ２を刺激しうるが、同時にＨＡＳ２を刺激することが知られている前−炎症性サイトカイン類、例えばＩＬ１、ＴＮＦａまたはＴＧＦβ（実施例６の陽性対照）の合成を刺激しない（接触後４８時間の線維芽細胞培養上澄み液に対する検定）。
【表４】
【００７８】
それ故、実施例５の条件下でのヨモギキクの抽出物の使用は、線維芽細胞培養物上で、ＨＡＳ２を刺激しうるが、同時にＨＡＳ２を刺激することが知られている前−炎症性サイトカイン類、例えばＩＬ１、ＴＮＦａまたはＴＧＦβ（実施例５の陽性対照）の合成を刺激しない（接触後４８時間の線維芽細胞培養上澄み液に対する検定）。
【表５】
【００７９】
それ故、実施例１の条件下でのハウチワマメの抽出物の使用は、線維芽細胞培養物上で、ＨＡＳ２を刺激しうるが、同時にＨＡＳ２を刺激することが知られている前−炎症性サイトカイン類、例えばＩＬ１、ＴＮＦａまたはＴＧＦβ（実施例１〜７の陽性対照）の合成を刺激しない（接触後４８時間の線維芽細胞培養上澄み液に対する検定）。
【表６】
【００８０】
実施例１０：水中油型エマルジョンタイプの化粧品または製薬学的調合物中の本発明の生成物の使用：
調合物ａ：Ｏ／Ｗエマルジョン
Ａ 水 １００にする量
ブチレングリコール ２
グリセロール ３
燐酸ナトリウムジヒドロキシセチル、 ２
イソプロピルヒドロキシセチルエーテル
Ｂ ステアリン酸グリコールＳＥ １４
トリイソノナオイン ５
オクチルココエート ６
Ｃ ブチレングリコール、 ２
メチルパラベン、
エチルパラベン、
プロピルパラベン、
５．５に調節されたｐＨ
Ｄ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
調合物ｂ：Ｏ／Ｗエマルジョン
Ａ 水 １００にする量
ブチレングリコール ２
グリセロール ３
ポリアクリルアミド、 ２．８
イソパラフィン、ラウレス−７
Ｂ ブチレングリコール、 ２．５
メチルパラベン、
エチルパラベン、
プロピルパラベン； ２
フェノキシエタノール、
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、
エチルパラベン
Ｄ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
調合物ｃ：Ｏ／Ｗエマルジョン
Ａ カルボマー ０．５０
プロピレングリコール ３
グリセロール ５
水 １００にする量
Ｂ オクチルココエート ５
ビサボロール ０．３０
ジメチコーン ０．３０
Ｃ 水酸化ナトリウム １．６０
Ｄ フェノキシエタノール、 ０．５０
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、エチルパラベン、
Ｅ 香料 ０．３０
Ｆ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【００８１】
実施例１１：油中水型の調合物中の本発明の生成物の使用：
Ａ ステアリン酸ジポリヒドロキシＰＥＧ−３０ ３
カプリン酸トリグリセリド類 ３
オクタン酸セテアリル ４
アジピン酸ジブチル ３
ブドウ種油 １．５
ホホバ油 １．５
フェノキシエタノール、 ０．５
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、エチルパラベン
Ｂ グリセロール ３
ブチレングリコール ３
硫酸マグネシウム ０．５
ＥＤＴＡ ０．０５
水 １００にする量
Ｃ シクロメチコーン １
ジメチコーン １
Ｄ 香料 ０．３
Ｅ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【００８２】
実施例１２：シャンプーまたはシャワーゲルタイプの調合物中の本発明の生成物の使用：Ａ キサンタンゴム ０．８
水 １００にする量
Ｂ ブチレングリコール、 ０．５
メチルパラベン、
エチルパラベン、プロピルパラベン
フェノキシエタノール、 ０．５
メチルパラベン、
プロピルパラベン、
ブチルパラベン、エチルパラベン
Ｃ クエン酸 ０．８
Ｄ ラウレス硫酸ナトリウム ４０．０
Ｅ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【００８３】
実施例１３：口紅タイプおよび他の無水製品の調合物中の本発明の生成物の使用：
Ａ 鉱油 １７．０
イソステアリン酸イソステアリル ３１．５
ジペラルゴン酸プロピレングリコール ２．６
イソステアリン酸プロピレングリコール １．７
ＰＥＧ−８蜜蝋 ３．０
水素化されたヤシ仁油グリセリド類、 ３．４
水素化されたヤシグリセリド類
ラノリン油 ３．４
ゴマ油 １．７
乳酸セチル １．７
鉱油、ラノリンアルコール ３．０
Ｂ ひまし油 １００にする量
二酸化チタン ３．９
ＣＩ １５８５０：１ ０．６１６
ＣＩ ４５４１０：１ ０．２５６
ＣＩ １９１４０：１ ０．０４８
ＣＩ ７７４９１ ２．０４８
Ｃ 本発明の生成物 ０．０１−５％
【００８４】
実施例１４：水性ゲル調合物（目の周りの領域、スリミングなど）中の本発明の生成物の使用：
Ａ 水 １００にする量
カルボマー ０．５
ブチレングリコール １５
フェノキシエタノール、メチルパラベン、 ０．５
プロピルパラベン、ブチルパラベン、
エチルパラベン
Ｂ 本発明の生成物 ０．０１−１０％
【図面の簡単な説明】
【００８５】
【図１】図１はトウグワの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図２】図２はマオウの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図３】図３はガラナの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図４】図４はヨモギキクの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図５】図５はインド・カイガラサルビアの抽出物を用いるＨＡＳ２刺激のグラフ表示である。
【図６】図６はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなるクリームの１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【図７】図７はインド・カイガラサルビアの抽出物およびヨモギキクの抽出物を含んでなる漿液の１ヶ月間にわたる使用後の皮膚の引き締まり性における変化のグラフである。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）有効量の、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｊ‘ｏｕｂｌｉｅ）（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、およびそれらの混合物よりなる群から選択される少なくとも１種の刺激剤、並びに
（ｂ）皮膚学的に許容可能な担体
を含んでなる組成物を皮膚組織に局所的に適用する段階を含んでなる、皮膚組織の線維芽細胞中のヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の発現および／または活性を刺激する方法。
【請求項２】
刺激剤がトウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）の抽出物、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）の抽出物、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）の抽出物、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）の抽出物、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）の抽出物、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）の抽出物、またはそれらの混合物よりなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
刺激剤の有効量が合計組成物の０．００１〜２０重量％間の量である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
皮膚内で引き締まり性（ｆｉｒｍｎｅｓｓ）および／または弾性および／または組織水分付与性を改良し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒および／または細胞の増殖、泳動もしくは分化および／または皮膚萎縮を改良することが意図される、並びに／或いは皮膚上の老化の影響を減じ、そして特に老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失、および／または萎縮瘢痕および／または老化の過程で観察される萎縮した皮膚組織を減じ、特に真皮萎縮を減ずることが意図される化粧品組成物中の活性成分としての有効量の少なくとも１種の植物抽出物の使用であって、該植物抽出物がガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、およびそれらの混合物よりなる群から選択される使用。
【請求項５】
（ａ）有効量のヒアルロナン・シンセターゼの発現または活性を刺激可能な、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃ
ｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、およびそれらの混合物よりなる群から選択される少なくとも１種の植物抽出物、並びに
（ｂ）少なくとも１種の化粧品的に許容可能な賦形剤
を含んでなる局所化粧品組成物。
【請求項６】
組成物が少なくとも１種の追加の活性な化粧品成分をさらに含んでなる請求項４に記載の局所化粧品組成物。
【請求項７】
組成物が水性もしくは油性溶液、グリームまたは水性ゲルもしくは油性ゲル、シャンプー、ミルク、エマルジョン、マイクロエマルジョンもしくはナノエマルジョン、ローション、エーロゾル、およびアンプル、漿液、液体石鹸、皮膚クレンジングバー、軟膏、ムース、或いは無水スティックよりなる群から選択される形態に調合される請求項４に記載の局所化粧品組成物。
【請求項８】
植物抽出物の量が合計組成物の０．００１〜２０重量％間である請求項４に記載の局所化粧品組成物。
【請求項９】
植物抽出物の量が合計組成物の０．００１〜１０重量％間である請求項７に記載の局所化粧品組成物。
【請求項１０】
植物抽出物の量が合計組成物の０．０１〜１０重量％間である請求項８に記載の局所化粧品組成物。
【請求項１】
（ａ）有効量の、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｊ‘ｏｕｂｌｉｅ）（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、およびそれらの混合物よりなる群から選択される少なくとも１種の刺激剤、並びに
（ｂ）皮膚学的に許容可能な担体
を含んでなる組成物を皮膚組織に局所的に適用する段階を含んでなる、皮膚組織の線維芽細胞中のヒアルロナン・シンセターゼ２（ＨＡＳ２）の発現および／または活性を刺激する方法。
【請求項２】
刺激剤がトウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）の抽出物、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）の抽出物、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）の抽出物、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）の抽出物、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）の抽出物、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）の抽出物、またはそれらの混合物よりなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項３】
刺激剤の有効量が合計組成物の０．００１〜２０重量％間の量である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
皮膚内で引き締まり性（ｆｉｒｍｎｅｓｓ）および／または弾性および／または組織水分付与性を改良し、並びに／或いは皮膚障壁効果を増加し、並びに／或いは組織回復力を増加し、或いは脈管形成または血液毛管の新形成を調節し、並びに／或いは治癒および／または細胞の増殖、泳動もしくは分化および／または皮膚萎縮を改良することが意図される、並びに／或いは皮膚上の老化の影響を減じ、そして特に老化の過程で観察される皮膚の引き締まり性の損失、および／または萎縮瘢痕および／または老化の過程で観察される萎縮した皮膚組織を減じ、特に真皮萎縮を減ずることが意図される化粧品組成物中の活性成分としての有効量の少なくとも１種の植物抽出物の使用であって、該植物抽出物がガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、およびそれらの混合物よりなる群から選択される使用。
【請求項５】
（ａ）有効量のヒアルロナン・シンセターゼの発現または活性を刺激可能な、ガラナ（Ｐａｕｌｌｉｎｉａ ｃｕｐａｎａ）、オトギリソウ（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｈｉｒｃｉｎｕｍ）、竹（Ｂａｍｂｕｓａ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ヤエナリ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、スグリ（Ｒｉｂｅｓ ｕｖａ−ｃｒｉｓｐａ）、ナギイカダ（Ｒｕｓｃ
ｕｓ ａｃｕｌｅａｔｕｓ）、ソラマネ（Ｖｉｃｉａ ｆａｂａ ｅｑｕｉｎａ）、エンドウマメ（Ｐｉｓｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ）、ルピナス（Ｌｕｐｉｎｕｓ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｓ）、マオウ（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ）、ヨモギキク（Ｔａｎａｃｅｔｕｍ ｖｕｌｇａｒｅ）、インド・カイガラサルビア（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌａｎｇａ）、トウグワ（Ｍｏｒｕｓ ａｌｂａ）、ジェーオウブリー（Ｐｅｎｔａｄｉｐｌａｎｄｒａ ｂｒａｚｚｅａｎａ）、およびそれらの混合物よりなる群から選択される少なくとも１種の植物抽出物、並びに
（ｂ）少なくとも１種の化粧品的に許容可能な賦形剤
を含んでなる局所化粧品組成物。
【請求項６】
組成物が少なくとも１種の追加の活性な化粧品成分をさらに含んでなる請求項４に記載の局所化粧品組成物。
【請求項７】
組成物が水性もしくは油性溶液、グリームまたは水性ゲルもしくは油性ゲル、シャンプー、ミルク、エマルジョン、マイクロエマルジョンもしくはナノエマルジョン、ローション、エーロゾル、およびアンプル、漿液、液体石鹸、皮膚クレンジングバー、軟膏、ムース、或いは無水スティックよりなる群から選択される形態に調合される請求項４に記載の局所化粧品組成物。
【請求項８】
植物抽出物の量が合計組成物の０．００１〜２０重量％間である請求項４に記載の局所化粧品組成物。
【請求項９】
植物抽出物の量が合計組成物の０．００１〜１０重量％間である請求項７に記載の局所化粧品組成物。
【請求項１０】
植物抽出物の量が合計組成物の０．０１〜１０重量％間である請求項８に記載の局所化粧品組成物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２００７−１３７８８４（Ｐ２００７−１３７８８４Ａ）
【公開日】平成１９年６月７日（２００７．６．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−３１１９７９（Ｐ２００６−３１１９７９）
【出願日】平成１８年１１月１７日（２００６．１１．１７）
【出願人】（５０６０５７２１４）エンゲルハード・リヨン・ソシエテ・アノニム (4)
【出願人】（５０６３８６５２７）
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年６月７日（２００７．６．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１１月１７日（２００６．１１．１７）
【出願人】（５０６０５７２１４）エンゲルハード・リヨン・ソシエテ・アノニム (4)
【出願人】（５０６３８６５２７）
【Ｆターム（参考）】
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