【課題】
【解決手段】本発明は、新規なプロテアーゼ、これらの酵素をコードする新規な遺伝子材料、およびセルロモナス類（Cellulomonas spp.）およびこれより開発された変異タンパク質を含むが、これらに限定されない類を含むミクロコシニアエ類（Micrococcineae spp.）から得られる蛋白分解性タンパク質を提供する。特に、本発明は、セルロモナス類から得られたプロテアーゼ組成物、該プロテアーゼをコードするＤＮＡ、該プロテアーゼをコードするＤＮＡを含むベクター、該ベクターＤＮＡで変異させた宿主細胞、および該宿主細胞で生産された酵素を提供する。また、本発明は、セルロモナス類（Cellulomonas spp.）を含むが、これらに限定されない類を含むミクロコシニアエ類（Micrococcineae spp.）から得られるプロテアーゼを含む、洗浄組成物（例えば、界面活性剤組成物）、動物食餌組成物、および織物および皮革の加工用組成物を提供する。選択的な態様において、本発明は、ここで記載された野生型プロテアーゼに由来するミュータント（すなわち、変異）プロテアーゼを提供する。これらのミュータント・プロテアーゼも多くの応用に用いられる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミクロコシニアエ（Micrococcineae）の構成種から得られた単離セリンプロテアーゼ。
【請求項２】
前記プロテアーゼがセルロモナディン（cellulomonadin）であることを特徴とする請求項１に記載のセリンプロテアーゼ。
【請求項３】
前記プロテアーゼが、セルロモナス（cellulomonas）、エルスコビア（Oerskovia）、セルロシミクロビウム（cellulosimicrobium）、キシラニバクテリウム（Xylanibacterium）、およびプロミクロモノスポラ（Promicromonospora）からなる群から選択される生物体であることを特徴とする請求項１に記載のセリンプロテアーゼ。
【請求項４】
前記プロテアーゼが、セルロモナス６９Ｂ４であることを特徴とする請求項３に記載のセリンプロテアーゼ。
【請求項５】
前記プロテアーゼが、配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項４に記載のセリンプロテアーゼ。
【請求項６】
請求項４に記載のセリンプロテアーゼと免疫学的交叉反応性を有する単離セリンプロテアーゼを含む組成物。
【請求項７】
請求項１に記載のセリンプロテアーゼと免疫学的交叉反応性を有する単離セリンプロテアーゼを含む組成物。
【請求項８】
請求項５に記載のセリンプロテアーゼと６０％以上のアミノ酸相同性を含む単離セリンプロテアーゼ。
【請求項９】
前記配列が、２，８、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、２４、２６、３１、３３、３５、３６、３８、３９、４０、４３、４６、４９、５１、５４、６１、６４、６５、６７、７０、７１、７６、７８、７９、８１、８３、８５、８６、９０、９３、９９、１００、１０５、１０７、１０９、１１２、１１３、１１６、１１８、１１９、１２１、１２３、１２７、１４５、１５５、１５９、１６０、１６３、１６５、１７０、１７４、１７９、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、および１８８位を含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸の位置における置換を含むことを特徴とする請求項４に記載のアミノ酸配列。
【請求項１０】
前記配列が、１、４、２２、２７、２８、３０、３２、４１、４７、４８、５５、５９、６３、６６、６９、７５、７７、８０、８４、８７、８８、８９、９２、９６、１１０、１１１、１１４、１１５、１１７、１２８、１３４、１４４、１４３、１４６、１５１、１５４、１５６、１５８、１６１、１６６、１７６、１７７、１８１、１８２、１８７、および１８９位を含む群から選択される少なくとも一つのアミノ酸の位置における置換を含むことを特徴とする請求項４に記載のアミノ酸配列。
【請求項１１】
配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むセルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼにおける位置と同等の位置におけるアミノ酸の少なくとも１つの置換を含むアミノ酸配列を有するプロテアーゼ変異体。
【請求項１２】
前記置換が、配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むセルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼにおける２，８、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、２４、２６、３１、３３、３５、３６、３８、３９、４０、４３、４６、４９、５１、５４、６１、６４、６５、６７、７０、７１、７６、７８、７９、８１、８３、８５、８６、９０、９３、９９、１００、１０５、１０７、１０９、１１２、１１３、１１６、１１８、１１９、１２１、１２３、１２７、１４５、１５５、１５９、１６０、１６３、１６５、１７０、１７４、１７９、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、および１８８位と同等の位置における置換であることを特徴とする請求項１１に記載の単離プロテアーゼ。
【請求項１３】
前記置換が、配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むセルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼにおける１、４、２２、２７、２８、３０、３２、４１、４７、４８、５５、５９、６３、６６、６９、７５、７７、８０、８４、８７、８８、８９、９２、９６、１１０、１１１、１１４、１１５、１１７、１２８、１３４、１４４、１４３、１４６、１５１、１５４、１５６、１５８、１６１、１６６、１７６、１７７、１８１、１８２、１８７、および１８９位と同等の位置における置換であることを特徴とする請求項１１に記載の単離プロテアーゼ。
【請求項１４】
配列番号８で示されるアミノ酸配列を含む単離プロテアーゼであって、１４、１６、３５、３６、６５、７５、７６、７９、１２３、１２７、１５９、および１７９からなる群から選択される位置における少なくとも１つのアミノ酸が他のアミノ酸で置換されていることを特徴とする単離プロテアーゼ。
【請求項１５】
前記プロテアーゼが、Ｒ１４Ｌ、Ｒ１６Ｉ、Ｒ１６Ｌ、Ｒ１６Ｑ、Ｒ３５Ｆ、Ｔ３６Ｓ、Ｇ６５Ｑ、Ｙ７５Ｇ、Ｎ７６Ｌ、Ｎ７６Ｖ、Ｒ７９Ｔ、Ｒ１２３Ｌ、Ｒ１２３Ｑ、Ｒ１２７Ａ、Ｒ１２７Ｋ、Ｒ１２７Ｑ、Ｒ１５９Ｋ、Ｒ１５９Ｑ、およびＲ１７９Ｑからなる群から選択される少なくとも一つの突然変異を含むことを特徴とする請求項１４に記載のプロテアーゼ。
【請求項１６】
前記プロテアーゼが、Ｒ１６Ｑ／Ｒ３５Ｆ／Ｒ１５９Ｑ、Ｒ１６Ｑ／Ｒ１２３Ｌ、Ｒ１４Ｌ／Ｒ１２７Ｑ／Ｒ１５９Ｑ、Ｒ１４Ｌ／Ｒ１７９Ｑ、Ｒ１２３Ｌ／Ｒ１２７Ｑ／Ｒ１７９Ｑ、Ｒ１６Ｑ／Ｒ７９Ｔ／Ｒ１２７Ｑ、およびＲ１６Ｑ／Ｒ７９Ｔからなる群から選択される多数突然変異を含むことを特徴とする請求項１５に記載のプロテアーゼ。
【請求項１７】
前記プロテアーゼが、以下に示すＲ１２３Ｌ、Ｒ１２７Ｑ、およびＲ１７９Ｑの突然変異を含むことを特徴とする請求項１５に記載のプロテアーゼ。
【請求項１８】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｔ３６Ｉ、Ａ３８Ｒ、Ｎ１７０Ｙ、Ｎ７３Ｔ、Ｇ７７Ｔ、Ｎ２４Ａ、Ｔ３６Ｇ、Ｎ２４Ｅ、Ｌ６９Ｓ、Ｔ３６Ｎ、Ｔ３６Ｓ、Ｅ１１９Ｒ、Ｎ７４Ｇ、Ｔ３６Ｗ、Ｓ７６Ｗ、Ｎ２４Ｔ、Ｎ２４Ｑ、Ｔ３６Ｐ、Ｓ７６Ｙ、Ｔ３６Ｈ、Ｇ５４Ｄ、Ｇ７８Ａ、Ｓ１８７Ｐ、Ｒ１７９Ｖ、Ｎ２４Ｖ、Ｖ９０Ｐ、Ｔ３６Ｄ、Ｌ６９Ｈ、Ｇ６５Ｐ、Ｇ６５Ｒ、Ｎ７Ｌ、Ｗ１０３Ｍ、Ｎ５５Ｆ、Ｇ１８６Ｅ、Ａ７０Ｈ、Ｓ７６Ｖ、Ｇ１８６Ｖ、Ｒ１５９Ｆ、Ｔ３６Ｙ、Ｔ３６Ｖ、Ｇ６５Ｖ、Ｎ２４Ｍ、Ｓ５１Ａ、Ｇ６５Ｙ、Ｑ７１Ｉ、Ｖ６６Ｈ、Ｐ１１８Ａ、Ｔ１１６Ｆ、Ａ３８Ｆ、Ｎ２４Ｈ、Ｖ６６Ｄ、Ｓ７６Ｌ、Ｇ１７７Ｍ、Ｇ１８６Ｉ、Ｈ８５Ｑ、Ｑ７１Ｋ、Ｑ７１Ｇ、Ｇ６５Ｓ、Ａ３８Ｄ、Ｐ１１８Ｆ、Ａ３８Ｓ、Ｇ６５Ｔ、Ｎ６７Ｇ、Ｔ３６Ｒ、Ｐ１１８Ｒ、Ｓ１１４Ｇ、Ｙ７５Ｉ、Ｉ１８１Ｈ、Ｇ６５Ｑ、Ｙ７５Ｇ、Ｔ３６Ｆ、Ａ３８Ｈ、Ｒ１７９Ｍ、Ｔ１８３Ｉ、Ｇ７８Ｓ、Ａ６４Ｗ、Ｙ７５Ｆ、Ｇ７７Ｓ、Ｎ２４Ｌ、Ｗ１０３Ｉ、Ｖ３Ｌ、Ｑ８１Ｖ、Ｒ１７９Ｄ、Ｇ５４Ｒ、Ｔ３６Ｌ、Ｑ７１Ｍ、Ａ７０Ｓ、Ｇ４９Ｆ、Ｇ５４Ｌ、Ｇ５４Ｈ、Ｇ７８Ｈ、Ｒ１７９Ｉ、Ｑ８１Ｋ、Ｖ９０Ｉ、Ａ３８Ｌ、Ｎ６７Ｌ、Ｔ１０９Ｉ、Ｒ１７９Ｎ、Ｖ６６Ｉ、Ｇ７８Ｔ、Ｒ１７９Ｙ、Ｓ１８７Ｔ、Ｎ６７Ｋ、Ｎ７３Ｓ、Ｅ１１９Ｋ、Ｖ３Ｉ、Ｑ７１Ｈ、Ｉ１１Ｑ、Ａ６４Ｈ、Ｒ１４Ｅ、Ｒ１７９Ｔ、Ｌ６９Ｖ、Ｖ１５０Ｌ、Ｑ７１Ａ、Ｇ６５Ｌ、Ｑ７１Ｎ、Ｖ９０Ｓ、Ａ６４Ｎ、Ｉ１１Ａ、Ｎ１４５Ｉ、Ｈ８５Ｔ、Ａ６４Ｙ、Ｎ１４５Ｑ、Ｖ６６Ｌ、Ｓ９２Ｇ、Ｓ１８８Ｍ、Ｇ７８Ｄ、Ｎ６７Ａ、Ｎ７Ｓ、Ｖ８０Ｈ、Ｇ５４Ｋ、Ａ７０Ｄ、Ｐ１１８Ｈ、Ｄ２Ｇ、Ｇ５４Ｍ、Ｑ８１Ｈ、Ｄ２Ｑ、Ｖ６６Ｅ、Ｒ７９Ｐ、Ａ３８Ｎ、Ｎ１４５Ｅ、Ｒ１７９Ｌ、Ｔ１０９Ｈ、Ｒ１７９Ｋ、Ｖ６６Ａ、Ｇ５４Ａ、Ｇ７８Ｎ、Ｔ１０９Ａ、Ｒ１７９Ａ、Ｎ７Ａ、Ｒ１７９Ｅ、Ｈ１０４Ｋ、Ａ６４Ｒ、およびＶ８０Ｌからなる群から選択される少なくとも一つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項１９】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｈ８５Ｒ、Ｈ８５Ｌ、Ｔ６２Ｉ、Ｎ６７Ｈ、Ｇ５４Ｉ、Ｎ２４Ｆ、Ｔ４０Ｖ、Ｔ８６Ａ、Ｇ６３Ｖ、Ｇ５４Ｑ、Ａ６４Ｆ、Ｇ７７Ｙ、Ｒ３５Ｆ、Ｔ１２９Ｓ、Ｒ６１Ｍ、Ｉ１２６Ｌ、Ｓ７６Ｎ、Ｔ１８２Ｖ、Ｒ７９Ｇ、Ｔ１０９Ｐ、Ｒ１２７Ｆ、Ｒ１２３Ｅ、Ｐ１１８Ｉ、Ｔ１０９Ｒ、１７１Ｓ、Ｔ１８３Ｋ、Ｎ６７Ｔ、Ｐ８９Ｎ、Ｆ１Ｔ、Ａ６４Ｋ、Ｇ７８Ｉ、Ｔ１０９Ｌ、Ｇ７８Ｖ、Ａ６４Ｍ、Ａ６４Ｓ、Ｔ１０Ｇ、Ｇ７７Ｎ、Ａ６４Ｌ、Ｎ６７Ｄ、Ｓ７６Ｔ、Ｎ４２Ｈ、Ｄ１８４Ｆ、Ｄ１８４Ｒ、Ｓ７６Ｉ、Ｓ７８Ｒ、Ａ３８Ｋ、Ｖ７２Ｉ、Ｖ３Ｔ、Ｔ１０７Ｓ、Ａ３８Ｖ、Ｆ４７Ｉ、Ｎ５５Ｑ、Ｓ７６Ｅ、Ｐ１１８Ｑ、Ｔ１０９Ｇ、Ｑ７１Ｄ、Ｐ１１８Ｋ、Ｎ６７Ｓ、Ｑ１６７Ｎ、Ｎ１４５Ｇ、Ｉ２８Ｌ、Ｉ１１Ｔ、Ａ６４Ｉ、Ｇ４９Ｋ、Ｇ４９Ａ、Ｇ６５Ａ、Ｎ１７０Ｄ、Ｈ８５Ｋ、Ｓ１８５Ｉ、Ｉ１８１Ｎ、Ｖ８０Ｆ、Ｌ６９Ｗ、Ｓ７６Ｒ、Ｄ１８４Ｈ、Ｖ１５０Ｍ、Ｔ１８３Ｍ、Ｎ６７Ｑ、Ｓ５１Ｑ、Ａ３８Ｙ、Ｔ１０７Ｖ、Ｎ１４５Ｔ、Ｑ７１Ｆ、Ａ８３Ｎ、Ｓ７６Ａ、Ｎ６７Ｒ、Ｔ１５１Ｌ、Ｔ１６３Ｌ、Ｓ５１Ｆ、Ｑ８１Ｉ、Ｆ４７Ｍ、Ａ４１Ｎ、Ｐ１１８Ｅ、Ｎ６７Ｙ、Ｔ１０７Ｍ、Ｎ７３Ｈ、６７Ｖ、Ｇ６３Ｗ、Ｔ１０Ｋ、Ｉ１８１Ｇ、Ｓ１８７Ｅ、Ｔ１０７Ｈ、Ｄ２Ａ、Ｌ１４２Ｖ、Ａ１４３Ｎ、Ａ８Ｇ、Ｓ１８７Ｌ、Ｖ９０Ａ、Ｇ４９Ｌ、Ｎ１７０Ｌ、Ｇ６５Ｈ、Ｔ３６Ｃ、Ｇ１２Ｗ、Ｓ７６Ｑ、Ａ１４３Ｓ、Ｆ１Ａ、Ｎ７Ｈ、Ｓ１８５Ｖ、Ａ１１０Ｔ、Ｎ５５Ｋ、Ｎ６７Ｆ、Ｎ７Ｉ、Ａ１１０Ｓ、Ｎ１７０Ａ、Ｑ８１Ｄ、Ａ６４Ｑ、Ｑ７１Ｌ、Ａ３８Ｉ、Ｎ１１２Ｉ、Ｖ９０Ｔ、Ｎ１４５Ｌ、Ａ６４Ｔ、Ｉ１１Ｓ、Ａ３０Ｓ、Ｒ１２３Ｉ、Ｄ２Ｈ、Ｖ６６Ｍ、Ｑ７１Ｒ、Ｖ９０Ｌ、Ｌ６８Ｗ、Ｎ２４Ｓ、Ｒ１５９Ｅ、Ｖ６６Ｎ、Ｄ１８４Ｑ、Ｅ１３３Ｑ、Ａ６４Ｖ、Ｄ２Ｎ、Ｇ１３Ｍ、Ｔ４０Ｓ、Ｓ７６Ｋ、Ｇ１７７Ｓ、Ｇ６３Ｑ、Ｓ１５Ｆ、Ａ８Ｋ、Ａ７０Ｇ、およびＡ３８Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２０】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｒ３５Ｅ、Ｒ３５Ｄ、Ｒ１４Ｅ、Ｒ１４Ｄ、Ｑ１６７Ｅ、Ｇ４９Ｃ、Ｓ１５Ｒ、Ｓ１５Ｈ、Ｉ１１Ｗ、Ｓ１５Ｃ、Ｇ４９Ｑ、Ｒ３５Ｑ、Ｒ３５Ｖ、Ｇ４９Ｅ、Ｒ１２３Ｄ、Ｒ１２３Ｙ、Ｇ４９Ｈ、Ａ３８Ｄ、Ｒ３５Ｓ、Ｆ４７Ｒ、Ｒ１２３Ｃ、Ｔ１５１Ｌ、Ｒ１４Ｔ、Ｒ３５Ｔ、Ｒ１２３Ｅ、Ｇ４９Ａ、Ｇ４９Ｖ、Ｄ５６Ｌ、Ｒ３５Ｎ、Ｒ３５Ａ、Ｇ１２Ｄ、Ｒ３５Ｃ、Ｒ１２３Ｎ、Ｔ４６Ｖ、Ｒ１２３Ｈ、Ｓ１５５Ｃ、Ｔ１２１Ｅ、Ｒ１２７Ｅ、Ｓ１１３Ｃ、Ｒ１２３Ｔ、Ｒ１６Ｅ、Ｔ４６Ｆ、Ｔ１２１Ｌ、Ａ３８Ｃ、Ｔ４６Ｅ、Ｒ１２３Ｗ、Ｔ４４Ｅ、Ｎ５５Ｇ、Ａ８Ｇ、Ｅ１１９Ｇ、Ｒ３５Ｐ、Ｒ１４Ｇ、Ｆ５９Ｗ、Ｒ１２７Ｓ、Ｒ６１Ｅ、Ｒ１４Ｓ、Ｓ１５５Ｗ、Ｒ１２３Ｆ、Ｒ１２３Ｓ、Ｇ４９Ｎ、Ｒ１２７Ｄ、Ｅ１１９Ｙ、Ａ４８Ｅ、Ｎ１７０Ｄ、Ｒ１５９Ｔ、Ｓ９９Ａ、Ｇ１２Ｑ、Ｐ１１８Ｒ、Ｆ１６５Ｗ、Ｒ１２７Ｑ、Ｒ３５Ｈ、Ｇ１２Ｎ、Ａ２２Ｃ、Ｇ１２Ｖ、Ｒ１６Ｔ、Ｙ５７Ｇ、Ｔ１００Ａ、Ｔ４６Ｙ、Ｒ１５９Ｅ、Ｅ１１９Ｒ、Ｔ１０７Ｒ、Ｔ１５１Ｃ、Ｇ５４Ｃ、Ｅ１１９Ｔ、Ｒ６１Ｖ、Ｉ１１Ｅ、Ｒ１４Ｉ、Ｒ６１Ｍ、Ｓ１５Ｅ、Ａ２２Ｓ、Ｒ１６Ｃ、Ｔ３６Ｃ、Ｒ１６Ｖ、Ｌ１２５Ｑ、Ｍ１８０Ｌ、Ｒ１２３Ｑ、Ｒ１４Ａ、Ｒ１４Ｑ、Ｒ３５Ｍ、Ｒ１２７Ｋ、Ｒ１５９Ｑ、Ｎ１１２Ｐ、Ｇ１２４Ｄ、Ｒ１７９Ｅ、Ｇ４９Ｌ、Ａ４１Ｄ、Ｇ１７７Ｄ、Ｒ１２３Ｖ、Ｅ１１９Ｖ、Ｔ１０Ｌ、Ｔ１０９Ｅ、Ｒ１７９Ｄ、Ｇ１２Ｓ、Ｔ１０Ｃ、Ｇ９１Ｑ、Ｓ１５Ｙ、Ｓ１５５Ｙ、Ｒ１４Ｃ、Ｔ１６３Ｄ、Ｔ１２１Ｆ、Ｒ１４Ｎ、Ｆ１６５Ｅ、Ｎ２４Ｅ、Ａ４１Ｃ、Ｒ６１Ｔ、Ｇ１２Ｉ、Ｐ１１８Ｋ、Ｔ４６Ｃ、Ｉ１１Ｔ、Ｒ１５９Ｄ、Ｎ１７０Ｃ、Ｒ１５９Ｖ、Ｓ１５５Ｉ、Ｉ１１Ｑ、Ｄ２Ｐ、Ｔ１００Ｒ、Ｒ１５９Ｓ、Ｓ１１４Ｃ、Ｒ１６Ｄ、およびＰ１３４Ｒからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２１】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｓ９９Ｇ、Ｔ１００Ｋ、Ｒ１２７Ａ、Ｆ１Ｐ、Ｓ１５５Ｖ、Ｔ１２８Ａ、Ｆ１６５Ｈ、Ｇ１７７Ｅ、Ａ７０Ｍ、Ｓ１４０Ｐ、Ａ８７Ｅ、Ｄ２Ｉ、Ｒ１５９Ｋ、Ｔ３６Ｖ、Ｒ１７９Ｃ、Ｅ１１９Ｎ、Ｔ１０Ｙ、Ｉ１７２Ａ、Ａ８Ｔ、Ｆ４７Ｖ、Ｗ１０３Ｌ、Ｒ６１Ｋ、Ｄ２Ｖ、Ｒ１７９Ｖ、Ｄ２Ｔ、Ｒ１５９Ｎ、Ｅ１１９Ａ、Ｇ５４Ｅ、Ｒ１６Ｑ、Ｇ４９Ｓ、Ｒ１６Ｉ、Ｓ５１Ｌ、Ｓ１５５Ｅ、Ｓ１５Ｍ、Ｒ１７９Ｉ、Ｔ１０Ｑ、Ｇ１２Ｈ、Ｒ１５９Ｃ、Ｒ１７９Ｔ、Ｔ１６３Ｃ、Ｒ１５９Ａ、Ａ１３２Ｓ、Ｎ１５７Ｄ、Ｇ１３Ｅ、Ｌ１４１Ｍ、Ａ４１Ｔ、Ｒ１２３Ｍ、Ｒ１４Ｍ、Ａ８Ｒ、Ｑ８１Ｐ、Ｎ２４Ｔ、Ｔ１０Ｄ、Ａ８８Ｆ、Ｒ６１Ｑ、Ｓ９９Ｋ、Ｒ１７９Ｙ、Ｔ１２１Ａ、Ｎ１１２Ｅ、Ｓ１５５Ｔ、Ｔ１５１Ｖ、Ｓ９９Ｑ、Ｔ１０Ｅ、Ｓ９２Ｔ、Ｔ１０９Ｋ、Ｔ４４Ｃ、Ｒ１２３Ａ、Ａ８７Ｃ、Ｓ１５Ｆ、Ｓ１５５Ｆ、Ｄ５６Ｆ、Ｔ１０Ｆ、Ａ８３Ｈ、Ｒ１７９Ｈ、Ｔ１２１Ｄ、Ｇ１３Ｄ、Ｐ１１８Ｃ、Ｇ４９Ｆ、Ｑ１７４Ｃ、Ｓ１１４Ｅ、Ｔ８６Ｅ、Ｆ１Ｎ、Ｔ１１５Ｃ、Ｒ１２７Ｃ、Ｒ１２３Ｋ、Ｖ６６Ｎ、Ｇ１２Ｙ、Ｓ１１３Ａ、Ｓ１５Ｎ、Ａ１７５Ｔ、Ｒ７９Ｔ、Ｒ１２３Ｇ、Ｒ１７９Ｓ、Ｒ１７９Ｎ、Ｒ１２３Ｉ、Ｐ１１８Ａ、Ｓ１８７Ｅ、Ｎ１１２Ｄ、Ａ７０Ｇ、Ｅ１１９Ｌ、Ｅ１１９Ｓ、Ｒ１５９Ｍ、Ｒ１４Ｈ、Ｒ１７９Ｆ、Ａ６４Ｃ、Ａ４１Ｓ、Ｒ１７９Ｗ、Ｎ２４Ｇ、Ｔ１００Ｑ、Ｐ１１８Ｗ、Ｑ８１Ｇ、Ｇ４９Ｋ、Ｒ１４Ｌ、Ｎ５５Ａ、Ｒ３５Ｋ、Ｒ７９Ｖ、Ｄ２Ｍ、Ｔ１６０Ｄ、Ａ８３Ｄ、Ｒ１７９Ｌ、Ｓ５１Ａ、Ｇ１２Ｐ、Ｓ９９Ｈ、Ｎ４２Ｄ、Ｓ１８８Ｅ、Ｔ１０Ｍ、Ｌ１２５Ｍ、Ｔ１１６Ｎ、Ａ７０Ｐ、Ｑ１７４Ｓ、Ｇ６５Ｄ、Ｓ１１３Ｄ、Ｅ１１９Ｑ、Ａ８３Ｅ、Ｎ１７０Ｌ、Ｑ８１Ａ、Ｓ５１Ｃ、Ｐ１１８Ｇ、Ｑ１７４Ｔ、Ｉ２８Ｖ、Ｓ１５Ｇ、およびＴ１１６Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２２】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｇ２６Ｉ、Ｇ２６Ｋ、Ｇ２６Ｑ、Ｇ２６Ｖ、Ｇ２６Ｗ、Ｆ２７Ｖ、Ｆ２７Ｗ、Ｉ２８Ｐ、Ｔ２９Ｅ、Ｔ１２９Ｗ、Ｔ４０Ｄ、Ｔ４０Ｑ、Ｒ４３Ｄ、Ｐ４３Ｈ、Ｐ４３Ｋ、Ｐ４３Ｌ、Ａ２２Ｃ、Ｔ４０Ｈ、Ｐ８９Ｗ、Ｇ９１Ｌ、Ｓ１８Ｅ、Ｆ５９Ｋ、Ａ３０Ｍ、Ａ３０Ｎ、Ｇ３１Ｍ、Ｃ３３Ｍ、Ｇ１６１Ｌ、Ｇ１６１Ｖ、Ｐ４３Ｎ、Ｇ２６Ｅ、Ｎ７３Ｐ、Ｇ８４Ｃ、Ｇ８４Ｐ、Ｇ４５Ｖ、Ｃ３３Ｌ、Ｙ９Ｅ、Ｙ９Ｐ、Ａ１４７Ｅ、Ｃ１５８Ｈ、Ｉ２８Ｗ、Ａ４８Ｐ、Ａ２２Ｓ、Ｔ６２Ｒ、Ｓ１３７Ｒ、Ｓ１５５Ｐ、Ｓ１５５Ｒ、Ｇ１５６Ｉ、Ｇ１５６Ｌ、Ｑ８１Ａ、Ｒ９６Ｃ、Ｉ４Ｄ、Ｉ４Ｐ、Ａ７０Ｐ、Ｃ１０５Ｅ、Ｃ１０５Ｇ、Ｃ１０５Ｋ、Ｃ１０５Ｍ、Ｃ１０５Ｎ、Ｃ１０５Ｓ、Ｔ１２８Ａ、Ｔ１２８Ｖ、Ｔ１２８Ｇ、Ｓ１４０Ｐ、Ｇ１２Ｄ、Ｃ３３Ｎ、Ｃ３３Ｅ、Ｔ１６４Ｇ、Ｇ４５Ａ、Ｇ１５６Ｐ、Ｓ９９Ａ、Ｑ１６７Ｌ、Ｓ１５５Ｗ、Ｉ２８Ｔ、Ｒ９６Ｆ、Ａ３０Ｐ、Ｒ１２３Ｗ、Ｔ４０Ｐ、Ｔ３９Ｒ、Ｃ１０５Ｐ、Ｔ１００Ａ、Ｃ１０５Ｗ、Ｓ１５５Ｋ、Ｔ４６Ｙ、Ｒ１２３Ｆ、Ｉ４Ｇ、Ｓ１５５Ｙ、Ｔ４６Ｖ、Ａ９３Ｓ、Ｙ５７Ｎ、Ｑ８１Ｓ、Ｇ１８６Ｓ、Ｇ３１Ｈ、Ｔ１０Ｙ、Ｇ３１Ｖ、Ａ８３Ｈ、Ａ３８Ｄ、Ｒ１２３Ｙ、Ｒ７９Ｔ、Ｃ１５８Ｇ、Ｇ３１Ｙ、Ｑ８１Ｐ、Ｒ９６Ｅ、Ａ３０Ｙ、Ｒ１５９Ｋ、Ａ２２Ｔ、Ｔ４０Ｎ、Ｙ５７Ｍ、Ｇ３１Ｎ、Ｑ８１Ｇ、Ｔ１６４Ｌ、Ｔ１２１Ｅ、Ｔ１０Ｆ、Ｑ１４６Ｐ、Ｒ１２３Ｎ、Ｖ３Ｒ、Ｐ４３Ｇ、Ｑ８１Ｈ、Ｑ８１Ｄ、Ｇ１６１Ｉ、Ｃ１５８Ｍ、Ｎ２４Ｔ、Ｔ１０Ｗ、Ｔ１２８Ｓ、Ｔ１６０Ｉ、Ｙ１７６Ｐ、Ｓ１５５Ｆ、Ｔ１２８Ｃ、Ｌ１２５Ａ、Ｐ１６８Ｙ、Ｔ６２Ｇ、Ｆ１６６Ｓ、Ｓ１８８Ａ、Ｑ８１Ｆ、Ｔ４６Ｗ、Ａ７０Ｇ、およびＡ３８Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２３】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｓ１８８Ｅ、Ｓ１８８Ｖ、Ｙ１１７Ｋ、Ｙ１１７Ｑ、Ｙ１１７Ｒ、Ｙ１１７Ｖ、Ｒ１２７Ｋ、Ｒ１２７Ｑ、Ｒ１２３Ｌ、Ｔ８６Ｓ、Ｒ１２３Ｉ、Ｑ８１Ｅ、Ｌ１２５Ｍ、Ｈ３２Ａ、Ｓ１８８Ｔ、Ｎ７４Ｆ、Ｃ３３Ｄ、Ｆ２７Ｉ、Ａ８３Ｍ、Ｑ７１Ｙ、Ｒ１２３Ｔ、Ｖ９０Ａ、Ｆ５９Ｗ、Ｌ１４１Ｃ、Ｎ１７０Ｅ、Ｔ４６Ｆ、Ｓ５１Ｖ、Ｇ１６２Ｐ、Ｓ１８５Ｒ、Ａ４１Ｓ、Ｒ７９Ｖ、Ｔ１５１Ｃ、Ｔ１０７Ｓ、Ｔ１２９Ｙ、Ｍ１８０Ｌ、Ｆ１６６Ｃ、Ｃ１０５Ｔ、Ｔ１６０Ｅ、Ｐ８９Ａ、Ｒ１５９Ｔ、Ｔ１８３Ｐ、Ｓ１８８Ｍ、Ｔ１０Ｌ、Ｇ２５Ｓ、Ｎ２４Ｓ、Ｅ１１９Ｌ、Ｔ１０７Ｌ、Ｔ１０７Ｑ、Ｇ１６１Ｋ、Ｇ１５Ｑ、Ｓ１５Ｒ、Ｇ１５３Ｋ、Ｇ１５３Ｖ、Ｓ１８８Ｇ、Ａ８３Ｅ、Ｇ１８６Ｐ、Ｔ１２１Ｄ、Ｇ４９Ａ、Ｓ１５Ｃ、Ｃ１０５Ｙ、Ｃ１０５Ａ、Ｒ１２７Ｆ、Ｑ７１Ａ、Ｔ１０Ｃ、Ｒ１７９Ｋ、Ｔ８６Ｉ、Ｗ１０３Ｎ、Ａ８７Ｓ、Ｆ１６６Ａ、Ａ８３Ｆ、Ｒ１２３Ｑ、Ａ１３２Ｃ、Ａ１４３Ｈ、Ｔ１６３Ｉ、Ｔ３９Ｖ、Ａ９３Ｄ、Ｖ９０Ｍ、Ｒ１２３Ｋ、Ｐ１３４Ｗ、Ｇ１７７Ｎ、Ｖ１１５Ｉ、Ｓ１５５Ｔ、Ｔ１１０Ｄ、Ｇ１０５Ｌ、Ｎ１７０Ｄ、Ｔ１０７Ａ、Ｇ８４Ｖ、Ｇ８４Ｍ、Ｌ１１１Ｋ、Ｐ１６８Ｉ、Ｇ１５４Ｌ、Ｔ１８３Ｉ、Ｓ９９Ｇ、Ｓ１５Ｔ、Ａ８Ｇ、Ｓ１５Ｎ、Ｐ１８９Ｓ、Ｓ１８８Ｃ、Ｔ１００Ｑ、Ａ１１０Ｇ、Ａ１２１Ａ、Ｇ１２Ａ、Ｒ１５９Ｖ、Ｇ３１Ａ、Ｇ１５４Ｒ、Ｔ１８２Ｌ、Ｖ１１５Ｌ、Ｔ１６０Ｑ、Ｔ１０７Ｆ、Ｒ１５９Ｑ、Ｇ１４４Ａ、Ｓ９２Ｔ、Ｔ１０１Ｓ、Ａ８３Ｒ、Ｇ１２ＨＭ、Ｓ１５Ｈ、Ｔ１１６Ｑ、Ｔ３６Ｖ、Ｇ１５４、Ｑ８１Ｃ、Ｖ１３０Ｔ、Ｔ１８３Ａ、Ｐ１１８Ｔ、Ａ８７Ｅ、Ｔ８６Ｍ、Ｖ１５０Ｎ、およびＮ２４Ｅからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２４】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｔ３６Ｉ、Ｉ１７２Ｔ、Ｎ２４Ｅ、Ｎ１７０Ｙ、Ｇ７７Ｔ、Ｇ１８６Ｎ、Ｉ１８１Ｌ、Ｎ７３Ｔ、Ａ３８Ｒ、Ｎ７４Ｇ、Ｎ２４Ａ、Ｇ５４Ｄ、Ｓ７６Ｄ、Ｒ１２３Ｅ、１５９Ｅ、Ｎ１１２Ｅ、Ｒ３５Ｅ、Ｒ１７９Ｖ、Ｒ１２３Ｄ、Ｎ２４Ｔ、Ｒ１７９Ｔ、Ｒ１４Ｌ、Ａ３８Ｄ、Ｖ９０Ｐ、Ｒ１４Ｑ、Ｒ１２３Ｉ、Ｒ１７９Ｄ、Ｓ７６Ｖ、Ｒ７９Ｇ、Ｒ３５Ｌ、Ｓ７６Ｅ、Ｓ７６Ｙ、Ｒ７９Ｄ、Ｒ７９Ｐ、Ｒ３５Ｑ、Ｒ１７９Ｎ、Ｎ１１２Ｄ、Ｒ１７９Ｅ、Ｇ６５Ｐ、Ｙ７５Ｇ、Ｖ９０Ｓ、Ｒ１７９Ｍ、Ｒ３５Ｆ、Ｒ１２３Ｆ、Ａ６４Ｉ、Ｎ２４Ｑ、Ｒ１４Ｉ、Ｒ１７９Ａ、Ｒ１２７Ａ、Ｒ１７９Ｉ、Ｎ１７０Ｄ、Ｒ３５Ａ、Ｒ１５９Ｆ、Ｔ１０９Ｅ、Ｒ１４Ｄ、Ｎ６７Ｄ、Ｇ４９Ａ、Ｎ１１２Ｑ、Ｇ７８Ｄ、Ｔ１２１Ｅ、Ｌ６９Ｓ、Ｔ１１６Ｅ、Ｖ９０Ｉ、Ｔ３６Ｓ、Ｔ３６Ｇ、ｎ１４５Ｅ、Ｔ８６Ｄ、Ｓ５１Ｄ、Ｒ１７９Ｋ、Ｔ１０７Ｅ、Ｔ１２９Ｓ、Ｌ１４２Ｖ、Ｒ７９Ａ、Ｒ７９Ｅ、Ａ３８Ｈ、Ｔ１０７Ｓ、Ｒ１２３Ａ、Ｎ５５Ｅ、Ｒ１２３Ｌ、Ｒ１５９Ｎ、Ｇ６５Ｄ、Ｒ１４Ｎ、Ｇ６５Ｑ、Ｒ１２３Ｑ、Ｎ２４Ｖ、Ｒ１４Ｇ、Ｔ１１６Ｑ、Ａ３８Ｎ、Ｒ１５９Ｑ、Ｒ１７９Ｙ、Ａ８３Ｅ、Ｎ１１２Ｌ、Ｓ９９Ｎ、Ｇ７８Ａ、Ｔ１０Ｎ、Ｈ８５Ｑ、Ｒ３５Ｑ、Ｎ２４Ｌ、Ｎ２４Ｈ、Ｇ４９Ｓ、Ｒ７９Ｌ、Ｓ７６Ｔ、Ｓ７６Ｌ、Ｇ６５Ｓ、Ｎ５５Ｆ、Ｒ７９Ｖ、Ｇ６５Ｔ、Ｒ１２３Ｎ、Ｔ８６Ｅ、Ｙ７５Ｆ、Ｆ１Ｔ、Ｓ７６Ｎ、Ｓ９９Ｖ、Ｒ７９Ｔ、Ｎ１１２Ｖ、Ｒ７９Ｍ、Ｔ１０７Ｖ、Ｒ７９Ｓ、Ｇ５４Ｅ、Ｇ６５Ｖ、Ｒ１２７Ｑ、Ｒ１５９Ｄ、Ｔ１０７Ｈ、Ｈ８５Ｔ、Ｒ３５Ｔ、Ｔ３６Ｎ、Ｑ８１Ｅ、Ｒ１２３Ｈ、Ｓ７６Ｉ、Ａ３８Ｆ、Ｖ９０Ｔ、およびＲ１４Ｔからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２５】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｇ６５Ｌ、Ｓ９９Ｄ、Ｔ１０７Ｍ、Ｓ１１３Ｔ、Ｓ９９Ｔ、Ｇ７７Ｓ、Ｒ１４Ｍ、Ａ６４Ｎ、Ｒ６１Ｍ、Ａ７０Ｄ、Ｑ７１Ｇ、Ａ９３Ｄ、Ｓ９２Ｇ、Ｎ１１２Ｙ、Ｓ１５Ｗ、Ｒ１５９Ｋ、Ｎ６７Ｇ、Ｔ１０Ｅ、Ｒ１２７Ｈ、Ａ６４Ｙ、Ｒ１５９Ｃ、Ａ３８Ｌ、Ｔ１６０Ｅ、Ｔ１８３Ｅ、Ｒ１２７Ｓ、Ａ８Ｅ、Ｓ５１Ｑ、Ｎ７Ｌ、Ｇ６３Ｄ、Ａ３８Ｓ、Ｒ３５Ｈ、Ｒ１４Ｋ、Ｔ１０７Ｉ、Ｇ１２Ｄ、Ａ６４Ｌ、Ｓ７６Ｗ、Ａ４１Ｎ、Ｒ３５Ｍ、Ａ６４Ｖ、Ａ３８Ｙ、Ｔ１８３Ｉ、Ｗ１０３Ｍ、Ａ４１Ｄ、Ｒ１２７Ｋ、Ｔ３６Ｄ、Ｒ６１Ｔ、Ｇ６５Ｙ、Ｇ１３Ｓ、Ｒ３５Ｙ、Ｒ１２３Ｔ、Ａ６４Ｈ、Ｇ４９Ｈ、Ａ７０Ｈ、Ａ６４Ｆ、Ｒ１２７Ｙ、Ｒ６１Ｅ、Ａ６４Ｐ、Ｔ１２１Ｄ、Ｖ１１５Ａ、Ｒ１２３Ｙ、Ｔ１０１Ｓ、Ｔ１８２Ｖ、Ｈ８５Ｌ、Ｎ２４Ｍ、Ｒ１２７Ｅ、Ｎ１４５Ｄ、Ｑ７１Ｈ、Ｓ７６Ｑ、Ａ６４Ｔ、Ｇ４９Ｆ、Ａ６４Ｑ、Ｔ１０Ｄ、Ｆ１Ｄ、Ａ７０Ｇ、Ｒ３５Ｗ、Ｑ７１Ｄ、Ｎ１２１Ｉ、Ａ６４Ｍ、Ｔ３６Ｈ、Ａ８Ｇ、Ｔ１０７Ｎ、Ｒ３５Ｓ、Ｎ６７Ｔ、Ｓ９２Ａ、Ｎ１７０Ｌ、Ｎ６７Ｅ、Ｓ１１４Ａ、Ｒ１４Ａ、Ｒ１４Ｓ、Ｑ８１Ｄ、Ｓ５１Ｈ、Ｒ１２３Ｓ、Ａ９３Ｓ、Ｒ１２７Ｆ、Ｉ１９Ｖ、Ｔ４０Ｖ、Ｓ１８５Ｎ、Ｒ１２３Ｇ、Ｒ１７９Ｌ、Ｓ５１Ｖ、Ｔ１６３Ｄ、Ｔ１０９Ｉ、Ａ６４Ｓ、Ｖ７２Ｉ、Ｎ６７Ｓ、Ｒ１５９Ｓ、Ｈ８５Ｍ、Ｔ１０９Ｇ、Ｑ７１Ｓ、Ｒ６１Ｈ、Ｔ１０７Ａ、Ｑ８１Ｖ、Ｖ９０Ｎ、Ｔ１０９Ａ、Ａ３８Ｔ、Ｎ１４５Ｔ、Ｒ１５９Ａ、Ａ１１０Ｓ、Ｑ８１Ｈ、Ａ４８Ｅ、Ｓ５１Ｔ、Ａ６４Ｗ、Ｒ１５９Ｌ、Ｎ６７Ｈ、Ａ９３Ｅ、Ｔ１１６Ｆ、Ｒ６１Ｓ、Ｒ１２３Ｖ、Ｖ３Ｌ、およびＲ１５９Ｙからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２６】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｔ３６Ｉ、Ｐ８９Ｄ、Ａ９３Ｔ、Ａ９３Ｓ、Ｔ３６Ｎ、Ｎ７３Ｔ、Ｔ３６Ｇ、Ｒ１５９Ｆ、Ｔ３６Ｓ、Ａ３８Ｒ、Ｓ９９Ｗ、Ｓ７６Ｗ、Ｔ３６Ｐ、Ｇ７７Ｔ、Ｇ５４Ｄ、Ｒ１２７Ａ、Ｒ１５９Ｅ、Ｈ８５Ｑ、Ｔ３６Ｄ、Ｓ７６Ｌ、Ｓ９９Ｎ、Ｙ７５Ｇ、Ｓ７６Ｙ、Ｒ１２７Ｓ、Ｎ２４Ｅ、Ｒ１２７Ｑ、Ｄ１８４Ｆ、Ｎ１７０Ｙ、Ｎ２４Ａ、Ｓ７６Ｔ、Ｈ８５Ｌ、Ｙ７５Ｆ、Ｓ７６Ｖ、Ｌ６９Ｓ、Ｒ１５９Ｋ、Ｒ１２７Ｋ、Ｇ６５Ｐ、Ｎ７４Ｇ、Ｒ１５９Ｈ、Ｇ６５Ｑ、Ｇ１８６Ｖ、Ａ４８Ｑ、Ｔ３６Ｈ、Ｎ６７Ｌ、Ｒ１４Ｉ、Ｒ１２７Ｌ、Ｔ３６Ｙ、Ｓ７６Ｉ、Ｓ１１４Ｇ、Ｒ１２７Ｈ、Ｓ１８７Ｐ、Ｖ３Ｌ、Ｇ７８Ｄ、Ｒ１２３Ｉ、Ｉ１８１Ｑ、Ｒ３５Ｆ、Ｈ８５Ｒ、Ｒ１２７Ｙ、Ｎ６７Ｓ、Ｑ８１Ｐ、Ｒ１２３Ｆ、Ｒ１５９Ｎ、Ｓ９９Ａ、Ｓ７６Ｄ、Ａ１３２Ｖ、Ｒ１２７Ｆ、Ａ１４３Ｎ、Ｓ９２Ａ、Ｎ２４Ｔ、Ｒ７９Ｐ、Ｓ７６Ｎ、Ｒ１４Ｍ、Ｇ１８６Ｅ、Ｎ２４Ｑ、Ｎ６７Ａ、Ｒ１２７Ｔ、Ｈ８５Ｋ、Ｇ６５Ｔ、Ｇ６５Ｙ、Ｒ１７９Ｖ、Ｙ７５Ｉ、Ｉ１１Ｑ、Ａ３８Ｌ、Ｔ３６Ｌ、Ｒ１５９Ｙ、Ｒ１５９Ｄ、Ｎ２４Ｖ、Ｇ６５Ｓ、Ｎ１５７Ｄ、Ｇ１８６Ｉ、Ｇ５４Ｑ、Ｎ６７Ｙ、Ｒ１２７Ｇ、Ｓ７６Ａ、Ａ３８Ｓ、Ｔ１０９Ｅ、Ｖ６６Ｈ、Ｔ１１６Ｆ、Ｒ１２３Ｌ、Ｇ４９Ａ、Ａ６４Ｈ、Ｔ３６Ｗ、Ｄ１８４Ｈ、Ｓ９９Ｄ、Ｇ１６１Ｋ、Ｐ１３４Ｅ、Ａ６４Ｆ、Ｎ６７Ｇ、Ｓ９９Ｔ、Ｄ２Ｑ、Ｓ７６Ｅ、Ｒ１６Ｑ、Ｇ５４Ｎ、Ｎ６７Ｖ、Ｒ３５Ｌ、Ｑ７１Ｉ、Ｎ７Ｌ、Ｎ１１２Ｅ、Ｌ６９Ｈ、Ｎ２４Ｈ、Ｇ５４Ｉ、Ｒ１６Ｌ、Ｎ２４Ｍ、Ａ６４Ｙ、Ｓ１１３Ａ、Ｈ８５Ｆ、Ｒ７９Ｇ、Ｉ１１Ａ、Ｔ１２１Ｄ、Ｒ６１Ｖ、およびＧ６５Ｌからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２７】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｎ６７Ｑ、Ｓ１８７Ｑ、Ｑ７１Ｈ、Ｔ１６３Ｄ、Ｒ６１Ｋ、Ｒ１５９Ｖ、Ｑ７１Ｆ、Ｖ３１Ｆ、Ｖ９０Ｉ、Ｒ７９Ｄ、Ｔ１６０Ｅ、Ｒ１２３Ｑ、Ａ３８Ｙ、Ｓ１１３Ｇ、Ａ８８Ｆ、Ａ７０Ｇ、Ｉ１１Ｔ、Ｇ７８Ａ、Ｎ２４Ｌ、Ｓ９２Ｇ、Ｒ１４Ｌ、Ｄ１８４Ｒ、Ｇ５４Ｌ、Ｎ１１２Ｌ、Ｈ８５Ｙ、Ｒ１６Ｎ、Ｇ７７Ｓ、Ｒ１７９Ｔ、Ｖ８０Ｌ、Ｇ６５Ｖ、Ｔ１２１Ｅ、Ｑ７１Ｄ、Ｒ１６Ｇ、Ｐ８９Ｎ、Ｎ４２Ｈ、Ｇ４９Ｆ、Ｉ１１Ｓ、Ｒ６１Ｍ、Ｒ１５９Ｃ、Ｇ６５Ｒ、Ｔ１８３Ｉ、Ａ９３Ｄ、Ｌ１１１Ｅ、Ｓ５１Ｑ、Ｇ７８Ｎ、Ｎ６７Ｔ、Ａ３８Ｎ、Ｔ４０Ｖ、Ａ６４Ｗ、Ｒ１５９Ｌ、Ｔ１０Ｅ、Ｒ１７９Ｋ、Ｒ１２３Ｅ、Ｖ９０Ｐ、Ａ６４Ｎ、Ｇ１６１Ｅ、Ｈ８５Ｔ、Ａ８Ｇ、Ｌ１４２Ｖ、Ａ４１Ｎ、Ｓ１８５Ｉ、Ｑ７１Ｌ、Ａ６４Ｔ、Ｒ１６Ｉ、Ａ３８Ｄ、Ｇ５４Ｍ、Ｎ１１２Ｑ、Ｒ１６Ａ、Ｒ１４Ｅ、Ｖ８０Ｈ、Ｎ１７０Ｄ、Ｓ９９Ｇ、Ｒ１７９Ｎ、Ｓ１５Ｅ、Ｇ４９Ｈ、Ａ７０Ｐ、Ａ６４Ｓ、Ｇ５４Ａ、Ｓ１８５Ｗ、Ｒ６１Ｈ、Ｔ１０Ｑ、Ａ３８Ｆ、Ｎ１７０Ｌ、Ｔ１０Ｌ、Ｎ６７Ｆ、Ｇ１２Ｄ、Ｄ１８４Ｔ、Ｒ１４Ｎ、Ｓ１８７Ｅ、Ｒ１４Ｐ、Ｎ１１２Ｄ、Ｓ１４０Ａ、Ｎ１１２Ｇ、Ｇ４９Ｓ、Ｌ１１１Ｄ、Ｎ６７Ｍ、Ｖ１５０Ｌ、Ｇ１２Ｙ、Ｒ１２３Ｋ、Ｐ８９Ｖ、Ｖ６６Ｄ、Ｇ７７Ｎ、Ｓ５１Ｔ、Ａ８Ｄ、Ｉ１８１Ｈ、Ｔ８６Ｎ、Ｒ１７９Ｄ、Ｎ５５Ｆ、Ｎ２４Ｓ、Ｄ１８４Ｌ、Ｒ６１Ｓ、Ｎ６７Ｋ、Ｇ１８６Ｌ、Ｆ１Ｔ、Ｒ１５９Ａ、Ｉ１１Ｌ、Ｒ６１Ｔ、Ｄ１８４Ｑ、Ａ９３Ｅ、Ｑ７１Ｔ、Ｒ１７９Ｅ、Ｌ６９Ｗ、Ｔ１６３Ｉ、Ｓ１８８Ｑ、Ｌ１２５Ｖ、Ａ３８Ｖ、Ｒ３５Ａ、Ｐ１３４Ｇ、Ａ６４Ｖ、Ｎ１４５Ｄ、Ｖ９０Ｔ、およびＡ１４３Ｓからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２８】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｔ３６Ｉ、Ｎ１７０Ｙ、Ａ３８Ｒ、Ｒ７９Ｐ、Ｇ７７Ｔ、Ｌ６９Ｓ、Ｎ７３Ｔ、Ｓ７６Ｖ、Ｓ７６Ｙ、Ｒ１７９Ｖ、Ｔ３６Ｎ、Ｎ５５Ｆ、Ｒ１５９Ｆ、Ｇ５４Ｄ、Ｇ６５Ｐ、Ｌ６９Ｈ、Ｔ３６Ｇ、Ｇ１７７Ｍ、Ｎ２４Ｅ、Ｎ７４Ｇ、Ｒ１５９Ｅ、Ｔ３６Ｓ、Ｙ７５Ｇ、Ｓ７６Ｉ、Ｓ７６Ｄ、Ａ８Ｒ、Ａ２４Ａ、Ｖ９０Ｐ、Ｒ１５９Ｃ、Ｇ６５Ｑ、Ｔ１２１Ｅ、Ａ８Ｖ、Ｓ７６Ｌ、Ｔ１０９Ｅ、Ｒ１７９Ｍ、Ａ８Ｔ、Ｔ１０７Ｎ、Ｇ１８６Ｅ、Ｓ７６Ｗ、Ｒ１２３Ｅ、Ａ３８Ｆ、Ｔ３６Ｐ、Ｎ６７Ｇ、Ｙ７５Ｆ、Ｓ７６Ｎ、Ｒ１７９Ｉ、Ｓ１８７Ｐ、Ｎ６７Ｖ、Ｖ９０Ｓ、Ｒ１２７Ａ、Ｒ１７９Ｙ、Ｒ３５Ｆ、Ｎ１４５Ｓ、Ｇ６５Ｓ、Ｒ６１Ｍ、Ｓ５１Ａ、Ｒ１７９Ｎ、Ｒ１２３Ｄ、Ｎ２４Ｔ、Ｎ５５Ｅ、Ｒ７９Ｃ、Ｇ１８６Ｖ、Ｒ１２３Ｉ、Ｇ１６１Ｅ、Ｇ６５Ｙ、Ａ３８Ｓ、Ｒ１４Ｌ、Ｖ９０Ｉ、Ｒ７９Ｇ、Ｎ１４５Ｅ、Ｎ６７Ｌ、Ｒ１２７Ｓ、Ｒ１５０Ｙ、Ｍ１８０Ｄ、Ｎ６７Ｔ、Ａ９３Ｄ、Ｔ１２１Ｄ、Ｑ８１Ｖ、Ｔ１０９Ｉ、Ａ９３Ｅ、Ｔ１０７Ｓ、Ｒ１７９Ｔ、Ｒ１７９Ｌ、Ｒ１７９Ｋ、Ｒ１５９Ｄ、Ｒ１７９Ａ、Ｒ７９Ｅ、Ｒ１２３Ｆ、Ｒ７９Ｄ、Ｔ３６Ｄ、Ａ６４Ｎ、Ｌ１４２Ｖ、Ｔ１０９Ａ、Ｉ１７２Ｖ、Ａ８３Ｎ、Ｔ８５Ａ、Ｒ１７９Ｄ、Ａ３８Ｌ、Ｉ１２６Ｌ、Ｒ１２７Ｑ、Ｒ１２７Ｌ、Ｌ６９Ｗ、Ｒ１２７Ｋ、Ｇ６５Ｔ、Ｒ１２７Ｈ、Ｐ１３４Ａ、Ｎ６７Ｄ、Ｒ１４Ｍ、Ｎ２４Ｑ、Ａ１４３Ｎ、Ｎ５５Ｓ、Ｎ６７Ｍ、Ｓ５１Ｄ、Ｓ７６Ｅ、Ｔ１６３Ｄ、Ａ３８Ｄ、Ｒ１５９Ｋ、Ｔ１８３Ｉ、Ｇ６３Ｖ、Ａ８Ｓ、Ｔ１０７Ｍ、Ｈ８５Ｑ、Ｎ１１２Ｅ、Ｎ６７Ｆ、Ｎ６７Ｓ、Ａ６４Ｈ、Ｔ８６Ｉ、Ｐ１３４Ｅ、Ｔ１８２Ｖ、Ｎ６７Ｙ、Ａ６４Ｓ、Ｇ７８Ｄ、Ｖ９０Ｔ、Ｒ６１Ｔ、Ｒ１６Ｑ、Ｇ６５Ｒ、Ｔ８６Ｌ、Ｖ９０Ｎ、Ｒ１５９Ｑ、Ｇ５４Ｉ、Ｓ７６Ｃ、Ｒ１７９Ｅ、Ｖ６６Ｄ、Ｌ６９Ｖ、Ｒ１２７Ｙ、Ｒ３５Ｌ、Ｒ１４Ｅ、およびＴ８６Ｆからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項２９】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｇ１８６Ｉ、Ａ６４Ｑ、Ｔ１０９Ｇ、Ｇ６４Ｌ、Ｎ２４Ｌ、Ａ８Ｅ、Ｎ１１２Ｄ、Ａ３８Ｈ、Ｒ１７９Ｗ、Ｓ１１４Ｇ、Ｒ１２３Ｌ、Ａ８Ｌ、Ｔ１２９Ｓ、Ｎ１７０Ｄ、Ｒ１５９Ｎ、Ｎ６７Ｃ、Ｓ９２Ｃ、Ｔ１０７Ａ、Ｇ５４Ｅ、Ｔ１０７Ｅ、Ｔ３６Ｖ、Ｒ１２７Ｔ、Ａ８Ｎ、Ｈ８５Ｌ、Ａ１１０Ｓ、Ｎ１７０Ｃ、Ａ６４Ｒ、Ａ１３２Ｖ、Ｔ３６Ｙ、Ｇ６３Ｄ、Ｗ１０３Ｍ、Ｔ１５１Ｖ、Ｒ１２３Ｐ、Ｗ１０３Ｙ、Ｓ７６Ｔ、Ｓ１８７Ｔ、Ｒ１２７Ｆ、Ｎ６７Ａ、Ｐ１７１Ｍ、Ａ７０Ｓ、Ｒ１５９Ｈ、Ｓ７６Ｑ、Ｌ１２５Ｖ、Ｇ５４Ｑ、Ｇ４９Ｌ、Ｒ１４Ｉ、Ｒ１４Ｑ、Ａ８３Ｉ、Ｖ９０Ｌ、Ｔ１８３Ｅ、Ｒ１５９Ａ、Ｔ１０１Ｓ、Ｇ６５Ｄ、Ｇ５４Ａ、Ｔ１０７Ｑ、Ｑ７１Ｍ、Ｔ８６Ｅ、Ｎ２４Ｍ、Ｎ５５Ｑ、Ｒ６１Ｖ、Ｐ１３４Ｄ、Ｒ９６Ｋ、Ａ８８Ｆ、Ｎ１４５Ｑ、Ａ６４Ｍ、Ａ６４Ｔ、Ｎ２４Ｖ、Ｓ１４０Ａ、Ａ８Ｈ、Ａ６４Ｉ、Ｒ１２３Ｑ、Ｔ１８３Ｑ、Ｎ２４Ｈ、Ａ６４Ｗ、Ｔ６２Ｉ、Ｔ１２９Ｇ、Ｒ３５Ａ、Ｔ４０Ｖ、Ｉ１１Ｔ、Ａ３８Ｎ、Ｎ１４５Ｇ、Ａ１７５Ｔ、Ｇ７７Ｑ、Ｔ１０９Ｈ、Ａ８Ｐ、Ｒ３５Ｅ、Ｔ１０９Ｎ、Ａ１１０Ｔ、Ｎ６７Ｑ、Ｇ６３Ｐ、Ｈ８５Ｒ、Ｓ９２Ｇ、Ａ１７５Ｖ、Ｓ５１Ｑ、Ｇ６３Ｑ、Ｔ１１６Ｆ、Ｇ６５Ａ、Ｒ７９Ｌ、Ｎ１４５Ｐ、Ｌ６９Ｑ、Ｑ１４６Ｄ、Ａ８３Ｄ、Ｆ１６６Ｙ、Ｒ１２３Ａ、Ｔ１２１Ｌ、Ｒ１２３Ｈ、Ａ７０Ｐ、Ｔ１８２Ｗ、Ｓ７６Ａ、Ａ６４Ｆ、Ｔ１０７Ｈ、Ｇ１８６Ｌ、Ｑ８１Ｉ、Ｒ１２３Ｋ、Ａ６４Ｌ、Ｎ６７Ｒ、Ｖ３Ｌ、Ｓ１８７Ｅ、Ｓ１６１Ｋ、Ｔ８６Ｍ、Ｉ４Ｍ、Ｇ７７Ｎ、Ｇ４９Ａ、Ａ４１Ｎ、Ｇ５４Ｍ、Ｔ１０７Ｖ、Ｑ８１Ｅ、Ａ３８Ｉ、Ｔ１０９Ｌ、Ｔ１８３Ｋ、Ａ７０Ｇ、Ｑ７１Ｄ、Ｔ１８３Ｌ、Ｑ８１Ｈ、Ａ６４Ｖ、Ａ９３Ｑ、Ｓ１８８Ｅ、Ｓ５１Ｆ、Ｇ１８６Ｐ、Ｇ１８６Ｔ、Ｒ１５９Ｌ、Ｐ１３４Ｇ、Ｎ１４５Ｔ、Ｎ５５Ｖ、Ｖ６６Ｅ、Ｒ１５９Ｖ、Ｙ１７６Ｌ、およびＲ１６Ｌからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３０】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｔ３６Ｉ、Ｎ７３Ｔ、Ｐ１３４Ｒ、Ｇ７７Ｔ、Ｎ２４Ｅ、Ｐ１３４Ｅ、Ｐ１３４Ｌ、Ｎ２４Ｔ、１５９Ｆ、Ｌ６９Ｓ、Ｔ１０Ｇ、Ｇ１８６Ｓ、Ｓ１４０Ａ、Ｔ３６Ｓ、Ｎ１１２Ｓ、Ｎ２４Ｑ、Ｔ３６Ｇ、Ｐ１３４Ｈ、Ｇ３４Ａ、Ｎ２４Ａ、Ａ３８Ｔ、Ｅ１１９Ｒ、Ｇ１８６Ｅ、Ｒ１４Ｍ、Ｓ７６Ｗ、Ｔ１０Ａ、Ａ３８Ｆ、Ｌ１４２Ｖ、Ｎ１７０Ｙ、Ｐ１３４Ｖ、Ａ２２Ｖ、Ｓ７６Ｖ、Ｔ１８２Ｖ、Ｓ７６Ｙ、Ｉ１１Ａ、Ｉ１１Ｓ、Ｓ１１８Ａ、Ｇ１８６Ｖ、Ｌ６９Ｈ、Ｉ１１Ｔ、Ｔ３６Ｎ、Ｇ６５Ｖ、Ｇ４９Ｆ、Ｖ９０Ｉ、Ｒ１７９Ｖ、Ｒ１６Ｋ、Ｔ１６３Ｉ、Ｒ１２７Ｆ、Ｒ１５９Ｋ、Ｎ２４Ｌ、Ｑ７１Ｉ、Ｓ１５Ｇ、Ｓ１５Ｆ、Ｒ１４Ｇ、Ｓ９９Ｎ、Ｔ１０Ｌ、Ｓ１５Ｅ、Ｔ１０７Ｒ、Ｆ１６６Ｙ、Ｇ４９Ａ、Ｖ９０Ｐ、Ｐ１３４Ｄ、Ｑ１６７Ｎ、Ｓ７６Ｄ、Ｓ５１Ａ、Ｖ８０Ａ、Ｖ１５０Ｌ、Ｎ７４Ｇ、Ｔ１０７Ｋ、Ｓ７６Ｌ、Ｎ２４Ｖ、Ｇ１２Ｉ、Ｓ９９Ｖ、およびＲ１６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの置換を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３１】
前記プロテアーゼのアミノ酸が、Ａｒｇ１４、Ｓｅｒ１５、Ａｒｇ１６、Ｃｙｓ１７、Ｈｉｓ３２、Ｃｙｓ３３、Ｐｈｅ５２、Ａｓｐ５６、Ｔｈｒ１００、Ｖａｌ１１５、Ｔｈｒ１１６、Ｔｙｒ１１７、Ｐｒｏ１１８、Ｇｌｕ１１９、Ａｌａ１３２、Ｇｌｕ１３３、Ｐｒｏ１３４、Ｇｌｙ１３５、Ａｓｐ１３６、Ｓｅｒ１３７、Ｔｈｒ１５１、Ｓｅｒ１５２、Ｇｌｙ１５３、Ｇｌｙ１５４、Ｓｅｒ１５５、Ｇｌｙ１５６、Ａｓｎ１５７、Ｔｈｒ１６４、およびＰｈｅ１６５を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３２】
前記プロテアーゼの触媒トリアッドがＨｉｓ３２、Ａｓｐ５６、およびＳｅｒ１３７を含むことを特徴とする請求項３１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３３】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｃｙｓ１３１、Ａｌａ１３２、Ｇｌｕ１３３、Ｐｒｏ１３４、Ｇｌｙ１３５、Ｔｈｒ１５１、Ｓｅｒ１５２、Ｇｌｙ１５３、Ｇｌｙ１５４、Ｓｅｒ１５５、Ｇｌｙ１５６、Ａｓｎ１５７およびＧｌｙ１６２、Ｔｈｒ１６３、およびＴｈｒ１６４を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３４】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｐｈｅ５２、Ｔｙｒ１１７、Ｐｒｏ１１８、およびＧｌｕ１１９を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３５】
前記プロテアーゼのアミノ酸配列が、Ｇｌｙ１５４から基質主鎖への主鎖−主鎖水素結合を有することを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３６】
前記プロテアーゼが、３つのジスルフィド結合を含むことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３７】
前記変異体が、野生型セルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼと比べてその基質特性を変化させていることを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３８】
前記変異体が、野生型セルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼと比べてｐＩを変化させていることを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項３９】
前記変異体が、野生型セルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼと比べて安定性を向上させていることを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項４０】
前記変異体が、変化した表面特性を示すことを特徴とする請求項１１に記載のプロテアーゼ。
【請求項４１】
前記変異体が、１、２、４、７、８、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、２２、２４、２５、３２、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５７、５９、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７１、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９５、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７、１１８、１１９、１２０、１２１、１２３、１２４、１２６、１２７、１２８、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３７、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、１５７、１５８、１５９、１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５、１６６、１６７、１６８、１７０、１７１、１７３、１７４、１７５、１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、１８１、１８２、１８３、および１８４からなる群から選択された少なくとも１つの位置における置換変異を含むことを特徴とする請求項４０に記載のプロテアーゼ。
【請求項４２】
前記プロテアーゼが、野生型プロテアーゼと比べて少なくとも１つの向上した特性を有する変異体プロテアーゼであることを特徴とする請求項１に記載のプロテアーゼ。
【請求項４３】
前記少なくとも１つの向上した特性が、酸安定性、熱安定性、カゼイン加水分解、ケラチン加水分解、洗浄性能、およびＬＡＳ安定性からなる群から選択されることを特徴とする請求項４２に記載のプロテアーゼ。
【請求項４４】
請求項１１に記載のプロテアーゼ変異体をコードするポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項４５】
請求項４４に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項４６】
前記宿主種細胞が、バチルス種（Bacillus sp.）、ストレプトマイセス種（Streptomyces sp.）、アスペルジルス種（Aspergillus sp.）、およびトリコデルマ種（Trichoderma sp.）からなる群から選択される請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項４７】
請求項４６に記載の宿主細胞により生産されるセリンプロテアーゼ。
【請求項４８】
配列番号５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、および７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む変異体プロテアーゼ。
【請求項４９】
前記アミノ酸配列が、配列番号５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、および７７からなる群から選択されるポリヌクレオチド配列によりコードされることを特徴とする請求項４２に記載の変異体プロテアーゼ。
【請求項５０】
請求項４９に記載のプロテアーゼ変異体をコードするポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター。
【請求項５１】
請求項５０に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項５２】
前記宿主細胞が、バチルス種、ストレプトマイセス種、アスペルジルス種、およびトリコデルマ種からなる群から選択されることを特徴とする請求項５１に記載の宿主細胞。
【請求項５３】
請求項５２に記載の宿主細胞により生産されるセリンプロテアーゼ。
【請求項５４】
前記プロテアーゼが、配列番号１、２、３、および４からなる群から選択されるポリヌクレオチド配列によりコードされることを特徴とする請求項１に記載の単離セリンプロテアーゼの少なくとも一部を含む組成物。
【請求項５５】
前記配列が配列番号１の少なくとも一部を含むことを特徴とする請求項５４に記載のポリヌクレオチド配列。
【請求項５６】
請求項５５に記載のポリヌクレオチド配列を含む発現ベクター。
【請求項５７】
請求項５６に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項５８】
前記宿主細胞が、バチルス種、ストレプトマイセス種、アスペルジルス種、およびトリコデルマ種からなる群から選択されることを特徴とする請求項５７に記載の宿主細胞。
【請求項５９】
請求項５８に記載の宿主細胞により生産されるセリンプロテアーゼ。
【請求項６０】
配列番号８におけるアミノ酸位置に相当する少なくとも１つの置換を含み、ケラチン加水分解、温度安定性、カゼイン活性、ＬＡＳ安定性、および洗浄能からなる群から選択される少なくとも一つの、野生型セルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼと比べて優れた性能を有する変異体プロテアーゼ。
【請求項６１】
（ｉ）配列番号４と７０％以上の相同性を有する、または（ｉｉ）中程度から高度にストリンジェントな条件下で配列番号４で示されるヌクレオチド配列から誘導されるプローブを加水分解により生成することができるか、または（ｉｉｉ）配列番号４で示されるヌクレオチド配列に相補的である、ヌクレオチド配列を含む単離ポリヌクレオチド。
【請求項６２】
請求項６１に記載のポリヌクレオチドをコードする発現ベクター。
【請求項６３】
請求項６２に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項６４】
配列番号４に示される配列の少なくとも一部に相補的な配列を含むポリヌクレオチド。
【請求項６５】
プロテアーゼ活性を有する酵素を生産する方法であって、
（ａ）配列番号４と７０％以上の相同性を有するポリヌクレオチドを含む発現ベクターで宿主細胞を変異させる工程、
（ｂ）前記プロテアーゼを生産するために宿主細胞に好適な条件下で形質転換宿主細胞を培養する工程、および
（ｃ）前記プロテアーゼを回収する工程
を含むことを特徴とする方法。
【請求項６６】
前記宿主細胞が、ストレプトマイセス、アスペルジルス、トリコデルマ、およびバチルス種からなる群から選択されることを特徴とする請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
配列番号４の対応する断片に実質的に同等な４〜１５０のヌクレオチド配列を含むプローブであって、前記プローブは蛋白分解活性を有する酵素をコードする核酸配列を検出するために用いられ、および前記核酸配列はミクロコシニアエの構成種から得られことを特徴とするプローブ。
【請求項６８】
前記ミクロコシニアエがセルロモナス種であることを特徴とする請求項６７に記載のプローブ。
【請求項６９】
前記セルロモナスがセルロモナス株６９Ｂ４であることを特徴とする請求項６８に記載のプローブ。
【請求項７０】
ミクロコシニアエの構成種から得られる少なくとも１つのセリンプロテアーゼを含む洗浄組成物。
【請求項７１】
前記プロテアーゼが、セルロモナス、エルスコビア、セルロシミクロビウム、キシラニバクテリウム、およびプロミクロモノスポラからなる群から選択される生物体から得られるセリンプロテアーゼであることを特徴とする請求項７０に記載の洗浄組成物。
【請求項７２】
前記プロテアーゼがセルロモナス６９Ｂ４から得られることを特徴とする請求項７１に記載の洗浄組成物。
【請求項７３】
前記プロテアーゼが配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項７２に記載の洗浄組成物。
【請求項７４】
前記セリンプロテアーゼが配列番号８で示されるアミノ酸配列と６０％以上のアミノ酸相同性を含むことを特徴とする請求項７３に記載の洗浄組成物。
【請求項７５】
前記セリンプロテアーゼが請求項７０に記載のセリンプロテアーゼと免疫学的交叉反応性を有することを特徴とする洗浄組成物。
【請求項７６】
前記セリンプロテアーゼが請求項７２に記載のセリンプロテアーゼと免疫学的交叉反応性を有することを特徴とする洗浄組成物。
【請求項７７】
前記セリンプロテアーゼが、配列番号８で示されるアミノ酸配列を有するセルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼにおける位置に均等な位置で生じる少なくとも１つのアミノ酸の置換を含むアミノ酸配列を有する変異体プロテアーゼであることを特徴とする請求項７０に記載の洗浄組成物。
【請求項７８】
前記置換が、配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むセルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼにおいて位置２、８、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、２４、２６、３１、３３、３５、３６、３８、３９、４０、４３、４６、４９、５１、５４、６１、６４、６５、６７、７０、７１、７６、７８、７９、８１、８３、８５、８６、９０、９３、９９、１００、１０５、１０７、１０９、１１２、１１３、１１６、１１８、１１９、１２１、１２３、１２７、１４５、１５５、１５９、１６０、１６３、１６５、１７０、１７４、１７９、１８３、１８４、１８５、１８６、１８７、および１８８と同等な位置で起こることを特徴とする請求項７７に記載の洗浄組成物。
【請求項７９】
前記置換は配列番号８で示されるアミノ酸配列を含むセルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼにおいて位置１、４、２２、２７、２８、３０、３２、４１、４７、４８、５５、５９、６３、６６、６９、７５、７７、８０、８４、８７、８８、８９、９２、９６、１１０、１１１、１１４、１１５、１１７、１２８、１３４、１４４、１４３、１４６、１５１、１５４、１５６、１５８、１６１、１６６、１７６、１７７、１８１、１８２、１８７、および１８９と同等な位置で起こることを特徴とする請求項７７に記載の洗浄組成物。
【請求項８０】
前記プロテアーゼが、配列番号８で示されるものと同等なアミノ酸配列において位置１４、１６、３５、３６、６５、７５、７６、７９、１２３、１２７、１５９、および１７９における少なくとも１つのアミノ酸置換を含むことを特徴とする請求項７７に記載の洗浄組成物。
【請求項８１】
前記プロテアーゼが、Ｒ１４Ｌ、Ｒ１６Ｉ、Ｒ１６Ｌ、Ｒ１６Ｑ、Ｒ３５Ｆ、Ｔ３６Ｓ、Ｇ６５Ｑ、Ｙ７５Ｇ、Ｎ７６Ｌ、Ｎ７６Ｖ、Ｒ７９Ｔ、Ｒ１２３Ｌ、Ｒ１２３Ｑ、Ｒ１２７Ａ、Ｒ１２７Ｋ、Ｒ１２７Ｑ、Ｒ１５９Ｋ、Ｒ１５９Ｑ、およびＲ１７９Ｑからなる群から選択される少なくとも１つの突然変異を含むことを特徴とする請求項８０に記載の洗浄組成物。
【請求項８２】
前記プロテアーゼが、組合せＲ１６Ｑ／Ｒ３５Ｆ／Ｒ１５９Ｑ、Ｒ１６Ｑ／Ｒ１２３Ｌ、Ｒ１４Ｌ／Ｒ１２７Ｑ／Ｒ１５９Ｑ、Ｒ１４Ｌ／Ｒ１７９Ｑ、Ｒ１２３Ｌ／Ｒ１２７Ｑ／Ｒ１７９Ｑ、Ｒ１６Ｑ／Ｒ７９Ｔ／Ｒ１２７Ｑ、およびＲ１６Ｑ／Ｒ７９Ｔからなる群から選択される突然変異の組合せを含むことを特徴とする請求項８１に記載の洗浄組成物。
【請求項８３】
前記プロテアーゼが以下の突然変異Ｒ１２３Ｌ、Ｒ１２７Ｑ、およびＲ１７９Ｑを含むことを特徴とする請求項８１に記載の洗浄組成物。
【請求項８４】
前記変異体セリンプロテアーゼは配列番号８におけるアミノ酸位置に対応する少なくとも１つの置換を含み、および前記変異体プロテアーゼは野生型セルロモナス６９Ｂ４プロテアーゼと比べて、ケラチン加水分解、熱安定性、カゼイン活性、ＬＡＳ安定性、および洗浄からなる群から選択される少なくとも１つの特性において向上した性能を有することを特徴とする請求項８０に記載の洗浄組成物。
【請求項８５】
前記変異体プロテアーゼが、配列番号５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、および７８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項７０に記載の洗浄組成物。
【請求項８６】
前記変異体プロテアーゼのアミノ酸配列が、配列番号５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、および７７からなる群から選択されるポリヌクレオチド配列によりコードされることを特徴とする請求項７０に記載の洗浄組成物。
【請求項８７】
洗浄有効量の蛋白分解酵素を含む洗浄組成物であって、前記酵素が配列番号４と７０％以上の配列同等性を有するアミノ酸配列を含むことを特徴とする洗浄組成物。
【請求項８８】
プロテアーゼ、アミラーゼ、リパーゼ、マンナナーゼ（mannanases）、ペクチナーゼ、クチナーゼ（cutinases）、オキシドレダクターゼ、ヘミセルラーゼ、およびセルラーゼからなる群から選択される一つ以上の追加の酵素または酵素誘導体をさらに含むことを特徴とする請求項８７に記載の洗浄組成物。
【請求項８９】
請求項１に記載のセリンプロテアーゼおよび少なくとも１つの安定化剤を含む組成物。
【請求項９０】
前記安定化剤が、ボラックス（borax）、グリセロール、および競合阻害剤からなる群から選択されるむことを特徴とする請求項８９に記載の洗浄組成物。
【請求項９１】
前記競合阻害剤が、前記セリンプロテアーゼをアニオン性界面活性剤に安定化することを特徴とする請求項９０に記載の洗浄組成物。
【請求項９２】
前記セリンプロテアーゼが自己消化に安定な変異体であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項９３】
請求項１に記載のセリンプロテアーゼを０．０００１重量％以上含み、任意に添加成分を含む洗浄組成物。
【請求項９４】
前記組成物が添加成分を含むことを特徴とする請求項９３に記載の洗浄組成物。
【請求項９５】
前記組成物が、約３から約５の実質ｐＨの組成物を提供するのに十分量のｐＨ調整剤を含み、ここで前記組成物が約３から約５のｐＨで加水分解する物質を実質的に含まないことを特徴とする請求項９３に記載の洗浄組成物。
【請求項９６】
前記加水分解する物質が界面活性化物質を含むことを特徴とする請求項９５に記載の洗浄組成物。
【請求項９７】
前記洗浄組成物が液体組成物であることを特徴とする請求項９５に記載の洗浄組成物。
【請求項９８】
前記界面活性化物質がエチレンオキサイド部分を含むアルキル硫酸ナトリウム界面活性剤を含むことを特徴とする請求項９６に記載の洗浄組成物。
【請求項９９】
少なくとも１つの酸安定酵素を含む洗浄組成物であって、約３から約５の実質ｐＨの組成物を提供するのに十分量のｐＨ調整剤を含み、ここで前記組成物が約３から約５のｐＨで加水分解する物質を実質的に含まないことを特徴とする洗浄組成物。
【請求項１００】
前記加水分解する物質が界面活性化物質を含むことを特徴とする請求項９９に記載の洗浄組成物。
【請求項１０１】
前記洗浄組成物が液体組成物であることを特徴とする請求項９９に記載の洗浄組成物。
【請求項１０２】
前記界面活性化物質がエチレンオキサイド部分を含むアルキル硫酸ナトリウム界面活性剤を含むことを特徴とする請求項９９に記載の洗浄組成物。
【請求項１０３】
前記組成物が好適な添加成分を含むことを特徴とする請求項９５に記載の洗浄組成物。
【請求項１０４】
前記組成物が好適な添加成分を含むことを特徴とする請求項９９に記載の洗浄組成物。
【請求項１０５】
前記組成物が約０．００１から約０．５重量％のＡＳＰを含むことを特徴とする請求項９５に記載の洗浄組成物。
【請求項１０６】
前記組成物が約０．０１から約０．１重量％のＡＳＰを含むことを特徴とする請求項１０５に記載の洗浄組成物。
【請求項１０７】
ａ）布地を含む表面および／または製品を、請求項９４に記載の洗浄組成物、および／または請求項９８に記載の洗浄組成物に接触させる工程、および
ｂ）任意に、前記表面または物質を洗浄および／またはすすぐ工程
を含む洗浄方法。
【請求項１０８】
ａ）布地を含む表面および／または製品を、請求項９９に記載の洗浄組成物、および／または請求項１００に記載の洗浄組成物に接触させる工程、および
ｂ）任意に、前記表面または物質を洗浄および／またはすすぐ工程
を含む洗浄方法。
【請求項１０９】
請求項１に記載のセリンプロテアーゼを含む動物飼料。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【公表番号】特表２００７−５１５１６４（Ｐ２００７−５１５１６４Ａ）
【公表日】平成１９年６月１４日（２００７．６．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５４１５８５（Ｐ２００６−５４１５８５）
【出願日】平成１６年１１月１９日（２００４．１１．１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０３９０６６
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０５２１４６
【国際公開日】平成１７年６月９日（２００５．６．９）
【出願人】（５００２８４５８０）ジェネンコー・インターナショナル・インク (67)
【出願人】（５９０００５０５８）ザ　プロクター　アンド　ギャンブル　カンパニー (2,280)
【Ｆターム（参考）】