抗ＥＧＦＲ物質とＩＧＦ−１Ｒ特異的インヒビターとを使用する組合せ療法
ＩＧＦ−１Ｒアンタゴニスト、例えばヒト化抗体と抗増殖薬との組合せを記載する。好ましい実施形態においては、本発明は、ＩＧＦ−１Ｒ抗体と、ＥＧＦＲインヒビターのクラスに属する抗増殖薬（これは好ましくはエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）である）との組合せを記載する。本発明の組合せは、ＩＧＦ１Ｒおよび／またはＥＧＦＲ媒介性または依存性腫瘍を含む腫瘍の治療に有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物における抗腫瘍活性を増強するための方法および組成物に関する。より詳しくは、本発明は、ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合する抗体と受容体チロシンキナーゼインヒビターとを含む組合せに関する。特に、本発明は、ＩＧＦ−１Ｒ抗体とチロシンキナーゼインヒビター、特にエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）との投与により、非小細胞肺癌および他の癌、例えば膵癌を治療するための組合せ療法（併用療法）に関する。該組合せ又は物質を含む方法および医薬組成物は、それぞれの単独の治療物質の使用に関して観察されるものより優れた腫瘍細胞増殖抑制を引き起こして、個々の成分の単独投与により見出されるものより有効な治療をもたらしうる。特定の態様はエルロチニブ耐性肺癌の治療を提供する。
【背景技術】
【０００２】
肺癌は男性における癌による大多数の死亡の原因であり、女性における最も頻繁な癌死亡原因としての乳癌を追い越しつつある。肺癌患者に関する現在の予後は不良である。肺癌死関連死亡率は男性および女性の両方において１９３０年から１０倍増加しており、これは主として喫煙の増加によるものであるが、ヒ素、アスベスト、クロマート、クロロメチルエーテル、ニッケル、多環式芳香族炭化水素および他の物質に対する暴露の増加によるものでもある。Ｓｃｏｔｔ，Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ：Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ａｄｄｉｃｕｓ Ｂｏｏｋｓ（２０００）およびＡｌｂｅｒｇら，Ｋａｎｅら（編）Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ，ｐｐ．１１−５２，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．（１９９８）を参照されたい。Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｏｃｉｅｔｙは、２００４年に１７３，５５０を超える新たな肺癌の症例が生じると推定している。また、２００４年に肺癌により推定１６０，４４０人が死亡するとしている（ＡＣＳウェブサイト：ｃａｎｃｅｒ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ｏｒｇ ｏｆ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ ｗｉｄｅ ｗｅｂ）。
【０００３】
肺癌は、肺に生じた原発腫瘍、または別の器官（例えば、腸または乳房）から広がった続発腫瘍から生じうる。１２を超えるタイプの肺癌が存在するが、９０％以上は、２つの範疇、すなわち、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）に含まれる。Ｓｃｏｔｔ（前記）を参照されたい。７０〜８０％はＮＳＣＬＣと診断される。「ＮＳＣＬＣ」なる語は以下の細胞型を含む：類表皮癌細胞、腺癌細胞および大未分化癌細胞。肺癌の診断は、通常、組織の生検により確認される。
【０００４】
治療アプローチおよび自然史はこれらの２つの疾患で異なる。米国における肺癌の症例の大多数（８０％）はＮＳＣＬＣである。ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣの両方に関する重要な臨床的および予後的因子の理解が過去２０年間で進展したが、治療結果の改善は最低限度にとどまっている。
【０００５】
ＮＳＣＬＳは一般に以下の３つの型に分類される：扁平上皮癌、腺癌および大細胞癌。扁平上皮癌および腺癌は共に、気道を裏打ちする細胞から発生するが、腺癌は、粘液を産生する杯細胞から発生する。大細胞肺癌は、顕微鏡で見た場合に該細胞が大きく且つ円く見えるため、そのように命名されたのであり、一般に、比較的未分化であると考えられている。Ｙｅｓｎｅｒ，Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ（１９９８）を参照されたい。非小細胞癌は４つの病期に分類されうる。Ｉ期は、リンパ節に癌を伴わない、非常に限局した癌である。ＩＩ期の癌は罹患肺の上部のリンパ節に広がっている。癌の病期は該癌の出発場所の近くに広がっている。これは胸壁、肺の被覆部（胸膜）、胸の中央部（縦隔）または他のリンパ節まででありうる。ＩＶ期の癌は身体の別の部分にまで広がっている。Ｉ期〜ＩＩＩ期の癌は、通常、化学療法を伴って又は伴わずに、手術で治療される。ＩＶ期の癌は、通常、化学療法および／または緩和ケアで治療される。
【０００６】
幾つかの染色体異常および遺伝的異常が肺癌において観察されている。ＮＳＣＬＣにおいては、３ｐ、９ｐ、１１ｐ、１５ｐおよび１７ｐ上で染色体異常が記載されており、染色体７、１１、１３および１９上で染色体欠失が認められている。Ｓｋａｒｉｎ（編），Ｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｔｙ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．（２０００）；Ｇｅｍｍｉｌｌら，ｐｐ．４６５−５０２，Ｋａｎｅ（前掲）；Ｂａｉｌｅｙ−Ｗｉｌｓｏｎら，ｐｐ．５３−９８，Ｋａｎｅ（前掲）を参照されたい。ＳＣＬＣにおいては１ｐ、３ｐ、５ｑ、６ｑ、８ｑ、１３ｑおよび１７ｐ上に染色体異常が記載されている。また、ＳＣＬＣ腫瘍の９０％以上およびＮＳＣＬＣ腫瘍の約５０％で染色体３ｐの短腕の喪失も認められている。
【０００７】
幾つかの癌遺伝子および腫瘍抑制遺伝子が肺癌に関連づけられている。Ｍａｂｒｙ，ｐｐ．３９１−４１２，Ｋａｎｅ（前掲）およびＳｃｌａｆａｎｉら，ｐｐ．２９５−３１６，Ｋａｎｅ（前掲）を参照されたい。ＳＣＬＣおよびＮＳＣＬＣのどちらにおいても、肺癌の５０％以上でｐ５３腫瘍抑制遺伝子が突然変異している。Ｙｅｓｎｅｒ（前掲）を参照されたい。もう１つの腫瘍抑制遺伝子であるＦＨＩＴは染色体３ｐ上で見出され、喫煙により突然変異する（同誌；Ｓｋａｒｉｎ，前掲）。また、ＳＣＬＣの９５％以上およびＮＳＣＬＣの約２０〜６０％は、もう１つの腫瘍抑制遺伝子である網膜芽細胞腫（Ｒｂ）タンパク質を有さないか又はその異常を有する。ｒａｓ癌遺伝子（特にＫ−ｒａｓ）はＮＳＣＬＣ検体の２０〜３０％において突然変異しており、ｃ−ｅｒｂＢ２癌遺伝子は２期ＮＳＣＬＣ検体の１８％および４期のＮＳＣＬＣ検体の６０％において発現される。Ｖａｎ Ｈｏｕｔｔｅ（前掲）を参照されたい。染色体９の領域、特に９ｐ２１の領域で見出される他の腫瘍抑制遺伝子は、ｐ１６．ｓｕｐ．ＩＮＫ４Ａおよびｐｌ５．ｓｕｐ．ＩＮＫ４Ｂを含む多数の癌細胞において欠失している。Ｂａｉｌｅｙ−Ｗｉｌｓｏｎ（前掲）；Ｓｃｌａｆａｎｉら（前掲）を参照されたい。これらの腫瘍抑制遺伝子は肺癌の発生病理にも関連づけられている。
【０００８】
また、多数の肺癌細胞は、肺癌細胞上で自己分泌またはパラ分泌様態で増殖因子を産生する。Ｓｉｅｇｆｒｉｅｄら，ｐｐ．３１７−３３６，Ｋａｎｅ（前掲）、Ｍｏｏｄｙ，ｐｐ．３３７−３７０，Ｋａｎｅ（前掲）およびＨｅａｓｌｅｙら，３７１−３９０，Ｋａｎｅ（前掲）を参照されたい。多数のＮＳＣＬＣ腫瘍は上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体を発現して、ＥＧＦに応答してＮＳＣＬＣ細胞が増殖するのを可能にする。インスリン様増殖因子（ＩＧＦ−１）はＮＳＣＬＣ腫瘍の８０％以上において上昇し、それは自己分泌増殖因子として機能すると考えられている。
【０００９】
肺癌の症例の大多数は喫煙に起因すると考えられるが、ほとんどの喫煙者は肺癌に罹患しない。肺癌に対する感受性はメンデル遺伝する可能性があり、したがって、遺伝する遺伝的成分を有しうる、と疫学的証拠は示唆している（Ｂａｉｌｅｙ−Ｗｉｌｓｏｎ，前掲）。したがって、幾つかの遺伝子座における或る対立遺伝子変異体が肺癌に対する感受性に影響を及ぼしうると考えられる。
【００１０】
肺癌に対する現在の療法は非常に限られたものである。一般に、患者の選択肢は手術、放射線療法および化学療法を含む。
【００１１】
肺癌のほとんどの症例は化学療法および放射線療法によっては治癒できない。肺癌のタイプおよび病期に応じて、腫瘍を幾らかの周辺肺組織と共に除去するために手術が用いられうる。肺葉切除術は、肺の葉（断片）が除去されることを意味する。肺全体が除去される場合、該手術は肺切除術と称される。葉の一部だけの除去は区域切除術またはけつ状切除術として公知である。
【００１２】
実際、ＮＳＣＬＣ患者の唯一の治療選択肢は、腫瘍が尚も限局している初期病期（ＩおよびＩＩ）の患者における局所療法（外科的切除または局所照射）である。しかし、診断時に、ＮＳＣＬＣ患者の大多数は、進行した疾患を有し、これは手術だけでは治癒できない。進行期の疾患において、全身化学療法および／または照射は目的の応答および症状の一時的軽減をもたらすが、それらは生存における限られた改善をもたらすに過ぎない。切除不能な疾患を有する患者の余命の中央値は６〜１２ヵ月である。ＩＩＩＢおよびＩＶ期のＮＳＣＬＣの２年間の生存率はそれぞれ１０．８および５．４％である。同様に、５年間の生存率は３．９および１．３％である。
【００１３】
癌が脳にまで広がった場合、脳転移の除去が有益かもしれない。これは頭蓋手術（頭蓋内の孔からの手術）を含む。
【００１４】
放射線療法には、幾つかの方法が存在する。外部ビーム放射線療法は、癌に集中して体外から発せられる放射線を使用する。このタイプの放射線療法は、原発肺癌または他の器官へのその転移を治療するために最も頻繁に用いられる。
【００１５】
また、手術中に見えない又は除去できない非常に小さな癌沈着を死滅させるための術後治療として放射線療法が用いられうる。放射線療法は、疼痛、出血、咀嚼困難および脳転移により引き起こされる問題のような肺癌の症状を一時的に軽減（緩和）するためにも用いられうる。
【００１６】
化学療法では、シスプラチンまたは関連薬カルボプラチンが、ＮＳＣＬＣの治療において最も頻繁に使用される化学療法剤である。パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）（タキソール（Ｔａｘｏｌ））、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）（タキソテレ（Ｔａｘｏｔｅｒｅ））、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）、ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）およびゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）を含む他の新規化合物がＮＳＣＬＣの治療に利用可能である。これらの薬物は従来の化学療法剤（エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）およびカルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ））と比べて改善されているが、全体的な治癒率は依然として低い。
【００１７】
上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）は、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ＥｒｂＢ２）、ＨＥＲ３（ＥｒｂＢ３）およびＨＥＲ４（ＥｒｂＢ４）を含む密接に関連した増殖因子受容体チロシンキナーゼのファミリーのメンバーである。リガンド結合に際して、これらの受容体はホモ二量体またはヘテロ二量体を形成して、自己リン酸化ならびにそれに続く細胞内シグナリングカスケード、例えばホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ、ＭＡＰＫ／ＥｒｋおよびＪａｋ／Ｓｔａｔシグナリング経路の活性化を招き、それらは細胞の増殖、生存およびトランスフォーメーションならびに治療抵抗性において主要な役割を果たしている。
【００１８】
ＥＧＦＲの下流では、ＰＩ３Ｋ経路が細胞の生存および増殖の調節において決定的に重要な役割を果たしている。ＥｒｂＢ３受容体はＰＩ３Ｋ経路の活性化において特有の役割を果たしている。ＥｒｂＢ３は弱いチロシンキナーゼ活性を有するか、またはチロシンキナーゼ活性を有さないが、ＥＧＦＲとのヘテロ二量体形成に際して、それはチロシン残基上でリン酸化される。チロシン−リン酸化ＥｒｂＢ３はＰＩ３Ｋに直接的に結合し、それを活性化する。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔシグナリングは、ＴＫＩ感受性ＮＳＣＬＣにおいて、ＥＧＦＲにより厳密に調節され、ＥＧＦＲ ＴＫＩは、それが増殖をも抑制するＮＳＣＬＣ細胞系においてのみ、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路をダウンレギュレーションすることを、研究は示している（Ｅｎｇｅｌｍａｎ，Ｊ．Ａ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２，３７８８−３７９３（２００５））。
【００１９】
ＥＧＦＲは非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の大多数で発現されるため、それは治療剤の開発のための魅力的な標的となっている。ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）およびエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）を含む小分子ＥＧＦＲチロシンキナーゼインヒビター（ＴＫＩ）がＮＳＣＬＣ患者に関する臨床治験において評価されている。どちらの物質も全ＮＳＣＬＣ患者の１０％〜２０％において部分的な応答をもたらす。ＥＧＦＲの突然変異および／または増幅を有する肺癌は、十中八九、ＥＧＦＲインヒビターに応答して縮小する。ＥＧＦＲ遺伝子における体細胞突然変異の活性化がＮＳＣＬＣ患者において特定されている。これらの「機能獲得（ｇａｉｎ−ｏｆ−ｆｕｎｃｔｉｏｎ）」突然変異は、対応受容体のチロシンキナーゼドメインのＡＴＰ結合ポケットをコードする領域の周辺に密集している置換または短いインフレームの欠失もしくは挿入である。そのような癌においては、ＥＧＦＲは決定的に重要な増殖および生存シグナリング経路の主要アクチベーターであり、したがってこれらの癌はＥＧＦＲ活性に依存している。これらの中心的な増殖および生存シグナリング経路は、ＥＧＦＲインヒビターにさらされると中断され、アポトーシスおよび／または細胞周期停止を引き起こす。
【００２０】
最近のデータは、細胞増殖、アポトーシス、血管新生および転移に関与するシグナリング経路を標的化する新規治療アプローチが研究中であることを示唆している。多数の潜在的標的経路のうち、上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体（ＥＧＦＲ）シグナリング経路が最も詳細に研究されている。なぜなら、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の４０％〜８０％を含む幾つかの充実性腫瘍においてＥＧＦＲの過剰発現が観察されているからである。前記のとおり、研究者は、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）を妨げる物質を現在試験している。なぜＥＧＦＲかというと、１つには、非小細胞肺癌を含む多数のタイプの癌の表面上でそれが異常に高いレベルで発現されるからである。これらの実験的ＥＧＦＲインヒビターの具体例としては、ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）（イレッサ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）））、セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）（エルビツクス（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）））およびエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）（タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）））が挙げられる。
【００２１】
ＭＡＰＫシグナリング経路における決定的に重要な下流シグナリング成分であるＫＲＡＳ遺伝子における活性化突然変異によるエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）またはＥＧＦＲ抑制療法に対する耐性（抵抗性）が臨床において観察されている（Ｐａｏ，Ｗ．ら，ＰＬｏＳ Ｍｅｄ．２，ｅ７３（２００５））。エルロチニブ療法に対する獲得耐性はＥＧＦＲエキソン２０における二次突然変異（Ｔ７９０Ｍ）に臨床において関連づけられている。また、最近の研究は、ＥＲＢ３をリン酸化してエルロチニブ療法に対する耐性を付与するＲＴＫであるｃＭＥＴを特定している。
【００２２】
しかし、ＥＧＦＲ ＴＫＩに対する全体的な応答率は限られたものであり、該薬物に対する耐性をもたらすメカニズムは十分には理解されていない。ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）およびエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）を含む小分子ＥＧＦＲチロシンキナーゼインヒビター（ＴＫＩ）はＮＳＣＬＣ患者に関して臨床治験において評価されている。どちらの物質も全ＮＳＣＬＣ患者の１０％〜２０％において部分的な応答を示す。２００４年に、研究者は、予め治療されたＮＳＣＬＣ患者を含む第ＩＩ相治験で参加者の１２％における腫瘍がエルロチニブでの治療に応答したと報告した。しかし、エルロチニブが患者の生存の延長に寄与したかどうかは不明であった。
【００２３】
２００４年に、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有する患者を含む幾つかの第ＩＩ相臨床治験は、標準的な化学療法とＥＧＦＲインヒビター（ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）またはエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ））の投与とを受けた患者が、化学療法のみを受けた患者の場合と同様の結果を示したに過ぎないことを報告した。しかし、同じ年に、カナダの第ＩＩＩ相治験の研究者は、もはや化学療法に応答しない癌を有するＮＳＣＬＣ患者が、プラセボを摂取した場合より約２ヶ月長く生存することに、エルロチニブが寄与したことを報告した。
【００２４】
エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）は、患者が、全体として、より長く生存することに寄与しなかった。生存期間の中央値は、エルロチニブを摂取した患者では１０．６ヶ月であったのに対して、プラセボ群では１０．５ヶ月であった。また、どちらの患者群もほぼ同じ「進行時間」（癌が悪化するまでに要する時間）を示した：エルロチニブ群では５．１ヶ月、プラセボ群では４．９ヶ月。前記の抗癌化合物は当分野に多大な貢献をしているが、改良された抗癌医薬がこの技術分野において絶えず探索されている。
【００２５】
エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）は細胞膜上でＥＧＦＲ／ＩＧＦ−ＩＲヘテロ二量体形成を誘導して、ＩＧＦ−ＩＲならびにその下流メディエーターＰＩ３Ｋ／Ａｋｔおよびｐ４４／４２ ＭＡＰＫを介して生存シグナルを伝達して、ＥＧＦＲおよび抗アポトーシス性サービビン（ｓｕｒｖｉｖｉｎ）タンパク質のラパマイシン哺乳類標的（ｍＴＯＲ）媒介合成を刺激する、と研究者は仮定している。したがって、ＩＧＦ−ＩＲの不活性化、ｍＴＯＲ媒介タンパク質合成の抑制、またはサービビンタンパク質のノックダウンは、ＥＧＦＲを過剰発現するＮＳＣＬＣ細胞を、エルロチニブ治療に対して感受性にする。Ｆｌｏｒｉａｎａ Ｍｏｒｇｉｌｌｏら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６６，１０１００−１０１１１，２００６年１０月１５日を参照されたい。
【００２６】
しかし、ＭＡＰＫシグナリング経路における決定的に重要な下流シグナリング成分であるＫｒａｓ遺伝子における活性化突然変異によるエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）またはＥＧＦＲ抑制療法に対する耐性が臨床において観察されている（Ｐａｏ，Ｗ．ら，ＰＬｏＳ Ｍｅｄ．２，ｅ７３（２００５））。また、エルロチニブ療法に対する獲得耐性はＥＧＦＲエキソン２０における二次突然変異（Ｔ７９０Ｍ）に臨床において関連づけられている。また、最近の研究は、ＥＲＢ３をリン酸化してエルロチニブ療法に対する耐性を付与するＲＴＫであるｃＭＥＴを特定している。
【００２７】
最近、ＩＧＦ１Ｒシグナリング経路の活性化が、ＥＧＦＲ ＴＫＩであるゲフィチニブ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）に対する耐性の媒介に関連づけられた（Ｇｕｉｘ Ｍら，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１１８（７）：２６０９−２６１９（２００８））。その著者は、ゲフィチニブ耐性（ＧＲ）ヒト扁平 上皮癌Ａ４３１細胞を、漸増量の該インヒビターと共にＡ４３１細胞を長時間インキュベートすることにより、単離した。ＧＲ細胞においては、該インヒビターはＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３およびＥｒｋのリン酸化レベルを減少させたが、Ａｋｔのリン酸化レベルは減少させなかった。この適応変化は、ＩＲＳ−１のリン酸化およびＰＩ３ＫとのＩＲＳ−１の相互作用のようなＩＧＦ−１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）により媒介されるシグナリング事象の活性化を伴っていた。該著者は続いて、ＩＧＦ−ＩＲの抑制がＰＩ３ＫとのＩＲＳ−１の会合を妨げること、ならびにＩＧＦ−ＩＲの抑制が、ゲフィチニブがＡｋｔリン酸化を軽減し細胞増殖を抑制する能力を回復させることを示した（図１Ａ）。他の研究者は、細胞における複数の受容体チロシンキナーゼ活性化がタルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）に対する薬物耐性に関与しうると仮定している。実際、ＥＧＦＲおよびｃＭＥＴの活性化がタルセバ耐性患者からの臨床サンプルにおいて観察されている。Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３５５（３）：７００−７０６（２００７年４月）をも参照されたい。
【００２８】
インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、例えばインスリン様増殖因子ＩおよびＩＩが、腫瘍細胞のような種々の細胞型に対する分裂促進活性の発現に関連づけられている。ＩＧＦはインスリンに構造的に類似しており、種々の疾患および損傷における治療手段として関連づけられている。インスリン様増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）は、８．４のｐＩを有する７６４９ダルトンのポリペプチドであり、血漿中を高濃度で循環し、ほとんどの組織において検出可能である（ＲｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔおよびＨｕｍｂｅｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７３：２３６５（１９７６）；ＲｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔおよびＨｕｍｂｅｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５３：２７６９（１９７８））。ＩＧＦ−Ｉは細胞分化および細胞増殖を刺激し、持続的増殖のためにはほとんどの哺乳類細胞型に要求される。これらの細胞型には、とりわけ、ヒト二倍体繊維芽細胞、上皮細胞、平滑筋細胞、Ｔリンパ球、神経細胞、骨髄性細胞、軟骨細胞、骨芽細胞および骨髄幹細胞が含まれる。これらの増殖因子のそれぞれは、インスリン様増殖因子受容体１（ＩＧＦ１Ｒ）と称される共通の受容体に結合することにより、その分裂促進効果を発現する（Ｓｅｐｐ−Ｌｏｒｅｎｚｉｎｏ，（１９９８）Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ４７：２３５）。Ｋｌａｐｐｅｒら，（１９８３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１１２：２２１５およびＲｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔら，（１９７８）Ｆｅｂｓ．Ｌｅｔｔ．８９：２８３も参照されたい。ＩＧＦ（ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２およびＩＧＦ変異体）の作用および活性に関する大量の文献が存在する。Ｖａｎ Ｗｙｋら，Ｒｅｃｅｎｔ Ｐｒｏｇ．Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．，３０：２５９（１９７４）；Ｂｉｎｏｕｘ，Ａｎｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，４１：１５７（１９８０）；ＣｌｅｍｍｏｎｓおよびＶａｎ Ｗｙｋ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ Ｅｘｐ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５７：１６１（１９８１）；Ｂａｘｔｅｒ，Ａｄｖ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．，２５：４９（１９８６）；米国特許第４，９８８，６７５号；ＷＯ ９１／０３２５３；ＷＯ ９３／２３０７１を参照されたい。
【００２９】
ＩＧＦ系はＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２およびインスリンに対する膜結合受容体から構成される。１型ＩＧＦ受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）は構造においてインスリン受容体（ＩＲ）に密接に関連しており、そのシグナリング経路の一部を共有しており（ＪｏｎｅｓおよびＣｌｅｍｍｏｎｓ，Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．，１６：３−３４（１９９５）；Ｕｌｌｒｉｃｈら，Ｃｅｌｌ ６１：２０３ ２１２，１９９０）、構造的にインスリン受容体に類似している（Ｕｌｌｒｉｃｈら，ＥＭＢＯ Ｊ．５：２５０３ ２５１２，１９８６）。ＩＧＦ−Ｉ受容体は以下の２つのタイプのサブユニットから構成される：アルファサブユニット（全体的に細胞外に存在しリガンド結合において機能する１３０ １３５ｋＤのタンパク質）、およびベータサブユニット（膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを有する９５ｋＤの膜貫通タンパク質）。ＩＧＦ−ＩＲは、まず、単一鎖プロ受容体ポリペプチドとして合成され、これはグリコシル化、タンパク質分解および共有結合によりプロセッシングされて、２つのアルファサブユニットと２つのベータサブユニットとを含む４６０ｋＤの成熟ヘテロ四量体へと合体する。該ベータサブユニットはリガンド活性化チロシンキナーゼ活性を有する。この活性は、該ベータサブユニットの自己リン酸化およびＩＧＦ−ＩＲ基質のリン酸化を含む、リガンド作用をもたらすシグナリング経路に関与する。
【００３０】
ＩＧＦ−ＩＲはＩＧＦ ＩおよびＩＧＦ ＩＩにはナノモル濃度のアフィニティー（例えば、１×１０〜９ｎＭのＫｄ）で結合するが、インスリンには１００〜１０００倍低いアフィニティーで結合しうる。代表的なナノモル濃度のアフィニティー値はＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，ｖｏｌ．５６５，ｐ．１９−２２（２００４）（その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に見出されうる。
【００３１】
インビトロおよびインビボでの腫瘍細胞の維持におけるＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＲの役割に関する相当な証拠が存在する。例えば、「高い正常」レベルのＩＧＦ−Ｉを有する個体は、「低い正常」範囲のＩＧＦ−Ｉレベルを有する個体と比較して増加した、一般的な癌のリスクを有する（Ｒｏｓｅｎら，Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．１０：１３６ ４１，１９９９）。種々のヒト腫瘍の増殖においてＩＧＦ−Ｉ／ＩＧＦ−Ｉ受容体相互作用が果たす役割の総説としては、Ｍａｃａｕｌａｙ，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６５：３１１ ３２０，１９９２を参照されたい。ＩＧＦ−１Ｒシグナリングは、正常細胞の増殖および発生において中心的な役割を果たしていることに加えて、腫瘍細胞の増殖、細胞トランスフォーメーションおよび腫瘍形成において決定的に重要な役割を果たすことにも関連づけられている。Ｂａｓｅｒｇａ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５：２４９−２５２（１９９５）を参照されたい。総説としては、Ｋｈａｎｄｗａｌａら，Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．２１：２１５−２４４（２０００）；ＤａｕｇｈａｄａｙおよびＲｏｔｗｅｉｎ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｒｅｖ．，１０：６８−９１（１９８９）を参照されたい。最近のデータは、ＩＧＦ−ＩＲが多種多様な腫瘍および腫瘍系において発現され、ＩＧＦがＩＧＦ−ＩＲへのその結合により腫瘍増殖を増幅するという結論を導いている。実際、該トランスフォーメーションにおいてＩＧＦ−ＩＲにより果たされる主要な役割を明らかに示している決定的な発見は、ＩＧＦ−ＩＲをコードする遺伝子が不活性化されているＲ−細胞が、通常は該細胞をトランスフォームしうる種々の因子（例えば、ウシパピローマウイルスのＥ５タンパク質、ＥＧＦＲの又はＰＤＧＦＲの過剰発現、ＳＶ４０のＴ抗原、活性化ｒａｓ、あるいはこれらの２つの最後の因子の組合せ）によるトランスフォーメーションに対して完全に治療抵抗性であるという実証である（Ｓｅｌｌ Ｃ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ，９０：１１２１７−１１２２１，１９９３；Ｓｅｌｌ Ｃ．ら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１４：３６０４−３６１２，１９９４；Ｍｏｒｒｉｏｎｅ Ａ．Ｊ．，Ｖｉｒｏｌ．，６９：５３００−５３０３，１９９５；Ｃｏｐｐｏｌａ Ｄ．ら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１４：４５８８−４５９５，１９９４；ＤｅＡｎｇｅｌｉｓ Ｔら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ，１６４：２１４−２２１，１９９５）。この仮定を支持する他の重要な例は、ＩＧＦ−１Ｒに対するアンチセンスＲＮＡでの治療によるマウス癌細胞の転移表現型の喪失（Ｌｏｎｇら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５：１００６−１００９（１９９５））、ならびにＩＧＦ−１Ｒ抗体の添加によるヒトメラノーマ細胞運動性（Ｓｔｒａｃｋｅら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４：２１５５４−２１５５９（１９８９））の及びヒト乳癌細胞増殖のインビトロ抑制（Ｒｏｈｌｉｋら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１４９：２７６−２８１（１９８７））を含む。
【００３２】
発癌におけるＩＧＦ−ＩＲの役割を支持する他の論拠は、該受容体に対するマウスモノクローナル抗体を使用した又はＩＧＦ−ＩＲのネガティブドミナントを使用した研究によるものである。実際、ＩＧＦ−ＩＲに対するマウスモノクローナル抗体は培養内の多数の細胞系の増殖およびインビボでの腫瘍細胞の成長を抑制する（Ａｒｔｅａｇａ Ｃ．ら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，４９：６２３７−６２４１，１９８９；Ｌｉら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍ．，１９６：９２−９８，１９９３；Ｚｉａ Ｆら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，２４：２６９−２７５，１９９６；Ｓｃｏｔｌａｎｄｉ Ｋら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５８：４１２７−４１３１，１９９８）。同様に、ＩＧＦ−ＩＲのネガティブドミナントは腫瘍増殖を抑制しうることが、Ｊｉａｎｇら（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，１８：６０７１−６０７７，１９９９）の研究において示されている。
【００３３】
ＩＧＦ−ＩＲレベルは肺の腫瘍において上昇する（Ｋａｉｓｅｒら，Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１１９：６６５ ６６８，１９９３；Ｍｏｏｄｙら，Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ５２：１１６１ １１７３，１９９３；Ｍａｃａｕｌｅｙら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５０：２５１１ ２５１７，１９９０）。
【００３４】
前記のとおり、多数の治療剤は、第一線級の療法として、あるいは他の治療剤が第二線級および第三線級の治療剤として失敗に終わった場合に限り、組合せて使用（併用）されることが推奨される。多数の化合物が治療用の治験に現在付されているか、それを完了しているが、早期段階の及び進行または転移した肺癌を治療しうる追加的な治療用化合物が大いに必要とされている。
【００３５】
肺癌患者の５年生存率は依然として極めて不良であり（＜１５）、より有効な治療法の必要性が強調されている。ＮＳＣＬＣ、特にエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌を治療するための有効な療法を開発するための試みは、これまでに報告されていない。この必要性を満たす新規組合せ治療剤または組合せ治療計画を本明細書中に記載する。
【００３６】
本発明の他の特徴および利点は以下の詳細な説明および実施例（具体例）から明らかであろう。
【発明の概要】
【００３７】
発明の概括
本発明は、抗チロシンキナーゼインヒビターと、ヒトインスリン様増殖因子受容体１型（ＩＧＦ−１Ｒ）に特異的に結合する抗体との組合せを投与することによる、哺乳動物（典型的にはヒト）における癌の治療のための改良された組合せ治療剤および方法を提供する。
【００３８】
本発明の１つの態様においては、該チロシンキナーゼインヒビターはエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）である。
【００３９】
本発明のもう１つの態様においては、該ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体であるＭＫ−０６４６である。
【００４０】
本発明の更にもう１つの態様においては、該組合せの投与は、チロシンキナーゼヒンヒビターの単独投与と比較して増強した治療効力をもたらす。
【００４１】
本発明の更にもう１つの態様においては、該チロシンキナーゼインヒビターは、典型的には、該ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＭＫ−０６４６）の投与の前またはそれと同時に、経口投与される。
【００４２】
本発明のもう１つの態様においては、該抗ＩＧＦ−Ｒ抗体は、該チロシンキナーゼインヒビターの投与の前、それと同時またはその後に投与されうる。該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、非経口、例えば皮下、腫瘍内、静脈内、皮内、経口、経粘膜または直腸投与により投与されうる。特定の作用理論に束縛されるものではないが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の投与によるＩＧＦ−１Ｒ媒介シグナリングカスケードの遮断は、天然ＩＧＦ−１Ｒリガンドの該受容体への結合に伴う該シグナリングカスケードを負にモジュレーションすることにより、抗腫瘍免疫を増強すると考えられる。
【００４３】
更にもう１つの実施形態においては、本発明は、治療的有効量のＩＧＦ１Ｒインヒビターの１以上またはその医薬組成物を対象に投与することを含む、該対象における治療または予防方法を提供する。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターは、
【化１】
【００４４】
およびＩＧＦ１Ｒ（例えば、ヒトＩＧＦ１Ｒ）に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントからなる群から選択される。１つの実施形態においては、該抗体は、ダロツズマブ（Ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）または本明細書において例えば後記「ＩＧＦ１Ｒインヒビター」の節に記載されているいずれかの他のＩＧＦ１Ｒインヒビターを含む。１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターを１以上の他の抗癌化学療法物質（抗癌化学療法剤）またはその医薬組成物と組合せて投与する。
【００４５】
１つの実施形態においては、そのような他の抗癌化学療法物質は、テニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）
【化２】
【００４６】
、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）
【化３】
【００４７】
、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）
【化４】
【００４８】
、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）
【化５】
【００４９】
、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）
【化６】
【００５０】
、そのいずれかのリポソーム製剤、例えばケリックス（Ｃａｅｌｙｘ）または
ドキシル（Ｄｏｘｉｌ（登録商標））、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）
【化７】
【００５１】
、１３−シス−レチノイン酸
【化８】
【００５２】
、イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）
【化９】
【００５３】
ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）
【化１０】
【００５４】
、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）
【化１１】
【００５５】
、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）
【化１２】
【００５６】
、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）
【化１３】
【００５７】
、メトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）
【化１４】
【００５８】
および本明細書において例えば後記「他の化学療法物質」の節に記載されているいずれかの他の化学療法物質からなる群から選択されるメンバーである。１つの実施形態においては、本明細書に記載されている任意の抗ＩＧＦ１Ｒ抗体の投与量は約１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重または４０〜１０００ｍｇ／ｍ２の範囲である。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を同時に投与する。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を非同時に投与する。１つの実施形態においては、該抗体はＩｇＧ定常領域を含む。１つの実施形態においては、該対象はヒト（例えば、小児）である。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターを抗癌治療手法と組合せて投与する。１つの実施形態においては、該抗癌治療手法は外科的腫瘍摘出術および／または抗癌放射線治療である。
【００５９】
本発明の１つの実施形態においては、該抗ＩＧＦ１Ｒ抗体またはその抗原結合性フラグメントは、本明細書に記載されているとおり、１以上の２．１２．１ ｆｘＣＤＲ（例えば、３つの軽鎖ＣＤＲおよび／または３つの重鎖ＣＤＲ）を含む。
【００６０】
本発明は更に、本明細書に記載されている説明に従い使用するためのＥＧＦＲインヒビターと抗ＩＧＦ−１Ｒアンタゴニストとを含む組成物およびキットを提供する。
【００６１】
本明細書中で用いる「抗体」なる語は、モノクローナル、ポリクローナル、キメラ、一本鎖、二重特異性およびヒト化または最適化抗体、ならびにＦａｂフラグメント、例えば、ＩＧＦ−１Ｒタンパク質に対する抗体の結合特異性を維持しているフラグメント、例えば、本発明の抗体により結合されるものと同じエピトープを発現するそのフラグメントを含む。
【００６２】
本発明の他の特徴および利点は、実施例および図面（その説明は後記に記載されている）を含む以下の説明において見出される。
【００６３】
発明の詳細な説明
精力的な研究の結果として、本発明者らは、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体またはその医薬上許容される塩をチロシンキナーゼインヒビターと組合せて使用することにより、相乗的に優れた抗癌活性が得られうることを見出した。該ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、フィジツムマブ（ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）、シクスツムマブ（ｃｉｘｕｔｕｍｕｍａｂ）、ＳＨＣ ７１７４５４、Ｒｏｃｈｅ Ｒ１５０７、ＥＭ １６４またはＡｍｇｅｎ ＡＭＧ４７９の１つである。
【００６４】
本発明の広範な態様は哺乳動物における抗腫瘍応答の増強方法に関する。本発明は、非小細胞肺癌、乳癌、結腸直腸癌、軟部組織または骨肉腫および子宮内膜癌からなる群から選択される癌の治療において特に有用である。しかし、本発明は、種々の他の癌、例えば脳癌、頚脳（ｃｅｒｖｉｃｏｃｅｒｅｂｒａｌ）癌、食道癌、甲状腺癌、小細胞肺癌、肺癌、胃癌、胆嚢／胆道癌、肝癌、膵癌、卵巣癌、絨毛癌、子宮体癌、子宮頚癌、腎盤／尿管癌、膀胱癌、前立腺癌、陰茎癌、精巣癌、胎児癌、ウィルムス癌、皮膚癌、悪性黒色腫、神経芽腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、軟部肉腫、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病およびホジキンリンパ腫の治療において有用であろう。より詳しくは、本発明は、チロシンキナーゼインヒビターと抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体とを含む組合せ、およびＮＳＣＬＣを治療するための該組合せの投与方法に関する。
【００６５】
定義および一般的技術
本明細書中で言及されている参考研究、特許、特許出願および科学文献（ＧｅｎＢａｎｋデータベース配列へのアクセッション番号を含む）は当業者の知見を確定するものであり、それぞれが参照により本明細書に組み入れられると具体的かつ個別に示されている場合と同等に、それらの全体を参照により本明細書に組み入れることとする。本明細書中で引用されているいずれかの参考文献と本明細書の具体的な教示との間の矛盾は、後者を優先して解決されるものとする。同様に、当技術分野で理解されている用語の定義と、本明細書において具体的に教示されている用語の定義との間の矛盾は、後者を優先して解決されるものとする。また、本明細書で用いられる術語は、専ら個々の実施形態を説明することを目的としたものであり、添付の特許請求の範囲のみにより限定される本発明の範囲を限定するものではないと理解されるべきである。
【００６６】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いる単数形は、文脈に明らかに矛盾しない限り、複数形指示物を含むことに注目する必要がある。したがって、例えば、「遺伝的改変」に対する言及は複数のそのような改変を含み、「プローブ」に対する言及は１以上のプローブおよび当業者に公知のその均等物に対する言及を含む、などである。
【００６７】
本明細書中に記載されている全ての刊行物を、該刊行物の引用対象である方法および／または材料を開示し記載するために、参照により本明細書に組み入れることとする。本明細書中に引用されている刊行物は、本出願の出願日の前のそれらの開示に関して引用されている。この場合、より早い優先日または先行する発明日に基づいて本発明者らが該刊行物に先行すると主張する権利がないと自認するものと解釈されるべきではない。さらに、実際の公開日は、示されているものとは異なる可能性があり、独立した証明を要する。
【００６８】
本明細書中で特に示されている場合を除き、本発明に関して用いられている科学技術用語は、当業者に一般に理解されている意味を有するものとする。さらに、文脈に矛盾する場合を除き、単数形の語は複数物を含むものとし、複数形の語は単数物を含むものとする。一般に、本明細書に記載されている細胞および組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学ならびにタンパク質および核酸化学およびハイブリダイゼーションに関して及びそれらの技術において用いられている用語体系は、当技術分野においてよく知られており一般に用いられているものである。特に示さない限り、本発明の方法および技術は、一般に、当技術分野でよく知られている通常の方法に従って行われ、また、本明細書の全体にわたって引用され記載されている種々の一般的およびより具体的な参考文献に記載されているとおりに行われる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）ならびにＡｕｓｕｂｅｌら，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（１９９２）ならびにＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９９０）（それらを参照により本明細書に組み入れることとする）を参照されたい。酵素反応および精製技術は、本明細書に記載されているとおり、または当技術分野において一般に行われているとおり、製造業者の説明に従って行われる。分析化学、合成有機化学および医薬化学に関して用いられている用語体系、ならびにそれらの実験手法および技術は、当技術分野においてよく知られており一般に用いられているものである。化学合成、化学分析、医薬の製造、製剤化（処方）および運搬ならびに患者の治療には、標準的な技術が用いられる。
【００６９】
以下の用語は、特に示さない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする。
【００７０】
本発明の目的においては、組織サンプルの「切片」は、組織サンプルの単一部分または断片、例えば、組織サンプルから切り出された組織または細胞の薄片を意味する。組織サンプルの複数の切片が、本発明に従い、採取され分析に付されうると理解される。
【００７１】
「癌」または「悪性疾患」は同義語として用いられ、制御されていない異常な細胞増殖、罹患細胞が局所的に又は血流およびリンパ系を介して他の身体部位へ広がる（すなわち、転移する）能力、ならびに幾つかの特徴的な構造的および／または分子的特徴のいずれかにより特徴づけられる幾つかの疾患のいずれかを意味する。「癌性」または「悪性細胞」は、特異的構造的特性を有し分化能を欠き浸潤し転移しうる細胞と理解される。癌の具体例としては、腎癌、結腸癌、乳癌、前立腺癌および肝癌が挙げられる（ＤｅＶｉｔａ，Ｖ．ら（編），２００１，Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ Ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，６．ｓｕｐ．ｔｈ Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．を参照されたい；この参考文献の全体をあらゆる目的で参照により本明細書に組み入れることとする）。より詳しくは、実施例（具体例）は、本明細書に詳細に記載されている組合せ療法を用いるＮＳＣＬＣの治療を詳細に記載しているが、「癌」なる語はそれに限定されない。それは、ＩＧＦ−１Ｒ依存性でありＥＧＦＲ依存性である全ての腫瘍を含む。このタイプの典型的な癌は、例えば膵癌を含む。
【００７２】
癌細胞の特徴の１つは、宿主により制御できない様態で増殖（成長）する傾向であるが、個々の癌細胞に関連した病態はいずれの形態をもとりうる。原発癌細胞（すなわち、悪性トランスフォーメーションの部位の近くから得られる細胞）は、十分に確立された病理学的技術、特に組織学的検査により、非癌細胞から容易に識別されうる。本明細書中で用いる癌細胞の定義は、原発癌細胞だけでなく、癌細胞祖先に由来する任意の細胞をも含む。これは転移癌細胞、ならびに癌細胞に由来するインビトロ培養および細胞系を含む。
【００７３】
細胞系−−「細胞系」または「細胞培養」は、インビトロで増殖または維持された、より高等な真核細胞を意味する。細胞の後代（子孫）は（形態学的に、遺伝子型において、または表現型において）親細胞と完全に同一でなくてもよいと理解される。「未培養（ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ）」として記載されている細胞は、生きた生物から直接的に得られ、該生物から、限られた長さの時間にわたって（該細胞が実質的な複製を受けるのに十分な程度に長くはない時間またはそのような条件下）維持されている。
【００７４】
本出願において用いる疾患の「診断」は、例えば、ＩＧＦ−１Ｒの発現に関連した又は該発現によりもたらされる病的過増殖性発癌障害の存在を診断または検出すること、該疾患の進行をモニターすること、およびＩＧＦ−１Ｒの発現に関連した障害の指標となる細胞またはサンプルを特定または検出することを含むと意図される。診断（する）、検出（する）、特定（する）などの語は本明細書においては互換的に用いられる。
【００７５】
本明細書中で用いる「病変」−−宿主細胞における癌細胞により引き起こされる「病変」は、該宿主の健常な生理的状態を損なうあらゆるものである。これは、癌細胞の異常または制御不能な増殖（成長）、転移、ＩＧＦ−１Ｒ含有細胞の発現レベルの増加、または不適当なレベルの他の産物、その生理的環境に不適当な機能の発現、隣接細胞の正常機能の阻害、炎症または免疫応答の悪化または抑制、あるいは望ましくない化学物質または侵襲性生物の存在を含みうるが、これらに限定されるものではない。
【００７６】
個体または細胞の「治療（処理）」は、該個体または細胞の未治療（未処理）経過を改変するための任意のタイプの介入である。例えば、個体の治療は、該個体に存在する癌により引き起こされる病変を軽減または抑制するために行われうる。治療（処理）は、ａ）組成物または組合せ療法（治療用物質）、例えば、ＩＧＦ−１Ｒ特異的ｍＡｂとチロシンキナーゼインヒビターとを含む医薬組成物の投与を含むが、これに限定されるものではない。「治療（処理）」なる語は、該生物において治療効果をもたらすこと、および少なくとも部分的には異常状態を軽減または阻止することを意味する。治療（処理）は、腫瘍の増殖（成長）の抑制、抑制された腫瘍増殖の維持、および寛解の誘導を含む。
【００７７】
「予防」なる語は、生物が異常状態に罹患する又は異常状態を発生する可能性を減少させることを意味する。
【００７８】
本明細書中で用いる「約」なる語は、許容されうる範囲内の、示されている値の近似値を意味する。好ましくは、該範囲は、示されている値の＋／−５％である。
【００７９】
「または」なる語は、文脈に明らかに矛盾しない限り、本明細書においては「および／または」なる語を意味するものとして用いられ、「および／または」なる語と互換的に用いられる。
【００８０】
「ＩＧＦ１Ｒ」、「ＩＧＦＲ１」、「インスリン様増殖因子受容体−Ｉ」および「インスリン様増殖因子受容体Ｉ型」なる語は当技術分野でよく知られている。ＩＧＦ−１Ｒは任意の生物に由来しうるが、それは好ましくは動物に由来し、より好ましくは哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジまたはイヌ）に由来し、最も好ましくはヒトに由来する。典型的なヒトＩＧＦ−１Ｒ前駆体のヌクレオチドおよびアミノ酸配列はＧｅｎｂａｎｋ（例えば、Ｇｅｎｅ ＩＤ ３４８０またはＮＭ０００８７５）において入手可能である。該前駆体の切断（例えば、アミノ酸７１０と７１１との間におけるもの）はαサブユニットおよびβサブユニットを与え、これらは会合して成熟受容体を形成する。
【００８１】
「免疫グロブリン」は四量体分子である。天然に存在する免疫グロブリンにおいては、各四量体は、ポリペプチド鎖の、２つの同一ペアから構成され、各ペアは１つの「軽」鎖（約２５ｋＤａ）および１つの「重」鎖（約５０ ７０ｋＤａ）を有する。各鎖のアミノ末端部分は、主に抗原認識をもたらす約１００〜１１０個またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を含む。各鎖のカルボキシ末端部分はカッパおよびラムダ軽鎖として分類される。重鎖はミュー、デルタ、ガンマ、アルファまたはイプシロンとして分類され、それぞれＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＥとしての、抗体のイソタイプを定める。軽鎖および重鎖においては、可変領域および定常領域は約１２個以上のアミノ酸の「Ｊ」領域により連結されており、重鎖は約１０個以上のアミノ酸の「Ｄ」領域をも含む。全般的には、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｃｈ．７（Ｐａｕｌ，Ｗ．編，２ｎｄ ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））（その全体をあらゆる目的で本明細書中に組み入れることとする）を参照されたい。各軽／重鎖ペアの可変領域は抗体結合部位を形成していて、完全な免疫グロブリンは２つの結合部位を有する。
【００８２】
「抗体」は、完全な免疫グロブリン、または特異的結合に関して完全抗体と競合するその抗原結合性部分を意味する。抗原結合性部分は、組換えＤＮＡ技術により、または完全抗体の酵素的もしくは化学的切断により製造されうる。抗原結合性部分には、とりわけ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｄＡｂおよび相補性決定領域（ＣＤＲ）フラグメント、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、ジアボディ、および特異的結合をもたらすのに十分な、免疫グロブリンの少なくとも一部を含有するポリペプチドが含まれる。幾つかの抗ＩＧＦ１Ｒ抗体が当技術分野で公知である（例えば、ＷＯ ０３／１００００８；ＷＯ ２００２／５３５９６；ＷＯ ０４／７１５２９；ＷＯ ０３／１０６６２１；ＵＳ２００３／２３５５８２；ＷＯ ０４／８３２４８；ＷＯ ０３／５９９５１；ＷＯ ０４／８７７５６またはＷＯ ２００５／１６９７０を参照されたい）。他の小分子ＩＧＦ１Ｒインヒビターも当技術分野で公知である。
【００８３】
本出願で用いる「抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体」なる語は、一括して、２００３年１２月１６日付け出願の米国特許第７，２４１，４４４号（その全内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に開示されている抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体総称される。それにおいて特許請求されている種々のＣＤＲ、軽鎖および重鎖のアミノ酸配列ならびに該全抗体をコードするヌクレオチド配列も、それらの全体を参照により本明細書に組み入れることとする。同様に、出願第１１／８０１，０８０号の開示も、その全体を参照により本明細書に組み入れることとする。
【００８４】
「患者」なる語はヒトおよび獣医対象を含む。
【００８５】
抗体− ＩＧＦ−１Ｒ（ｈ７Ｃ１０）
本明細書中に詳細に記載されているとおり、本発明の態様の１つは、チロシンキナーゼインヒビター−ＥＧＦＲ、例えばエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、およびヒトインスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）−１に特異的に結合する抗体を癌患者に共投与することによる抗癌物質（抗癌剤）の抗腫瘍効力の改善方法に関する。
【００８６】
したがって、提示されている組合せ療法において使用されるＩＧＦ−１Ｒ抗体は、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）に特異的に結合するものである。該組合せ療法において使用される典型的な抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体およびその使用方法は米国特許第７，２４１，４４４号（‘４４４特許）（その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に記載されている。例えば、‘４４４特許の請求項１を参照されたい。「ｈ７Ｃ１０」または「ＭＫ−０６４６」は、ＩＧＦ−１Ｒに結合するものとして及びＩＲ／ＩＧＦ−１ハイブリッド受容体に結合するものとして特徴づけられるヒト化抗体を示すために互換的に用いられる。そのような抗体は、好ましくは、例えば‘４４４特許に記載されている抗体を含み、ここで、該抗体はヒト化抗体またはそのフラグメントであり、軽鎖および／または重鎖を含み、ここで、該軽鎖および／または重鎖の骨格セグメントＦＲ１〜ＦＲ４は、それぞれ、ヒト抗体軽鎖および／または重鎖の骨格セグメントＦＲ１〜ＦＲ４に由来する。該ヒト化抗体は、配列番号１、２または３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する非ヒト由来の少なくとも１以上の相補性決定領域を含む少なくとも１つの軽鎖と、配列番号４、５または６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する少なくとも１以上の相補性決定領域を含む少なくとも１つの重鎖とを含みうる。該軽鎖は、配列番号７または８の１つにおいて記載されているアミノ酸配列の１以上、または配列番号７または８の配列に対して最適アライメント後に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含みうる。同様に、該重鎖は、配列番号９、１０または１１の１つにおいて記載されているアミノ酸配列の１以上、または配列番号９、１０または１１の配列に対して最適アライメント後に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含みうる。ある実施形態においては、該治療方法は、ＭＫ−０６４６により結合されるものと同じＩＧＦ−１Ｒ上のエピトープに結合する抗体を投与することを含む。
【００８７】
組換え抗体（ＩＧＦ−１Ｒ特異的ｍＡｂ）を発現させるための核酸分子は’４４４特許（その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に記載されている。
【００８８】
本明細書中で用いる「核酸」または「核酸分子」は一本鎖または二本鎖の任意のＤＮＡまたはＲＮＡ分子を意味し、一本鎖の場合には、直鎖状または環状形態のその相補的配列の分子を含む。核酸分子を記載する場合、個々の核酸分子の配列または構造は、本明細書においては、配列を５’から３’への方向に示す通常の慣例に従って記載されうる。本発明の幾つかの実施形態においては、核酸は「単離」されている。この語は、ＤＮＡに適用される場合には、それが由来する生物の天然に存在するゲノムにおいてそれが直接的に隣接している配列から分離されたＤＮＡ分子に関して用いられる。例えば、「単離された核酸」は、ベクター（例えば、プラスミドまたはウイルスベクター）内に挿入された或いは原核もしくは真核細胞または宿主性物のゲノムＤＮＡ内に組込まれたＤＮＡ分子を含みうる。「単離された核酸」なる語は、ＲＮＡに適用される場合には、主として、前記の単離されたＤＮＡ分子によりコードされるＲＮＡ分子を意味する。あるいは、該用語は、それがその天然状態で（すなわち、細胞または組織において）会合している他の核酸から十分に分離されたＲＮＡ分子を意味しうる。単離された核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）は更に、生物学的または合成的手段により直接的に製造され、その製造中に存在する他の成分から分離された分子を表しうる。
【００８９】
本発明の核酸はまた、本発明の核酸の断片を含む。「断片」は、好ましくは少なくとも約１０核酸長、より好ましくは約４０核酸、最も好ましくは約１００核酸長の核酸配列を意味する。「断片」は、１以上の欠失、挿入または置換を含有する少なくとも約１００個の連続的ヌクレオチドの伸長をも意味しうる。「断片」はまた、遺伝子のコード配列全体を意味することが可能であり、５’および３’非翻訳領域を含みうる。
【００９０】
本発明において使用される抗体には、モノクローナル抗体、合成抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（二重特性抗体を含む）、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、一本鎖Ｆｖ（ｓｃｆｖ）（二重特異性ｓｃＦｖを含む）、一本鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、および前記のいずれかのエピトープ結合性フラグメントが含まれるが、これらに限定されるものではない。特に、本発明において使用される抗体には、免疫グロブリン分子、および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち、ＩＧＦ−１Ｒに免疫特異的に結合するＩＧＦ−１Ｒ結合部位を含有する分子が含まれる。本発明において使用される免疫グロブリン分子は任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスの免疫グロブリン分子でありうる。好ましくは、本発明において使用される抗体はＩｇＧ、より好ましくはＩｇＧ１である。
【００９１】
本発明において使用される抗体は任意の動物に由来しうる。好ましくは、該抗体はヒト化モノクローナル抗体である。あるいは、該抗体は、‘４４４特許において特許請求されている抗体の同じエピトープにそれが結合する限り、完全にヒトの抗体でありうる。本明細書中で用いる「ヒト」抗体には、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体が含まれ、ヒト免疫グロブリンライブラリーから単離された、またはヒト遺伝子から抗体を発現するマウスもしくは他の動物から単離された抗体が含まれる。
【００９２】
本発明において使用される抗体は単一特異性、二重特異性、三重特異性またはそれより多重特異性でありうる。多重特異性抗体はポリペプチドの種々のエピトープに免疫特異的に結合することが可能であり、あるいはポリペプチドおよび異種エピトープ（例えば、異種ポリペプチドまたは固体支持体）の両方に免疫特異的に結合しうる。例えば、国際公開番号ＷＯ ９３／１７７１５、ＷＯ ９２／０８８０２、ＷＯ ９１／００３６ＯおよびＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔら，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ １４７：６０−６９；米国特許第４，４７４，８９３号、第４，７１４，６８１号、第４，９２５，６４８号、第５，５７３，９２０号および第５，６０１，８１９号；ならびにＫｏｓｔｅｌｎｙら，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３を参照されたい。
【００９３】
本発明において使用される抗体には、該抗体の誘導体が含まれる。本発明で用いられる方法と共に使用される抗体をコードするヌクレオチド配列内に突然変異を導入するためには、当業者に公知の標準的な技術、例えば、アミノ酸の置換をもたらす部位特異的突然変異誘発およびＰＣＲ媒介突然変異誘発が用いられうる。好ましくは、該誘導体は、元の分子と比較して、２５個未満のアミノ酸の置換、２０個未満のアミノ酸の置換、１５個未満のアミノ酸の置換、１０個未満のアミノ酸の置換、５個未満のアミノ酸の置換、４個未満のアミノ酸の置換、３個未満のアミノ酸の置換、または２個未満のアミノ酸の置換を含む。好ましい実施形態においては、該誘導体は、１以上の推定非必須アミノ酸残基に施された保存的アミノ酸置換を有する。「保存的アミノ酸置換」は、類似電荷を有する側鎖を有するアミノ酸残基でアミノ酸残基が置換されているものである。類似電荷を有する側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当技術分野で定められている。これらのファミリーは、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、無極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖を有するアミノ酸（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を含む。あるいは、突然変異を、例えば飽和突然変異誘発により、コード配列の全部または一部に沿ってランダムに導入することが可能であり、得られた突然変異体を生物活性に関してスクリーニングして、活性を保有する突然変異体を特定することが可能である。突然変異誘発後、コード化タンパク質を発現させることが可能であり、該タンパク質の活性を測定することが可能である。
【００９４】
本発明において使用される抗体には、修飾された（すなわち、任意のタイプの分子の、該抗体への共有結合により修飾された）誘導体が含まれる。例えば、限定的なものではないが、該抗体誘導体には、例えばグリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ；ペジル化）、リン酸化、アミド化、公知の保護／遮蔽基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への結合などにより修飾された抗体が含まれる。特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシン（ｔｕｎｉｃａｍｙｃｉｎ）の存在下の合成など（これらに限定されるものではない）を含む任意の多数の化学修飾が公知技術により行われうる。また、該誘導体は１以上の非古典的アミノ酸を含みうる。
【００９５】
本発明はまた、当業者に公知のフレームワーク領域を含む、本発明において使用される抗体を提供する。ある実施形態においては、本発明において使用される組成物および方法において使用される抗体のフレームワーク領域の１以上、好ましくは、該フレームワーク領域の全ては、ヒトのものである。本発明において使用される或る他の実施形態においては、本発明において使用される抗体のフラグメント領域はヒト化されている。ある実施形態においては、本発明において使用される方法で使用される抗体は合成抗体、モノクローナル抗体、イントラボディ（ｉｎｔｒａｂｏｄｙ）、キメラ抗体、ヒト抗体、ヒト化キメラ抗体、ヒト化抗体、グリコシル化抗体、多重特異性抗体、ヒト抗体、一本鎖抗体または二重特異性抗体である。
【００９６】
ある実施形態においては、本発明において使用される抗体はＩＧＦ−１Ｒに対する高い結合アフィニティーを有する。
【００９７】
ある実施形態においては、本発明において使用される抗体は、約１２時間以上、約１日以上、約３日以上、約６日以上、約１０日以上、約１５日以上、約２０日以上、約２５日以上、約３０日以上、約３５日以上、約４０日以上、約４５日以上、約２ヶ月以上、約３ヶ月以上、約４ヶ月以上、または５ヶ月以上の、対象、好ましくはヒトにおける半減期を有する。増加したインビボ半減期を有する抗体は、当業者に公知の技術により製造されうる。例えば、増加したインビボ半減期を有する抗体は、ＦｃドメインとＦｃＲｎ受容体との相互作用に関与することが確認されたアミノ酸残基を修飾（例えば、置換、欠失または付加）することにより製造されうる［例えば、ＷＯ ９７／３４６３１および米国特許出願第１０／０２０，３５４（発明の名称“Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｘｔｅｎｄｅｄ Ｈａｌｆ−Ｌｉｖｅｓ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ”）（Ｊｏｈｎｓｏｎらにより２００１年１２月１２日付けで出願された）；Ｕ．Ｓ．公開第２００５／００３７００号および第２００５／００６４５１４号（それらの全体を参照により本明細書に組み入れることとする）を参照されたい］。そのような抗体は、当業者に公知の方法を用いて、例えば本明細書に記載されているイムノアッセイにより、抗原への結合活性およびインビボ効力に関して試験されうる。
【００９８】
さらに、増加したインビボ半減期を有する抗体は、重合体分子、例えば高分子量ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を該抗体に結合させることにより製造されうる。ＰＥＧは、多官能性リンカーを使用して又は使用しないで、該抗体のＮまたはＣ末端へのＰＥＧの部位特異的コンジュゲート化により、あるいはリシン残基上の存在するイプシロン−アミノ基を介して、該抗体に結合されうる。生物活性の最低限度の喪失を引き起こす直鎖状または分枝状重合体誘導体化が用いられる。コンジュゲーションの度合は、該抗体へのＰＥＧ分子の適切なコンジュゲーションが確保されるように、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析により厳密にモニターされる。未反応ＰＥＧは、例えばサイズ排除またはイオン交換クロマトグラフィーにより、抗体−ＰＥＧコンジュゲートから分離されうる。ＰＥＧ誘導体化抗体は、当業者に公知の方法を用いて、例えば本明細書に記載されているイムノアッセイにより、抗原への結合活性およびインビボ効力に関して試験されうる。
【００９９】
ある実施形態においては、本発明において使用される抗体は、ＩＧＦ−１Ｒへの結合能を保有する、完全抗体の抗原結合性部分を含む。具体例には以下のものが含まれる：（ｉ）Ｆａｂフラグメント、すなわち、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる１価フラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、すなわち、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂフラグメントを含む２価フラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄら，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によりコードされているが、それらは、それらが単一タンパク質鎖（ここで、ＶＬおよびＶＨ領域はペアとなって１価分子を形成する）として産生されることを可能にする合成リンカーにより、組換え法を用いて連結されうる（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知である；例えば、Ｂｉｒｄら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎら（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３を参照されたい）。そのような一本鎖抗体は「抗体」なる語に対する言及に含まれる。
【０１００】
ＩＧＦ−１Ｒに対する抗体の製造方法はよく知られている。例えば、‘４４１特許を参照されたい。
【０１０１】
抗体特異性に関するスクリーニング− 抗体の製造のための技術は前記に記載されている。所望により、ある生物学的特性を有する抗体を更に選択することが可能である。例えば、該抗体は、産生されたら、ＩＧＦ−１Ｒに対するその結合アフィニティーに関してスクリーニングされうる。ＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合する抗体に関するスクリーニングは、マイクロタイタープレートがＩＧＦ−１Ｒでコーティングされた酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて達成されうる。いくつかの実施形態においては、陽性反応性クローンからのＩＧＦ−１Ｒに結合する抗体を更に、ＥＬＩＳＡに基づくアッセイにおける他のＩＧＦ−１Ｒアイソフォーム（例えば、ＩＧＦ−１Ｒ）に対する反応性に関して、そのような他のＩＧＦ−１Ｒアイソフォームでコーティングされたマイクロタイタープレートを使用してスクリーニングすることが可能である。ＩＧＦ−１Ｒの別のアイソフォームに反応性である抗体を産生するクローンを排除し、ＩＧＦ−１Ｒのみに反応性である抗体を産生するクローンを更なる増殖および発生のために選択することが可能である。ＩＧＦ−１Ｒに対する該抗体の反応性の確認は、例えばウエスタンブロットアッセイを用いて達成されうる。該ウエスタンブロットアッセイにおいては、卵巣癌、乳癌、腎癌、結腸直腸癌、肺癌、子宮内膜癌または脳癌細胞からのタンパク質および精製されたＩＧＦ−１Ｒおよび他のＩＧＦ−１ＲアイソフォームをＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上で泳動させ、ついで膜上にブロッティングする。ついで該膜を推定抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体でプローブすることが可能である。ＩＧＦ−１Ｒに対する反応性および別のインスリン様受容体アイソフォームに対する無反応性はＩＧＦ−１Ｒに対する反応性の特異性を証明するものである。
【０１０２】
ＩＧＦ−１Ｒまたはその誘導体を検出するための一般的方法− 本発明の抗体またはその結合性フラグメントを使用するＩＧＦ−１Ｒを検出するためのアッセイ法は特に限定されるものではない。被験流体中の抗原の量（例えば、ＩＧＦ−１Ｒのレベル）に対応する抗体、抗原または抗体−抗原複合体の量が化学的または物理的手段により検出可能であり、既知量の該抗原を含有する標準溶液から作成された標準曲線から該抗原の量が算出されうる限り、任意のアッセイ法が用いられうる。本発明に含まれる代表的イムノアッセイには以下のものが含まれるが、それらに限定されるものではない：米国特許第４，３６７，１１０号に記載されているもの（二重モノクローナル抗体サンドイッチアッセイ）；Ｗｉｄｅら，ＫｉｒｋｈａｍおよびＨｕｎｔｅｒ編，Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｅ．およびＳ．Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ（１９７０）に記載されているもの；米国特許第４，４５２，９０１号に記載されているもの（ウエスタンブロット）；Ｂｒｏｗｎら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５５：４９８０−４９８３（１９８０）に記載されているもの（標識リガンドの免疫沈降）；およびＢｒｏｏｋｓら，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３９：４７７（１９８０）に記載されているもの（免疫細胞化学）；光学顕微鏡、フローサイトメトリーまたは蛍光測定検出と共に蛍光標識抗体を使用する免疫蛍光技術など。Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ８０’ｓ，Ａ．Ｖｏｌｌｅｒら編，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐａｒｋ，１９８１，Ｚｏｌａ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７−１５８（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９８７）も参照されたい。
【０１０３】
（１）サンドイッチアッセイは、検出すべきタンパク質の別々の免疫原性部分またはエピトープにそれぞれが結合しうる２つの抗体の使用を含む。サンドイッチアッセイにおいては、該試験サンプルアナライトが、固体支持体上に固定化された第１抗体に結合し、ついで第２抗体が該アナライトに結合して、不溶性の３成分複合体を形成する。例えば、米国特許第４，３７６，１１０号を参照されたい。第２抗体自体が、検出可能部分で標識されることが可能であり（直接サンドイッチアッセイ）、あるいは検出可能部分で標識された抗免疫グロブリン抗体を使用して測定されることが可能である（間接サンドイッチアッセイ）。例えば、１つのタイプのサンドイッチアッセイはＥＬＩＳＡアッセイであり、この場合、検出可能部分は酵素である。
【０１０４】
該サンドイッチアッセイにおいては、本発明の固定化抗体を試験流体と反応させ（一次反応）、ついで本発明の抗体の標識形態と反応させ（二次反応）、該固定化担体上の該標識物質の活性を測定し、それにより該試験流体中のＩＧＦ−１Ｒレベルを定量することが可能である。該一次および二次反応は同時に又は或る時間間隔で行われうる。標識および固定化の方法は前記方法の変法により行われうる。該サンドイッチアッセイによるイムノアッセイにおいては、固定化または標識抗体のために使用される抗体は必ずしも１つの種からのものである必要はなく、２以上の種の抗体の混合物を使用して、測定感度などを向上させることが可能である。該サンドイッチアッセイによりＩＧＦ−１Ｒをアッセイする方法においては、例えば、該一次反応において使用される抗体がＩＧＦ−１ＲのＣ末端領域における部分ペプチドを認識する場合には、該二次反応において使用される抗体は、好ましくは、該Ｃ末端領域以外の部分ペプチド（すなわち、Ｎ末端領域）を認識するものである。該一次反応に使用される抗体がＩＧＦ−１ＲのＮ末端における部分ペプチドを認識する場合には、該二次反応において使用される抗体としては、好ましくは、Ｎ末端領域以外の部分ペプチド（すなわち、Ｃ末端領域）を認識する抗体が使用される。
【０１０５】
ＩＧＦ−１Ｒを検出するのに同様に有用でありうる他のタイプの「サンドイッチ」アッセイは、いわゆる「同時」および「リバース（逆）」アッセイである。同時アッセイは単一インキュベーション工程を含み、この場合、固体支持体に結合した抗体および標識抗体の両方を被験サンプルに同時に加える。該インキュベーションが完了した後、該固体支持体を洗浄して流体サンプルの残渣および未複合体化標識抗体を除去する。ついで、通常の「フォワード」サンドイッチアッセイの場合と同様に、該固体支持体に結合した標識抗体の存在を決定する。
【０１０６】
「リバース」アッセイにおいては、まずは標識抗体の溶液を流体サンプルに加え、ついで、適当なインキュベーション時間の後に固体支持体に結合した未標識抗体を加えるという逐次的添加を行う。第２のインキュベーションの後、該固相を常法により洗浄して、それを被験サンプルの残渣および未反応標識抗体の溶液から取り出す。ついで、「同時」および「フォワード」アッセイの場合と同様に、固体支持体に結合した標識抗体の測定を行う。１つの実施形態においては、別々のエピトープに特異的な本発明の抗体の組合せを使用して、高感度な３部位免疫放射線アッセイを構築する。
【０１０７】
このタイプのアッセイはまた、ＩＧＦ−１Ｒ発現がどのような「サンプル」において生じうる場合であっても、ＩＧＦ−１Ｒ発現を定量するために用いられうる。したがって、ある態様においては、該サンドイッチアッセイは、
（ｉ）担体上に固定化されたＩＧＦ−１ＲのＮ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体、Ｃ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体の標識形態、および試験流体を反応させ、該標識の活性を測定することを含む、試験流体中のＩＧＦ−１Ｒの発現レベルを定量するための方法、または
（ｉｉ）担体上に固定化されたＩＧＦ−１ＲのＣ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体、ＩＧＦ−１Ｒの標識形態のＮ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体、および試験流体を反応させ、該標識の活性を測定することを含む、試験流体中のＩＧＦ−１Ｒ発現を定量するための方法などを含む。
【０１０８】
（２）競合結合アッセイは、限られた量の抗体との結合に関して試験サンプルアナライトと標識標準物が競合しうることに基づく。試験サンプル中のＩＧＦ−１Ｒタンパク質の量は、該抗体に結合した標準物の量に反比例する。結合した標準物の量の決定を促進するために、一般には、該抗体に結合した標準物およびアナライトが、未結合のままである標準物およびアナライトから簡便に分離されうるように、該競合の前または後に該抗体を不溶化する。
【０１０９】
ＩＧＦ−１Ｒ発現のレベルを定量するために、当業者は、本発明の抗体またはそのフラグメント、試験流体およびＩＧＦ−１Ｒの標識形態を組合せ及び／又は競合的に反応させ、該抗体またはそのフラグメントに結合した標識ＩＧＦ−１Ｒの比を測定し、それにより該試験流体中のＩＧＦ−１Ｒを定量することが可能である。
【０１１０】
（３）免疫測定アッセイ
免疫測定アッセイにおいては、試験流体中の抗原および固相抗原を、ある与えられた量の標識形態の本発明の抗体と競合的に反応させ、ついで固相を液相から分離する。あるいは試験流体中の抗原および過剰量の標識形態の本発明の抗体を反応させ、ついで固相抗原を加えて、未反応の標識形態の本発明の抗体を該固相に結合させ、ついで該固相を液相から分離する。ついで該相のいずれかの標識量を測定して、該試験流体中の抗原レベルを決定する。
【０１１１】
典型的な及び好ましい免疫測定アッセイには、「フォワード」アッセイが含まれ、この場合、該固相に結合した抗体を、まず、被験サンプルと接触させて、二成分固相抗体−ＩＧＦ１Ｒ複合体の形成により該サンプルからＩＧＦ−１Ｒを抽出する。適当なインキュベーション時間の後、固体支持体を洗浄して、未反応ＩＧＦ−１Ｒ（存在する場合）を含む流体サンプルの残渣を除去し、ついで既知量の標識抗体（これは「レポーター分子」として機能する）を含有する溶液と接触させる。未標識抗体を介して固体支持体に結合したＩＧＦ−１Ｒと該標識抗体が複合体を形成するのを可能にする第２のインキュベーション時間の後、該固体支持体を再度洗浄して該未反応標識抗体を除去する。このタイプのフォワードサンドイッチアッセイは、ＩＧＦ−１Ｒが存在するかどうかを決定するための単純な「イエス／ノー（有／無）」アッセイであることが可能であり、あるいは既知量のＩＧＦ−１Ｒを含有する標準サンプルに関して得られた尺度と標識抗体の尺度を比較することにより定量的にされうる。そのような「２部位」または「サンドイッチ」アッセイはＷｉｄｅ（Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｅ Ａｓｓａｙ Ｍｅｔｈｏｄ，Ｋｉｒｋｈａｍ編，Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ，１９７０，ｐｐ．１９９−２０６）により記載されている。
【０１１２】
（４）ネフェロメトリー
ネフェロメトリーにおいては、ゲル内または溶液中で抗原−抗体反応の結果として生じる不溶性沈降物の量を測定する。試験流体中の抗原の量が少なく、少量の該沈降物しか得られない場合であっても、レーザー散乱を用いるレーザーネフェロメトリーが好適に用いられうる。
【０１１３】
標識剤を使用する前記アッセイ方法（１）〜（４）において使用されうる標識剤の具体例には、放射性同位体（例えば、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓなど）、蛍光物質、例えばシアニン蛍光色素（例えば、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７）、フルオレスカミン、フルオレセインイソチオシアナートなど、酵素（例えば、ベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ、リンゴ酸デヒドロゲナーゼなど）、発光物質（例えば、ルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、ルシゲニンなど）、ビオチン、ランタニドなどが含まれる。また、抗体を標識剤に結合させるために、ビオチン−アビジン系も使用されうる。
【０１１４】
抗原または抗体の固定化においては、物理的吸着が用いられうる。あるいは、タンパク質、酵素などの固定化に通常用いられる化学結合も用いられうる。該担体の具体例には、不溶性多糖、例えばアガロース、デキストラン、セルロースなど；合成樹脂、例えばポリスチレン、ポリアクリルアミド、シリコーンなど；またはガラスなどが含まれる。
【０１１５】
もう１つの実施形態においては、本発明は、体液（例えば、血液、血清、血漿、喀痰など）中のＩＧＦ−１Ｒレベルの特定および測定により癌および腫瘍の診断を補助する。ＩＧＦ−１Ｒが通常存在し、発癌性障害の発生が異常量の細胞表面受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）（例えば、正常と比べた場合の発現）により引き起こされる場合には、該アッセイは、生物学的サンプル中のＩＧＦ−１Ｒレベルを、同じ細胞型の正常非発癌性組織において予想される範囲と比較すべきである。したがって、対照被験者または当該被験者のベースラインと比較した場合の被験者におけるＩＧＦ−１Ｒ含有細胞の量またはＩＧＦ−１Ｒ発現レベルにおける統計的に有意な増加は、進行中の発癌性障害またはそのような障害のリスクの診断につながりうる要因となりうる。同様に、転移する可能性のある癌の指標となる高レベルのＩＧＦ−１Ｒの存在も検出されうる。本発明の抗体により認識される抗原（例えば、ＩＧＦ−１Ｒ）を発現する癌の場合、抗原を検出しうることは早期診断をもたらし、それにより早期治療の可能性をもたらす。早期段階で診断することが困難な癌では早期検出が特に重要である
さらに、体液サンプル、例えば血液において検出され測定される抗原のレベルは、癌または腫瘍に対する治療（限定的なものではないが、手術、化学療法、放射線療法、本発明の治療方法およびそれらの組合せを含む）の経過をモニターするための手段を提供する。体液中の抗原のレベルを疾患の重症度と相関させることにより、そのような抗原のレベルを用いて、例えば原発腫瘍、癌および／もしくは転移の除去の成功を示し、ならびに／または他の療法の有効性を経時的にモニターすることが可能である。例えば、癌または腫瘍特異的抗原のレベルの経時的減少は患者における腫瘍負荷の軽減を示す。これとは対照的に、抗原のレベルの経時的な無変化または増加は療法の無効性または腫瘍もしくは癌の継続的な成長を示す。
【０１１６】
検体中の該抗体の検出は、当技術分野で公知の技術、例えば免疫酵素技術、例えばイムノペルオキシダーゼ染色技術、またはアビジン−ビオチン技術、または免疫蛍光技術を用いて達成されうる（例えば、Ｃｉｏｃｃａら，１９８６，“Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１２１：５６２ ７９およびＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｋｉｍｂａｌｌ編（２．ｓｕｐ．ｎｄ Ｅｄ），Ｍａｃｍｉｌｌａｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９８６，ｐｐ．１１３ １１７を参照されたい）。当業者は、機能的かつ最適なアッセイ条件を通常の実験により決定することが可能である。
【０１１７】
ＩＧＦ−１Ｒを検出するための典型的なインビトロイムノアッセイは、ＩＧＦ−１Ｒに選択的に結合しうる検出可能な様態で標識された本発明の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体または抗原結合性フラグメントの存在下、生物学的サンプルをインキュベートし、サンプル中で結合した該標識フラグメントまたは抗体を検出することを含む。該抗体は、該細胞またはその一部に該抗体が結合したら該細胞またはその一部（例えば、過形成、異形成および／または癌性細胞から放出されたＩＧＦ−１Ｒまたはその断片）の検出を可能にするのに有効な標識に結合している。該生物学的サンプル中の細胞またはその一部の存在は該標識の検出により検出される。
【０１１８】
該生物学的サンプルを、細胞、細胞粒子、膜または可溶性タンパク質を固定化しうる例えばニトロセルロースまたは他の固体支持体もしくはマトリックスのような固相支持体または担体と接触させ、該固相支持体または担体上に固定化することが可能である。ついで該支持体を適当なバッファーで洗浄し、ついで、検出可能な様態で標識された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で処理することが可能である。ついで該固相支持体をバッファーで再び洗浄して未結合抗体を除去することが可能である。ついで該固体支持体上の結合標識の量を通常の手段により検出することが可能である。したがって、本発明のもう１つの実施形態においては、固相支持体（例えば、本明細書に記載されているもの）に結合したモノクローナル抗体またはその結合性フラグメントを含む組成物を提供する。
【０１１９】
「固相支持体」または「担体」は、ペプチド、抗原または抗体に結合しうる任意の支持体を意味する。よく知られた支持体または担体には、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナイロン、アミラーゼ、天然および修飾セルロース、ポリアクリルアミド、アガロースおよび磁鉄鉱が含まれる。本発明の目的においては、該担体の性質は或る程度まで可溶性であるか又は不溶性でありうる。該支持体物質は、結合分子がＩＧＦ−１Ｒまたは抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体に結合しうる限り、実質的に全ての可能な構造的形状を有しうる。したがって、該支持体の形状は、ビーズの場合のような球状、または試験管の内部表面もしくは棒の外部表面の場合のような円筒状でありうる。あるいは該表面は平面状、例えばシート、培養皿、試験ストリップなどでありうる。好ましい支持体には、ポリスチレンビーズが含まれる。当業者は、抗体、ペプチドまたは抗原を結合させるための多数の他の適当な担体を知っており、あるいは通常の実験によりそれを確認することが可能である。
【０１２０】
本発明に従うインビトロアッセイはまた、組換えＩＧＦ−１Ｒを発現する細胞から単離された膜、ＩＧＦ−１Ｒのリガンド結合性セグメントを含む可溶性断片、または固相基体に結合した断片の使用を含む。これらのアッセイは結合性セグメントの突然変異および修飾またはリガンドの突然変異および修飾（例えば、リガンド類似体）の効果の診断的決定を可能にする。
【０１２１】
インビボモデルにおける組合せ免疫療法の効力に関するアッセイ− 当技術分野でよく知られた技術を用いて、腫瘍変化後の種々の時点で腫瘍負荷を評価することが可能である。抗腫瘍応答をモニターし、組合せ免疫療法の効力を決定するためのアッセイは、後記で説明する。改良または増強された抗腫瘍応答は、該免疫療法の投与後間もなく（例えば、５〜１０日以内に）、最も劇的に観察されうるが、場合によっては、ＩＧＦ−１Ｒの発現レベル、該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の投与量および投与頻度ならびにチロシンキナーゼインヒビターであるエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）の投与の時機に対する該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の投与の相対的時機のような要因に応じて、該応答は遅延しうる。したがって、免疫療法後の抗腫瘍応答を十分に評価するために、組合せ療法の治療または投与後の種々の時点で採取された生物学的サンプルに関して、任意のよく知られたアッセイを行うことが可能である。
【０１２２】
治療のモニター− 当業者は、本発明の組合せ治療の投与の際の治療結果および／または全身免疫応答をモニターするための手段を認識している。特に、治療結果は、腫瘍成長の低下および／または腫瘍退縮および／または腫瘍特異的マーカーのレベルをモニターすることにより評価されうる。治療に応答した腫瘍成長の低下または腫瘍退縮は、例えば腫瘍の数、腫瘍質量もしくはサイズまたは転移の軽減／予防を含む当業者に公知の幾つかのエンドポイントの１以上を用いてモニターされうる。
【０１２３】
ＩＧＦ−１Ｒインヒビター：
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＢＭＳ−５７７０９８
【化１５】
【０１２４】
またはＡＥＷ−５４１
【化１６】
【０１２５】
または
【化１７】
【０１２６】
である。
【０１２７】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／４８１３３に記載されているピリミジン誘導体のいずれか、例えば、コア構造：
【化１８】
【０１２８】
を含むものである。これらの物質を投与することによる、エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌またはＩＧＦ−１Ｒにより引き起こされるものを治療または予防する方法は、本発明の範囲内である。
【０１２９】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１４に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化１９】
【０１３０】
を含むもの、例えば、
【化２０】
【化２１】
【０１３１】
または
【化２２】
【０１３２】
である。
【０１３３】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１５に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化２３】
【０１３４】
を含むものである。
【０１３５】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１６に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化２４】
【０１３６】
を含むもの、例えば、
【化２５】
【化２６】
【化２７】
【０１３７】
または
【化２８】
【０１３８】
である。
【０１３９】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１９に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化２９】
【０１４０】
を含むものである。
【０１４１】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターは、例えばＶＥＧＦ−２Ｒ、Ｋｉｔ、ＦＬＴ３および／またはＰＤＧＦＲをも抑制する多重標的化キナーゼインヒビター、例えばＳＵ−１１２４８（例えば、リンゴ酸スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ））またはＢａｙ４３−９００６（ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ））である。これらの物質を投与することによる、エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌またはＩＧＦ−１Ｒにより引き起こされるものを治療または予防する方法は、本発明の範囲内である。
【０１４２】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／２４９６７に記載されている化合物のいずれか、例えば、コア構造：
【化３０】
【０１４３】
を含むものである。
【０１４４】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０４／３０６２５に記載されている化合物のいずれか、例えば、コア構造：
【化３１】
【０１４５】
を含むものである。
【０１４６】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０４／３０６２７に記載されている化合物のいずれか、例えば、コア構造：
【化３２】
【０１４７】
を含むものである。
【０１４８】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ００／３５４５５に記載されているヘテロアリール−アリール尿素のいずれか、例えば、コア構造：
【化３３】
【０１４９】
を含むものである。
【０１５０】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／２７２４６に記載されているペプチドのいずれかである。
【０１５１】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターは
【化３４】
【０１５２】
またはＰＣＴ出願公開第ＷＯ ０２／９２５９９号に開示されているいずれかの４−アミノ−５−フェニル−７−シクロブチル−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体である。
【０１５３】
他の化学療法物質
本発明の範囲は、本発明のＩＧＦ１Ｒインヒビターを他の化学療法物質（化学療法剤）と共に含む組成物、およびＩＧＦ１Ｒインヒビターを他の化学療法物質（例えば、他の抗癌化学療法物質または鎮吐薬）と共に投与することによる神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、小児癌または膵癌の治療方法を含む。他の化学療法物質は、それが投与される個体における有益な生理的応答を惹起する任意の物質を含み、例えば、この場合、該物質は、それが投与される対象における疾患の症状または原因を軽減または排除する。他の化学療法物質は、任意の抗癌化学療法物質を含む。抗癌療法物質は、例えば、それが投与される対象における癌の症状または原因を軽減または排除するいずれかの物質である。
【０１５４】
本発明の１つの実施形態においては、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）（ＶＰ−１６；
【化３５】
【０１５５】
）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１５６】
本発明の１つの実施形態においては、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）
【化３６】
【０１５７】
と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１５８】
本発明の１つの実施形態においては、公開米国特許出願番号Ｕ．Ｓ．２００４／０２０９８７８Ａ１に開示されているいずれかの化合物（例えば、
【化３７】
【０１５９】
により表されるコア構造を含むもの）またはドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）
【化３８】
【０１６０】
、例えば、ケリックス（Ｃａｅｌｙｘ）またはＤｏｘｉｌ（登録商標）（ドキソルビシンＨＣｌリポソーム注射剤；Ｏｒｔｈｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌ．Ｐ；Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。Ｄｏｘｉｌ（登録商標）は、Ｎ−（カルボニル−メトキシポリエチレングリコール２０００）−１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンナトリウム塩（ＭＰＥＧ−ＤＳＰＥ）、完全水素化大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）およびコレステロールから構成されるＳＴＥＡＬＴＨ（登録商標）リポソーム担体中にドキソルビシンを含む。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１６１】
本発明の１つの実施形態においては、５’−デオキシ−５−フルオロウリジン
【化３９】
【０１６２】
と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１６３】
本発明の１つの実施形態においては、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）
【化４０】
【０１６４】
と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１６５】
本発明の１つの実施形態においては、テモゾロミド（ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）
【化４１】
【０１６６】
；いずれかのＣＤＫインヒビター、例えばＺＫ−３０４７０９、セリシクリブ（Ｓｅｌｉｃｉｃｌｉｂ）（Ｒ−ロスコビチン（ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ））
【化４２】
【０１６７】
；いずれかのＭＥＫインヒビター、例えばＰＤ０３２５９０１
【化４３】
【０１６８】
、ＡＺＤ−６２４４；カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）（５’−デオキシ−５−フルオロ−Ｎ−［（ペンチルオキシ）カルボニル］−シチジン）；またはＬ−グルタミン酸、Ｎ−［４−［２−（２−アミノ−４，７−ジヒドロ−４−オキソ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル）エチル］ベンゾイル］−二ナトリウム塩七水和物
【化４４】
【０１６９】
；ペメトレックスト（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）二ナトリウム七水和物と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１７０】
本発明の１つの実施形態においては、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ）
【化４５】
【０１７１】
（Ｓｔｏｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９３（１６）：４０７４−４０７５（１９７１）；Ｂｅｉｓｌｅｒら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１４（１１）：１１１６−１１１７（１９６２））またはイチノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）
【化４６】
【０１７２】
（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標）；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏ．；Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１７３】
本発明の１つの実施形態においては、ＦＯＬＦＯＸ療法（オキサリプタチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）
【化４７】
【０１７４】
および注入用フルオロウラシル（ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）
【化４８】
【０１７５】
およびフォリン酸
【化４９】
【０１７６】
）（Ｃｈａｏｕｃｈｅら，Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（３）：２８８−２８９（２０００）；ｄｅ Ｇｒａｍｏｎｔら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１８（１６）：２９３８−２９４７（２０００））と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１７７】
本発明の１つの実施形態においては、抗エストロゲン物質、例えば
【化５０】
【０１７８】
（タモシキフェン（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＮｏｌｖａｄｅｘ（登録商標）として販売されている）または
【化５１】
【０１７９】
（クエン酸トレミフェン（ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ）；Ｓｈｉｒｅ ＵＳ，Ｉｎｃ．；Ｆｌｏｒｅｎｃｅ，ＫＹによりＦａｒｅｓｔｏｎ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１８０】
本発明の１つの実施形態においては、アロマターゼインヒビター、例えば
【化５２】
【０１８１】
（アナストラゾール（ａｎａｓｔｒａｚｏｌｅ）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＡｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）として販売されている）、
【化５３】
【０１８２】
（エキセメスタン（ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）；Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩによりＡｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）として販売されている）または
【化５４】
【０１８３】
（レトロゾール（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪによりＦｅｍａｒａ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１８４】
本発明の１つの実施形態においては、エストロゲン、例えばＤＥＳ（ジエチルスチルベストロール）、
【化５５】
【０１８５】
（エストラジオール；Ｗａｒｎｅｒ Ｃｈｉｌｃｏｔｔ，Ｉｎｃ．；Ｒｏｃｋａｗａｙ，ＮＪによりＥｓｔｒｏｌ（登録商標）として販売されている）またはコンジュゲート化エストロゲン（Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．；Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡによりＰｒｅｍａｒｉｎ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１８６】
本発明の１つの実施形態においては、抗血管新生物質、例えばベバシズマブ（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）（Ａｖａｓｔｉｎ（商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）、抗ＶＥＧＦＲ−２抗体ＩＭＣ−１Ｃ１１、他のＶＥＧＦＲインヒビター、例えばＣＨＩＲ−２５８
【化５６】
【０１８７】
、ＷＯ２００４／１３１４５（例えば、コア構造式：
【化５７】
【０１８８】
を含むもの）、ＷＯ２００４／０９５４２（例えば、コア構造式：
【化５８】
【０１８９】
を含むもの）、ＷＯ００／７１１２９（例えば、コア構造式：
【化５９】
【０１９０】
を含むもの）、ＷＯ２００４／０９６０１（例えば、コア構造式：
【化６０】
【０１９１】
を含むもの）、ＷＯ２００４／０１０５９（例えば、コア構造式：
【化６１】
【０１９２】
を含むもの）、ＷＯ０１／２９０２５（例えば、コア構造式：
【化６２】
【０１９３】
を含むもの）、ＷＯ０２／３２８６１（例えば、コア構造式：
【化６３】
【０１９４】
を含むもの）またはＷＯ０３／８８９００（例えば、コア構造式：
【化６４】
【０１９５】
を含むもの）に記載されているインヒビターのいずれか；３−［５−（メチルスルホニルピペラジンメチル）−インドリル］−キノリン；バタラニブ（Ｖａｔａｌａｎｉｂ）
【化６５】
【０１９６】
；ＰＴＫ／ＺＫ；ＣＰＧ−７９７８７；ＺＫ−２２２５８４）、ＡＧ−０１３７３６
【化６６】
【０１９７】
およびＶＥＧＦトラップ（ＡＶＥ−０００５）、ＶＥＧＦ受容体１および２の一部を含む可溶性おとり（デコイ）受容体と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１９８】
本発明の１つの実施形態においては、ＬＨＲＨ（黄体形成ホルモン放出ホルモン）アゴニスト、例えば［Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ ｔ ）６，Ａｚｇｌｙ １０］の酢酸塩（ｐｙｒｏ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ ｔ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｚｇｌｙ−ＮＨ２酢酸塩［Ｃ５９Ｈ８４Ｎ１８Ｏ１４・（Ｃ２Ｈ４Ｏ２）ｘ（ここで、ｘ＝１〜２．４）］；
【化６７】
【０１９９】
（ゴセレリン（ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）アセタート；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ ＵＫ Ｌｉｍｉｔｅｄ；Ｍａｃｃｌｅｓｆｉｅｌｄ，ＥｎｇｌａｎｄによりＺｏｌａｄｅｘ（登録商標）として販売されている）
【化６８】
【０２００】
（リュープロリド（ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ）アセタート；Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ Ｉｎｃ．；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹによりＥｌｉｇａｒｄ（登録商標）として販売されている）または
【化６９】
【０２０１】
（トリプトレリン（ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）パモアート；Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩによりＴｒｅｌｓｔａｒ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２０２】
本発明の１つの実施形態においては、黄体ホルモン物質、例えば
【化７０】
（メドロキシプロゲステロン（ｍｅｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ）アセタート；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏ．；Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩによりＰｒｏｖｅｒａ（登録商標）として販売されている）、
【化７１】
【０２０３】
（ヒドロキシプロゲステロン（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ）カプロアート；１７−（（１−オキソヘキシル）オキシ）プレグナ）−４−エン−３，２０−ジオン）、メゲストロール（ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ）アセタートまたはプロゲスチン（ｐｒｏｇｅｓｔｉｎ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２０４】
本発明の１つの実施形態においては、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、例えば
【化７２】
【０２０５】
（ラロキシフェン（ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ）；Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ；Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮによりＥｖｉｓｔａ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２０６】
本発明の１つの実施形態においては、抗アンドロゲン物質、例えば
【化７３】
【０２０７】
（ビカルタミド（ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＣＡＳＯＤＥＸ（登録商標）により販売されている）；
【化７４】
【０２０８】
（フルタミド（ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）；２−メチル−Ｎ−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］プロパンアミド；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪによりＥｕｌｅｘｉｎ（登録商標）として販売されている）；
【化７５】
【０２０９】
（ニルタミド（ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ）；Ａｖｅｎｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．；Ｋａｎｓａｓ Ｃｉｔｙ，ＭＯによりＮｉｌａｎｄｒｏｎ（登録商標）として販売されている）および
【化７６】
【０２１０】
（メゲストロール（Ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ）アセタート；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＳｑｕｉｂｂによりＭｅｇａｃｅ（登録商標）として販売されている）（これらに限定されるものではない）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２１１】
本発明の１つの実施形態においては、ＥＧＦ受容体またはＨＥＲ２の作用に拮抗する１以上のインヒビター、例えば、ＣＰ−７２４７１４
【化７７】
【０２１２】
；ＴＡＫ−１６５
【化７８】
【０２１３】
；ＨＫＩ−２７２
【化７９】
【０２１４】
；ＯＳＩ−７７４
【化８０】
【０２１５】
；エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ），Ｈｉｄａｌｇｏら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９（１３）：３２６７−３２７９（２００１）、ラパタニブ（Ｌａｐａｔａｎｉｂ）
【化８１】
【０２１６】
；ＧＷ２０１６；Ｒｕｓｎａｋら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ １：８５−９４（２００１）；Ｎ−｛３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル｝−６−［５−（｛［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ｝メチル）−２−フリル］−４−キナゾリンアミン；ＰＣＴ出願番号ＷＯ９９／３５１４６）、カネルチニブ（Ｃａｎｅｒｔｉｎｉｂ）（ＣＩ−１０３３；
【化８２】
【０２１７】
；Ｅｒｌｉｃｈｍａｎら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１（２）：７３９−４８（２００１）；Ｓｍａｉｌｌら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（７）：１３８０−９７（２０００））、ＡＢＸ−ＥＧＦ抗体（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．；Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ；Ｙａｎｇら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５９（６）：１２３６−４３（１９９９）；Ｙａｎｇら，Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｏｎｃｏｌ Ｈｅｍａｔｏｌ．３８（１）：１７−２３（２００１））、エルビツクス（ｅｒｂｉｔｕｘ）（米国特許第６，２１７，８６６号；ＩＭＣ−Ｃ２２５，セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）；Ｉｍｃｌｏｎｅ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ）、ＥＫＢ−５６９
【化８３】
【０２１８】
（Ｗｉｓｓｎｅｒら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６（１）：４９−６３（２００３））、ＰＫＩ−１６６
【化８４】
【０２１９】
（ＣＧＰ−７５１６６）、ＧＷ−５７２０１６、任意の抗ＥＧＦＲ抗体および任意の抗ＨＥＲ２抗体（これらに限定されるものではない）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２２０】
本発明の１つの実施形態においては、
【化８５】
【０２２１】
（ロナファルニブ（ｌｏｎａｆａｒｎｉｂ）；Ｓａｒａｓａｒ（商標）；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ；Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。もう１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターと組合された以下のＦＰＴインヒビターの１つを提供する。
【化８６】
【０２２２】
または
【化８７】
【０２２３】
これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２２４】
ＩＧＦ１Ｒインヒビターと組合せて提供されうる他のＦＰＴインヒビターには、以下のものが含まれる：ＢＭＳ−２１４６６２
【化８８】
【０２２５】
（Ｈｕｎｔら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（２０）：３５８７−９５（２０００）；Ｄａｎｃｅｙら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２２５９−２２６７（２００２）；（Ｒ）−７−シアノ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１−（１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル）−３−（フェニルメチル）−４−（２−チエニルスルホニル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン））およびＲ１５５７７７（チピファルニブ（ｔｉｐｉｆａｒｎｉｂ）；Ｇａｒｎｅｒら，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．３０（７）：８２３−３０（２００２）；Ｄａｎｃｅｙら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２２５９−２２６７（２００２）；（Ｂ）−６−［アミノ（４−クロロフェニル）（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）−メチル］−４−（３−クロロフェニル）−１−メチル−２（１Ｈ）−キノリノン］；
【化８９】
【０２２６】
（Ｚａｒｎｅｓｔｒａ（商標）として販売されている；Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ；Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２２７】
本発明の１つの実施形態においては、以下のものと組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。
【化９０】
【０２２８】
（アミフォスチン（Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ））；
【化９１】
【０２２９】
（ＮＶＰ−ＬＡＱ８２４；Ａｔａｄｊａら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６４：６８９−６９５（２００４））、
【化９２】
【０２３０】
（スベロイルアナリド（ｓｕｂｅｒｏｙｌ ａｎａｌｉｄｅ）ヒドロキサム酸）、
【化９３】
【０２３１】
（バルプロン酸（Ｖａｌｐｒｏｉｃ ａｃｉｄ）；Ｍｉｃｈａｅｌｉｓら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６５：５２０−５２７（２００４））、
【化９４】
【０２３２】
（トリコスタチン（ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ）Ａ）、
【化９５】
【０２３３】
（ＦＫ−２２８；Ｆｕｒｕｍａｉら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６２：４９１６−４９２１（２００２））、
【化９６】
【０２３４】
（ＳＵ１１２４８；Ｍｅｎｄｅｌら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．９（１）：３２７−３７（２００３））、
【化９７】
【０２３５】
（ＢＡＹ４３−９００６）、
【化９８】
【０２３６】
（ＫＲＮ９５１）、
【化９９】
【０２３７】
（アミノグルテチミド（Ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ））；
【化１００】
【０２３８】
（アムサアクリン（Ａｍｓａｃｒｉｎｅ））；
【化１０１】
【０２３９】
（アナグレリド（Ａｎａｇｒｅｌｉｄｅ））；
【化１０２】
【０２４０】
（Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ（アナストロゾール）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＡｒｉｍｉｄｅｘとして販売されている）；アスパラギナーゼ；カルメット−ゲラン桿菌（ＢＣＧ）ワクチン（Ｇａｒｒｉｄｏら，Ｃｙｔｏｂｉｏｓ．９０（３６０）：４７−６５（１９９７））；
【化１０３】
【０２４１】
（ブレオマイシン）；
【化１０４】
【０２４２】
（ブセレリン（Ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ））；
【化１０５】
【０２４３】
（ブスルファン（Ｂｕｓｕｌｆａｎ）；１，４−ブタンジオール ジメタンスルホナート；ＥＳＰ Ｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．；Ｅｄｉｓｏｎ，Ｎｅｗ ＪｅｒｓｅｙによりＢｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）として販売されている）；
【化１０６】
【０２４４】
（カルボプラチン（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪによりＰａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１０７】
【０２４５】
（カルムスチン（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ））；
【化１０８】
【０２４６】
（クロラムブシル（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ））；
【化１０９】
【０２４７】
（シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ））；
【化１１０】
【０２４８】
（クラドリビン（Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ））；
【化１１１】
【０２４９】
（クロドロナート（Ｃｌｏｄｒｏｎａｔｅ））；
【化１１２】
【０２５０】
（シクロホスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ））；
【化１１３】
【０２５１】
（シプロテロン（Ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ））；
【化１１４】
【０２５２】
（シタラビン（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ））；
【化１１５】
【０２５３】
（ダカルバジン（Ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ））；
【化１１６】
【０２５４】
（ダクチノマイシン（Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ））；
【化１１７】
【０２５５】
（ダウノルビシン（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ））；
【化１１８】
【０２５６】
（ジエチルシチルベストロール（Ｄｉｅｔｈｙｌｓｔｉｌｂｅｓｔｒｏｌ））；
【化１１９】
【０２５７】
（エピルビシン（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ））；
【化１２０】
【０２５８】
（フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ））；
【化１２１】
【０２５９】
（フルドロコルチゾン（Ｆｌｕｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ））；
【化１２２】
【０２６０】
（フルオキシメステロン（Ｆｌｕｏｘｙｍｅｓｔｅｒｏｎｅ））；
【化１２３】
【０２６１】
（フルタミド（Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ））；
【化１２４】
【０２６２】
（ヒドロキシ尿素（Ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ））；
【化１２５】
【０２６３】
（イダルビシン（Ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ））；
【化１２６】
【０２６４】
（イフォスファミド（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ））；
【化１２７】
【０２６５】
（イマチニブ（Ｉｍａｔｉｎｉｂ）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪによりＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標）として販売されている）；
【化１２８】
【０２６６】
（ロイコボリン（Ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ））；
【化１２９】
【０２６７】
（ロイプロリド（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ））；
【化１３０】
【０２６８】
（レバミゾール（Ｌｅｖａｍｉｓｏｌｅ））；
【化１３１】
【０２６９】
（ロムスチン（Ｌｏｍｕｓｔｉｎｅ））；
【化１３２】
【０２７０】
（メクロルエタミン（Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ））；
【化１３３】
【０２７１】
（メルファラン（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ）；Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｗａｒｒｅｎ，ＮＪによりＡｌｋｅｒａｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１３４】
【０２７２】
（メルカプトプリン（Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ））；
【化１３５】
【０２７３】
（メスナ（Ｍｅｓｎａ））；
【化１３６】
【０２７４】
（メトトレキセート（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ））；
【化１３７】
【０２７５】
（マイトマイシン（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ））；
【化１３８】
【０２７６】
（ミトタン（Ｍｉｔｏｔａｎｅ））；
【化１３９】
【０２７７】
（ミトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ））；
【化１４０】
【０２７８】
（ニルタミド（Ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ））；オクトレオチド（ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）（Ｌ−システインアミド，Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−システイニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｄ−トリプトフィル−Ｌ−リシル−Ｌ−トレオニル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）プロピル］−，環状（２ ７）−ジスルフィド；［Ｒ Ｒ＊，Ｒ＊）］；
【化１４１】
【０２７９】
；Ｋａｔｚら，Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍ．８（４）：２５５−７３（１９８９）；Ｓａｎｄｏｓｔａｔｉｎ ＬＡＲ（登録商標）Ｄｅｐｏｔとして販売されている；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍ．Ｃｏｒｐ；Ｅ． Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪ）；オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）
【化１４２】
【０２８０】
；Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ Ｉｎｃ．；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹによりＥｌｏｘａｔｉｎ（商標）として販売されている）；
【化１４３】
【０２８１】
（パミドロナート（Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪによりＡｒｅｄｉａ（登録商標）として販売されている）；
【化１４４】
【０２８２】
（ペントスタチン（Ｐｅｎｔｏｓｔａｔｉｎ）；Ｓｕｐｅｒｇｅｎ；Ｄｕｂｌｉｎ，ＣＡによりＮｉｐｅｎｔ（登録商標）として販売されている）；
【化１４５】
【０２８３】
（プリカマイシン（Ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ））；
【化１４６】
【０２８４】
（ポルフィマー（Ｐｏｒｆｉｍｅｒ））；Ａｘｃａｎ Ｓｃａｎｄｉｐｈａｒｍ Ｉｎｃ．；Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬによりＰｈｏｔｏｆｒｉｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１４７】
【０２８５】
（プロカルバジン（Ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ））；
【化１４８】
【０２８６】
（ラルチトレックスト（Ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ））；リツキィマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．；Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡによりＲｉｔｕｘａｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１４９】
【０２８７】
（ストレプトゾシン（Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ））；
【化１５０】
【０２８８】
（テニポシド（Ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ））；
【化１５１】
【０２８９】
（テストステロン（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ））；
【化１５２】
【０２９０】
（サリドマイド（Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ））；
【化１５３】
【０２９１】
（チオグアニン（Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ））；
【化１５４】
【０２９２】
（チオテパ（Ｔｈｉｏｔｅｐａ））；
【化１５５】
【０２９３】
（トレチノイン（Ｔｒｅｔｉｎｏｉｎ））；
【化１５６】
【０２９４】
（ビンデシン（Ｖｉｎｄｅｓｉｎｅ））または１３−シス−レチノイン酸
【化１５７】
【０２９５】
。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９６】
本発明の１つの実施形態においては、以下のいずれかの１以上と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する：フェニルアラニンマスタード、ウラシルマスタード、エストラムスチン（ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ）、アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、フロクスウリジン（ｆｉｏｘｕｒｉｄｉｎｅ）、５−デオキシウリジン、シトシンアラビノシド、６−メルカプトプリン、デオキシコフォルマイシン（ｄｅｏｘｙｃｏｆｏｒｍｙｃｉｎ）、カルシトリオール（ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ）、バルルビシン（ｖａｌｒｕｂｉｃｉｎ）、ミトラマイシン（ｍｉｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、ビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、ラゾキシン（ｒａｚｏｘｉｎ）、マリマスタット（ｍａｒｉｍａｓｔａｔ）、ＣＯＬ−３、ネオバスタット（ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、ＢＭＳ−２７５２９１、スクアラミン（ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ）、エンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＥＭＤ１２１９７４、インターロイキン−１２、ＩＭ８６２、アンジオスタチン、ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）、ヨードキシフェン（ｉｄｏｘｙｆｅｎｅ）、スピロノラクトン（ｓｐｉｒｏｎｏｌａｃｔｏｎｅ）、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、シミチジン（ｃｉｍｉｔｉｄｉｎｅ）、トラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、デニロイキン（ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ）、ジフチトックス（ｄｉｆｔｉｔｏｘ）、ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、ボルテジミブ（ｂｏｒｔｅｚｉｍｉｂ）、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）Ｂ、ＢＭＳ−２４７５５０（例えば、Ｌｅｅら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７：１４２９−１４３７（２００１）を参照されたい）、ＢＭＳ−３１０７０５、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）（３−ヒドロキシタモキシフェン）、４−ヒドロキシタモキシフェン、ピペンドキシフェン（ｐｉｐｅｎｄｏｘｉｆｅｎｅ）、ＥＲＡ−９２３、アルゾキシフェン（ａｒｚｏｘｉｆｅｎｅ）、フルベストラント（ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）、アコルビフェン（ａｃｏｌｂｉｆｅｎｅ）、ラソフォキシフェン（ｌａｓｏｆｏｘｉｆｅｎｅ）（ＣＰ−３３６１５６）、ヨードキシフェン（ｉｄｏｘｉｆｅｎｅ）、ＴＳＥ−４２４、ＨＭＲ−３３３９、ＺＫ１８６６１９、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４（Ｔｈｏｍａｓら，Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ．３０（３ Ｓｕｐｐｌ ６）：３２−８（２００３））、ヒト化抗ＶＥＧＦ抗体ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、ＶＸ−７４５（Ｈａｄｄａｄ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ ２（８）：１０７０−６（２００１））、ＰＤ １８４３５２（Ｓｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄら，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．５：８１０−８１６（１９９９））、ラマパイシン（ｒａｐａｍｙｃｉｎ）、ＣＣＩ−７７９（Ｓｅｈｇａｌら，Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．，１４：１−２２（１９９４）；Ｅｌｉｔ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ ３（８）：１２４９−５３（２００２））、ＬＹ２９４００２、ＬＹ２９２２２３、ＬＹ２９２６９６、ＬＹ２９３６８４、ＬＹ２９３６４６（Ｖｌａｈｏｓら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９（７）：５２４１−５２４８（１９９４））、ウォルトマンニン（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ）、ＢＡＹ−４３−９００６（Ｗｉｌｈｅｌｍら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２２５５−２２５７（２００２））、ＺＭ３３６３７２、Ｌ−７７９，４５０、Ｌｏｗｉｎｇｅｒら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓ．８：２２６９−２２７８（２００２）に開示されている任意のＲａｆインヒビター；フラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）（Ｌ８６−８２７５／ＨＭＲ １２７５；Ｓｅｎｄｅｒｏｗｉｃｚ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９（５６）：６６００−６６０６（２０００））またはＵＣＮ−０１（７−ヒドロキシ スタウロスポリン（ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）；Ｓｅｎｄｅｒｏｗｉｃｚ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９（５６）：６６００−６６０６（２０００））。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９７】
本発明のもう１つの実施形態においては、スチリル置換ヘテロアリールＥＧＦＲインヒビターを開示している米国特許第５，６５６，６５５号、ビスモノおよび／または二環式アリールヘテロアリール炭素環式およびヘテロ炭素環式ＥＧＦＲおよびＰＤＧＦＲインヒビターを開示している米国特許第５，６４６，１５３号、ＥＧＦＲを抑制する三環式ピリミジン化合物を開示している米国特許第５，６７９，６８３号、受容体チロシンキナーゼ抑制活性を有するキナゾリン誘導体を開示している米国特許第５，６１６，５８２号、ＥＧＦＲを抑制する構造を有する化合物を開示しているＦｒｙら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６５ １０９３−１０９５（１９９４）（Ｆｒｙらの図１を参照されたい）、ＥＧＦＲを抑制するヘテロアリールエテンジイルまたはヘテロアリールエテンジイルアリール化合物を開示している米国特許第５，１９６，４４６号、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲおよびＦＧＦＲファミリーの受容体を抑制するＰＤ１６６２８５［ＰＤ１６６２８５は６−（２，６−ジクロロフェニル）−２−（４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルアミノ）−８−メチル−８Ｈ−ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−７−オンとして特定されている］として特定された化合物を開示しているＰａｎｅｋら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ２８３：１４３３−１４４４ （１９９７）に記載されている化合物のいずれかの１以上と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９８】
本発明の１つの実施形態においては、以下のいずれかの１以上と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する：ＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ；ペジル化）または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ａ、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ｂ、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ｃ、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファｎ−１、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファｎ−３およびＰＥＧ化、非ＰＥＧ化共通（コンセンサス）インターフェロンまたはアルブミン−インターフェロン−アルファ。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９９】
本明細書中で用いる「インターフェロンアルファ」なる語は、細胞増殖を抑制し免疫応答をモジュレーションする、高度に相同な種に特異的なタンパク質ファミリーを意味する。典型的な適当なインターフェロン−アルファには、組換えインターフェロンアルファ−２ｂ、組換えインターフェロンアルファ−２ａ、組換えインターフェロンアルファ−２ｃ、アルファ２インターフェロン、インターフェロンアルファ−ｎ１（ＩＮＳ）、天然アルファインターフェロンの精製混合物、共通アルファインターフェロン、例えば、米国特許第４，８９７，４７１号および第４，６９５，６２３号（特にその実施例７、８または９）、またはインターフェロンアルファ−ｎ３、天然アルファインターフェロンの混合物に記載されているものが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０３００】
インターフェロンアルファ−２ａはＨｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）によりＲＯＦＥＲＯＮ−Ａ（登録商標）として販売されている。
【０３０１】
インターフェロンアルファ−２ｂはＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）によりＩＮＴＲＯＮ−Ａ（登録商標）として販売されている。インターフェロンアルファ２ｂの製造は、例えば米国特許第４，５３０，９０１号に記載されている。
【０３０２】
インターフェロンアルファ−ｎ３は、Ｈｅｍｉｓｐｈｅｒｘ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）によりＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ ＩＮＪＥＣＴＩＯＮ（登録商標）として販売されている天然インターフェロンの混合物である。
【０３０３】
インターフェロンアルファ−ｎ１（ＩＮＳ）は、Ｇｌａｘｏ−Ｓｍｉｔｈ−Ｋｌｉｎｅ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，ＮＣ）によりＷＥＬＬＦＥＲＯＮ（登録商標）として販売されている天然インターフェロンの混合物である。
【０３０４】
共通インターフェロンは、Ｉｎｔｅｒｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．（Ｂｒｉｓｂａｎｅ，ＣＡ）によりＩＮＦＥＲＧＥＮ（登録商標）として販売されている。
【０３０５】
インターフェロンアルファ−２ｃは、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ，Ｉｎｃ．（Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ，ＣＴ）によりＢＥＲＯＦＯＲ（登録商標）として販売されている。
【０３０６】
天然インターフェロンの精製混合物は、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ；Ｔｏｋｙｏ，ＪａｐａｎによりＳＵＭＩＦＥＲＯＮ（登録商標）として販売されている。
【０３０７】
本明細書中で用いる「ＰＥＧ化インターフェロンアルファ」なる語は、インターフェロンアルファ、好ましくはインターフェロンアルファ−２ａおよびアルファ−２ｂのポリエチレングリコール修飾コンジュゲートを意味する。好ましいポリエチレングリコール−インターフェロンアルファ−２ｂコンジュゲートはＰＥＧ１２０００−インターフェロンアルファ−２ｂである。本明細書中で用いる「１２，０００分子量ポリエチレングリコールコンジュゲート化インターフェロンアルファ」および「ＰＥＧ１２０００−ＩＦＮアルファ」なる語は、１２０００の平均分子量を有するポリエチレングリコールとインターフェロンアルファ−２ａまたは−２ｂアミノ基との間にウレタン連結を含有する国際出願番号ＷＯ ９５／１３０９０の方法により製造されるようなコンジュゲートを含む。ＰＥＧ化インターフェロンアルファＰＥＧ１２０００−ＩＦＮ−アルファ−２ｂはＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから入手可能である。
【０３０８】
好ましいＰＥＧ １２０００−インターフェロンアルファ−２ｂは、インターフェロンアルファ−２ｂ分子内のリシン残基のイプシロンアミノ基にＰＥＧ重合体を結合させることにより製造されうる。単一のＰＥＧ１２０００分子はウレタン連結によりＩＦＮアルファ−２ｂ分子上の遊離アミノ基にコンジュゲート化されうる。このコンジュゲートは、結合しているＰＥＧ１２０００の分子量により特徴づけられる。ＰＥＧ１２０００−ＩＦＮアルファ−２ｂコンジュゲートは、注射用の凍結乾燥粉末として製剤化されうる。
【０３０９】
ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ｂはＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）によりＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）として販売されている。
【０３１０】
ＰＥＧ化インターフェロン−アルファ−２ａはＨｏｆｆｉｎａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）によりＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）として販売されている。
【０３１１】
他のインターフェロンアルファコンジュゲートは、インターフェロンアルファを水溶性重合体に結合させることにより製造されうる。そのような重合体の非限定的な一覧は、他のポリアルキレンオキシドホモ重合体、例えばポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化ポリオール、その共重合体およびそのブロック共重合体を含む。ポリアルキレンオキシドに基づく重合体の代わりとして、有効に非抗原性である物質、例えばデキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物に基づく重合体などが使用されうる。そのようなインターフェロンアルファ−重合体コンジュゲートは、例えば米国特許第４，７６６，１０６号、米国特許第４，９１７，８８８号、欧州特許出願第０ ２３６ ９８７号もしくは第０ ５９３ ８６８号または国際公開番号ＷＯ ９５／１３０９０に記載されている。
【０３１２】
非経口投与に適したＰＥＧ化インターフェロンアルファの医薬組成物は、適当なバッファー、例えばＴｒｉｓ−ＨＣｌ、酢酸塩またはリン酸塩、例えば二塩基性リン酸ナトリウム／一塩基性リン酸ナトリウムバッファー、および医薬上許容される賦形剤（例えば、スクロース）、担体（例えば、ヒト血漿アルブミン）、等張化剤（例えば、ＮａＣｌ）、保存剤（例えば、チメロソール、クレゾールまたはベンジルアルコール）および界面活性剤（例えば、トゥイーンまたはポリソルベート）で注射用無菌水において製剤化されうる。該ＰＥＧ化インターフェロンアルファは２℃〜８℃の冷凍下で凍結乾燥粉末として保存されうる。還元（再構成）水溶液は、２℃〜８℃で保存された場合に安定であり、還元から２４時間以内に使用される。例えば、米国特許第４，４９２，５３７号、第５，７６２，９２３号および第５，７６６，５８２号を参照されたい。また、該還元水溶液は、予め充填された多用量シリンジ（例えば、インスリンのような薬物の運搬に有用なもの）中で保存されうる。典型的な適当なシリンジには、ペン型シリンジに付属した予め充填されたバイアルを含む系、例えば、Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋから入手可能なＮＯＶＯＬＥＴ（登録商標）Ｎｏｖｏ Ｐｅｎ、またはＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから入手可能なＲＥＤＩＰＥＮ（登録商標）が含まれる。他のシリンジ系には、希釈剤および凍結乾燥ＰＥＧ化インターフェロンアルファ粉末を別々の区画に含有するガラスカートリッジを含むペン型シリンジが含まれる。
【０３１３】
本発明の範囲は、１以上の他の抗癌化学療法物質（例えば、本明細書に記載されているもの）と組合された、そして場合によっては（すなわち、存在していても存在していなくてもよい）１以上の鎮吐薬［パロノセトロン（ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ）（ＡｌｏｘｉとしてＭＧＩ Ｐｈａｒｍａにより販売されている）、アプレピタント（ａｐｒｅｐｉｔａｎｔ）（ＥｍｅｎｄとしてＭｅｒｃｋ ａｎｄ Ｃｏ．；Ｒａｈｗａｙ，ＮＪにより販売されている）、ジフェンヒドラミン（ｄｉｐｈｅｎｈｙｄｒａｍｉｎｅ）（Ｂｅｎａｄｒｙｌ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、ヒドロキシジン（ｈｙｄｒｏｘｙｚｉｎｅ）（Ａｔａｒａｘ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、メトクロプラミド（ｍｅｔｏｃｌｏｐｒａｍｉｄｅ）（Ｒｅｇｌａｎ（登録商標）としてＡＨ Ｒｏｂｉｎｓ Ｃｏ，；Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡにより販売されている）、ロラゼパム（ｌｏｒａｚｅｐａｍ）（Ａｔｉｖａｎ（登録商標）としてＷｙｅｔｈ；Ｍａｄｉｓｏｎ，ＮＪにより販売されている）、アルプラゾラム（ａｌｐｒａｚｏｌａｍ）（Ｘａｎａｘ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、ハロペリドール（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ）（Ｈａｌｄｏｌ（登録商標）としてＯｒｔｈｏ−ＭｃＮｅｉｌ；Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪにより販売されている）、ドロペリドール（ｄｒｏｐｅｒｉｄｏｌ）（Ｉｎａｐｓｉｎｅ（登録商標））、ドロナビノール（ｄｒｏｎａｂｉｎｏｌ）（Ｍａｒｉｎｏｌ（登録商標）としてＳｏｌｖａｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．；Ｍａｒｉｅｔｔａ，ＧＡにより販売されている）、デキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）（Ｄｅｃａｄｒｏｎ（登録商標）としてＭｅｒｃｋ ａｎｄ Ｃｏ．；Ｒａｈｗａｙ，ＮＪにより販売されている）、メチルプレドニゾロン（ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）（Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、プロクロルペラジン（ｐｒｏｃｈｌｏｒｐｅｒａｚｉｎｅ）（Ｃｏｍｐａｚｉｎｅ（登録商標）としてＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ；Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，ＮＣ）、グラニセトロン（ｇｒａｎｉｓｅｔｒｏｎ）（Ｋｙｔｒｉｌ（登録商標）としてＨｏｆｆｉｎａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ｉｎｃ．；Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪにより販売されている）、オンダンセトロン（ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ）（Ｚｏｆｒａｎ（登録商標）としてＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ；Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，ＮＣにより販売されている）、ドラセトロン（ｄｏｌａｓｅｔｒｏｎ）（Ａｎｚｅｍｅｔ（登録商標）としてＳａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、トロピセトロン（ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ）（Ｎａｖｏｂａｎ（登録商標）としてＮｏｖａｒｔｆｓ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪにより販売されている）を含むが、これらに限定されるものではない］と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを含む組成物をも含む。
【０３１４】
鎮吐薬を含む組成物は、抗癌化学療法の一般的副作用である悪心の予防または治療に有用である。したがって、本発明はまた、場合によっては１以上の他の化学療法物質（例えば、本明細書に記載されているもの）と組合された、そして場合によっては１以上の鎮吐薬と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを投与することによる、対象における癌の治療または予防方法を含む。
【０３１５】
本発明は更に、外科的腫瘍摘出術または抗癌放射線治療と組合せて、場合によってはもう１つの化学療法物質および／または鎮吐薬（例えば、前記のもの）と組合せてＩＧＦＲ１抑制物質を投与することによる、任意の段階またはタイプの神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法を含む。
【０３１６】
エルロチニブ
本発明の広範な態様は、治療を受けるヒト患者に対する有意な副作用を伴うことなく癌を有効に治療する方法を提供する。本発明の治療の臨床的結果は幾分予想外のものである。なぜなら、抗ＩＧＦＲ−１Ｒ抗体とエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）とを含む該組合せ療法は、エルロチニブ耐性癌の治療において、より有効だと考えられるからである。また、該組合せ療法（ＭＫ−０６４６とエルロチニブとの組合せ）は、種々の癌において、エルロチニブ単独の場合より有効だと考えられる。他のチロシンキナーゼインヒビターもＩＧＦ−１Ｒ抗体と組合されうると理解される。あるいは、該組合せ療法は２以上のチロシンキナーゼインヒビターを含むことが可能であり、したがって、化学療法物質単独の場合と比較して有害な事象の付随的発生を有意に増加させない少なくとも２つの化学療法物質を含む化学療法カクテルと組合された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を含みうる。
【０３１７】
受容体チロシンキナーゼは、上皮増殖因子のような増殖因子に対する細胞外結合ドメイン、膜貫通ドメイン、およびタンパク質内の特異的チロシン残基をリン酸化して細胞増殖に影響を及ぼすキナーゼとして機能する細胞内部分を有する、細胞膜にわたって広がる大きな酵素である。そのようなキナーゼは、しばしば、一般的なヒトの癌、例えば肺癌、乳癌、胃腸癌、例えば結腸、直腸または胃癌、白血病および卵巣、気管支または膵臓癌において、異常に発現されることが公知である。チロシンキナーゼ活性を有する上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）は、脳、肺、扁平上皮細胞、膀胱、胃、乳房、頭頚部、食道、婦人科および甲状腺腫瘍のような多数の癌において、突然変異および／過剰発現していることも示されている。
【０３１８】
したがって、受容体チロシンキナーゼのインヒビターは哺乳類癌細胞の増殖の選択的インヒビターとして有用であると認識されている。例えば、チロシンキナーゼインヒビターであるエルブスタチン（ｅｒｂｓｔａｔｉｎ）は、上皮増殖因子受容体チロシンキナーゼ（ＥＧＦＲ）を発現する移植ヒト乳癌の、胸腺欠損ヌードマウスにおける成長を選択的に低下させるが、ＥＧＦ受容体を発現しない別の癌の成長には影響を及ぼさない。
【０３１９】
スチレン誘導体のような種々の他の化合物もチロシンキナーゼ抑制特性を有することが示されている。最近、５つの欧州特許公開、すなわち、ＥＰ ０ ５６６ ２２６ Ａ１、ＥＰ ０ ６０２ ８５１ Ａ１、ＥＰ ０ ６３５ ５０７ Ａ１、ＥＰ ０ ６３５ ４９８ Ａ１およびＥＰ ０ ５２０ ７２２Ａ１は、あるキナゾリン誘導体が、それらのチロシンキナーゼ抑制特性から生じる抗癌特性を有することを開示している。また、ＰＣＴ公開ＷＯ ９２／２０６４２はチロシンキナーゼインヒビターとしてビス−モノおよび二環式アリールおよびヘテロアリール化合物を開示している。
【０３２０】
エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）の製造および使用方法は、１９９６年５月２８日付けで出願され現在はＰｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．に譲渡されている米国特許第５，７４７，４９８号（その全内容を参照により本明細書に組み入れることとする）に記載され特許請求されている。
【０３２１】
投与量および投与経路
ＩＧＦ−１Ｒ特異的抗体と化学療法物質とを含む本発明の組合せ療法は、公知方法、例えばボーラスもしくは或る時間にわたる連続的注入による静脈内投与、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、鞘内、経口、局所または吸入経路により、ヒト患者に投与される。該抗体の静脈内または皮下投与が好ましい。３つの異なる運搬アプローチが本発明による該抗体の運搬に有用であると予想される。通常の静脈内運搬が、おそらく、大多数の腫瘍に対する標準的な運搬技術であろう。しかし、卵巣、胆管、他の管などの腫瘍により例示される腹腔内の腫瘍のような幾つかの腫瘍に関しては、腫瘍において高用量の抗体を得、抗体のクリアランスを最小にするためには、腹腔内投与が有利であろう。同様に、ある充実性腫瘍は、局所潅流に適した脈管構造を有する。局所潅流は、腫瘍部位において高用量の該抗体が得られるのを可能にし、該抗体の短期クリアランスを最小にするであろう。
【０３２２】
タンパク質または抗体の注入に基づくあらゆる療法の場合と同様に、安全性の懸念は、主として、（ｉ）サイトカイン放出症候群、すなわち、低血圧、発熱、震え、悪寒、（ｉｉ）該物質に対する免疫原性応答の発生（すなわち、患者による該抗体療法に対するヒト抗体の発生、またはＨＡＨＡもしくはＨＡＣＡ応答）、および（ｉｉｉ）ＥＧＦ受容体を発現する正常細胞（例えば、ＥＧＦＲおよび／またはＩＧＦ−１Ｒを発現する肝細胞）に対する毒性に関するものである。これらの安全性の懸念のそれぞれをモニターするために、標準的な試験および追跡（フォローアップ）が行われるであろう。特に、肝臓に対する損傷が有ればそれを評価するために、臨床治験中に頻繁に肝機能がモニターされるであろう。
【０３２３】
疾患の予防または治療のためには、抗体の適当な投与量は、前記のとおりの治療すべき疾患のタイプ、該疾患の重症度および経過、該抗体が予防目的で投与されるのか治療目的で投与されるのか、過去の療法、患者の臨床履歴および該抗体に対する応答、ならびに担当医師の判断に左右されるであろう。該抗体は、適切には、１回で又は一連の治療にわたって患者に投与される。組合せ療法計画においては、本発明の組成物は、治療的に有効な又は相乗作用をもたらす量で投与される。本明細書中で用いる治療的に有効な量（治療的有効量）は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と１以上の他の療法物質（治療用物質）との共投与、または本発明の組成物の投与が、標的疾患または状態の軽減または抑制をもたらすような量である。治療的に相乗作用をもたらす量は、個々の疾患に関連した状態または症状を相乗的または有意に軽減または排除するのに必要な、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体および１以上の他の療法物質（治療用物質）の量である。
【０３２４】
広範な実施形態においては、本発明の治療は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と１以上の化学療法物質との組合せ投与を含む。該組合せ投与は、別々の製剤または単一の医薬製剤を使用する共投与、およびいずれかの順序での連続的投与を含み、ここで、好ましくは、両方（または全て）の活性物質がそれらの生物活性を同時に発現する期間が存在する。そのような化学療法物質に関する調製および投与スケジュールは、製造業者の説明に従って又は当業者により実験的に決定されるとおりに行われうる。化学療法に関する調製および投与スケジュールはＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｍ．Ｃ．Ｐｅｒｒｙ編，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．（１９９２）にも記載されている。該化学療法物質は該抗体の投与の前または後に投与されることが可能であり、あるいはそれと同時に投与されうる。本発明の治療組合せの臨床投与は、現在臨床において使用されているチロシンキナーゼインヒビター（ＴＫＩ）［エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）およびゲフィチニブ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）］およびモノクローナル抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で観察されるとおり、皮疹のような有害反応の度合により制限される可能性がある。
【０３２５】
「治療的に有効な量」または「治療的に有効な投与量」なる語は、癌（例えば、非小細胞肺癌またはいずれかの他のエルロチニブまたはＩＧＦ−１Ｒ耐性癌）の徴候、症状および／もしくは臨床指数（例えば、腫瘍増殖）のいずれかの測定可能な改善ならびに／またはいずれかの度合の癌の進行もしくは転移の予防、遅延もしくは阻止を含む、投与者（例えば、研究者、医師または獣医）により求められている組織、系、対象または宿主の生物学的または医学的応答を惹起する本発明の組成物（例えば、ＩＧＦ１Ｒインヒビター、例えば、抗ＩＧＦ１Ｒ抗体）の量または投与量を意味する。
【０３２６】
適当な投与量は医学的実施者に公知であり、もちろん、個々の病態、投与される組成物の特異的活性、および治療を受けている個々の患者に左右されるであろう。いくつかの場合には、所望の治療量を達成するために、反復投与、すなわち、個々のモニターまたは計量された用量の個々の投与の反復を行うことが必要である可能性があり、この場合、所望の１日量または効果が達成されるまで個々の投与を反復する。適当な投与量に関する更なる情報は後記実施例に記載されている。
【０３２７】
例えば、１つの実施形態においては、いずれかの抗ＩＧＦ１Ｒ抗体、例えば、ドルツズマブ（Ｄｏｌｕｔｕｚｕｍａｂ）または本明細書に記載されているいずれかの他の抗ＩＧＦ１Ｒ抗体に対応する抗体または抗原結合性フラグメントの「治療的に有効な投与量」は、週１回で約４０〜約１０００ｍｇ／ｍ２（例えば、約５０ｍｇ／ｍ２、６０ｍｇ／ｍ２、７０ｍｇ／ｍ２、８０ｍｇ／ｍ２、９０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、約２００ｍｇ／ｍ２、約３００ｍｇ／ｍ２、約４００ｍｇ／ｍ２、約５００ｍｇ／ｍ２、約６００ｍｇ／ｍ２または約７００ｍｇ／ｍ２）または１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重（例えば、約１ｍｇ／ｋｇ体重、約２ｍｇ／ｋｇ体重、約３ｍｇ／ｋｇ体重、約４ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重、約６ｍｇ／ｋｇ体重、約７ｍｇ／ｋｇ体重、約８ｍｇ／ｋｇ体重、約９ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１１ｍｇ／ｋｇ体重、約１２ｍｇ／ｋｇ体重、約１３ｍｇ／ｋｇ体重、約１４ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１６ｍｇ／ｋｇ体重、約１７ｍｇ／ｋｇ体重、約１８ｍｇ／ｋｇ体重、約１９ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重）である。
【０３２８】
投与計画は、最適な所望の応答（例えば、治療応答）が得られるように調節されうる。例えば、単一用量が投与可能であり、あるいは幾つかの分割量が経時的に投与可能であり、あるいは該用量は、治療状況の要求に適応するように比例的に減少または増加されうる。例えば、投与量は、患者の年齢、体重、身長、過去の病歴、現在の投薬ならびに交差反応、アレルギー、感受性および有害な副作用の可能性に応じて、当技術分野における通常の技量を有する実施者（例えば、医師または獣医）により決定または調節されうる。投与の容易化および投与量の均一性のためには、投与単位形の非経口組成物を製剤化することが特に有利である。
【０３２９】
当技術分野における通常の技量を有する医師または獣医は、必要な該医薬組成物の有効量を容易に決定し処方することが可能である。例えば、医師または獣医は、所望の治療効果を達成するために要求されるレベルより低いレベルの、該医薬組成物において使用される本発明の抗体または抗原結合性フラグメントの用量から開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加することが可能であろう。本発明の抗体または組合せの、与えられた用量または治療計画の有効性は、例えば、対象において治療されている腫瘍が縮小または成長停止したかどうかを判定することにより決定されうる。腫瘍のサイズは、例えば、Ｘ線、磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）により、または外科的手法において視覚的に、容易に決定されうる。腫瘍細胞および増殖は、チミジンＰＥＴスキャンを使用することにより測定されうる（例えば、Ｗｅｌｌｓら，Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．８：７−１４（１９９６）を参照されたい）。一般に、チミジンＰＥＴスキャンは、［２−１１Ｃ］−チミジンのような放射能トレーサーの注射、およびそれに続く、患者の身体のＰＥＴスキャンを含む（Ｖａｎｄｅｒ Ｂｏｒｇｈｔら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １０１：７９４−７９９，１９９１；Ｖａｎｄｅｒ Ｂｏｒｇｈｔら，Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ａｐｐｌ．Ｉｎｓｔｒｕｍ．Ｐａｒｔ Ａ，４２：１０３−１０４（１９９１））。使用されうる他のトレーサーには、［１８Ｆ］−ＦＤＧ（１８−フルオロデオキシグルコース）、［１２４Ｉ］ＩＵｄＲ（５−［１２４Ｉ］ヨード−２’−デオキシウリジン）、［７６Ｂｒ］ＢｒｄＵｒｄ（ブロモデオキシウリジン）、［１８Ｆ］ＦＬＴ（３’−デオキシ−３’フルオロチミジン）または［１１Ｃ］ＦＭＡＵ（２’−フルオロ−５−メチル−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルウラシル）が含まれる。
【０３３０】
例えば、ＮＳＣＬＣの進行は種々の方法により医師または獣医によりモニターされることが可能であり、それに応じて投与計画が改変されうる。進行をモニターするための方法には、例えば、ＣＴスキャン（例えば、腫瘍サイズをモニターするためのもの）、ＭＲＩスキャン（例えば、腫瘍サイズをモニターするためのもの）、胸部Ｘ線（例えば、腫瘍サイズをモニターするためのもの）、骨スキャン、骨髄生検、ホルモン試験、全血球試験（ＣＢＣ）、尿または血液中のＮＳＣＬＣ腫瘍マーカーに関する試験が含まれる。
【０３３１】
タイプおよび重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）の抗体が、例えば１以上の別々の投与によるものであるか連続的注入によるものであるかにかかわらず、患者への投与のための初期候補投与量である。典型的な１日投与量は、前記の要因に応じて約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の範囲となりうるであろう。数日間以上にわたる反復投与の場合、条件に応じて、該治療は、疾患症状の所望の抑制が生じるまで続けられる。しかし、他の投与計画も有用でありうる。
【０３３２】
１つの態様においては、本発明の抗体は毎週投与され、または２〜３週間ごとに、約５ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与されうる。より好ましくは、そのような投与計画は、エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌、例えばＮＳＣＬＣを治療するための化学療法計画と組合せて用いられる。いくつかの態様においては、該化学療法計画は通常の高用量の断続的投与を含む。いくつかの他の態様においては、該化学療法物質は、計画された中断を伴うことなく、より小さい及びより頻繁な用量を用いて投与される（「規則的（ｍｅｔｒｏｎｏｍｉｃ）化学療法」）。本発明の療法の進行は通常の技術およびアッセイにより容易にモニターされる。
【０３３３】
１つの実施形態においては、投与手順は、エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）（経口）をＩＧＦ−１Ｒ抗体と共に投与することを含み、エルロチニブは毎日投与され、一方、ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＭＫ−０６４６）は毎週投与される。特に、ＭＫ−０６４６（ＩＧＦ−１Ｒ ｍＡｂ）は毎週１０ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｖ．）の用量で投与され、一方、エルロチニブは毎日１５０ｍｇ投与される。
【０３３４】
ＩＧＦ−１Ｒ抗体に関する代替的投与計画は以下のとおりである：
（ｉ）１５ｍｇ／ｋｇ の負荷（ローディング）、およびそれに続く、毎週７．５ｍｇ／ｋｇ、
（ｉｉ）隔週で２０ｍｇ／ｋｇ、
（ｉｉｉ）３週間ごとに３０ｍｇ／ｋｇ。
【０３３５】
非経口投与の場合、該抗体は、医薬上許容される非経口ビヒクルと組合された又は別々に提供された溶液、懸濁液、乳液（エマルション）または凍結乾燥粉末として製剤化されうる。そのようなビヒクルの具体例としては、水、食塩水（塩類液）、リンガー液、デキストロース溶液および１〜１０％ ヒト血清アルブミンが挙げられる。リポソームおよび非水性ビヒクル、例えば不揮発性油も使用されうる。該ビヒクルまたは凍結乾燥粉末は、等張性を維持する添加物（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール）および化学的安定性を維持する添加物（例えば、バッファーおよび保存剤）を含有しうる。該製剤は、公知の又は適当な技術により滅菌される。該組合せ療法の投与は疾患進行まで継続されうる。
【０３３６】
本発明を一般的な観点から説明してきたが、以下の実施例においては本発明の実施形態を更に詳細に開示することとする。
【０３３７】
製造品
本発明のもう１つの実施形態においては、前記の障害の治療に有用な要素を含有する製造品を提供する。該製造品は、容器、標識（ラベル）およびパッケージインサートを含む。適当な容器には、例えばボトル、バイアル、シリンジなどが含まれる。該容器は、種々の材料、例えばガラスまたはプラスチックから形成されうる。該容器は、該状態を治療するのに有効な組成物を含有し、無菌性の接近口（アクセスポート）を有しうる（例えば、該容器は、皮下注射針により刺し貫かれうる栓を有する静脈溶液バッグまたはバイアルでありうる）。該組成物中の少なくとも１つの活性物質は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体である。該容器上の又はそれに添付された標識は、選択された状態を治療するために該組成物が使用されることを示す。該製造品は更に、医薬上許容されるバッファー、例えばリン酸緩衝食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液を含む第２容器を含む。それは更に、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針およびシリンジを含む商業的な又は使用者の観点から望ましい他の要素を含みうる。また、該製造品は、例えば該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体組成物およびＥＧＦＲインヒビター（例えば、エルロチニブ）組成物を患者に投与することを該組成物の使用者に説明することを含む使用説明を伴うパッケージインサートを含む。
【０３３８】
本明細書中に挙げられている全ての刊行物を、例えば、ここに記載されている発明に関して用いられうる該刊行物中に記載されている構造および方法を記載し開示する目的で、参照により本明細書に組み入れることとする。前記および本明細書中の全体にわたって記載されている刊行物は、専ら、本出願の出願日の前のそれらの開示に関して記載されている。この場合、より早い発明に基づいて本発明者らがそのような開示に先行すると主張する権利がないと自認するものと解釈されるべきではない。
【図面の簡単な説明】
【０３３９】
【図１Ａ】図１（Ａ）は、ＥＧＦ１ＲとＩＧＦ１Ｒとの間のクロストークを示す概要図である（どのような方法も要さない）。
【図１Ｂ】図１（Ｂ）は、Ｐ−ＲＴＫアレイにより測定されたＥＧＦＲおよびＩＧＦ１Ｒ活性化の要約である（詳細な方法または細胞培養、細胞溶解、ＲＴＫアレイ法およびイメージ定量は本明細書中に記載されている）。
【図１Ｃ】図１（Ｃ）は、Ｐ−ＲＴＫアレイからの代表的イメージであり、Ｐ−ＥＧＦＲおよびＰ−ＩＧＦ１Ｒに対応する位置が該イメージにおいて示されている（方法は図１Ｂと同じである）。
【実施例１】
【０３４０】
ＥＧＦＲおよびＩＧＦＩＲの活性化とＭＫ−０６４６／エルロチニブの組合せの効力との間の相関性
要約：細胞における多受容体チロシンキナーゼの活性化はエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）に対する薬物耐性に関与しうるであろう。実際、エルロチニブ耐性患者からの臨床サンプルにおいてＥＧＦＲおよびｃＭＥＴの活性化が観察されている。
【０３４１】
方法：ＭＫ−０６４６／エルロチニブの組合せに応答する腫瘍を特定するために、肺癌細胞系のパネルにおける種々のＲＴＫのリン酸化状態を評価した。図１に示されているとおり、１０個の肺癌細胞系のパネルにわたる活性化ＥＧＦＲおよびＩＧＦＩＲのレベルを定量した。ＮＣＩ−Ｈ２１２２およびＮＣＩ−Ｈ３２２Ｍにより表される細胞系のなかで、Ｐ−ＩＧＦＩＲおよびＰ−ＥＧＦＲの両方を高レベルで示したものは非常に少数であったが、ＥＧＦＲ突然変異細胞系ＨＣＣ８２７は、ＩＧＦＲの活性化をほとんど又は全く伴わない高レベルのＰ−ＥＧＦＲを示した。
【０３４２】
簡潔に説明すると、全てのＮＳＣＬＣ細胞系をＡＴＣＣから入手し、ＡＴＣＣにより指定されているとおりに１０％ ＦＢＳを含有するＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ内で維持した。約２００万個の細胞を１０ｃｍプレート内で培養し、タンパク質ライセートをサブコンフルエント培養から調製し、Ｐ−ＲＴＫアレイ（Ｒ＆Ｄ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）上に、該製造業者により記載されているとおりにブロットした。該アレイをＨＲＰ結合Ｐ−Ｔｙｒ抗体でプローブし、ついでＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ化学発光基質（Ｐｉｅｒｃｅ）と共にインキュベートし、ついでブロットをＫｏｄａｋ Ｂｉｏｍａｘ Ｌｉｇｈｔ Ｆｉｌｍに露出させた。該フィルムを走査し、適当なＲＴＫスポット（二重）の位置を整列させ、強度を、デンシトメトリーを用いて決定し、定量した（Ａｌｐｈａ Ｅａｓｅ）。該膜上にスポットされた陽性対照（Ｐ−Ｔｙｒペプチド）（該膜の４つの隅における二重スポット）に対して正規化することにより、Ｐ−ＲＴＫの相対レベルを推定した。
【実施例２】
【０３４３】
ＭＫ−０６４６／エルロチニブによるＰＩ３ＫおよびＲＡＳ−ＭＡＰＫシグナリングの抑制
要約：ＰＩ３ＫおよびＲＡＳ−ＭＡＰＫ経路活性に対するこれらのＲＴＫの抑制の効果を試験するために、該経路における中心的集合点のリン酸化状態を測定した。図２に示すとおり、ＥＧＦＲとＩＧＦＩＲとの組合せインヒビターは、両方の受容体を高レベルで発現するＮＣＩ−Ｈ２１２２およびＮＣＩ−Ｈ３２２Ｍ細胞系におけるＰ−Ｓ６ＲＰおよびＰ−Ｓ６Ｋの実質的減少により測定した場合、ＰＩ３Ｋ経路の遮断において、より有効であった。Ｐ−ＥＧＦＲおよびＰ−ＩＧＦＩＲの両方が低レベルの細胞系においては、ＰＩ３Ｋシグナリングのそのような相乗的抑制は観察できなかった（Ａ４２７が一例として示されている）。他の細胞系において、同様の結果が得られた（データ非表示）。
【０３４４】
方法：ウエスタンブロット分析のために、６ウェルプレート内で培養された細胞（〜０．３百万個）からの全タンパク質ライセートをデフォロリムス（Ｄｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ）（１０ｎＭ）もしくはＭＫ−０６４６（１０ｎｇ／ｍｌ）のいずれか又はそれらの組合せで４時間処理し、ＳＤＳゲルローディング色素（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）において集めた。サンプルを、示されている全ての又はホスホ特異的な抗体で、ついで二次抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣＳＴ）でウエスタンブロットし、ついでＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ化学発光基質（Ｐｉｅｒｃｅ）と共にインキュベートした。ついで該ブロットをＫｏｄａｋ Ｂｉｏｍａｘ Ｌｉｇｈｔ Ｆｉｌｍに露出させた。ＥＲＫ、ｐ−ＥＲＫ（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）、ＡＫＴおよびｐ−ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）、ＩＧＦ１ＲＴ Ｓ６ＫおよびＰ−Ｓ６Ｋ（Ｔ３８９）、ＩＲＳ１およびＰ−ＩＲＳ１（Ｓ３０２）ならびにアクチンに対する抗体をＣＳＴから得た。
【実施例３】
【０３４５】
ＥＧＦＲおよびＩＧＦ−１ｒシグナリングの両方を抑制する機能的効果
要約：ＥＧＦＲおよびＩＧＦ−１Ｒシグナリングの両方を抑制する機能的効果を試験するために、接着（２Ｄ）および非接着（３Ｄ）条件下の増殖抑制を評価した。接着増殖条件下、ＭＫ−０６４６処理細胞系においては有意な増殖抑制は観察されなかった。これは従来の実験と一致している（データ非表示）。この組合せの効果を３Ｄ非接着条件下で試験するために、本発明者らは、超低接着プレートに基づく増殖アッセイを開発した。非接着条件下で増殖させた場合、１０個中７個の系のみが測定可能な様態で増殖し、感受性評価のために使用した。ＮＣＩ−Ｈ２１２２細胞は、非接着条件下、エルロチニブ／ＭＫ−０６４６の組合せに対する感受性の相当な増加を示した。一方、低レベルのＰ−ＩＧＦＩＲおよびＥＧＦＲを有するＡ４２７細胞は、２Ｄまたは３Ｄ増殖条件下、有意な増殖抑制を示さなかった。
【０３４６】
方法：細胞（〜３×１０３）を接着または非接着（超低接着プレート；Ｃｏｒｎｉｎｇ）９６ウェルプレート内に播いた。第１日に、細胞を、示されている濃度のエルロチニブまたはＭＫ−０６４６またはそれらの組合せと共にインキュベートし、１組の細胞をＤＮＡ含量測定のために集めた（第１日）。該培地および薬物を３日ごとにゆっくり交換し、該アッセイの終了時に（示されているとおり）プレートを集め、Ｃｙｑｕａｎｔアッセイを該製造業者の説明のとおりに用いてＤＮＡ含量を測定した。第１日から該アッセイの終了時までのＤＮＡ含量の増加に基づいて、固有増殖を計算した。
【実施例４】
【０３４７】
前記の結果を証明するために、本発明者らはハイスループット軟寒天コロニー形成アッセイを利用した。蛍光生細胞色素（Ｌａｖａ Ｃｅｌｌ）を使用して足場非依存的増殖を定量した。ＭＫ−０６４６およびエルロチニブの組合せは、ＮＣＩ−Ｈ２１２２およびＡ５４９の両方の細胞系の軟寒天コロニー形成を有意に抑制した（図４：対照と比較してＰ＞０．０００１）。Ｈ４６０細胞は、該組合せの存在下、増殖抑制の増加を示した。したがって、該インビトロ分析は、ＭＫ−０６４６およびエルロチニブの組合せに対して、より良好に応答する、１０個中３個の細胞系（３０％）を特定した。これは両方のＲＴＫ（ＥＧＦＲおよびＩＧＦ１Ｒ）の活性化と相関している。
【０３４８】
方法：９６ウェルガラス底プレート（ＭａｔｒｉＣａｌ）内で軟寒天アッセイを行った。０．８％ アガロースで補足された同じ培養培地からなる下層の最上部に１４％ ＦＢＳおよび０．３％（ｗ／ｖ）ＳｅａＰｌａｑｕｅアガロース（Ｌｏｎｚａ Ｒｏｃｋｌａｎｄ，Ｉｎｃ）で補足された１００μｌのＲＭＰＩ １６４０内に、３，０００〜９，０００細胞／ウェルの濃度で細胞を播いた。アガロースが固化した後で補足された１００μｌの培地内に化合物を加えた。細胞を７〜１４日間インキュベートした後、ＬａｖａＣｅｌｌ（Ａｃｔｉｖｅ Ｍｏｔｉｆ）で一晩染色した。Ｉｓｏｃｙｔｅ（商標）レーザースキャニングサイトメーターを使用してコロニーを定量した。足場非依存的増殖をＭＫ−０６４６が単独で又は標準的なケア物質と共に抑制する能力を軟寒天コロニー形成アッセイにおいて評価した。Ｐ−ＲＴＫアッセイ（Ｒ＆Ｄ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を該製造業者の説明のとおりに使用して、全タンパク質ライセートにおいてＲＴＫ状態を評価した。ＫＲＡＳにおける活性化突然変異は、公開されている癌ゲノムデータベース（Ｓａｎｇｅｒ）から特定された。
【実施例５】
【０３４９】
ｋＲＡＳ突然変異体肺腫瘍異種移植片モデルにおけるエルロチニブおよびＭＫ−０６４６の効力の評価
前に、ｋ−ＲＡＳ突然変異体ＮＣＩ−Ｈ２１２２異種移植片（インビトロでの高ｐ−ＩＧＦ１Ｒおよびｐ−ＥＧＦ１Ｒ）からのインビボデータは、ＩＧＦ１Ｒ受容体のダウンレギュレーションに相関する腫瘍増殖の良好な抑制を示した。ＭＫ−０６４６処理後にＰＩ３Ｋ経路の抑制も観察された。この異種移植片モデルを使用して、本発明者らは、エルロチニブ耐性ｋＲＡＳ突然変異体患者集団において、エルロチニブと組合されたＭＫ−０６４６の効果を評価した。図５に示すとおり、ＭＫ−０６４６（２ｍｐｋ；週１回の投与）とエルロチニブ（５０ｍｐｋ）との組合せは腫瘍増殖の有意な抑制、そして更には該異種移植片の退縮を引き起こして、ｋＲＡＳ突然変異体肺腫瘍により特徴づけられる病態の治療に関するＫ−０６４６およびエルロチニブの組合せの根底にある論理的説明に関する更なる確証をもたらした。
【０３５０】
方法：２．５×１０６ ＮＣＩ−Ｈ２１２２ヒトＮＳＣＬＣ細胞を４〜６週齢のｎｕ／ｎｕマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右脇腹に皮下注射した。腫瘍が〜３００ｍｍ３（長さ＊幅＊幅＊０．５）のサイズに達したら、マウスを治療群にランダム化した。ビヒクル（２０ｍＬ Ｌ−ヒスチジン、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．５％ ＰＳ８０ ｐＨ＝６）を週１回、３週間にわたり（ｑｗｋ×３）、または２ｍｐｋのＭＫ−０６４６（ｍｇ／ｋｇ ＭＫ−０６４６ ｑｗｋ）を腹腔内に、またはエルロチニブ（５０ｍｇ／ｋｇ、経口ガバージュ）を毎日、またはＭＫ−０６４６と組合せて３週間にわたって、マウス（ｎ＝８匹／群）に投与した。動物を秤量し、該研究中に週２回および終了時にノギスで計測することにより腫瘍体積を決定した。腫瘍重量を終了時に決定した。第２１日に、動物をＣＯ２窒息により犠死させた。最終投与の２４時間後にマウスを犠死させた。犠死の時点で、組織サンプルを集め、加工した。
【実施例６】
【０３５１】
効力と全タンパク質レベルの減少との間の相関性
要約：標的関与の尺度として、ＩＧＦ１Ｒの全レベルをウエスタンブロットＥＬＩＳＡによりアッセイした（データ非表示）。該データは効力と全タンパク質レベルの減少との間の良好な相関性を示した。図６に示すとおり、各パネルにおいて、ＭＫ−０６４６は、ビヒクルまたはエルロチニブ単独処理と比較してＩＧＦ１Ｒの全レベルを減少させうる。これらのデータは、ＭＫ−０６４６の単独での又は他の標的化物質と組合された長期的な慢性的治療にわたる標的関与および効力に関する良好な生物マーカーとして、全ＩＧＦ１Ｒレベルが機能しうることを示唆している。Ｐ−ＡＫＴ、ＰＳ６ＫおよびＰＳ６ＲＰの減少により測定されるとおり、顕著なＰＩ３Ｋ経路抑制が、該組合せで処理された腫瘍において観察された。ＲＡＳ−ＭＡＰＫ経路も該組合せにより抑制された。これらのデータは、ＩＧＦ１ＲおよびＥＧＦＲの組合せ抑制が、各物質が単独投与された場合と比較して増強した、抗腫瘍効力誘発性増殖因子シグナリングの抑制をもたらしたことを示唆している。図７を参照すると、別のＫＲＡＳ突然変異体エルロチニブ不応性ＮＳＣＬＣモデルにおいても、エルロチニブおよびＭＫ−０６４６の組合せによる同様の抗腫瘍効力が観察された。
【０３５２】
方法：効力研究の終了時（示されている投与の４週間後）に異種移植片サンプルからの全タンパク質（５００マイクログラム）を単離した。６個の独立した腫瘍からのサンプルを治療の容易さに関して分析した。既に記載されているとおりに、該タンパク質をウエスタンブロットし、可視化した（図２を参照されたい）。
【０３５３】
配列表
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物における抗腫瘍活性を増強するための方法および組成物に関する。より詳しくは、本発明は、ヒトＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合する抗体と受容体チロシンキナーゼインヒビターとを含む組合せに関する。特に、本発明は、ＩＧＦ−１Ｒ抗体とチロシンキナーゼインヒビター、特にエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）との投与により、非小細胞肺癌および他の癌、例えば膵癌を治療するための組合せ療法（併用療法）に関する。該組合せ又は物質を含む方法および医薬組成物は、それぞれの単独の治療物質の使用に関して観察されるものより優れた腫瘍細胞増殖抑制を引き起こして、個々の成分の単独投与により見出されるものより有効な治療をもたらしうる。特定の態様はエルロチニブ耐性肺癌の治療を提供する。
【背景技術】
【０００２】
肺癌は男性における癌による大多数の死亡の原因であり、女性における最も頻繁な癌死亡原因としての乳癌を追い越しつつある。肺癌患者に関する現在の予後は不良である。肺癌死関連死亡率は男性および女性の両方において１９３０年から１０倍増加しており、これは主として喫煙の増加によるものであるが、ヒ素、アスベスト、クロマート、クロロメチルエーテル、ニッケル、多環式芳香族炭化水素および他の物質に対する暴露の増加によるものでもある。Ｓｃｏｔｔ，Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ：Ａ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ａｄｄｉｃｕｓ Ｂｏｏｋｓ（２０００）およびＡｌｂｅｒｇら，Ｋａｎｅら（編）Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ，ｐｐ．１１−５２，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．（１９９８）を参照されたい。Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｏｃｉｅｔｙは、２００４年に１７３，５５０を超える新たな肺癌の症例が生じると推定している。また、２００４年に肺癌により推定１６０，４４０人が死亡するとしている（ＡＣＳウェブサイト：ｃａｎｃｅｒ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ｏｒｇ ｏｆ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ ｗｉｄｅ ｗｅｂ）。
【０００３】
肺癌は、肺に生じた原発腫瘍、または別の器官（例えば、腸または乳房）から広がった続発腫瘍から生じうる。１２を超えるタイプの肺癌が存在するが、９０％以上は、２つの範疇、すなわち、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）に含まれる。Ｓｃｏｔｔ（前記）を参照されたい。７０〜８０％はＮＳＣＬＣと診断される。「ＮＳＣＬＣ」なる語は以下の細胞型を含む：類表皮癌細胞、腺癌細胞および大未分化癌細胞。肺癌の診断は、通常、組織の生検により確認される。
【０００４】
治療アプローチおよび自然史はこれらの２つの疾患で異なる。米国における肺癌の症例の大多数（８０％）はＮＳＣＬＣである。ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣの両方に関する重要な臨床的および予後的因子の理解が過去２０年間で進展したが、治療結果の改善は最低限度にとどまっている。
【０００５】
ＮＳＣＬＳは一般に以下の３つの型に分類される：扁平上皮癌、腺癌および大細胞癌。扁平上皮癌および腺癌は共に、気道を裏打ちする細胞から発生するが、腺癌は、粘液を産生する杯細胞から発生する。大細胞肺癌は、顕微鏡で見た場合に該細胞が大きく且つ円く見えるため、そのように命名されたのであり、一般に、比較的未分化であると考えられている。Ｙｅｓｎｅｒ，Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ（１９９８）を参照されたい。非小細胞癌は４つの病期に分類されうる。Ｉ期は、リンパ節に癌を伴わない、非常に限局した癌である。ＩＩ期の癌は罹患肺の上部のリンパ節に広がっている。癌の病期は該癌の出発場所の近くに広がっている。これは胸壁、肺の被覆部（胸膜）、胸の中央部（縦隔）または他のリンパ節まででありうる。ＩＶ期の癌は身体の別の部分にまで広がっている。Ｉ期〜ＩＩＩ期の癌は、通常、化学療法を伴って又は伴わずに、手術で治療される。ＩＶ期の癌は、通常、化学療法および／または緩和ケアで治療される。
【０００６】
幾つかの染色体異常および遺伝的異常が肺癌において観察されている。ＮＳＣＬＣにおいては、３ｐ、９ｐ、１１ｐ、１５ｐおよび１７ｐ上で染色体異常が記載されており、染色体７、１１、１３および１９上で染色体欠失が認められている。Ｓｋａｒｉｎ（編），Ｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｔｙ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｕｎｇ Ｃａｎｃｅｒ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．（２０００）；Ｇｅｍｍｉｌｌら，ｐｐ．４６５−５０２，Ｋａｎｅ（前掲）；Ｂａｉｌｅｙ−Ｗｉｌｓｏｎら，ｐｐ．５３−９８，Ｋａｎｅ（前掲）を参照されたい。ＳＣＬＣにおいては１ｐ、３ｐ、５ｑ、６ｑ、８ｑ、１３ｑおよび１７ｐ上に染色体異常が記載されている。また、ＳＣＬＣ腫瘍の９０％以上およびＮＳＣＬＣ腫瘍の約５０％で染色体３ｐの短腕の喪失も認められている。
【０００７】
幾つかの癌遺伝子および腫瘍抑制遺伝子が肺癌に関連づけられている。Ｍａｂｒｙ，ｐｐ．３９１−４１２，Ｋａｎｅ（前掲）およびＳｃｌａｆａｎｉら，ｐｐ．２９５−３１６，Ｋａｎｅ（前掲）を参照されたい。ＳＣＬＣおよびＮＳＣＬＣのどちらにおいても、肺癌の５０％以上でｐ５３腫瘍抑制遺伝子が突然変異している。Ｙｅｓｎｅｒ（前掲）を参照されたい。もう１つの腫瘍抑制遺伝子であるＦＨＩＴは染色体３ｐ上で見出され、喫煙により突然変異する（同誌；Ｓｋａｒｉｎ，前掲）。また、ＳＣＬＣの９５％以上およびＮＳＣＬＣの約２０〜６０％は、もう１つの腫瘍抑制遺伝子である網膜芽細胞腫（Ｒｂ）タンパク質を有さないか又はその異常を有する。ｒａｓ癌遺伝子（特にＫ−ｒａｓ）はＮＳＣＬＣ検体の２０〜３０％において突然変異しており、ｃ−ｅｒｂＢ２癌遺伝子は２期ＮＳＣＬＣ検体の１８％および４期のＮＳＣＬＣ検体の６０％において発現される。Ｖａｎ Ｈｏｕｔｔｅ（前掲）を参照されたい。染色体９の領域、特に９ｐ２１の領域で見出される他の腫瘍抑制遺伝子は、ｐ１６．ｓｕｐ．ＩＮＫ４Ａおよびｐｌ５．ｓｕｐ．ＩＮＫ４Ｂを含む多数の癌細胞において欠失している。Ｂａｉｌｅｙ−Ｗｉｌｓｏｎ（前掲）；Ｓｃｌａｆａｎｉら（前掲）を参照されたい。これらの腫瘍抑制遺伝子は肺癌の発生病理にも関連づけられている。
【０００８】
また、多数の肺癌細胞は、肺癌細胞上で自己分泌またはパラ分泌様態で増殖因子を産生する。Ｓｉｅｇｆｒｉｅｄら，ｐｐ．３１７−３３６，Ｋａｎｅ（前掲）、Ｍｏｏｄｙ，ｐｐ．３３７−３７０，Ｋａｎｅ（前掲）およびＨｅａｓｌｅｙら，３７１−３９０，Ｋａｎｅ（前掲）を参照されたい。多数のＮＳＣＬＣ腫瘍は上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体を発現して、ＥＧＦに応答してＮＳＣＬＣ細胞が増殖するのを可能にする。インスリン様増殖因子（ＩＧＦ−１）はＮＳＣＬＣ腫瘍の８０％以上において上昇し、それは自己分泌増殖因子として機能すると考えられている。
【０００９】
肺癌の症例の大多数は喫煙に起因すると考えられるが、ほとんどの喫煙者は肺癌に罹患しない。肺癌に対する感受性はメンデル遺伝する可能性があり、したがって、遺伝する遺伝的成分を有しうる、と疫学的証拠は示唆している（Ｂａｉｌｅｙ−Ｗｉｌｓｏｎ，前掲）。したがって、幾つかの遺伝子座における或る対立遺伝子変異体が肺癌に対する感受性に影響を及ぼしうると考えられる。
【００１０】
肺癌に対する現在の療法は非常に限られたものである。一般に、患者の選択肢は手術、放射線療法および化学療法を含む。
【００１１】
肺癌のほとんどの症例は化学療法および放射線療法によっては治癒できない。肺癌のタイプおよび病期に応じて、腫瘍を幾らかの周辺肺組織と共に除去するために手術が用いられうる。肺葉切除術は、肺の葉（断片）が除去されることを意味する。肺全体が除去される場合、該手術は肺切除術と称される。葉の一部だけの除去は区域切除術またはけつ状切除術として公知である。
【００１２】
実際、ＮＳＣＬＣ患者の唯一の治療選択肢は、腫瘍が尚も限局している初期病期（ＩおよびＩＩ）の患者における局所療法（外科的切除または局所照射）である。しかし、診断時に、ＮＳＣＬＣ患者の大多数は、進行した疾患を有し、これは手術だけでは治癒できない。進行期の疾患において、全身化学療法および／または照射は目的の応答および症状の一時的軽減をもたらすが、それらは生存における限られた改善をもたらすに過ぎない。切除不能な疾患を有する患者の余命の中央値は６〜１２ヵ月である。ＩＩＩＢおよびＩＶ期のＮＳＣＬＣの２年間の生存率はそれぞれ１０．８および５．４％である。同様に、５年間の生存率は３．９および１．３％である。
【００１３】
癌が脳にまで広がった場合、脳転移の除去が有益かもしれない。これは頭蓋手術（頭蓋内の孔からの手術）を含む。
【００１４】
放射線療法には、幾つかの方法が存在する。外部ビーム放射線療法は、癌に集中して体外から発せられる放射線を使用する。このタイプの放射線療法は、原発肺癌または他の器官へのその転移を治療するために最も頻繁に用いられる。
【００１５】
また、手術中に見えない又は除去できない非常に小さな癌沈着を死滅させるための術後治療として放射線療法が用いられうる。放射線療法は、疼痛、出血、咀嚼困難および脳転移により引き起こされる問題のような肺癌の症状を一時的に軽減（緩和）するためにも用いられうる。
【００１６】
化学療法では、シスプラチンまたは関連薬カルボプラチンが、ＮＳＣＬＣの治療において最も頻繁に使用される化学療法剤である。パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）（タキソール（Ｔａｘｏｌ））、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）（タキソテレ（Ｔａｘｏｔｅｒｅ））、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）、ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）およびゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）を含む他の新規化合物がＮＳＣＬＣの治療に利用可能である。これらの薬物は従来の化学療法剤（エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）およびカルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ））と比べて改善されているが、全体的な治癒率は依然として低い。
【００１７】
上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）は、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ＥｒｂＢ２）、ＨＥＲ３（ＥｒｂＢ３）およびＨＥＲ４（ＥｒｂＢ４）を含む密接に関連した増殖因子受容体チロシンキナーゼのファミリーのメンバーである。リガンド結合に際して、これらの受容体はホモ二量体またはヘテロ二量体を形成して、自己リン酸化ならびにそれに続く細胞内シグナリングカスケード、例えばホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／Ａｋｔ、ＭＡＰＫ／ＥｒｋおよびＪａｋ／Ｓｔａｔシグナリング経路の活性化を招き、それらは細胞の増殖、生存およびトランスフォーメーションならびに治療抵抗性において主要な役割を果たしている。
【００１８】
ＥＧＦＲの下流では、ＰＩ３Ｋ経路が細胞の生存および増殖の調節において決定的に重要な役割を果たしている。ＥｒｂＢ３受容体はＰＩ３Ｋ経路の活性化において特有の役割を果たしている。ＥｒｂＢ３は弱いチロシンキナーゼ活性を有するか、またはチロシンキナーゼ活性を有さないが、ＥＧＦＲとのヘテロ二量体形成に際して、それはチロシン残基上でリン酸化される。チロシン−リン酸化ＥｒｂＢ３はＰＩ３Ｋに直接的に結合し、それを活性化する。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔシグナリングは、ＴＫＩ感受性ＮＳＣＬＣにおいて、ＥＧＦＲにより厳密に調節され、ＥＧＦＲ ＴＫＩは、それが増殖をも抑制するＮＳＣＬＣ細胞系においてのみ、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路をダウンレギュレーションすることを、研究は示している（Ｅｎｇｅｌｍａｎ，Ｊ．Ａ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２，３７８８−３７９３（２００５））。
【００１９】
ＥＧＦＲは非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の大多数で発現されるため、それは治療剤の開発のための魅力的な標的となっている。ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）およびエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）を含む小分子ＥＧＦＲチロシンキナーゼインヒビター（ＴＫＩ）がＮＳＣＬＣ患者に関する臨床治験において評価されている。どちらの物質も全ＮＳＣＬＣ患者の１０％〜２０％において部分的な応答をもたらす。ＥＧＦＲの突然変異および／または増幅を有する肺癌は、十中八九、ＥＧＦＲインヒビターに応答して縮小する。ＥＧＦＲ遺伝子における体細胞突然変異の活性化がＮＳＣＬＣ患者において特定されている。これらの「機能獲得（ｇａｉｎ−ｏｆ−ｆｕｎｃｔｉｏｎ）」突然変異は、対応受容体のチロシンキナーゼドメインのＡＴＰ結合ポケットをコードする領域の周辺に密集している置換または短いインフレームの欠失もしくは挿入である。そのような癌においては、ＥＧＦＲは決定的に重要な増殖および生存シグナリング経路の主要アクチベーターであり、したがってこれらの癌はＥＧＦＲ活性に依存している。これらの中心的な増殖および生存シグナリング経路は、ＥＧＦＲインヒビターにさらされると中断され、アポトーシスおよび／または細胞周期停止を引き起こす。
【００２０】
最近のデータは、細胞増殖、アポトーシス、血管新生および転移に関与するシグナリング経路を標的化する新規治療アプローチが研究中であることを示唆している。多数の潜在的標的経路のうち、上皮増殖因子（ＥＧＦ）受容体（ＥＧＦＲ）シグナリング経路が最も詳細に研究されている。なぜなら、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の４０％〜８０％を含む幾つかの充実性腫瘍においてＥＧＦＲの過剰発現が観察されているからである。前記のとおり、研究者は、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）を妨げる物質を現在試験している。なぜＥＧＦＲかというと、１つには、非小細胞肺癌を含む多数のタイプの癌の表面上でそれが異常に高いレベルで発現されるからである。これらの実験的ＥＧＦＲインヒビターの具体例としては、ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）（イレッサ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）））、セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）（エルビツクス（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）））およびエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）（タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）））が挙げられる。
【００２１】
ＭＡＰＫシグナリング経路における決定的に重要な下流シグナリング成分であるＫＲＡＳ遺伝子における活性化突然変異によるエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）またはＥＧＦＲ抑制療法に対する耐性（抵抗性）が臨床において観察されている（Ｐａｏ，Ｗ．ら，ＰＬｏＳ Ｍｅｄ．２，ｅ７３（２００５））。エルロチニブ療法に対する獲得耐性はＥＧＦＲエキソン２０における二次突然変異（Ｔ７９０Ｍ）に臨床において関連づけられている。また、最近の研究は、ＥＲＢ３をリン酸化してエルロチニブ療法に対する耐性を付与するＲＴＫであるｃＭＥＴを特定している。
【００２２】
しかし、ＥＧＦＲ ＴＫＩに対する全体的な応答率は限られたものであり、該薬物に対する耐性をもたらすメカニズムは十分には理解されていない。ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）およびエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）を含む小分子ＥＧＦＲチロシンキナーゼインヒビター（ＴＫＩ）はＮＳＣＬＣ患者に関して臨床治験において評価されている。どちらの物質も全ＮＳＣＬＣ患者の１０％〜２０％において部分的な応答を示す。２００４年に、研究者は、予め治療されたＮＳＣＬＣ患者を含む第ＩＩ相治験で参加者の１２％における腫瘍がエルロチニブでの治療に応答したと報告した。しかし、エルロチニブが患者の生存の延長に寄与したかどうかは不明であった。
【００２３】
２００４年に、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を有する患者を含む幾つかの第ＩＩ相臨床治験は、標準的な化学療法とＥＧＦＲインヒビター（ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）またはエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ））の投与とを受けた患者が、化学療法のみを受けた患者の場合と同様の結果を示したに過ぎないことを報告した。しかし、同じ年に、カナダの第ＩＩＩ相治験の研究者は、もはや化学療法に応答しない癌を有するＮＳＣＬＣ患者が、プラセボを摂取した場合より約２ヶ月長く生存することに、エルロチニブが寄与したことを報告した。
【００２４】
エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）は、患者が、全体として、より長く生存することに寄与しなかった。生存期間の中央値は、エルロチニブを摂取した患者では１０．６ヶ月であったのに対して、プラセボ群では１０．５ヶ月であった。また、どちらの患者群もほぼ同じ「進行時間」（癌が悪化するまでに要する時間）を示した：エルロチニブ群では５．１ヶ月、プラセボ群では４．９ヶ月。前記の抗癌化合物は当分野に多大な貢献をしているが、改良された抗癌医薬がこの技術分野において絶えず探索されている。
【００２５】
エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）は細胞膜上でＥＧＦＲ／ＩＧＦ−ＩＲヘテロ二量体形成を誘導して、ＩＧＦ−ＩＲならびにその下流メディエーターＰＩ３Ｋ／Ａｋｔおよびｐ４４／４２ ＭＡＰＫを介して生存シグナルを伝達して、ＥＧＦＲおよび抗アポトーシス性サービビン（ｓｕｒｖｉｖｉｎ）タンパク質のラパマイシン哺乳類標的（ｍＴＯＲ）媒介合成を刺激する、と研究者は仮定している。したがって、ＩＧＦ−ＩＲの不活性化、ｍＴＯＲ媒介タンパク質合成の抑制、またはサービビンタンパク質のノックダウンは、ＥＧＦＲを過剰発現するＮＳＣＬＣ細胞を、エルロチニブ治療に対して感受性にする。Ｆｌｏｒｉａｎａ Ｍｏｒｇｉｌｌｏら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６６，１０１００−１０１１１，２００６年１０月１５日を参照されたい。
【００２６】
しかし、ＭＡＰＫシグナリング経路における決定的に重要な下流シグナリング成分であるＫｒａｓ遺伝子における活性化突然変異によるエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）またはＥＧＦＲ抑制療法に対する耐性が臨床において観察されている（Ｐａｏ，Ｗ．ら，ＰＬｏＳ Ｍｅｄ．２，ｅ７３（２００５））。また、エルロチニブ療法に対する獲得耐性はＥＧＦＲエキソン２０における二次突然変異（Ｔ７９０Ｍ）に臨床において関連づけられている。また、最近の研究は、ＥＲＢ３をリン酸化してエルロチニブ療法に対する耐性を付与するＲＴＫであるｃＭＥＴを特定している。
【００２７】
最近、ＩＧＦ１Ｒシグナリング経路の活性化が、ＥＧＦＲ ＴＫＩであるゲフィチニブ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）に対する耐性の媒介に関連づけられた（Ｇｕｉｘ Ｍら，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１１８（７）：２６０９−２６１９（２００８））。その著者は、ゲフィチニブ耐性（ＧＲ）ヒト扁平 上皮癌Ａ４３１細胞を、漸増量の該インヒビターと共にＡ４３１細胞を長時間インキュベートすることにより、単離した。ＧＲ細胞においては、該インヒビターはＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３およびＥｒｋのリン酸化レベルを減少させたが、Ａｋｔのリン酸化レベルは減少させなかった。この適応変化は、ＩＲＳ−１のリン酸化およびＰＩ３ＫとのＩＲＳ−１の相互作用のようなＩＧＦ−１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）により媒介されるシグナリング事象の活性化を伴っていた。該著者は続いて、ＩＧＦ−ＩＲの抑制がＰＩ３ＫとのＩＲＳ−１の会合を妨げること、ならびにＩＧＦ−ＩＲの抑制が、ゲフィチニブがＡｋｔリン酸化を軽減し細胞増殖を抑制する能力を回復させることを示した（図１Ａ）。他の研究者は、細胞における複数の受容体チロシンキナーゼ活性化がタルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）に対する薬物耐性に関与しうると仮定している。実際、ＥＧＦＲおよびｃＭＥＴの活性化がタルセバ耐性患者からの臨床サンプルにおいて観察されている。Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｎｉｃａｔｉｏｎｓ，３５５（３）：７００−７０６（２００７年４月）をも参照されたい。
【００２８】
インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、例えばインスリン様増殖因子ＩおよびＩＩが、腫瘍細胞のような種々の細胞型に対する分裂促進活性の発現に関連づけられている。ＩＧＦはインスリンに構造的に類似しており、種々の疾患および損傷における治療手段として関連づけられている。インスリン様増殖因子Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）は、８．４のｐＩを有する７６４９ダルトンのポリペプチドであり、血漿中を高濃度で循環し、ほとんどの組織において検出可能である（ＲｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔおよびＨｕｍｂｅｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７３：２３６５（１９７６）；ＲｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔおよびＨｕｍｂｅｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５３：２７６９（１９７８））。ＩＧＦ−Ｉは細胞分化および細胞増殖を刺激し、持続的増殖のためにはほとんどの哺乳類細胞型に要求される。これらの細胞型には、とりわけ、ヒト二倍体繊維芽細胞、上皮細胞、平滑筋細胞、Ｔリンパ球、神経細胞、骨髄性細胞、軟骨細胞、骨芽細胞および骨髄幹細胞が含まれる。これらの増殖因子のそれぞれは、インスリン様増殖因子受容体１（ＩＧＦ１Ｒ）と称される共通の受容体に結合することにより、その分裂促進効果を発現する（Ｓｅｐｐ−Ｌｏｒｅｎｚｉｎｏ，（１９９８）Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ４７：２３５）。Ｋｌａｐｐｅｒら，（１９８３）Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１１２：２２１５およびＲｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔら，（１９７８）Ｆｅｂｓ．Ｌｅｔｔ．８９：２８３も参照されたい。ＩＧＦ（ＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２およびＩＧＦ変異体）の作用および活性に関する大量の文献が存在する。Ｖａｎ Ｗｙｋら，Ｒｅｃｅｎｔ Ｐｒｏｇ．Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．，３０：２５９（１９７４）；Ｂｉｎｏｕｘ，Ａｎｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，４１：１５７（１９８０）；ＣｌｅｍｍｏｎｓおよびＶａｎ Ｗｙｋ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ Ｅｘｐ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５７：１６１（１９８１）；Ｂａｘｔｅｒ，Ａｄｖ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．，２５：４９（１９８６）；米国特許第４，９８８，６７５号；ＷＯ ９１／０３２５３；ＷＯ ９３／２３０７１を参照されたい。
【００２９】
ＩＧＦ系はＩＧＦ−１、ＩＧＦ−２およびインスリンに対する膜結合受容体から構成される。１型ＩＧＦ受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）は構造においてインスリン受容体（ＩＲ）に密接に関連しており、そのシグナリング経路の一部を共有しており（ＪｏｎｅｓおよびＣｌｅｍｍｏｎｓ，Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．，１６：３−３４（１９９５）；Ｕｌｌｒｉｃｈら，Ｃｅｌｌ ６１：２０３ ２１２，１９９０）、構造的にインスリン受容体に類似している（Ｕｌｌｒｉｃｈら，ＥＭＢＯ Ｊ．５：２５０３ ２５１２，１９８６）。ＩＧＦ−Ｉ受容体は以下の２つのタイプのサブユニットから構成される：アルファサブユニット（全体的に細胞外に存在しリガンド結合において機能する１３０ １３５ｋＤのタンパク質）、およびベータサブユニット（膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを有する９５ｋＤの膜貫通タンパク質）。ＩＧＦ−ＩＲは、まず、単一鎖プロ受容体ポリペプチドとして合成され、これはグリコシル化、タンパク質分解および共有結合によりプロセッシングされて、２つのアルファサブユニットと２つのベータサブユニットとを含む４６０ｋＤの成熟ヘテロ四量体へと合体する。該ベータサブユニットはリガンド活性化チロシンキナーゼ活性を有する。この活性は、該ベータサブユニットの自己リン酸化およびＩＧＦ−ＩＲ基質のリン酸化を含む、リガンド作用をもたらすシグナリング経路に関与する。
【００３０】
ＩＧＦ−ＩＲはＩＧＦ ＩおよびＩＧＦ ＩＩにはナノモル濃度のアフィニティー（例えば、１×１０〜９ｎＭのＫｄ）で結合するが、インスリンには１００〜１０００倍低いアフィニティーで結合しうる。代表的なナノモル濃度のアフィニティー値はＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，ｖｏｌ．５６５，ｐ．１９−２２（２００４）（その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に見出されうる。
【００３１】
インビトロおよびインビボでの腫瘍細胞の維持におけるＩＧＦ−Ｉおよび／またはＩＧＦ−ＩＲの役割に関する相当な証拠が存在する。例えば、「高い正常」レベルのＩＧＦ−Ｉを有する個体は、「低い正常」範囲のＩＧＦ−Ｉレベルを有する個体と比較して増加した、一般的な癌のリスクを有する（Ｒｏｓｅｎら，Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．１０：１３６ ４１，１９９９）。種々のヒト腫瘍の増殖においてＩＧＦ−Ｉ／ＩＧＦ−Ｉ受容体相互作用が果たす役割の総説としては、Ｍａｃａｕｌａｙ，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６５：３１１ ３２０，１９９２を参照されたい。ＩＧＦ−１Ｒシグナリングは、正常細胞の増殖および発生において中心的な役割を果たしていることに加えて、腫瘍細胞の増殖、細胞トランスフォーメーションおよび腫瘍形成において決定的に重要な役割を果たすことにも関連づけられている。Ｂａｓｅｒｇａ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５：２４９−２５２（１９９５）を参照されたい。総説としては、Ｋｈａｎｄｗａｌａら，Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．２１：２１５−２４４（２０００）；ＤａｕｇｈａｄａｙおよびＲｏｔｗｅｉｎ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ Ｒｅｖ．，１０：６８−９１（１９８９）を参照されたい。最近のデータは、ＩＧＦ−ＩＲが多種多様な腫瘍および腫瘍系において発現され、ＩＧＦがＩＧＦ−ＩＲへのその結合により腫瘍増殖を増幅するという結論を導いている。実際、該トランスフォーメーションにおいてＩＧＦ−ＩＲにより果たされる主要な役割を明らかに示している決定的な発見は、ＩＧＦ−ＩＲをコードする遺伝子が不活性化されているＲ−細胞が、通常は該細胞をトランスフォームしうる種々の因子（例えば、ウシパピローマウイルスのＥ５タンパク質、ＥＧＦＲの又はＰＤＧＦＲの過剰発現、ＳＶ４０のＴ抗原、活性化ｒａｓ、あるいはこれらの２つの最後の因子の組合せ）によるトランスフォーメーションに対して完全に治療抵抗性であるという実証である（Ｓｅｌｌ Ｃ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ，ＵＳＡ，９０：１１２１７−１１２２１，１９９３；Ｓｅｌｌ Ｃ．ら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１４：３６０４−３６１２，１９９４；Ｍｏｒｒｉｏｎｅ Ａ．Ｊ．，Ｖｉｒｏｌ．，６９：５３００−５３０３，１９９５；Ｃｏｐｐｏｌａ Ｄ．ら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１４：４５８８−４５９５，１９９４；ＤｅＡｎｇｅｌｉｓ Ｔら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ，１６４：２１４−２２１，１９９５）。この仮定を支持する他の重要な例は、ＩＧＦ−１Ｒに対するアンチセンスＲＮＡでの治療によるマウス癌細胞の転移表現型の喪失（Ｌｏｎｇら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５：１００６−１００９（１９９５））、ならびにＩＧＦ−１Ｒ抗体の添加によるヒトメラノーマ細胞運動性（Ｓｔｒａｃｋｅら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４：２１５５４−２１５５９（１９８９））の及びヒト乳癌細胞増殖のインビトロ抑制（Ｒｏｈｌｉｋら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１４９：２７６−２８１（１９８７））を含む。
【００３２】
発癌におけるＩＧＦ−ＩＲの役割を支持する他の論拠は、該受容体に対するマウスモノクローナル抗体を使用した又はＩＧＦ−ＩＲのネガティブドミナントを使用した研究によるものである。実際、ＩＧＦ−ＩＲに対するマウスモノクローナル抗体は培養内の多数の細胞系の増殖およびインビボでの腫瘍細胞の成長を抑制する（Ａｒｔｅａｇａ Ｃ．ら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，４９：６２３７−６２４１，１９８９；Ｌｉら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍ．，１９６：９２−９８，１９９３；Ｚｉａ Ｆら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，２４：２６９−２７５，１９９６；Ｓｃｏｔｌａｎｄｉ Ｋら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５８：４１２７−４１３１，１９９８）。同様に、ＩＧＦ−ＩＲのネガティブドミナントは腫瘍増殖を抑制しうることが、Ｊｉａｎｇら（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，１８：６０７１−６０７７，１９９９）の研究において示されている。
【００３３】
ＩＧＦ−ＩＲレベルは肺の腫瘍において上昇する（Ｋａｉｓｅｒら，Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１１９：６６５ ６６８，１９９３；Ｍｏｏｄｙら，Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ５２：１１６１ １１７３，１９９３；Ｍａｃａｕｌｅｙら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５０：２５１１ ２５１７，１９９０）。
【００３４】
前記のとおり、多数の治療剤は、第一線級の療法として、あるいは他の治療剤が第二線級および第三線級の治療剤として失敗に終わった場合に限り、組合せて使用（併用）されることが推奨される。多数の化合物が治療用の治験に現在付されているか、それを完了しているが、早期段階の及び進行または転移した肺癌を治療しうる追加的な治療用化合物が大いに必要とされている。
【００３５】
肺癌患者の５年生存率は依然として極めて不良であり（＜１５）、より有効な治療法の必要性が強調されている。ＮＳＣＬＣ、特にエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌を治療するための有効な療法を開発するための試みは、これまでに報告されていない。この必要性を満たす新規組合せ治療剤または組合せ治療計画を本明細書中に記載する。
【００３６】
本発明の他の特徴および利点は以下の詳細な説明および実施例（具体例）から明らかであろう。
【発明の概要】
【００３７】
発明の概括
本発明は、抗チロシンキナーゼインヒビターと、ヒトインスリン様増殖因子受容体１型（ＩＧＦ−１Ｒ）に特異的に結合する抗体との組合せを投与することによる、哺乳動物（典型的にはヒト）における癌の治療のための改良された組合せ治療剤および方法を提供する。
【００３８】
本発明の１つの態様においては、該チロシンキナーゼインヒビターはエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）である。
【００３９】
本発明のもう１つの態様においては、該ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体であるＭＫ−０６４６である。
【００４０】
本発明の更にもう１つの態様においては、該組合せの投与は、チロシンキナーゼヒンヒビターの単独投与と比較して増強した治療効力をもたらす。
【００４１】
本発明の更にもう１つの態様においては、該チロシンキナーゼインヒビターは、典型的には、該ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＭＫ−０６４６）の投与の前またはそれと同時に、経口投与される。
【００４２】
本発明のもう１つの態様においては、該抗ＩＧＦ−Ｒ抗体は、該チロシンキナーゼインヒビターの投与の前、それと同時またはその後に投与されうる。該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、非経口、例えば皮下、腫瘍内、静脈内、皮内、経口、経粘膜または直腸投与により投与されうる。特定の作用理論に束縛されるものではないが、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の投与によるＩＧＦ−１Ｒ媒介シグナリングカスケードの遮断は、天然ＩＧＦ−１Ｒリガンドの該受容体への結合に伴う該シグナリングカスケードを負にモジュレーションすることにより、抗腫瘍免疫を増強すると考えられる。
【００４３】
更にもう１つの実施形態においては、本発明は、治療的有効量のＩＧＦ１Ｒインヒビターの１以上またはその医薬組成物を対象に投与することを含む、該対象における治療または予防方法を提供する。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターは、
【化１】
【００４４】
およびＩＧＦ１Ｒ（例えば、ヒトＩＧＦ１Ｒ）に特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントからなる群から選択される。１つの実施形態においては、該抗体は、ダロツズマブ（Ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）または本明細書において例えば後記「ＩＧＦ１Ｒインヒビター」の節に記載されているいずれかの他のＩＧＦ１Ｒインヒビターを含む。１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターを１以上の他の抗癌化学療法物質（抗癌化学療法剤）またはその医薬組成物と組合せて投与する。
【００４５】
１つの実施形態においては、そのような他の抗癌化学療法物質は、テニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）
【化２】
【００４６】
、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）
【化３】
【００４７】
、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）
【化４】
【００４８】
、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）
【化５】
【００４９】
、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）
【化６】
【００５０】
、そのいずれかのリポソーム製剤、例えばケリックス（Ｃａｅｌｙｘ）または
ドキシル（Ｄｏｘｉｌ（登録商標））、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）
【化７】
【００５１】
、１３−シス−レチノイン酸
【化８】
【００５２】
、イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）
【化９】
【００５３】
ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）
【化１０】
【００５４】
、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）
【化１１】
【００５５】
、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）
【化１２】
【００５６】
、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）
【化１３】
【００５７】
、メトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）
【化１４】
【００５８】
および本明細書において例えば後記「他の化学療法物質」の節に記載されているいずれかの他の化学療法物質からなる群から選択されるメンバーである。１つの実施形態においては、本明細書に記載されている任意の抗ＩＧＦ１Ｒ抗体の投与量は約１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重または４０〜１０００ｍｇ／ｍ２の範囲である。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を同時に投与する。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を非同時に投与する。１つの実施形態においては、該抗体はＩｇＧ定常領域を含む。１つの実施形態においては、該対象はヒト（例えば、小児）である。１つの実施形態においては、該ＩＧＦ１Ｒインヒビターを抗癌治療手法と組合せて投与する。１つの実施形態においては、該抗癌治療手法は外科的腫瘍摘出術および／または抗癌放射線治療である。
【００５９】
本発明の１つの実施形態においては、該抗ＩＧＦ１Ｒ抗体またはその抗原結合性フラグメントは、本明細書に記載されているとおり、１以上の２．１２．１ ｆｘＣＤＲ（例えば、３つの軽鎖ＣＤＲおよび／または３つの重鎖ＣＤＲ）を含む。
【００６０】
本発明は更に、本明細書に記載されている説明に従い使用するためのＥＧＦＲインヒビターと抗ＩＧＦ−１Ｒアンタゴニストとを含む組成物およびキットを提供する。
【００６１】
本明細書中で用いる「抗体」なる語は、モノクローナル、ポリクローナル、キメラ、一本鎖、二重特異性およびヒト化または最適化抗体、ならびにＦａｂフラグメント、例えば、ＩＧＦ−１Ｒタンパク質に対する抗体の結合特異性を維持しているフラグメント、例えば、本発明の抗体により結合されるものと同じエピトープを発現するそのフラグメントを含む。
【００６２】
本発明の他の特徴および利点は、実施例および図面（その説明は後記に記載されている）を含む以下の説明において見出される。
【００６３】
発明の詳細な説明
精力的な研究の結果として、本発明者らは、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体またはその医薬上許容される塩をチロシンキナーゼインヒビターと組合せて使用することにより、相乗的に優れた抗癌活性が得られうることを見出した。該ＩＧＦ−１Ｒ抗体は、ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、フィジツムマブ（ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）、シクスツムマブ（ｃｉｘｕｔｕｍｕｍａｂ）、ＳＨＣ ７１７４５４、Ｒｏｃｈｅ Ｒ１５０７、ＥＭ １６４またはＡｍｇｅｎ ＡＭＧ４７９の１つである。
【００６４】
本発明の広範な態様は哺乳動物における抗腫瘍応答の増強方法に関する。本発明は、非小細胞肺癌、乳癌、結腸直腸癌、軟部組織または骨肉腫および子宮内膜癌からなる群から選択される癌の治療において特に有用である。しかし、本発明は、種々の他の癌、例えば脳癌、頚脳（ｃｅｒｖｉｃｏｃｅｒｅｂｒａｌ）癌、食道癌、甲状腺癌、小細胞肺癌、肺癌、胃癌、胆嚢／胆道癌、肝癌、膵癌、卵巣癌、絨毛癌、子宮体癌、子宮頚癌、腎盤／尿管癌、膀胱癌、前立腺癌、陰茎癌、精巣癌、胎児癌、ウィルムス癌、皮膚癌、悪性黒色腫、神経芽腫、骨肉腫、ユーイング肉腫、軟部肉腫、急性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病およびホジキンリンパ腫の治療において有用であろう。より詳しくは、本発明は、チロシンキナーゼインヒビターと抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体とを含む組合せ、およびＮＳＣＬＣを治療するための該組合せの投与方法に関する。
【００６５】
定義および一般的技術
本明細書中で言及されている参考研究、特許、特許出願および科学文献（ＧｅｎＢａｎｋデータベース配列へのアクセッション番号を含む）は当業者の知見を確定するものであり、それぞれが参照により本明細書に組み入れられると具体的かつ個別に示されている場合と同等に、それらの全体を参照により本明細書に組み入れることとする。本明細書中で引用されているいずれかの参考文献と本明細書の具体的な教示との間の矛盾は、後者を優先して解決されるものとする。同様に、当技術分野で理解されている用語の定義と、本明細書において具体的に教示されている用語の定義との間の矛盾は、後者を優先して解決されるものとする。また、本明細書で用いられる術語は、専ら個々の実施形態を説明することを目的としたものであり、添付の特許請求の範囲のみにより限定される本発明の範囲を限定するものではないと理解されるべきである。
【００６６】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いる単数形は、文脈に明らかに矛盾しない限り、複数形指示物を含むことに注目する必要がある。したがって、例えば、「遺伝的改変」に対する言及は複数のそのような改変を含み、「プローブ」に対する言及は１以上のプローブおよび当業者に公知のその均等物に対する言及を含む、などである。
【００６７】
本明細書中に記載されている全ての刊行物を、該刊行物の引用対象である方法および／または材料を開示し記載するために、参照により本明細書に組み入れることとする。本明細書中に引用されている刊行物は、本出願の出願日の前のそれらの開示に関して引用されている。この場合、より早い優先日または先行する発明日に基づいて本発明者らが該刊行物に先行すると主張する権利がないと自認するものと解釈されるべきではない。さらに、実際の公開日は、示されているものとは異なる可能性があり、独立した証明を要する。
【００６８】
本明細書中で特に示されている場合を除き、本発明に関して用いられている科学技術用語は、当業者に一般に理解されている意味を有するものとする。さらに、文脈に矛盾する場合を除き、単数形の語は複数物を含むものとし、複数形の語は単数物を含むものとする。一般に、本明細書に記載されている細胞および組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学ならびにタンパク質および核酸化学およびハイブリダイゼーションに関して及びそれらの技術において用いられている用語体系は、当技術分野においてよく知られており一般に用いられているものである。特に示さない限り、本発明の方法および技術は、一般に、当技術分野でよく知られている通常の方法に従って行われ、また、本明細書の全体にわたって引用され記載されている種々の一般的およびより具体的な参考文献に記載されているとおりに行われる。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）ならびにＡｕｓｕｂｅｌら，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（１９９２）ならびにＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９９０）（それらを参照により本明細書に組み入れることとする）を参照されたい。酵素反応および精製技術は、本明細書に記載されているとおり、または当技術分野において一般に行われているとおり、製造業者の説明に従って行われる。分析化学、合成有機化学および医薬化学に関して用いられている用語体系、ならびにそれらの実験手法および技術は、当技術分野においてよく知られており一般に用いられているものである。化学合成、化学分析、医薬の製造、製剤化（処方）および運搬ならびに患者の治療には、標準的な技術が用いられる。
【００６９】
以下の用語は、特に示さない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする。
【００７０】
本発明の目的においては、組織サンプルの「切片」は、組織サンプルの単一部分または断片、例えば、組織サンプルから切り出された組織または細胞の薄片を意味する。組織サンプルの複数の切片が、本発明に従い、採取され分析に付されうると理解される。
【００７１】
「癌」または「悪性疾患」は同義語として用いられ、制御されていない異常な細胞増殖、罹患細胞が局所的に又は血流およびリンパ系を介して他の身体部位へ広がる（すなわち、転移する）能力、ならびに幾つかの特徴的な構造的および／または分子的特徴のいずれかにより特徴づけられる幾つかの疾患のいずれかを意味する。「癌性」または「悪性細胞」は、特異的構造的特性を有し分化能を欠き浸潤し転移しうる細胞と理解される。癌の具体例としては、腎癌、結腸癌、乳癌、前立腺癌および肝癌が挙げられる（ＤｅＶｉｔａ，Ｖ．ら（編），２００１，Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ Ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，６．ｓｕｐ．ｔｈ Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．を参照されたい；この参考文献の全体をあらゆる目的で参照により本明細書に組み入れることとする）。より詳しくは、実施例（具体例）は、本明細書に詳細に記載されている組合せ療法を用いるＮＳＣＬＣの治療を詳細に記載しているが、「癌」なる語はそれに限定されない。それは、ＩＧＦ−１Ｒ依存性でありＥＧＦＲ依存性である全ての腫瘍を含む。このタイプの典型的な癌は、例えば膵癌を含む。
【００７２】
癌細胞の特徴の１つは、宿主により制御できない様態で増殖（成長）する傾向であるが、個々の癌細胞に関連した病態はいずれの形態をもとりうる。原発癌細胞（すなわち、悪性トランスフォーメーションの部位の近くから得られる細胞）は、十分に確立された病理学的技術、特に組織学的検査により、非癌細胞から容易に識別されうる。本明細書中で用いる癌細胞の定義は、原発癌細胞だけでなく、癌細胞祖先に由来する任意の細胞をも含む。これは転移癌細胞、ならびに癌細胞に由来するインビトロ培養および細胞系を含む。
【００７３】
細胞系−−「細胞系」または「細胞培養」は、インビトロで増殖または維持された、より高等な真核細胞を意味する。細胞の後代（子孫）は（形態学的に、遺伝子型において、または表現型において）親細胞と完全に同一でなくてもよいと理解される。「未培養（ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ）」として記載されている細胞は、生きた生物から直接的に得られ、該生物から、限られた長さの時間にわたって（該細胞が実質的な複製を受けるのに十分な程度に長くはない時間またはそのような条件下）維持されている。
【００７４】
本出願において用いる疾患の「診断」は、例えば、ＩＧＦ−１Ｒの発現に関連した又は該発現によりもたらされる病的過増殖性発癌障害の存在を診断または検出すること、該疾患の進行をモニターすること、およびＩＧＦ−１Ｒの発現に関連した障害の指標となる細胞またはサンプルを特定または検出することを含むと意図される。診断（する）、検出（する）、特定（する）などの語は本明細書においては互換的に用いられる。
【００７５】
本明細書中で用いる「病変」−−宿主細胞における癌細胞により引き起こされる「病変」は、該宿主の健常な生理的状態を損なうあらゆるものである。これは、癌細胞の異常または制御不能な増殖（成長）、転移、ＩＧＦ−１Ｒ含有細胞の発現レベルの増加、または不適当なレベルの他の産物、その生理的環境に不適当な機能の発現、隣接細胞の正常機能の阻害、炎症または免疫応答の悪化または抑制、あるいは望ましくない化学物質または侵襲性生物の存在を含みうるが、これらに限定されるものではない。
【００７６】
個体または細胞の「治療（処理）」は、該個体または細胞の未治療（未処理）経過を改変するための任意のタイプの介入である。例えば、個体の治療は、該個体に存在する癌により引き起こされる病変を軽減または抑制するために行われうる。治療（処理）は、ａ）組成物または組合せ療法（治療用物質）、例えば、ＩＧＦ−１Ｒ特異的ｍＡｂとチロシンキナーゼインヒビターとを含む医薬組成物の投与を含むが、これに限定されるものではない。「治療（処理）」なる語は、該生物において治療効果をもたらすこと、および少なくとも部分的には異常状態を軽減または阻止することを意味する。治療（処理）は、腫瘍の増殖（成長）の抑制、抑制された腫瘍増殖の維持、および寛解の誘導を含む。
【００７７】
「予防」なる語は、生物が異常状態に罹患する又は異常状態を発生する可能性を減少させることを意味する。
【００７８】
本明細書中で用いる「約」なる語は、許容されうる範囲内の、示されている値の近似値を意味する。好ましくは、該範囲は、示されている値の＋／−５％である。
【００７９】
「または」なる語は、文脈に明らかに矛盾しない限り、本明細書においては「および／または」なる語を意味するものとして用いられ、「および／または」なる語と互換的に用いられる。
【００８０】
「ＩＧＦ１Ｒ」、「ＩＧＦＲ１」、「インスリン様増殖因子受容体−Ｉ」および「インスリン様増殖因子受容体Ｉ型」なる語は当技術分野でよく知られている。ＩＧＦ−１Ｒは任意の生物に由来しうるが、それは好ましくは動物に由来し、より好ましくは哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジまたはイヌ）に由来し、最も好ましくはヒトに由来する。典型的なヒトＩＧＦ−１Ｒ前駆体のヌクレオチドおよびアミノ酸配列はＧｅｎｂａｎｋ（例えば、Ｇｅｎｅ ＩＤ ３４８０またはＮＭ０００８７５）において入手可能である。該前駆体の切断（例えば、アミノ酸７１０と７１１との間におけるもの）はαサブユニットおよびβサブユニットを与え、これらは会合して成熟受容体を形成する。
【００８１】
「免疫グロブリン」は四量体分子である。天然に存在する免疫グロブリンにおいては、各四量体は、ポリペプチド鎖の、２つの同一ペアから構成され、各ペアは１つの「軽」鎖（約２５ｋＤａ）および１つの「重」鎖（約５０ ７０ｋＤａ）を有する。各鎖のアミノ末端部分は、主に抗原認識をもたらす約１００〜１１０個またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を含む。各鎖のカルボキシ末端部分はカッパおよびラムダ軽鎖として分類される。重鎖はミュー、デルタ、ガンマ、アルファまたはイプシロンとして分類され、それぞれＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＥとしての、抗体のイソタイプを定める。軽鎖および重鎖においては、可変領域および定常領域は約１２個以上のアミノ酸の「Ｊ」領域により連結されており、重鎖は約１０個以上のアミノ酸の「Ｄ」領域をも含む。全般的には、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｃｈ．７（Ｐａｕｌ，Ｗ．編，２ｎｄ ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））（その全体をあらゆる目的で本明細書中に組み入れることとする）を参照されたい。各軽／重鎖ペアの可変領域は抗体結合部位を形成していて、完全な免疫グロブリンは２つの結合部位を有する。
【００８２】
「抗体」は、完全な免疫グロブリン、または特異的結合に関して完全抗体と競合するその抗原結合性部分を意味する。抗原結合性部分は、組換えＤＮＡ技術により、または完全抗体の酵素的もしくは化学的切断により製造されうる。抗原結合性部分には、とりわけ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｄＡｂおよび相補性決定領域（ＣＤＲ）フラグメント、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、キメラ抗体、ジアボディ、および特異的結合をもたらすのに十分な、免疫グロブリンの少なくとも一部を含有するポリペプチドが含まれる。幾つかの抗ＩＧＦ１Ｒ抗体が当技術分野で公知である（例えば、ＷＯ ０３／１００００８；ＷＯ ２００２／５３５９６；ＷＯ ０４／７１５２９；ＷＯ ０３／１０６６２１；ＵＳ２００３／２３５５８２；ＷＯ ０４／８３２４８；ＷＯ ０３／５９９５１；ＷＯ ０４／８７７５６またはＷＯ ２００５／１６９７０を参照されたい）。他の小分子ＩＧＦ１Ｒインヒビターも当技術分野で公知である。
【００８３】
本出願で用いる「抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体」なる語は、一括して、２００３年１２月１６日付け出願の米国特許第７，２４１，４４４号（その全内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に開示されている抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体総称される。それにおいて特許請求されている種々のＣＤＲ、軽鎖および重鎖のアミノ酸配列ならびに該全抗体をコードするヌクレオチド配列も、それらの全体を参照により本明細書に組み入れることとする。同様に、出願第１１／８０１，０８０号の開示も、その全体を参照により本明細書に組み入れることとする。
【００８４】
「患者」なる語はヒトおよび獣医対象を含む。
【００８５】
抗体− ＩＧＦ−１Ｒ（ｈ７Ｃ１０）
本明細書中に詳細に記載されているとおり、本発明の態様の１つは、チロシンキナーゼインヒビター−ＥＧＦＲ、例えばエルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、およびヒトインスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）−１に特異的に結合する抗体を癌患者に共投与することによる抗癌物質（抗癌剤）の抗腫瘍効力の改善方法に関する。
【００８６】
したがって、提示されている組合せ療法において使用されるＩＧＦ−１Ｒ抗体は、インスリン様増殖因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）に特異的に結合するものである。該組合せ療法において使用される典型的な抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体およびその使用方法は米国特許第７，２４１，４４４号（‘４４４特許）（その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に記載されている。例えば、‘４４４特許の請求項１を参照されたい。「ｈ７Ｃ１０」または「ＭＫ−０６４６」は、ＩＧＦ−１Ｒに結合するものとして及びＩＲ／ＩＧＦ−１ハイブリッド受容体に結合するものとして特徴づけられるヒト化抗体を示すために互換的に用いられる。そのような抗体は、好ましくは、例えば‘４４４特許に記載されている抗体を含み、ここで、該抗体はヒト化抗体またはそのフラグメントであり、軽鎖および／または重鎖を含み、ここで、該軽鎖および／または重鎖の骨格セグメントＦＲ１〜ＦＲ４は、それぞれ、ヒト抗体軽鎖および／または重鎖の骨格セグメントＦＲ１〜ＦＲ４に由来する。該ヒト化抗体は、配列番号１、２または３からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する非ヒト由来の少なくとも１以上の相補性決定領域を含む少なくとも１つの軽鎖と、配列番号４、５または６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する少なくとも１以上の相補性決定領域を含む少なくとも１つの重鎖とを含みうる。該軽鎖は、配列番号７または８の１つにおいて記載されているアミノ酸配列の１以上、または配列番号７または８の配列に対して最適アライメント後に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含みうる。同様に、該重鎖は、配列番号９、１０または１１の１つにおいて記載されているアミノ酸配列の１以上、または配列番号９、１０または１１の配列に対して最適アライメント後に少なくとも８０％の同一性を有する配列を含みうる。ある実施形態においては、該治療方法は、ＭＫ−０６４６により結合されるものと同じＩＧＦ−１Ｒ上のエピトープに結合する抗体を投与することを含む。
【００８７】
組換え抗体（ＩＧＦ−１Ｒ特異的ｍＡｂ）を発現させるための核酸分子は’４４４特許（その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする）に記載されている。
【００８８】
本明細書中で用いる「核酸」または「核酸分子」は一本鎖または二本鎖の任意のＤＮＡまたはＲＮＡ分子を意味し、一本鎖の場合には、直鎖状または環状形態のその相補的配列の分子を含む。核酸分子を記載する場合、個々の核酸分子の配列または構造は、本明細書においては、配列を５’から３’への方向に示す通常の慣例に従って記載されうる。本発明の幾つかの実施形態においては、核酸は「単離」されている。この語は、ＤＮＡに適用される場合には、それが由来する生物の天然に存在するゲノムにおいてそれが直接的に隣接している配列から分離されたＤＮＡ分子に関して用いられる。例えば、「単離された核酸」は、ベクター（例えば、プラスミドまたはウイルスベクター）内に挿入された或いは原核もしくは真核細胞または宿主性物のゲノムＤＮＡ内に組込まれたＤＮＡ分子を含みうる。「単離された核酸」なる語は、ＲＮＡに適用される場合には、主として、前記の単離されたＤＮＡ分子によりコードされるＲＮＡ分子を意味する。あるいは、該用語は、それがその天然状態で（すなわち、細胞または組織において）会合している他の核酸から十分に分離されたＲＮＡ分子を意味しうる。単離された核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）は更に、生物学的または合成的手段により直接的に製造され、その製造中に存在する他の成分から分離された分子を表しうる。
【００８９】
本発明の核酸はまた、本発明の核酸の断片を含む。「断片」は、好ましくは少なくとも約１０核酸長、より好ましくは約４０核酸、最も好ましくは約１００核酸長の核酸配列を意味する。「断片」は、１以上の欠失、挿入または置換を含有する少なくとも約１００個の連続的ヌクレオチドの伸長をも意味しうる。「断片」はまた、遺伝子のコード配列全体を意味することが可能であり、５’および３’非翻訳領域を含みうる。
【００９０】
本発明において使用される抗体には、モノクローナル抗体、合成抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（二重特性抗体を含む）、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、一本鎖Ｆｖ（ｓｃｆｖ）（二重特異性ｓｃＦｖを含む）、一本鎖抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）フラグメント、ジスルフィド連結Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、および前記のいずれかのエピトープ結合性フラグメントが含まれるが、これらに限定されるものではない。特に、本発明において使用される抗体には、免疫グロブリン分子、および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち、ＩＧＦ−１Ｒに免疫特異的に結合するＩＧＦ−１Ｒ結合部位を含有する分子が含まれる。本発明において使用される免疫グロブリン分子は任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）またはサブクラスの免疫グロブリン分子でありうる。好ましくは、本発明において使用される抗体はＩｇＧ、より好ましくはＩｇＧ１である。
【００９１】
本発明において使用される抗体は任意の動物に由来しうる。好ましくは、該抗体はヒト化モノクローナル抗体である。あるいは、該抗体は、‘４４４特許において特許請求されている抗体の同じエピトープにそれが結合する限り、完全にヒトの抗体でありうる。本明細書中で用いる「ヒト」抗体には、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体が含まれ、ヒト免疫グロブリンライブラリーから単離された、またはヒト遺伝子から抗体を発現するマウスもしくは他の動物から単離された抗体が含まれる。
【００９２】
本発明において使用される抗体は単一特異性、二重特異性、三重特異性またはそれより多重特異性でありうる。多重特異性抗体はポリペプチドの種々のエピトープに免疫特異的に結合することが可能であり、あるいはポリペプチドおよび異種エピトープ（例えば、異種ポリペプチドまたは固体支持体）の両方に免疫特異的に結合しうる。例えば、国際公開番号ＷＯ ９３／１７７１５、ＷＯ ９２／０８８０２、ＷＯ ９１／００３６ＯおよびＷＯ ９２／０５７９３；Ｔｕｔｔら，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ １４７：６０−６９；米国特許第４，４７４，８９３号、第４，７１４，６８１号、第４，９２５，６４８号、第５，５７３，９２０号および第５，６０１，８１９号；ならびにＫｏｓｔｅｌｎｙら，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３を参照されたい。
【００９３】
本発明において使用される抗体には、該抗体の誘導体が含まれる。本発明で用いられる方法と共に使用される抗体をコードするヌクレオチド配列内に突然変異を導入するためには、当業者に公知の標準的な技術、例えば、アミノ酸の置換をもたらす部位特異的突然変異誘発およびＰＣＲ媒介突然変異誘発が用いられうる。好ましくは、該誘導体は、元の分子と比較して、２５個未満のアミノ酸の置換、２０個未満のアミノ酸の置換、１５個未満のアミノ酸の置換、１０個未満のアミノ酸の置換、５個未満のアミノ酸の置換、４個未満のアミノ酸の置換、３個未満のアミノ酸の置換、または２個未満のアミノ酸の置換を含む。好ましい実施形態においては、該誘導体は、１以上の推定非必須アミノ酸残基に施された保存的アミノ酸置換を有する。「保存的アミノ酸置換」は、類似電荷を有する側鎖を有するアミノ酸残基でアミノ酸残基が置換されているものである。類似電荷を有する側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当技術分野で定められている。これらのファミリーは、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、無極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ分枝側鎖を有するアミノ酸（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を含む。あるいは、突然変異を、例えば飽和突然変異誘発により、コード配列の全部または一部に沿ってランダムに導入することが可能であり、得られた突然変異体を生物活性に関してスクリーニングして、活性を保有する突然変異体を特定することが可能である。突然変異誘発後、コード化タンパク質を発現させることが可能であり、該タンパク質の活性を測定することが可能である。
【００９４】
本発明において使用される抗体には、修飾された（すなわち、任意のタイプの分子の、該抗体への共有結合により修飾された）誘導体が含まれる。例えば、限定的なものではないが、該抗体誘導体には、例えばグリコシル化、アセチル化、ＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｉｏｎ；ペジル化）、リン酸化、アミド化、公知の保護／遮蔽基による誘導体化、タンパク質分解切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への結合などにより修飾された抗体が含まれる。特異的化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシン（ｔｕｎｉｃａｍｙｃｉｎ）の存在下の合成など（これらに限定されるものではない）を含む任意の多数の化学修飾が公知技術により行われうる。また、該誘導体は１以上の非古典的アミノ酸を含みうる。
【００９５】
本発明はまた、当業者に公知のフレームワーク領域を含む、本発明において使用される抗体を提供する。ある実施形態においては、本発明において使用される組成物および方法において使用される抗体のフレームワーク領域の１以上、好ましくは、該フレームワーク領域の全ては、ヒトのものである。本発明において使用される或る他の実施形態においては、本発明において使用される抗体のフラグメント領域はヒト化されている。ある実施形態においては、本発明において使用される方法で使用される抗体は合成抗体、モノクローナル抗体、イントラボディ（ｉｎｔｒａｂｏｄｙ）、キメラ抗体、ヒト抗体、ヒト化キメラ抗体、ヒト化抗体、グリコシル化抗体、多重特異性抗体、ヒト抗体、一本鎖抗体または二重特異性抗体である。
【００９６】
ある実施形態においては、本発明において使用される抗体はＩＧＦ−１Ｒに対する高い結合アフィニティーを有する。
【００９７】
ある実施形態においては、本発明において使用される抗体は、約１２時間以上、約１日以上、約３日以上、約６日以上、約１０日以上、約１５日以上、約２０日以上、約２５日以上、約３０日以上、約３５日以上、約４０日以上、約４５日以上、約２ヶ月以上、約３ヶ月以上、約４ヶ月以上、または５ヶ月以上の、対象、好ましくはヒトにおける半減期を有する。増加したインビボ半減期を有する抗体は、当業者に公知の技術により製造されうる。例えば、増加したインビボ半減期を有する抗体は、ＦｃドメインとＦｃＲｎ受容体との相互作用に関与することが確認されたアミノ酸残基を修飾（例えば、置換、欠失または付加）することにより製造されうる［例えば、ＷＯ ９７／３４６３１および米国特許出願第１０／０２０，３５４（発明の名称“Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｗｉｔｈ Ｅｘｔｅｎｄｅｄ Ｈａｌｆ−Ｌｉｖｅｓ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ”）（Ｊｏｈｎｓｏｎらにより２００１年１２月１２日付けで出願された）；Ｕ．Ｓ．公開第２００５／００３７００号および第２００５／００６４５１４号（それらの全体を参照により本明細書に組み入れることとする）を参照されたい］。そのような抗体は、当業者に公知の方法を用いて、例えば本明細書に記載されているイムノアッセイにより、抗原への結合活性およびインビボ効力に関して試験されうる。
【００９８】
さらに、増加したインビボ半減期を有する抗体は、重合体分子、例えば高分子量ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を該抗体に結合させることにより製造されうる。ＰＥＧは、多官能性リンカーを使用して又は使用しないで、該抗体のＮまたはＣ末端へのＰＥＧの部位特異的コンジュゲート化により、あるいはリシン残基上の存在するイプシロン−アミノ基を介して、該抗体に結合されうる。生物活性の最低限度の喪失を引き起こす直鎖状または分枝状重合体誘導体化が用いられる。コンジュゲーションの度合は、該抗体へのＰＥＧ分子の適切なコンジュゲーションが確保されるように、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析により厳密にモニターされる。未反応ＰＥＧは、例えばサイズ排除またはイオン交換クロマトグラフィーにより、抗体−ＰＥＧコンジュゲートから分離されうる。ＰＥＧ誘導体化抗体は、当業者に公知の方法を用いて、例えば本明細書に記載されているイムノアッセイにより、抗原への結合活性およびインビボ効力に関して試験されうる。
【００９９】
ある実施形態においては、本発明において使用される抗体は、ＩＧＦ−１Ｒへの結合能を保有する、完全抗体の抗原結合性部分を含む。具体例には以下のものが含まれる：（ｉ）Ｆａｂフラグメント、すなわち、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる１価フラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、すなわち、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂフラグメントを含む２価フラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄら，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）。さらに、Ｆｖフラグメントの２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは別々の遺伝子によりコードされているが、それらは、それらが単一タンパク質鎖（ここで、ＶＬおよびＶＨ領域はペアとなって１価分子を形成する）として産生されることを可能にする合成リンカーにより、組換え法を用いて連結されうる（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知である；例えば、Ｂｉｒｄら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎら（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９−５８８３を参照されたい）。そのような一本鎖抗体は「抗体」なる語に対する言及に含まれる。
【０１００】
ＩＧＦ−１Ｒに対する抗体の製造方法はよく知られている。例えば、‘４４１特許を参照されたい。
【０１０１】
抗体特異性に関するスクリーニング− 抗体の製造のための技術は前記に記載されている。所望により、ある生物学的特性を有する抗体を更に選択することが可能である。例えば、該抗体は、産生されたら、ＩＧＦ−１Ｒに対するその結合アフィニティーに関してスクリーニングされうる。ＩＧＦ−１Ｒに特異的に結合する抗体に関するスクリーニングは、マイクロタイタープレートがＩＧＦ−１Ｒでコーティングされた酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて達成されうる。いくつかの実施形態においては、陽性反応性クローンからのＩＧＦ−１Ｒに結合する抗体を更に、ＥＬＩＳＡに基づくアッセイにおける他のＩＧＦ−１Ｒアイソフォーム（例えば、ＩＧＦ−１Ｒ）に対する反応性に関して、そのような他のＩＧＦ−１Ｒアイソフォームでコーティングされたマイクロタイタープレートを使用してスクリーニングすることが可能である。ＩＧＦ−１Ｒの別のアイソフォームに反応性である抗体を産生するクローンを排除し、ＩＧＦ−１Ｒのみに反応性である抗体を産生するクローンを更なる増殖および発生のために選択することが可能である。ＩＧＦ−１Ｒに対する該抗体の反応性の確認は、例えばウエスタンブロットアッセイを用いて達成されうる。該ウエスタンブロットアッセイにおいては、卵巣癌、乳癌、腎癌、結腸直腸癌、肺癌、子宮内膜癌または脳癌細胞からのタンパク質および精製されたＩＧＦ−１Ｒおよび他のＩＧＦ−１ＲアイソフォームをＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル上で泳動させ、ついで膜上にブロッティングする。ついで該膜を推定抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体でプローブすることが可能である。ＩＧＦ−１Ｒに対する反応性および別のインスリン様受容体アイソフォームに対する無反応性はＩＧＦ−１Ｒに対する反応性の特異性を証明するものである。
【０１０２】
ＩＧＦ−１Ｒまたはその誘導体を検出するための一般的方法− 本発明の抗体またはその結合性フラグメントを使用するＩＧＦ−１Ｒを検出するためのアッセイ法は特に限定されるものではない。被験流体中の抗原の量（例えば、ＩＧＦ−１Ｒのレベル）に対応する抗体、抗原または抗体−抗原複合体の量が化学的または物理的手段により検出可能であり、既知量の該抗原を含有する標準溶液から作成された標準曲線から該抗原の量が算出されうる限り、任意のアッセイ法が用いられうる。本発明に含まれる代表的イムノアッセイには以下のものが含まれるが、それらに限定されるものではない：米国特許第４，３６７，１１０号に記載されているもの（二重モノクローナル抗体サンドイッチアッセイ）；Ｗｉｄｅら，ＫｉｒｋｈａｍおよびＨｕｎｔｅｒ編，Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｅ．およびＳ．Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ（１９７０）に記載されているもの；米国特許第４，４５２，９０１号に記載されているもの（ウエスタンブロット）；Ｂｒｏｗｎら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５５：４９８０−４９８３（１９８０）に記載されているもの（標識リガンドの免疫沈降）；およびＢｒｏｏｋｓら，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３９：４７７（１９８０）に記載されているもの（免疫細胞化学）；光学顕微鏡、フローサイトメトリーまたは蛍光測定検出と共に蛍光標識抗体を使用する免疫蛍光技術など。Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ８０’ｓ，Ａ．Ｖｏｌｌｅｒら編，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐａｒｋ，１９８１，Ｚｏｌａ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７−１５８（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９８７）も参照されたい。
【０１０３】
（１）サンドイッチアッセイは、検出すべきタンパク質の別々の免疫原性部分またはエピトープにそれぞれが結合しうる２つの抗体の使用を含む。サンドイッチアッセイにおいては、該試験サンプルアナライトが、固体支持体上に固定化された第１抗体に結合し、ついで第２抗体が該アナライトに結合して、不溶性の３成分複合体を形成する。例えば、米国特許第４，３７６，１１０号を参照されたい。第２抗体自体が、検出可能部分で標識されることが可能であり（直接サンドイッチアッセイ）、あるいは検出可能部分で標識された抗免疫グロブリン抗体を使用して測定されることが可能である（間接サンドイッチアッセイ）。例えば、１つのタイプのサンドイッチアッセイはＥＬＩＳＡアッセイであり、この場合、検出可能部分は酵素である。
【０１０４】
該サンドイッチアッセイにおいては、本発明の固定化抗体を試験流体と反応させ（一次反応）、ついで本発明の抗体の標識形態と反応させ（二次反応）、該固定化担体上の該標識物質の活性を測定し、それにより該試験流体中のＩＧＦ−１Ｒレベルを定量することが可能である。該一次および二次反応は同時に又は或る時間間隔で行われうる。標識および固定化の方法は前記方法の変法により行われうる。該サンドイッチアッセイによるイムノアッセイにおいては、固定化または標識抗体のために使用される抗体は必ずしも１つの種からのものである必要はなく、２以上の種の抗体の混合物を使用して、測定感度などを向上させることが可能である。該サンドイッチアッセイによりＩＧＦ−１Ｒをアッセイする方法においては、例えば、該一次反応において使用される抗体がＩＧＦ−１ＲのＣ末端領域における部分ペプチドを認識する場合には、該二次反応において使用される抗体は、好ましくは、該Ｃ末端領域以外の部分ペプチド（すなわち、Ｎ末端領域）を認識するものである。該一次反応に使用される抗体がＩＧＦ−１ＲのＮ末端における部分ペプチドを認識する場合には、該二次反応において使用される抗体としては、好ましくは、Ｎ末端領域以外の部分ペプチド（すなわち、Ｃ末端領域）を認識する抗体が使用される。
【０１０５】
ＩＧＦ−１Ｒを検出するのに同様に有用でありうる他のタイプの「サンドイッチ」アッセイは、いわゆる「同時」および「リバース（逆）」アッセイである。同時アッセイは単一インキュベーション工程を含み、この場合、固体支持体に結合した抗体および標識抗体の両方を被験サンプルに同時に加える。該インキュベーションが完了した後、該固体支持体を洗浄して流体サンプルの残渣および未複合体化標識抗体を除去する。ついで、通常の「フォワード」サンドイッチアッセイの場合と同様に、該固体支持体に結合した標識抗体の存在を決定する。
【０１０６】
「リバース」アッセイにおいては、まずは標識抗体の溶液を流体サンプルに加え、ついで、適当なインキュベーション時間の後に固体支持体に結合した未標識抗体を加えるという逐次的添加を行う。第２のインキュベーションの後、該固相を常法により洗浄して、それを被験サンプルの残渣および未反応標識抗体の溶液から取り出す。ついで、「同時」および「フォワード」アッセイの場合と同様に、固体支持体に結合した標識抗体の測定を行う。１つの実施形態においては、別々のエピトープに特異的な本発明の抗体の組合せを使用して、高感度な３部位免疫放射線アッセイを構築する。
【０１０７】
このタイプのアッセイはまた、ＩＧＦ−１Ｒ発現がどのような「サンプル」において生じうる場合であっても、ＩＧＦ−１Ｒ発現を定量するために用いられうる。したがって、ある態様においては、該サンドイッチアッセイは、
（ｉ）担体上に固定化されたＩＧＦ−１ＲのＮ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体、Ｃ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体の標識形態、および試験流体を反応させ、該標識の活性を測定することを含む、試験流体中のＩＧＦ−１Ｒの発現レベルを定量するための方法、または
（ｉｉ）担体上に固定化されたＩＧＦ−１ＲのＣ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体、ＩＧＦ−１Ｒの標識形態のＮ末端領域における部分ペプチドと特異的に反応する抗体、および試験流体を反応させ、該標識の活性を測定することを含む、試験流体中のＩＧＦ−１Ｒ発現を定量するための方法などを含む。
【０１０８】
（２）競合結合アッセイは、限られた量の抗体との結合に関して試験サンプルアナライトと標識標準物が競合しうることに基づく。試験サンプル中のＩＧＦ−１Ｒタンパク質の量は、該抗体に結合した標準物の量に反比例する。結合した標準物の量の決定を促進するために、一般には、該抗体に結合した標準物およびアナライトが、未結合のままである標準物およびアナライトから簡便に分離されうるように、該競合の前または後に該抗体を不溶化する。
【０１０９】
ＩＧＦ−１Ｒ発現のレベルを定量するために、当業者は、本発明の抗体またはそのフラグメント、試験流体およびＩＧＦ−１Ｒの標識形態を組合せ及び／又は競合的に反応させ、該抗体またはそのフラグメントに結合した標識ＩＧＦ−１Ｒの比を測定し、それにより該試験流体中のＩＧＦ−１Ｒを定量することが可能である。
【０１１０】
（３）免疫測定アッセイ
免疫測定アッセイにおいては、試験流体中の抗原および固相抗原を、ある与えられた量の標識形態の本発明の抗体と競合的に反応させ、ついで固相を液相から分離する。あるいは試験流体中の抗原および過剰量の標識形態の本発明の抗体を反応させ、ついで固相抗原を加えて、未反応の標識形態の本発明の抗体を該固相に結合させ、ついで該固相を液相から分離する。ついで該相のいずれかの標識量を測定して、該試験流体中の抗原レベルを決定する。
【０１１１】
典型的な及び好ましい免疫測定アッセイには、「フォワード」アッセイが含まれ、この場合、該固相に結合した抗体を、まず、被験サンプルと接触させて、二成分固相抗体−ＩＧＦ１Ｒ複合体の形成により該サンプルからＩＧＦ−１Ｒを抽出する。適当なインキュベーション時間の後、固体支持体を洗浄して、未反応ＩＧＦ−１Ｒ（存在する場合）を含む流体サンプルの残渣を除去し、ついで既知量の標識抗体（これは「レポーター分子」として機能する）を含有する溶液と接触させる。未標識抗体を介して固体支持体に結合したＩＧＦ−１Ｒと該標識抗体が複合体を形成するのを可能にする第２のインキュベーション時間の後、該固体支持体を再度洗浄して該未反応標識抗体を除去する。このタイプのフォワードサンドイッチアッセイは、ＩＧＦ−１Ｒが存在するかどうかを決定するための単純な「イエス／ノー（有／無）」アッセイであることが可能であり、あるいは既知量のＩＧＦ−１Ｒを含有する標準サンプルに関して得られた尺度と標識抗体の尺度を比較することにより定量的にされうる。そのような「２部位」または「サンドイッチ」アッセイはＷｉｄｅ（Ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｅ Ａｓｓａｙ Ｍｅｔｈｏｄ，Ｋｉｒｋｈａｍ編，Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎｅ，Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ，１９７０，ｐｐ．１９９−２０６）により記載されている。
【０１１２】
（４）ネフェロメトリー
ネフェロメトリーにおいては、ゲル内または溶液中で抗原−抗体反応の結果として生じる不溶性沈降物の量を測定する。試験流体中の抗原の量が少なく、少量の該沈降物しか得られない場合であっても、レーザー散乱を用いるレーザーネフェロメトリーが好適に用いられうる。
【０１１３】
標識剤を使用する前記アッセイ方法（１）〜（４）において使用されうる標識剤の具体例には、放射性同位体（例えば、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓなど）、蛍光物質、例えばシアニン蛍光色素（例えば、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７）、フルオレスカミン、フルオレセインイソチオシアナートなど、酵素（例えば、ベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼ、リンゴ酸デヒドロゲナーゼなど）、発光物質（例えば、ルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、ルシゲニンなど）、ビオチン、ランタニドなどが含まれる。また、抗体を標識剤に結合させるために、ビオチン−アビジン系も使用されうる。
【０１１４】
抗原または抗体の固定化においては、物理的吸着が用いられうる。あるいは、タンパク質、酵素などの固定化に通常用いられる化学結合も用いられうる。該担体の具体例には、不溶性多糖、例えばアガロース、デキストラン、セルロースなど；合成樹脂、例えばポリスチレン、ポリアクリルアミド、シリコーンなど；またはガラスなどが含まれる。
【０１１５】
もう１つの実施形態においては、本発明は、体液（例えば、血液、血清、血漿、喀痰など）中のＩＧＦ−１Ｒレベルの特定および測定により癌および腫瘍の診断を補助する。ＩＧＦ−１Ｒが通常存在し、発癌性障害の発生が異常量の細胞表面受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）（例えば、正常と比べた場合の発現）により引き起こされる場合には、該アッセイは、生物学的サンプル中のＩＧＦ−１Ｒレベルを、同じ細胞型の正常非発癌性組織において予想される範囲と比較すべきである。したがって、対照被験者または当該被験者のベースラインと比較した場合の被験者におけるＩＧＦ−１Ｒ含有細胞の量またはＩＧＦ−１Ｒ発現レベルにおける統計的に有意な増加は、進行中の発癌性障害またはそのような障害のリスクの診断につながりうる要因となりうる。同様に、転移する可能性のある癌の指標となる高レベルのＩＧＦ−１Ｒの存在も検出されうる。本発明の抗体により認識される抗原（例えば、ＩＧＦ−１Ｒ）を発現する癌の場合、抗原を検出しうることは早期診断をもたらし、それにより早期治療の可能性をもたらす。早期段階で診断することが困難な癌では早期検出が特に重要である
さらに、体液サンプル、例えば血液において検出され測定される抗原のレベルは、癌または腫瘍に対する治療（限定的なものではないが、手術、化学療法、放射線療法、本発明の治療方法およびそれらの組合せを含む）の経過をモニターするための手段を提供する。体液中の抗原のレベルを疾患の重症度と相関させることにより、そのような抗原のレベルを用いて、例えば原発腫瘍、癌および／もしくは転移の除去の成功を示し、ならびに／または他の療法の有効性を経時的にモニターすることが可能である。例えば、癌または腫瘍特異的抗原のレベルの経時的減少は患者における腫瘍負荷の軽減を示す。これとは対照的に、抗原のレベルの経時的な無変化または増加は療法の無効性または腫瘍もしくは癌の継続的な成長を示す。
【０１１６】
検体中の該抗体の検出は、当技術分野で公知の技術、例えば免疫酵素技術、例えばイムノペルオキシダーゼ染色技術、またはアビジン−ビオチン技術、または免疫蛍光技術を用いて達成されうる（例えば、Ｃｉｏｃｃａら，１９８６，“Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ Ｕｓｉｎｇ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ”，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１２１：５６２ ７９およびＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｋｉｍｂａｌｌ編（２．ｓｕｐ．ｎｄ Ｅｄ），Ｍａｃｍｉｌｌａｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９８６，ｐｐ．１１３ １１７を参照されたい）。当業者は、機能的かつ最適なアッセイ条件を通常の実験により決定することが可能である。
【０１１７】
ＩＧＦ−１Ｒを検出するための典型的なインビトロイムノアッセイは、ＩＧＦ−１Ｒに選択的に結合しうる検出可能な様態で標識された本発明の抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体または抗原結合性フラグメントの存在下、生物学的サンプルをインキュベートし、サンプル中で結合した該標識フラグメントまたは抗体を検出することを含む。該抗体は、該細胞またはその一部に該抗体が結合したら該細胞またはその一部（例えば、過形成、異形成および／または癌性細胞から放出されたＩＧＦ−１Ｒまたはその断片）の検出を可能にするのに有効な標識に結合している。該生物学的サンプル中の細胞またはその一部の存在は該標識の検出により検出される。
【０１１８】
該生物学的サンプルを、細胞、細胞粒子、膜または可溶性タンパク質を固定化しうる例えばニトロセルロースまたは他の固体支持体もしくはマトリックスのような固相支持体または担体と接触させ、該固相支持体または担体上に固定化することが可能である。ついで該支持体を適当なバッファーで洗浄し、ついで、検出可能な様態で標識された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で処理することが可能である。ついで該固相支持体をバッファーで再び洗浄して未結合抗体を除去することが可能である。ついで該固体支持体上の結合標識の量を通常の手段により検出することが可能である。したがって、本発明のもう１つの実施形態においては、固相支持体（例えば、本明細書に記載されているもの）に結合したモノクローナル抗体またはその結合性フラグメントを含む組成物を提供する。
【０１１９】
「固相支持体」または「担体」は、ペプチド、抗原または抗体に結合しうる任意の支持体を意味する。よく知られた支持体または担体には、ガラス、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、デキストラン、ナイロン、アミラーゼ、天然および修飾セルロース、ポリアクリルアミド、アガロースおよび磁鉄鉱が含まれる。本発明の目的においては、該担体の性質は或る程度まで可溶性であるか又は不溶性でありうる。該支持体物質は、結合分子がＩＧＦ−１Ｒまたは抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体に結合しうる限り、実質的に全ての可能な構造的形状を有しうる。したがって、該支持体の形状は、ビーズの場合のような球状、または試験管の内部表面もしくは棒の外部表面の場合のような円筒状でありうる。あるいは該表面は平面状、例えばシート、培養皿、試験ストリップなどでありうる。好ましい支持体には、ポリスチレンビーズが含まれる。当業者は、抗体、ペプチドまたは抗原を結合させるための多数の他の適当な担体を知っており、あるいは通常の実験によりそれを確認することが可能である。
【０１２０】
本発明に従うインビトロアッセイはまた、組換えＩＧＦ−１Ｒを発現する細胞から単離された膜、ＩＧＦ−１Ｒのリガンド結合性セグメントを含む可溶性断片、または固相基体に結合した断片の使用を含む。これらのアッセイは結合性セグメントの突然変異および修飾またはリガンドの突然変異および修飾（例えば、リガンド類似体）の効果の診断的決定を可能にする。
【０１２１】
インビボモデルにおける組合せ免疫療法の効力に関するアッセイ− 当技術分野でよく知られた技術を用いて、腫瘍変化後の種々の時点で腫瘍負荷を評価することが可能である。抗腫瘍応答をモニターし、組合せ免疫療法の効力を決定するためのアッセイは、後記で説明する。改良または増強された抗腫瘍応答は、該免疫療法の投与後間もなく（例えば、５〜１０日以内に）、最も劇的に観察されうるが、場合によっては、ＩＧＦ−１Ｒの発現レベル、該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の投与量および投与頻度ならびにチロシンキナーゼインヒビターであるエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）の投与の時機に対する該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体の投与の相対的時機のような要因に応じて、該応答は遅延しうる。したがって、免疫療法後の抗腫瘍応答を十分に評価するために、組合せ療法の治療または投与後の種々の時点で採取された生物学的サンプルに関して、任意のよく知られたアッセイを行うことが可能である。
【０１２２】
治療のモニター− 当業者は、本発明の組合せ治療の投与の際の治療結果および／または全身免疫応答をモニターするための手段を認識している。特に、治療結果は、腫瘍成長の低下および／または腫瘍退縮および／または腫瘍特異的マーカーのレベルをモニターすることにより評価されうる。治療に応答した腫瘍成長の低下または腫瘍退縮は、例えば腫瘍の数、腫瘍質量もしくはサイズまたは転移の軽減／予防を含む当業者に公知の幾つかのエンドポイントの１以上を用いてモニターされうる。
【０１２３】
ＩＧＦ−１Ｒインヒビター：
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＢＭＳ−５７７０９８
【化１５】
【０１２４】
またはＡＥＷ−５４１
【化１６】
【０１２５】
または
【化１７】
【０１２６】
である。
【０１２７】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／４８１３３に記載されているピリミジン誘導体のいずれか、例えば、コア構造：
【化１８】
【０１２８】
を含むものである。これらの物質を投与することによる、エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌またはＩＧＦ−１Ｒにより引き起こされるものを治療または予防する方法は、本発明の範囲内である。
【０１２９】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１４に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化１９】
【０１３０】
を含むもの、例えば、
【化２０】
【化２１】
【０１３１】
または
【化２２】
【０１３２】
である。
【０１３３】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１５に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化２３】
【０１３４】
を含むものである。
【０１３５】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１６に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化２４】
【０１３６】
を含むもの、例えば、
【化２５】
【化２６】
【化２７】
【０１３７】
または
【化２８】
【０１３８】
である。
【０１３９】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／３５６１９に記載されているチロシンキナーゼインヒビターのいずれか、例えば、コア構造：
【化２９】
【０１４０】
を含むものである。
【０１４１】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターは、例えばＶＥＧＦ−２Ｒ、Ｋｉｔ、ＦＬＴ３および／またはＰＤＧＦＲをも抑制する多重標的化キナーゼインヒビター、例えばＳＵ−１１２４８（例えば、リンゴ酸スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ））またはＢａｙ４３−９００６（ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ））である。これらの物質を投与することによる、エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌またはＩＧＦ−１Ｒにより引き起こされるものを治療または予防する方法は、本発明の範囲内である。
【０１４２】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／２４９６７に記載されている化合物のいずれか、例えば、コア構造：
【化３０】
【０１４３】
を含むものである。
【０１４４】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０４／３０６２５に記載されている化合物のいずれか、例えば、コア構造：
【化３１】
【０１４５】
を含むものである。
【０１４６】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０４／３０６２７に記載されている化合物のいずれか、例えば、コア構造：
【化３２】
【０１４７】
を含むものである。
【０１４８】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ００／３５４５５に記載されているヘテロアリール−アリール尿素のいずれか、例えば、コア構造：
【化３３】
【０１４９】
を含むものである。
【０１５０】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１ＲインヒビターはＷＯ ０３／２７２４６に記載されているペプチドのいずれかである。
【０１５１】
本発明の１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターは
【化３４】
【０１５２】
またはＰＣＴ出願公開第ＷＯ ０２／９２５９９号に開示されているいずれかの４−アミノ−５−フェニル−７−シクロブチル−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体である。
【０１５３】
他の化学療法物質
本発明の範囲は、本発明のＩＧＦ１Ｒインヒビターを他の化学療法物質（化学療法剤）と共に含む組成物、およびＩＧＦ１Ｒインヒビターを他の化学療法物質（例えば、他の抗癌化学療法物質または鎮吐薬）と共に投与することによる神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、横紋筋肉腫、小児癌または膵癌の治療方法を含む。他の化学療法物質は、それが投与される個体における有益な生理的応答を惹起する任意の物質を含み、例えば、この場合、該物質は、それが投与される対象における疾患の症状または原因を軽減または排除する。他の化学療法物質は、任意の抗癌化学療法物質を含む。抗癌療法物質は、例えば、それが投与される対象における癌の症状または原因を軽減または排除するいずれかの物質である。
【０１５４】
本発明の１つの実施形態においては、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）（ＶＰ−１６；
【化３５】
【０１５５】
）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１５６】
本発明の１つの実施形態においては、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）
【化３６】
【０１５７】
と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１５８】
本発明の１つの実施形態においては、公開米国特許出願番号Ｕ．Ｓ．２００４／０２０９８７８Ａ１に開示されているいずれかの化合物（例えば、
【化３７】
【０１５９】
により表されるコア構造を含むもの）またはドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）
【化３８】
【０１６０】
、例えば、ケリックス（Ｃａｅｌｙｘ）またはＤｏｘｉｌ（登録商標）（ドキソルビシンＨＣｌリポソーム注射剤；Ｏｒｔｈｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｌ．Ｐ；Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。Ｄｏｘｉｌ（登録商標）は、Ｎ−（カルボニル−メトキシポリエチレングリコール２０００）−１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンナトリウム塩（ＭＰＥＧ−ＤＳＰＥ）、完全水素化大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）およびコレステロールから構成されるＳＴＥＡＬＴＨ（登録商標）リポソーム担体中にドキソルビシンを含む。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１６１】
本発明の１つの実施形態においては、５’−デオキシ−５−フルオロウリジン
【化３９】
【０１６２】
と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１６３】
本発明の１つの実施形態においては、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）
【化４０】
【０１６４】
と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１６５】
本発明の１つの実施形態においては、テモゾロミド（ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）
【化４１】
【０１６６】
；いずれかのＣＤＫインヒビター、例えばＺＫ−３０４７０９、セリシクリブ（Ｓｅｌｉｃｉｃｌｉｂ）（Ｒ−ロスコビチン（ｒｏｓｃｏｖｉｔｉｎｅ））
【化４２】
【０１６７】
；いずれかのＭＥＫインヒビター、例えばＰＤ０３２５９０１
【化４３】
【０１６８】
、ＡＺＤ−６２４４；カペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）（５’−デオキシ−５−フルオロ−Ｎ−［（ペンチルオキシ）カルボニル］−シチジン）；またはＬ−グルタミン酸、Ｎ−［４−［２−（２−アミノ−４，７−ジヒドロ−４−オキソ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル）エチル］ベンゾイル］−二ナトリウム塩七水和物
【化４４】
【０１６９】
；ペメトレックスト（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）二ナトリウム七水和物と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１７０】
本発明の１つの実施形態においては、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ）
【化４５】
【０１７１】
（Ｓｔｏｒｋら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９３（１６）：４０７４−４０７５（１９７１）；Ｂｅｉｓｌｅｒら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１４（１１）：１１１６−１１１７（１９６２））またはイチノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）
【化４６】
【０１７２】
（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標）；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏ．；Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１７３】
本発明の１つの実施形態においては、ＦＯＬＦＯＸ療法（オキサリプタチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）
【化４７】
【０１７４】
および注入用フルオロウラシル（ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）
【化４８】
【０１７５】
およびフォリン酸
【化４９】
【０１７６】
）（Ｃｈａｏｕｃｈｅら，Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（３）：２８８−２８９（２０００）；ｄｅ Ｇｒａｍｏｎｔら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１８（１６）：２９３８−２９４７（２０００））と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１７７】
本発明の１つの実施形態においては、抗エストロゲン物質、例えば
【化５０】
【０１７８】
（タモシキフェン（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＮｏｌｖａｄｅｘ（登録商標）として販売されている）または
【化５１】
【０１７９】
（クエン酸トレミフェン（ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ）；Ｓｈｉｒｅ ＵＳ，Ｉｎｃ．；Ｆｌｏｒｅｎｃｅ，ＫＹによりＦａｒｅｓｔｏｎ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１８０】
本発明の１つの実施形態においては、アロマターゼインヒビター、例えば
【化５２】
【０１８１】
（アナストラゾール（ａｎａｓｔｒａｚｏｌｅ）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＡｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）として販売されている）、
【化５３】
【０１８２】
（エキセメスタン（ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）；Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩによりＡｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）として販売されている）または
【化５４】
【０１８３】
（レトロゾール（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪによりＦｅｍａｒａ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１８４】
本発明の１つの実施形態においては、エストロゲン、例えばＤＥＳ（ジエチルスチルベストロール）、
【化５５】
【０１８５】
（エストラジオール；Ｗａｒｎｅｒ Ｃｈｉｌｃｏｔｔ，Ｉｎｃ．；Ｒｏｃｋａｗａｙ，ＮＪによりＥｓｔｒｏｌ（登録商標）として販売されている）またはコンジュゲート化エストロゲン（Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．；Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡによりＰｒｅｍａｒｉｎ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１８６】
本発明の１つの実施形態においては、抗血管新生物質、例えばベバシズマブ（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）（Ａｖａｓｔｉｎ（商標）；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ；Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）、抗ＶＥＧＦＲ−２抗体ＩＭＣ−１Ｃ１１、他のＶＥＧＦＲインヒビター、例えばＣＨＩＲ−２５８
【化５６】
【０１８７】
、ＷＯ２００４／１３１４５（例えば、コア構造式：
【化５７】
【０１８８】
を含むもの）、ＷＯ２００４／０９５４２（例えば、コア構造式：
【化５８】
【０１８９】
を含むもの）、ＷＯ００／７１１２９（例えば、コア構造式：
【化５９】
【０１９０】
を含むもの）、ＷＯ２００４／０９６０１（例えば、コア構造式：
【化６０】
【０１９１】
を含むもの）、ＷＯ２００４／０１０５９（例えば、コア構造式：
【化６１】
【０１９２】
を含むもの）、ＷＯ０１／２９０２５（例えば、コア構造式：
【化６２】
【０１９３】
を含むもの）、ＷＯ０２／３２８６１（例えば、コア構造式：
【化６３】
【０１９４】
を含むもの）またはＷＯ０３／８８９００（例えば、コア構造式：
【化６４】
【０１９５】
を含むもの）に記載されているインヒビターのいずれか；３−［５−（メチルスルホニルピペラジンメチル）−インドリル］−キノリン；バタラニブ（Ｖａｔａｌａｎｉｂ）
【化６５】
【０１９６】
；ＰＴＫ／ＺＫ；ＣＰＧ−７９７８７；ＺＫ−２２２５８４）、ＡＧ−０１３７３６
【化６６】
【０１９７】
およびＶＥＧＦトラップ（ＡＶＥ−０００５）、ＶＥＧＦ受容体１および２の一部を含む可溶性おとり（デコイ）受容体と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０１９８】
本発明の１つの実施形態においては、ＬＨＲＨ（黄体形成ホルモン放出ホルモン）アゴニスト、例えば［Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ ｔ ）６，Ａｚｇｌｙ １０］の酢酸塩（ｐｙｒｏ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｓｅｒ（Ｂｕ ｔ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ａｚｇｌｙ−ＮＨ２酢酸塩［Ｃ５９Ｈ８４Ｎ１８Ｏ１４・（Ｃ２Ｈ４Ｏ２）ｘ（ここで、ｘ＝１〜２．４）］；
【化６７】
【０１９９】
（ゴセレリン（ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）アセタート；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ ＵＫ Ｌｉｍｉｔｅｄ；Ｍａｃｃｌｅｓｆｉｅｌｄ，ＥｎｇｌａｎｄによりＺｏｌａｄｅｘ（登録商標）として販売されている）
【化６８】
【０２００】
（リュープロリド（ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ）アセタート；Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ Ｉｎｃ．；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹによりＥｌｉｇａｒｄ（登録商標）として販売されている）または
【化６９】
【０２０１】
（トリプトレリン（ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）パモアート；Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩによりＴｒｅｌｓｔａｒ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２０２】
本発明の１つの実施形態においては、黄体ホルモン物質、例えば
【化７０】
（メドロキシプロゲステロン（ｍｅｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ）アセタート；Ｐｈａｒｍａｃｉａ＆Ｕｐｊｏｈｎ Ｃｏ．；Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩによりＰｒｏｖｅｒａ（登録商標）として販売されている）、
【化７１】
【０２０３】
（ヒドロキシプロゲステロン（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ）カプロアート；１７−（（１−オキソヘキシル）オキシ）プレグナ）−４−エン−３，２０−ジオン）、メゲストロール（ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ）アセタートまたはプロゲスチン（ｐｒｏｇｅｓｔｉｎ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２０４】
本発明の１つの実施形態においては、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、例えば
【化７２】
【０２０５】
（ラロキシフェン（ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ）；Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ；Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮによりＥｖｉｓｔａ（登録商標）として販売されている）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２０６】
本発明の１つの実施形態においては、抗アンドロゲン物質、例えば
【化７３】
【０２０７】
（ビカルタミド（ｂｉｃａｌｕｔａｍｉｄｅ）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＣＡＳＯＤＥＸ（登録商標）により販売されている）；
【化７４】
【０２０８】
（フルタミド（ｆｌｕｔａｍｉｄｅ）；２−メチル−Ｎ−［４−ニトロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］プロパンアミド；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪによりＥｕｌｅｘｉｎ（登録商標）として販売されている）；
【化７５】
【０２０９】
（ニルタミド（ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ）；Ａｖｅｎｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．；Ｋａｎｓａｓ Ｃｉｔｙ，ＭＯによりＮｉｌａｎｄｒｏｎ（登録商標）として販売されている）および
【化７６】
【０２１０】
（メゲストロール（Ｍｅｇｅｓｔｒｏｌ）アセタート；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ ＳｑｕｉｂｂによりＭｅｇａｃｅ（登録商標）として販売されている）（これらに限定されるものではない）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２１１】
本発明の１つの実施形態においては、ＥＧＦ受容体またはＨＥＲ２の作用に拮抗する１以上のインヒビター、例えば、ＣＰ−７２４７１４
【化７７】
【０２１２】
；ＴＡＫ−１６５
【化７８】
【０２１３】
；ＨＫＩ−２７２
【化７９】
【０２１４】
；ＯＳＩ−７７４
【化８０】
【０２１５】
；エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ），Ｈｉｄａｌｇｏら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１９（１３）：３２６７−３２７９（２００１）、ラパタニブ（Ｌａｐａｔａｎｉｂ）
【化８１】
【０２１６】
；ＧＷ２０１６；Ｒｕｓｎａｋら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ １：８５−９４（２００１）；Ｎ−｛３−クロロ−４−［（３−フルオロベンジル）オキシ］フェニル｝−６−［５−（｛［２−（メチルスルホニル）エチル］アミノ｝メチル）−２−フリル］−４−キナゾリンアミン；ＰＣＴ出願番号ＷＯ９９／３５１４６）、カネルチニブ（Ｃａｎｅｒｔｉｎｉｂ）（ＣＩ−１０３３；
【化８２】
【０２１７】
；Ｅｒｌｉｃｈｍａｎら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６１（２）：７３９−４８（２００１）；Ｓｍａｉｌｌら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（７）：１３８０−９７（２０００））、ＡＢＸ−ＥＧＦ抗体（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．；Ｆｒｅｅｍｏｎｔ，ＣＡ；Ｙａｎｇら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５９（６）：１２３６−４３（１９９９）；Ｙａｎｇら，Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｏｎｃｏｌ Ｈｅｍａｔｏｌ．３８（１）：１７−２３（２００１））、エルビツクス（ｅｒｂｉｔｕｘ）（米国特許第６，２１７，８６６号；ＩＭＣ−Ｃ２２５，セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）；Ｉｍｃｌｏｎｅ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ）、ＥＫＢ−５６９
【化８３】
【０２１８】
（Ｗｉｓｓｎｅｒら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６（１）：４９−６３（２００３））、ＰＫＩ−１６６
【化８４】
【０２１９】
（ＣＧＰ−７５１６６）、ＧＷ−５７２０１６、任意の抗ＥＧＦＲ抗体および任意の抗ＨＥＲ２抗体（これらに限定されるものではない）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２２０】
本発明の１つの実施形態においては、
【化８５】
【０２２１】
（ロナファルニブ（ｌｏｎａｆａｒｎｉｂ）；Ｓａｒａｓａｒ（商標）；Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ；Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。もう１つの実施形態においては、ＩＧＦ１Ｒインヒビターと組合された以下のＦＰＴインヒビターの１つを提供する。
【化８６】
【０２２２】
または
【化８７】
【０２２３】
これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２２４】
ＩＧＦ１Ｒインヒビターと組合せて提供されうる他のＦＰＴインヒビターには、以下のものが含まれる：ＢＭＳ−２１４６６２
【化８８】
【０２２５】
（Ｈｕｎｔら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（２０）：３５８７−９５（２０００）；Ｄａｎｃｅｙら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２２５９−２２６７（２００２）；（Ｒ）−７−シアノ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１−（１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル）−３−（フェニルメチル）−４−（２−チエニルスルホニル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン））およびＲ１５５７７７（チピファルニブ（ｔｉｐｉｆａｒｎｉｂ）；Ｇａｒｎｅｒら，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．３０（７）：８２３−３０（２００２）；Ｄａｎｃｅｙら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２２５９−２２６７（２００２）；（Ｂ）−６−［アミノ（４−クロロフェニル）（１−メチル−１Ｈ−イミダゾール−５−イル）−メチル］−４−（３−クロロフェニル）−１−メチル−２（１Ｈ）−キノリノン］；
【化８９】
【０２２６】
（Ｚａｒｎｅｓｔｒａ（商標）として販売されている；Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ；Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２２７】
本発明の１つの実施形態においては、以下のものと組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。
【化９０】
【０２２８】
（アミフォスチン（Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ））；
【化９１】
【０２２９】
（ＮＶＰ−ＬＡＱ８２４；Ａｔａｄｊａら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６４：６８９−６９５（２００４））、
【化９２】
【０２３０】
（スベロイルアナリド（ｓｕｂｅｒｏｙｌ ａｎａｌｉｄｅ）ヒドロキサム酸）、
【化９３】
【０２３１】
（バルプロン酸（Ｖａｌｐｒｏｉｃ ａｃｉｄ）；Ｍｉｃｈａｅｌｉｓら，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６５：５２０−５２７（２００４））、
【化９４】
【０２３２】
（トリコスタチン（ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ）Ａ）、
【化９５】
【０２３３】
（ＦＫ−２２８；Ｆｕｒｕｍａｉら，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６２：４９１６−４９２１（２００２））、
【化９６】
【０２３４】
（ＳＵ１１２４８；Ｍｅｎｄｅｌら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．９（１）：３２７−３７（２００３））、
【化９７】
【０２３５】
（ＢＡＹ４３−９００６）、
【化９８】
【０２３６】
（ＫＲＮ９５１）、
【化９９】
【０２３７】
（アミノグルテチミド（Ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ））；
【化１００】
【０２３８】
（アムサアクリン（Ａｍｓａｃｒｉｎｅ））；
【化１０１】
【０２３９】
（アナグレリド（Ａｎａｇｒｅｌｉｄｅ））；
【化１０２】
【０２４０】
（Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ（アナストロゾール）；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＰ；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥによりＡｒｉｍｉｄｅｘとして販売されている）；アスパラギナーゼ；カルメット−ゲラン桿菌（ＢＣＧ）ワクチン（Ｇａｒｒｉｄｏら，Ｃｙｔｏｂｉｏｓ．９０（３６０）：４７−６５（１９９７））；
【化１０３】
【０２４１】
（ブレオマイシン）；
【化１０４】
【０２４２】
（ブセレリン（Ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ））；
【化１０５】
【０２４３】
（ブスルファン（Ｂｕｓｕｌｆａｎ）；１，４−ブタンジオール ジメタンスルホナート；ＥＳＰ Ｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．；Ｅｄｉｓｏｎ，Ｎｅｗ ＪｅｒｓｅｙによりＢｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）として販売されている）；
【化１０６】
【０２４４】
（カルボプラチン（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ；Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪによりＰａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１０７】
【０２４５】
（カルムスチン（Ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ））；
【化１０８】
【０２４６】
（クロラムブシル（Ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ））；
【化１０９】
【０２４７】
（シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ））；
【化１１０】
【０２４８】
（クラドリビン（Ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ））；
【化１１１】
【０２４９】
（クロドロナート（Ｃｌｏｄｒｏｎａｔｅ））；
【化１１２】
【０２５０】
（シクロホスファミド（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ））；
【化１１３】
【０２５１】
（シプロテロン（Ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ））；
【化１１４】
【０２５２】
（シタラビン（Ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ））；
【化１１５】
【０２５３】
（ダカルバジン（Ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ））；
【化１１６】
【０２５４】
（ダクチノマイシン（Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ））；
【化１１７】
【０２５５】
（ダウノルビシン（Ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ））；
【化１１８】
【０２５６】
（ジエチルシチルベストロール（Ｄｉｅｔｈｙｌｓｔｉｌｂｅｓｔｒｏｌ））；
【化１１９】
【０２５７】
（エピルビシン（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ））；
【化１２０】
【０２５８】
（フルダラビン（Ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ））；
【化１２１】
【０２５９】
（フルドロコルチゾン（Ｆｌｕｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ））；
【化１２２】
【０２６０】
（フルオキシメステロン（Ｆｌｕｏｘｙｍｅｓｔｅｒｏｎｅ））；
【化１２３】
【０２６１】
（フルタミド（Ｆｌｕｔａｍｉｄｅ））；
【化１２４】
【０２６２】
（ヒドロキシ尿素（Ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ））；
【化１２５】
【０２６３】
（イダルビシン（Ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ））；
【化１２６】
【０２６４】
（イフォスファミド（Ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ））；
【化１２７】
【０２６５】
（イマチニブ（Ｉｍａｔｉｎｉｂ）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪによりＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標）として販売されている）；
【化１２８】
【０２６６】
（ロイコボリン（Ｌｅｕｃｏｖｏｒｉｎ））；
【化１２９】
【０２６７】
（ロイプロリド（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ））；
【化１３０】
【０２６８】
（レバミゾール（Ｌｅｖａｍｉｓｏｌｅ））；
【化１３１】
【０２６９】
（ロムスチン（Ｌｏｍｕｓｔｉｎｅ））；
【化１３２】
【０２７０】
（メクロルエタミン（Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ））；
【化１３３】
【０２７１】
（メルファラン（Ｍｅｌｐｈａｌａｎ）；Ｃｅｌｇｅｎｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｗａｒｒｅｎ，ＮＪによりＡｌｋｅｒａｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１３４】
【０２７２】
（メルカプトプリン（Ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ））；
【化１３５】
【０２７３】
（メスナ（Ｍｅｓｎａ））；
【化１３６】
【０２７４】
（メトトレキセート（Ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ））；
【化１３７】
【０２７５】
（マイトマイシン（Ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ））；
【化１３８】
【０２７６】
（ミトタン（Ｍｉｔｏｔａｎｅ））；
【化１３９】
【０２７７】
（ミトキサントロン（Ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ））；
【化１４０】
【０２７８】
（ニルタミド（Ｎｉｌｕｔａｍｉｄｅ））；オクトレオチド（ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）（Ｌ−システインアミド，Ｄ−フェニルアラニル−Ｌ−システイニル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｄ−トリプトフィル−Ｌ−リシル−Ｌ−トレオニル−Ｎ−［２−ヒドロキシ−１−（ヒドロキシメチル）プロピル］−，環状（２ ７）−ジスルフィド；［Ｒ Ｒ＊，Ｒ＊）］；
【化１４１】
【０２７９】
；Ｋａｔｚら，Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍ．８（４）：２５５−７３（１９８９）；Ｓａｎｄｏｓｔａｔｉｎ ＬＡＲ（登録商標）Ｄｅｐｏｔとして販売されている；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍ．Ｃｏｒｐ；Ｅ． Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪ）；オキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）
【化１４２】
【０２８０】
；Ｓａｎｏｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ Ｉｎｃ．；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹによりＥｌｏｘａｔｉｎ（商標）として販売されている）；
【化１４３】
【０２８１】
（パミドロナート（Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪによりＡｒｅｄｉａ（登録商標）として販売されている）；
【化１４４】
【０２８２】
（ペントスタチン（Ｐｅｎｔｏｓｔａｔｉｎ）；Ｓｕｐｅｒｇｅｎ；Ｄｕｂｌｉｎ，ＣＡによりＮｉｐｅｎｔ（登録商標）として販売されている）；
【化１４５】
【０２８３】
（プリカマイシン（Ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ））；
【化１４６】
【０２８４】
（ポルフィマー（Ｐｏｒｆｉｍｅｒ））；Ａｘｃａｎ Ｓｃａｎｄｉｐｈａｒｍ Ｉｎｃ．；Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬによりＰｈｏｔｏｆｒｉｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１４７】
【０２８５】
（プロカルバジン（Ｐｒｏｃａｒｂａｚｉｎｅ））；
【化１４８】
【０２８６】
（ラルチトレックスト（Ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ））；リツキィマブ（Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．；Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡによりＲｉｔｕｘａｎ（登録商標）として販売されている）；
【化１４９】
【０２８７】
（ストレプトゾシン（Ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ））；
【化１５０】
【０２８８】
（テニポシド（Ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ））；
【化１５１】
【０２８９】
（テストステロン（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ））；
【化１５２】
【０２９０】
（サリドマイド（Ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ））；
【化１５３】
【０２９１】
（チオグアニン（Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ））；
【化１５４】
【０２９２】
（チオテパ（Ｔｈｉｏｔｅｐａ））；
【化１５５】
【０２９３】
（トレチノイン（Ｔｒｅｔｉｎｏｉｎ））；
【化１５６】
【０２９４】
（ビンデシン（Ｖｉｎｄｅｓｉｎｅ））または１３−シス−レチノイン酸
【化１５７】
【０２９５】
。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９６】
本発明の１つの実施形態においては、以下のいずれかの１以上と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する：フェニルアラニンマスタード、ウラシルマスタード、エストラムスチン（ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ）、アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、フロクスウリジン（ｆｉｏｘｕｒｉｄｉｎｅ）、５−デオキシウリジン、シトシンアラビノシド、６−メルカプトプリン、デオキシコフォルマイシン（ｄｅｏｘｙｃｏｆｏｒｍｙｃｉｎ）、カルシトリオール（ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ）、バルルビシン（ｖａｌｒｕｂｉｃｉｎ）、ミトラマイシン（ｍｉｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、ビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、ラゾキシン（ｒａｚｏｘｉｎ）、マリマスタット（ｍａｒｉｍａｓｔａｔ）、ＣＯＬ−３、ネオバスタット（ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、ＢＭＳ−２７５２９１、スクアラミン（ｓｑｕａｌａｍｉｎｅ）、エンドスタチン（ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ）、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＥＭＤ１２１９７４、インターロイキン−１２、ＩＭ８６２、アンジオスタチン、ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）、ヨードキシフェン（ｉｄｏｘｙｆｅｎｅ）、スピロノラクトン（ｓｐｉｒｏｎｏｌａｃｔｏｎｅ）、フィナステリド（ｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅ）、シミチジン（ｃｉｍｉｔｉｄｉｎｅ）、トラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、デニロイキン（ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ）、ジフチトックス（ｄｉｆｔｉｔｏｘ）、ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、ボルテジミブ（ｂｏｒｔｅｚｉｍｉｂ）、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、ドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）Ｂ、ＢＭＳ−２４７５５０（例えば、Ｌｅｅら，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．７：１４２９−１４３７（２００１）を参照されたい）、ＢＭＳ−３１０７０５、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）（３−ヒドロキシタモキシフェン）、４−ヒドロキシタモキシフェン、ピペンドキシフェン（ｐｉｐｅｎｄｏｘｉｆｅｎｅ）、ＥＲＡ−９２３、アルゾキシフェン（ａｒｚｏｘｉｆｅｎｅ）、フルベストラント（ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）、アコルビフェン（ａｃｏｌｂｉｆｅｎｅ）、ラソフォキシフェン（ｌａｓｏｆｏｘｉｆｅｎｅ）（ＣＰ−３３６１５６）、ヨードキシフェン（ｉｄｏｘｉｆｅｎｅ）、ＴＳＥ−４２４、ＨＭＲ−３３３９、ＺＫ１８６６１９、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４（Ｔｈｏｍａｓら，Ｓｅｍｉｎ Ｏｎｃｏｌ．３０（３ Ｓｕｐｐｌ ６）：３２−８（２００３））、ヒト化抗ＶＥＧＦ抗体ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、ＶＸ−７４５（Ｈａｄｄａｄ，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ ２（８）：１０７０−６（２００１））、ＰＤ １８４３５２（Ｓｅｂｏｌｔ−Ｌｅｏｐｏｌｄら，Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．５：８１０−８１６（１９９９））、ラマパイシン（ｒａｐａｍｙｃｉｎ）、ＣＣＩ−７７９（Ｓｅｈｇａｌら，Ｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ．，１４：１−２２（１９９４）；Ｅｌｉｔ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ ３（８）：１２４９−５３（２００２））、ＬＹ２９４００２、ＬＹ２９２２２３、ＬＹ２９２６９６、ＬＹ２９３６８４、ＬＹ２９３６４６（Ｖｌａｈｏｓら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９（７）：５２４１−５２４８（１９９４））、ウォルトマンニン（ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ）、ＢＡＹ−４３−９００６（Ｗｉｌｈｅｌｍら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．８：２２５５−２２５７（２００２））、ＺＭ３３６３７２、Ｌ−７７９，４５０、Ｌｏｗｉｎｇｅｒら，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓ．８：２２６９−２２７８（２００２）に開示されている任意のＲａｆインヒビター；フラボピリドール（ｆｌａｖｏｐｉｒｉｄｏｌ）（Ｌ８６−８２７５／ＨＭＲ １２７５；Ｓｅｎｄｅｒｏｗｉｃｚ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９（５６）：６６００−６６０６（２０００））またはＵＣＮ−０１（７−ヒドロキシ スタウロスポリン（ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）；Ｓｅｎｄｅｒｏｗｉｃｚ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １９（５６）：６６００−６６０６（２０００））。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９７】
本発明のもう１つの実施形態においては、スチリル置換ヘテロアリールＥＧＦＲインヒビターを開示している米国特許第５，６５６，６５５号、ビスモノおよび／または二環式アリールヘテロアリール炭素環式およびヘテロ炭素環式ＥＧＦＲおよびＰＤＧＦＲインヒビターを開示している米国特許第５，６４６，１５３号、ＥＧＦＲを抑制する三環式ピリミジン化合物を開示している米国特許第５，６７９，６８３号、受容体チロシンキナーゼ抑制活性を有するキナゾリン誘導体を開示している米国特許第５，６１６，５８２号、ＥＧＦＲを抑制する構造を有する化合物を開示しているＦｒｙら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２６５ １０９３−１０９５（１９９４）（Ｆｒｙらの図１を参照されたい）、ＥＧＦＲを抑制するヘテロアリールエテンジイルまたはヘテロアリールエテンジイルアリール化合物を開示している米国特許第５，１９６，４４６号、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲおよびＦＧＦＲファミリーの受容体を抑制するＰＤ１６６２８５［ＰＤ１６６２８５は６−（２，６−ジクロロフェニル）−２−（４−（２−ジエチルアミノエトキシ）フェニルアミノ）−８−メチル−８Ｈ−ピリド（２，３−ｄ）ピリミジン−７−オンとして特定されている］として特定された化合物を開示しているＰａｎｅｋら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ２８３：１４３３−１４４４ （１９９７）に記載されている化合物のいずれかの１以上と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９８】
本発明の１つの実施形態においては、以下のいずれかの１以上と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを提供する：ＰＥＧ化（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ；ペジル化）または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ａ、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ｂ、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ｃ、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファｎ−１、ＰＥＧ化または非ＰＥＧ化インターフェロンアルファｎ−３およびＰＥＧ化、非ＰＥＧ化共通（コンセンサス）インターフェロンまたはアルブミン−インターフェロン−アルファ。これらの物質を投与することによる、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、神経芽細胞腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法は、本発明の範囲内である。
【０２９９】
本明細書中で用いる「インターフェロンアルファ」なる語は、細胞増殖を抑制し免疫応答をモジュレーションする、高度に相同な種に特異的なタンパク質ファミリーを意味する。典型的な適当なインターフェロン−アルファには、組換えインターフェロンアルファ−２ｂ、組換えインターフェロンアルファ−２ａ、組換えインターフェロンアルファ−２ｃ、アルファ２インターフェロン、インターフェロンアルファ−ｎ１（ＩＮＳ）、天然アルファインターフェロンの精製混合物、共通アルファインターフェロン、例えば、米国特許第４，８９７，４７１号および第４，６９５，６２３号（特にその実施例７、８または９）、またはインターフェロンアルファ−ｎ３、天然アルファインターフェロンの混合物に記載されているものが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【０３００】
インターフェロンアルファ−２ａはＨｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）によりＲＯＦＥＲＯＮ−Ａ（登録商標）として販売されている。
【０３０１】
インターフェロンアルファ−２ｂはＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）によりＩＮＴＲＯＮ−Ａ（登録商標）として販売されている。インターフェロンアルファ２ｂの製造は、例えば米国特許第４，５３０，９０１号に記載されている。
【０３０２】
インターフェロンアルファ−ｎ３は、Ｈｅｍｉｓｐｈｅｒｘ Ｂｉｏｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）によりＡＬＦＥＲＯＮ Ｎ ＩＮＪＥＣＴＩＯＮ（登録商標）として販売されている天然インターフェロンの混合物である。
【０３０３】
インターフェロンアルファ−ｎ１（ＩＮＳ）は、Ｇｌａｘｏ−Ｓｍｉｔｈ−Ｋｌｉｎｅ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，ＮＣ）によりＷＥＬＬＦＥＲＯＮ（登録商標）として販売されている天然インターフェロンの混合物である。
【０３０４】
共通インターフェロンは、Ｉｎｔｅｒｍｕｎｅ，Ｉｎｃ．（Ｂｒｉｓｂａｎｅ，ＣＡ）によりＩＮＦＥＲＧＥＮ（登録商標）として販売されている。
【０３０５】
インターフェロンアルファ−２ｃは、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ，Ｉｎｃ．（Ｒｉｄｇｅｆｉｅｌｄ，ＣＴ）によりＢＥＲＯＦＯＲ（登録商標）として販売されている。
【０３０６】
天然インターフェロンの精製混合物は、Ｓｕｍｉｔｏｍｏ；Ｔｏｋｙｏ，ＪａｐａｎによりＳＵＭＩＦＥＲＯＮ（登録商標）として販売されている。
【０３０７】
本明細書中で用いる「ＰＥＧ化インターフェロンアルファ」なる語は、インターフェロンアルファ、好ましくはインターフェロンアルファ−２ａおよびアルファ−２ｂのポリエチレングリコール修飾コンジュゲートを意味する。好ましいポリエチレングリコール−インターフェロンアルファ−２ｂコンジュゲートはＰＥＧ１２０００−インターフェロンアルファ−２ｂである。本明細書中で用いる「１２，０００分子量ポリエチレングリコールコンジュゲート化インターフェロンアルファ」および「ＰＥＧ１２０００−ＩＦＮアルファ」なる語は、１２０００の平均分子量を有するポリエチレングリコールとインターフェロンアルファ−２ａまたは−２ｂアミノ基との間にウレタン連結を含有する国際出願番号ＷＯ ９５／１３０９０の方法により製造されるようなコンジュゲートを含む。ＰＥＧ化インターフェロンアルファＰＥＧ１２０００−ＩＦＮ−アルファ−２ｂはＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから入手可能である。
【０３０８】
好ましいＰＥＧ １２０００−インターフェロンアルファ−２ｂは、インターフェロンアルファ−２ｂ分子内のリシン残基のイプシロンアミノ基にＰＥＧ重合体を結合させることにより製造されうる。単一のＰＥＧ１２０００分子はウレタン連結によりＩＦＮアルファ−２ｂ分子上の遊離アミノ基にコンジュゲート化されうる。このコンジュゲートは、結合しているＰＥＧ１２０００の分子量により特徴づけられる。ＰＥＧ１２０００−ＩＦＮアルファ−２ｂコンジュゲートは、注射用の凍結乾燥粉末として製剤化されうる。
【０３０９】
ＰＥＧ化インターフェロンアルファ−２ｂはＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ）によりＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）として販売されている。
【０３１０】
ＰＥＧ化インターフェロン−アルファ−２ａはＨｏｆｆｉｎａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ（Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪ）によりＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）として販売されている。
【０３１１】
他のインターフェロンアルファコンジュゲートは、インターフェロンアルファを水溶性重合体に結合させることにより製造されうる。そのような重合体の非限定的な一覧は、他のポリアルキレンオキシドホモ重合体、例えばポリプロピレングリコール、ポリオキシエチレン化ポリオール、その共重合体およびそのブロック共重合体を含む。ポリアルキレンオキシドに基づく重合体の代わりとして、有効に非抗原性である物質、例えばデキストラン、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、炭水化物に基づく重合体などが使用されうる。そのようなインターフェロンアルファ−重合体コンジュゲートは、例えば米国特許第４，７６６，１０６号、米国特許第４，９１７，８８８号、欧州特許出願第０ ２３６ ９８７号もしくは第０ ５９３ ８６８号または国際公開番号ＷＯ ９５／１３０９０に記載されている。
【０３１２】
非経口投与に適したＰＥＧ化インターフェロンアルファの医薬組成物は、適当なバッファー、例えばＴｒｉｓ−ＨＣｌ、酢酸塩またはリン酸塩、例えば二塩基性リン酸ナトリウム／一塩基性リン酸ナトリウムバッファー、および医薬上許容される賦形剤（例えば、スクロース）、担体（例えば、ヒト血漿アルブミン）、等張化剤（例えば、ＮａＣｌ）、保存剤（例えば、チメロソール、クレゾールまたはベンジルアルコール）および界面活性剤（例えば、トゥイーンまたはポリソルベート）で注射用無菌水において製剤化されうる。該ＰＥＧ化インターフェロンアルファは２℃〜８℃の冷凍下で凍結乾燥粉末として保存されうる。還元（再構成）水溶液は、２℃〜８℃で保存された場合に安定であり、還元から２４時間以内に使用される。例えば、米国特許第４，４９２，５３７号、第５，７６２，９２３号および第５，７６６，５８２号を参照されたい。また、該還元水溶液は、予め充填された多用量シリンジ（例えば、インスリンのような薬物の運搬に有用なもの）中で保存されうる。典型的な適当なシリンジには、ペン型シリンジに付属した予め充填されたバイアルを含む系、例えば、Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋから入手可能なＮＯＶＯＬＥＴ（登録商標）Ｎｏｖｏ Ｐｅｎ、またはＳｃｈｅｒｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪから入手可能なＲＥＤＩＰＥＮ（登録商標）が含まれる。他のシリンジ系には、希釈剤および凍結乾燥ＰＥＧ化インターフェロンアルファ粉末を別々の区画に含有するガラスカートリッジを含むペン型シリンジが含まれる。
【０３１３】
本発明の範囲は、１以上の他の抗癌化学療法物質（例えば、本明細書に記載されているもの）と組合された、そして場合によっては（すなわち、存在していても存在していなくてもよい）１以上の鎮吐薬［パロノセトロン（ｐａｌｏｎｏｓｅｔｒｏｎ）（ＡｌｏｘｉとしてＭＧＩ Ｐｈａｒｍａにより販売されている）、アプレピタント（ａｐｒｅｐｉｔａｎｔ）（ＥｍｅｎｄとしてＭｅｒｃｋ ａｎｄ Ｃｏ．；Ｒａｈｗａｙ，ＮＪにより販売されている）、ジフェンヒドラミン（ｄｉｐｈｅｎｈｙｄｒａｍｉｎｅ）（Ｂｅｎａｄｒｙｌ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、ヒドロキシジン（ｈｙｄｒｏｘｙｚｉｎｅ）（Ａｔａｒａｘ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、メトクロプラミド（ｍｅｔｏｃｌｏｐｒａｍｉｄｅ）（Ｒｅｇｌａｎ（登録商標）としてＡＨ Ｒｏｂｉｎｓ Ｃｏ，；Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，ＶＡにより販売されている）、ロラゼパム（ｌｏｒａｚｅｐａｍ）（Ａｔｉｖａｎ（登録商標）としてＷｙｅｔｈ；Ｍａｄｉｓｏｎ，ＮＪにより販売されている）、アルプラゾラム（ａｌｐｒａｚｏｌａｍ）（Ｘａｎａｘ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、ハロペリドール（ｈａｌｏｐｅｒｉｄｏｌ）（Ｈａｌｄｏｌ（登録商標）としてＯｒｔｈｏ−ＭｃＮｅｉｌ；Ｒａｒｉｔａｎ，ＮＪにより販売されている）、ドロペリドール（ｄｒｏｐｅｒｉｄｏｌ）（Ｉｎａｐｓｉｎｅ（登録商標））、ドロナビノール（ｄｒｏｎａｂｉｎｏｌ）（Ｍａｒｉｎｏｌ（登録商標）としてＳｏｌｖａｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．；Ｍａｒｉｅｔｔａ，ＧＡにより販売されている）、デキサメタゾン（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）（Ｄｅｃａｄｒｏｎ（登録商標）としてＭｅｒｃｋ ａｎｄ Ｃｏ．；Ｒａｈｗａｙ，ＮＪにより販売されている）、メチルプレドニゾロン（ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）（Ｍｅｄｒｏｌ（登録商標）としてＰｆｉｚｅｒ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、プロクロルペラジン（ｐｒｏｃｈｌｏｒｐｅｒａｚｉｎｅ）（Ｃｏｍｐａｚｉｎｅ（登録商標）としてＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ；Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，ＮＣ）、グラニセトロン（ｇｒａｎｉｓｅｔｒｏｎ）（Ｋｙｔｒｉｌ（登録商標）としてＨｏｆｆｉｎａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ｉｎｃ．；Ｎｕｔｌｅｙ，ＮＪにより販売されている）、オンダンセトロン（ｏｎｄａｎｓｅｔｒｏｎ）（Ｚｏｆｒａｎ（登録商標）としてＧｌａｘｏｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ；Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ，ＮＣにより販売されている）、ドラセトロン（ｄｏｌａｓｅｔｒｏｎ）（Ａｎｚｅｍｅｔ（登録商標）としてＳａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにより販売されている）、トロピセトロン（ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ）（Ｎａｖｏｂａｎ（登録商標）としてＮｏｖａｒｔｆｓ；Ｅａｓｔ Ｈａｎｏｖｅｒ，ＮＪにより販売されている）を含むが、これらに限定されるものではない］と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを含む組成物をも含む。
【０３１４】
鎮吐薬を含む組成物は、抗癌化学療法の一般的副作用である悪心の予防または治療に有用である。したがって、本発明はまた、場合によっては１以上の他の化学療法物質（例えば、本明細書に記載されているもの）と組合された、そして場合によっては１以上の鎮吐薬と組合されたＩＧＦ１Ｒインヒビターを投与することによる、対象における癌の治療または予防方法を含む。
【０３１５】
本発明は更に、外科的腫瘍摘出術または抗癌放射線治療と組合せて、場合によってはもう１つの化学療法物質および／または鎮吐薬（例えば、前記のもの）と組合せてＩＧＦＲ１抑制物質を投与することによる、任意の段階またはタイプの神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、ウィルムス腫瘍、骨肉腫、膵癌または任意の小児癌の治療または予防方法を含む。
【０３１６】
エルロチニブ
本発明の広範な態様は、治療を受けるヒト患者に対する有意な副作用を伴うことなく癌を有効に治療する方法を提供する。本発明の治療の臨床的結果は幾分予想外のものである。なぜなら、抗ＩＧＦＲ−１Ｒ抗体とエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）とを含む該組合せ療法は、エルロチニブ耐性癌の治療において、より有効だと考えられるからである。また、該組合せ療法（ＭＫ−０６４６とエルロチニブとの組合せ）は、種々の癌において、エルロチニブ単独の場合より有効だと考えられる。他のチロシンキナーゼインヒビターもＩＧＦ−１Ｒ抗体と組合されうると理解される。あるいは、該組合せ療法は２以上のチロシンキナーゼインヒビターを含むことが可能であり、したがって、化学療法物質単独の場合と比較して有害な事象の付随的発生を有意に増加させない少なくとも２つの化学療法物質を含む化学療法カクテルと組合された抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体を含みうる。
【０３１７】
受容体チロシンキナーゼは、上皮増殖因子のような増殖因子に対する細胞外結合ドメイン、膜貫通ドメイン、およびタンパク質内の特異的チロシン残基をリン酸化して細胞増殖に影響を及ぼすキナーゼとして機能する細胞内部分を有する、細胞膜にわたって広がる大きな酵素である。そのようなキナーゼは、しばしば、一般的なヒトの癌、例えば肺癌、乳癌、胃腸癌、例えば結腸、直腸または胃癌、白血病および卵巣、気管支または膵臓癌において、異常に発現されることが公知である。チロシンキナーゼ活性を有する上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）は、脳、肺、扁平上皮細胞、膀胱、胃、乳房、頭頚部、食道、婦人科および甲状腺腫瘍のような多数の癌において、突然変異および／過剰発現していることも示されている。
【０３１８】
したがって、受容体チロシンキナーゼのインヒビターは哺乳類癌細胞の増殖の選択的インヒビターとして有用であると認識されている。例えば、チロシンキナーゼインヒビターであるエルブスタチン（ｅｒｂｓｔａｔｉｎ）は、上皮増殖因子受容体チロシンキナーゼ（ＥＧＦＲ）を発現する移植ヒト乳癌の、胸腺欠損ヌードマウスにおける成長を選択的に低下させるが、ＥＧＦ受容体を発現しない別の癌の成長には影響を及ぼさない。
【０３１９】
スチレン誘導体のような種々の他の化合物もチロシンキナーゼ抑制特性を有することが示されている。最近、５つの欧州特許公開、すなわち、ＥＰ ０ ５６６ ２２６ Ａ１、ＥＰ ０ ６０２ ８５１ Ａ１、ＥＰ ０ ６３５ ５０７ Ａ１、ＥＰ ０ ６３５ ４９８ Ａ１およびＥＰ ０ ５２０ ７２２Ａ１は、あるキナゾリン誘導体が、それらのチロシンキナーゼ抑制特性から生じる抗癌特性を有することを開示している。また、ＰＣＴ公開ＷＯ ９２／２０６４２はチロシンキナーゼインヒビターとしてビス−モノおよび二環式アリールおよびヘテロアリール化合物を開示している。
【０３２０】
エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）の製造および使用方法は、１９９６年５月２８日付けで出願され現在はＰｆｉｚｅｒ Ｉｎｃ．に譲渡されている米国特許第５，７４７，４９８号（その全内容を参照により本明細書に組み入れることとする）に記載され特許請求されている。
【０３２１】
投与量および投与経路
ＩＧＦ−１Ｒ特異的抗体と化学療法物質とを含む本発明の組合せ療法は、公知方法、例えばボーラスもしくは或る時間にわたる連続的注入による静脈内投与、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、鞘内、経口、局所または吸入経路により、ヒト患者に投与される。該抗体の静脈内または皮下投与が好ましい。３つの異なる運搬アプローチが本発明による該抗体の運搬に有用であると予想される。通常の静脈内運搬が、おそらく、大多数の腫瘍に対する標準的な運搬技術であろう。しかし、卵巣、胆管、他の管などの腫瘍により例示される腹腔内の腫瘍のような幾つかの腫瘍に関しては、腫瘍において高用量の抗体を得、抗体のクリアランスを最小にするためには、腹腔内投与が有利であろう。同様に、ある充実性腫瘍は、局所潅流に適した脈管構造を有する。局所潅流は、腫瘍部位において高用量の該抗体が得られるのを可能にし、該抗体の短期クリアランスを最小にするであろう。
【０３２２】
タンパク質または抗体の注入に基づくあらゆる療法の場合と同様に、安全性の懸念は、主として、（ｉ）サイトカイン放出症候群、すなわち、低血圧、発熱、震え、悪寒、（ｉｉ）該物質に対する免疫原性応答の発生（すなわち、患者による該抗体療法に対するヒト抗体の発生、またはＨＡＨＡもしくはＨＡＣＡ応答）、および（ｉｉｉ）ＥＧＦ受容体を発現する正常細胞（例えば、ＥＧＦＲおよび／またはＩＧＦ−１Ｒを発現する肝細胞）に対する毒性に関するものである。これらの安全性の懸念のそれぞれをモニターするために、標準的な試験および追跡（フォローアップ）が行われるであろう。特に、肝臓に対する損傷が有ればそれを評価するために、臨床治験中に頻繁に肝機能がモニターされるであろう。
【０３２３】
疾患の予防または治療のためには、抗体の適当な投与量は、前記のとおりの治療すべき疾患のタイプ、該疾患の重症度および経過、該抗体が予防目的で投与されるのか治療目的で投与されるのか、過去の療法、患者の臨床履歴および該抗体に対する応答、ならびに担当医師の判断に左右されるであろう。該抗体は、適切には、１回で又は一連の治療にわたって患者に投与される。組合せ療法計画においては、本発明の組成物は、治療的に有効な又は相乗作用をもたらす量で投与される。本明細書中で用いる治療的に有効な量（治療的有効量）は、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と１以上の他の療法物質（治療用物質）との共投与、または本発明の組成物の投与が、標的疾患または状態の軽減または抑制をもたらすような量である。治療的に相乗作用をもたらす量は、個々の疾患に関連した状態または症状を相乗的または有意に軽減または排除するのに必要な、抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体および１以上の他の療法物質（治療用物質）の量である。
【０３２４】
広範な実施形態においては、本発明の治療は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体と１以上の化学療法物質との組合せ投与を含む。該組合せ投与は、別々の製剤または単一の医薬製剤を使用する共投与、およびいずれかの順序での連続的投与を含み、ここで、好ましくは、両方（または全て）の活性物質がそれらの生物活性を同時に発現する期間が存在する。そのような化学療法物質に関する調製および投与スケジュールは、製造業者の説明に従って又は当業者により実験的に決定されるとおりに行われうる。化学療法に関する調製および投与スケジュールはＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｍ．Ｃ．Ｐｅｒｒｙ編，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍｄ．（１９９２）にも記載されている。該化学療法物質は該抗体の投与の前または後に投与されることが可能であり、あるいはそれと同時に投与されうる。本発明の治療組合せの臨床投与は、現在臨床において使用されているチロシンキナーゼインヒビター（ＴＫＩ）［エルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）およびゲフィチニブ（Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）］およびモノクローナル抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体で観察されるとおり、皮疹のような有害反応の度合により制限される可能性がある。
【０３２５】
「治療的に有効な量」または「治療的に有効な投与量」なる語は、癌（例えば、非小細胞肺癌またはいずれかの他のエルロチニブまたはＩＧＦ−１Ｒ耐性癌）の徴候、症状および／もしくは臨床指数（例えば、腫瘍増殖）のいずれかの測定可能な改善ならびに／またはいずれかの度合の癌の進行もしくは転移の予防、遅延もしくは阻止を含む、投与者（例えば、研究者、医師または獣医）により求められている組織、系、対象または宿主の生物学的または医学的応答を惹起する本発明の組成物（例えば、ＩＧＦ１Ｒインヒビター、例えば、抗ＩＧＦ１Ｒ抗体）の量または投与量を意味する。
【０３２６】
適当な投与量は医学的実施者に公知であり、もちろん、個々の病態、投与される組成物の特異的活性、および治療を受けている個々の患者に左右されるであろう。いくつかの場合には、所望の治療量を達成するために、反復投与、すなわち、個々のモニターまたは計量された用量の個々の投与の反復を行うことが必要である可能性があり、この場合、所望の１日量または効果が達成されるまで個々の投与を反復する。適当な投与量に関する更なる情報は後記実施例に記載されている。
【０３２７】
例えば、１つの実施形態においては、いずれかの抗ＩＧＦ１Ｒ抗体、例えば、ドルツズマブ（Ｄｏｌｕｔｕｚｕｍａｂ）または本明細書に記載されているいずれかの他の抗ＩＧＦ１Ｒ抗体に対応する抗体または抗原結合性フラグメントの「治療的に有効な投与量」は、週１回で約４０〜約１０００ｍｇ／ｍ２（例えば、約５０ｍｇ／ｍ２、６０ｍｇ／ｍ２、７０ｍｇ／ｍ２、８０ｍｇ／ｍ２、９０ｍｇ／ｍ２、１００ｍｇ／ｍ２、約２００ｍｇ／ｍ２、約３００ｍｇ／ｍ２、約４００ｍｇ／ｍ２、約５００ｍｇ／ｍ２、約６００ｍｇ／ｍ２または約７００ｍｇ／ｍ２）または１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重（例えば、約１ｍｇ／ｋｇ体重、約２ｍｇ／ｋｇ体重、約３ｍｇ／ｋｇ体重、約４ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重、約６ｍｇ／ｋｇ体重、約７ｍｇ／ｋｇ体重、約８ｍｇ／ｋｇ体重、約９ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１１ｍｇ／ｋｇ体重、約１２ｍｇ／ｋｇ体重、約１３ｍｇ／ｋｇ体重、約１４ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１６ｍｇ／ｋｇ体重、約１７ｍｇ／ｋｇ体重、約１８ｍｇ／ｋｇ体重、約１９ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重）である。
【０３２８】
投与計画は、最適な所望の応答（例えば、治療応答）が得られるように調節されうる。例えば、単一用量が投与可能であり、あるいは幾つかの分割量が経時的に投与可能であり、あるいは該用量は、治療状況の要求に適応するように比例的に減少または増加されうる。例えば、投与量は、患者の年齢、体重、身長、過去の病歴、現在の投薬ならびに交差反応、アレルギー、感受性および有害な副作用の可能性に応じて、当技術分野における通常の技量を有する実施者（例えば、医師または獣医）により決定または調節されうる。投与の容易化および投与量の均一性のためには、投与単位形の非経口組成物を製剤化することが特に有利である。
【０３２９】
当技術分野における通常の技量を有する医師または獣医は、必要な該医薬組成物の有効量を容易に決定し処方することが可能である。例えば、医師または獣医は、所望の治療効果を達成するために要求されるレベルより低いレベルの、該医薬組成物において使用される本発明の抗体または抗原結合性フラグメントの用量から開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加することが可能であろう。本発明の抗体または組合せの、与えられた用量または治療計画の有効性は、例えば、対象において治療されている腫瘍が縮小または成長停止したかどうかを判定することにより決定されうる。腫瘍のサイズは、例えば、Ｘ線、磁気共鳴撮像（ＭＲＩ）により、または外科的手法において視覚的に、容易に決定されうる。腫瘍細胞および増殖は、チミジンＰＥＴスキャンを使用することにより測定されうる（例えば、Ｗｅｌｌｓら，Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．８：７−１４（１９９６）を参照されたい）。一般に、チミジンＰＥＴスキャンは、［２−１１Ｃ］−チミジンのような放射能トレーサーの注射、およびそれに続く、患者の身体のＰＥＴスキャンを含む（Ｖａｎｄｅｒ Ｂｏｒｇｈｔら，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １０１：７９４−７９９，１９９１；Ｖａｎｄｅｒ Ｂｏｒｇｈｔら，Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ａｐｐｌ．Ｉｎｓｔｒｕｍ．Ｐａｒｔ Ａ，４２：１０３−１０４（１９９１））。使用されうる他のトレーサーには、［１８Ｆ］−ＦＤＧ（１８−フルオロデオキシグルコース）、［１２４Ｉ］ＩＵｄＲ（５−［１２４Ｉ］ヨード−２’−デオキシウリジン）、［７６Ｂｒ］ＢｒｄＵｒｄ（ブロモデオキシウリジン）、［１８Ｆ］ＦＬＴ（３’−デオキシ−３’フルオロチミジン）または［１１Ｃ］ＦＭＡＵ（２’−フルオロ−５−メチル−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルウラシル）が含まれる。
【０３３０】
例えば、ＮＳＣＬＣの進行は種々の方法により医師または獣医によりモニターされることが可能であり、それに応じて投与計画が改変されうる。進行をモニターするための方法には、例えば、ＣＴスキャン（例えば、腫瘍サイズをモニターするためのもの）、ＭＲＩスキャン（例えば、腫瘍サイズをモニターするためのもの）、胸部Ｘ線（例えば、腫瘍サイズをモニターするためのもの）、骨スキャン、骨髄生検、ホルモン試験、全血球試験（ＣＢＣ）、尿または血液中のＮＳＣＬＣ腫瘍マーカーに関する試験が含まれる。
【０３３１】
タイプおよび重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）の抗体が、例えば１以上の別々の投与によるものであるか連続的注入によるものであるかにかかわらず、患者への投与のための初期候補投与量である。典型的な１日投与量は、前記の要因に応じて約１μｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の範囲となりうるであろう。数日間以上にわたる反復投与の場合、条件に応じて、該治療は、疾患症状の所望の抑制が生じるまで続けられる。しかし、他の投与計画も有用でありうる。
【０３３２】
１つの態様においては、本発明の抗体は毎週投与され、または２〜３週間ごとに、約５ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与されうる。より好ましくは、そのような投与計画は、エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌、例えばＮＳＣＬＣを治療するための化学療法計画と組合せて用いられる。いくつかの態様においては、該化学療法計画は通常の高用量の断続的投与を含む。いくつかの他の態様においては、該化学療法物質は、計画された中断を伴うことなく、より小さい及びより頻繁な用量を用いて投与される（「規則的（ｍｅｔｒｏｎｏｍｉｃ）化学療法」）。本発明の療法の進行は通常の技術およびアッセイにより容易にモニターされる。
【０３３３】
１つの実施形態においては、投与手順は、エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）（経口）をＩＧＦ−１Ｒ抗体と共に投与することを含み、エルロチニブは毎日投与され、一方、ＩＧＦ−１Ｒ抗体（ＭＫ−０６４６）は毎週投与される。特に、ＭＫ−０６４６（ＩＧＦ−１Ｒ ｍＡｂ）は毎週１０ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｖ．）の用量で投与され、一方、エルロチニブは毎日１５０ｍｇ投与される。
【０３３４】
ＩＧＦ−１Ｒ抗体に関する代替的投与計画は以下のとおりである：
（ｉ）１５ｍｇ／ｋｇ の負荷（ローディング）、およびそれに続く、毎週７．５ｍｇ／ｋｇ、
（ｉｉ）隔週で２０ｍｇ／ｋｇ、
（ｉｉｉ）３週間ごとに３０ｍｇ／ｋｇ。
【０３３５】
非経口投与の場合、該抗体は、医薬上許容される非経口ビヒクルと組合された又は別々に提供された溶液、懸濁液、乳液（エマルション）または凍結乾燥粉末として製剤化されうる。そのようなビヒクルの具体例としては、水、食塩水（塩類液）、リンガー液、デキストロース溶液および１〜１０％ ヒト血清アルブミンが挙げられる。リポソームおよび非水性ビヒクル、例えば不揮発性油も使用されうる。該ビヒクルまたは凍結乾燥粉末は、等張性を維持する添加物（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール）および化学的安定性を維持する添加物（例えば、バッファーおよび保存剤）を含有しうる。該製剤は、公知の又は適当な技術により滅菌される。該組合せ療法の投与は疾患進行まで継続されうる。
【０３３６】
本発明を一般的な観点から説明してきたが、以下の実施例においては本発明の実施形態を更に詳細に開示することとする。
【０３３７】
製造品
本発明のもう１つの実施形態においては、前記の障害の治療に有用な要素を含有する製造品を提供する。該製造品は、容器、標識（ラベル）およびパッケージインサートを含む。適当な容器には、例えばボトル、バイアル、シリンジなどが含まれる。該容器は、種々の材料、例えばガラスまたはプラスチックから形成されうる。該容器は、該状態を治療するのに有効な組成物を含有し、無菌性の接近口（アクセスポート）を有しうる（例えば、該容器は、皮下注射針により刺し貫かれうる栓を有する静脈溶液バッグまたはバイアルでありうる）。該組成物中の少なくとも１つの活性物質は抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体である。該容器上の又はそれに添付された標識は、選択された状態を治療するために該組成物が使用されることを示す。該製造品は更に、医薬上許容されるバッファー、例えばリン酸緩衝食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液を含む第２容器を含む。それは更に、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針およびシリンジを含む商業的な又は使用者の観点から望ましい他の要素を含みうる。また、該製造品は、例えば該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体組成物およびＥＧＦＲインヒビター（例えば、エルロチニブ）組成物を患者に投与することを該組成物の使用者に説明することを含む使用説明を伴うパッケージインサートを含む。
【０３３８】
本明細書中に挙げられている全ての刊行物を、例えば、ここに記載されている発明に関して用いられうる該刊行物中に記載されている構造および方法を記載し開示する目的で、参照により本明細書に組み入れることとする。前記および本明細書中の全体にわたって記載されている刊行物は、専ら、本出願の出願日の前のそれらの開示に関して記載されている。この場合、より早い発明に基づいて本発明者らがそのような開示に先行すると主張する権利がないと自認するものと解釈されるべきではない。
【図面の簡単な説明】
【０３３９】
【図１Ａ】図１（Ａ）は、ＥＧＦ１ＲとＩＧＦ１Ｒとの間のクロストークを示す概要図である（どのような方法も要さない）。
【図１Ｂ】図１（Ｂ）は、Ｐ−ＲＴＫアレイにより測定されたＥＧＦＲおよびＩＧＦ１Ｒ活性化の要約である（詳細な方法または細胞培養、細胞溶解、ＲＴＫアレイ法およびイメージ定量は本明細書中に記載されている）。
【図１Ｃ】図１（Ｃ）は、Ｐ−ＲＴＫアレイからの代表的イメージであり、Ｐ−ＥＧＦＲおよびＰ−ＩＧＦ１Ｒに対応する位置が該イメージにおいて示されている（方法は図１Ｂと同じである）。
【実施例１】
【０３４０】
ＥＧＦＲおよびＩＧＦＩＲの活性化とＭＫ−０６４６／エルロチニブの組合せの効力との間の相関性
要約：細胞における多受容体チロシンキナーゼの活性化はエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）に対する薬物耐性に関与しうるであろう。実際、エルロチニブ耐性患者からの臨床サンプルにおいてＥＧＦＲおよびｃＭＥＴの活性化が観察されている。
【０３４１】
方法：ＭＫ−０６４６／エルロチニブの組合せに応答する腫瘍を特定するために、肺癌細胞系のパネルにおける種々のＲＴＫのリン酸化状態を評価した。図１に示されているとおり、１０個の肺癌細胞系のパネルにわたる活性化ＥＧＦＲおよびＩＧＦＩＲのレベルを定量した。ＮＣＩ−Ｈ２１２２およびＮＣＩ−Ｈ３２２Ｍにより表される細胞系のなかで、Ｐ−ＩＧＦＩＲおよびＰ−ＥＧＦＲの両方を高レベルで示したものは非常に少数であったが、ＥＧＦＲ突然変異細胞系ＨＣＣ８２７は、ＩＧＦＲの活性化をほとんど又は全く伴わない高レベルのＰ−ＥＧＦＲを示した。
【０３４２】
簡潔に説明すると、全てのＮＳＣＬＣ細胞系をＡＴＣＣから入手し、ＡＴＣＣにより指定されているとおりに１０％ ＦＢＳを含有するＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ内で維持した。約２００万個の細胞を１０ｃｍプレート内で培養し、タンパク質ライセートをサブコンフルエント培養から調製し、Ｐ−ＲＴＫアレイ（Ｒ＆Ｄ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）上に、該製造業者により記載されているとおりにブロットした。該アレイをＨＲＰ結合Ｐ−Ｔｙｒ抗体でプローブし、ついでＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ化学発光基質（Ｐｉｅｒｃｅ）と共にインキュベートし、ついでブロットをＫｏｄａｋ Ｂｉｏｍａｘ Ｌｉｇｈｔ Ｆｉｌｍに露出させた。該フィルムを走査し、適当なＲＴＫスポット（二重）の位置を整列させ、強度を、デンシトメトリーを用いて決定し、定量した（Ａｌｐｈａ Ｅａｓｅ）。該膜上にスポットされた陽性対照（Ｐ−Ｔｙｒペプチド）（該膜の４つの隅における二重スポット）に対して正規化することにより、Ｐ−ＲＴＫの相対レベルを推定した。
【実施例２】
【０３４３】
ＭＫ−０６４６／エルロチニブによるＰＩ３ＫおよびＲＡＳ−ＭＡＰＫシグナリングの抑制
要約：ＰＩ３ＫおよびＲＡＳ−ＭＡＰＫ経路活性に対するこれらのＲＴＫの抑制の効果を試験するために、該経路における中心的集合点のリン酸化状態を測定した。図２に示すとおり、ＥＧＦＲとＩＧＦＩＲとの組合せインヒビターは、両方の受容体を高レベルで発現するＮＣＩ−Ｈ２１２２およびＮＣＩ−Ｈ３２２Ｍ細胞系におけるＰ−Ｓ６ＲＰおよびＰ−Ｓ６Ｋの実質的減少により測定した場合、ＰＩ３Ｋ経路の遮断において、より有効であった。Ｐ−ＥＧＦＲおよびＰ−ＩＧＦＩＲの両方が低レベルの細胞系においては、ＰＩ３Ｋシグナリングのそのような相乗的抑制は観察できなかった（Ａ４２７が一例として示されている）。他の細胞系において、同様の結果が得られた（データ非表示）。
【０３４４】
方法：ウエスタンブロット分析のために、６ウェルプレート内で培養された細胞（〜０．３百万個）からの全タンパク質ライセートをデフォロリムス（Ｄｅｆｏｒｏｌｉｍｕｓ）（１０ｎＭ）もしくはＭＫ−０６４６（１０ｎｇ／ｍｌ）のいずれか又はそれらの組合せで４時間処理し、ＳＤＳゲルローディング色素（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）において集めた。サンプルを、示されている全ての又はホスホ特異的な抗体で、ついで二次抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣＳＴ）でウエスタンブロットし、ついでＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ化学発光基質（Ｐｉｅｒｃｅ）と共にインキュベートした。ついで該ブロットをＫｏｄａｋ Ｂｉｏｍａｘ Ｌｉｇｈｔ Ｆｉｌｍに露出させた。ＥＲＫ、ｐ−ＥＲＫ（Ｔｈｒ２０２／Ｔｙｒ２０４）、ＡＫＴおよびｐ−ＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）、ＩＧＦ１ＲＴ Ｓ６ＫおよびＰ−Ｓ６Ｋ（Ｔ３８９）、ＩＲＳ１およびＰ−ＩＲＳ１（Ｓ３０２）ならびにアクチンに対する抗体をＣＳＴから得た。
【実施例３】
【０３４５】
ＥＧＦＲおよびＩＧＦ−１ｒシグナリングの両方を抑制する機能的効果
要約：ＥＧＦＲおよびＩＧＦ−１Ｒシグナリングの両方を抑制する機能的効果を試験するために、接着（２Ｄ）および非接着（３Ｄ）条件下の増殖抑制を評価した。接着増殖条件下、ＭＫ−０６４６処理細胞系においては有意な増殖抑制は観察されなかった。これは従来の実験と一致している（データ非表示）。この組合せの効果を３Ｄ非接着条件下で試験するために、本発明者らは、超低接着プレートに基づく増殖アッセイを開発した。非接着条件下で増殖させた場合、１０個中７個の系のみが測定可能な様態で増殖し、感受性評価のために使用した。ＮＣＩ−Ｈ２１２２細胞は、非接着条件下、エルロチニブ／ＭＫ−０６４６の組合せに対する感受性の相当な増加を示した。一方、低レベルのＰ−ＩＧＦＩＲおよびＥＧＦＲを有するＡ４２７細胞は、２Ｄまたは３Ｄ増殖条件下、有意な増殖抑制を示さなかった。
【０３４６】
方法：細胞（〜３×１０３）を接着または非接着（超低接着プレート；Ｃｏｒｎｉｎｇ）９６ウェルプレート内に播いた。第１日に、細胞を、示されている濃度のエルロチニブまたはＭＫ−０６４６またはそれらの組合せと共にインキュベートし、１組の細胞をＤＮＡ含量測定のために集めた（第１日）。該培地および薬物を３日ごとにゆっくり交換し、該アッセイの終了時に（示されているとおり）プレートを集め、Ｃｙｑｕａｎｔアッセイを該製造業者の説明のとおりに用いてＤＮＡ含量を測定した。第１日から該アッセイの終了時までのＤＮＡ含量の増加に基づいて、固有増殖を計算した。
【実施例４】
【０３４７】
前記の結果を証明するために、本発明者らはハイスループット軟寒天コロニー形成アッセイを利用した。蛍光生細胞色素（Ｌａｖａ Ｃｅｌｌ）を使用して足場非依存的増殖を定量した。ＭＫ−０６４６およびエルロチニブの組合せは、ＮＣＩ−Ｈ２１２２およびＡ５４９の両方の細胞系の軟寒天コロニー形成を有意に抑制した（図４：対照と比較してＰ＞０．０００１）。Ｈ４６０細胞は、該組合せの存在下、増殖抑制の増加を示した。したがって、該インビトロ分析は、ＭＫ−０６４６およびエルロチニブの組合せに対して、より良好に応答する、１０個中３個の細胞系（３０％）を特定した。これは両方のＲＴＫ（ＥＧＦＲおよびＩＧＦ１Ｒ）の活性化と相関している。
【０３４８】
方法：９６ウェルガラス底プレート（ＭａｔｒｉＣａｌ）内で軟寒天アッセイを行った。０．８％ アガロースで補足された同じ培養培地からなる下層の最上部に１４％ ＦＢＳおよび０．３％（ｗ／ｖ）ＳｅａＰｌａｑｕｅアガロース（Ｌｏｎｚａ Ｒｏｃｋｌａｎｄ，Ｉｎｃ）で補足された１００μｌのＲＭＰＩ １６４０内に、３，０００〜９，０００細胞／ウェルの濃度で細胞を播いた。アガロースが固化した後で補足された１００μｌの培地内に化合物を加えた。細胞を７〜１４日間インキュベートした後、ＬａｖａＣｅｌｌ（Ａｃｔｉｖｅ Ｍｏｔｉｆ）で一晩染色した。Ｉｓｏｃｙｔｅ（商標）レーザースキャニングサイトメーターを使用してコロニーを定量した。足場非依存的増殖をＭＫ−０６４６が単独で又は標準的なケア物質と共に抑制する能力を軟寒天コロニー形成アッセイにおいて評価した。Ｐ−ＲＴＫアッセイ（Ｒ＆Ｄ ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を該製造業者の説明のとおりに使用して、全タンパク質ライセートにおいてＲＴＫ状態を評価した。ＫＲＡＳにおける活性化突然変異は、公開されている癌ゲノムデータベース（Ｓａｎｇｅｒ）から特定された。
【実施例５】
【０３４９】
ｋＲＡＳ突然変異体肺腫瘍異種移植片モデルにおけるエルロチニブおよびＭＫ−０６４６の効力の評価
前に、ｋ−ＲＡＳ突然変異体ＮＣＩ−Ｈ２１２２異種移植片（インビトロでの高ｐ−ＩＧＦ１Ｒおよびｐ−ＥＧＦ１Ｒ）からのインビボデータは、ＩＧＦ１Ｒ受容体のダウンレギュレーションに相関する腫瘍増殖の良好な抑制を示した。ＭＫ−０６４６処理後にＰＩ３Ｋ経路の抑制も観察された。この異種移植片モデルを使用して、本発明者らは、エルロチニブ耐性ｋＲＡＳ突然変異体患者集団において、エルロチニブと組合されたＭＫ−０６４６の効果を評価した。図５に示すとおり、ＭＫ−０６４６（２ｍｐｋ；週１回の投与）とエルロチニブ（５０ｍｐｋ）との組合せは腫瘍増殖の有意な抑制、そして更には該異種移植片の退縮を引き起こして、ｋＲＡＳ突然変異体肺腫瘍により特徴づけられる病態の治療に関するＫ−０６４６およびエルロチニブの組合せの根底にある論理的説明に関する更なる確証をもたらした。
【０３５０】
方法：２．５×１０６ ＮＣＩ−Ｈ２１２２ヒトＮＳＣＬＣ細胞を４〜６週齢のｎｕ／ｎｕマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右脇腹に皮下注射した。腫瘍が〜３００ｍｍ３（長さ＊幅＊幅＊０．５）のサイズに達したら、マウスを治療群にランダム化した。ビヒクル（２０ｍＬ Ｌ−ヒスチジン、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．５％ ＰＳ８０ ｐＨ＝６）を週１回、３週間にわたり（ｑｗｋ×３）、または２ｍｐｋのＭＫ−０６４６（ｍｇ／ｋｇ ＭＫ−０６４６ ｑｗｋ）を腹腔内に、またはエルロチニブ（５０ｍｇ／ｋｇ、経口ガバージュ）を毎日、またはＭＫ−０６４６と組合せて３週間にわたって、マウス（ｎ＝８匹／群）に投与した。動物を秤量し、該研究中に週２回および終了時にノギスで計測することにより腫瘍体積を決定した。腫瘍重量を終了時に決定した。第２１日に、動物をＣＯ２窒息により犠死させた。最終投与の２４時間後にマウスを犠死させた。犠死の時点で、組織サンプルを集め、加工した。
【実施例６】
【０３５１】
効力と全タンパク質レベルの減少との間の相関性
要約：標的関与の尺度として、ＩＧＦ１Ｒの全レベルをウエスタンブロットＥＬＩＳＡによりアッセイした（データ非表示）。該データは効力と全タンパク質レベルの減少との間の良好な相関性を示した。図６に示すとおり、各パネルにおいて、ＭＫ−０６４６は、ビヒクルまたはエルロチニブ単独処理と比較してＩＧＦ１Ｒの全レベルを減少させうる。これらのデータは、ＭＫ−０６４６の単独での又は他の標的化物質と組合された長期的な慢性的治療にわたる標的関与および効力に関する良好な生物マーカーとして、全ＩＧＦ１Ｒレベルが機能しうることを示唆している。Ｐ−ＡＫＴ、ＰＳ６ＫおよびＰＳ６ＲＰの減少により測定されるとおり、顕著なＰＩ３Ｋ経路抑制が、該組合せで処理された腫瘍において観察された。ＲＡＳ−ＭＡＰＫ経路も該組合せにより抑制された。これらのデータは、ＩＧＦ１ＲおよびＥＧＦＲの組合せ抑制が、各物質が単独投与された場合と比較して増強した、抗腫瘍効力誘発性増殖因子シグナリングの抑制をもたらしたことを示唆している。図７を参照すると、別のＫＲＡＳ突然変異体エルロチニブ不応性ＮＳＣＬＣモデルにおいても、エルロチニブおよびＭＫ−０６４６の組合せによる同様の抗腫瘍効力が観察された。
【０３５２】
方法：効力研究の終了時（示されている投与の４週間後）に異種移植片サンプルからの全タンパク質（５００マイクログラム）を単離した。６個の独立した腫瘍からのサンプルを治療の容易さに関して分析した。既に記載されているとおりに、該タンパク質をウエスタンブロットし、可視化した（図２を参照されたい）。
【０３５３】
配列表
【特許請求の範囲】
【請求項１】
チロシンキナーゼインヒビターとＩＧＦ−１Ｒインヒビターとを含む組合せ療法物質またはその医薬組成物の治療的に有効な量を対象に投与することを含む、対象における医学的状態の治療または予防方法であって、該組合せ療法物質の投与が、該患者を治療するのに十分な、ＥＧＦＲインヒビターまたはＩＧＦ−１Ｒインヒビターの単独投与と比較して増強した治療効力をもたらす、方法。
【請求項２】
該チロシンキナーゼインヒビターがエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
該医学的状態がエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
該ＩＧＦ−１Ｒインヒビターまたはその機能性フラグメントの１つが、ヒトＩＧＦ１Ｒに特異的に結合する抗体であり、該抗体が、非ヒト由来の少なくとも１つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）と、非ヒト由来の少なくとも１つの軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）とを含み、ＩＧＦ−１Ｒに結合する該抗体が、（ａ）ＩＧＦ−１Ｒには結合するがＩＲには結合しない；（ｂ）インスリン受容体とインスリン増殖因子受容体とを含むハイブリッド受容体（ＩＲ／ＩＧＦ−１Ｒハイブリッド−Ｒ）には結合するがＩＲ単独体には結合しない；（ｃ）ヒトＩＧＦ−１ＲとＩＧＦ−１および／またはＩＧＦ−２との間の結合を抑制する；（ｄ）該ハイブリッド−Ｒならびにその天然リガンド、好ましくは、本明細書においてＩＧＦ１および／またはＩＧＦ２と称されるリガンドおよび／またはインスリンに１００ｎＭ未満の阻害定数および／またはＩＣ５０で結合する；（ｅ）該ＩＧＦ−１Ｒのチロシンキナーゼ活性を特異的に抑制する；（ｆ）該ハイブリッド−Ｒのチロシンキナーゼ活性を特異的に抑制する；（ｇ）該ハイブリッド−Ｒに対する１０ｎＭ以下の結合アフィニティーを有する；（ｈ）ＩＧＦ−１Ｒの発現をダウンレギュレーションする；（ｉ）ハイブリッド−Ｒの発現をダウンレギュレーションする；（ｊ）インビボの腫瘍増殖を抑制することからなる群から選択される特性の少なくとも１つを有する、請求項１記載の方法。
【請求項５】
該ＩＧＦ−１ｒ抗体が重鎖と軽鎖とを含み、該重鎖が、配列番号４、５または６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲを含み、該軽鎖が、配列番号１、２または３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲを含む、請求項４記載の方法。
【請求項６】
該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、フィジツムマブ（ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）、シクスツムマブ（ｃｉｘｕｔｕｍｕｍａｂ）、ＳＨＣ ７１７４５４、ロッシエ（Ｒｏｃｈｅ）Ｒ１５０７およびアムジェン（Ａｍｇｅｎ）ＡＭＧ４７９からなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項７】
該ヒト化抗体またはその機能性フラグメントの１つが、配列番号７もしくは８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、または配列番号９、１０もしくは１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項３記載の方法。
【請求項８】
該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体がダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）である、請求項７記載の方法。
【請求項９】
該チロシンキナーゼインヒビターがエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）であり、それを１０ｍｇ〜４００ｍｇの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
該チロシンキナーゼインヒビターを毎週１００〜３００ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
該チロシンキナーゼインヒビターと該ＩＧＦ−１Ｒインヒビターとを含む該組合せ療法物質を以下のとおりに投与する：すなわち、チロシンキナーゼを約１５０ｍｇ／ｋｇで投与し、該ＩＧＦ−１Ｒインヒビターを毎週１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
該チロシンキナーゼインヒビターがエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）であり、それを週５回投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
該ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）を１０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内に投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
該ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）を週１回投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
該ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）を２週間に１回投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１６】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターを、１以上の他の化学療法物質またはその医薬組成物と組合せて投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
前記の他の化学療法物質が、テニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）
【化１】
、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）
【化２】
、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）
【化３】
、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）
【化４】
、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）
【化５】
、そのいずれかのリポソーム製剤、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）
【化６】
、１３−シス−レチノイン酸
【化７】
、イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）
【化８】
ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）
【化９】
、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）
【化１０】
、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）
【化１１】
、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）
【化１２】
、カルシトリオール（ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ）、およびメトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）
【化１３】
からなる群から選択される１以上のメンバーである、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を同時に投与する、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を非同時に投与する、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターを、抗癌治療手法と組合せて投与する、請求項１７記載の方法。
【請求項２１】
該抗癌治療手法が外科的腫瘍摘出術および／または抗癌放射線治療である、請求項１７記載の方法。
【請求項２２】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターが、
【化１４】
およびヒトＩＧＦ１Ｒに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントからなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項１】
チロシンキナーゼインヒビターとＩＧＦ−１Ｒインヒビターとを含む組合せ療法物質またはその医薬組成物の治療的に有効な量を対象に投与することを含む、対象における医学的状態の治療または予防方法であって、該組合せ療法物質の投与が、該患者を治療するのに十分な、ＥＧＦＲインヒビターまたはＩＧＦ−１Ｒインヒビターの単独投与と比較して増強した治療効力をもたらす、方法。
【請求項２】
該チロシンキナーゼインヒビターがエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
該医学的状態がエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）耐性癌である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
該ＩＧＦ−１Ｒインヒビターまたはその機能性フラグメントの１つが、ヒトＩＧＦ１Ｒに特異的に結合する抗体であり、該抗体が、非ヒト由来の少なくとも１つの重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）と、非ヒト由来の少なくとも１つの軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）とを含み、ＩＧＦ−１Ｒに結合する該抗体が、（ａ）ＩＧＦ−１Ｒには結合するがＩＲには結合しない；（ｂ）インスリン受容体とインスリン増殖因子受容体とを含むハイブリッド受容体（ＩＲ／ＩＧＦ−１Ｒハイブリッド−Ｒ）には結合するがＩＲ単独体には結合しない；（ｃ）ヒトＩＧＦ−１ＲとＩＧＦ−１および／またはＩＧＦ−２との間の結合を抑制する；（ｄ）該ハイブリッド−Ｒならびにその天然リガンド、好ましくは、本明細書においてＩＧＦ１および／またはＩＧＦ２と称されるリガンドおよび／またはインスリンに１００ｎＭ未満の阻害定数および／またはＩＣ５０で結合する；（ｅ）該ＩＧＦ−１Ｒのチロシンキナーゼ活性を特異的に抑制する；（ｆ）該ハイブリッド−Ｒのチロシンキナーゼ活性を特異的に抑制する；（ｇ）該ハイブリッド−Ｒに対する１０ｎＭ以下の結合アフィニティーを有する；（ｈ）ＩＧＦ−１Ｒの発現をダウンレギュレーションする；（ｉ）ハイブリッド−Ｒの発現をダウンレギュレーションする；（ｊ）インビボの腫瘍増殖を抑制することからなる群から選択される特性の少なくとも１つを有する、請求項１記載の方法。
【請求項５】
該ＩＧＦ−１ｒ抗体が重鎖と軽鎖とを含み、該重鎖が、配列番号４、５または６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲを含み、該軽鎖が、配列番号１、２または３からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む少なくとも１つのＣＤＲを含む、請求項４記載の方法。
【請求項６】
該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体が、ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）、フィジツムマブ（ｆｉｇｉｔｕｍｕｍａｂ）、シクスツムマブ（ｃｉｘｕｔｕｍｕｍａｂ）、ＳＨＣ ７１７４５４、ロッシエ（Ｒｏｃｈｅ）Ｒ１５０７およびアムジェン（Ａｍｇｅｎ）ＡＭＧ４７９からなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【請求項７】
該ヒト化抗体またはその機能性フラグメントの１つが、配列番号７もしくは８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、または配列番号９、１０もしくは１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項３記載の方法。
【請求項８】
該抗ＩＧＦ−１Ｒ抗体がダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）である、請求項７記載の方法。
【請求項９】
該チロシンキナーゼインヒビターがエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）であり、それを１０ｍｇ〜４００ｍｇの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
該チロシンキナーゼインヒビターを毎週１００〜３００ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１１】
該チロシンキナーゼインヒビターと該ＩＧＦ−１Ｒインヒビターとを含む該組合せ療法物質を以下のとおりに投与する：すなわち、チロシンキナーゼを約１５０ｍｇ／ｋｇで投与し、該ＩＧＦ−１Ｒインヒビターを毎週１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
該チロシンキナーゼインヒビターがエルロチニブ（Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）であり、それを週５回投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
該ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）を１０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内に投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
該ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）を週１回投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
該ダロツズマブ（ｄａｌｏｔｕｚｕｍａｂ）を２週間に１回投与する、請求項１１記載の方法。
【請求項１６】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターを、１以上の他の化学療法物質またはその医薬組成物と組合せて投与する、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
前記の他の化学療法物質が、テニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）
【化１】
、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）
【化２】
、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）
【化３】
、エトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）
【化４】
、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）
【化５】
、そのいずれかのリポソーム製剤、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）
【化６】
、１３−シス−レチノイン酸
【化７】
、イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）
【化８】
ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）
【化９】
、イリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）
【化１０】
、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）
【化１１】
、ダクチノマイシン（ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）
【化１２】
、カルシトリオール（ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌ）、およびメトトレキセート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）
【化１３】
からなる群から選択される１以上のメンバーである、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を同時に投与する、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターおよび前記の他の抗癌療法物質を非同時に投与する、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターを、抗癌治療手法と組合せて投与する、請求項１７記載の方法。
【請求項２１】
該抗癌治療手法が外科的腫瘍摘出術および／または抗癌放射線治療である、請求項１７記載の方法。
【請求項２２】
該ＩＧＦ１Ｒインヒビターが、
【化１４】
およびヒトＩＧＦ１Ｒに特異的に結合する単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントからなる群から選択される、請求項１記載の方法。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公表番号】特表２０１２−５２４０８７（Ｐ２０１２−５２４０８７Ａ）
【公表日】平成２４年１０月１１日（２０１２．１０．１１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０６０６７（Ｐ２０１２−５０６０６７）
【出願日】平成２２年４月６日（２０１０．４．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３００２２
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１２０５９２
【国際公開日】平成２２年１０月２１日（２０１０．１０．２１）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション (924)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１０月１１日（２０１２．１０．１１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年４月６日（２０１０．４．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３００２２
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１２０５９２
【国際公開日】平成２２年１０月２１日（２０１０．１０．２１）
【出願人】（３９００２３５２６）メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション (924)
【Ｆターム（参考）】
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