ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートの医薬組成物
本発明は、ソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持するソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートを含む組成物における向上、その組成物を調製する方法、ならびにその組成物を用いて哺乳類を処置する方法に向けられている。特に、本発明はDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)を含む医薬組成物に関し、そのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートはインビボで生理的ｐＨにおいて沈殿し、ゆっくりと溶解して体液および血流中に放出されるインサイチュ沈着物を形成する。本発明はさらに、有機的構成要素、例えばジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）または平均分子量が４００であるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００）を含んでいてよい。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持するソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートを含む組成物における向上、その組成物を調製する方法、ならびにその組成物を用いて哺乳類を処置する方法に関する。特に、本発明はDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)を含む医薬組成物に関し、そのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートはインビボで生理的ｐＨにおいて沈殿し、ゆっくりと溶解して体液および血流中に放出されるインサイチュ沈着物を形成する。本発明はさらに、有機的構成要素、例えばジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）または平均分子量が４００であるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００）を含んでいてよい。
【背景技術】
【０００２】
ドーパミンはパーキンソン病および精神分裂病両方の発病に関係していることが示されているカテコールアミン神経伝達物質である。ドーパミンおよび関連分子はマウスにおいていくつかのタイプの悪性腫瘍の増殖を阻害することが示されており、この活性は腫瘍細胞の増殖の阻害、腫瘍免疫の刺激、および悪性メラノーマにおけるメラニンの代謝への作用に様々に起因すると考えられてきた。最近の研究は、内皮細胞上のＤ２ドーパミン受容体の存在を示した。ドーパミンはＶＰＦ／ＶＥＧＦの血管透過および血管新生活性を非毒性のレベルで強力かつ選択的に阻害することが最近報告された。
【０００３】
テトラデカペプチドであるソマトスタチン（ＳＳ）は、下垂体、膵臓および胃腸管のような組織における様々な分泌プロセスに対して強力な阻害作用を有することが示されている。ＳＳは中枢神経系における神経調節物質としても作用する。本質的に全て阻害性であるＳＳのこれらの生物学的作用は、一連のＧタンパク質共役型受容体を通して引き出され、その５種類の異なる亜型が特性付けられている（ＳＳＴＲ−１〜ＳＳＴＲ−５）。これらの５種類の亜型は内因性のＳＳリガンドに関して類似の親和性を有するが、様々な組織において異なる分布を有する。ソマトスタチンはその５種類の別個の受容体（ＳＳＴＲ）に比較的高い、およびそれぞれの亜型に関して等しい親和性で結合する。
【０００４】
ＳＳはＳＳＴＲ−１、−２、−３、−４、および−５亜型を介して細胞の成長を止めることにより、および／またはＳＳＴＲ−３亜型を介してアポトーシスを誘導することにより細胞の増殖を制御しているという証拠がある。ＳＳおよび様々なアナログは、インビトロおよびインビボで特定のＳＳ受容体（ＳＳＴＲ’ｓ）およびことによると異なる受容体以降の作用（ｐｏｓｔｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｏｎｓ）を介して通常の、および腫瘍性の細胞増殖を阻害することが示されている。加えて、正常なヒト組織および腫瘍性のヒト組織において別のＳＳＴＲ亜型が発現しているという証拠があり、これが様々なＳＳアナログに関する異なる組織親和性およびそれらの療法的作用に対する多様な臨床応答をもたらしている。
【０００５】
異なるタイプのソマトスタチン受容体亜型への結合は、様々な病気および／または疾患の処置と関係している。例えば、成長ホルモンの阻害はソマトスタチン２型受容体（”ＳＳＴＲ−２”）に起因すると考えられており、一方でインスリンの阻害はソマトスタチン５型受容体（”ＳＳＴＲ−５”）に起因すると考えられてきた。２型および５型の活性化は、成長ホルモンの抑制およびより詳細には成長ホルモンを分泌する腺腫（先端巨大症）および甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）を分泌する腺腫と関係していた。５型受容体を活性化するが２型受容体を活性化しないことは、プロラクチンを分泌する腺腫の処置と関係していた。ソマトスタチン受容体亜型の活性化と関係する他の適応には、糖尿病、脈管障害、増殖性網膜症、暁現象、および腎症を処置するためのインスリンおよび／またはグルカゴンの阻害；消化性潰瘍、腸皮および膵臓皮フィステル、過敏性腸症候群、ダンピング症候群、漿液性下痢症候群、ＡＩＤＳに関連する下痢、化学療法に誘発される下痢、急性または慢性膵臓炎ならびに胃腸ホルモンを分泌する腫瘍を処置するための胃酸の分泌の阻害；肝細胞癌のような癌の処置；血管新生の阻害；炎症性障害、例えば関節炎の処置；網膜症；慢性同種移植片拒絶；血管形成術；移植片の血管および胃腸の出血の予防が含まれる。好ましくは、ソマトスタチンアナログは、望ましくない副作用または有効性の喪失につながる可能性がある他の受容体亜型との相互作用を低減するために、望まれる生物学的応答の原因である特定のソマトスタチン受容体亜型（単数または複数）に選択的である。
【０００６】
ソマトスタチンおよびその受容体（ＳＳＴＲ−１〜ＳＳＴＲ−５）は正常なヒトの傍濾胞Ｃ細胞および甲状腺髄様癌（ＭＴＣ）において発現している。ＭＴＣはカルシトニン（ＣＴ）、ソマトスタチン、およびいくつかの他のペプチドを産生する甲状腺の傍濾胞Ｃ細胞から生じる腫瘍である。最近、ＳＳおよびＳＳＴＲがヒトのＭＴＣにおいて発現していることが示され、ＳＳおよびＳＳアナログは血漿ＣＴレベルの低下を誘導し、ＭＴＣの患者において症状の改善をもたらすことが示された。別の最近の研究は、ＳＳおよびＳＳアナログ、特にＳＳＴＲ−１およびＳＳＴＲ−２は腫瘍細胞の増殖を阻害することができることを示しており、これは特定のＳＳＴＲ亜型はＭＴＣの細胞成長の制御において機能している可能性があることを示唆している。ＭＴＣの細胞成長に選択的に作用するＳＳＴＲ亜型アナログの開発および特性付けは、臨床的および療法的適用に有用である。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、ドーパミン−ソマトスタチンコンジュゲートを含む医薬組成物を提供する。特に好ましいのは次のドーパミン−ソマトスタチンコンジュゲート、以下それを”実施例１”と呼ぶ：Dop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)、またはその医薬的に許容できる塩であり、ここで前記組成物の配合物は優れた製造、投与、薬物動態および薬力学的特性、ならびに弱められた好ましくない副作用を与える。実施例１の分子構造は次のものである：
【０００８】
【化１】
【０００９】
。
好ましい特徴において、本発明は、その中のドーパミン−ソマトスタチンコンジュゲートがインビボで生理的ｐＨにおいて沈殿し、ゆっくりと溶解して体液および血流中に放出されるインサイチュ沈着物を形成する医薬組成物を提供する。本発明は、次のパラグラフ（１）〜（３８）、下記、および特許請求の範囲において要約することができる。従って：
（１） １観点において、本発明は、ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートまたはその医薬的に許容できる塩を含む透明な水溶液、またはゲルまたは半固体の医薬組成物に向けられており、ここでそのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートは対象への皮下または筋肉内投与の後に沈殿を形成する。
【００１０】
（２） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが実施例１、すなわちDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:1)である、パラグラフ（１）に従う医薬組成物。
【００１１】
（３） さらに有機的構成要素を含む、パラグラフ（２）に従う医薬組成物。
（４） 医薬組成物。
（５） 前記有機的構成要素が水溶液中でのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートの溶解性を増大させる、またはゲルもしくは半固体の粘性を減少させる、パラグラフ（３）に従う医薬組成物。
【００１２】
（６） 前記有機的構成要素が有機ポリマーである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（７） 前記有機ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である、パラグラフ（５）に従う医薬組成物。
【００１３】
（８） 前記ＰＥＧがＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ１７５０からなるグループから選択される、パラグラフ（６）に従う医薬組成物。
（９） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが２０％ ＰＥＧ４００水溶液中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、パラグラフ（８）に従う医薬組成物。
【００１４】
（１０） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＤＭＡ水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、パラグラフ（８）に従う医薬組成物。
（１１） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＰＥＧ４００水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、パラグラフ（８）に従う医薬組成物。
【００１５】
（１２） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５〜３０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲で溶解している、パラグラフ（１）〜（３）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００１６】
（１３） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、パラグラフ（１２）に従う医薬組成物。
（１４） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、パラグラフ（１２）に従う医薬組成物。
【００１７】
（１５） 前記有機的構成要素が有機溶媒である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（１６） 前記有機溶媒がアミドである、パラグラフ（１５）に従う医薬組成物。
【００１８】
（１７） 前記アミドがジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）である、パラグラフ（１６）に従う医薬組成物。
（１８） 前記有機的構成要素がアルコールである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
【００１９】
（１９） 前記アルコールがエタノール、プロパノールおよびプロピレングリコールからなるグループから選択される、パラグラフ（１８）に従う医薬組成物。
（２０） 前記有機的構成要素が糖である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
【００２０】
（２１） 前記有機的構成要素がシクロデキストリンである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２２） 前記シクロデキストリンがヒドロキシプロピルシクロデキストリンおよびスルホブチルエーテルシクロデキストリンからなるグループから選択される、パラグラフ（２１）に従う医薬組成物。
【００２１】
（２３） 前記有機的構成要素がリン脂質である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２４） 前記リン脂質が水素添加大豆ホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロール、ｌ−ジミリストイルホスファチジルコリン、およびｌ−ジミリストイルホスファチジルグリセロールからなるグループから選択される、パラグラフ（２３）に従う医薬組成物。
【００２２】
（２５） 前記有機的構成要素が水溶性有機溶媒である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２６） 前記水溶性有機溶媒がＰＥＧ３００、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジメチルアセトアミド、およびジメチルスルホキシドからなるグループから選択される、パラグラフ（２５）に従う医薬組成物。
【００２３】
（２７） 前記有機的構成要素が非イオン性界面活性剤である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２８） 前記非イオン性界面活性剤がＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ６０、ｄ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエート、ポロキサマー４０７、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−１９４４ＣＳ、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−２１２５ＣＳ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、Ｇｅｌｌｕｃｉｒｅ ４４／１４、Ｓｏｆｔｉｇｅｎ ７６７、ならびにＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００またはＰＥＧ１７５０のモノ−およびジ−脂肪エステル（ｆａｔｔｙ ｅｓｔｅｒｓ）からなるグループから選択される、パラグラフ（２７）に従う医薬組成物。
【００２４】
（２９） 前記有機的構成要素がエステルである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（３０） 前記エステルがポリグリコールエステルである、パラグラフ（２９）に従う医薬組成物。
【００２５】
（３１） ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートがｐＨ１．０〜１０．５、好ましくは３〜８、より好ましくは５〜６の水溶液中に存在する、パラグラフ（１）〜（３０）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００２６】
（３２） ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが約０．０００１から５００ｍｇ／ｍＬまで、好ましくは約０．１から３００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、パラグラフ（１）〜（３１）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００２７】
（３３） さらに保存剤を含む、パラグラフ（１）〜（３２）のいずれか１項に従う医薬組成物。
（３４） 前記保存剤がｍ−クレゾール、フェノール、ベンジルアルコール、およびメチルパラベンからなるグループから選択される、パラグラフ（３３）に従う医薬組成物。
【００２８】
（３５） 前記保存剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、パラグラフ（３４）に従う医薬組成物。
（３６） さらに等張剤（ｉｓｏｔｏｎｉｃ ａｇｅｎｔ）を含む、パラグラフ（１）〜（３５）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００２９】
（３７） 前記等張剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、パラグラフ（３６）に従う医薬組成物。
（３８） さらに安定化剤を含む、パラグラフ（１）〜（３７）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００３０】
（３９） 前記安定化剤がイミダゾール、アルギニンおよびヒスチジンからなるグループから選択される、パラグラフ（３８）に従う医薬組成物。
（４０） さらに界面活性剤を含む、パラグラフ（１）〜（３９）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００３１】
（４１） さらにキレート剤を含む、パラグラフ（１）〜（４０）のいずれか１項に従う医薬組成物。
（４２） さらに緩衝剤を含む、パラグラフ（１）〜（４１）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００３２】
（４３） 前記緩衝剤がトリス、酢酸アンモニウム、酢酸ナトリウム、グリシン、アスパラギン酸、およびビス−トリスからなるグループから選択される、パラグラフ（４２）に従う医薬組成物。
【００３３】
（４４） さらに二価金属を含む、パラグラフ（１）〜（４３）のいずれか１項に従う医薬組成物。
（４５） 前記二価金属が亜鉛である、パラグラフ（４４）に従う医薬組成物。
【００３４】
本発明の好ましい態様はソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持するソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートとしての実施例１に向けられているが、本発明は実施例１に限定されるわけでは決して無い。本発明のソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートには、例えば、ＷＯ ２００４／０９１４９０およびＷＯ ０２／１００８８８として公開された出願者の前の国際公開番号において開示されている、ソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持する全てのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが含まれる。これらの刊行物を、それぞれの個別の刊行物の開示が本明細書において明確に与えられた場合と同程度まで本明細書に援用する。
【００３５】
これらの刊行物からの下記のソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートも、本発明の医薬組成物を構成するために都合よく用いてよい：
実施例２： Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:2)
実施例３： Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:3)
実施例４： Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:4)
実施例５： Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:5)
実施例６： Dop3-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:6)
実施例７： Dop4-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:7)
実施例８： Dop2-Doc-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:8)
実施例９： Dop2-Lys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:9)
実施例１０： Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:10)
実施例１１： Ac-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:11)
実施例１２： Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:12)
実施例１３： Dop2-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:13)
実施例１４： Ac-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:14)
実施例１５： Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:15)
実施例１６： Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:16)
実施例１７： Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:17)
実施例１８： Dop5-Lys(Dop5)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:18)
実施例１９： Dop5-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:19)
実施例２０： Dop6-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:20)
実施例２１： Dop2-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe] (SEQ ID NO:21)
実施例２２： Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe] (SEQ ID NO:22)
実施例２３： (SEQ ID NO:23)
【００３６】
【化２】
【００３７】
実施例２４： (SEQ ID NO:24)
【００３８】
【化３】
【００３９】
実施例２５： (SEQ ID NO:25)
【００４０】
【化４】
【００４１】
実施例２６： (SEQ ID NO:26)
【００４２】
【化５】
【００４３】
実施例２７： (SEQ ID NO:27)
【００４４】
【化６】
【００４５】
実施例２８： (SEQ ID NO:28)
【００４６】
【化７】
【００４７】
実施例２９： (SEQ ID NO:29)
【００４８】
【化８】
【００４９】
実施例３０： (SEQ ID NO:30)
【００５０】
【化９】
【００５１】
実施例３１： (SEQ ID NO:31)
【００５２】
【化１０】
【００５３】
実施例３２： (SEQ ID NO:32)
【００５４】
【化１１】
【００５５】
実施例３３： (SEQ ID NO:33)
【００５６】
【化１２】
【００５７】
実施例３４： (SEQ ID NO:34)
【００５８】
【化１３】
【００５９】
実施例３５： (SEQ ID NO:35)
【００６０】
【化１４】
【００６１】
実施例３６： (SEQ ID NO:36)
【００６２】
【化１５】
【００６３】
実施例３７： (SEQ ID NO:37)
【００６４】
【化１６】
【００６５】
実施例３８： (SEQ ID NO:38)
【００６６】
【化１７】
【００６７】
実施例３９： (SEQ ID NO:39)
【００６８】
【化１８】
【００６９】
実施例４０： (SEQ ID NO:40)
【００７０】
【化１９】
【００７１】
実施例４１： (SEQ ID NO:41)
【００７２】
【化２０】
【００７３】
実施例４２： (SEQ ID NO:42)
【００７４】
【化２１】
【００７５】
。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】図１は、スプラーグドーリーラットへの２０ｍｇ／ｋｇ体重の次の２種類の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・実施例１の２００ｍｇ／ｍＬ ５％ ＤＭＡ水溶液；および ・実施例１の２００ｍｇ／ｍＬ ５％ ＰＥＧ４００水溶液。
【図２】図２は、図１で示した２種類の試験配合物の１回の皮下投与の後で、スプラーグドーリーラットの注射部位に残っている実施例１の概算された百分率を表す。
【図３】図３Ａおよび３Ｂは、スプラーグドーリーラットへの１．８ｍｇ／ｋｇ体重の次の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、それぞれ通常の尺度上および対数の尺度上での、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・２０％ＰＥＧ水溶液中で溶解した３０％（ｗ／ｖ）実施例１。
【図４】図４Ａおよび４Ｂは、スプラーグドーリーラットへの１．８ｍｇ／ｋｇ体重の次の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、それぞれ通常の尺度上および対数の尺度上での、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・水中１５％（ｗ／ｖ）実施例１。
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、スプラーグドーリーラットへの１．８ｍｇ／ｋｇ体重の次の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、それぞれ通常の尺度上および対数の尺度上での、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・水中３０％（ｗ／ｖ）実施例１。
【発明を実施するための形態】
【００７７】
”Ｄｏｐ２”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００７８】
【化２２】
【００７９】
。
”Ｄｏｐ３”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８０】
【化２３】
【００８１】
。
”Ｄｏｐ４”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８２】
【化２４】
【００８３】
。
”Ｄｏｐ５”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８４】
【化２５】
【００８５】
。
”Ｄｏｐ６”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８６】
【化２６】
【００８７】
。
Ｌｙｓ（Ｄｏｐ２）は次の構造を有する：
【００８８】
【化２７】
【００８９】
。
Ｄｏｐ２−Ｌｙｓ（Ｄｏｐ２）は次の構造を有する：
【００９０】
【化２８】
【００９１】
。
Ｌｙｓ（Ｄｏｐ５）は次の構造を有する：
【００９２】
【化２９】
【００９３】
。
Ｄｏｐ５−Ｌｙｓ（Ｄｏｐ５）は次の構造を有する：
【００９４】
【化３０】
【００９５】
。
本明細書においてパラメーターおよび量と関連して用いられる用語”約”は、そのパラメーターまたは量が、述べられたパラメーターまたは量の±５％以内であることを意味する。
【００９６】
”Ａｅｐａ”は、次の構造により表される４−（２−アミノエチル）−１−カルボキシメチル−ピペラジンを意味する：
【００９７】
【化３１】
【００９８】
。
”Ａｂｕ”はα−アミノ酪酸を意味する。
”Ａｃ”はアセチルを意味する。
【００９９】
”ＢＳＡ”はウシ血清アルブミンを意味する。
”Ｃｙｓ”または”Ｃ”はシステインを意味する。
”Ｄａｂ”は２，４−ジアミノ酪酸を意味する。
【０１００】
”ＤＣＭ”はジクロロメタンを意味する。
”ＤＩＣ”はＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミドを意味する。
”ＤＩＥＡ”はジイソプロピルエチルアミンを意味する。
【０１０１】
”ＤＭＦ”はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
”ＤＭＡ”はジメチルアセトアミドを意味する。
”Ｆｍｏｃ”はフルオレニルメトキシカルボニルを意味する。
【０１０２】
”ＨＰＬＣ”は高速液体クロマトグラフィーを意味する。
”Ｌｙｓ”または”Ｋ”はリシンを意味する。
”ＮＭＰ”はＮ−メチルピロリドンを意味する。
【０１０３】
”ＰＢＳ”はリン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ７．４を意味する。
”ＰＥＧ”はポリエチレングリコールを意味する。
”ＰＥＧ３００”は平均分子量が３００であるポリエチレングリコールを意味する。
【０１０４】
”ＰＥＧ４００”は平均分子量が４００であるポリエチレングリコールを意味する。
”ＰＥＧ１７５０”は平均分子量が１７５０であるポリエチレングリコールを意味する。
【０１０５】
”Ｔｈｒ”または”Ｔ”はスレオニンを意味する。
”Ｔｒｐ”または”Ｗ”はトリプトファンを意味する。
”Ｔｙｒ”または”Ｙ”はチロシンを意味する。
【０１０６】
”ｔＢｕ”はｔｅｒｔ−ブチルを意味する。
”ＴＩＳ”はトリイソプロピルシランを意味する。
”ＴＦＡ”はトリフルオロ酢酸を意味する。
【０１０７】
”Ｖａｌ”または”Ｖ”はバリンを意味する。
”ソマトスタチン受容体作動薬”は、ソマトスタチン受容体、例えば異なる亜型のいずれか：例えばＳＳＴＲ−１、ＳＳＴＲ−２、ＳＳＴＲ−３、ＳＳＴＲ−４、およびＳＳＴＲ−５に関して高い結合親和性（例えば、１００ｎＭ未満、または好ましくは１０ｎＭ未満、またはより好ましくは１ｎＭ未満のＫｉ）を有し（例えば下記の受容体結合アッセイにより定義される）、例えばｃＡＭＰの細胞内での産生の阻害に関するアッセイにおいてソマトスタチン様の作用を引き出す化合物を意味する。
【０１０８】
”ソマトスタチン選択的作動薬”は、１種類のソマトスタチン受容体亜型に関して、あらゆる他のソマトスタチン受容体亜型に関するよりも高い結合親和性（すなわちより低いＫｉ）を有するソマトスタチン受容体作動薬、例えばソマトスタチンＳＳＴＲ−２選択的作動薬を意味する。
【０１０９】
”ドーパミン受容体作動薬”は、ドーパミン受容体、例えば異なる亜型のいずれか：例えばＤ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、およびＤ５受容体に関して高い結合親和性（例えば、１００ｎＭ未満、または好ましくは１０ｎＭ未満、またはより好ましくは１ｎＭ未満のＫｉ）を有する（例えば下記の受容体結合アッセイにより定義される）化合物を意味する。
【実施例】
【０１１０】
実施例１、すなわちDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)の合成
実施例１、すなわちDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)は、ＡＣＴ３９６ペプチド合成機（Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ，米国ケンタッキー州ルイビル）において、Ｆｍｏｃ化学（Ｆｍｏｃ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）を用いて自動的に合成された。０．６６ｍｍｏｌ／ｇの置換を有するＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ４−メチルベンジルヒドリルアミン（４−ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｙｌｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｅ）（ＭＢＨＡ）樹脂(Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ．，米国カリフォルニア州サンディエゴ)を用いた（置換：０．６６ｍｍｏｌ／ｇ、７６ｍｇ、５０ｍｏｌスケール）。用いたＦｍｏｃアミノ酸はFmoc-DLys (Dde)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-DTrp(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Abu-OHおよびFmoc-Thr(tBu)-OHであり、それらはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ(米国カリフォルニア州サンディエゴ)から購入した。合成は５０μｍｏｌスケールで実施した。それぞれの反応サイクルに関して、ＡＣＴ３９６ペプチド合成機を、次のことを行うようにプログラムした：（１）ＮＭＰで２回洗浄する；（２）１×５分間および１×２５分間、ＮＭＰ中２０％ピペリジンを用いてＦｍｏｃ保護基を除去する；（３）ＮＭＰで２回洗浄する；ならびに（４）カップリングあたり１時間、ＤＭＦ中の、４倍過剰量のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（０．２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＣ（０．２ｍｍｏｌ）を用いてダブルカップリングする。樹脂はその配列に従ってうまくカップリングされた。
【０１１１】
ペプチド鎖を組み立てた後、Ｆｍｏｃ基を除去し、樹脂をＮＭＰおよびＤＣＭで完全に洗浄した。樹脂をシェーカー上の反応容器の中に移し、ＤＭＦ中２％ヒドラジンで２×３０分間処理してＤＬｙｓの側鎖中のＤｄｅ保護基を除去した。ＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで連続的に洗浄した後、樹脂をＤｏｐ２−ＯＨ（５４ｍｇ，３．０等量），ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢｒｏｐ，８２ｍｇ，３．４等量）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡＴ，０．４ｍｇ，３．０等量）、ペンタフルオロフェノール（ｐｅｎｔａｌｆｌｕｒｏｐｈｅｎｏｌ）（１８．４ｍｇ，４等量）、ＤＭＡＰ（ＤＭＦ中０．１Ｍの０．２５ｍＬ，１．０等量）およびＤＩＥＡ（５３Ｌ，４等量）の溶液と共に一夜振とうした。
【０１１２】
ＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで連続的に洗浄した後、樹脂をＴＦＡ（４．７５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．４ｍＬ）、およびＴＩＳ（０．４２５ｍＬ）の混合物で２時間処理した。樹脂を濾過により除去した。濾液を７０ｍＬのエーテルの中に注いだ。形成された沈殿を濾過して分離し、エーテルで完全に洗浄した。この粗生成物を５ｍＬの酢酸水溶液（水／酢酸＝１：１）中で溶解した。次いでその溶液を５０ｍＬのＨ２Ｏおよび２０ｍＬのアセトニトリルで希釈し、それにメタノール中ヨウ素を溶液が黄色を維持するまで添加した。その溶液をゆっくりと１時間攪拌し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液の添加により反応を終わらせた。粗生成物を、Ｃ１８ Ｄｙｎａｍａｘ−１００Ａ°（４×４３ｃｍ，Ｖａｒｉａｎ，米国カリフォルニア州ウォルナットクリーク）のカラムを用いる逆相分取ＨＰＬＣにおいて精製した。そのカラムを、９０％Ａおよび１０％Ｂから６０％Ａおよび４０％Ｂまでの直線勾配により、１時間で溶離し、ここでＡは水中０．１％ＴＦＡであり、Ｂはアセトニトリル中０．１％ＴＦＡであった。紫外吸収による主要成分を含む画分を集め、凍結乾燥した。分析的ＨＰＬＣでの分析に基づいて、純度は９９．９９％であった。エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳ−ＭＳ）での分析は、１６９３．６０の分子量を与えた（計算された分子量である１６９４．２３と一致する）。
【０１１３】
他の例示したソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートを、実質的に実施例１の合成に関して記述した手順に従って合成した。例示したソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートに関する物理的データを表１において示す。
【０１１４】
表１
【０１１５】
【表１−１】
【０１１６】
【表１−２】
【０１１７】
・ソマトスタチン受容体の特異性および選択性アッセイ
ソマトスタチン−ドーパミンキメラを合成するのに用いたソマトスタチンアナログの特異性および選択性を、下記のように、それぞれのＳＳＴＲ亜型を安定して形質移入したＣＨＯ−Ｋ１細胞における放射リガンド結合アッセイにより決定した。ソマトスタチンアナログは、米国特許出願公開番号０２２１０００６７９０においても記述されている。ＳＳＴＲ１（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｍ８１８２９）、ＳＳＴＲ２（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｍ８１８３０）、ＳＳＴＲ３（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｌ０７０６２）、およびＳＳＴＲ４（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号ＡＬ０４９６５１）遺伝子のゲノム断片の完全なコード配列およびＳＳＴＲ５（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｄ１６８２７）に関するｃＤＮＡクローンを、哺乳類発現ベクターｐＣＭＶ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，イタリア、ミラノ）の中にサブクローニングした。他のＳＳＴＲ配列は当業者に既知である。ＳＳＴＲ１〜５を安定して発現するクローン細胞株を、リン酸カルシウム共沈法(Davis L, et al., 1994 In: Basic methods in Molecular Biology、第２版、Appleton & Lange、米国コネティカット州ノーウォーク: 611-646)を用いたＣＨＯ−Ｋ１細胞（ＡＴＣＣ，米国バージニア州マナサス）中への形質移入により得た。プラスミドｐＲＳＶ−ｎｅｏ（ＡＴＣＣ）が選択可能なマーカーとして含められた。クローン細胞株を０．５ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，イタリア、ミラノ）を含むＲＰＭＩ １６４０培地中で選択し、リングクローニングし（ｒｉｎｇ ｃｌｏｎｅｄ）、増やして培養状態にした（ｅｘｐａｎｄｅｄ ｉｎｔｏ ｃｕｌｔｕｒｅ）。
【０１１８】
インビトロ受容体結合アッセイのための膜を、ＳＳＴＲ亜型を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞を氷冷した５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中でホモジナイズし、３９，０００ｇ（１０分間）で２回、間で新しい緩衝液中で再懸濁して遠心分離することにより得た。最終的なペレットをアッセイのために１０ｍＭトリス−ＨＣｌ中で再懸濁した。
【０１１９】
ＳＳＴＲ１、３、４、および５のアッセイに関して、膜の調製物の分割量（ａｌｉｑｕｏｔｓ）を、２５℃で９０分間、１０ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、２００ＫＩＵ／ｍＬトラジロール、０．０２ｍｇ／ｍＬバシトラシン、および０．０２ｍｇ／ｍＬフェニルメチルスルホニルフロリドを含む５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ ７．４）中０．０５ｎＭ［１２５Ｉ−Ｔｙｒ１１］ＳＳ−１４と共に保温した。最終的なアッセイ体積は０．３ｍＬであった。
【０１２０】
ＳＳＴＲ２のアッセイに関して、放射リガンドとして０．０５ｎＭ ［１２５Ｉ］ＭＫ−６７８を用い、保温時間は２５℃で９０分間であった。ＢＲＡＮＤＥＬ濾過マニホールドを用いる、ＧＦ／Ｃガラスマイクロファイバーフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ Ｃｏ．）（０．３％ポリエチレンイミンに予め浸した）を通した急速濾過により、保温を終了した。それぞれのチューブおよびフィルターを、５ｍＬ分割量の氷冷した緩衝液で３回洗浄した。特異的な結合を、結合した全ての放射リガンドから、ＳＳＴＲ１、３、４、および５に関して１０００ｎＭ ＳＳ−１４、またはＳＳＴＲ２に関して１０００ｎＭ ＭＫ−６７８の存在下で結合した放射リガンドを引いたものとして定義した。
【０１２１】
・ドーパミン受容体の特異性および選択性アッセイ
ソマトスタチン−ドーパミンキメラを合成するのに用いたドーパミンアナログのドーパミン−２受容体に関する特異性および選択性は、下記のような放射リガンド結合アッセイにより決定することができる。
【０１２２】
粗製の膜を、凍結したラット線条体（Ｚｉｖｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，米国ペンシルバニア州ピッツバーグ）を２０ｍＬの氷冷した５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中でＢｒｉｎｋｍａｎ Ｐｏｌｙｔｒｏｎ細胞破砕機（設定６、１５秒間）によりホモジナイズすることにより調製した。緩衝液を添加して４０ｍＬの最終体積を得、ホモジネートをＳｏｒｖａｌ ＳＳ−３４ローター中で、０〜４℃において３９，０００ｇで１０分間遠心分離した。結果として生じた上清をデカントして廃棄した。ペレットを氷冷した緩衝液中で再度ホモジナイズし、３７℃で１０分間前保温し、希釈し、前記のように遠心分離した。最終的なペレットを緩衝液中で再懸濁し、受容体結合アッセイのために氷上で保った。
【０１２３】
アッセイのため、洗浄した膜調製物の分割量および試験化合物を、５０ｍＭトリスＨＣｌ、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２中０．２５ｎＭ［３ＨＩ］スピペロン（１６．５Ｃｉ．ｍｍｏｌ，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ，米国マサチューセッツ州ボストン）と共に１５分間（３７℃）保温した。最終的なアッセイ体積は１．０ｍＬであった。ＢＲＡＮＤＥＬ濾過マニホールドを用いる、ＧＦ／Ｂガラスファイバーフィルターを通した急速濾過により、保温を終了した。次いでそれぞれのチューブおよびフィルターを、５ｍＬ分割量の氷冷した緩衝液で３回洗浄した。特異的な結合を、結合した全ての放射リガンドから１０００ｎＭの（＋）ブタクラモールの存在下で結合した放射リガンドを引いたものとして定義した。
【０１２４】
論じたアッセイを用いて、次のように、５種類のヒトソマトスタチン受容体（ｈＳＳＴＲ１−ｈＳＳＴＲ５）およびドーパミン−２受容体（ｈＵＴＩＩおよびｈＤＡ２）に関する阻害定数（Ｋｉ）を、例示したソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートに関して測定した：
表２
【０１２５】
【表２−１】
【０１２６】
【表２−２】
【０１２７】
・ｃＡＭＰの細胞内での産生の阻害
ソマトスタチン（ｓｓｔ）およびドーパミン（Ｄ２）受容体亜型は、様々な神経内分泌腫瘍において共発現しており、機能上の相乗作用を示す可能性がある。両方の受容体亜型に結合する、本明細書で開示した新規のソマトスタチン−ドーパミンキメラ分子、例えば実施例１は、いくつかのより早期の前臨床試験において超作動性の（ｓｕｐｅｒａｇｏｎｉｓｔｉｃ）特性を示した。これは、細胞膜におけるそれらの標的受容体のヘテロ二量体化の誘導またはこれらの化合物の個々の受容体の増進された活性化のどちらかによるものである可能性がある。
【０１２８】
ＨＥＫ−２９３細胞におけるｃＡＭＰ応答要素−ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイをこのアッセイにおいて用い、ここで前記ＨＥＫ−２９３細胞にＤ２および／またはｓｓｔ２のｃＤＮＡを一過性に形質移入した。Ｄ２のみを形質移入した（Ｄ２−ｍｏｎｏｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ）細胞において、実施例１のｃＡＭＰ阻害のＩＣ５０値は０．０２ｎＭであった。ｓｓｔ２のみを形質移入した細胞において、実施例１のｃＡＭＰ阻害のＩＣ５０値は０．０４ｎＭであった。ｓｓｔ２とＤ２を同時形質移入した細胞において、実施例１のｃＡＭＰ阻害のＩＣ５０値は０．０２ｎＭであった。
【０１２９】
この細胞モデルにおいて、実施例１はその非常に強力な作用のほとんどをＤ２受容体への高親和性結合および活性化を通して成立させていると結論付けることができる。ｓｓｔ２受容体の高い効力での活性化との組み合わせでのＤ２受容体の優れた活性化は、いくつかの前臨床試験においてこの化合物で観察された超作動性の作用を説明することができるであろう。
【０１３０】
・様々な濃度のＤＭＡおよびＰＥＧ４００における実施例１の溶解度の決定
本発明を実行するために都合よく用いることができる化合物は、下記の手順を用いて異なるＤＭＡおよびＰＥＧ４００濃度におけるその溶解度を決定するための試験をすることができる。
【０１３１】
用いた溶媒は次のものである：
水中５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＤＭＡ、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＰＥＧ４００；および
ＰＢＳ中５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＤＭＡ、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＰＥＧ４００。
【０１３２】
約１ｍｇの実施例１に、増大する体積の上記の溶媒または緩衝液を添加した。溶解可能な体積に達したら、重量／体積によりその濃度を計算した。実施例１が溶けなかった場合、溶液を遠心分離し、上清をＨＰＬＣにより分析して濃度を決定した。その決定された濃度を、その溶媒または緩衝液中での実施例１の溶解度として扱う。
【０１３３】
溶液のｐＨをチェックした。それらは約ｐＨ７であった。それ以上の調整は行わなかった。
水およびＰＢＳ中での実施例１の溶解度は非常に異なっている。実施例１は、水に基づく溶媒中で、ＰＢＳに基づく溶媒中よりも非常によく溶ける。従って、水およびＰＢＳに基づく溶媒は両方ともこの試験において用いられた。その結果を次の表においてリストする。
【０１３４】
表３
【０１３５】
【表３】
【０１３６】
*ＨＰＬＣによる
表４
【０１３７】
【表４】
【０１３８】
*ＨＰＬＣによる
・実施例１の配合物の薬物動態試験
実施例１の５種類の異なる配合物（”配合物１〜５”）を、次の手順を用いて調製した：
（１） 実施例１を５％ＤＭＡ水溶液中で２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。
【０１３９】
（２） 実施例１を５％ＰＥＧ４００水溶液中で２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。
（３） 実施例１を２０％ＰＥＧ４００水溶液中で３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解させた。
【０１４０】
（４） 実施例１を水中で１５％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解させた。
（５） 実施例１を水中で３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解させた。
・投与および血液試料の収集
配合物（１）および（２）に関して、スプラーグドーリーラットに実施例１のこれらの配合物を２０ｍｇ／ｋｇ体重で皮下投与した。血液試料を、１、２、４、８、２４時間および２、３、４、７日の時点で集めた。血漿をその血液から遠心分離により集め、−８０℃で保管した。注射部位の組織も集め、５×メタノールと共にホモジナイズし、−８０℃で保管した。
【０１４１】
配合物（３）、（４）および（５）に関して、スプラーグドーリーラットに実施例１のこれらの配合物を１．８ｍｇ／ｋｇ体重で皮下投与した。血液試料を、５、１０、１５、３０分、１、２、４、８時間および１、２、３、４、７、１４、２１、２８、３５、４２日の時点で集めた。血漿をその血液から遠心分離により集め、−８０℃で保管した。注射部位の組織も集め、５×メタノールと共にホモジナイズし、−８０℃で保管した。
【０１４２】
・試料の調製
血漿（２００μＬ）を１０μＬのギ酸で酸性化し、６００μＬのアセトニトリルを用いて沈殿させた。上清を遠心分離により集め、真空下で濃縮して乾燥させた。残留物を１５０μＬの水中３０％アセトニトリル中で溶解し、遠心分離した。５０μＬの上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。
【０１４３】
組織のメタノール抽出物（１０μＬ）を水中３０％アセトニトリルで１ｍＬに希釈し、５０μＬをＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。
・ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析
Ｔｒｕｂｏ Ｉｏｎｓｐｒａｙプローブを備えたＡＰＩ４０００質量分析システムを用いてＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を行った。分子イオン検出のＭＲＭモードを、５６５．６および１５９．１のイオンペアと共に用いた。
【０１４４】
ＨＰＬＣによる分離は、Ｌｕｎａ Ｃ８（２） ２×３０ｍｍ ３μカラムを用いて、１０％Ｂから９０％Ｂまで１０分間で、０．３０ｍＬ／分の流速で流して行った。緩衝液Ａは水中１％ギ酸であり、緩衝液Ｂはアセトニトリル中１％ギ酸である。
【０１４５】
ＬＯＱは０．２ｎｇ／ｍＬであった。
・結果および要約
・配合物（１）および（２）
実施例１の血漿濃度は、その標準的なキャリブレーションプロットにより計算された。１．５ｍｇ／ｍＬの実施例１（２０ｍｇ／３００ｇのラットのｋｇ、４ｍＬメタノール抽出物中）を１００％として用いて、注射部位に残っていた百分率を計算した。
【０１４６】
表５：配合物（１）および（２）で投与された、実施例１の血漿濃度および実施例１の注射部位に残っていた百分率
【０１４７】
【表５】
【０１４８】
配合物（１）および（２）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを図１で示す。
配合物（１）および（２）で投与された実施例１の、注射部位における組織蓄積プロフィールを図２で示す。
【０１４９】
表６：配合物（３）、（４）および（５）で投与された実施例１の血漿濃度
【０１５０】
【表６】
【０１５１】
配合物（３）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを、通常の尺度において図３Ａ、対数の尺度において図３Ｂで示す。
配合物（４）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを、通常の尺度において図４Ａ、対数の尺度において図４Ｂで示す。
【０１５２】
配合物（５）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを、通常の尺度において図５Ａ、対数の尺度において図５Ｂで示す。
図７：ＰＫパラメーター
【０１５３】
【表７】
【０１５４】
その結果は、本明細書において記述された本発明に従う実施例１の配合物が、低減された初期血漿濃度を有する許容できる持続放出配合物を与えることを示しており、それは望まれない副作用を低減する、または排除する可能性がある。そのデータは、皮下注射の後、体液は配合物（１）、（２）および（３）の有機的な内容物を希釈することができ、結果として実施例１の急速な沈殿がもたらされることも示している。
【０１５５】
本発明の追加の態様は前述の開示から明らかであると考えられ、それは本明細書において完全に記述された、および下記の特許請求の範囲において定義された本発明に含まれることを意図する。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持するソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートを含む組成物における向上、その組成物を調製する方法、ならびにその組成物を用いて哺乳類を処置する方法に関する。特に、本発明はDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)を含む医薬組成物に関し、そのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートはインビボで生理的ｐＨにおいて沈殿し、ゆっくりと溶解して体液および血流中に放出されるインサイチュ沈着物を形成する。本発明はさらに、有機的構成要素、例えばジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）または平均分子量が４００であるポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００）を含んでいてよい。
【背景技術】
【０００２】
ドーパミンはパーキンソン病および精神分裂病両方の発病に関係していることが示されているカテコールアミン神経伝達物質である。ドーパミンおよび関連分子はマウスにおいていくつかのタイプの悪性腫瘍の増殖を阻害することが示されており、この活性は腫瘍細胞の増殖の阻害、腫瘍免疫の刺激、および悪性メラノーマにおけるメラニンの代謝への作用に様々に起因すると考えられてきた。最近の研究は、内皮細胞上のＤ２ドーパミン受容体の存在を示した。ドーパミンはＶＰＦ／ＶＥＧＦの血管透過および血管新生活性を非毒性のレベルで強力かつ選択的に阻害することが最近報告された。
【０００３】
テトラデカペプチドであるソマトスタチン（ＳＳ）は、下垂体、膵臓および胃腸管のような組織における様々な分泌プロセスに対して強力な阻害作用を有することが示されている。ＳＳは中枢神経系における神経調節物質としても作用する。本質的に全て阻害性であるＳＳのこれらの生物学的作用は、一連のＧタンパク質共役型受容体を通して引き出され、その５種類の異なる亜型が特性付けられている（ＳＳＴＲ−１〜ＳＳＴＲ−５）。これらの５種類の亜型は内因性のＳＳリガンドに関して類似の親和性を有するが、様々な組織において異なる分布を有する。ソマトスタチンはその５種類の別個の受容体（ＳＳＴＲ）に比較的高い、およびそれぞれの亜型に関して等しい親和性で結合する。
【０００４】
ＳＳはＳＳＴＲ−１、−２、−３、−４、および−５亜型を介して細胞の成長を止めることにより、および／またはＳＳＴＲ−３亜型を介してアポトーシスを誘導することにより細胞の増殖を制御しているという証拠がある。ＳＳおよび様々なアナログは、インビトロおよびインビボで特定のＳＳ受容体（ＳＳＴＲ’ｓ）およびことによると異なる受容体以降の作用（ｐｏｓｔｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｃｔｉｏｎｓ）を介して通常の、および腫瘍性の細胞増殖を阻害することが示されている。加えて、正常なヒト組織および腫瘍性のヒト組織において別のＳＳＴＲ亜型が発現しているという証拠があり、これが様々なＳＳアナログに関する異なる組織親和性およびそれらの療法的作用に対する多様な臨床応答をもたらしている。
【０００５】
異なるタイプのソマトスタチン受容体亜型への結合は、様々な病気および／または疾患の処置と関係している。例えば、成長ホルモンの阻害はソマトスタチン２型受容体（”ＳＳＴＲ−２”）に起因すると考えられており、一方でインスリンの阻害はソマトスタチン５型受容体（”ＳＳＴＲ−５”）に起因すると考えられてきた。２型および５型の活性化は、成長ホルモンの抑制およびより詳細には成長ホルモンを分泌する腺腫（先端巨大症）および甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）を分泌する腺腫と関係していた。５型受容体を活性化するが２型受容体を活性化しないことは、プロラクチンを分泌する腺腫の処置と関係していた。ソマトスタチン受容体亜型の活性化と関係する他の適応には、糖尿病、脈管障害、増殖性網膜症、暁現象、および腎症を処置するためのインスリンおよび／またはグルカゴンの阻害；消化性潰瘍、腸皮および膵臓皮フィステル、過敏性腸症候群、ダンピング症候群、漿液性下痢症候群、ＡＩＤＳに関連する下痢、化学療法に誘発される下痢、急性または慢性膵臓炎ならびに胃腸ホルモンを分泌する腫瘍を処置するための胃酸の分泌の阻害；肝細胞癌のような癌の処置；血管新生の阻害；炎症性障害、例えば関節炎の処置；網膜症；慢性同種移植片拒絶；血管形成術；移植片の血管および胃腸の出血の予防が含まれる。好ましくは、ソマトスタチンアナログは、望ましくない副作用または有効性の喪失につながる可能性がある他の受容体亜型との相互作用を低減するために、望まれる生物学的応答の原因である特定のソマトスタチン受容体亜型（単数または複数）に選択的である。
【０００６】
ソマトスタチンおよびその受容体（ＳＳＴＲ−１〜ＳＳＴＲ−５）は正常なヒトの傍濾胞Ｃ細胞および甲状腺髄様癌（ＭＴＣ）において発現している。ＭＴＣはカルシトニン（ＣＴ）、ソマトスタチン、およびいくつかの他のペプチドを産生する甲状腺の傍濾胞Ｃ細胞から生じる腫瘍である。最近、ＳＳおよびＳＳＴＲがヒトのＭＴＣにおいて発現していることが示され、ＳＳおよびＳＳアナログは血漿ＣＴレベルの低下を誘導し、ＭＴＣの患者において症状の改善をもたらすことが示された。別の最近の研究は、ＳＳおよびＳＳアナログ、特にＳＳＴＲ−１およびＳＳＴＲ−２は腫瘍細胞の増殖を阻害することができることを示しており、これは特定のＳＳＴＲ亜型はＭＴＣの細胞成長の制御において機能している可能性があることを示唆している。ＭＴＣの細胞成長に選択的に作用するＳＳＴＲ亜型アナログの開発および特性付けは、臨床的および療法的適用に有用である。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、ドーパミン−ソマトスタチンコンジュゲートを含む医薬組成物を提供する。特に好ましいのは次のドーパミン−ソマトスタチンコンジュゲート、以下それを”実施例１”と呼ぶ：Dop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)、またはその医薬的に許容できる塩であり、ここで前記組成物の配合物は優れた製造、投与、薬物動態および薬力学的特性、ならびに弱められた好ましくない副作用を与える。実施例１の分子構造は次のものである：
【０００８】
【化１】
【０００９】
。
好ましい特徴において、本発明は、その中のドーパミン−ソマトスタチンコンジュゲートがインビボで生理的ｐＨにおいて沈殿し、ゆっくりと溶解して体液および血流中に放出されるインサイチュ沈着物を形成する医薬組成物を提供する。本発明は、次のパラグラフ（１）〜（３８）、下記、および特許請求の範囲において要約することができる。従って：
（１） １観点において、本発明は、ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートまたはその医薬的に許容できる塩を含む透明な水溶液、またはゲルまたは半固体の医薬組成物に向けられており、ここでそのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートは対象への皮下または筋肉内投与の後に沈殿を形成する。
【００１０】
（２） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが実施例１、すなわちDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:1)である、パラグラフ（１）に従う医薬組成物。
【００１１】
（３） さらに有機的構成要素を含む、パラグラフ（２）に従う医薬組成物。
（４） 医薬組成物。
（５） 前記有機的構成要素が水溶液中でのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートの溶解性を増大させる、またはゲルもしくは半固体の粘性を減少させる、パラグラフ（３）に従う医薬組成物。
【００１２】
（６） 前記有機的構成要素が有機ポリマーである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（７） 前記有機ポリマーがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である、パラグラフ（５）に従う医薬組成物。
【００１３】
（８） 前記ＰＥＧがＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ１７５０からなるグループから選択される、パラグラフ（６）に従う医薬組成物。
（９） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが２０％ ＰＥＧ４００水溶液中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、パラグラフ（８）に従う医薬組成物。
【００１４】
（１０） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＤＭＡ水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、パラグラフ（８）に従う医薬組成物。
（１１） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＰＥＧ４００水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、パラグラフ（８）に従う医薬組成物。
【００１５】
（１２） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５〜３０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲で溶解している、パラグラフ（１）〜（３）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００１６】
（１３） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、パラグラフ（１２）に従う医薬組成物。
（１４） 前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、パラグラフ（１２）に従う医薬組成物。
【００１７】
（１５） 前記有機的構成要素が有機溶媒である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（１６） 前記有機溶媒がアミドである、パラグラフ（１５）に従う医薬組成物。
【００１８】
（１７） 前記アミドがジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）である、パラグラフ（１６）に従う医薬組成物。
（１８） 前記有機的構成要素がアルコールである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
【００１９】
（１９） 前記アルコールがエタノール、プロパノールおよびプロピレングリコールからなるグループから選択される、パラグラフ（１８）に従う医薬組成物。
（２０） 前記有機的構成要素が糖である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
【００２０】
（２１） 前記有機的構成要素がシクロデキストリンである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２２） 前記シクロデキストリンがヒドロキシプロピルシクロデキストリンおよびスルホブチルエーテルシクロデキストリンからなるグループから選択される、パラグラフ（２１）に従う医薬組成物。
【００２１】
（２３） 前記有機的構成要素がリン脂質である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２４） 前記リン脂質が水素添加大豆ホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロール、ｌ−ジミリストイルホスファチジルコリン、およびｌ−ジミリストイルホスファチジルグリセロールからなるグループから選択される、パラグラフ（２３）に従う医薬組成物。
【００２２】
（２５） 前記有機的構成要素が水溶性有機溶媒である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２６） 前記水溶性有機溶媒がＰＥＧ３００、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジメチルアセトアミド、およびジメチルスルホキシドからなるグループから選択される、パラグラフ（２５）に従う医薬組成物。
【００２３】
（２７） 前記有機的構成要素が非イオン性界面活性剤である、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（２８） 前記非イオン性界面活性剤がＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ６０、ｄ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエート、ポロキサマー４０７、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−１９４４ＣＳ、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−２１２５ＣＳ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、Ｇｅｌｌｕｃｉｒｅ ４４／１４、Ｓｏｆｔｉｇｅｎ ７６７、ならびにＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００またはＰＥＧ１７５０のモノ−およびジ−脂肪エステル（ｆａｔｔｙ ｅｓｔｅｒｓ）からなるグループから選択される、パラグラフ（２７）に従う医薬組成物。
【００２４】
（２９） 前記有機的構成要素がエステルである、パラグラフ（４）に従う医薬組成物。
（３０） 前記エステルがポリグリコールエステルである、パラグラフ（２９）に従う医薬組成物。
【００２５】
（３１） ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートがｐＨ１．０〜１０．５、好ましくは３〜８、より好ましくは５〜６の水溶液中に存在する、パラグラフ（１）〜（３０）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００２６】
（３２） ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが約０．０００１から５００ｍｇ／ｍＬまで、好ましくは約０．１から３００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、パラグラフ（１）〜（３１）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００２７】
（３３） さらに保存剤を含む、パラグラフ（１）〜（３２）のいずれか１項に従う医薬組成物。
（３４） 前記保存剤がｍ−クレゾール、フェノール、ベンジルアルコール、およびメチルパラベンからなるグループから選択される、パラグラフ（３３）に従う医薬組成物。
【００２８】
（３５） 前記保存剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、パラグラフ（３４）に従う医薬組成物。
（３６） さらに等張剤（ｉｓｏｔｏｎｉｃ ａｇｅｎｔ）を含む、パラグラフ（１）〜（３５）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００２９】
（３７） 前記等張剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、パラグラフ（３６）に従う医薬組成物。
（３８） さらに安定化剤を含む、パラグラフ（１）〜（３７）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００３０】
（３９） 前記安定化剤がイミダゾール、アルギニンおよびヒスチジンからなるグループから選択される、パラグラフ（３８）に従う医薬組成物。
（４０） さらに界面活性剤を含む、パラグラフ（１）〜（３９）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００３１】
（４１） さらにキレート剤を含む、パラグラフ（１）〜（４０）のいずれか１項に従う医薬組成物。
（４２） さらに緩衝剤を含む、パラグラフ（１）〜（４１）のいずれか１項に従う医薬組成物。
【００３２】
（４３） 前記緩衝剤がトリス、酢酸アンモニウム、酢酸ナトリウム、グリシン、アスパラギン酸、およびビス−トリスからなるグループから選択される、パラグラフ（４２）に従う医薬組成物。
【００３３】
（４４） さらに二価金属を含む、パラグラフ（１）〜（４３）のいずれか１項に従う医薬組成物。
（４５） 前記二価金属が亜鉛である、パラグラフ（４４）に従う医薬組成物。
【００３４】
本発明の好ましい態様はソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持するソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートとしての実施例１に向けられているが、本発明は実施例１に限定されるわけでは決して無い。本発明のソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートには、例えば、ＷＯ ２００４／０９１４９０およびＷＯ ０２／１００８８８として公開された出願者の前の国際公開番号において開示されている、ソマトスタチンおよびドーパミン両方の活性をインビボで保持する全てのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが含まれる。これらの刊行物を、それぞれの個別の刊行物の開示が本明細書において明確に与えられた場合と同程度まで本明細書に援用する。
【００３５】
これらの刊行物からの下記のソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートも、本発明の医薬組成物を構成するために都合よく用いてよい：
実施例２： Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:2)
実施例３： Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:3)
実施例４： Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:4)
実施例５： Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:5)
実施例６： Dop3-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:6)
実施例７： Dop4-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:7)
実施例８： Dop2-Doc-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:8)
実施例９： Dop2-Lys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:9)
実施例１０： Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:10)
実施例１１： Ac-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:11)
実施例１２： Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:12)
実施例１３： Dop2-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:13)
実施例１４： Ac-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:14)
実施例１５： Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:15)
実施例１６： Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:16)
実施例１７： Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:17)
実施例１８： Dop5-Lys(Dop5)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:18)
実施例１９： Dop5-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:19)
実施例２０： Dop6-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:20)
実施例２１： Dop2-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe] (SEQ ID NO:21)
実施例２２： Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe] (SEQ ID NO:22)
実施例２３： (SEQ ID NO:23)
【００３６】
【化２】
【００３７】
実施例２４： (SEQ ID NO:24)
【００３８】
【化３】
【００３９】
実施例２５： (SEQ ID NO:25)
【００４０】
【化４】
【００４１】
実施例２６： (SEQ ID NO:26)
【００４２】
【化５】
【００４３】
実施例２７： (SEQ ID NO:27)
【００４４】
【化６】
【００４５】
実施例２８： (SEQ ID NO:28)
【００４６】
【化７】
【００４７】
実施例２９： (SEQ ID NO:29)
【００４８】
【化８】
【００４９】
実施例３０： (SEQ ID NO:30)
【００５０】
【化９】
【００５１】
実施例３１： (SEQ ID NO:31)
【００５２】
【化１０】
【００５３】
実施例３２： (SEQ ID NO:32)
【００５４】
【化１１】
【００５５】
実施例３３： (SEQ ID NO:33)
【００５６】
【化１２】
【００５７】
実施例３４： (SEQ ID NO:34)
【００５８】
【化１３】
【００５９】
実施例３５： (SEQ ID NO:35)
【００６０】
【化１４】
【００６１】
実施例３６： (SEQ ID NO:36)
【００６２】
【化１５】
【００６３】
実施例３７： (SEQ ID NO:37)
【００６４】
【化１６】
【００６５】
実施例３８： (SEQ ID NO:38)
【００６６】
【化１７】
【００６７】
実施例３９： (SEQ ID NO:39)
【００６８】
【化１８】
【００６９】
実施例４０： (SEQ ID NO:40)
【００７０】
【化１９】
【００７１】
実施例４１： (SEQ ID NO:41)
【００７２】
【化２０】
【００７３】
実施例４２： (SEQ ID NO:42)
【００７４】
【化２１】
【００７５】
。
【図面の簡単な説明】
【００７６】
【図１】図１は、スプラーグドーリーラットへの２０ｍｇ／ｋｇ体重の次の２種類の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・実施例１の２００ｍｇ／ｍＬ ５％ ＤＭＡ水溶液；および ・実施例１の２００ｍｇ／ｍＬ ５％ ＰＥＧ４００水溶液。
【図２】図２は、図１で示した２種類の試験配合物の１回の皮下投与の後で、スプラーグドーリーラットの注射部位に残っている実施例１の概算された百分率を表す。
【図３】図３Ａおよび３Ｂは、スプラーグドーリーラットへの１．８ｍｇ／ｋｇ体重の次の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、それぞれ通常の尺度上および対数の尺度上での、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・２０％ＰＥＧ水溶液中で溶解した３０％（ｗ／ｖ）実施例１。
【図４】図４Ａおよび４Ｂは、スプラーグドーリーラットへの１．８ｍｇ／ｋｇ体重の次の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、それぞれ通常の尺度上および対数の尺度上での、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・水中１５％（ｗ／ｖ）実施例１。
【図５】図５Ａおよび５Ｂは、スプラーグドーリーラットへの１．８ｍｇ／ｋｇ体重の次の実施例１の配合物の１回の皮下投与の後に得られた、それぞれ通常の尺度上および対数の尺度上での、完全な時間経過血漿プロフィール（中央値）を表す： ・水中３０％（ｗ／ｖ）実施例１。
【発明を実施するための形態】
【００７７】
”Ｄｏｐ２”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００７８】
【化２２】
【００７９】
。
”Ｄｏｐ３”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８０】
【化２３】
【００８１】
。
”Ｄｏｐ４”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８２】
【化２４】
【００８３】
。
”Ｄｏｐ５”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８４】
【化２５】
【００８５】
。
”Ｄｏｐ６”は次の構造を有する化合物を意味する：
【００８６】
【化２６】
【００８７】
。
Ｌｙｓ（Ｄｏｐ２）は次の構造を有する：
【００８８】
【化２７】
【００８９】
。
Ｄｏｐ２−Ｌｙｓ（Ｄｏｐ２）は次の構造を有する：
【００９０】
【化２８】
【００９１】
。
Ｌｙｓ（Ｄｏｐ５）は次の構造を有する：
【００９２】
【化２９】
【００９３】
。
Ｄｏｐ５−Ｌｙｓ（Ｄｏｐ５）は次の構造を有する：
【００９４】
【化３０】
【００９５】
。
本明細書においてパラメーターおよび量と関連して用いられる用語”約”は、そのパラメーターまたは量が、述べられたパラメーターまたは量の±５％以内であることを意味する。
【００９６】
”Ａｅｐａ”は、次の構造により表される４−（２−アミノエチル）−１−カルボキシメチル−ピペラジンを意味する：
【００９７】
【化３１】
【００９８】
。
”Ａｂｕ”はα−アミノ酪酸を意味する。
”Ａｃ”はアセチルを意味する。
【００９９】
”ＢＳＡ”はウシ血清アルブミンを意味する。
”Ｃｙｓ”または”Ｃ”はシステインを意味する。
”Ｄａｂ”は２，４−ジアミノ酪酸を意味する。
【０１００】
”ＤＣＭ”はジクロロメタンを意味する。
”ＤＩＣ”はＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミドを意味する。
”ＤＩＥＡ”はジイソプロピルエチルアミンを意味する。
【０１０１】
”ＤＭＦ”はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
”ＤＭＡ”はジメチルアセトアミドを意味する。
”Ｆｍｏｃ”はフルオレニルメトキシカルボニルを意味する。
【０１０２】
”ＨＰＬＣ”は高速液体クロマトグラフィーを意味する。
”Ｌｙｓ”または”Ｋ”はリシンを意味する。
”ＮＭＰ”はＮ−メチルピロリドンを意味する。
【０１０３】
”ＰＢＳ”はリン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ７．４を意味する。
”ＰＥＧ”はポリエチレングリコールを意味する。
”ＰＥＧ３００”は平均分子量が３００であるポリエチレングリコールを意味する。
【０１０４】
”ＰＥＧ４００”は平均分子量が４００であるポリエチレングリコールを意味する。
”ＰＥＧ１７５０”は平均分子量が１７５０であるポリエチレングリコールを意味する。
【０１０５】
”Ｔｈｒ”または”Ｔ”はスレオニンを意味する。
”Ｔｒｐ”または”Ｗ”はトリプトファンを意味する。
”Ｔｙｒ”または”Ｙ”はチロシンを意味する。
【０１０６】
”ｔＢｕ”はｔｅｒｔ−ブチルを意味する。
”ＴＩＳ”はトリイソプロピルシランを意味する。
”ＴＦＡ”はトリフルオロ酢酸を意味する。
【０１０７】
”Ｖａｌ”または”Ｖ”はバリンを意味する。
”ソマトスタチン受容体作動薬”は、ソマトスタチン受容体、例えば異なる亜型のいずれか：例えばＳＳＴＲ−１、ＳＳＴＲ−２、ＳＳＴＲ−３、ＳＳＴＲ−４、およびＳＳＴＲ−５に関して高い結合親和性（例えば、１００ｎＭ未満、または好ましくは１０ｎＭ未満、またはより好ましくは１ｎＭ未満のＫｉ）を有し（例えば下記の受容体結合アッセイにより定義される）、例えばｃＡＭＰの細胞内での産生の阻害に関するアッセイにおいてソマトスタチン様の作用を引き出す化合物を意味する。
【０１０８】
”ソマトスタチン選択的作動薬”は、１種類のソマトスタチン受容体亜型に関して、あらゆる他のソマトスタチン受容体亜型に関するよりも高い結合親和性（すなわちより低いＫｉ）を有するソマトスタチン受容体作動薬、例えばソマトスタチンＳＳＴＲ−２選択的作動薬を意味する。
【０１０９】
”ドーパミン受容体作動薬”は、ドーパミン受容体、例えば異なる亜型のいずれか：例えばＤ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、およびＤ５受容体に関して高い結合親和性（例えば、１００ｎＭ未満、または好ましくは１０ｎＭ未満、またはより好ましくは１ｎＭ未満のＫｉ）を有する（例えば下記の受容体結合アッセイにより定義される）化合物を意味する。
【実施例】
【０１１０】
実施例１、すなわちDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)の合成
実施例１、すなわちDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2(SEQ ID NO:1)は、ＡＣＴ３９６ペプチド合成機（Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ，米国ケンタッキー州ルイビル）において、Ｆｍｏｃ化学（Ｆｍｏｃ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）を用いて自動的に合成された。０．６６ｍｍｏｌ／ｇの置換を有するＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ４−メチルベンジルヒドリルアミン（４−ｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｙｌｈｙｄｒｙｌａｍｉｎｅ）（ＭＢＨＡ）樹脂(Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ．，米国カリフォルニア州サンディエゴ)を用いた（置換：０．６６ｍｍｏｌ／ｇ、７６ｍｇ、５０ｍｏｌスケール）。用いたＦｍｏｃアミノ酸はFmoc-DLys (Dde)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-DTrp(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Abu-OHおよびFmoc-Thr(tBu)-OHであり、それらはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ(米国カリフォルニア州サンディエゴ)から購入した。合成は５０μｍｏｌスケールで実施した。それぞれの反応サイクルに関して、ＡＣＴ３９６ペプチド合成機を、次のことを行うようにプログラムした：（１）ＮＭＰで２回洗浄する；（２）１×５分間および１×２５分間、ＮＭＰ中２０％ピペリジンを用いてＦｍｏｃ保護基を除去する；（３）ＮＭＰで２回洗浄する；ならびに（４）カップリングあたり１時間、ＤＭＦ中の、４倍過剰量のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（０．２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＣ（０．２ｍｍｏｌ）を用いてダブルカップリングする。樹脂はその配列に従ってうまくカップリングされた。
【０１１１】
ペプチド鎖を組み立てた後、Ｆｍｏｃ基を除去し、樹脂をＮＭＰおよびＤＣＭで完全に洗浄した。樹脂をシェーカー上の反応容器の中に移し、ＤＭＦ中２％ヒドラジンで２×３０分間処理してＤＬｙｓの側鎖中のＤｄｅ保護基を除去した。ＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで連続的に洗浄した後、樹脂をＤｏｐ２−ＯＨ（５４ｍｇ，３．０等量），ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢｒｏｐ，８２ｍｇ，３．４等量）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡＴ，０．４ｍｇ，３．０等量）、ペンタフルオロフェノール（ｐｅｎｔａｌｆｌｕｒｏｐｈｅｎｏｌ）（１８．４ｍｇ，４等量）、ＤＭＡＰ（ＤＭＦ中０．１Ｍの０．２５ｍＬ，１．０等量）およびＤＩＥＡ（５３Ｌ，４等量）の溶液と共に一夜振とうした。
【０１１２】
ＤＭＦ、ＭｅＯＨおよびＤＣＭで連続的に洗浄した後、樹脂をＴＦＡ（４．７５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（０．４ｍＬ）、およびＴＩＳ（０．４２５ｍＬ）の混合物で２時間処理した。樹脂を濾過により除去した。濾液を７０ｍＬのエーテルの中に注いだ。形成された沈殿を濾過して分離し、エーテルで完全に洗浄した。この粗生成物を５ｍＬの酢酸水溶液（水／酢酸＝１：１）中で溶解した。次いでその溶液を５０ｍＬのＨ２Ｏおよび２０ｍＬのアセトニトリルで希釈し、それにメタノール中ヨウ素を溶液が黄色を維持するまで添加した。その溶液をゆっくりと１時間攪拌し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液の添加により反応を終わらせた。粗生成物を、Ｃ１８ Ｄｙｎａｍａｘ−１００Ａ°（４×４３ｃｍ，Ｖａｒｉａｎ，米国カリフォルニア州ウォルナットクリーク）のカラムを用いる逆相分取ＨＰＬＣにおいて精製した。そのカラムを、９０％Ａおよび１０％Ｂから６０％Ａおよび４０％Ｂまでの直線勾配により、１時間で溶離し、ここでＡは水中０．１％ＴＦＡであり、Ｂはアセトニトリル中０．１％ＴＦＡであった。紫外吸収による主要成分を含む画分を集め、凍結乾燥した。分析的ＨＰＬＣでの分析に基づいて、純度は９９．９９％であった。エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳ−ＭＳ）での分析は、１６９３．６０の分子量を与えた（計算された分子量である１６９４．２３と一致する）。
【０１１３】
他の例示したソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートを、実質的に実施例１の合成に関して記述した手順に従って合成した。例示したソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートに関する物理的データを表１において示す。
【０１１４】
表１
【０１１５】
【表１−１】
【０１１６】
【表１−２】
【０１１７】
・ソマトスタチン受容体の特異性および選択性アッセイ
ソマトスタチン−ドーパミンキメラを合成するのに用いたソマトスタチンアナログの特異性および選択性を、下記のように、それぞれのＳＳＴＲ亜型を安定して形質移入したＣＨＯ−Ｋ１細胞における放射リガンド結合アッセイにより決定した。ソマトスタチンアナログは、米国特許出願公開番号０２２１０００６７９０においても記述されている。ＳＳＴＲ１（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｍ８１８２９）、ＳＳＴＲ２（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｍ８１８３０）、ＳＳＴＲ３（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｌ０７０６２）、およびＳＳＴＲ４（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号ＡＬ０４９６５１）遺伝子のゲノム断片の完全なコード配列およびＳＳＴＲ５（例えばＧｅｎｂａｎｋアクセス番号Ｄ１６８２７）に関するｃＤＮＡクローンを、哺乳類発現ベクターｐＣＭＶ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，イタリア、ミラノ）の中にサブクローニングした。他のＳＳＴＲ配列は当業者に既知である。ＳＳＴＲ１〜５を安定して発現するクローン細胞株を、リン酸カルシウム共沈法(Davis L, et al., 1994 In: Basic methods in Molecular Biology、第２版、Appleton & Lange、米国コネティカット州ノーウォーク: 611-646)を用いたＣＨＯ−Ｋ１細胞（ＡＴＣＣ，米国バージニア州マナサス）中への形質移入により得た。プラスミドｐＲＳＶ−ｎｅｏ（ＡＴＣＣ）が選択可能なマーカーとして含められた。クローン細胞株を０．５ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，イタリア、ミラノ）を含むＲＰＭＩ １６４０培地中で選択し、リングクローニングし（ｒｉｎｇ ｃｌｏｎｅｄ）、増やして培養状態にした（ｅｘｐａｎｄｅｄ ｉｎｔｏ ｃｕｌｔｕｒｅ）。
【０１１８】
インビトロ受容体結合アッセイのための膜を、ＳＳＴＲ亜型を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞を氷冷した５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中でホモジナイズし、３９，０００ｇ（１０分間）で２回、間で新しい緩衝液中で再懸濁して遠心分離することにより得た。最終的なペレットをアッセイのために１０ｍＭトリス−ＨＣｌ中で再懸濁した。
【０１１９】
ＳＳＴＲ１、３、４、および５のアッセイに関して、膜の調製物の分割量（ａｌｉｑｕｏｔｓ）を、２５℃で９０分間、１０ｍｇ／ｍＬ ＢＳＡ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、２００ＫＩＵ／ｍＬトラジロール、０．０２ｍｇ／ｍＬバシトラシン、および０．０２ｍｇ／ｍＬフェニルメチルスルホニルフロリドを含む５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ ７．４）中０．０５ｎＭ［１２５Ｉ−Ｔｙｒ１１］ＳＳ−１４と共に保温した。最終的なアッセイ体積は０．３ｍＬであった。
【０１２０】
ＳＳＴＲ２のアッセイに関して、放射リガンドとして０．０５ｎＭ ［１２５Ｉ］ＭＫ−６７８を用い、保温時間は２５℃で９０分間であった。ＢＲＡＮＤＥＬ濾過マニホールドを用いる、ＧＦ／Ｃガラスマイクロファイバーフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ Ｃｏ．）（０．３％ポリエチレンイミンに予め浸した）を通した急速濾過により、保温を終了した。それぞれのチューブおよびフィルターを、５ｍＬ分割量の氷冷した緩衝液で３回洗浄した。特異的な結合を、結合した全ての放射リガンドから、ＳＳＴＲ１、３、４、および５に関して１０００ｎＭ ＳＳ−１４、またはＳＳＴＲ２に関して１０００ｎＭ ＭＫ−６７８の存在下で結合した放射リガンドを引いたものとして定義した。
【０１２１】
・ドーパミン受容体の特異性および選択性アッセイ
ソマトスタチン−ドーパミンキメラを合成するのに用いたドーパミンアナログのドーパミン−２受容体に関する特異性および選択性は、下記のような放射リガンド結合アッセイにより決定することができる。
【０１２２】
粗製の膜を、凍結したラット線条体（Ｚｉｖｉｃ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，米国ペンシルバニア州ピッツバーグ）を２０ｍＬの氷冷した５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中でＢｒｉｎｋｍａｎ Ｐｏｌｙｔｒｏｎ細胞破砕機（設定６、１５秒間）によりホモジナイズすることにより調製した。緩衝液を添加して４０ｍＬの最終体積を得、ホモジネートをＳｏｒｖａｌ ＳＳ−３４ローター中で、０〜４℃において３９，０００ｇで１０分間遠心分離した。結果として生じた上清をデカントして廃棄した。ペレットを氷冷した緩衝液中で再度ホモジナイズし、３７℃で１０分間前保温し、希釈し、前記のように遠心分離した。最終的なペレットを緩衝液中で再懸濁し、受容体結合アッセイのために氷上で保った。
【０１２３】
アッセイのため、洗浄した膜調製物の分割量および試験化合物を、５０ｍＭトリスＨＣｌ、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２中０．２５ｎＭ［３ＨＩ］スピペロン（１６．５Ｃｉ．ｍｍｏｌ，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ，米国マサチューセッツ州ボストン）と共に１５分間（３７℃）保温した。最終的なアッセイ体積は１．０ｍＬであった。ＢＲＡＮＤＥＬ濾過マニホールドを用いる、ＧＦ／Ｂガラスファイバーフィルターを通した急速濾過により、保温を終了した。次いでそれぞれのチューブおよびフィルターを、５ｍＬ分割量の氷冷した緩衝液で３回洗浄した。特異的な結合を、結合した全ての放射リガンドから１０００ｎＭの（＋）ブタクラモールの存在下で結合した放射リガンドを引いたものとして定義した。
【０１２４】
論じたアッセイを用いて、次のように、５種類のヒトソマトスタチン受容体（ｈＳＳＴＲ１−ｈＳＳＴＲ５）およびドーパミン−２受容体（ｈＵＴＩＩおよびｈＤＡ２）に関する阻害定数（Ｋｉ）を、例示したソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートに関して測定した：
表２
【０１２５】
【表２−１】
【０１２６】
【表２−２】
【０１２７】
・ｃＡＭＰの細胞内での産生の阻害
ソマトスタチン（ｓｓｔ）およびドーパミン（Ｄ２）受容体亜型は、様々な神経内分泌腫瘍において共発現しており、機能上の相乗作用を示す可能性がある。両方の受容体亜型に結合する、本明細書で開示した新規のソマトスタチン−ドーパミンキメラ分子、例えば実施例１は、いくつかのより早期の前臨床試験において超作動性の（ｓｕｐｅｒａｇｏｎｉｓｔｉｃ）特性を示した。これは、細胞膜におけるそれらの標的受容体のヘテロ二量体化の誘導またはこれらの化合物の個々の受容体の増進された活性化のどちらかによるものである可能性がある。
【０１２８】
ＨＥＫ−２９３細胞におけるｃＡＭＰ応答要素−ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイをこのアッセイにおいて用い、ここで前記ＨＥＫ−２９３細胞にＤ２および／またはｓｓｔ２のｃＤＮＡを一過性に形質移入した。Ｄ２のみを形質移入した（Ｄ２−ｍｏｎｏｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ）細胞において、実施例１のｃＡＭＰ阻害のＩＣ５０値は０．０２ｎＭであった。ｓｓｔ２のみを形質移入した細胞において、実施例１のｃＡＭＰ阻害のＩＣ５０値は０．０４ｎＭであった。ｓｓｔ２とＤ２を同時形質移入した細胞において、実施例１のｃＡＭＰ阻害のＩＣ５０値は０．０２ｎＭであった。
【０１２９】
この細胞モデルにおいて、実施例１はその非常に強力な作用のほとんどをＤ２受容体への高親和性結合および活性化を通して成立させていると結論付けることができる。ｓｓｔ２受容体の高い効力での活性化との組み合わせでのＤ２受容体の優れた活性化は、いくつかの前臨床試験においてこの化合物で観察された超作動性の作用を説明することができるであろう。
【０１３０】
・様々な濃度のＤＭＡおよびＰＥＧ４００における実施例１の溶解度の決定
本発明を実行するために都合よく用いることができる化合物は、下記の手順を用いて異なるＤＭＡおよびＰＥＧ４００濃度におけるその溶解度を決定するための試験をすることができる。
【０１３１】
用いた溶媒は次のものである：
水中５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＤＭＡ、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＰＥＧ４００；および
ＰＢＳ中５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＤＭＡ、５％、１０％、２０％、３０％、４０％ＰＥＧ４００。
【０１３２】
約１ｍｇの実施例１に、増大する体積の上記の溶媒または緩衝液を添加した。溶解可能な体積に達したら、重量／体積によりその濃度を計算した。実施例１が溶けなかった場合、溶液を遠心分離し、上清をＨＰＬＣにより分析して濃度を決定した。その決定された濃度を、その溶媒または緩衝液中での実施例１の溶解度として扱う。
【０１３３】
溶液のｐＨをチェックした。それらは約ｐＨ７であった。それ以上の調整は行わなかった。
水およびＰＢＳ中での実施例１の溶解度は非常に異なっている。実施例１は、水に基づく溶媒中で、ＰＢＳに基づく溶媒中よりも非常によく溶ける。従って、水およびＰＢＳに基づく溶媒は両方ともこの試験において用いられた。その結果を次の表においてリストする。
【０１３４】
表３
【０１３５】
【表３】
【０１３６】
*ＨＰＬＣによる
表４
【０１３７】
【表４】
【０１３８】
*ＨＰＬＣによる
・実施例１の配合物の薬物動態試験
実施例１の５種類の異なる配合物（”配合物１〜５”）を、次の手順を用いて調製した：
（１） 実施例１を５％ＤＭＡ水溶液中で２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。
【０１３９】
（２） 実施例１を５％ＰＥＧ４００水溶液中で２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解させた。
（３） 実施例１を２０％ＰＥＧ４００水溶液中で３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解させた。
【０１４０】
（４） 実施例１を水中で１５％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解させた。
（５） 実施例１を水中で３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解させた。
・投与および血液試料の収集
配合物（１）および（２）に関して、スプラーグドーリーラットに実施例１のこれらの配合物を２０ｍｇ／ｋｇ体重で皮下投与した。血液試料を、１、２、４、８、２４時間および２、３、４、７日の時点で集めた。血漿をその血液から遠心分離により集め、−８０℃で保管した。注射部位の組織も集め、５×メタノールと共にホモジナイズし、−８０℃で保管した。
【０１４１】
配合物（３）、（４）および（５）に関して、スプラーグドーリーラットに実施例１のこれらの配合物を１．８ｍｇ／ｋｇ体重で皮下投与した。血液試料を、５、１０、１５、３０分、１、２、４、８時間および１、２、３、４、７、１４、２１、２８、３５、４２日の時点で集めた。血漿をその血液から遠心分離により集め、−８０℃で保管した。注射部位の組織も集め、５×メタノールと共にホモジナイズし、−８０℃で保管した。
【０１４２】
・試料の調製
血漿（２００μＬ）を１０μＬのギ酸で酸性化し、６００μＬのアセトニトリルを用いて沈殿させた。上清を遠心分離により集め、真空下で濃縮して乾燥させた。残留物を１５０μＬの水中３０％アセトニトリル中で溶解し、遠心分離した。５０μＬの上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。
【０１４３】
組織のメタノール抽出物（１０μＬ）を水中３０％アセトニトリルで１ｍＬに希釈し、５０μＬをＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。
・ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析
Ｔｒｕｂｏ Ｉｏｎｓｐｒａｙプローブを備えたＡＰＩ４０００質量分析システムを用いてＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を行った。分子イオン検出のＭＲＭモードを、５６５．６および１５９．１のイオンペアと共に用いた。
【０１４４】
ＨＰＬＣによる分離は、Ｌｕｎａ Ｃ８（２） ２×３０ｍｍ ３μカラムを用いて、１０％Ｂから９０％Ｂまで１０分間で、０．３０ｍＬ／分の流速で流して行った。緩衝液Ａは水中１％ギ酸であり、緩衝液Ｂはアセトニトリル中１％ギ酸である。
【０１４５】
ＬＯＱは０．２ｎｇ／ｍＬであった。
・結果および要約
・配合物（１）および（２）
実施例１の血漿濃度は、その標準的なキャリブレーションプロットにより計算された。１．５ｍｇ／ｍＬの実施例１（２０ｍｇ／３００ｇのラットのｋｇ、４ｍＬメタノール抽出物中）を１００％として用いて、注射部位に残っていた百分率を計算した。
【０１４６】
表５：配合物（１）および（２）で投与された、実施例１の血漿濃度および実施例１の注射部位に残っていた百分率
【０１４７】
【表５】
【０１４８】
配合物（１）および（２）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを図１で示す。
配合物（１）および（２）で投与された実施例１の、注射部位における組織蓄積プロフィールを図２で示す。
【０１４９】
表６：配合物（３）、（４）および（５）で投与された実施例１の血漿濃度
【０１５０】
【表６】
【０１５１】
配合物（３）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを、通常の尺度において図３Ａ、対数の尺度において図３Ｂで示す。
配合物（４）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを、通常の尺度において図４Ａ、対数の尺度において図４Ｂで示す。
【０１５２】
配合物（５）の薬物動態プロフィールの完全な時間経過プロットを、通常の尺度において図５Ａ、対数の尺度において図５Ｂで示す。
図７：ＰＫパラメーター
【０１５３】
【表７】
【０１５４】
その結果は、本明細書において記述された本発明に従う実施例１の配合物が、低減された初期血漿濃度を有する許容できる持続放出配合物を与えることを示しており、それは望まれない副作用を低減する、または排除する可能性がある。そのデータは、皮下注射の後、体液は配合物（１）、（２）および（３）の有機的な内容物を希釈することができ、結果として実施例１の急速な沈殿がもたらされることも示している。
【０１５５】
本発明の追加の態様は前述の開示から明らかであると考えられ、それは本明細書において完全に記述された、および下記の特許請求の範囲において定義された本発明に含まれることを意図する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートまたはその医薬的に許容できる塩を含む透明な水溶液、またはゲルまたは半固体の医薬組成物であって、そのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが対象への皮下または筋肉内投与の後に沈殿を形成する医薬組成物。
【請求項２】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが次のもの：
Dop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:1)
Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:2)
Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:3)
Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:4)
Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:5)
Dop3-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:6)
Dop4-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:7)
Dop2-Doc-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:8)
Dop2-Lys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:9)
Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:10)
Ac-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:11)
Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:12)
Dop2-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:13)
Ac-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:14)
Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:15)
Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:16)
Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:17)
Dop5-Lys(Dop5)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:18)
Dop5-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:19)
Dop6-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:20)
Dop2-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe]; (SEQ ID NO:21)
Dop2-Lys(Dopa2)-DTyr-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe]; (SEQ ID NO:22)
【化１】
; (SEQ ID NO:23)
【化２】
; (SEQ ID NO:24)
【化３】
; (SEQ ID NO:25)
【化４】
; (SEQ ID NO:26)
【化５】
; (SEQ ID NO:27)
【化６】
; (SEQ ID NO:28)
【化７】
; (SEQ ID NO:29)
【化８】
; (SEQ ID NO:30)
【化９】
; (SEQ ID NO:31)
【化１０】
; (SEQ ID NO:32)
【化１１】
; (SEQ ID NO:33)
【化１２】
; (SEQ ID NO:34)
【化１３】
; (SEQ ID NO:35)
【化１４】
; (SEQ ID NO:36)
【化１５】
; (SEQ ID NO:37)
【化１６】
; (SEQ ID NO:38)
【化１７】
; (SEQ ID NO:39)
【化１８】
; (SEQ ID NO:40)
【化１９】
; (SEQ ID NO:41)もしくは
【化２０】
; (SEQ ID NO:42)
またはその医薬的に許容できる塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートがDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:1)である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
さらに有機的構成要素を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記有機的構成要素が水溶液中でのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートの溶解性を増大させる、またはゲルもしくは半固体の粘性を減少させる、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記有機的構成要素が有機ポリマーである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記有機ポリマーがＰＥＧである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ＰＥＧがＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ１７５０からなるグループから選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが２０％ ＰＥＧ４００水溶液中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＤＭＡ水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＰＥＧ４００水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５〜３０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲で溶解している、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記有機的構成要素が有機溶媒である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記有機溶媒がアミドである、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記アミドがジメチルアセトアミドである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記有機的構成要素がアルコールである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記アルコールがエタノール、プロパノールおよびプロピレングリコールからなるグループから選択される、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記有機溶媒が糖である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記有機的構成要素がシクロデキストリンである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記シクロデキストリンがヒドロキシプロピルシクロデキストリンおよびスルホブチルエーテルシクロデキストリンからなるグループから選択される、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記有機的構成要素がリン脂質である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記リン脂質が水素添加大豆ホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロール、ｌ−ジミリストイルホスファチジルコリン、およびｌ−ジミリストイルホスファチジルグリセロールからなるグループから選択される、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記有機的構成要素が水溶性有機溶媒である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記水溶性有機溶媒がＰＥＧ３００、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジメチルアセトアミド、およびジメチルスルホキシドからなるグループから選択される、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記有機的構成要素が非イオン性界面活性剤である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記非イオン性界面活性剤がＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ６０、ｄ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエート、ポロキサマー４０７、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−１９４４ＣＳ、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−２１２５ＣＳ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、Ｇｅｌｌｕｃｉｒｅ ４４／１４、Ｓｏｆｔｉｇｅｎ ７６７、ならびにＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００またはＰＥＧ１７５０のモノ−およびジ−脂肪エステルからなるグループから選択される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記有機的構成要素がエステルである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記エステルがポリグリコールエステルである、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートがｐＨ１．０〜１０．５、好ましくは３〜８、より好ましくは５〜６の水溶液中に存在する、請求項１〜３０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが約０．０００１から５００ｍｇ／ｍＬまで、好ましくは約０．１から３００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
さらに保存剤を含む、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記保存剤がｍ−クレゾール、フェノール、ベンジルアルコール、およびメチルパラベンからなるグループから選択される、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記保存剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
さらに等張剤を含む、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記等張剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
さらに安定化剤を含む、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記安定化剤がイミダゾール、アルギニンおよびヒスチジンからなるグループから選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
さらに界面活性剤を含む、請求項１〜３９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
さらにキレート剤を含む、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
さらに緩衝剤を含む、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記緩衝剤がトリス、酢酸アンモニウム、酢酸ナトリウム、グリシン、アスパラギン酸、およびビス−トリスからなるグループから選択される、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
さらに二価金属を含む、請求項１〜４３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記二価金属が亜鉛である、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
対象において疾患または病気を処置する方法であって、前記方法が前記対象に療法上有効量の請求項１〜４５のいずれか１項に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記疾患または病気が肺癌、神経膠腫、食思不振、甲状腺機能低下、高アルドステロン症、Ｈ．ピロリの増殖、先端巨大症、再狭窄、クローン病、全身性硬化症、外部および内部膵臓偽嚢胞および腹水、ＶＩＰ産生腫瘍、膵島細胞症（ｎｅｓｉｄｏｂｌａｓｔｏｓｉｓ）、高インスリン症、ガストリノーマ、ゾリンジャー−エリソン症候群、下痢、ＡＩＤＳに関連する下痢、化学療法に関連する下痢、強皮症、過敏性腸症候群、膵臓炎、小腸閉塞症、胃食道逆流症、十二指腸胃逆流症、クッシング症候群、ゴナドトロピノーマ（ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎｏｍａ）、上皮小体亢進症、グレーブス病、糖尿病性ニューロパシー、ページェット病、多嚢胞卵巣症、甲状腺癌、ヘパトーム（ｈｅｐａｔｏｍｅ）、白血病、髄膜腫、癌性悪液質、起立性低血圧、食後低血圧、パニック発作、ＧＨ分泌性腺腫、先端巨大症、ＴＳＨ分泌性腺腫、プロラクチン分泌性腺腫、インスリノーマ、グルカゴノーマ、糖尿病、高脂血症、インスリン不感症、Ｘ症候群、脈管障害、増殖性網膜症、暁現象、腎症、胃酸分泌、消化性潰瘍、腸皮フィステル、膵臓皮フィステル、ダンピング症候群、漿液性下痢症候群、膵臓炎、胃腸ホルモン分泌性腫瘍、血管新生、関節炎、同種移植片拒絶、移植片の血管の出血、門脈高血圧、胃腸の出血、肥満、およびオピオイドの過剰摂取からなるグループから選択される方法。
【請求項１】
ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートまたはその医薬的に許容できる塩を含む透明な水溶液、またはゲルまたは半固体の医薬組成物であって、そのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが対象への皮下または筋肉内投与の後に沈殿を形成する医薬組成物。
【請求項２】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが次のもの：
Dop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:1)
Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:2)
Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:3)
Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:4)
Dop2-DPhe-Doc-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr(Dop2)-DTrp-Lys-Val-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:5)
Dop3-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:6)
Dop4-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:7)
Dop2-Doc-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:8)
Dop2-Lys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:9)
Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:10)
Ac-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:11)
Dop2-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:12)
Dop2-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:13)
Ac-DLys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:14)
Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:15)
Dop2-Lys(Dop2)-DTyr-DTyr-cyclo[Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Thr-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:16)
Dop2-Lys(Dop2)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:17)
Dop5-Lys(Dop5)-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:18)
Dop5-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:19)
Dop6-DPhe-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2; (SEQ ID NO:20)
Dop2-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe]; (SEQ ID NO:21)
Dop2-Lys(Dopa2)-DTyr-Tyr-cyclo[DDab-Arg-Phe-Phe-DTrp-Lys-Thr-Phe]; (SEQ ID NO:22)
【化１】
; (SEQ ID NO:23)
【化２】
; (SEQ ID NO:24)
【化３】
; (SEQ ID NO:25)
【化４】
; (SEQ ID NO:26)
【化５】
; (SEQ ID NO:27)
【化６】
; (SEQ ID NO:28)
【化７】
; (SEQ ID NO:29)
【化８】
; (SEQ ID NO:30)
【化９】
; (SEQ ID NO:31)
【化１０】
; (SEQ ID NO:32)
【化１１】
; (SEQ ID NO:33)
【化１２】
; (SEQ ID NO:34)
【化１３】
; (SEQ ID NO:35)
【化１４】
; (SEQ ID NO:36)
【化１５】
; (SEQ ID NO:37)
【化１６】
; (SEQ ID NO:38)
【化１７】
; (SEQ ID NO:39)
【化１８】
; (SEQ ID NO:40)
【化１９】
; (SEQ ID NO:41)もしくは
【化２０】
; (SEQ ID NO:42)
またはその医薬的に許容できる塩である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートがDop2-DLys(Dop2)-cyclo[Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys]-Thr-NH2 (SEQ ID NO:1)である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
さらに有機的構成要素を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記有機的構成要素が水溶液中でのソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートの溶解性を増大させる、またはゲルもしくは半固体の粘性を減少させる、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記有機的構成要素が有機ポリマーである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記有機ポリマーがＰＥＧである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ＰＥＧがＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００およびＰＥＧ１７５０からなるグループから選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが２０％ ＰＥＧ４００水溶液中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＤＭＡ水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが５％ ＰＥＧ４００水溶液中で約２００ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５〜３０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲で溶解している、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約１５％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが水中で約３０％（ｗ／ｖ）の濃度で溶解している、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記有機的構成要素が有機溶媒である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記有機溶媒がアミドである、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記アミドがジメチルアセトアミドである、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記有機的構成要素がアルコールである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記アルコールがエタノール、プロパノールおよびプロピレングリコールからなるグループから選択される、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記有機溶媒が糖である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記有機的構成要素がシクロデキストリンである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記シクロデキストリンがヒドロキシプロピルシクロデキストリンおよびスルホブチルエーテルシクロデキストリンからなるグループから選択される、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記有機的構成要素がリン脂質である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記リン脂質が水素添加大豆ホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルグリセロール、ｌ−ジミリストイルホスファチジルコリン、およびｌ−ジミリストイルホスファチジルグリセロールからなるグループから選択される、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
前記有機的構成要素が水溶性有機溶媒である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記水溶性有機溶媒がＰＥＧ３００、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジメチルアセトアミド、およびジメチルスルホキシドからなるグループから選択される、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記有機的構成要素が非イオン性界面活性剤である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記非イオン性界面活性剤がＣｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ４０、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ６０、ｄ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシネート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエート、ポロキサマー４０７、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−１９４４ＣＳ、Ｌａｂｒａｆｉｌ Ｍ−２１２５ＣＳ、Ｌａｂｒａｓｏｌ、Ｇｅｌｌｕｃｉｒｅ ４４／１４、Ｓｏｆｔｉｇｅｎ ７６７、ならびにＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００またはＰＥＧ１７５０のモノ−およびジ−脂肪エステルからなるグループから選択される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記有機的構成要素がエステルである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
前記エステルがポリグリコールエステルである、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートがｐＨ１．０〜１０．５、好ましくは３〜８、より好ましくは５〜６の水溶液中に存在する、請求項１〜３０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
ソマトスタチン−ドーパミンコンジュゲートが約０．０００１から５００ｍｇ／ｍＬまで、好ましくは約０．１から３００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
さらに保存剤を含む、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記保存剤がｍ−クレゾール、フェノール、ベンジルアルコール、およびメチルパラベンからなるグループから選択される、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記保存剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
さらに等張剤を含む、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
前記等張剤が０．０１ｍｇ／ｍＬから１００ｍｇ／ｍＬまでの濃度で存在する、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
さらに安定化剤を含む、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記安定化剤がイミダゾール、アルギニンおよびヒスチジンからなるグループから選択される、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
さらに界面活性剤を含む、請求項１〜３９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
さらにキレート剤を含む、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
さらに緩衝剤を含む、請求項１〜４１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記緩衝剤がトリス、酢酸アンモニウム、酢酸ナトリウム、グリシン、アスパラギン酸、およびビス−トリスからなるグループから選択される、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
さらに二価金属を含む、請求項１〜４３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記二価金属が亜鉛である、請求項４４に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
対象において疾患または病気を処置する方法であって、前記方法が前記対象に療法上有効量の請求項１〜４５のいずれか１項に記載の医薬組成物を投与することを含み、前記疾患または病気が肺癌、神経膠腫、食思不振、甲状腺機能低下、高アルドステロン症、Ｈ．ピロリの増殖、先端巨大症、再狭窄、クローン病、全身性硬化症、外部および内部膵臓偽嚢胞および腹水、ＶＩＰ産生腫瘍、膵島細胞症（ｎｅｓｉｄｏｂｌａｓｔｏｓｉｓ）、高インスリン症、ガストリノーマ、ゾリンジャー−エリソン症候群、下痢、ＡＩＤＳに関連する下痢、化学療法に関連する下痢、強皮症、過敏性腸症候群、膵臓炎、小腸閉塞症、胃食道逆流症、十二指腸胃逆流症、クッシング症候群、ゴナドトロピノーマ（ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎｏｍａ）、上皮小体亢進症、グレーブス病、糖尿病性ニューロパシー、ページェット病、多嚢胞卵巣症、甲状腺癌、ヘパトーム（ｈｅｐａｔｏｍｅ）、白血病、髄膜腫、癌性悪液質、起立性低血圧、食後低血圧、パニック発作、ＧＨ分泌性腺腫、先端巨大症、ＴＳＨ分泌性腺腫、プロラクチン分泌性腺腫、インスリノーマ、グルカゴノーマ、糖尿病、高脂血症、インスリン不感症、Ｘ症候群、脈管障害、増殖性網膜症、暁現象、腎症、胃酸分泌、消化性潰瘍、腸皮フィステル、膵臓皮フィステル、ダンピング症候群、漿液性下痢症候群、膵臓炎、胃腸ホルモン分泌性腫瘍、血管新生、関節炎、同種移植片拒絶、移植片の血管の出血、門脈高血圧、胃腸の出血、肥満、およびオピオイドの過剰摂取からなるグループから選択される方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公表番号】特表２０１１−５２０８７９（Ｐ２０１１−５２０８７９Ａ）
【公表日】平成２３年７月２１日（２０１１．７．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５０９４７７（Ｐ２０１１−５０９４７７）
【出願日】平成２１年５月１２日（２００９．５．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００２９４３
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１３９８５５
【国際公開日】平成２１年１１月１９日（２００９．１１．１９）
【出願人】（５０９１２０４６９）イプセン ファルマ ソシエテ パール アクシオン サンプリフィエ (51)
【氏名又は名称原語表記】ＩＰＳＥＮ ＰＨＡＲＭＡ Ｓ．Ａ．Ｓ．
【住所又は居所原語表記】６５ Ｑｕａｉ Ｇｅｏｒｇｅｓ Ｇｏｒｓｅ，Ｆ−９２１００ Ｂｏｕｌｏｇｎｅ Ｂｉｌｌａｎｃｏｕｒｔ ＦＲＡＮＣＥ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年７月２１日（２０１１．７．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年５月１２日（２００９．５．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／００２９４３
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１３９８５５
【国際公開日】平成２１年１１月１９日（２００９．１１．１９）
【出願人】（５０９１２０４６９）イプセン ファルマ ソシエテ パール アクシオン サンプリフィエ (51)
【氏名又は名称原語表記】ＩＰＳＥＮ ＰＨＡＲＭＡ Ｓ．Ａ．Ｓ．
【住所又は居所原語表記】６５ Ｑｕａｉ Ｇｅｏｒｇｅｓ Ｇｏｒｓｅ，Ｆ−９２１００ Ｂｏｕｌｏｇｎｅ Ｂｉｌｌａｎｃｏｕｒｔ ＦＲＡＮＣＥ
【Ｆターム（参考）】
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