二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
本発明は、工学操作された多価多重特異性結合タンパク質、作成方法、及び特に疾患の予防、診断及び／または治療におけるその使用に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなるポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記結合タンパク質。
【請求項２】
ＶＤ１及びＶＤ２が、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の結合タンパク質。
【請求項３】
ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなるポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記結合タンパク質。
【請求項４】
ＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の結合タンパク質。
【請求項５】
ｎが、０である、請求項１または３に記載の結合タンパク質。
【請求項６】
第１及び第２ポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、前記第１ポリペプチド鎖が、第１ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域である）
からなり、第２ポリペプチド鎖が、第２ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記結合タンパク質。
【請求項７】
ＶＤ１及びＶＤ２重鎖可変ドメインが、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の結合タンパク質。
【請求項８】
Ｘ１またはＸ２が、配列番号１〜２６からなる群から選択されるアミノ酸配列である、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項９】
結合タンパク質が、２つの第１ポリペプチド鎖及び２つの第２ポリペプチド鎖を含む、請求項６に記載の結合タンパク質。
【請求項１０】
Ｆｃ領域が、未変性配列Ｆｃ領域及び変異配列Ｆｃ領域からなる群から選択される、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１１】
Ｆｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ及びＩｇＤ由来のＦｃ領域からなる群から選択される、請求項１０に記載の結合タンパク質。
【請求項１２】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ１及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ１が、それぞれ同一の第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１３】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ１及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ１が、それぞれ異なる第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１４】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ２及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ２が、それぞれ同一の第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１５】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ２及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ２が、それぞれ異なる第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１６】
上記第１及び上記第２親抗体が、上記抗原上の異なるエピトーブに結合する、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項１７】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が第２抗原に結合する力価とは異なる力価で第１抗原に結合する、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項１８】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が第２抗原に結合する親和性とは異なる親和性で第１抗原に結合する、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項１９】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、ヒト抗体、ＣＤＲグラフト化抗体及びヒト化抗体からなる群から選択される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項２０】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結されている２つのＦａｂ断片からなる二価断片、ＶＨ及びＣＨ１ドメインから構成されるＦｄ断片、抗体のシクグルアームのＶＬ及びＶＨドメインから構成されるＦｖ断片、ｄＡｂ断片、単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、一本鎖抗体及びダイアボディからなる群から選択される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項２１】
結合タンパク質が、上記第１親抗体またはその抗原結合部分、または上記第２親抗体またはその抗原結合部分により示される、少なくとも１つの所望特性を有する、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項２２】
上記所望特性が、１つ以上の抗体パラメーターから選択される、請求項２２に記載の結合タンパク質。
【請求項２３】
上記抗体パラメーターが、抗原特異性、抗原に対する親和性、力価、生物学的機能、エピトープ認識、安定性、可溶性、産生効率、免疫原性、薬物動態、バイオアベイラビリティ、組織交差反応性及びオルソロガス抗原結合からなる群から選択される、請求項２１に記載の結合タンパク質。
【請求項２４】
４つのポリペプチド鎖を含む２つの抗原に結合し得る結合タンパク質であって、前記した２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域である）
からなり、２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記したＶＤ１及びＶＤ２重鎖可変ドメインが、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記したＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記結合タンパク質。
【請求項２５】
４つのポリペプチド鎖を含む２つの抗原に結合し得る結合タンパク質であって、前記した２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記した２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記ＤＶＤ−Ｉｇが、ＣＤ−２０、ＣＤ−１９、ＣＤ−８０、ＣＤ−２２、ＣＤ−４０、ＣＤ−３、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ−２）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、インスリン様成長因子１，２（ＩＧＦ１，２）、インスリン様成長因子受容体（ＩＧＦ１Ｒ）、マクロファージ刺激タンパク質受容体チロシンキナーゼ（ＲＯＮ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、間葉−上皮移行因子（ｃ−ＭＥＴ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ショウジョウバエデルタホモログ（ＤＬＬ４）、ニュロピリン１（ＮＲＰ１）、胎盤成長因子（ＰＬＧＦ）及びｖ−ｅｒｂ−ｂ２トリ赤芽球性白血病ウイルス発癌ホモログ３（ＥｒｂＢ３）からなる群から選択される、少なくとも１つの抗原に結合する、前記結合タンパク質。
【請求項２６】
結合タンパク質が、１つ以上の標的に対して表面プラズモン共鳴により測定して少なくとも約１０２Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０３Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０４Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０５Ｍ−１ｓ−１、及び少なくとも約１０６Ｍ−１ｓ−１からなる群から選択される、オン速度定数（Ｋｏｎ）を有する、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項２７】
結合タンパク質が、１つ以上の標的に対して表面プラズモン共鳴により測定して多くとも約１０−３ｓ−１、多くとも約１０−４ｓ−１、多くとも約１０−５ｓ−１、及び多くとも約１０−６ｓ−１からなる群から選択される、オフ速度定数（Ｋｏｆｆ）を有する、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項２８】
結合タンパク質が、１つ以上の標的に対して多くとも約１０−７Ｍ、多くとも約１０−８Ｍ、多くとも約１０−９Ｍ、多くとも約１０−１０Ｍ、多くとも約１０−１１Ｍ、多くとも約１０−１２Ｍ、及び多くとも１０−１３Ｍからなる群から選択される解離定数（ＫＤ）を有する、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項２９】
請求項１、３、６、２４または２５のいずれか１項に記載の結合タンパク質を含む結合タンパク質コンジュゲートであって、更に免疫接着分子、イメージング剤、治療薬及び細胞傷害薬からなる群から選択される物質を含む、前記結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３０】
上記物質が、放射標識、酵素、蛍光標識、発光標識、生物発光標識、磁気標識及びビオチンからなる群から選択されるイメージング剤である、請求項２９に記載の結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３１】
上記イメージング剤が、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１６６Ｈｏ及び１５３Ｓｍからなる群から選択される放射標識である、請求項３０に記載の結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３２】
上記物質が、代謝拮抗薬、アルキル化剤、抗生物質、成長因子、サイトカイン、抗血管新生薬、有糸分裂阻害薬、アントラサイクリン、毒素及びアポトーシス剤からなる群から選択される、治療薬または細胞傷害薬である、請求項３０に記載の結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３３】
結合タンパク質が、結晶化結合タンパク質である、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項３４】
上記結晶が、担体非含有の医薬徐放性結晶である、請求項３３に記載の結合タンパク質。
【請求項３５】
結合タンパク質が、該結合タンパク質の可溶性相当物よりも長いインビボ半減期を有する、請求項３３に記載の結合タンパク質。
【請求項３６】
結合タンパク質が、生物活性を保持している、請求項３３に記載の結合タンパク質。
【請求項３７】
請求項１、３、６、２４または２５のいずれか１項に記載の結合タンパク質アミノ酸配列をエンコードする、単離核酸。
【請求項３８】
請求項３７に記載の単離核酸を含む、ベクター。
【請求項３９】
上記ベクターが、ｐｃＤＮＡ、ｐＴＴ、ｐＴＴ３、ｐＥＦＢＯＳ、ｐＢＶ、ｐＪＶ、ｐｃＤＮＡ３．１ ＴＯＰＯ、ｐＥＦ６ ＴＯＰＯ及びｐＢＪからなる群から選択される、請求項３８に記載のベクター。
【請求項４０】
請求項３８に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項４１】
宿主細胞が、原核細胞である、請求項４０に記載の宿主細胞。
【請求項４２】
宿主細胞が、大腸菌である、請求項４１に記載の宿主細胞。
【請求項４３】
宿主細胞が、真核細胞である、請求項４０に記載の宿主細胞。
【請求項４４】
上記真核細胞が、原生生物細胞、動物細胞、植物細胞及び真菌細胞からなる群から選択される、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４５】
上記真核細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞及び昆虫細胞からなる群から選択される、動物細胞である、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４６】
宿主細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項４７】
宿主細胞が、ＣＯＳである、請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項４８】
宿主細胞が、酵母細胞である、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４９】
上記酵母細胞が、サッカロミセス・セレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）である、請求項４８に記載の宿主細胞。
【請求項５０】
宿主細胞が、昆虫Ｓｆ９細胞である、請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項５１】
請求項４０〜５０のいずれか１項に記載の宿主細胞を培地において結合タンパク質を産生するのに十分な条件下で培養することを含む、結合タンパク質の産生方法。
【請求項５２】
産生した結合タンパク質の５０％〜７５％が、二重特異性四価結合タンパク質である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
産生した結合タンパク質の７５％〜９０％が、二重特異性四価結合タンパク質である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
産生した結合タンパク質の９０％〜９５％が、二重特異性四価結合タンパク質である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
請求項５１に記載の方法に従って産生された、タンパク質。
【請求項５６】
請求項１〜３６及び５５のいずれか１項に記載の結合タンパク質及び医薬的に許容され得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項５７】
更に少なくとも１つの追加治療薬を含む、請求項５６に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
上記追加治療薬が、治療薬、イメージング剤、細胞傷害薬、血管形成インヒビター、キナーゼ阻害剤、共刺激分子ブロッカー、接着分子ブロッカー、抗サイトカイン抗体またはその機能性断片、メトトレキセート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能標識または受容体、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋ブロッカー、抗微生物剤、抗乾癬薬、コルチコステロイド、タンパク同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射線医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、興奮薬、喘息薬物療法、β−アゴニスト、吸入ステロイド、エピネフリンまたはアナログ、サイトカイン及びサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
治療が達成されるように、被験者に対して請求項１〜３６及び５５のいずれか１項に記載の結合タンパク質を投与することによる、疾患または障害のための被験者の治療方法。
【請求項６０】
上記障害が、関節リウマチ、骨関節症、若年性慢性関節炎、敗血症性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、全身性エリテマトーデス、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、移植片対宿主病、臓器移植拒絶反応、臓器移植に関連する急性または慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、播種性血管内凝固、川崎病、グレーヴス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、ウェジナー肉芽腫症、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、腎臓の顕微鏡的血管炎、慢性活動型肝炎、ブドウ膜炎、敗血症性ショック、毒素性ショック症候群、敗血症症候群、悪液質、感染性疾患、寄生虫疾患、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、卒中、原発性胆汁性肝硬変、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、心筋梗塞、アジソン病、散在性、Ｉ型多腺性自己免疫症及びＩＩ型多腺性自己免疫症、シュミット症候群、成人（急性）呼吸窮迫症候群、脱毛症、円形脱毛症、血清反応陰性関節症、関節症、ライター病、乾癬性関節症、潰瘍性腸炎性関節症、腸炎性滑膜炎、クラミジア、エルシニア及びサルモネラ関連関節症、脊椎関節症、アテローム性疾患／動脈硬化症、アトピー性アレルギー、自己免疫性水疱性疾患、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、類天疱瘡、線状ＩｇＡ病、自己免疫性溶血性貧血、クームズ試験陽性溶血性貧血、後天性悪性貧血、若年性悪性貧血、筋痛性脳炎／ローヤルフリー病、慢性皮膚粘膜カンジダ症、巨細胞動脈炎、原発性硬化性肝炎、特発性自己免疫性肝炎、後天性免疫不全症症候群、後天性免疫不全症関連疾患、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、分類不能型免疫不全症（分類不能型低ガンマグロブリン血症）、拡張型心筋症、女性不妊症、卵巣機能不全、早発性卵巣機能不全、線維性肺疾患、特発性線維性肺胞炎、炎症後間質性肺疾患、間質性肺炎、結合組織病関連間質性肺疾患、混合結合組織病関連肺疾患、全身性硬化症関連間質性肺疾患、関節リウマチ関連間質性肺疾患、全身性エリテマトーデス関連肺疾患、皮膚筋炎／多発性筋炎関連肺疾患、シェーグレン病関連肺疾患、強直性脊椎炎関連肺疾患、血管炎性びまん性肺疾患、ヘモジデリン沈着症関連肺疾患、薬物誘発性間質性肺疾患、線維症、放射線線維症、閉塞性細気管支炎、慢性好酸球性肺炎、リンパ球性浸潤性肺疾患、感染後間質性肺疾患、痛風性関節炎、自己免疫性肝炎、１型自己免疫性肝炎（古典的自己免疫性またはルポイド肝炎）、２型自己免疫性肝炎（抗ＬＫＭ抗体肝炎）、自己免疫媒介低血糖症、黒色表皮腫を伴うＢ型インスリン抵抗性、副甲状腺機能低下症、臓器移植に関連する急性免疫疾患、臓器移植に関連する慢性免疫疾患、変形性関節症、原発性硬化性胆管炎、１型乾癬、２型乾癬、特発性白血球減少症、自己免疫性好中球減少症、腎疾患ＮＯＳ、糸球体腎炎、腎臓の顕微鏡的血管炎、ライム病、円板状エリテマトーデス、特発性またはＮＯＳ男性不妊症、精子自己免疫、多発性硬化症（すべてのサブタイプ）、交感性眼炎、結合組織病に続発する肺性高血圧、グッドパスチャー症候群、結節性多発性動脈炎の肺症状、急性リウマチ熱、リウマチ様脊椎炎、スチル病、全身性硬化症、シェーグレン症候群、高安病／動脈炎、自己免疫性血小板減少症、特発性血小板減少症、自己免疫性甲状腺疾患、甲状腺機能亢進症、甲状腺腫様自己免疫性甲状腺機能低下症（橋本病）、萎縮性自己免疫性甲状腺機能低下症、原発性粘液水腫、水晶体原性ブドウ膜炎、原発性血管炎、白斑性急性肝疾患、慢性肝疾患、アルコール性肝硬変、アルコール誘発性肝損傷、胆汁鬱滞、特異体質性肝疾患、薬物誘発性肝炎、非アルコール性脂肪肝、アレルギー及び喘息、Ｂ群連鎖球菌（ＧＢＳ）感染、精神障害（例えば、うつ病及び統合失調症）、Ｔｈ２型及びＴｈ１型媒介疾患、急性及び慢性疼痛（いろいろな形の疼痛）、並びに癌（例えば、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌及び腎臓癌）及び造血性悪性腫瘍（白血病及びリンパ腫）、無βリポタンパク血症、先端チアノーゼ、急性及び慢性寄生虫または感染性プロセス、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性または慢性細菌感染、急性膵炎、急性腎不全、腺癌、航空機異所性拍動、エイズ認知症複合、アルコール誘発性肝炎、アレルギー性結膜炎、アレルギー性接触皮膚炎、アレルギー性鼻炎、同種移植片拒絶反応、α−１−アンチトリプシン欠損症、筋萎縮側索硬化症、貧血、狭心症、前角細胞変性、抗ｃｄ３治療、抗リン脂質症候群、抗受容体過敏反応、大動脈瘤及び末梢動脈瘤、大動脈解離、動脈性高血圧、動脈硬化症、動静脈フィステル、運動失調症、心房細動（持続性または発作性）、心房粗動、房室ブロック、Ｂ細胞リンパ腫、移植骨片拒絶反応、骨髄移植（ＢＭＴ）拒絶反応、脚ブロック、バーキットリンパ腫、火傷、心臓不整脈、心臓失神症候群、心臓腫瘍、心筋症、心肺バイパス炎症応答、軟骨移植拒絶反応、小脳皮質変性、小脳障害、無秩序または多源性心房頻拍、化学療法関連障害、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性アルコール中毒、慢性炎症性病理、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性サリチル酸中毒、大腸癌、鬱血性心不全、結膜炎、接触皮膚炎、肺性心、冠動脈疾患、クロイツフェルト−ヤコブ病、培養陰性敗血症、膿疱性線維症、サイトカイン治療関連障害、拳闘家認知症、脱髄疾患、デング出血熱、皮膚炎、皮膚症状、糖尿病、真性糖尿病、糖尿病性アテローム性疾患、びまん性レヴイ小体病、拡張性鬱血性心筋症、脳幹神経節の障害、中年のダウン症候群、ＣＮＳドーパミン受容体をブロックする薬物による薬物誘発性運動障害、薬物過敏、湿疹、脳脊髄炎、心内膜炎、内分泌病、喉頭蓋炎、エプスタイン−バーウイルス感染、先端紅痛症、錐体外路性脳障害、家族性血球貪食リンパ組織球症、胎児性胸腺移植拒絶反応、フリードライヒ運動失調症、機能性末梢動脈障害、真菌性敗血症、ガス壊疽、胃潰瘍、糸球体腎炎、臓器または組織の移植片拒絶反応、グラム陰性敗血症、グラム陽性敗血症、細胞内生物による肉芽腫、毛様細胞白血病、ハラーホルデン−スパッツ病、橋本甲状腺炎、枯草熱、心臓移植拒絶反応、血色素症、血液透析、溶血性尿毒症症候群／血栓溶解性血小板減少性紫斑病、出血、肝炎（Ａ）、ヒス束不整脈、ＨＩＶ感染／ＨＩＶ神経障害、ホジキン病、運動過多性運動障害、過敏反応、過敏性肺炎、高血圧、運動減少性運動障害、視床下部−下垂体−副腎軸評価、特発性アジソン病、特発性肺線維症、抗体媒介細胞毒性、無力症、乳児脊髄性筋萎縮症、大動脈の炎症、インフルエンザＡ、電離放射線暴露、虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／視神経炎、虚血−再潅流傷害、虚血性発作、若年性関節リウマチ、若年性脊髄性筋萎縮症、カポジ肉腫、腎移植拒絶反応、レジオネラ、リーシュマニア症、ライ病、皮質脊髄系の病巣、脂肪浮腫、肝移植拒絶反応、リンパ水腫、マラリア、悪性リンパ腫、悪性組織球症、悪性メラノーマ、髄膜炎、骨髄炎菌血症、代謝性／特発性、片頭痛、ミトコンドリア多系統障害、混合結合組織病、単クローン性免疫グロブリン血症、多発性骨髄腫、多系統変性（メンセル・ドゥジュリーヌ−トーマス・シードレーガー及びマシャド−ジョセフ）、重症筋無力症、マイコバクテリウム・アビウム・イントラセルラーレ、結核菌、骨髄異形成症候群、心筋梗塞、心筋虚血障害、鼻咽頭癌、新生児慢性肺疾患、腎炎、ネフローゼ、神経変性疾患、神経原性Ｉ筋萎縮症、好中球減少性発熱、非ホジキンリンパ腫、腹部動脈及びその枝の閉塞、閉塞性動脈障害、ｏｋｔ３治療、睾丸炎／副睾丸炎、睾丸炎／精管復元術、臓器巨大症、骨粗しょう症、膵臓移植拒絶反応、膵臓癌、腫瘍随伴症候群／悪性腫瘍の高カルシウム血症、上皮小体移植拒絶反応、骨盤内炎症性疾患、多年性鼻炎、心膜疾患、末梢アテローム性疾患、末梢血管疾患、腹膜炎、悪性貧血、ニューモシスティス・カリニ肺炎、肺炎、ＰＯＥＭＳ症候群（多発性神経障害、臓器巨大症、内分泌症、単クローン性免疫グロブリン血症、及び皮膚症状症候群）、輸血後症候群、ポストポンプ症候群、ＭＩ後心臓切開術症候群、子癇前症、進行性核上麻痺、原発性肺性高血圧、放射線治療、レイノー現象及び病、レイノー病、レフサム病、狭いＱＲＳの規則正しい頻脈、腎血管性高血圧、再潅流傷害、拘束型心筋症、肉腫、強皮症、老人性舞踏病、レヴイ小体型老人性認知症、血清反応陰性関節症、ショック、鎌状赤血球貧血、皮膚同種片拒絶反応、皮膚症状症候群、小腸移植拒絶反応、充実性腫瘍、特異的不整脈、脊髄性運動失調症、脊髄小脳変性、連鎖球菌性筋炎、小脳の構造的病巣、亜急性硬化性汎脳炎、失神、心血管系の梅毒、全身性アナフィラクシー、全身性炎症応答症候群、全身性若年性関節リウマチ、Ｔ細胞またはＦＡＢ ＡＬＬ、毛細管拡張症、閉塞性血栓血管炎、血小板減少症、毒性、移植片、外傷／出血、ＩＩＩ型過敏症、ＩＶ型過敏症、不安定狭心症、尿毒症、尿路敗血症、じんま疹、心臓弁膜症、静脈瘤、血管炎、静脈病、静脈血栓症、心室細動、ウイルス性及び真菌性感染、ウイルス性脳炎／無菌性髄膜炎、ウイルス関連血球貪食症候群、ウェルニッケ−コルサコフ症候群、ウィルソン病、臓器または組織の異種片移植拒絶反応、急性冠動脈症候群、急性特発性多発性神経炎、急性炎症性脱髄性多発性神経根ニューロパシー、急性虚血、成人スチル病、円形脱毛症、アナフィラキシー、抗リン脂質抗体症候群、再生不良性貧血、動脈硬化症、アトピー性湿疹、アトピー性皮膚炎、自己免疫性皮膚炎、ストレプトコッカス感染に関連する自己免疫性障害、自己免疫性腸疾患、自己免疫性難聴、自己免疫性リンパ組織増殖性症候群（ＡＬＰＳ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性早発性卵巣機能不全、眼瞼炎、気管支拡張症、水疱性類天疱瘡、心血管疾患、難治性抗リン脂質症候群、セリアック病、頸椎症、慢性虚血、瘢痕性類天疱瘡、多発性硬化症のリスクのある最初のエピソードからなる症候群（ｃｉｓ）、結膜炎、小児期発症精神病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、涙嚢炎、皮膚筋炎、糖尿病性網膜症、真性糖尿病、椎間板ヘルニア、椎間板脱出、薬物誘引性免疫溶血性貧血、心内膜炎、子宮内膜炎、内眼球炎、上強膜炎、多形滲出性紅斑、重症多形紅斑、妊娠性類天疱瘡、ギランバレー症候群（ＧＢＳ）、枯草熱、ヒューズ症候群、特発性パーキンソン病、特発性間質性肺炎、ＩｇＥ媒介アレルギー、免疫溶血性貧血、封入体筋炎、感染性眼炎症性疾患、炎症性脱髄疾患、炎症性心疾患、炎症性腎疾患、ＩＰＦ／ＵＩＰ、虹彩炎、角膜炎、乾性角結膜炎、クスウマル病またはクスウマル−マイエル病、ランドリー麻痺、ランゲルハンス細胞組織球症、網状皮斑、黄斑変性、顕微鏡的多発性血管炎、ベヒテレフ病、運動ニューロン障害、粘膜類天疱瘡、多臓器不全、重症筋無力症、骨髄異形成症候群、心筋炎、神経根障害、神経障害、非Ａ非Ｂ肝炎、視神経炎、骨溶解、卵巣癌、少関節ＪＲＡ、末梢動脈閉塞性疾患（ＰＡＯＤ）、末梢血管疾患（ＰＶＤ）、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、静脈炎、結節性多発性動脈炎（または、結節性動脈周囲炎）、多発性軟骨炎、リウマチ性多発性筋痛、白髪、多関節性ＪＲＡ、多内分泌欠乏症候群、多発性筋炎、リウマチ性多発性筋痛（ＰＭＲ）、ポスト−ポンプ症候群、原発性パーキンソン症候群、前立腺及び腎臓癌、及び造血性悪性腫瘍（白血病及びリンパ腫）、乾癬、真性赤血球系無形成症、原発性副腎機能不全、再発性視神経脊髄炎、再狭窄症、リウマチ性心疾患、ｓａｐｈｏ（滑膜炎、ニキビ、膿庖症、骨増殖症及び骨炎）、強皮症、続発性アミロイドーシス、ショック肺、強膜炎、坐骨神経痛、続発性副腎機能不全、シリコーン関連結合組織病、スネドン−ウィルキンソン皮膚病、強直性脊椎炎、スチーブンス−ジョンソン症候群（ＳＪＳ）、全身性炎症性応答症候群、側頭動脈炎、トキソプラズマ網膜炎、中毒性表皮融解、横断性脊髄炎、ＴＲＡＰＳ（腫瘍壊死因子受容体）、１型アレルギー反応、ＩＩ型糖尿病、じんま疹、通常型間質性肺炎（ＵＩＰ）、血管炎、春季カタル、ウイルス性網膜炎、フォークト−小柳−原田症候群（ＶＫＨ症候
群）、滲出型黄斑変性、損傷治癒、エルシニア及びサルモネラ関連関節症からなる群から選択される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
被験者への投与が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹腔内、包内、軟骨内、膣内、脳質内、小脳内、脳・小脳内、結腸内、子宮頸管内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、髄液嚢内、胸内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻腔内及び経皮的から選択される、少なくとも１つのモードによる、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
第１及び第２抗原に結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンを作成するように、
ａ）第１抗原に結合し得る第１親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｂ）第２抗原に結合し得る第２親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｃ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１でなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第１及び第３ポリペプチド鎖を構築するステップ；
ｄ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１でなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第２及び第４ポリペプチド鎖を構築するステップ；及び
ｅ）第１、第２、第３及び第４ポリペプチド鎖を発現させるステップ；
を含む２つの抗原を結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンの作成方法であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原を結合し得る、前記方法。
【請求項６３】
ＶＤ１及びＶＤ２重鎖可変ドメインが、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、ヒト抗体、ＣＤＲグラフト化抗体及びヒト化抗体からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６５】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結されている２つのＦａｂ断片からなる二価断片、ＶＨ及びＣＨ１ドメインから構成されるＦｄ断片、抗体のシングルアームのＶＬ及びＶＨドメインから構成されるＦｖ断片、ｄＡｂ断片、単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、一本鎖抗体及びダイアボディからなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６６】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される、少なくとも１つの所望特性を有する、請求項６２に記載の方法。
【請求項６７】
上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される、少なくとも１つの所望特性を有する、請求項６２に記載の方法。
【請求項６８】
Ｆｃ領域が、未変性配列Ｆｃ領域及び変異配列Ｆｃ領域からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６９】
Ｆｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ及びＩｇＤ由来のＦｃ領域からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項７０】
上記所望特性が、１つ以上の抗体パラメーターから選択される、請求項６６に記載の方法。
【請求項７１】
上記所望特性が、１つ以上の抗体パラメーターから選択される、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
上記抗体パラメーターが、抗原特異性、抗原に対する親和性、力価、生物学的機能、エピトープ認識、安定性、可溶性、産生効率、免疫原性、薬物動態、バイオアベイラビリティ、組織交差反応性及びオルソロガス抗原結合からなる群から選択される、請求項７０に記載の方法。
【請求項７３】
上記抗体パラメーターが、抗原特異性、抗原に対する親和性、力価、生物学的機能、エピトープ認識、安定性、可溶性、産生効率、免疫原性、薬物動態、バイオアベイラビリティ、組織交差反応性及びオルソロガス抗原結合からなる群から選択される、請求項７１に記載の方法。
【請求項７４】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が上記第２抗原に結合する親和性とは異なる親和性で上記第１抗原に結合する、請求項６２に記載の方法。
【請求項７５】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が上記第２抗原に結合する力価とは異なる力価で上記第１抗原に結合する、請求項６２に記載の方法。
【請求項７６】
所望特性を有する第１及び第２抗原に結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンが作成されるように、
ａ）第１抗原に結合し得且つ二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される少なくとも１つの所望特性を有する第１親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｂ）第２抗原に結合し得且つ二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される少なくとも１つの所望特性を有する第２親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｃ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第１及び第３ポリペプチド鎖を構築するステップ；
ｄ）（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
ＸＩはリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第２及び第４ポリペプチド鎖を構築するステップ；
ｅ）第１、第２、第３及び第４ポリペプチド鎖を発現させるステップ；
を含む所望特性を有する２つの抗原に結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンの作成方法であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記方法。
【請求項７７】
（ａ）改変前の結合タンパク質の特性を測定するステップ；
（ａ）重鎖及び／または軽鎖の（Ｘ１）１の長さ及び／または配列を改変させて、改変重鎖及び／または軽鎖を得るステップ；
（ｂ）改変重鎖及び軽鎖を含む改変結合タンパク質の改良された特性を測定するステップ；
を含む、請求項６に記載の結合タンパク質の特性の改良方法。
【請求項７８】
（ａ）改変前の結合タンパク質の特性を測定するステップ；
（ｂ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎがＶＤ２−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ１−Ｃ−（Ｘ２）ｎに変化するように第１及び第２ポリペプチド鎖を改変させて、改変重鎖及び軽鎖を得るステップ；
（ｃ）改変重鎖及び軽鎖を含む改変結合タンパク質の改良された特性を測定するステップ；
を含む、請求項６に記載の結合タンパク質の特性の改良方法。
【請求項７９】
（ａ）改変前の結合タンパク質の特性を測定するステップ；
（ｂ）重鎖及び／または軽鎖のＶＤ１またはＶＤ２の１つのみの配列が変化するように第１及び／または第２ポリペプチド鎖を改変させるステップ；及び
（ｃ）改変重鎖及び軽鎖を含む改変結合タンパク質の特性を測定するステップ；
を含む、請求項６に記載の結合タンパク質の特性の改良方法。
【請求項８０】
特性が、標的抗原に対する結合、宿主細胞からの発現収率、インビトロ半減期、インビボ半減期、安定性、可溶性及び改良されたエフェクター機能からなる群から選択される、請求項７７〜７８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８１】
改変重鎖の（Ｘ１）１の長さを長くする、請求項７７に記載の方法。
【請求項８２】
改変重鎖の（Ｘ１）１の長さを短くする、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８３】
改変軽鎖の（Ｘ１）１の長さを長くする、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８４】
改変軽鎖の（Ｘ１）１の長さを短くする、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８５】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２１または２２からなる群から選択されるアミノ酸からなる、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８６】
改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１３または１４からなる群から選択されるアミノ酸からなる、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８７】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２２であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１４である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８８】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２１であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１４である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８９】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２２であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１３である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項９０】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２１であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１３である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項１】
ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなるポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記結合タンパク質。
【請求項２】
ＶＤ１及びＶＤ２が、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の結合タンパク質。
【請求項３】
ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなるポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記結合タンパク質。
【請求項４】
ＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の結合タンパク質。
【請求項５】
ｎが、０である、請求項１または３に記載の結合タンパク質。
【請求項６】
第１及び第２ポリペプチド鎖を含む結合タンパク質であって、前記第１ポリペプチド鎖が、第１ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域である）
からなり、第２ポリペプチド鎖が、第２ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記結合タンパク質。
【請求項７】
ＶＤ１及びＶＤ２重鎖可変ドメインが、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の結合タンパク質。
【請求項８】
Ｘ１またはＸ２が、配列番号１〜２６からなる群から選択されるアミノ酸配列である、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項９】
結合タンパク質が、２つの第１ポリペプチド鎖及び２つの第２ポリペプチド鎖を含む、請求項６に記載の結合タンパク質。
【請求項１０】
Ｆｃ領域が、未変性配列Ｆｃ領域及び変異配列Ｆｃ領域からなる群から選択される、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１１】
Ｆｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ及びＩｇＤ由来のＦｃ領域からなる群から選択される、請求項１０に記載の結合タンパク質。
【請求項１２】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ１及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ１が、それぞれ同一の第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１３】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ１及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ１が、それぞれ異なる第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１４】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ２及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ２が、それぞれ同一の第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１５】
上記第１ポリペプチド鎖のＶＤ２及び上記第２ポリペプチド鎖のＶＤ２が、それぞれ異なる第１及び第２親抗体、またはその抗原結合部分から得られる、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項１６】
上記第１及び上記第２親抗体が、上記抗原上の異なるエピトーブに結合する、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項１７】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が第２抗原に結合する力価とは異なる力価で第１抗原に結合する、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項１８】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が第２抗原に結合する親和性とは異なる親和性で第１抗原に結合する、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項１９】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、ヒト抗体、ＣＤＲグラフト化抗体及びヒト化抗体からなる群から選択される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項２０】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結されている２つのＦａｂ断片からなる二価断片、ＶＨ及びＣＨ１ドメインから構成されるＦｄ断片、抗体のシクグルアームのＶＬ及びＶＨドメインから構成されるＦｖ断片、ｄＡｂ断片、単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、一本鎖抗体及びダイアボディからなる群から選択される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の結合タンパク質。
【請求項２１】
結合タンパク質が、上記第１親抗体またはその抗原結合部分、または上記第２親抗体またはその抗原結合部分により示される、少なくとも１つの所望特性を有する、請求項１、３または６に記載の結合タンパク質。
【請求項２２】
上記所望特性が、１つ以上の抗体パラメーターから選択される、請求項２２に記載の結合タンパク質。
【請求項２３】
上記抗体パラメーターが、抗原特異性、抗原に対する親和性、力価、生物学的機能、エピトープ認識、安定性、可溶性、産生効率、免疫原性、薬物動態、バイオアベイラビリティ、組織交差反応性及びオルソロガス抗原結合からなる群から選択される、請求項２１に記載の結合タンパク質。
【請求項２４】
４つのポリペプチド鎖を含む２つの抗原に結合し得る結合タンパク質であって、前記した２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域である）
からなり、２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記したＶＤ１及びＶＤ２重鎖可変ドメインが、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、前記したＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、前記結合タンパク質。
【請求項２５】
４つのポリペプチド鎖を含む２つの抗原に結合し得る結合タンパク質であって、前記した２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記した２つのポリペプチド鎖が、ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなり、前記ＤＶＤ−Ｉｇが、ＣＤ−２０、ＣＤ−１９、ＣＤ−８０、ＣＤ−２２、ＣＤ−４０、ＣＤ−３、ヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ−２）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、インスリン様成長因子１，２（ＩＧＦ１，２）、インスリン様成長因子受容体（ＩＧＦ１Ｒ）、マクロファージ刺激タンパク質受容体チロシンキナーゼ（ＲＯＮ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、間葉−上皮移行因子（ｃ−ＭＥＴ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ショウジョウバエデルタホモログ（ＤＬＬ４）、ニュロピリン１（ＮＲＰ１）、胎盤成長因子（ＰＬＧＦ）及びｖ−ｅｒｂ−ｂ２トリ赤芽球性白血病ウイルス発癌ホモログ３（ＥｒｂＢ３）からなる群から選択される、少なくとも１つの抗原に結合する、前記結合タンパク質。
【請求項２６】
結合タンパク質が、１つ以上の標的に対して表面プラズモン共鳴により測定して少なくとも約１０２Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０３Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０４Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０５Ｍ−１ｓ−１、及び少なくとも約１０６Ｍ−１ｓ−１からなる群から選択される、オン速度定数（Ｋｏｎ）を有する、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項２７】
結合タンパク質が、１つ以上の標的に対して表面プラズモン共鳴により測定して多くとも約１０−３ｓ−１、多くとも約１０−４ｓ−１、多くとも約１０−５ｓ−１、及び多くとも約１０−６ｓ−１からなる群から選択される、オフ速度定数（Ｋｏｆｆ）を有する、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項２８】
結合タンパク質が、１つ以上の標的に対して多くとも約１０−７Ｍ、多くとも約１０−８Ｍ、多くとも約１０−９Ｍ、多くとも約１０−１０Ｍ、多くとも約１０−１１Ｍ、多くとも約１０−１２Ｍ、及び多くとも１０−１３Ｍからなる群から選択される解離定数（ＫＤ）を有する、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項２９】
請求項１、３、６、２４または２５のいずれか１項に記載の結合タンパク質を含む結合タンパク質コンジュゲートであって、更に免疫接着分子、イメージング剤、治療薬及び細胞傷害薬からなる群から選択される物質を含む、前記結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３０】
上記物質が、放射標識、酵素、蛍光標識、発光標識、生物発光標識、磁気標識及びビオチンからなる群から選択されるイメージング剤である、請求項２９に記載の結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３１】
上記イメージング剤が、３Ｈ、１４Ｃ、３５Ｓ、９０Ｙ、９９Ｔｃ、１１１Ｉｎ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、１７７Ｌｕ、１６６Ｈｏ及び１５３Ｓｍからなる群から選択される放射標識である、請求項３０に記載の結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３２】
上記物質が、代謝拮抗薬、アルキル化剤、抗生物質、成長因子、サイトカイン、抗血管新生薬、有糸分裂阻害薬、アントラサイクリン、毒素及びアポトーシス剤からなる群から選択される、治療薬または細胞傷害薬である、請求項３０に記載の結合タンパク質コンジュゲート。
【請求項３３】
結合タンパク質が、結晶化結合タンパク質である、請求項１、３、６、２４または２５に記載の結合タンパク質。
【請求項３４】
上記結晶が、担体非含有の医薬徐放性結晶である、請求項３３に記載の結合タンパク質。
【請求項３５】
結合タンパク質が、該結合タンパク質の可溶性相当物よりも長いインビボ半減期を有する、請求項３３に記載の結合タンパク質。
【請求項３６】
結合タンパク質が、生物活性を保持している、請求項３３に記載の結合タンパク質。
【請求項３７】
請求項１、３、６、２４または２５のいずれか１項に記載の結合タンパク質アミノ酸配列をエンコードする、単離核酸。
【請求項３８】
請求項３７に記載の単離核酸を含む、ベクター。
【請求項３９】
上記ベクターが、ｐｃＤＮＡ、ｐＴＴ、ｐＴＴ３、ｐＥＦＢＯＳ、ｐＢＶ、ｐＪＶ、ｐｃＤＮＡ３．１ ＴＯＰＯ、ｐＥＦ６ ＴＯＰＯ及びｐＢＪからなる群から選択される、請求項３８に記載のベクター。
【請求項４０】
請求項３８に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項４１】
宿主細胞が、原核細胞である、請求項４０に記載の宿主細胞。
【請求項４２】
宿主細胞が、大腸菌である、請求項４１に記載の宿主細胞。
【請求項４３】
宿主細胞が、真核細胞である、請求項４０に記載の宿主細胞。
【請求項４４】
上記真核細胞が、原生生物細胞、動物細胞、植物細胞及び真菌細胞からなる群から選択される、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４５】
上記真核細胞が、哺乳動物細胞、鳥類細胞及び昆虫細胞からなる群から選択される、動物細胞である、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４６】
宿主細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項４７】
宿主細胞が、ＣＯＳである、請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項４８】
宿主細胞が、酵母細胞である、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４９】
上記酵母細胞が、サッカロミセス・セレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）である、請求項４８に記載の宿主細胞。
【請求項５０】
宿主細胞が、昆虫Ｓｆ９細胞である、請求項４５に記載の宿主細胞。
【請求項５１】
請求項４０〜５０のいずれか１項に記載の宿主細胞を培地において結合タンパク質を産生するのに十分な条件下で培養することを含む、結合タンパク質の産生方法。
【請求項５２】
産生した結合タンパク質の５０％〜７５％が、二重特異性四価結合タンパク質である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
産生した結合タンパク質の７５％〜９０％が、二重特異性四価結合タンパク質である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
産生した結合タンパク質の９０％〜９５％が、二重特異性四価結合タンパク質である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
請求項５１に記載の方法に従って産生された、タンパク質。
【請求項５６】
請求項１〜３６及び５５のいずれか１項に記載の結合タンパク質及び医薬的に許容され得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項５７】
更に少なくとも１つの追加治療薬を含む、請求項５６に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
上記追加治療薬が、治療薬、イメージング剤、細胞傷害薬、血管形成インヒビター、キナーゼ阻害剤、共刺激分子ブロッカー、接着分子ブロッカー、抗サイトカイン抗体またはその機能性断片、メトトレキセート、シクロスポリン、ラパマイシン、ＦＫ５０６、検出可能標識または受容体、ＴＮＦアンタゴニスト、抗リウマチ薬、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋ブロッカー、抗微生物剤、抗乾癬薬、コルチコステロイド、タンパク同化ステロイド、エリスロポエチン、免疫化、免疫グロブリン、免疫抑制薬、成長ホルモン、ホルモン補充薬、放射線医薬品、抗うつ薬、抗精神病薬、興奮薬、喘息薬物療法、β−アゴニスト、吸入ステロイド、エピネフリンまたはアナログ、サイトカイン及びサイトカインアンタゴニストからなる群から選択される、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
治療が達成されるように、被験者に対して請求項１〜３６及び５５のいずれか１項に記載の結合タンパク質を投与することによる、疾患または障害のための被験者の治療方法。
【請求項６０】
上記障害が、関節リウマチ、骨関節症、若年性慢性関節炎、敗血症性関節炎、ライム関節炎、乾癬性関節炎、反応性関節炎、脊椎関節症、全身性エリテマトーデス、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、甲状腺炎、喘息、アレルギー性疾患、乾癬、皮膚炎、強皮症、移植片対宿主病、臓器移植拒絶反応、臓器移植に関連する急性または慢性免疫疾患、サルコイドーシス、アテローム性動脈硬化症、播種性血管内凝固、川崎病、グレーヴス病、ネフローゼ症候群、慢性疲労症候群、ウェジナー肉芽腫症、ヘノッホ−シェーンライン紫斑病、腎臓の顕微鏡的血管炎、慢性活動型肝炎、ブドウ膜炎、敗血症性ショック、毒素性ショック症候群、敗血症症候群、悪液質、感染性疾患、寄生虫疾患、後天性免疫不全症候群、急性横断性脊髄炎、ハンチントン舞踏病、パーキンソン病、アルツハイマー病、卒中、原発性胆汁性肝硬変、溶血性貧血、悪性腫瘍、心不全、心筋梗塞、アジソン病、散在性、Ｉ型多腺性自己免疫症及びＩＩ型多腺性自己免疫症、シュミット症候群、成人（急性）呼吸窮迫症候群、脱毛症、円形脱毛症、血清反応陰性関節症、関節症、ライター病、乾癬性関節症、潰瘍性腸炎性関節症、腸炎性滑膜炎、クラミジア、エルシニア及びサルモネラ関連関節症、脊椎関節症、アテローム性疾患／動脈硬化症、アトピー性アレルギー、自己免疫性水疱性疾患、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、類天疱瘡、線状ＩｇＡ病、自己免疫性溶血性貧血、クームズ試験陽性溶血性貧血、後天性悪性貧血、若年性悪性貧血、筋痛性脳炎／ローヤルフリー病、慢性皮膚粘膜カンジダ症、巨細胞動脈炎、原発性硬化性肝炎、特発性自己免疫性肝炎、後天性免疫不全症症候群、後天性免疫不全症関連疾患、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、分類不能型免疫不全症（分類不能型低ガンマグロブリン血症）、拡張型心筋症、女性不妊症、卵巣機能不全、早発性卵巣機能不全、線維性肺疾患、特発性線維性肺胞炎、炎症後間質性肺疾患、間質性肺炎、結合組織病関連間質性肺疾患、混合結合組織病関連肺疾患、全身性硬化症関連間質性肺疾患、関節リウマチ関連間質性肺疾患、全身性エリテマトーデス関連肺疾患、皮膚筋炎／多発性筋炎関連肺疾患、シェーグレン病関連肺疾患、強直性脊椎炎関連肺疾患、血管炎性びまん性肺疾患、ヘモジデリン沈着症関連肺疾患、薬物誘発性間質性肺疾患、線維症、放射線線維症、閉塞性細気管支炎、慢性好酸球性肺炎、リンパ球性浸潤性肺疾患、感染後間質性肺疾患、痛風性関節炎、自己免疫性肝炎、１型自己免疫性肝炎（古典的自己免疫性またはルポイド肝炎）、２型自己免疫性肝炎（抗ＬＫＭ抗体肝炎）、自己免疫媒介低血糖症、黒色表皮腫を伴うＢ型インスリン抵抗性、副甲状腺機能低下症、臓器移植に関連する急性免疫疾患、臓器移植に関連する慢性免疫疾患、変形性関節症、原発性硬化性胆管炎、１型乾癬、２型乾癬、特発性白血球減少症、自己免疫性好中球減少症、腎疾患ＮＯＳ、糸球体腎炎、腎臓の顕微鏡的血管炎、ライム病、円板状エリテマトーデス、特発性またはＮＯＳ男性不妊症、精子自己免疫、多発性硬化症（すべてのサブタイプ）、交感性眼炎、結合組織病に続発する肺性高血圧、グッドパスチャー症候群、結節性多発性動脈炎の肺症状、急性リウマチ熱、リウマチ様脊椎炎、スチル病、全身性硬化症、シェーグレン症候群、高安病／動脈炎、自己免疫性血小板減少症、特発性血小板減少症、自己免疫性甲状腺疾患、甲状腺機能亢進症、甲状腺腫様自己免疫性甲状腺機能低下症（橋本病）、萎縮性自己免疫性甲状腺機能低下症、原発性粘液水腫、水晶体原性ブドウ膜炎、原発性血管炎、白斑性急性肝疾患、慢性肝疾患、アルコール性肝硬変、アルコール誘発性肝損傷、胆汁鬱滞、特異体質性肝疾患、薬物誘発性肝炎、非アルコール性脂肪肝、アレルギー及び喘息、Ｂ群連鎖球菌（ＧＢＳ）感染、精神障害（例えば、うつ病及び統合失調症）、Ｔｈ２型及びＴｈ１型媒介疾患、急性及び慢性疼痛（いろいろな形の疼痛）、並びに癌（例えば、肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、大腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌及び腎臓癌）及び造血性悪性腫瘍（白血病及びリンパ腫）、無βリポタンパク血症、先端チアノーゼ、急性及び慢性寄生虫または感染性プロセス、急性白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性または慢性細菌感染、急性膵炎、急性腎不全、腺癌、航空機異所性拍動、エイズ認知症複合、アルコール誘発性肝炎、アレルギー性結膜炎、アレルギー性接触皮膚炎、アレルギー性鼻炎、同種移植片拒絶反応、α−１−アンチトリプシン欠損症、筋萎縮側索硬化症、貧血、狭心症、前角細胞変性、抗ｃｄ３治療、抗リン脂質症候群、抗受容体過敏反応、大動脈瘤及び末梢動脈瘤、大動脈解離、動脈性高血圧、動脈硬化症、動静脈フィステル、運動失調症、心房細動（持続性または発作性）、心房粗動、房室ブロック、Ｂ細胞リンパ腫、移植骨片拒絶反応、骨髄移植（ＢＭＴ）拒絶反応、脚ブロック、バーキットリンパ腫、火傷、心臓不整脈、心臓失神症候群、心臓腫瘍、心筋症、心肺バイパス炎症応答、軟骨移植拒絶反応、小脳皮質変性、小脳障害、無秩序または多源性心房頻拍、化学療法関連障害、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性アルコール中毒、慢性炎症性病理、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、慢性サリチル酸中毒、大腸癌、鬱血性心不全、結膜炎、接触皮膚炎、肺性心、冠動脈疾患、クロイツフェルト−ヤコブ病、培養陰性敗血症、膿疱性線維症、サイトカイン治療関連障害、拳闘家認知症、脱髄疾患、デング出血熱、皮膚炎、皮膚症状、糖尿病、真性糖尿病、糖尿病性アテローム性疾患、びまん性レヴイ小体病、拡張性鬱血性心筋症、脳幹神経節の障害、中年のダウン症候群、ＣＮＳドーパミン受容体をブロックする薬物による薬物誘発性運動障害、薬物過敏、湿疹、脳脊髄炎、心内膜炎、内分泌病、喉頭蓋炎、エプスタイン−バーウイルス感染、先端紅痛症、錐体外路性脳障害、家族性血球貪食リンパ組織球症、胎児性胸腺移植拒絶反応、フリードライヒ運動失調症、機能性末梢動脈障害、真菌性敗血症、ガス壊疽、胃潰瘍、糸球体腎炎、臓器または組織の移植片拒絶反応、グラム陰性敗血症、グラム陽性敗血症、細胞内生物による肉芽腫、毛様細胞白血病、ハラーホルデン−スパッツ病、橋本甲状腺炎、枯草熱、心臓移植拒絶反応、血色素症、血液透析、溶血性尿毒症症候群／血栓溶解性血小板減少性紫斑病、出血、肝炎（Ａ）、ヒス束不整脈、ＨＩＶ感染／ＨＩＶ神経障害、ホジキン病、運動過多性運動障害、過敏反応、過敏性肺炎、高血圧、運動減少性運動障害、視床下部−下垂体−副腎軸評価、特発性アジソン病、特発性肺線維症、抗体媒介細胞毒性、無力症、乳児脊髄性筋萎縮症、大動脈の炎症、インフルエンザＡ、電離放射線暴露、虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／視神経炎、虚血−再潅流傷害、虚血性発作、若年性関節リウマチ、若年性脊髄性筋萎縮症、カポジ肉腫、腎移植拒絶反応、レジオネラ、リーシュマニア症、ライ病、皮質脊髄系の病巣、脂肪浮腫、肝移植拒絶反応、リンパ水腫、マラリア、悪性リンパ腫、悪性組織球症、悪性メラノーマ、髄膜炎、骨髄炎菌血症、代謝性／特発性、片頭痛、ミトコンドリア多系統障害、混合結合組織病、単クローン性免疫グロブリン血症、多発性骨髄腫、多系統変性（メンセル・ドゥジュリーヌ−トーマス・シードレーガー及びマシャド−ジョセフ）、重症筋無力症、マイコバクテリウム・アビウム・イントラセルラーレ、結核菌、骨髄異形成症候群、心筋梗塞、心筋虚血障害、鼻咽頭癌、新生児慢性肺疾患、腎炎、ネフローゼ、神経変性疾患、神経原性Ｉ筋萎縮症、好中球減少性発熱、非ホジキンリンパ腫、腹部動脈及びその枝の閉塞、閉塞性動脈障害、ｏｋｔ３治療、睾丸炎／副睾丸炎、睾丸炎／精管復元術、臓器巨大症、骨粗しょう症、膵臓移植拒絶反応、膵臓癌、腫瘍随伴症候群／悪性腫瘍の高カルシウム血症、上皮小体移植拒絶反応、骨盤内炎症性疾患、多年性鼻炎、心膜疾患、末梢アテローム性疾患、末梢血管疾患、腹膜炎、悪性貧血、ニューモシスティス・カリニ肺炎、肺炎、ＰＯＥＭＳ症候群（多発性神経障害、臓器巨大症、内分泌症、単クローン性免疫グロブリン血症、及び皮膚症状症候群）、輸血後症候群、ポストポンプ症候群、ＭＩ後心臓切開術症候群、子癇前症、進行性核上麻痺、原発性肺性高血圧、放射線治療、レイノー現象及び病、レイノー病、レフサム病、狭いＱＲＳの規則正しい頻脈、腎血管性高血圧、再潅流傷害、拘束型心筋症、肉腫、強皮症、老人性舞踏病、レヴイ小体型老人性認知症、血清反応陰性関節症、ショック、鎌状赤血球貧血、皮膚同種片拒絶反応、皮膚症状症候群、小腸移植拒絶反応、充実性腫瘍、特異的不整脈、脊髄性運動失調症、脊髄小脳変性、連鎖球菌性筋炎、小脳の構造的病巣、亜急性硬化性汎脳炎、失神、心血管系の梅毒、全身性アナフィラクシー、全身性炎症応答症候群、全身性若年性関節リウマチ、Ｔ細胞またはＦＡＢ ＡＬＬ、毛細管拡張症、閉塞性血栓血管炎、血小板減少症、毒性、移植片、外傷／出血、ＩＩＩ型過敏症、ＩＶ型過敏症、不安定狭心症、尿毒症、尿路敗血症、じんま疹、心臓弁膜症、静脈瘤、血管炎、静脈病、静脈血栓症、心室細動、ウイルス性及び真菌性感染、ウイルス性脳炎／無菌性髄膜炎、ウイルス関連血球貪食症候群、ウェルニッケ−コルサコフ症候群、ウィルソン病、臓器または組織の異種片移植拒絶反応、急性冠動脈症候群、急性特発性多発性神経炎、急性炎症性脱髄性多発性神経根ニューロパシー、急性虚血、成人スチル病、円形脱毛症、アナフィラキシー、抗リン脂質抗体症候群、再生不良性貧血、動脈硬化症、アトピー性湿疹、アトピー性皮膚炎、自己免疫性皮膚炎、ストレプトコッカス感染に関連する自己免疫性障害、自己免疫性腸疾患、自己免疫性難聴、自己免疫性リンパ組織増殖性症候群（ＡＬＰＳ）、自己免疫性心筋炎、自己免疫性早発性卵巣機能不全、眼瞼炎、気管支拡張症、水疱性類天疱瘡、心血管疾患、難治性抗リン脂質症候群、セリアック病、頸椎症、慢性虚血、瘢痕性類天疱瘡、多発性硬化症のリスクのある最初のエピソードからなる症候群（ｃｉｓ）、結膜炎、小児期発症精神病、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、涙嚢炎、皮膚筋炎、糖尿病性網膜症、真性糖尿病、椎間板ヘルニア、椎間板脱出、薬物誘引性免疫溶血性貧血、心内膜炎、子宮内膜炎、内眼球炎、上強膜炎、多形滲出性紅斑、重症多形紅斑、妊娠性類天疱瘡、ギランバレー症候群（ＧＢＳ）、枯草熱、ヒューズ症候群、特発性パーキンソン病、特発性間質性肺炎、ＩｇＥ媒介アレルギー、免疫溶血性貧血、封入体筋炎、感染性眼炎症性疾患、炎症性脱髄疾患、炎症性心疾患、炎症性腎疾患、ＩＰＦ／ＵＩＰ、虹彩炎、角膜炎、乾性角結膜炎、クスウマル病またはクスウマル−マイエル病、ランドリー麻痺、ランゲルハンス細胞組織球症、網状皮斑、黄斑変性、顕微鏡的多発性血管炎、ベヒテレフ病、運動ニューロン障害、粘膜類天疱瘡、多臓器不全、重症筋無力症、骨髄異形成症候群、心筋炎、神経根障害、神経障害、非Ａ非Ｂ肝炎、視神経炎、骨溶解、卵巣癌、少関節ＪＲＡ、末梢動脈閉塞性疾患（ＰＡＯＤ）、末梢血管疾患（ＰＶＤ）、末梢動脈疾患（ＰＡＤ）、静脈炎、結節性多発性動脈炎（または、結節性動脈周囲炎）、多発性軟骨炎、リウマチ性多発性筋痛、白髪、多関節性ＪＲＡ、多内分泌欠乏症候群、多発性筋炎、リウマチ性多発性筋痛（ＰＭＲ）、ポスト−ポンプ症候群、原発性パーキンソン症候群、前立腺及び腎臓癌、及び造血性悪性腫瘍（白血病及びリンパ腫）、乾癬、真性赤血球系無形成症、原発性副腎機能不全、再発性視神経脊髄炎、再狭窄症、リウマチ性心疾患、ｓａｐｈｏ（滑膜炎、ニキビ、膿庖症、骨増殖症及び骨炎）、強皮症、続発性アミロイドーシス、ショック肺、強膜炎、坐骨神経痛、続発性副腎機能不全、シリコーン関連結合組織病、スネドン−ウィルキンソン皮膚病、強直性脊椎炎、スチーブンス−ジョンソン症候群（ＳＪＳ）、全身性炎症性応答症候群、側頭動脈炎、トキソプラズマ網膜炎、中毒性表皮融解、横断性脊髄炎、ＴＲＡＰＳ（腫瘍壊死因子受容体）、１型アレルギー反応、ＩＩ型糖尿病、じんま疹、通常型間質性肺炎（ＵＩＰ）、血管炎、春季カタル、ウイルス性網膜炎、フォークト−小柳−原田症候群（ＶＫＨ症候
群）、滲出型黄斑変性、損傷治癒、エルシニア及びサルモネラ関連関節症からなる群から選択される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
被験者への投与が、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹腔内、包内、軟骨内、膣内、脳質内、小脳内、脳・小脳内、結腸内、子宮頸管内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺内、直腸内、腎内、網膜内、髄腔内、髄液嚢内、胸内、子宮内、膀胱内、ボーラス、膣、直腸、頬側、舌下、鼻腔内及び経皮的から選択される、少なくとも１つのモードによる、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
第１及び第２抗原に結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンを作成するように、
ａ）第１抗原に結合し得る第１親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｂ）第２抗原に結合し得る第２親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｃ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１でなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第１及び第３ポリペプチド鎖を構築するステップ；
ｄ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１でなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第２及び第４ポリペプチド鎖を構築するステップ；及び
ｅ）第１、第２、第３及び第４ポリペプチド鎖を発現させるステップ；
を含む２つの抗原を結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンの作成方法であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原を結合し得る、前記方法。
【請求項６３】
ＶＤ１及びＶＤ２重鎖可変ドメインが、配列番号２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４及び１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、ＶＤ１及びＶＤ２軽鎖可変ドメインが、配列番号２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３、４５、４７、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９１、９３、９５、９７、９９、１０１、１０３、１０５及び１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、ヒト抗体、ＣＤＲグラフト化抗体及びヒト化抗体からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６５】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分及び上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結されている２つのＦａｂ断片からなる二価断片、ＶＨ及びＣＨ１ドメインから構成されるＦｄ断片、抗体のシングルアームのＶＬ及びＶＨドメインから構成されるＦｖ断片、ｄＡｂ断片、単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）、一本鎖抗体及びダイアボディからなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６６】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される、少なくとも１つの所望特性を有する、請求項６２に記載の方法。
【請求項６７】
上記第２親抗体またはその抗原結合部分が、二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される、少なくとも１つの所望特性を有する、請求項６２に記載の方法。
【請求項６８】
Ｆｃ領域が、未変性配列Ｆｃ領域及び変異配列Ｆｃ領域からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６９】
Ｆｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ及びＩｇＤ由来のＦｃ領域からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項７０】
上記所望特性が、１つ以上の抗体パラメーターから選択される、請求項６６に記載の方法。
【請求項７１】
上記所望特性が、１つ以上の抗体パラメーターから選択される、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
上記抗体パラメーターが、抗原特異性、抗原に対する親和性、力価、生物学的機能、エピトープ認識、安定性、可溶性、産生効率、免疫原性、薬物動態、バイオアベイラビリティ、組織交差反応性及びオルソロガス抗原結合からなる群から選択される、請求項７０に記載の方法。
【請求項７３】
上記抗体パラメーターが、抗原特異性、抗原に対する親和性、力価、生物学的機能、エピトープ認識、安定性、可溶性、産生効率、免疫原性、薬物動態、バイオアベイラビリティ、組織交差反応性及びオルソロガス抗原結合からなる群から選択される、請求項７１に記載の方法。
【請求項７４】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が上記第２抗原に結合する親和性とは異なる親和性で上記第１抗原に結合する、請求項６２に記載の方法。
【請求項７５】
上記第１親抗体またはその抗原結合部分が、上記第２親抗体またはその抗原結合部分が上記第２抗原に結合する力価とは異なる力価で上記第１抗原に結合する、請求項６２に記載の方法。
【請求項７６】
所望特性を有する第１及び第２抗原に結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンが作成されるように、
ａ）第１抗原に結合し得且つ二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される少なくとも１つの所望特性を有する第１親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｂ）第２抗原に結合し得且つ二重可変ドメイン免疫グロブリンにより示される少なくとも１つの所望特性を有する第２親抗体またはその抗原結合部分を得るステップ；
ｃ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１重鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２重鎖可変ドメインであり；
Ｃは重鎖定常ドメインであり；
Ｘ１はリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域であり；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第１及び第３ポリペプチド鎖を構築するステップ；
ｄ）（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎ
（ここで、
ＶＤ１は第１親抗体またはその抗原結合部分から得られる第１軽鎖可変ドメインであり；
ＶＤ２は第２親抗体またはその抗原結合部分から得られる第２軽鎖可変ドメインであり；
Ｃは軽鎖定常ドメインであり；
ＸＩはリンカーであり、ただしＣＨ１ではなく；
Ｘ２はＦｃ領域を含まず；
（Ｘ１）ｎは（Ｘ１）０または（Ｘ１）１であり；
（Ｘ２）ｎは（Ｘ２）０または（Ｘ２）１である）
からなる第２及び第４ポリペプチド鎖を構築するステップ；
ｅ）第１、第２、第３及び第４ポリペプチド鎖を発現させるステップ；
を含む所望特性を有する２つの抗原に結合し得る二重可変ドメイン免疫グロブリンの作成方法であって、前記結合タンパク質が、ＣＤ−２０とＣＤ−１９、ＣＤ−２０とＣＤ−８０、ＣＤ−２０とＣＤ−２２、ＣＤ−２０とＣＤ−４０、ＣＤ−３とＨＥＲ−２、ＣＤ−３とＣＤ−１９、ＥＧＦＲとＨＥＲ−２、ＥＧＦＲとＣＤ−３、ＥＧＦＲとＩＧＦ１，２、ＥＧＦＲとＩＧＦ１Ｒ、ＥＧＦＲとＲＯＮ、ＥＧＦＲとＨＧＦ、ＥＧＦＲとｃ−ＭＥＴ、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１，２、ＨＥＲ−２とＩＧＦ１Ｒ、ＲＯＮとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＥＧＦＲ、ＶＥＧＦとＨＥＲ−２、ＶＥＧＦとＣＤ−２０、ＶＥＧＦとＩＧＦ１，２、ＶＥＧＦとＤＬＬ４、ＶＥＧＦとＨＧＦ、ＶＥＧＦとＲＯＮ、ＶＥＧＦとＮＲＰ１、ＣＤ−２０とＣＤ３、ＤＬＬ−４とＰＬＧＦ、ＶＥＧＦとＰＬＧＦ、ＥｒｂＢ３とＥＧＦＲ、ＥｒｂＢ３とＨＧＦ、ＨＥＲ−２とＥｒｂＢ３、ｃ−ＭｅｔとＥｒＢ３、ＰＬＧＦとＨＥＲ−２、及びＨＥＲ−２とＨＥＲ−２からなる群から選択される、１対の抗原に結合し得る、前記方法。
【請求項７７】
（ａ）改変前の結合タンパク質の特性を測定するステップ；
（ａ）重鎖及び／または軽鎖の（Ｘ１）１の長さ及び／または配列を改変させて、改変重鎖及び／または軽鎖を得るステップ；
（ｂ）改変重鎖及び軽鎖を含む改変結合タンパク質の改良された特性を測定するステップ；
を含む、請求項６に記載の結合タンパク質の特性の改良方法。
【請求項７８】
（ａ）改変前の結合タンパク質の特性を測定するステップ；
（ｂ）ＶＤ１−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ２−Ｃ−（Ｘ２）ｎがＶＤ２−（Ｘ１）ｎ−ＶＤ１−Ｃ−（Ｘ２）ｎに変化するように第１及び第２ポリペプチド鎖を改変させて、改変重鎖及び軽鎖を得るステップ；
（ｃ）改変重鎖及び軽鎖を含む改変結合タンパク質の改良された特性を測定するステップ；
を含む、請求項６に記載の結合タンパク質の特性の改良方法。
【請求項７９】
（ａ）改変前の結合タンパク質の特性を測定するステップ；
（ｂ）重鎖及び／または軽鎖のＶＤ１またはＶＤ２の１つのみの配列が変化するように第１及び／または第２ポリペプチド鎖を改変させるステップ；及び
（ｃ）改変重鎖及び軽鎖を含む改変結合タンパク質の特性を測定するステップ；
を含む、請求項６に記載の結合タンパク質の特性の改良方法。
【請求項８０】
特性が、標的抗原に対する結合、宿主細胞からの発現収率、インビトロ半減期、インビボ半減期、安定性、可溶性及び改良されたエフェクター機能からなる群から選択される、請求項７７〜７８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８１】
改変重鎖の（Ｘ１）１の長さを長くする、請求項７７に記載の方法。
【請求項８２】
改変重鎖の（Ｘ１）１の長さを短くする、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８３】
改変軽鎖の（Ｘ１）１の長さを長くする、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８４】
改変軽鎖の（Ｘ１）１の長さを短くする、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８５】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２１または２２からなる群から選択されるアミノ酸からなる、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８６】
改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１３または１４からなる群から選択されるアミノ酸からなる、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８７】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２２であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１４である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８８】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２１であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１４である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項８９】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２２であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１３である、請求項７７または８０に記載の方法。
【請求項９０】
改変重鎖の（Ｘ１）１が、配列番号２１であり、改変軽鎖の（Ｘ１）１が、配列番号１３である、請求項７７または８０に記載の方法。
【図１】
【公表番号】特表２０１３−５０７９６９（Ｐ２０１３−５０７９６９Ａ）
【公表日】平成２５年３月７日（２０１３．３．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５３５４１０（Ｐ２０１２−５３５４１０）
【出願日】平成２２年１０月２２日（２０１０．１０．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５３７３０
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０５０２６２
【国際公開日】平成２３年４月２８日（２０１１．４．２８）
【出願人】（３９１００８７８８）アボット・ラボラトリーズ (650)
【氏名又は名称原語表記】ＡＢＢＯＴＴ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年３月７日（２０１３．３．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１０月２２日（２０１０．１０．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５３７３０
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０５０２６２
【国際公開日】平成２３年４月２８日（２０１１．４．２８）
【出願人】（３９１００８７８８）アボット・ラボラトリーズ (650)
【氏名又は名称原語表記】ＡＢＢＯＴＴ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ
【Ｆターム（参考）】
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