ケモカイン受容体のピリジニルスルホンアミドモジュレーター
本発明は、下記式：
で示される化合物またはその医薬上許容される塩；これを含む医薬組成物およびＣＣＲ−２受容体により介在される障害の治療におけるその使用に関する。
で示される化合物またはその医薬上許容される塩；これを含む医薬組成物およびＣＣＲ−２受容体により介在される障害の治療におけるその使用に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケモカイン受容体のモジュレーター、具体的にはＣＣＲ２アンタゴニストである一群のピリジニルスルホンアミドおよびその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣＣＲ２は、単球およびいくつかの他の白血球の細胞表面で発現されるケモカイン受容体である。ＣＣＲ２は、炎症および感染部位で酸性される、単球走化性蛋白質ＭＣＰ−１および他のＣＣケモカインに結合する。ＭＣＰ−１／ＣＣＲ２相互作用による炎症部位への単球の動員は、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症、多発性硬化症、閉塞性細気管支炎、喘息、アレルギー性鼻炎、湿疹、アトピー性皮膚炎、腎臓病、肺胞炎、腎炎、肝臓肝硬変、鬱血性心不全、ウイルス性髄膜炎、脳梗塞、ニューロパシー、川崎病、アルツハイマー病、卒中、急性神経損傷、ＨＩＶ感染、ＡＩＤＳ、自己免疫疾患、癌、敗血症、網膜炎、炎症性腸疾患、移植片動脈硬化症、特発性肺線維症、乾癬、ＨＩＶ−関連認知症、狼瘡、エリテマトーデス、肝炎、膵臓炎、クローン病、子宮内膜症および糖尿病を含む複合炎症障害を含む多くの疾患の病理の促進に関与する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
したがって、ＣＣＲ２に結合する化合物群の発見は当該分野において有益であり、これにより、炎症性部位への単球の望ましくないＭＣＰ１−介在動員の形成を防止または最小化することができる。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
第１の態様において、本発明は、下記式：
【化１】
［式中：
Ｘは−Ｏ、−ＮＨまたは−Ｓであり；
Ｒ１は、ヘテロアリール基またはアリール基であり、これらは各々、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＣＮ、Ｃ１−４アルキルチオ−、−ＯＣＦ３、ジメチルアミノ、ニトロおよび−ＣＦ３からなる群から独立して選択される３個までの置換基により置換されており；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、−ＣＦ３または−ＯＣＦ３であり；
Ｒ３は、Ｒ４−フェニル−、Ｒ５−ピリジル−、メチルテトラゾリル、モルホリノ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、（ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、メチルイソキサゾリル；ピリダジニルまたはトリアゾリルであり；
ここに、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシメチル、テトラゾリル、ＣＯＯＨまたは−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり；
Ｒ５は、２−メチル、２−ハロ、２−シアノ、２−ＣＯＯＨ、ジメチルアミノメチル、メチルモルホリノメチルであり；
ここに、ＲａおよびＲｂは、各々Ｈであるか、あるいはそれらが結合しているＣと一緒になって、カルボニル基を結合し；
Ｒｃは、Ｈ、−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６；Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル；Ｃ１−Ｃ６−アルキル；フェニル−ＣＨ（ＣＨ３）−；オキソイソキサゾリジニル；ジメチルチアゾリル；ジヒドロチアゾリル；イミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−；またはイミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−であり；
Ｒｄは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、ベンジルであるか、あるいはＲｃおよびＲｄは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、トリアゾロピペリジニルまたはピロリジノニル基を形成し；
ｙは１、２または３であり；
Ｒ６は、−ＮＲ７Ｒ８、ＯＨ、メトキシ、フェニル、イミダゾリル、インドリル、テトラヒドロピラニル、ベンズイミダゾリルまたはＣ３−Ｃ６−シクロアルキルであり；
Ｒ７はＨまたはメチルであり；Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルまたはフェニルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、イミダゾリル、またはピロリジノニル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。
【０００５】
第２の態様において、本発明は、ａ）請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩；およびｂ）医薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
第３の態様において、本発明は、ＣＣＲ２により介在される疾患または症状の治療方法であって、医薬的に有効な量の本発明の化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
第１の態様において、本発明は、下記式：
【化２】
［式中：
Ｘは−Ｏ、−ＮＨまたは−Ｓであり；
Ｒ１は、ヘテロアリール基またはアリール基であり、これらは各々、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＣＮ、Ｃ１−４アルキルチオ−、−ＯＣＦ３、ジメチルアミノ、ニトロおよび−ＣＦ３からなる群から独立して選択される３個までの置換基により置換されており；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、−ＣＦ３または−ＯＣＦ３であり；
Ｒ３は、Ｒ４−フェニル−、Ｒ５−ピリジル−、メチルテトラゾリル、モルホリノ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、（ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、メチルイソキサゾリル；ピリダジニルまたはトリアゾリルであり；
ここに、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシメチル、テトラゾリル、ＣＯＯＨまたは−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり；
Ｒ５は、２−メチル、２−ハロ、２−シアノ、２−ＣＯＯＨ、ジメチルアミノメチル、メチルモルホリノメチルであり；
ここに、ＲａおよびＲｂは、各々Ｈであるか、あるいはそれらが結合しているＣと一緒になって、カルボニル基を結合し；
Ｒｃは、Ｈ、−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６；Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル；Ｃ１−Ｃ６−アルキル；フェニル−ＣＨ（ＣＨ３）−；オキソイソキサゾリジニル；ジメチルチアゾリル；ジヒドロチアゾリル；イミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−；またはイミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−であり；
Ｒｄは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、ベンジルであるか、あるいはＲｃおよびＲｄは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、トリアゾロピペリジニルまたはピロリジノニル基を形成し；
ｙは１、２または３であり；
Ｒ６は、−ＮＲ７Ｒ８、ＯＨ、メトキシ、フェニル、イミダゾリル、インドリル、テトラヒドロピラニル、ベンズイミダゾリルまたはＣ３−Ｃ６−シクロアルキルであり；
Ｒ７はＨまたはメチルであり；Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルまたはフェニルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、イミダゾリル、またはピロリジノニル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩に関する。
【０００７】
本明細書で用いられる場合、「アルキル」なる用語は、所定の数の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖を意味する。本明細書で用いられる場合、「アルキル」なる用語は、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソブチル、イソプロピル、ｔ−ブチル、および１，１−ジメチルプロピルが挙げられる。
【０００８】
「アルコキシ」の例としては、限定するものではないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、プロプ−２−オキシ、ｎ−ブトキシ、ブト−２−オキシ、２−メチルプロプ−１−オキシ、２−メチルプロプ−２−オキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキシルオキシが挙げられる。
【０００９】
Ｃ１−４アルキルチオの例としては、限定するものではないが、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、プロプ−２−チオ、ｎ−ブチルチオ、ブト−２−チオ、２−メチルプロプ−１−チオ、２−メチルプロプ−２−チオが挙げられる。
【００１０】
Ｃ３−６シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシル基が挙げられる。
【００１１】
本明細書で用いられる場合、「ヘテロシクロアルキル」なる用語は、１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有する５〜６員の非芳香環基を意味する。ヘテロシクロアルキル基のとしては、２Ｈ−ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、２Ｈ−ピリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロピリダジニル、ピペリジニル、およびピペラジニルが挙げられる。
【００１２】
「ハロゲン」または「ハロ」なる用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨウドを意味する。
【００１３】
「本発明の化合物」なる用語は、本明細書で用いられる場合、１種またはそれ以上の本発明を含む。本発明は、化合物、ならびにそれらの医薬上許容される塩を含む。したがって、化合物またはその医薬上許容される塩なる文脈における「または」なる語は、化合物またはその医薬上許容される塩もしくはそれらの組み合わせを含むものと解される。
【００１４】
本明細書で用いられる場合、「医薬上許容される」なる語は、正常な医学的判断の範囲内において、過度の毒性、刺激または他の問題または合併症を伴うことなくヒトおよび動物の組織と接触して用いるのに適し、合理的な利益／リスク比に見合った、化合物、物質、組成物および剤形を意味する。当業者には、式（Ｉ）で示される化合物の医薬上許容される塩を調製することができることは明らかだろう。これらの医薬上許容される塩は、最終的な単離および化合物の精製の間に系内で調製するか、あるいは、別個に、純粋な化合物をその遊離酸または遊離塩基の形態で、それぞれ、適当な塩基または酸と反応させることにより調製することができる。
【００１５】
本発明の化合物は、以下の反応スキームに従って調製することができる。
式（Ｉ）で示される化合物は、式（ＩＩ）：
【化３】
［式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは上記と同意義である］
示される化合物またはその適当に保護された誘導体と、式（ＩＩＩ）：
Ｌ−ＳＯ２−Ｒ１ （ＩＩＩ）
［式中、Ｌは適当な脱離基であり、Ｒ１は上記と同意義である］
で示される化合物とを反応させること、
および、その後、任意に、
（ｉ）保護基（複数でも可）を除去すること；および／または
（ｉｉ）塩を形成すること；および／または
（ｉｉｉ）式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を、他の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩に変換すること
により調製することができる。
【００１６】
適当な脱離基Ｌの例としては、クロロ、ブロモ、およびペンタフルオロフェノキシが挙げられる。
典型的には、Ｌがクロロである場合、かかる反応は、適当な溶媒、例えばピリジン（所望により、第２の溶媒、例えばクロロホルムまたはテトラヒドロフランと混合していてもよい）中に、式（ＩＩ）で示される化合物を溶解し、これを、適当な溶媒、例えばピリジン中の式（ＩＩＩ）で示される化合物と反応させることにより行うことができる。また、さらに触媒量のジメチルアミノピリジンを用いてもよい。反応は、一般的には、８０〜２５０℃の高い温度範囲、例えば２００℃で、３０分〜１時間、あるいは８０℃で５〜２４時間で行われる。
【００１７】
式（ＩＩ）で示される化合物は、下記スキームに詳述する化学反応に従って、例えば、関連するＲ３基を有するアルコール、アミンまたはチオールを、適当な塩基、例えば適当な脱離基Ｌ、例えば塩素を有する式（ＩＶ）で示される化合物、炭酸カリウム、およびニトロ−ピリジンで、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）のような溶媒中、適当な時間、例えば１〜２４時間、２０〜１００℃の適当な温度で処理することにより調製することができる。ついで、この反応のニトロ−ピリジン生成物（ＩＩＩ）を、標準的な文献公知の方法：例えば、プラチナまたはパラジウムのような金属触媒の存在下での水素化を用いて還元することができる。別法として、適当な試薬、例えばギ酸アンモニウムでの移動水素化を、プラチナまたはパラジウムの存在下、適当な溶媒、例えばジクロロメタン、酢酸エチル、エタノールまたはそれらの混合溶媒系中で行って、式（ＩＩａ）で示される化合物を得ることができる。
【００１８】
【化４】
【００１９】
式（ＩＶ）で示されるニトロ−ピリジン化合物は、当業者により、文献公知の方法を用いて容易に調製することができる。Ｒ２がＣＮである式（ＩＶ）で示される化合物の調製法の例を、下記スキーム５に示す。
さらに具体的には、ＸがＯであり、Ｒ３が、例えばカルボン酸置換基を有する６員芳香族またはヘテロ芳香環である、式（Ｉ）で示される化合物は、下記スキーム２に示すように、対応するメチルまたはエチルエステルの加水分解により調製することができる。
【００２０】
【化５】
［式中、ＡはＣＨ２またはＯ、ＮまたはＳのようなヘテロ原子である］
【００２１】
適当な加水分解条件は、例えばメタノールのような適当な溶媒中の水酸化リチウムである。この反応は、完了するまで５０〜９０℃で、例えば１５分〜２４時間行ってもよい。
ＸがＯであり、Ｒ３がアミド置換基を有するフェニルである式（Ｉ）で示される化合物を、下記スキーム３に記載の化学反応に従って調製することができる。
【００２２】
【化６】
【００２３】
工程１、適当なエステルの塩基、例えば水素化ナトリウムカリウムでの環化は、適当な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中、例えば０℃で行うことができる。中間体ラクタムは単離してもよく、あるいは工程２に示すようにすぐにスルホニル化剤で処理してもよい。ついで、得られたスルホニル化ラクタムを、関連するアミンで処理して、工程３に記載のように開環して、アミドを得ることができる。
別法として、一般式（Ｉｂ）で示される化合物は、対応する酸から、関連するアミンで、アミドカップリング剤、例えばＴＢＴＵの存在下、下記スキーム４に示すような標準的な文献公知の方法に従って処理することにより調製することができる。
【００２４】
【化７】
【００２５】
２−クロロ−３−ニトロピリジン（化合物ＩＶａ）は、下記スキーム５に示すように２−ヒドロキシピリジンの塩素化／脱水により調製することができる。式（ＶＩＩ）で示される化合物を脱水して、対応するクロロ／シアノ置換化合物を得ることができる。
【００２６】
【化８】
【００２７】
スキーム２に示されるＲ１がアリールである中間体（Ｖ）は、例えば下記スキーム６に記載の方法により調製することができる：
【化９】
［式中、ＡはＣＨ２またはＯ、ＮまたはＳのようなヘテロ原子であり、Ｒは式（Ｉ）で示される化合物の定義内にある適当な置換基である］
【００２８】
反応は、高温、例えば５０〜１００℃、例えば９５℃で約１時間ピリジンのような溶媒中で行うことができる。
スキーム３に示される中間体（ＶＩ）は、下記スキーム７に記載のように調製することができる：
【化１０】
【００２９】
炭酸カリウムでの処理は、適当な溶媒、例えばＤＭＦ中、高温、例えば８０〜１２０℃の範囲、例えば１００℃で、８時間まで、例えば４時間で行うことができる。
炭素担持パラジウムの存在下での水素化は、適当な溶媒、例えば酢酸エチル中、室温にて、４時間まで、例えば２時間で行うことができる。
スキーム７のアミンとスルホニルクロライド基の間のカップリング工程は、例えば出発物質を、メタノールおよび水のような溶媒中、水酸化リチウムの存在下で、適当な期間、例えば１時間還流することにより行うことができる。
【００３０】
当業者には、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物の調製において、望ましくない副反応を防止するために、分子内の１種またはそれ以上の感受性基を保護する必要がある、および／またはそれが望ましいことがあることは明らかだろう。本発明での使用に適当な保護基は、当業者によく知られており、慣用的な方法で用いることができる。例えば、「Protective groups in organic synthesis」、 T.W. Greene and P.G.M. Wuts (John Wiley and sons 1991)または「PProtecting Groups」、P.J. Kocienski (Georg Thieme Verlag 1994）を参照のこと。適当なアミノ保護基の例としては、アシル型保護基（例えば、ホルミル、トリフルオロアセチル、アセチル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および置換Ｃｂｚ）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、イソプロピルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル）およびアルキル型保護基（例えば、ベンジル、トリチル、クロロトリチル）が挙げられる。適当な酸素保護基の例としては、例えばアルキルシリル基、例えばトリメチルシリルまたはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル；アルキルエーテル、例えばテトラヒドロピラニルまたはｔｅｒｔ−ブチル；またはエステル、例えばアセテートが挙げられる。
【００３１】
式（Ｉ）で示される他の化合物は、上記したものと類似の一般的な方法により調製することができる。
上記した式（Ｉ）で示される化合物は塩基性基を含んでいてもよく、また、酸性基を含んでいてもよく、したがって、医薬上許容される酸または塩との塩を形成してもよい。
【００３２】
本発明で示される化合物の医薬上許容される塩の例としては、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸および硫酸と、および有機酸、例えば酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、マリン酸、コハク酸、カンファースルホン酸、イソチオン酸、粘液酸、ゲンチシン酸、イソニコチン酸、糖酸、グルクロン酸、フロ酸、グルタミン酸、アスコルビン酸、アントラニル酸、サリチル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、パントテン酸、ステアリン酸、スルフィン酸、アルギン酸、ガラクツロン酸およびアリールスルホン酸、例えば、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸と形成される酸付加塩；アルカリ金属およびアルカリ土類金属および有機塩基、例えばＮ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルマイン（Ｎ−メチルグルカミン、リシンおよびプロカインと形成される塩基付加塩；および、内部塩が挙げられる。生理学的に許容されないアニオンまたはカチオンを有する塩は、医薬上許容される塩の調製および／または非治療的な使用、例えばインビトロの条件での使用に有用な中間体として本発明の範囲内に含まれる。
【００３３】
本発明のある種の化合物は、１当量またはそれ以上の酸と酸付加塩を形成しうる。本発明のある種の化合物は、１当量未満の酸と酸付加塩を形成しうる。本発明は、すべての可能性ある化学量論的および非化学量論的形態も範囲内に含む。
ある種の式（Ｉ）で示される化合物は、立体異性体が存在する（例えば、これらは、１個またはそれ以上の不斉炭素原子を含有しうる）。個々の立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマー）およびそれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。また、本発明は、１個またはそれ以上のキラル中心が反転した異性体との混合物としての、式（Ｉ）で示される化合物の個々の異性体を包含する。同様に、式（Ｉ）で示される化合物は、式において示されるもの以外の互変異性体として存在することができ、これらもまた、本発明の範囲内に含まれる。
式（Ｉ）で示される化合物の特定のエナンチオマーを必要とする場合、これは、例えば、式（Ｉ）で示される化合物の対応するエナンチオマー混合物を、慣用的な方法で分割することにより得ることができる。かくして、必要とされるエナンチオマーは、式（Ｉ）で示されるラセミ化合物から、キラルＨＰＬＣ法により得ることができる。
【００３４】
さらなる態様において、本発明は、ＣＣＲ２により介在される疾患の治療方法であって、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を該治療を必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
当業者には、本明細書で用いられる治療なる語は、確立した疾患または兆候の治療と同様に予防にまで及ぶことは明らかだろう。
【００３５】
治療的使用に関して、本発明の化合物は、生化合物として投与することも可能であるが、医薬処方における活性成分として存在することが好ましい。
かくして、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を、１種またはそれ以上の医薬上許容される担体または希釈剤と一緒に含む医薬組成物を提供する。担体（複数でも可）、希釈剤（複数でも可）および／または賦形剤（複数でも可）は、処方の他の成分と適当する、および患者に悪影響を及ぼさないという意味で、「許容」されなければならない。
【００３６】
本発明の化合物は、本発明の化合物を、標準的な医薬担体、希釈剤または賦形剤と、当業者に公知の慣用的な方法に従って組み合わせることにより調製される慣用的な剤形で投与することができる。これらの方法は、混合、造粒および圧搾または適宜所望の製剤に成分を溶解することを含む。
【００３７】
本発明の医薬組成物は、いずれもの経路による投与用に処方することができ、ヒトを含む哺乳動物への経口、口腔、局所、吸入または注入、埋め込み、直腸または非経口投与に適した形態を含む。
組成物は、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、ロゼンジ、クリームまたは液体製剤、例えば経口または滅菌非経口溶液または懸濁液の形態であってもよい。
【００３８】
経口投与用の錠剤およびカプセルは、慣用的な賦形剤、例えば結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、デンプン糊またはポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、糖、微結晶セルロース、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、グリシンまたはソルビトール；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えばジャガイモデンプンまたはナトリウムデンプングリコレートまたは湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含有していてもよい。錠剤は、当業者によく知られた方法に従ってコートされていてもよい。経口液体製剤は、例えば、水性または油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であってもよく、あるいは、使用前に水または他の適当なビヒクルで復元する乾燥製品として提供してもよい。かかる液体製剤は、慣用的な添加剤、例えば懸濁化剤、例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは硬化食用油；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノ−オレアートまたはアカシア；非水性ビヒクル（食用油を含む）、例えばアーモンド油、ヤシ油、油性エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；可溶化剤、例えば界面活性剤、例えばポリソルベートまたは他の剤、例えばシクロデキストリン；および保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルまたはアスコルビン酸；および、望ましい場合、慣用的なフレーバーまたは着色剤を含んでいてもよい。また、組成物は、例えば慣用的な坐剤基剤、例えばココアバターまたは他のグリセライドを含む坐剤として処方してもよい。
【００３９】
バッカル投与に関して、組成物は、慣用的な方法で処方される錠剤またはロゼンジの形態でありうる。
本発明の局所処方は、例えば、軟膏、クリームまたはローション、眼軟膏および眼または耳滴剤、含浸包帯およびエアロゾールとして提供することができ、適当な慣用的な添加剤、例えば保存剤、薬剤の浸透を補助する溶媒および軟膏およびクリームにおける皮膚軟化剤を含んでいてもよい。
【００４０】
また、処方は、慣用的な担体、例えばクリームまたは軟膏を、およびローションに関してはエタノールまたはオレイルアルコールを含有していてもよい。かかる担体は、処方の約１％〜約９８％で存在してもよい。より通常には、これらは処方の約８０％まで存在する。
【００４１】
本発明の組成物は、注入または持続注入による非経口投与用に処方することができる。注入用処方は、アンプルでの単位剤形またはさらに保存剤を含む複数回投与用容器の形態で提供されうる。組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルジョンの形態であってもよく、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤のような処方用薬剤を含有してもよい。別法として、活性成分は、使用前に適当なビヒクル、例えば滅菌、発熱物質不含水で復元する粉末形態であってもよい。
【００４２】
非経口投与に関して、液体剤形は、化合物および滅菌ビヒクル、好ましくは水を用いて調製することができる。化合物は、ビヒクルおよび使用する濃度に応じて、ビヒクル中に懸濁しても、溶解してもよい。溶液の調製において、化合物は、注射用水に溶解し、濾過滅菌し、適当なバイアルまたはアンプルに充填し、シールすることができる。
【００４３】
有利には、局所麻酔剤、保存剤および緩衝化剤のような薬剤を、ビヒクル中に溶解することができる。安定性を増強するために、組成物は、バイアルに充填した後冷凍し、減圧下で水を除去することができる。ついで、凍結乾燥粉末をバイアル中にシールし、付属の注射用水のバイアルを、使用前に液体に復元するために提供することができる。非経口懸濁液は、化合物をビヒクルに溶解する代わりに懸濁し、滅菌を濾過により行えないこと以外は実質的に同様の方法で調製される。化合物は、エチレンオキシドに曝露することにより滅菌し、ついで、滅菌ビヒクルに懸濁される。有利には、界面活性剤または湿潤剤を、化合物の均一な分散を促進するために組成物に含ませる。
【００４４】
組成物が投与ユニットを含む場合、個々のユニットは、典型的には１〜１０００ｍｇの活性成分を含有する。
【００４５】
さらになる式（Ｉ）で示される化合物の調製の詳細は、以下の実施例に記載する。
以下の限定するものではない実施例により、本発明を説明する。
略語
ＨＰＬＣ−高速液体クロマトグラフィー
ＤＣＭ−ジクロロメタン
ＤＭＦ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ−ジメチルスルホキシド
ＨＣｌ−塩酸
ＳＰＥ−固相抽出機
ＨＢｔＵ−Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＤＭＡＰ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピペリジン
ＭＤＡＰ−マスディレクテッド自動分取ＨＰＬＣ
【００４６】
質量スペクトルは、Ｗａｔｅｒｓ ＺＱ質量分析器またはＭｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ２質量分析器を用いて得、電子スプレーイオン化法を用いて、ＭＨ＋またはＭ−を観察した。プロトン核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、特記しない限り４００ＭＨｚで記録し、化学シフトは、内部標準として用いるＭｅ４Ｓｉから低磁場へのｐｐｍで記録し、シングレット（ｓ）、ダブレット（ｄ）、ダブレットダブレット（ｄｄ）、トリプレット（ｔ）、ダブレットトリプレット（ｄｔ）、カルテット（ｑ）マルチプレット（ｍ）として記載し、他の場合は全部を記載する。「ｂｒ」なる語は、ブロードなピークを意味する；例えば、ブロードなシグナルは、ｂｒ．ｓ（またはｂｒｓ）と記載してもよい。
【００４７】
中間体１ ５−ニトロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−３−ピリジンカルボキサミド
【化１１】
カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ、１０３ｇ）を、ＤＭＦ（５１０ｍＬ）中の５−ニトロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−３−ピリジンカルボン酸（１０６ｇ）の溶液に室温にて滴下し、混合物を、発泡がなくなるまで６０℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、１０〜３５％のアンモニア（７３０ｍＬ）に注いだ。２０分後、沈殿を濾過し、水（５０ｍＬ）で洗浄し、減圧下７０℃で乾燥して、８３．３ｇの生成物を淡黄色固体として得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．６１（ｄ，１Ｈ），８．５５（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．１７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【００４８】
中間体２ ６−クロロ−５−ニトロ−３−ピリジンカルボニトリル
【化１２】
オキシ塩化リン（１００ｍＬ）中の中間体１（１０ｇ）を３時間加熱し、ついで、さらに３時間激しく還流し、室温に一晩冷却した。混合物を濃縮し、氷（３００ｍＬ）に注ぎ、１５分間撹拌した。得られた固体を濾過し、熱酢酸エチル（２５０ｍＬ）でトリチュレートし、熱濾過し、有機物の濾液を水（３×１５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、標題化合物を５．９４ｇの淡黄色粉末として得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．８８（ｄ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ）。
【００４９】
中間体３ ２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン
【化１３】
５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジンアミン（５．０ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）中に溶解し、氷塩浴で−１０℃に冷却した。水（１０ｍＬ）中の硝酸ナトリウム（４．９７ｇ、７２ｍｍｏｌ）を、この冷溶液に１時間にわたって滴下し、１時間以上０℃で撹拌した。反応混合物を、氷塩浴で−１０℃に冷却し、２Ｎの水酸化ナトリウムでｐＨ９．０に、０℃以下に保ちながら中和した。ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を加え、混合物を濾過した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を３．３６ｇ（６０％収率）の淡褐色固体として得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．６２（ｄ，１Ｈ，２．５Ｈｚ），８．２６（ｄ，１Ｈ，２．２Ｈｚ）。
【００５０】
中間体４ ２−［（５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル
【化１４】
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（２ｇ）および２−ヒドロキシ安息香酸メチル（１．４ｍｌ）の撹拌溶液に、炭酸カリウムを加えた。得られた混合物を、５０℃で２４時間加熱した。粗反応物を冷却し、酢酸エチルおよび水間で分配し（各々７５ｍｌ）、分離し、水層を酢酸エチル（総量２２５ｍｌ）で抽出した。合した有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、３．２４ｇの標題化合物を得た；ＭＨ＋３０９。
【００５１】
中間体５ ５−クロロ−２−［（４−メチル−２−ピリジニル）オキシ］−３−ニトロピリジン
【化１５】
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（３８６ｍｇ）および４−メチル−２（１Ｈ）−ピリジノン（２４１ｍｇ）の溶液に、炭酸カリウム（５５２ｍｇ）を加えた。得られた混合物を、５０℃で１．５時間加熱し、ついで、７０℃で２時間加熱し、ついで、室温に冷却し、７２時間撹拌した。混合物を濃縮して固体を得、これをＤＣＭ／水間で分配し、層を分離し、水層をさらにＤＣＭで抽出した。合したＤＣＭ抽出物を洗浄（水）し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、褐色油を得た。油を、シリカゲルＳＰＥ（シクロヘキサン中の２０〜４０％酢酸エチル）により精製して、１９７ｍｇの標題化合物を得た；ＭＨ＋２６６。
【００５２】
中間体６ ５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ニトロピリジン
【化１６】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（１．９３ｇ）の溶液を調製し、２ｍＬのこの溶液を、２−メチル−３−ヒドロキシピリジン（２２９ｍｇ）に加えた。炭酸カリウム（１．５ｅｑ）を加え、混合物を９０℃で１時間加熱した。ついで、混合物を冷却し、濃縮し、ＤＣＭ中に溶解し、濃縮した（２回）。得られた固体を、クロロホルムおよび水（各々５ｍＬ）間で分配し、分離した。クロロホルム層をブローして、粗生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．４７（ｄｄ，１Ｈ），８．３８（ｄ，１Ｈ），８．２６（ｄ，１Ｈ），７．４３（ｄｄ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，１Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ）
【００５３】
上記中間体５に記載の方法と類似の方法を用いて、以下の中間体を製造した。この反応は、２０〜９０℃で１〜２４時間で進行する。酢酸エチルを、処理の間クロロホルムの代わりに用いてもよい。
【表１】
【００５４】
【表２】
【００５５】
【表３】
【００５６】
中間体２９ ２−［（３−アミノ−５−クロロ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル
【化１７】
ＤＣＭ（１０ｍｌ）中の２−［（５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル（中間体４）（９９７ｍｇ）の撹拌溶液に、ギ酸アンモニウム（３ｇ）および５％炭素担持パラジウム「デグサ（ｄｅｇｕｓｓａ）」（２５２ｍｇ）を加えた。得られた混合物を５０℃で２４時間加熱した。粗混合物を冷却し、セライトにより濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（８７３ｍｇ（９７％収率））を得た；ＭＨ＋２７９／２８１。
【００５７】
中間体３０ ２−［（３−アミノ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル
【化１８】
２−クロロ−３−ニトロピリジン（１０ｇ）、２−ヒドロキシ安息香酸メチル（１１．５ｇ）および炭酸カリウム（１７．４ｇ）を、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中に混合し、１００℃に４時間加熱した。混合物を室温に冷却し、ついで、水（６００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合した有機物を水（１００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。得られた固体をヘキサンでトリチュレートし、濾過した。得られた固体（１ｇ）を、２時間、酢酸エチル（４０ｍＬ）およびエタノール（１０ｍＬ）中、５％炭素担持パラジウム（１００ｍｇ）の存在下で水素化した。セライトで濾過し、０．７６ｇの標題化合物を得た；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．０２（ｄｄ，１Ｈ），７．５８（ｍ，２Ｈ），７．４８（ｄｄ，１Ｈ），７．２９（ｍ，２Ｈ），７．０１（ｄｄ，１Ｈ），６．８２（ｄｄ，１Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）。
【００５８】
中間体３１ ３−［（５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジニル）アミノ］安息香酸
【化１９】
中間体２（５００ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ）、３−アミノ安息香酸（３９１ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．１ｍＬ、７．７７ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中に溶解し、１００℃に１８時間加熱した。反応混合物を３０ｍＬのＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）および水（３０ｍＬ）中に溶解し、ｐＨ３．０未満に、２ＮのＨＣｌで酸性化した。有機層を分離し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を７１０ｍｇ（９３％収率）の黄色泡沫体を得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１３．０３（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ），８．６３（ｄ，１Ｈ，２．５Ｈｚ），８．５９（ｄ，１Ｈ，２．３Ｈｚ），８．１８（ｔ，１Ｈ，１．７Ｈｚ），７．８２（ｄｄ，１Ｈ，１．５，７．２Ｈｚ），７．７３（ｄ，１Ｈ，７．８Ｈｚ），７．５０（ｔ，７．８Ｈｚ）。
【００５９】
上記の中間体３１に記載の方法と類似の方法を用いて、以下の中間体を製造した。中間体３２は、分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ７５×３０ｍｍのカラム、４０ｍＬ／分の流速、Ａ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ、Ｂ：水中０．１％ＴＦＡ、Ａ：１５分で２０〜１００％、２１５ｎｍでＵＶ検出）を用いてさらに精製を必要とした。当業者には明らかなように、類似の中間体は、合成法において、慣用的な修飾法を含んでいてもよい。
【００６０】
【表４】
【００６１】
中間体３３ ５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジンアミン
【化２０】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ニトロピリジン（中間体６）（約２ｍｍｏｌ）の溶液を、５％炭素担持パラジウム（Ｄｅｇｕｓｓａ−型、３１２ｍｇ）、ギ酸アンモニウム（１．５ｇ）に加え、混合物を２４時間加熱還流した。反応混合物をセライトにより濾過し（２×２ｍＬ、ＤＣＭ洗浄）、濾液を濃縮して、３９０ｍｇの生成物を得、約１０％の中間体ヒドロキシルアミン（７．５−７．６ｐｐｍで特徴的なピーク）を含有していた；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）８．４１（ｄｄ，１Ｈ），７．４３（ｍ，２Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ），４．２２（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。反応は、化合物を上記条件に再び付すことにより、完全に完了させることができる。
【００６２】
中間体３３に記載の方法と類似の方法を用いて以下の中間体を製造した。いくつかの場合において、ギ酸アンモニウムよりも、大気圧のＨ２ガスを用いた。
【表５】
【００６３】
【表６】
【００６４】
【表７】
【００６５】
中間体５９ ５−クロロ−２−｛［２−（４−モルホリニルメチル）−３−ピリジニル］オキシ｝−３−ピリジンアミン
【化２１】
ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の２−（４−モルホリニルメチル）−３−ピリジノール（２５１ｍｇ）の溶液を調製し、２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（２３８ｍｇ）に加えた。炭酸カリウム（２５５当量）を加え、混合物を９０℃に２時間加熱した。ついで、混合物を冷却し、濃縮した。得られた固体を、ＤＣＭおよび水（各々５ｍＬ）間で分配し、分離した。ＤＣＭ層を濃縮し、ＤＣＭ（３．３ｍＬ）中に再び溶解し、ついで、５％炭素担持パラジウム（Ｄｅｇｕｓｓａ型、２０３ｍｇ）に加えた。ギ酸アンモニウム（１．０ｇ）を加え、混合物を２４時間加熱還流した。反応混合物をセライトにより濾過し（２×２ｍＬのＤＣＭで洗浄）、濾液を濃縮して、２２４ｍｇの生成物を得た；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）８．４５（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｍ，２Ｈ），７．２６（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｄ，１Ｈ），４．５８（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），３．７６（ｓ，２Ｈ），３．５３（ｍ，４Ｈ），２．４６（ｍ，４Ｈ）。
【００６６】
中間体５９に記載の方法と類似の方法を用いて、以下のアニリン中間体を製造した。
【表８】
【００６７】
中間体６３ ５−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジンカルボン酸メチル
【化２２】
ピリジン（２ｍＬ）中の中間体２２（５ｍｇ）および３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１０９ｕＬ）の混合物を、９５℃で１時間加熱し、冷却し、濃縮した。生成物をメタノール中に溶解し、アミノプロピルＳＰＥカートリッジ（５ｇ）に保持した。カートリッジをメタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、生成物をメタノール中２Ｍアンモニア溶液で溶出した。溶出液を濃縮し、酢酸エチルおよび水間で分配し、有機層を濃縮して、１８０ｍｇの生成物を得た；［Ｍ］−＝４８８；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．１２（ｄ，１Ｈ），８．４５（ｄ，１Ｈ），７．９６（ｍ，２Ｈ），７．８５（ｍ，２Ｈ），７．６５（ｄｄ，１Ｈ），７．５６（ｄ，１Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ）。
【００６８】
中間体６４に記載の方法と類似の方法、および適当な出発物質を用いて、下記表に記載の中間体を製造した。
【表９】
【００６９】
中間体７４ ２−クロロピリド［２，３−ｂ］［１，４］ベンゾキサゼピン−６（５Ｈ）−オン
【化２３】
２０ｍＬの無水ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）中の中間体２９（９１７ｍｇ）の撹拌溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４４３ｍｇ）を一度に加えた。得られた紫色溶液を６０℃で２時間加熱し、冷却し、クロロホルムおよび水（各々２０ｍｌ）間で分配した。層を分離し、水層を、さらにクロロホルム（総量１５０ｍｌ）で抽出し、合した有機層を水で洗浄し、相分離器により分離し、減圧下で濃縮して、標題化合物を得た；５６０ｍｇ（６９％）；ＭＨ＋２４７。
【００７０】
中間体７５ ２−クロロ−５−［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］ピリド［２，３−ｂ］［１，４］ベンゾキサゼピン−６（５Ｈ）−オン
【化２４】
無水ＴＨＦ（１５ｍｌ）中の水素化ナトリウム（６０％鉱油分散液、１３ｍｇ）の懸濁液に、０℃で、中間体７４（３５０ｍｇ）を滴下した。得られた紫溶液を０℃で１５分間撹拌し、ついで、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（２６５ｕｌ）を加えた。混合物を、さらに３０分室温にて撹拌し、ついで、２Ｍ塩酸（２ｍｌ）を加えた。粗反応混合物を減圧下で濃縮して黄色固体を得、これを酢酸エチルおよびクロロホルム中に懸濁し、無機塩を濾過し、液体を減圧下で濃縮して、１．０３ｇの標題化合物を得た；ＭＨ＋＝４５７。
【００７１】
実施例
実施例１ ２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化２５】
水（５ｍｌ）およびメタノール（５ｍｌ）中の中間体７３（１１５ｍｇ）の懸濁液に、水酸化リチウム（２３ｍｇ）を加えた。得られた溶液を３０℃で２時間撹拌した。粗反応混合物を、減圧下で濃縮して固体を得、これを水およびジエチルエーテル（各々１０ｍｌ）間で分配した。層を分離し、塩基性の水層を、２Ｎ塩酸を用いてｐＨ１に酸性化し、クロロホルム（３×２０ｍｌ）で抽出した。合した有機物を１Ｎ塩酸、水で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１０７ｍｇ（９６％））を得た。ＭＨ＋４７５
【００７２】
実施例２ ５−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジンカルボン酸
【化２６】
メタノール（１．５ｍＬ）中の中間体６３（１８０ｍｇ）の懸濁液に、４Ｍ水酸化リチウム溶液（３．７ｍＬ）を加え、混合物を５０℃に１５分間加温し、ついで、室温に一晩冷却した。混合物の容量を、窒素流で５０％減少させ、酸性化（２ＭのＨＣｌ；ｐＨ２まで）し、酢酸エチルで抽出し、乾燥（飽和ブラインおよび硫酸ナトリウム）し、吹きつけて、生成物を得た（１２５ｍｇ）。［Ｍ］−＝４７６
【００７３】
実施例２に記載の方法と類似の方法を用いて、下記表の化合物を同様に調製した。いくつかの場合、さらに当量の水酸化リチウムとの反応を繰り返す必要があるか、あるいは、５０℃で反応時間を延ばす必要がある。
【表１０】
【００７４】
実施例１２ ３，４−ジクロロ−Ｎ−（５−クロロ−２−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］オキシ｝−３−ピリジニル）ベンゼンスルホンアミド
【化２７】
乾燥ＴＨＦ（２．１ｍＬ）を、実施例６（６００ｍｇ）を入れた乾燥二首フラスコに加えた。フラスコを０℃に冷却し、ついで、ＴＨＦ中の水素化アルミニウムリチウム（２．５３ｍＬ）の１．０Ｍ溶液を滴下した。反応物を室温にし、ついで、１時間撹拌した。反応が完了すると、０℃に戻し、クエンチした。沈殿物を濾過し、ついで、濃縮し、ＩＳＣＯ ＭＰＬＣで精製して、２０２ｍｇの標題化合物を得た、ＭＨ＋；４６０。
【００７５】
実施例１２に記載の方法と類似の方法を用いて以下の中間体を製造した。
【表１１】
【００７６】
中間体７６ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−ホルミルフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化２８】
【００７７】
実施例１２（２０２ｍｇ）を、乾燥ＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、ついで、樹脂結合ＭＰ−ＴｓＯ−ＴＥＭＰＯ（ローディング＝１ｍｍｏｌ／１ｇ、８７８ｍｇ）を加え、室温にて一晩撹拌した。反応を行い、樹脂を濾過し、沈殿物を濃縮した。要すれば、さらに精製するために、ＩＳＣＯ ＭＰＬＣを用いて、２１６ｍｇを得た。ＭＨ＋；５７８
【００７８】
中間体７６の方法と類似の方法を用いて以下の中間体を製造した。
【表１２】
【００７９】
実施例１４ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化２９】
ピリジン（２ｍＬ）中の中間体３３（１６５ｍｇ）、４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（５ｍｇ）および３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１０９ｕＬ）の混合物を、９５℃で１時間加熱し、冷却し、ブローした。生成物をメタノール中に溶解し、アミノプロピルＳＰＥカートリッジ（５ｇ）に保持した。カートリッジをメタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、生成物をメタノール中２Ｍアンモニアで溶出した。溶出液をブローし、クロロホルム（酢酸エチルを用いてもよい）および水間で分配し、有機層をブローして１５５ｍｇの生成物を得た。［ＭＨ］＋＝４４４
【００８０】
適当な出発物質から、実施例１４に記載の方法と類似の方法により調製し、ついで、適当な溶媒を用いるシリカ−ＳＰＥにより、および／またはマスディレクテッド自動精製ＨＰＬＣにより精製して、以下の実施例を調製した。場合により、反応はより低温で行ってもよい。反応には種々の変法がある。
【００８１】
【表１３】
【００８２】
【表１４】
【００８３】
【表１５】
【００８４】
【表１６】
【００８５】
【表１７】
【００８６】
【表１８】
【００８７】
【表１９】
【００８８】
【表２０】
【００８９】
実施例８９ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−メチル−２−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化３０】
ピリジン（３ｍｌ）中の中間体４５（１１７ｍｇ）の撹拌溶液に、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（９３ｕＬ）およびＤＭＡＰ（３ｍｇ）を加えた。得られた混合物を７０℃で２時間加熱し、ついで、室温に冷却し、７２時間撹拌した。さらに、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（３７ｕＬ）を加え、得られたを１００℃でさらに２４時間撹拌した。反応物を冷却し、減圧下で濃縮し、ついで、ＩｓｏｌｕｔｅアミノプロピルＳＰＥで精製した。３容量のメタノール、ついで、３容量のメタノール中２Ｍアンモニアを回収した。アンモニア／メタノールフラクションを減圧下で濃縮して褐色固体を得、これを酢酸エチル／水間で分配し、分離した。酢酸エチル層を水で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を得た（７９ｍｇ）。ＭＨ＋４４４／４４６
【００９０】
実施例９０ ３，４−ジクロロ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルアミノ）−３−ピリジニル］ベンゼンスルホンアミド
【化３１】
中間体５８（１８ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（２１ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、およびピリジン（１４μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３中に溶解し、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＤＭＳＯ中に溶解した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ５０×２０ｍｍカラム、流速２０ｍＬ／分、Ａ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ、Ｂ：水中０．１％ＴＦＡ、Ａ：１０分で２０〜１００％、２１５ｎｍでＵＶ検出）を用いて精製して、標題化合物を４．８ｍｇ（１３％収率）の黄褐色固体として得た。ＭＨ＋４１９／４２１／４２３
【００９１】
実施例９１ ４−ブロモ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝−２−メチルベンゼンスルホンアミド
【化３２】
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＮａＨ（０．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、１ｍＬのＤＭＦ中の中間体３３を加えた。１０分後、４−ブロモ−２−メチルベンゼンスルホニルクロライド（０．２５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で３６時間撹拌した。反応物をＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合した有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、１２０ｍｇの粗物質を得た。粗物質を分取ＨＰＬＣで精製して、黄色固体を得た（５ｍｇ、４％）。［ＭＨ］＋＝４７０
【００９２】
適当な出発物質で開始して、実施例９１に記載の方法で以下の実施例を合成した。
【表２１】
【００９３】
実施例９３ Ｎ−｛５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝−４−（１，１−ジメチルプロピル）ベンゼンスルホンアミド
【化３３】
ピリジン（２ｍＬ）中のスルホニルクロライド（０．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液を、２分間撹拌した、ついで、１ｍＬピリジン中の中間体３３の溶液を加え、混合物を９０℃で３時間撹拌した。反応物を冷却し、１５ｍＬの水に注いだ。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、合した有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、１４０ｍｇの粗物質を得た。粗物質を分取ＨＰＬＣにより精製して、灰白色固体を得た（３５ｍｇ、１８％）。［ＭＨ］＋＝４４６
【００９４】
実施例９３と類似の方法で以下の実施例を調製した。
【表２２】
【００９５】
実施例１０３ ２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド
【化３４】
無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中の中間体７５（５１５ｍｇ）の撹拌溶液に、エタノールアミン（１３８ｍｇ）を加えた。溶液は添加後すぐに暗色になり、ついで、４０℃で１５分間加熱した。粗反応混合物を冷却し、減圧下で濃縮し、Ｉｓｏｌｕｔｅアミノプロピルイオン交換ＳＰＥに充填した。メタノール（３容量）およびメタノール中２Ｍアンモニア（３容量）で溶出した。アンモニアメタノールフラクションを減圧下で濃縮して固体を得、水およびクロロホルム間で分配し、相分離器で溶出し、濃縮して、橙色固体を得た。橙色固体をさらにシリカゲルＳＰＥ（ＤＣＭ１〜５％メタノール）で精製して、標題化合物を得た（１８１ｍｇ）。ＭＨ＋５１８
【００９６】
実施例１０４ ２−［（５−クロロ−３−｛［（４，５−ジクロロ−２−チエニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−メチルベンズアミド
【化３５】
無水ＴＨＦ中の水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散液、５７ｍｇ）の懸濁液に、中間体７４（１７７ｍｇ）を１回で加えた。得られた紫／褐色溶液を０℃で１５分間撹拌した。４，５−ジクロロ−２−チオフェンスルホニルクロライド（２１６ｍｇ）を加え、反応混合物を６０分室温で撹拌した。２Ｍ塩酸（４ｍＬ）を滴下し、反応物を減圧下で濃縮して、橙色固体を得た。橙色固体を無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、メチルアミン（４４ｍｇ）を加えた。得られた物質を室温にて７２時間撹拌し、ついで、減圧下で濃縮して、橙色油を得た。ＭＤＡＰを用いて精製して、標題化合物を得た（２４ｍｇ）。ＭＨ＋４９４
【００９７】
中間体７４から適当な出発物質を用い、実施例１０４に記載の方法と類似の方法により以下の実施例を調製した。
【表２３】
【００９８】
実施例１０７ ２−［（３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化３６】
中間体３０、（５００ｍｇ）、４−クロロベンゼンスルホニルクロライド（４３２ｍｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ）をピリジン（１０ｍＬ）中に溶解し、１時間加熱還流した。ピリジンを減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製し、残渣を２−プロパノールでトリチュレートした。得られた固体をメタノール（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）中、水酸化リチウム水和物（１２０ｍｇ）の存在下で１時間加熱還流した。２ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）を加え、混合物を濾過し、乾燥して、標題化合物（２１０ｍｇ）を白色固体として得た。［ＭＨ］＋＝４０５
【００９９】
実施例１０８ ２−［（３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化３７】
中間体３０および３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドから、実施例１０７に記載の方法と類似の方法で実施例１０８を調製した。［ＭＨ］＋＝４３９；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．６７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１０．４８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．０４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．８５（ｍ，３Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．７３（ｍ，３Ｈ），７．５５（ｔ，１Ｈ），７．３１（ｔ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，１Ｈ），６．７０（ｄｄ，１Ｈ）
【０１００】
実施例１０９ ２−［（５−クロロ−３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化３８】
中間体２９および４−クロロベンゼンスルホニルクロライドから実施例１０７に記載の方法と類似の方法で実施例１０９を調製した；ＨＰＬＣｍ／ｚ［ＭＨ］＋＝４３９。
【０１０１】
実施例１１０ ２−［（５−クロロ−３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−メチルベンズアミド
【化３９】
無水ＤＣＭ（５ｍｌ）中の実施例１０９（８４ｍｇ）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（ジ−ｉ−プロピルエチルアミン）（３６ｕｌ）、ＴＢｔＵ（６７ｍｇ）およびＴＨＦ中２Ｍメチルアミン（２８７ｕｌ）を連続して加えた。得られたを１８時間室温で撹拌した。さらに、ＴＨＦ中の２Ｍメチルアミン（２８７ｕｌ）およびＴＢｔｕ（４０ｍｇ）を加え、反応物を３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、黄色油を得た。油を、最初にシリカゲルＳＰＥ（ヘキサン中２０〜８０％酢酸エチル）で精製して黄色油を得た。さらに、ＭＤＡＰにより精製して、標題化合物を得た（１３ｍｇ（１５％））；ＭＨ＋４５２。
【０１０２】
実施例１１１ ２−｛［３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−６−（メチルオキシ）−２−ピリジニル］オキシ｝安息香酸
【化４０】
サリチル酸エチル（１９９ｍｇ）をＤＭＦ中に溶解した。これに炭酸カリウム（２０７ｍｇ）および２−クロロ−６−（メチルオキシ）−３−ニトロピリジン（１８８ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波反応器中１２０℃で３０分間加熱し、ついで、溶媒を除去した。残渣をＤＣＭ（１０ｍＬ）および１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）間で分配し、有機相を減圧下で濃縮した。これをエタノール（１０ｍＬ）中に溶解し、１０％炭素担持パラジウム（５ｍｇ）を加えた。混合物を水素雰囲気下、室温で、１２時間撹拌した。スラリーをセライト（登録商標）により濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、ピリジン（３ｍＬ）に溶解した。これに４−クロロベンゼンスルホニルクロライド（４２２ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波反応器中、１２０℃で３０分間加熱し、ついで、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣をＤＣＭ（２０ｍＬ）および１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）間で分配した。有機相を減圧下で濃縮し、２：１テトラヒドロフラン：水中に溶解し、水酸化リチウム（２４ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波反応器中、１２５℃で３０分間加熱し、ついで、溶媒を減圧下で除去した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。［ＭＨ］＋＝４３５，［Ｍ］−＝４３３
【０１０３】
実施例１１２ ２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−［２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）エチル］ベンズアミド
【化４１】
ＤＭＦ（０．４５ｍｌ）中のヒスタミンジヒドロクロライド（１７ｍｇ）の懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（２ｍｇ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド（２９ｍｇ）、および２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸（６４ｍｇ、実施例１）を加えた。反応物を１２時間室温にて撹拌した。ついで、溶液をメタノール（５ｍｌ）で希釈し、アミノプロピル−ＳＰＥカラムで濾過した。生成物を５％アンモニア／メタノールで溶出し、自動精製ＨＰＬＣにより精製した。［ＭＨ］＋＝５６８．
【０１０４】
２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸、３−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸、または４−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸から、実施例１に記載の方法と類似の方法により、適当なアミンを用いて調製し、ついで、アミノプロピル−ＳＰＥおよび／または自動分取ＨＰＬＣにより精製して、以下の実施例を調製した。いくつかの実施例において、６０℃での加熱を要した。
【０１０５】
【表２４】
【０１０６】
【表２５】
【０１０７】
【表２６】
【０１０８】
【表２７】
【０１０９】
【表２８】
【０１１０】
実施例１６４ ３，４−ジクロロ−Ｎ−（５−クロロ−２−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］オキシ｝−３−ピリジニル）ベンゼンスルホンアミド
【化４２】
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−シアノフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド（３３ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、アジ化ナトリウム（２３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム（１９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の反応混合物を、１２０℃で１２時間撹拌した。溶媒を除去した後、残渣を水（３ｍＬ）中に懸濁し、５％ＮａＯＨで塩基性化し、Ｅｔ２Ｏで洗浄した。水層を１０％ＨＣｌでｐＨ３に酸性化し、酢酸エチルで抽出し、有機層を水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濃縮して、粗生成物を得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を白色固体として得た（２２ｍｇ、６１％）。ＨＰＬＣＲｔ＝２．９８分、ｍ／ｚ［ＭＨ］＋＝４９８．１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ８．０１（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｄ，１Ｈ），７．９３（ｄ，１Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），７．６４（ｍ，２Ｈ），６．８４（ｍ，２Ｈ）
【０１１１】
３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−シアノフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドの代わりに３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−シアノフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドを用いる以外は同様の方法で、下記表の実施例１６６を調製した。
【０１１２】
【表２９】
【０１１３】
実施例１６６ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−｛［（フェニルメチル）アミノ］メチル｝フェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化４３】
中間体７６（４９．８ｍｇｌ）を、バイアル中の無水塩化メチレン（０．５ｍＬ）に溶解し、ついで、ベンジルアミン（１６．０ｍｇ）をＴＥＡ（０．０２ｍＬ）および氷ＡｃＯＨ（０．００４ｍＬ）と一緒に加えた。混合物を室温にて３０分間撹拌し、ついで、トリアセトキシボロヒドリドナトリウム（４６．２ｍｇ）を加えた。反応物を一晩室温にて撹拌し、反応が完了した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、炭酸水素ナトリウム溶液、水およびブラインで洗浄した。有機層を濃縮し、酸性ＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣで精製した。［ＭＨ］＋＝５４９
【０１１４】
３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−ホルミルフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドまたは３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−ホルミルフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドのいずれかで開始し、適当なアミンを用いて、実施例２と類似の方法で以下の実施例を調製した。
【０１１５】
【表３０】
【０１１６】
【表３１】
【０１１７】
【表３２】
【０１１８】
本発明の化合物は、ケモカイン受容体、特にＣＣＲ２受容体に対してアフィニティを示すことが見出された。かかるアフィニティは、典型的には、適当なアッセイにおいて受容体からの５０％の刺激応答を阻害するのに必要な化合物濃度であるＩＣ５０から計算され、これは、「Ｋｉ」値として下記式：
【化４４】
［式中、Ｌ＝放射性リガンドおよびＫＤ＝放射性リガンドの受容体に対するアフィニティ(Cheng and Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22:3099, 1973)］
により計算される。
本明細書において、ｐＫｉ（Ｋｉの真数に対応する）をＫｉの代わりに用いる。
一の態様において、本発明は、以下に記載するアッセイ方法から導かれる５．４〜６．５のｐＫｉを有する化合物を提供する。さらなる態様において、本発明は、以下に記載するアッセイ方法から導かれる６．５〜７．０のｐＫｉを有する化合物を提供する。さらなる態様において、本発明は、以下に記載するアッセイ方法から導かれる７．０のｐＫｉを有する化合物を提供する。
【０１１９】
ＣＣＲ−２［３５Ｓ］ＧＴＰｇＳ ＳＰＡ結合アッセイ
膜調製
ヒトＣＣＲ−２受容体を発現するＣＨＯ細胞を、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのＬ−グルタミン、Ｇ４１８を補足したＤＭＥＭ Ｆ１２培地において３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で増殖する。密集した細胞を、０．６ｍＭのＥＤＴＡを含有するＨａｎｋｓ緩衝塩溶液（ＨＢＳＳ、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋不含）を用いて収穫した。得られた細胞懸濁液を、３００ｇ、４℃で１０分間遠心分離に付し、細胞ペレットを１００ｍｌのＨＢＳＳ＋ＥＤＴＡに懸濁し、３００ｇで５分間遠心分離に付した。得られた細胞ペレットを、１００ｍＭのリューペプチン（ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ）、２５μｇ／ｍｌのバシトラシン、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＰＭＳＦおよび２μＭのペプスタインＡを含有する、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ中にｐＨ７．４で再懸濁した。懸濁液を氷冷ブレンダーを用いて均質にし、５００ｇで２０分間遠心分離に付した。上清を破棄し、４８０００ｇで３０分間遠心分離した。この細胞ペレットを、ペプスタインＡおよびＰＭＳＦを除いた上記緩衝液に再懸濁し、−７０℃でアリコートをストックした。
【０１２０】
アッセイ
アッセイについては、膜を解凍し、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、１００ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．４、１ｍｇ／ｍｌサポニンを含有、１０ｍＭのＧＤＰ）に再懸濁して、最終濃度５μｇ／ウェルとした。これらをＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒ ＳＰＡビーズ（０．２５ｍｇ／ウェル）と、室温にて３０分間撹拌しながら予め結合させた。０．５μｌの１００％ＤＭＳＯ中の種々の試験化合物（３０μＭ〜３０ｐＭ）（３８４ウェルプレートにおいて４倍希釈で１１点）を含有するアッセイプレートを、このアッセイに用いた（Ｂｉｏｍｅｋ ＦＸで調製される）。また、このプレートは、実験において高および低対照を得るために、１６ウェルのＤＭＳＯおよび１６ウェルの高濃度の標準アンタゴニストを含む。この１５μｌのビーズおよび膜混合物に、１５μｌ［３５Ｓ］ＧＴＰｇＳ（最終濃度０．２ｎＭ）および１５μｌのＥＣ８０（４０ｎＭ）のＭＣＰ−１を加える。この濃度のＭＣＰ−１は、この受容体に対するアゴニスト曲線から予め決定される。マルチドロップを用いてすべての添加を行う。ついで、プレートをシールし、５分間、３００ｒｐｍで遠心分離し、ついで、これらを室温にて３時間インキュベートする。この後、Ｖｉｅｗｌｕｘイメージングシステムで読み取る。データ処理に関しては、高および低対照ウェルをデータの標準化に用い、ついで、Ｅｘｃｅｌにて４パラメータキットを用いてフィットする。
【０１２１】
上記したアッセイは、５．０〜５．５の範囲でｐＫｉの有効検出限界があると考えられる。したがって、かかるアッセイでこの範囲内のｐＫｉを示す化合物は、確かに受容体に対して適度なアフィニティを有しうるが、同様に、より低いアフィニティ（大幅に低いアフィニティを含む）も有しうる。
このアッセイを用いて、代表的な化合物はｐＫｉが５．０以上であった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケモカイン受容体のモジュレーター、具体的にはＣＣＲ２アンタゴニストである一群のピリジニルスルホンアミドおよびその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣＣＲ２は、単球およびいくつかの他の白血球の細胞表面で発現されるケモカイン受容体である。ＣＣＲ２は、炎症および感染部位で酸性される、単球走化性蛋白質ＭＣＰ−１および他のＣＣケモカインに結合する。ＭＣＰ−１／ＣＣＲ２相互作用による炎症部位への単球の動員は、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症、多発性硬化症、閉塞性細気管支炎、喘息、アレルギー性鼻炎、湿疹、アトピー性皮膚炎、腎臓病、肺胞炎、腎炎、肝臓肝硬変、鬱血性心不全、ウイルス性髄膜炎、脳梗塞、ニューロパシー、川崎病、アルツハイマー病、卒中、急性神経損傷、ＨＩＶ感染、ＡＩＤＳ、自己免疫疾患、癌、敗血症、網膜炎、炎症性腸疾患、移植片動脈硬化症、特発性肺線維症、乾癬、ＨＩＶ−関連認知症、狼瘡、エリテマトーデス、肝炎、膵臓炎、クローン病、子宮内膜症および糖尿病を含む複合炎症障害を含む多くの疾患の病理の促進に関与する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
したがって、ＣＣＲ２に結合する化合物群の発見は当該分野において有益であり、これにより、炎症性部位への単球の望ましくないＭＣＰ１−介在動員の形成を防止または最小化することができる。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
第１の態様において、本発明は、下記式：
【化１】
［式中：
Ｘは−Ｏ、−ＮＨまたは−Ｓであり；
Ｒ１は、ヘテロアリール基またはアリール基であり、これらは各々、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＣＮ、Ｃ１−４アルキルチオ−、−ＯＣＦ３、ジメチルアミノ、ニトロおよび−ＣＦ３からなる群から独立して選択される３個までの置換基により置換されており；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、−ＣＦ３または−ＯＣＦ３であり；
Ｒ３は、Ｒ４−フェニル−、Ｒ５−ピリジル−、メチルテトラゾリル、モルホリノ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、（ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、メチルイソキサゾリル；ピリダジニルまたはトリアゾリルであり；
ここに、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシメチル、テトラゾリル、ＣＯＯＨまたは−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり；
Ｒ５は、２−メチル、２−ハロ、２−シアノ、２−ＣＯＯＨ、ジメチルアミノメチル、メチルモルホリノメチルであり；
ここに、ＲａおよびＲｂは、各々Ｈであるか、あるいはそれらが結合しているＣと一緒になって、カルボニル基を結合し；
Ｒｃは、Ｈ、−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６；Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル；Ｃ１−Ｃ６−アルキル；フェニル−ＣＨ（ＣＨ３）−；オキソイソキサゾリジニル；ジメチルチアゾリル；ジヒドロチアゾリル；イミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−；またはイミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−であり；
Ｒｄは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、ベンジルであるか、あるいはＲｃおよびＲｄは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、トリアゾロピペリジニルまたはピロリジノニル基を形成し；
ｙは１、２または３であり；
Ｒ６は、−ＮＲ７Ｒ８、ＯＨ、メトキシ、フェニル、イミダゾリル、インドリル、テトラヒドロピラニル、ベンズイミダゾリルまたはＣ３−Ｃ６−シクロアルキルであり；
Ｒ７はＨまたはメチルであり；Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルまたはフェニルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、イミダゾリル、またはピロリジノニル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。
【０００５】
第２の態様において、本発明は、ａ）請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩；およびｂ）医薬上許容される賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
第３の態様において、本発明は、ＣＣＲ２により介在される疾患または症状の治療方法であって、医薬的に有効な量の本発明の化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む方法を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
第１の態様において、本発明は、下記式：
【化２】
［式中：
Ｘは−Ｏ、−ＮＨまたは−Ｓであり；
Ｒ１は、ヘテロアリール基またはアリール基であり、これらは各々、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＣＮ、Ｃ１−４アルキルチオ−、−ＯＣＦ３、ジメチルアミノ、ニトロおよび−ＣＦ３からなる群から独立して選択される３個までの置換基により置換されており；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、−ＣＦ３または−ＯＣＦ３であり；
Ｒ３は、Ｒ４−フェニル−、Ｒ５−ピリジル−、メチルテトラゾリル、モルホリノ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、（ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、メチルイソキサゾリル；ピリダジニルまたはトリアゾリルであり；
ここに、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシメチル、テトラゾリル、ＣＯＯＨまたは−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり；
Ｒ５は、２−メチル、２−ハロ、２−シアノ、２−ＣＯＯＨ、ジメチルアミノメチル、メチルモルホリノメチルであり；
ここに、ＲａおよびＲｂは、各々Ｈであるか、あるいはそれらが結合しているＣと一緒になって、カルボニル基を結合し；
Ｒｃは、Ｈ、−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６；Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル；Ｃ１−Ｃ６−アルキル；フェニル−ＣＨ（ＣＨ３）−；オキソイソキサゾリジニル；ジメチルチアゾリル；ジヒドロチアゾリル；イミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−；またはイミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−であり；
Ｒｄは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、ベンジルであるか、あるいはＲｃおよびＲｄは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、トリアゾロピペリジニルまたはピロリジノニル基を形成し；
ｙは１、２または３であり；
Ｒ６は、−ＮＲ７Ｒ８、ＯＨ、メトキシ、フェニル、イミダゾリル、インドリル、テトラヒドロピラニル、ベンズイミダゾリルまたはＣ３−Ｃ６−シクロアルキルであり；
Ｒ７はＨまたはメチルであり；Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルまたはフェニルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、イミダゾリル、またはピロリジノニル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩に関する。
【０００７】
本明細書で用いられる場合、「アルキル」なる用語は、所定の数の炭素原子を含有する直鎖または分枝鎖を意味する。本明細書で用いられる場合、「アルキル」なる用語は、限定するものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソブチル、イソプロピル、ｔ−ブチル、および１，１−ジメチルプロピルが挙げられる。
【０００８】
「アルコキシ」の例としては、限定するものではないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、プロプ−２−オキシ、ｎ−ブトキシ、ブト−２−オキシ、２−メチルプロプ−１−オキシ、２−メチルプロプ−２−オキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキシルオキシが挙げられる。
【０００９】
Ｃ１−４アルキルチオの例としては、限定するものではないが、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、プロプ−２−チオ、ｎ−ブチルチオ、ブト−２−チオ、２−メチルプロプ−１−チオ、２−メチルプロプ−２−チオが挙げられる。
【００１０】
Ｃ３−６シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシル基が挙げられる。
【００１１】
本明細書で用いられる場合、「ヘテロシクロアルキル」なる用語は、１個またはそれ以上のヘテロ原子を含有する５〜６員の非芳香環基を意味する。ヘテロシクロアルキル基のとしては、２Ｈ−ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、２Ｈ−ピリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロピリダジニル、ピペリジニル、およびピペラジニルが挙げられる。
【００１２】
「ハロゲン」または「ハロ」なる用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨウドを意味する。
【００１３】
「本発明の化合物」なる用語は、本明細書で用いられる場合、１種またはそれ以上の本発明を含む。本発明は、化合物、ならびにそれらの医薬上許容される塩を含む。したがって、化合物またはその医薬上許容される塩なる文脈における「または」なる語は、化合物またはその医薬上許容される塩もしくはそれらの組み合わせを含むものと解される。
【００１４】
本明細書で用いられる場合、「医薬上許容される」なる語は、正常な医学的判断の範囲内において、過度の毒性、刺激または他の問題または合併症を伴うことなくヒトおよび動物の組織と接触して用いるのに適し、合理的な利益／リスク比に見合った、化合物、物質、組成物および剤形を意味する。当業者には、式（Ｉ）で示される化合物の医薬上許容される塩を調製することができることは明らかだろう。これらの医薬上許容される塩は、最終的な単離および化合物の精製の間に系内で調製するか、あるいは、別個に、純粋な化合物をその遊離酸または遊離塩基の形態で、それぞれ、適当な塩基または酸と反応させることにより調製することができる。
【００１５】
本発明の化合物は、以下の反応スキームに従って調製することができる。
式（Ｉ）で示される化合物は、式（ＩＩ）：
【化３】
［式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは上記と同意義である］
示される化合物またはその適当に保護された誘導体と、式（ＩＩＩ）：
Ｌ−ＳＯ２−Ｒ１ （ＩＩＩ）
［式中、Ｌは適当な脱離基であり、Ｒ１は上記と同意義である］
で示される化合物とを反応させること、
および、その後、任意に、
（ｉ）保護基（複数でも可）を除去すること；および／または
（ｉｉ）塩を形成すること；および／または
（ｉｉｉ）式（Ｉ）で示される化合物またはその塩を、他の式（Ｉ）で示される化合物またはその塩に変換すること
により調製することができる。
【００１６】
適当な脱離基Ｌの例としては、クロロ、ブロモ、およびペンタフルオロフェノキシが挙げられる。
典型的には、Ｌがクロロである場合、かかる反応は、適当な溶媒、例えばピリジン（所望により、第２の溶媒、例えばクロロホルムまたはテトラヒドロフランと混合していてもよい）中に、式（ＩＩ）で示される化合物を溶解し、これを、適当な溶媒、例えばピリジン中の式（ＩＩＩ）で示される化合物と反応させることにより行うことができる。また、さらに触媒量のジメチルアミノピリジンを用いてもよい。反応は、一般的には、８０〜２５０℃の高い温度範囲、例えば２００℃で、３０分〜１時間、あるいは８０℃で５〜２４時間で行われる。
【００１７】
式（ＩＩ）で示される化合物は、下記スキームに詳述する化学反応に従って、例えば、関連するＲ３基を有するアルコール、アミンまたはチオールを、適当な塩基、例えば適当な脱離基Ｌ、例えば塩素を有する式（ＩＶ）で示される化合物、炭酸カリウム、およびニトロ−ピリジンで、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）のような溶媒中、適当な時間、例えば１〜２４時間、２０〜１００℃の適当な温度で処理することにより調製することができる。ついで、この反応のニトロ−ピリジン生成物（ＩＩＩ）を、標準的な文献公知の方法：例えば、プラチナまたはパラジウムのような金属触媒の存在下での水素化を用いて還元することができる。別法として、適当な試薬、例えばギ酸アンモニウムでの移動水素化を、プラチナまたはパラジウムの存在下、適当な溶媒、例えばジクロロメタン、酢酸エチル、エタノールまたはそれらの混合溶媒系中で行って、式（ＩＩａ）で示される化合物を得ることができる。
【００１８】
【化４】
【００１９】
式（ＩＶ）で示されるニトロ−ピリジン化合物は、当業者により、文献公知の方法を用いて容易に調製することができる。Ｒ２がＣＮである式（ＩＶ）で示される化合物の調製法の例を、下記スキーム５に示す。
さらに具体的には、ＸがＯであり、Ｒ３が、例えばカルボン酸置換基を有する６員芳香族またはヘテロ芳香環である、式（Ｉ）で示される化合物は、下記スキーム２に示すように、対応するメチルまたはエチルエステルの加水分解により調製することができる。
【００２０】
【化５】
［式中、ＡはＣＨ２またはＯ、ＮまたはＳのようなヘテロ原子である］
【００２１】
適当な加水分解条件は、例えばメタノールのような適当な溶媒中の水酸化リチウムである。この反応は、完了するまで５０〜９０℃で、例えば１５分〜２４時間行ってもよい。
ＸがＯであり、Ｒ３がアミド置換基を有するフェニルである式（Ｉ）で示される化合物を、下記スキーム３に記載の化学反応に従って調製することができる。
【００２２】
【化６】
【００２３】
工程１、適当なエステルの塩基、例えば水素化ナトリウムカリウムでの環化は、適当な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中、例えば０℃で行うことができる。中間体ラクタムは単離してもよく、あるいは工程２に示すようにすぐにスルホニル化剤で処理してもよい。ついで、得られたスルホニル化ラクタムを、関連するアミンで処理して、工程３に記載のように開環して、アミドを得ることができる。
別法として、一般式（Ｉｂ）で示される化合物は、対応する酸から、関連するアミンで、アミドカップリング剤、例えばＴＢＴＵの存在下、下記スキーム４に示すような標準的な文献公知の方法に従って処理することにより調製することができる。
【００２４】
【化７】
【００２５】
２−クロロ−３−ニトロピリジン（化合物ＩＶａ）は、下記スキーム５に示すように２−ヒドロキシピリジンの塩素化／脱水により調製することができる。式（ＶＩＩ）で示される化合物を脱水して、対応するクロロ／シアノ置換化合物を得ることができる。
【００２６】
【化８】
【００２７】
スキーム２に示されるＲ１がアリールである中間体（Ｖ）は、例えば下記スキーム６に記載の方法により調製することができる：
【化９】
［式中、ＡはＣＨ２またはＯ、ＮまたはＳのようなヘテロ原子であり、Ｒは式（Ｉ）で示される化合物の定義内にある適当な置換基である］
【００２８】
反応は、高温、例えば５０〜１００℃、例えば９５℃で約１時間ピリジンのような溶媒中で行うことができる。
スキーム３に示される中間体（ＶＩ）は、下記スキーム７に記載のように調製することができる：
【化１０】
【００２９】
炭酸カリウムでの処理は、適当な溶媒、例えばＤＭＦ中、高温、例えば８０〜１２０℃の範囲、例えば１００℃で、８時間まで、例えば４時間で行うことができる。
炭素担持パラジウムの存在下での水素化は、適当な溶媒、例えば酢酸エチル中、室温にて、４時間まで、例えば２時間で行うことができる。
スキーム７のアミンとスルホニルクロライド基の間のカップリング工程は、例えば出発物質を、メタノールおよび水のような溶媒中、水酸化リチウムの存在下で、適当な期間、例えば１時間還流することにより行うことができる。
【００３０】
当業者には、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物の調製において、望ましくない副反応を防止するために、分子内の１種またはそれ以上の感受性基を保護する必要がある、および／またはそれが望ましいことがあることは明らかだろう。本発明での使用に適当な保護基は、当業者によく知られており、慣用的な方法で用いることができる。例えば、「Protective groups in organic synthesis」、 T.W. Greene and P.G.M. Wuts (John Wiley and sons 1991)または「PProtecting Groups」、P.J. Kocienski (Georg Thieme Verlag 1994）を参照のこと。適当なアミノ保護基の例としては、アシル型保護基（例えば、ホルミル、トリフルオロアセチル、アセチル）、芳香族ウレタン型保護基（例えば、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）および置換Ｃｂｚ）、脂肪族ウレタン保護基（例えば、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、イソプロピルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル）およびアルキル型保護基（例えば、ベンジル、トリチル、クロロトリチル）が挙げられる。適当な酸素保護基の例としては、例えばアルキルシリル基、例えばトリメチルシリルまたはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル；アルキルエーテル、例えばテトラヒドロピラニルまたはｔｅｒｔ−ブチル；またはエステル、例えばアセテートが挙げられる。
【００３１】
式（Ｉ）で示される他の化合物は、上記したものと類似の一般的な方法により調製することができる。
上記した式（Ｉ）で示される化合物は塩基性基を含んでいてもよく、また、酸性基を含んでいてもよく、したがって、医薬上許容される酸または塩との塩を形成してもよい。
【００３２】
本発明で示される化合物の医薬上許容される塩の例としては、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸および硫酸と、および有機酸、例えば酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、マリン酸、コハク酸、カンファースルホン酸、イソチオン酸、粘液酸、ゲンチシン酸、イソニコチン酸、糖酸、グルクロン酸、フロ酸、グルタミン酸、アスコルビン酸、アントラニル酸、サリチル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、パントテン酸、ステアリン酸、スルフィン酸、アルギン酸、ガラクツロン酸およびアリールスルホン酸、例えば、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸と形成される酸付加塩；アルカリ金属およびアルカリ土類金属および有機塩基、例えばＮ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルマイン（Ｎ−メチルグルカミン、リシンおよびプロカインと形成される塩基付加塩；および、内部塩が挙げられる。生理学的に許容されないアニオンまたはカチオンを有する塩は、医薬上許容される塩の調製および／または非治療的な使用、例えばインビトロの条件での使用に有用な中間体として本発明の範囲内に含まれる。
【００３３】
本発明のある種の化合物は、１当量またはそれ以上の酸と酸付加塩を形成しうる。本発明のある種の化合物は、１当量未満の酸と酸付加塩を形成しうる。本発明は、すべての可能性ある化学量論的および非化学量論的形態も範囲内に含む。
ある種の式（Ｉ）で示される化合物は、立体異性体が存在する（例えば、これらは、１個またはそれ以上の不斉炭素原子を含有しうる）。個々の立体異性体（エナンチオマーおよびジアステレオマー）およびそれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。また、本発明は、１個またはそれ以上のキラル中心が反転した異性体との混合物としての、式（Ｉ）で示される化合物の個々の異性体を包含する。同様に、式（Ｉ）で示される化合物は、式において示されるもの以外の互変異性体として存在することができ、これらもまた、本発明の範囲内に含まれる。
式（Ｉ）で示される化合物の特定のエナンチオマーを必要とする場合、これは、例えば、式（Ｉ）で示される化合物の対応するエナンチオマー混合物を、慣用的な方法で分割することにより得ることができる。かくして、必要とされるエナンチオマーは、式（Ｉ）で示されるラセミ化合物から、キラルＨＰＬＣ法により得ることができる。
【００３４】
さらなる態様において、本発明は、ＣＣＲ２により介在される疾患の治療方法であって、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を該治療を必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
当業者には、本明細書で用いられる治療なる語は、確立した疾患または兆候の治療と同様に予防にまで及ぶことは明らかだろう。
【００３５】
治療的使用に関して、本発明の化合物は、生化合物として投与することも可能であるが、医薬処方における活性成分として存在することが好ましい。
かくして、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を、１種またはそれ以上の医薬上許容される担体または希釈剤と一緒に含む医薬組成物を提供する。担体（複数でも可）、希釈剤（複数でも可）および／または賦形剤（複数でも可）は、処方の他の成分と適当する、および患者に悪影響を及ぼさないという意味で、「許容」されなければならない。
【００３６】
本発明の化合物は、本発明の化合物を、標準的な医薬担体、希釈剤または賦形剤と、当業者に公知の慣用的な方法に従って組み合わせることにより調製される慣用的な剤形で投与することができる。これらの方法は、混合、造粒および圧搾または適宜所望の製剤に成分を溶解することを含む。
【００３７】
本発明の医薬組成物は、いずれもの経路による投与用に処方することができ、ヒトを含む哺乳動物への経口、口腔、局所、吸入または注入、埋め込み、直腸または非経口投与に適した形態を含む。
組成物は、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、ロゼンジ、クリームまたは液体製剤、例えば経口または滅菌非経口溶液または懸濁液の形態であってもよい。
【００３８】
経口投与用の錠剤およびカプセルは、慣用的な賦形剤、例えば結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、デンプン糊またはポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、糖、微結晶セルロース、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、グリシンまたはソルビトール；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えばジャガイモデンプンまたはナトリウムデンプングリコレートまたは湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムを含有していてもよい。錠剤は、当業者によく知られた方法に従ってコートされていてもよい。経口液体製剤は、例えば、水性または油性懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であってもよく、あるいは、使用前に水または他の適当なビヒクルで復元する乾燥製品として提供してもよい。かかる液体製剤は、慣用的な添加剤、例えば懸濁化剤、例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは硬化食用油；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノ−オレアートまたはアカシア；非水性ビヒクル（食用油を含む）、例えばアーモンド油、ヤシ油、油性エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；可溶化剤、例えば界面活性剤、例えばポリソルベートまたは他の剤、例えばシクロデキストリン；および保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピルまたはアスコルビン酸；および、望ましい場合、慣用的なフレーバーまたは着色剤を含んでいてもよい。また、組成物は、例えば慣用的な坐剤基剤、例えばココアバターまたは他のグリセライドを含む坐剤として処方してもよい。
【００３９】
バッカル投与に関して、組成物は、慣用的な方法で処方される錠剤またはロゼンジの形態でありうる。
本発明の局所処方は、例えば、軟膏、クリームまたはローション、眼軟膏および眼または耳滴剤、含浸包帯およびエアロゾールとして提供することができ、適当な慣用的な添加剤、例えば保存剤、薬剤の浸透を補助する溶媒および軟膏およびクリームにおける皮膚軟化剤を含んでいてもよい。
【００４０】
また、処方は、慣用的な担体、例えばクリームまたは軟膏を、およびローションに関してはエタノールまたはオレイルアルコールを含有していてもよい。かかる担体は、処方の約１％〜約９８％で存在してもよい。より通常には、これらは処方の約８０％まで存在する。
【００４１】
本発明の組成物は、注入または持続注入による非経口投与用に処方することができる。注入用処方は、アンプルでの単位剤形またはさらに保存剤を含む複数回投与用容器の形態で提供されうる。組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルジョンの形態であってもよく、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤のような処方用薬剤を含有してもよい。別法として、活性成分は、使用前に適当なビヒクル、例えば滅菌、発熱物質不含水で復元する粉末形態であってもよい。
【００４２】
非経口投与に関して、液体剤形は、化合物および滅菌ビヒクル、好ましくは水を用いて調製することができる。化合物は、ビヒクルおよび使用する濃度に応じて、ビヒクル中に懸濁しても、溶解してもよい。溶液の調製において、化合物は、注射用水に溶解し、濾過滅菌し、適当なバイアルまたはアンプルに充填し、シールすることができる。
【００４３】
有利には、局所麻酔剤、保存剤および緩衝化剤のような薬剤を、ビヒクル中に溶解することができる。安定性を増強するために、組成物は、バイアルに充填した後冷凍し、減圧下で水を除去することができる。ついで、凍結乾燥粉末をバイアル中にシールし、付属の注射用水のバイアルを、使用前に液体に復元するために提供することができる。非経口懸濁液は、化合物をビヒクルに溶解する代わりに懸濁し、滅菌を濾過により行えないこと以外は実質的に同様の方法で調製される。化合物は、エチレンオキシドに曝露することにより滅菌し、ついで、滅菌ビヒクルに懸濁される。有利には、界面活性剤または湿潤剤を、化合物の均一な分散を促進するために組成物に含ませる。
【００４４】
組成物が投与ユニットを含む場合、個々のユニットは、典型的には１〜１０００ｍｇの活性成分を含有する。
【００４５】
さらになる式（Ｉ）で示される化合物の調製の詳細は、以下の実施例に記載する。
以下の限定するものではない実施例により、本発明を説明する。
略語
ＨＰＬＣ−高速液体クロマトグラフィー
ＤＣＭ−ジクロロメタン
ＤＭＦ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ−ジメチルスルホキシド
ＨＣｌ−塩酸
ＳＰＥ−固相抽出機
ＨＢｔＵ−Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＤＭＡＰ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピペリジン
ＭＤＡＰ−マスディレクテッド自動分取ＨＰＬＣ
【００４６】
質量スペクトルは、Ｗａｔｅｒｓ ＺＱ質量分析器またはＭｉｃｒｏｍａｓｓ Ｐｌａｔｆｏｒｍ ２質量分析器を用いて得、電子スプレーイオン化法を用いて、ＭＨ＋またはＭ−を観察した。プロトン核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、特記しない限り４００ＭＨｚで記録し、化学シフトは、内部標準として用いるＭｅ４Ｓｉから低磁場へのｐｐｍで記録し、シングレット（ｓ）、ダブレット（ｄ）、ダブレットダブレット（ｄｄ）、トリプレット（ｔ）、ダブレットトリプレット（ｄｔ）、カルテット（ｑ）マルチプレット（ｍ）として記載し、他の場合は全部を記載する。「ｂｒ」なる語は、ブロードなピークを意味する；例えば、ブロードなシグナルは、ｂｒ．ｓ（またはｂｒｓ）と記載してもよい。
【００４７】
中間体１ ５−ニトロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−３−ピリジンカルボキサミド
【化１１】
カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ、１０３ｇ）を、ＤＭＦ（５１０ｍＬ）中の５−ニトロ−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−３−ピリジンカルボン酸（１０６ｇ）の溶液に室温にて滴下し、混合物を、発泡がなくなるまで６０℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、１０〜３５％のアンモニア（７３０ｍＬ）に注いだ。２０分後、沈殿を濾過し、水（５０ｍＬ）で洗浄し、減圧下７０℃で乾燥して、８３．３ｇの生成物を淡黄色固体として得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．６１（ｄ，１Ｈ），８．５５（ｄ，１Ｈ），７．８０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．１７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）。
【００４８】
中間体２ ６−クロロ−５−ニトロ−３−ピリジンカルボニトリル
【化１２】
オキシ塩化リン（１００ｍＬ）中の中間体１（１０ｇ）を３時間加熱し、ついで、さらに３時間激しく還流し、室温に一晩冷却した。混合物を濃縮し、氷（３００ｍＬ）に注ぎ、１５分間撹拌した。得られた固体を濾過し、熱酢酸エチル（２５０ｍＬ）でトリチュレートし、熱濾過し、有機物の濾液を水（３×１５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、標題化合物を５．９４ｇの淡黄色粉末として得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．８８（ｄ，１Ｈ），８．５０（ｄ，１Ｈ）。
【００４９】
中間体３ ２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン
【化１３】
５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジンアミン（５．０ｇ、２８．８ｍｍｏｌ）を濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）中に溶解し、氷塩浴で−１０℃に冷却した。水（１０ｍＬ）中の硝酸ナトリウム（４．９７ｇ、７２ｍｍｏｌ）を、この冷溶液に１時間にわたって滴下し、１時間以上０℃で撹拌した。反応混合物を、氷塩浴で−１０℃に冷却し、２Ｎの水酸化ナトリウムでｐＨ９．０に、０℃以下に保ちながら中和した。ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）を加え、混合物を濾過した。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を３．３６ｇ（６０％収率）の淡褐色固体として得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．６２（ｄ，１Ｈ，２．５Ｈｚ），８．２６（ｄ，１Ｈ，２．２Ｈｚ）。
【００５０】
中間体４ ２−［（５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル
【化１４】
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（２ｇ）および２−ヒドロキシ安息香酸メチル（１．４ｍｌ）の撹拌溶液に、炭酸カリウムを加えた。得られた混合物を、５０℃で２４時間加熱した。粗反応物を冷却し、酢酸エチルおよび水間で分配し（各々７５ｍｌ）、分離し、水層を酢酸エチル（総量２２５ｍｌ）で抽出した。合した有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、３．２４ｇの標題化合物を得た；ＭＨ＋３０９。
【００５１】
中間体５ ５−クロロ−２−［（４−メチル−２−ピリジニル）オキシ］−３−ニトロピリジン
【化１５】
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（３８６ｍｇ）および４−メチル−２（１Ｈ）−ピリジノン（２４１ｍｇ）の溶液に、炭酸カリウム（５５２ｍｇ）を加えた。得られた混合物を、５０℃で１．５時間加熱し、ついで、７０℃で２時間加熱し、ついで、室温に冷却し、７２時間撹拌した。混合物を濃縮して固体を得、これをＤＣＭ／水間で分配し、層を分離し、水層をさらにＤＣＭで抽出した。合したＤＣＭ抽出物を洗浄（水）し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、褐色油を得た。油を、シリカゲルＳＰＥ（シクロヘキサン中の２０〜４０％酢酸エチル）により精製して、１９７ｍｇの標題化合物を得た；ＭＨ＋２６６。
【００５２】
中間体６ ５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ニトロピリジン
【化１６】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（１．９３ｇ）の溶液を調製し、２ｍＬのこの溶液を、２−メチル−３−ヒドロキシピリジン（２２９ｍｇ）に加えた。炭酸カリウム（１．５ｅｑ）を加え、混合物を９０℃で１時間加熱した。ついで、混合物を冷却し、濃縮し、ＤＣＭ中に溶解し、濃縮した（２回）。得られた固体を、クロロホルムおよび水（各々５ｍＬ）間で分配し、分離した。クロロホルム層をブローして、粗生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．４７（ｄｄ，１Ｈ），８．３８（ｄ，１Ｈ），８．２６（ｄ，１Ｈ），７．４３（ｄｄ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，１Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ）
【００５３】
上記中間体５に記載の方法と類似の方法を用いて、以下の中間体を製造した。この反応は、２０〜９０℃で１〜２４時間で進行する。酢酸エチルを、処理の間クロロホルムの代わりに用いてもよい。
【表１】
【００５４】
【表２】
【００５５】
【表３】
【００５６】
中間体２９ ２−［（３−アミノ−５−クロロ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル
【化１７】
ＤＣＭ（１０ｍｌ）中の２−［（５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル（中間体４）（９９７ｍｇ）の撹拌溶液に、ギ酸アンモニウム（３ｇ）および５％炭素担持パラジウム「デグサ（ｄｅｇｕｓｓａ）」（２５２ｍｇ）を加えた。得られた混合物を５０℃で２４時間加熱した。粗混合物を冷却し、セライトにより濾過し、減圧下で濃縮して、標題化合物（８７３ｍｇ（９７％収率））を得た；ＭＨ＋２７９／２８１。
【００５７】
中間体３０ ２−［（３−アミノ−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸メチル
【化１８】
２−クロロ−３−ニトロピリジン（１０ｇ）、２−ヒドロキシ安息香酸メチル（１１．５ｇ）および炭酸カリウム（１７．４ｇ）を、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中に混合し、１００℃に４時間加熱した。混合物を室温に冷却し、ついで、水（６００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合した有機物を水（１００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、減圧下で濃縮した。得られた固体をヘキサンでトリチュレートし、濾過した。得られた固体（１ｇ）を、２時間、酢酸エチル（４０ｍＬ）およびエタノール（１０ｍＬ）中、５％炭素担持パラジウム（１００ｍｇ）の存在下で水素化した。セライトで濾過し、０．７６ｇの標題化合物を得た；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８．０２（ｄｄ，１Ｈ），７．５８（ｍ，２Ｈ），７．４８（ｄｄ，１Ｈ），７．２９（ｍ，２Ｈ），７．０１（ｄｄ，１Ｈ），６．８２（ｄｄ，１Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）。
【００５８】
中間体３１ ３−［（５−クロロ−３−ニトロ−２−ピリジニル）アミノ］安息香酸
【化１９】
中間体２（５００ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ）、３−アミノ安息香酸（３９１ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．１ｍＬ、７．７７ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中に溶解し、１００℃に１８時間加熱した。反応混合物を３０ｍＬのＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）および水（３０ｍＬ）中に溶解し、ｐＨ３．０未満に、２ＮのＨＣｌで酸性化した。有機層を分離し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を７１０ｍｇ（９３％収率）の黄色泡沫体を得た；１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１３．０３（ｂｒｓ，１Ｈ），１０．０４（ｓ，１Ｈ），８．６３（ｄ，１Ｈ，２．５Ｈｚ），８．５９（ｄ，１Ｈ，２．３Ｈｚ），８．１８（ｔ，１Ｈ，１．７Ｈｚ），７．８２（ｄｄ，１Ｈ，１．５，７．２Ｈｚ），７．７３（ｄ，１Ｈ，７．８Ｈｚ），７．５０（ｔ，７．８Ｈｚ）。
【００５９】
上記の中間体３１に記載の方法と類似の方法を用いて、以下の中間体を製造した。中間体３２は、分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ７５×３０ｍｍのカラム、４０ｍＬ／分の流速、Ａ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ、Ｂ：水中０．１％ＴＦＡ、Ａ：１５分で２０〜１００％、２１５ｎｍでＵＶ検出）を用いてさらに精製を必要とした。当業者には明らかなように、類似の中間体は、合成法において、慣用的な修飾法を含んでいてもよい。
【００６０】
【表４】
【００６１】
中間体３３ ５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジンアミン
【化２０】
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ニトロピリジン（中間体６）（約２ｍｍｏｌ）の溶液を、５％炭素担持パラジウム（Ｄｅｇｕｓｓａ−型、３１２ｍｇ）、ギ酸アンモニウム（１．５ｇ）に加え、混合物を２４時間加熱還流した。反応混合物をセライトにより濾過し（２×２ｍＬ、ＤＣＭ洗浄）、濾液を濃縮して、３９０ｍｇの生成物を得、約１０％の中間体ヒドロキシルアミン（７．５−７．６ｐｐｍで特徴的なピーク）を含有していた；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）８．４１（ｄｄ，１Ｈ），７．４３（ｍ，２Ｈ），７．２１（ｍ，２Ｈ），７．０４（ｄ，１Ｈ），４．２２（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）。反応は、化合物を上記条件に再び付すことにより、完全に完了させることができる。
【００６２】
中間体３３に記載の方法と類似の方法を用いて以下の中間体を製造した。いくつかの場合において、ギ酸アンモニウムよりも、大気圧のＨ２ガスを用いた。
【表５】
【００６３】
【表６】
【００６４】
【表７】
【００６５】
中間体５９ ５−クロロ−２−｛［２−（４−モルホリニルメチル）−３−ピリジニル］オキシ｝−３−ピリジンアミン
【化２１】
ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の２−（４−モルホリニルメチル）−３−ピリジノール（２５１ｍｇ）の溶液を調製し、２，５−ジクロロ−３−ニトロピリジン（２３８ｍｇ）に加えた。炭酸カリウム（２５５当量）を加え、混合物を９０℃に２時間加熱した。ついで、混合物を冷却し、濃縮した。得られた固体を、ＤＣＭおよび水（各々５ｍＬ）間で分配し、分離した。ＤＣＭ層を濃縮し、ＤＣＭ（３．３ｍＬ）中に再び溶解し、ついで、５％炭素担持パラジウム（Ｄｅｇｕｓｓａ型、２０３ｍｇ）に加えた。ギ酸アンモニウム（１．０ｇ）を加え、混合物を２４時間加熱還流した。反応混合物をセライトにより濾過し（２×２ｍＬのＤＣＭで洗浄）、濾液を濃縮して、２２４ｍｇの生成物を得た；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）８．４５（ｄ，１Ｈ），７．５１（ｍ，２Ｈ），７．２６（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｄ，１Ｈ），４．５８（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），３．７６（ｓ，２Ｈ），３．５３（ｍ，４Ｈ），２．４６（ｍ，４Ｈ）。
【００６６】
中間体５９に記載の方法と類似の方法を用いて、以下のアニリン中間体を製造した。
【表８】
【００６７】
中間体６３ ５−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジンカルボン酸メチル
【化２２】
ピリジン（２ｍＬ）中の中間体２２（５ｍｇ）および３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１０９ｕＬ）の混合物を、９５℃で１時間加熱し、冷却し、濃縮した。生成物をメタノール中に溶解し、アミノプロピルＳＰＥカートリッジ（５ｇ）に保持した。カートリッジをメタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、生成物をメタノール中２Ｍアンモニア溶液で溶出した。溶出液を濃縮し、酢酸エチルおよび水間で分配し、有機層を濃縮して、１８０ｍｇの生成物を得た；［Ｍ］−＝４８８；１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ９．１２（ｄ，１Ｈ），８．４５（ｄ，１Ｈ），７．９６（ｍ，２Ｈ），７．８５（ｍ，２Ｈ），７．６５（ｄｄ，１Ｈ），７．５６（ｄ，１Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ）。
【００６８】
中間体６４に記載の方法と類似の方法、および適当な出発物質を用いて、下記表に記載の中間体を製造した。
【表９】
【００６９】
中間体７４ ２−クロロピリド［２，３−ｂ］［１，４］ベンゾキサゼピン−６（５Ｈ）−オン
【化２３】
２０ｍＬの無水ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）中の中間体２９（９１７ｍｇ）の撹拌溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４４３ｍｇ）を一度に加えた。得られた紫色溶液を６０℃で２時間加熱し、冷却し、クロロホルムおよび水（各々２０ｍｌ）間で分配した。層を分離し、水層を、さらにクロロホルム（総量１５０ｍｌ）で抽出し、合した有機層を水で洗浄し、相分離器により分離し、減圧下で濃縮して、標題化合物を得た；５６０ｍｇ（６９％）；ＭＨ＋２４７。
【００７０】
中間体７５ ２−クロロ−５−［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］ピリド［２，３−ｂ］［１，４］ベンゾキサゼピン−６（５Ｈ）−オン
【化２４】
無水ＴＨＦ（１５ｍｌ）中の水素化ナトリウム（６０％鉱油分散液、１３ｍｇ）の懸濁液に、０℃で、中間体７４（３５０ｍｇ）を滴下した。得られた紫溶液を０℃で１５分間撹拌し、ついで、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（２６５ｕｌ）を加えた。混合物を、さらに３０分室温にて撹拌し、ついで、２Ｍ塩酸（２ｍｌ）を加えた。粗反応混合物を減圧下で濃縮して黄色固体を得、これを酢酸エチルおよびクロロホルム中に懸濁し、無機塩を濾過し、液体を減圧下で濃縮して、１．０３ｇの標題化合物を得た；ＭＨ＋＝４５７。
【００７１】
実施例
実施例１ ２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化２５】
水（５ｍｌ）およびメタノール（５ｍｌ）中の中間体７３（１１５ｍｇ）の懸濁液に、水酸化リチウム（２３ｍｇ）を加えた。得られた溶液を３０℃で２時間撹拌した。粗反応混合物を、減圧下で濃縮して固体を得、これを水およびジエチルエーテル（各々１０ｍｌ）間で分配した。層を分離し、塩基性の水層を、２Ｎ塩酸を用いてｐＨ１に酸性化し、クロロホルム（３×２０ｍｌ）で抽出した。合した有機物を１Ｎ塩酸、水で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１０７ｍｇ（９６％））を得た。ＭＨ＋４７５
【００７２】
実施例２ ５−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジンカルボン酸
【化２６】
メタノール（１．５ｍＬ）中の中間体６３（１８０ｍｇ）の懸濁液に、４Ｍ水酸化リチウム溶液（３．７ｍＬ）を加え、混合物を５０℃に１５分間加温し、ついで、室温に一晩冷却した。混合物の容量を、窒素流で５０％減少させ、酸性化（２ＭのＨＣｌ；ｐＨ２まで）し、酢酸エチルで抽出し、乾燥（飽和ブラインおよび硫酸ナトリウム）し、吹きつけて、生成物を得た（１２５ｍｇ）。［Ｍ］−＝４７６
【００７３】
実施例２に記載の方法と類似の方法を用いて、下記表の化合物を同様に調製した。いくつかの場合、さらに当量の水酸化リチウムとの反応を繰り返す必要があるか、あるいは、５０℃で反応時間を延ばす必要がある。
【表１０】
【００７４】
実施例１２ ３，４−ジクロロ−Ｎ−（５−クロロ−２−｛［４−（ヒドロキシメチル）フェニル］オキシ｝−３−ピリジニル）ベンゼンスルホンアミド
【化２７】
乾燥ＴＨＦ（２．１ｍＬ）を、実施例６（６００ｍｇ）を入れた乾燥二首フラスコに加えた。フラスコを０℃に冷却し、ついで、ＴＨＦ中の水素化アルミニウムリチウム（２．５３ｍＬ）の１．０Ｍ溶液を滴下した。反応物を室温にし、ついで、１時間撹拌した。反応が完了すると、０℃に戻し、クエンチした。沈殿物を濾過し、ついで、濃縮し、ＩＳＣＯ ＭＰＬＣで精製して、２０２ｍｇの標題化合物を得た、ＭＨ＋；４６０。
【００７５】
実施例１２に記載の方法と類似の方法を用いて以下の中間体を製造した。
【表１１】
【００７６】
中間体７６ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−ホルミルフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化２８】
【００７７】
実施例１２（２０２ｍｇ）を、乾燥ＤＣＭ（５ｍＬ）中に溶解し、ついで、樹脂結合ＭＰ−ＴｓＯ−ＴＥＭＰＯ（ローディング＝１ｍｍｏｌ／１ｇ、８７８ｍｇ）を加え、室温にて一晩撹拌した。反応を行い、樹脂を濾過し、沈殿物を濃縮した。要すれば、さらに精製するために、ＩＳＣＯ ＭＰＬＣを用いて、２１６ｍｇを得た。ＭＨ＋；５７８
【００７８】
中間体７６の方法と類似の方法を用いて以下の中間体を製造した。
【表１２】
【００７９】
実施例１４ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化２９】
ピリジン（２ｍＬ）中の中間体３３（１６５ｍｇ）、４−（ジメチルアミノ）−ピリジン（５ｍｇ）および３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（１０９ｕＬ）の混合物を、９５℃で１時間加熱し、冷却し、ブローした。生成物をメタノール中に溶解し、アミノプロピルＳＰＥカートリッジ（５ｇ）に保持した。カートリッジをメタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、生成物をメタノール中２Ｍアンモニアで溶出した。溶出液をブローし、クロロホルム（酢酸エチルを用いてもよい）および水間で分配し、有機層をブローして１５５ｍｇの生成物を得た。［ＭＨ］＋＝４４４
【００８０】
適当な出発物質から、実施例１４に記載の方法と類似の方法により調製し、ついで、適当な溶媒を用いるシリカ−ＳＰＥにより、および／またはマスディレクテッド自動精製ＨＰＬＣにより精製して、以下の実施例を調製した。場合により、反応はより低温で行ってもよい。反応には種々の変法がある。
【００８１】
【表１３】
【００８２】
【表１４】
【００８３】
【表１５】
【００８４】
【表１６】
【００８５】
【表１７】
【００８６】
【表１８】
【００８７】
【表１９】
【００８８】
【表２０】
【００８９】
実施例８９ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−メチル−２−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化３０】
ピリジン（３ｍｌ）中の中間体４５（１１７ｍｇ）の撹拌溶液に、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（９３ｕＬ）およびＤＭＡＰ（３ｍｇ）を加えた。得られた混合物を７０℃で２時間加熱し、ついで、室温に冷却し、７２時間撹拌した。さらに、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（３７ｕＬ）を加え、得られたを１００℃でさらに２４時間撹拌した。反応物を冷却し、減圧下で濃縮し、ついで、ＩｓｏｌｕｔｅアミノプロピルＳＰＥで精製した。３容量のメタノール、ついで、３容量のメタノール中２Ｍアンモニアを回収した。アンモニア／メタノールフラクションを減圧下で濃縮して褐色固体を得、これを酢酸エチル／水間で分配し、分離した。酢酸エチル層を水で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を得た（７９ｍｇ）。ＭＨ＋４４４／４４６
【００９０】
実施例９０ ３，４−ジクロロ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−イルアミノ）−３−ピリジニル］ベンゼンスルホンアミド
【化３１】
中間体５８（１８ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライド（２１ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、およびピリジン（１４μＬ、０．１７ｍｍｏｌ）をＣＨＣｌ３中に溶解し、室温で１８時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＤＭＳＯ中に溶解した。分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ５０×２０ｍｍカラム、流速２０ｍＬ／分、Ａ：アセトニトリル中０．１％ＴＦＡ、Ｂ：水中０．１％ＴＦＡ、Ａ：１０分で２０〜１００％、２１５ｎｍでＵＶ検出）を用いて精製して、標題化合物を４．８ｍｇ（１３％収率）の黄褐色固体として得た。ＭＨ＋４１９／４２１／４２３
【００９１】
実施例９１ ４−ブロモ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝−２−メチルベンゼンスルホンアミド
【化３２】
ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＮａＨ（０．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、１ｍＬのＤＭＦ中の中間体３３を加えた。１０分後、４−ブロモ−２−メチルベンゼンスルホニルクロライド（０．２５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２５℃で３６時間撹拌した。反応物をＮＨ４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合した有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、１２０ｍｇの粗物質を得た。粗物質を分取ＨＰＬＣで精製して、黄色固体を得た（５ｍｇ、４％）。［ＭＨ］＋＝４７０
【００９２】
適当な出発物質で開始して、実施例９１に記載の方法で以下の実施例を合成した。
【表２１】
【００９３】
実施例９３ Ｎ−｛５−クロロ−２−［（２−メチル−３−ピリジニル）オキシ］−３−ピリジニル｝−４−（１，１−ジメチルプロピル）ベンゼンスルホンアミド
【化３３】
ピリジン（２ｍＬ）中のスルホニルクロライド（０．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液を、２分間撹拌した、ついで、１ｍＬピリジン中の中間体３３の溶液を加え、混合物を９０℃で３時間撹拌した。反応物を冷却し、１５ｍＬの水に注いだ。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、合した有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮して、１４０ｍｇの粗物質を得た。粗物質を分取ＨＰＬＣにより精製して、灰白色固体を得た（３５ｍｇ、１８％）。［ＭＨ］＋＝４４６
【００９４】
実施例９３と類似の方法で以下の実施例を調製した。
【表２２】
【００９５】
実施例１０３ ２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド
【化３４】
無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中の中間体７５（５１５ｍｇ）の撹拌溶液に、エタノールアミン（１３８ｍｇ）を加えた。溶液は添加後すぐに暗色になり、ついで、４０℃で１５分間加熱した。粗反応混合物を冷却し、減圧下で濃縮し、Ｉｓｏｌｕｔｅアミノプロピルイオン交換ＳＰＥに充填した。メタノール（３容量）およびメタノール中２Ｍアンモニア（３容量）で溶出した。アンモニアメタノールフラクションを減圧下で濃縮して固体を得、水およびクロロホルム間で分配し、相分離器で溶出し、濃縮して、橙色固体を得た。橙色固体をさらにシリカゲルＳＰＥ（ＤＣＭ１〜５％メタノール）で精製して、標題化合物を得た（１８１ｍｇ）。ＭＨ＋５１８
【００９６】
実施例１０４ ２−［（５−クロロ−３−｛［（４，５−ジクロロ−２−チエニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−メチルベンズアミド
【化３５】
無水ＴＨＦ中の水素化ナトリウム（鉱油中６０％分散液、５７ｍｇ）の懸濁液に、中間体７４（１７７ｍｇ）を１回で加えた。得られた紫／褐色溶液を０℃で１５分間撹拌した。４，５−ジクロロ−２−チオフェンスルホニルクロライド（２１６ｍｇ）を加え、反応混合物を６０分室温で撹拌した。２Ｍ塩酸（４ｍＬ）を滴下し、反応物を減圧下で濃縮して、橙色固体を得た。橙色固体を無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中に溶解し、メチルアミン（４４ｍｇ）を加えた。得られた物質を室温にて７２時間撹拌し、ついで、減圧下で濃縮して、橙色油を得た。ＭＤＡＰを用いて精製して、標題化合物を得た（２４ｍｇ）。ＭＨ＋４９４
【００９７】
中間体７４から適当な出発物質を用い、実施例１０４に記載の方法と類似の方法により以下の実施例を調製した。
【表２３】
【００９８】
実施例１０７ ２−［（３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化３６】
中間体３０、（５００ｍｇ）、４−クロロベンゼンスルホニルクロライド（４３２ｍｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（２０ｍｇ）をピリジン（１０ｍＬ）中に溶解し、１時間加熱還流した。ピリジンを減圧下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製し、残渣を２−プロパノールでトリチュレートした。得られた固体をメタノール（８ｍＬ）および水（２ｍＬ）中、水酸化リチウム水和物（１２０ｍｇ）の存在下で１時間加熱還流した。２ＭのＨＣｌ（１０ｍＬ）を加え、混合物を濾過し、乾燥して、標題化合物（２１０ｍｇ）を白色固体として得た。［ＭＨ］＋＝４０５
【００９９】
実施例１０８ ２−［（３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化３７】
中間体３０および３，４−ジクロロベンゼンスルホニルクロライドから、実施例１０７に記載の方法と類似の方法で実施例１０８を調製した。［ＭＨ］＋＝４３９；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．６７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１０．４８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．０４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．８５（ｍ，３Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．７３（ｍ，３Ｈ），７．５５（ｔ，１Ｈ），７．３１（ｔ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，１Ｈ），６．７０（ｄｄ，１Ｈ）
【０１００】
実施例１０９ ２−［（５−クロロ−３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸
【化３８】
中間体２９および４−クロロベンゼンスルホニルクロライドから実施例１０７に記載の方法と類似の方法で実施例１０９を調製した；ＨＰＬＣｍ／ｚ［ＭＨ］＋＝４３９。
【０１０１】
実施例１１０ ２−［（５−クロロ−３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−メチルベンズアミド
【化３９】
無水ＤＣＭ（５ｍｌ）中の実施例１０９（８４ｍｇ）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（ジ−ｉ−プロピルエチルアミン）（３６ｕｌ）、ＴＢｔＵ（６７ｍｇ）およびＴＨＦ中２Ｍメチルアミン（２８７ｕｌ）を連続して加えた。得られたを１８時間室温で撹拌した。さらに、ＴＨＦ中の２Ｍメチルアミン（２８７ｕｌ）およびＴＢｔｕ（４０ｍｇ）を加え、反応物を３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、黄色油を得た。油を、最初にシリカゲルＳＰＥ（ヘキサン中２０〜８０％酢酸エチル）で精製して黄色油を得た。さらに、ＭＤＡＰにより精製して、標題化合物を得た（１３ｍｇ（１５％））；ＭＨ＋４５２。
【０１０２】
実施例１１１ ２−｛［３−｛［（４−クロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−６−（メチルオキシ）−２−ピリジニル］オキシ｝安息香酸
【化４０】
サリチル酸エチル（１９９ｍｇ）をＤＭＦ中に溶解した。これに炭酸カリウム（２０７ｍｇ）および２−クロロ−６−（メチルオキシ）−３−ニトロピリジン（１８８ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波反応器中１２０℃で３０分間加熱し、ついで、溶媒を除去した。残渣をＤＣＭ（１０ｍＬ）および１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）間で分配し、有機相を減圧下で濃縮した。これをエタノール（１０ｍＬ）中に溶解し、１０％炭素担持パラジウム（５ｍｇ）を加えた。混合物を水素雰囲気下、室温で、１２時間撹拌した。スラリーをセライト（登録商標）により濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、ピリジン（３ｍＬ）に溶解した。これに４−クロロベンゼンスルホニルクロライド（４２２ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波反応器中、１２０℃で３０分間加熱し、ついで、揮発性物質を減圧下で除去した。残渣をＤＣＭ（２０ｍＬ）および１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（５ｍＬ）間で分配した。有機相を減圧下で濃縮し、２：１テトラヒドロフラン：水中に溶解し、水酸化リチウム（２４ｍｇ）を加えた。混合物をマイクロ波反応器中、１２５℃で３０分間加熱し、ついで、溶媒を減圧下で除去した。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製して、標題化合物を得た。［ＭＨ］＋＝４３５，［Ｍ］−＝４３３
【０１０３】
実施例１１２ ２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］−Ｎ−［２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）エチル］ベンズアミド
【化４１】
ＤＭＦ（０．４５ｍｌ）中のヒスタミンジヒドロクロライド（１７ｍｇ）の懸濁液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（２ｍｇ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド（２９ｍｇ）、および２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸（６４ｍｇ、実施例１）を加えた。反応物を１２時間室温にて撹拌した。ついで、溶液をメタノール（５ｍｌ）で希釈し、アミノプロピル−ＳＰＥカラムで濾過した。生成物を５％アンモニア／メタノールで溶出し、自動精製ＨＰＬＣにより精製した。［ＭＨ］＋＝５６８．
【０１０４】
２−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸、３−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸、または４−［（５−クロロ−３−｛［（３，４−ジクロロフェニル）スルホニル］アミノ｝−２−ピリジニル）オキシ］安息香酸から、実施例１に記載の方法と類似の方法により、適当なアミンを用いて調製し、ついで、アミノプロピル−ＳＰＥおよび／または自動分取ＨＰＬＣにより精製して、以下の実施例を調製した。いくつかの実施例において、６０℃での加熱を要した。
【０１０５】
【表２４】
【０１０６】
【表２５】
【０１０７】
【表２６】
【０１０８】
【表２７】
【０１０９】
【表２８】
【０１１０】
実施例１６４ ３，４−ジクロロ−Ｎ−（５−クロロ−２−｛［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）フェニル］オキシ｝−３−ピリジニル）ベンゼンスルホンアミド
【化４２】
無水ＤＭＦ（２ｍＬ）中の３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−シアノフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド（３３ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、アジ化ナトリウム（２３ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）および塩化アンモニウム（１９ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の反応混合物を、１２０℃で１２時間撹拌した。溶媒を除去した後、残渣を水（３ｍＬ）中に懸濁し、５％ＮａＯＨで塩基性化し、Ｅｔ２Ｏで洗浄した。水層を１０％ＨＣｌでｐＨ３に酸性化し、酢酸エチルで抽出し、有機層を水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濃縮して、粗生成物を得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の化合物を白色固体として得た（２２ｍｇ、６１％）。ＨＰＬＣＲｔ＝２．９８分、ｍ／ｚ［ＭＨ］＋＝４９８．１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）δ８．０１（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｄ，１Ｈ），７．９３（ｄ，１Ｈ），７．８５（ｄ，１Ｈ），７．６４（ｍ，２Ｈ），６．８４（ｍ，２Ｈ）
【０１１１】
３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−シアノフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドの代わりに３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−シアノフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドを用いる以外は同様の方法で、下記表の実施例１６６を調製した。
【０１１２】
【表２９】
【０１１３】
実施例１６６ ３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−｛［（フェニルメチル）アミノ］メチル｝フェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミド
【化４３】
中間体７６（４９．８ｍｇｌ）を、バイアル中の無水塩化メチレン（０．５ｍＬ）に溶解し、ついで、ベンジルアミン（１６．０ｍｇ）をＴＥＡ（０．０２ｍＬ）および氷ＡｃＯＨ（０．００４ｍＬ）と一緒に加えた。混合物を室温にて３０分間撹拌し、ついで、トリアセトキシボロヒドリドナトリウム（４６．２ｍｇ）を加えた。反応物を一晩室温にて撹拌し、反応が完了した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、炭酸水素ナトリウム溶液、水およびブラインで洗浄した。有機層を濃縮し、酸性ＧｉｌｓｏｎＨＰＬＣで精製した。［ＭＨ］＋＝５４９
【０１１４】
３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（３−ホルミルフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドまたは３，４−ジクロロ−Ｎ−｛５−クロロ−２−［（４−ホルミルフェニル）オキシ］−３−ピリジニル｝ベンゼンスルホンアミドのいずれかで開始し、適当なアミンを用いて、実施例２と類似の方法で以下の実施例を調製した。
【０１１５】
【表３０】
【０１１６】
【表３１】
【０１１７】
【表３２】
【０１１８】
本発明の化合物は、ケモカイン受容体、特にＣＣＲ２受容体に対してアフィニティを示すことが見出された。かかるアフィニティは、典型的には、適当なアッセイにおいて受容体からの５０％の刺激応答を阻害するのに必要な化合物濃度であるＩＣ５０から計算され、これは、「Ｋｉ」値として下記式：
【化４４】
［式中、Ｌ＝放射性リガンドおよびＫＤ＝放射性リガンドの受容体に対するアフィニティ(Cheng and Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22:3099, 1973)］
により計算される。
本明細書において、ｐＫｉ（Ｋｉの真数に対応する）をＫｉの代わりに用いる。
一の態様において、本発明は、以下に記載するアッセイ方法から導かれる５．４〜６．５のｐＫｉを有する化合物を提供する。さらなる態様において、本発明は、以下に記載するアッセイ方法から導かれる６．５〜７．０のｐＫｉを有する化合物を提供する。さらなる態様において、本発明は、以下に記載するアッセイ方法から導かれる７．０のｐＫｉを有する化合物を提供する。
【０１１９】
ＣＣＲ−２［３５Ｓ］ＧＴＰｇＳ ＳＰＡ結合アッセイ
膜調製
ヒトＣＣＲ−２受容体を発現するＣＨＯ細胞を、１０％ウシ胎児血清、２ｍＭのＬ−グルタミン、Ｇ４１８を補足したＤＭＥＭ Ｆ１２培地において３７℃、５％ＣＯ２雰囲気下で増殖する。密集した細胞を、０．６ｍＭのＥＤＴＡを含有するＨａｎｋｓ緩衝塩溶液（ＨＢＳＳ、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋不含）を用いて収穫した。得られた細胞懸濁液を、３００ｇ、４℃で１０分間遠心分離に付し、細胞ペレットを１００ｍｌのＨＢＳＳ＋ＥＤＴＡに懸濁し、３００ｇで５分間遠心分離に付した。得られた細胞ペレットを、１００ｍＭのリューペプチン（ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ）、２５μｇ／ｍｌのバシトラシン、１ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＰＭＳＦおよび２μＭのペプスタインＡを含有する、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ中にｐＨ７．４で再懸濁した。懸濁液を氷冷ブレンダーを用いて均質にし、５００ｇで２０分間遠心分離に付した。上清を破棄し、４８０００ｇで３０分間遠心分離した。この細胞ペレットを、ペプスタインＡおよびＰＭＳＦを除いた上記緩衝液に再懸濁し、−７０℃でアリコートをストックした。
【０１２０】
アッセイ
アッセイについては、膜を解凍し、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２、１００ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．４、１ｍｇ／ｍｌサポニンを含有、１０ｍＭのＧＤＰ）に再懸濁して、最終濃度５μｇ／ウェルとした。これらをＬＥＡＤｓｅｅｋｅｒ ＳＰＡビーズ（０．２５ｍｇ／ウェル）と、室温にて３０分間撹拌しながら予め結合させた。０．５μｌの１００％ＤＭＳＯ中の種々の試験化合物（３０μＭ〜３０ｐＭ）（３８４ウェルプレートにおいて４倍希釈で１１点）を含有するアッセイプレートを、このアッセイに用いた（Ｂｉｏｍｅｋ ＦＸで調製される）。また、このプレートは、実験において高および低対照を得るために、１６ウェルのＤＭＳＯおよび１６ウェルの高濃度の標準アンタゴニストを含む。この１５μｌのビーズおよび膜混合物に、１５μｌ［３５Ｓ］ＧＴＰｇＳ（最終濃度０．２ｎＭ）および１５μｌのＥＣ８０（４０ｎＭ）のＭＣＰ−１を加える。この濃度のＭＣＰ−１は、この受容体に対するアゴニスト曲線から予め決定される。マルチドロップを用いてすべての添加を行う。ついで、プレートをシールし、５分間、３００ｒｐｍで遠心分離し、ついで、これらを室温にて３時間インキュベートする。この後、Ｖｉｅｗｌｕｘイメージングシステムで読み取る。データ処理に関しては、高および低対照ウェルをデータの標準化に用い、ついで、Ｅｘｃｅｌにて４パラメータキットを用いてフィットする。
【０１２１】
上記したアッセイは、５．０〜５．５の範囲でｐＫｉの有効検出限界があると考えられる。したがって、かかるアッセイでこの範囲内のｐＫｉを示す化合物は、確かに受容体に対して適度なアフィニティを有しうるが、同様に、より低いアフィニティ（大幅に低いアフィニティを含む）も有しうる。
このアッセイを用いて、代表的な化合物はｐＫｉが５．０以上であった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
［式中：
Ｘは−Ｏ、−ＮＨまたは−Ｓであり；
Ｒ１は、ヘテロアリール基またはアリール基であり、これらは各々、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＣＮ、Ｃ１−４アルキルチオ−、−ＯＣＦ３、ジメチルアミノ、ニトロおよび−ＣＦ３からなる群から独立して選択される３個までの置換基により置換されており；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、−ＣＦ３または−ＯＣＦ３であり；
Ｒ３は、Ｒ４−フェニル−、Ｒ５−ピリジル−、メチルテトラゾリル、モルホリノ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、（ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、メチルイソキサゾリル；ピリダジニルまたはトリアゾリルであり；
ここに、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシメチル、テトラゾリル、ＣＯＯＨまたは−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり；
Ｒ５は、２−メチル、２−ハロ、２−シアノ、２−ＣＯＯＨ、ジメチルアミノメチル、メチルモルホリノメチルであり；
ここに、ＲａおよびＲｂは、各々Ｈであるか、あるいはそれらが結合しているＣと一緒になって、カルボニル基を結合し；
Ｒｃは、Ｈ、−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６；Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル；Ｃ１−Ｃ６−アルキル；フェニル−ＣＨ（ＣＨ３）−；オキソイソキサゾリジニル；ジメチルチアゾリル；ジヒドロチアゾリル；イミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−；またはイミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−であり；
Ｒｄは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、ベンジルであるか、あるいはＲｃおよびＲｄは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、トリアゾロピペリジニルまたはピロリジノニル基を形成し；
ｙは１、２または３であり；
Ｒ６は、−ＮＲ７Ｒ８、ＯＨ、メトキシ、フェニル、イミダゾリル、インドリル、テトラヒドロピラニル、ベンズイミダゾリルまたはＣ３−Ｃ６−シクロアルキルであり；
Ｒ７はＨまたはメチルであり；Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルまたはフェニルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、イミダゾリル、またはピロリジノニル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｒ２がＣｌであり、ＸがＯである、請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１が２個の置換基を有するフェニル基である、請求項２記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項４】
式：
【化２】
［式中、ＹはＣｌまたはＣＦ３である］
で示される請求項３記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項５】
Ｒ３がＲ４−フェニル−または２−メチル−３−ピリジニルである、請求項４記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項６】
Ｒ４が−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり、ここに、Ｒｃが−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６であり、ＲｄがＨである、請求項５記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項７】
式：
【化３】
［式中、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニルまたはモルホリノ基を形成する］
で示される請求項６記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項８】
ａ）請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩；およびｂ）医薬上許容される賦形剤を含む組成物
【請求項９】
ＣＣＲ２により介在される疾患または症状の治療または予防方法であって、治療的に有効な量の請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩を該治療または予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項１】
式：
【化１】
［式中：
Ｘは−Ｏ、−ＮＨまたは−Ｓであり；
Ｒ１は、ヘテロアリール基またはアリール基であり、これらは各々、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキル−、Ｃ３−６シクロアルキル、−ＣＮ、Ｃ１−４アルキルチオ−、−ＯＣＦ３、ジメチルアミノ、ニトロおよび−ＣＦ３からなる群から独立して選択される３個までの置換基により置換されており；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、ハロ、−ＣＮ、−ＣＦ３または−ＯＣＦ３であり；
Ｒ３は、Ｒ４−フェニル−、Ｒ５−ピリジル−、メチルテトラゾリル、モルホリノ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、（ＣＨ３）２Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２−、メチルイソキサゾリル；ピリダジニルまたはトリアゾリルであり；
ここに、Ｒ４は、Ｈ、ハロ、ＣＮ、ヒドロキシメチル、テトラゾリル、ＣＯＯＨまたは−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり；
Ｒ５は、２−メチル、２−ハロ、２−シアノ、２−ＣＯＯＨ、ジメチルアミノメチル、メチルモルホリノメチルであり；
ここに、ＲａおよびＲｂは、各々Ｈであるか、あるいはそれらが結合しているＣと一緒になって、カルボニル基を結合し；
Ｒｃは、Ｈ、−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６；Ｃ３−Ｃ６−シクロアルキル；Ｃ１−Ｃ６−アルキル；フェニル−ＣＨ（ＣＨ３）−；オキソイソキサゾリジニル；ジメチルチアゾリル；ジヒドロチアゾリル；イミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＨ２−；またはイミダゾリル−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−であり；
Ｒｄは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、ベンジルであるか、あるいはＲｃおよびＲｄは、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、トリアゾロピペリジニルまたはピロリジノニル基を形成し；
ｙは１、２または３であり；
Ｒ６は、−ＮＲ７Ｒ８、ＯＨ、メトキシ、フェニル、イミダゾリル、インドリル、テトラヒドロピラニル、ベンズイミダゾリルまたはＣ３−Ｃ６−シクロアルキルであり；
Ｒ７はＨまたはメチルであり；Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４−アルキルまたはフェニルであるか；あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニル、モルホリノ、ピラジニル、イミダゾリル、またはピロリジノニル基を形成する］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｒ２がＣｌであり、ＸがＯである、請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１が２個の置換基を有するフェニル基である、請求項２記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項４】
式：
【化２】
［式中、ＹはＣｌまたはＣＦ３である］
で示される請求項３記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項５】
Ｒ３がＲ４−フェニル−または２−メチル−３−ピリジニルである、請求項４記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項６】
Ｒ４が−ＣＲａＲｂ−ＮＲｃＲｄであり、ここに、Ｒｃが−（ＣＨ２）ｙ−Ｒ６であり、ＲｄがＨである、請求項５記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項７】
式：
【化３】
［式中、Ｒ７およびＲ８は、それらが結合している窒素と一緒になって、ピペリジニル、ピロリジニルまたはモルホリノ基を形成する］
で示される請求項６記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項８】
ａ）請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩；およびｂ）医薬上許容される賦形剤を含む組成物
【請求項９】
ＣＣＲ２により介在される疾患または症状の治療または予防方法であって、治療的に有効な量の請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩を該治療または予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【公表番号】特表２００９−５１８４４４（Ｐ２００９−５１８４４４Ａ）
【公表日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４４６２０（Ｐ２００８−５４４６２０）
【出願日】平成１８年１２月４日（２００６．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０６１５４３
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０６７８７５
【国際公開日】平成１９年６月１４日（２００７．６．１４）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ グループ リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ ＧＲＯＵＰ ＬＩＭＩＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｈｏｕｓｅ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ Ａｖｅｎｕｅ Ｇｒｅｅｎｆｏｒｄ，Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ ＵＢ６ ０ＮＮ，Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１２月４日（２００６．１２．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０６１５４３
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０６７８７５
【国際公開日】平成１９年６月１４日（２００７．６．１４）
【出願人】（３９７００９９３４）グラクソ グループ リミテッド (832)
【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯ ＧＲＯＵＰ ＬＩＭＩＴＥＤ
【住所又は居所原語表記】Ｇｌａｘｏ Ｗｅｌｌｃｏｍｅ Ｈｏｕｓｅ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ Ａｖｅｎｕｅ Ｇｒｅｅｎｆｏｒｄ，Ｍｉｄｄｌｅｓｅｘ ＵＢ６ ０ＮＮ，Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]